Krooninen sairaus

tiivistelmä

Aberrant telomeeripituuden mitattiin verestä on liitetty suurentunut riski useiden syöpätyyppien. Alalla perinnöllinen ei-polypoosin peräsuolen syöpä (CRC), ja erityisemmin Lynch oireyhtymä, aiheuttamia ituradan mutaatioista mismatch korjaus (

MMR

) geenit, olemme hiljattain havaittu, että syöpään vaikuttaa

MMR

geenimutaatio kantajia oli lyhyempi telomeres ja selvempi lyhentämisestä telomeeripituuden iän kuin valvontaa ja muuttumattomina

MMR

geenimutaatio harjoittajille. Täällä arvioida veren telomeeripituuden MMR taitavia perinnöllinen ei-polypoosin CRC, eli familiaalinen CRC tyyppi X (fCRC-X). Kaikkiaan 57 syöpää vaikutti ja 57 syöpää vapaa yksilöitä 34 Amsterdam-positiivisia fCRC-X perheiden analysoitiin ja verrattiin tietoihin aiemmin julkaistu 144 syöpään vaikuttaa ja 100 syöpää vapaa

MMR

geenimutaatio kantajia, ja 234 valvontaa. Suhteellinen telomeeripituuden mitattiin käyttämällä yksivärinen multiplex kvantitatiivinen PCR-menetelmällä, seuraavia tiukkoja toimenpiteitä välttääkseen lähteitä bias ja säätää iän. Huolimatta taannehtivuus Tutkimuksemme tulokset osoittavat, että enää telomeres assosioituvat syöpäriskin fCRC-X, mikä tunnistaa eri mallien telomeeripituuden mukaan tilan MMR järjestelmän.

Citation: Seguí N, Guinó E, Pineda M, Navarro M, Bellido F, Lázaro C, et al. (2014) Pidempi Telomeres liittyy syöpäriski MMR Taitavan Perinnöllinen Non-polypoosin peräsuolen syövän. PLoS ONE 9 (2): e86063. doi: 10,1371 /journal.pone.0086063

Editor: Amanda Ewart Toland, Ohio State University Medical Center, Yhdysvallat

vastaanotettu: 08 lokakuu 2013; Hyväksytty: 9. joulukuuta 2013. Julkaistu: 03 helmikuu 2014

Copyright: © 2014 Seguí et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tämä työ on rahoitettu Espanjan talousministeriö (valtiosihteeristön tutkimus-, kehitys- ja innovaatio) (avustukset SAF2012-38885 LV ja SAF2012-33636 kuin GC, ja Ramón y Cajal sopimuksen LV); L’Oréal-UNESCO ”For Women in Science”; tieteellistä perustaa Asociación Española Contra el Cancer; Katalonian hallitus (avustus 2009SGR290); ja Carlos III Health Institute (apurahan NS). Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Suvussa on yksi vahvimmista riskitekijöitä kehittämiseen peräsuolen syöpä (CRC) ja on mukana noin 20% kaikista CRC tapauksista. Kuitenkin vain 2-6% kaikista CRC selittävät ituradan mutaatioita tunnetaan korkean penetrance CRC geenejä. Amsterdamin kriteerit määriteltiin tunnistaa perinnöllinen ei-polypoosin CRC tapauksissa huomioon nuorena ( 50 vuotta) klo syöpädiagnoosin ja korkea familiaalinen yhdistäminen CRC (Amsterdam I) tai muiden siihen liittyvien kasvainten (Amsterdam II). Noin 60% perheistä, jotka täyttävät Amsterdam kriteerit osoittavat DNA mismatch korjaus (MMR) puute seurauksena ituradan mutaation tai epimutation on

MMR

geeni, eli

MLH1

,

MSH2

,

MSH6

tai

PMS2

(Lynch oireyhtymä, LS). Loput 40% ei näytä MMR vikoja ja geneettinen syy familiaalinen CRC yhdistäminen on vielä tuntematon, jotka on ryhmitelty familiaalinen CRC tyyppi X (fCRC-X) [1], [2].

kromosomi telomeres koostuvat useista lyhyt toistoja (TTTAGG), jotka suojaavat laajamittainen genomista uudelleenjärjestelyjä. Telomeres lyhentää solunjakautumisen, joka lopulta johtaa solun vanhenemista. Joskus harvoin soluja, jotka poikkeavasti ohittaa monistus vanhenemista kriittisesti lyhyen telomeres voi kehittyä genomista epävakautta ja mahdollisesti tulla kasvaimia synnyttäviä. Syöpäsoluissa, kuitenkin, kuten kantasoluja, telomeraasin, entsyymiä, joka lisää telomeerisesti toistoja kromosomiin päihin, on ilmaistu, kompensoidaan telomeerien eroosio ja estää vanhenemista /apoptoosin [3] – [5].

ituradan mutaatioita komponentit telomeraasikompleksin syy perinnöllinen dyskeratoosi. Potilaat, joilla on tämä häiriö on lyhyt telomeres, mikä johtaa luuytimen vajaatoiminta ja lisääntynyt syöpäriskiä [6]. Vastaavasti hiiri malleja, joissa telomeraasi- puute ja lyhyet telomeres on korkea riski sairastua syöpään [7]. Viimeaikaiset epidemiologiset tutkimukset ovat arvioineet telomeeripituuden mitattiin perifeerisen veren DNA mahdollisena biomarkkeri syöpäriskiä. Useissa tutkimuksissa on raportoitu assosiaatiot telomeeripituuden ja syövän riskiä, ​​vaikka tiedot ovat epäjohdonmukaisia ​​joukossa tutkimuksia ja kasvaintyypeissä [8]. CRC tutkimuksissa ristiriitaisia ​​tuloksia on havaittu, ilmeisesti johtuen eroista tutkimuspopulaatiossa, tutkimuksen suunnittelu, analyyttinen lähestymistapa, otoskoko, tai altistuminen ympäristötekijöille [9] – [15].

Mitä perinnöllinen CRC, ryhmämme raportoi äskettäin, että syöpään vaikuttaa

MMR

geenimutaation kantajia oli lyhyempi telomeres ja osoitti nopeampaa telomeerivasta poistuman iän, mitataan veren, kuin valvontaa ja syöpää vapaa

MMR

geenimutaatio harjoittajille [ ,,,0],16]. Kuitenkin rooli telomeeripituuden kuten syövän riskiä muokkaaja LS ei voida esittää, koska se oli väitetty, että lyhennetty telomeres havaittu takautuvasti kerättyjä näytteitä syöpää vaikuttanut henkilö saattaa olla seurausta taudin [8], [14] . Kuitenkin se, että syöpä-vapaa mutaation kantajia oli pidempi telomeres kuin syöpä-vapaa säädetyn valvonnan lisätodisteita tukee teoriaa, että telomeeripituuden saattaa toimia syövän riski muokkaaja LS [16].

Täällä raportoivat ensimmäisen tutkimuksen käyttäytymistä veren telomeeripituuden MMR taitavia perinnöllinen ei-polypoosin CRC eli fCRC-X, ja vertaa sitä käyttäytymistä havaittu valvonnan ja perinnöllinen ei-polypoosin CRC kanssa MMR vika, eli LS ( aiemmin julkaistu [16]).

Materiaalit ja menetelmät

Ethics lausunto

Kirjallinen suostumus saatiin kaikissa aineissa. Tutkimuksen hyväksyi eettinen komitea IDIBELL (vrt. PR221 /09).

TET

Yhteensä 114 yksilöiden, 57 syöpään vaikuttaa ja 57 syöpää vapaa, 34 fCRC-X ryhmää oli mukana tutkimuksessa. Nämä perheet täyttivät Amsterdamin perusteet, mutta eivät osoittaneet MMR vikoja (mikrosatelliittien epävakaus tai tappio ilmentymisen MMR proteiinien MLH1, MSH2, MSH6 ja PMS2). Kaikkiaan 76,5% (26/34) perheistä täytti Amsterdamin I kriteereitä ja 23,5% (8/34) Amsterdam II. Vertailun vuoksi, aiemmin julkaistu telomeeripituuden tietoja kuuluvista henkilöistä LS perheitä ja valvonta kuuluivat analyysit [16]. Familiaalinen CRC-X, LS ja vertailunäytteet olivat valkoihoisia ja palvelukseen samasta homogeenisesta (Espanjan Katalonian alueen) kautta perinnöllisen syövän Program Katalonian syöpäinstituutti, IDIBELL. Taulukossa 1 esitetään ominaisuudet fCRC-X tutkituista tapauksista vertaamalla niitä LS yksilöiden ja valvonta aiemmin analysoitu [16].

Suhteellinen telomeeripituuden mittaaminen

Suhteellinen telomeeripituuden ( RTL) arvioitiin käyttämällä yksivärinen multiplex kvantitatiivinen PCR-menetelmällä [17], samoin edellytyksin kuin Segui et al. [16]. Lisäksi MMR-taitavia perinnöllinen tapauksissa ajettiin yhdessä LS tapauksissa ja valvontaa. Jotta voidaan sulkea pois esineitä tai teknisiä syitä vaihteluun, standardikäyrän sisällytettiin kussakin ajossa (384-kuoppainen levy), jokainen näyte mitattiin kolmesta, ja aina kun mahdollista, sama määrä näytteitä eri kliinisistä ryhmistä ajettiin sama levy. Varastointi ja DNA: n eristys ääreisverenkierron tehtiin samasta laitoksesta ja samoja uuttamismenetelmiä suosittelemia jälkikäteen telomeeripituuden tutkimukset [8].

TILASTOANALYYSI

RTL säädettiin iän perustuu telomeeripituuden lyhenemistä esiintyy iän myötä väestössä (valvonta), kuten aiemmin raportoitu [16], [18]. Erot ikävakioitu telomere pituudet analysoitiin käyttäen Wilcoxonin summa testi (Mann-Whitney U). Kruskal-Wallisin rank sum testiä käytettiin vertaamaan demografisten ominaisuuksien ryhmissä. Kaikki testit olivat kaksipuolisia ja p-arvot alle 0,05 pidettiin tilastollisesti merkittävänä. Analyysit suoritettiin käyttäen R tilasto-ohjelmalla.

Tulokset

ikävakioitu RTL arvioitiin 57 syöpään vaikuttaa fCRC-X potilaista ja 57 terveellä yksilöllä 34 fCRC-X perheitä. Tuloksia verrattiin tuloksiin julkaisimme aikaisemmassa tutkimuksessa 144 syöpää vaikuttaa

MMR

geenimutaation kantajia, 100 muuttumattomina

MMR

geenimutaatio kantajia ja 234 valvontaa [16].

syöpä kärsivissä fCRC-X tapaukset osoittivat merkitsevästi pidempi telomeres kuin ennallaan fCRC-X yksilöä (p = 0,009) ja syöpä-vapaa (p = 0,013) (Kuva. 1). Nämä tulokset olivat jyrkässä ristiriidassa aiemmin havaittu LS, jossa telomere pituudet havaittu syöpää vaikuttaa

MMR

geenimutaation kantajia olivat lyhyempiä kuin ennallaan mutaation kantajia (p = 0,032) [16]. Toisaalta, syöpä-vapaa fCRC-X tapaukset osoittavat lyhyemmät telomeerit kuin syöpä-vapaa

MMR

geenimutaation kantajia (p = 0,015), mutta samanlaisia ​​pituuden valvonnan (Fig. 1).

eri ryhmät vastaavat: syöpää vaikutti fCRC-X tapauksissa (mediaani ikävakioitu RTL: 0,017); syöpä-vapaa yksilöitä fCRC-X perheiden (mediaani: -0,215); syöpään vaikuttaa

MMR

geenimutaation kantajia (mediaani: -0,131); syöpä-vapaa

MMR

geenimutaation kantajia (mediaani: -0,079); ja syöpää vapaa valvonta (mediaani: -0,092). Erot ikävakioitu RTL analysoitiin käyttäen Wilcoxonin summa testi (Mann-Whitney U). Laatikot edustavat kvartiiliväli jakaumien (25

th ja 75

th persentiilit); vaakarivillä sisällä laatikot, medians; ja pystysuorat viivat, 5

th ja 95

th persentiilit. Tiedot LS perheiden ja valvonta julkaistiin aiemmin [16].

Keskustelu

Huomasimme, että enää telomeres jotka liittyvät syövän fCRC-X. Lisäksi tietojen perusteella aiemmin julkaistu ryhmämme [16], MMR-puutteellinen ja -proficient ei-polypoosin perinnöllinen tapaukset osoittavat selvästi malleja veren telomeeripituuden, mikä viittaa siihen, että tilan MMR järjestelmä on keskeinen määritettäessä telomeeripituuden perinnöllinen tapauksissa .

Useat epidemiologiset tutkimukset ovat tutkineet yhdistys telomeeripituuden CRC riskin väestössä, tuottavat ristiriitaisia ​​tuloksia [19]. Todisteet Retrospektiivisen tutkimuksista osoittaa, että telomeres ääreisverisoluissa lyhyitä CRC tapauksissa kuin valvontaa. Tämä yhdistys ei ole toistettu tulevaisuutta koskevia tutkimuksia, mikä viittaa siihen, että yhdistyksen välillä lyhyt telomeres ja CRC takautuva tutkimuksissa on jotenkin seurausta taudin hoitoon tai ero selviytymisen sijaan syy (vaikutus käänteisen syy) [14]. Mitä mahdollisille tutkimuksissa ei havaittu yhteyttä kolmessa suhteellisen pieniä tutkimuksia (134-191 tapausta vs. 306-406 valvonta) [9] – [11]. Kuitenkin viime aikoina, suurempia mahdollisille tutkimuksissa havaittiin, että enää telomeres liittyivät suurempi CRC riski (tapaukset /valvonta = 2,157 /3,921) [14], tai että sekä pitkän että lyhyen telomeres lisääntynyt CRC riski (tapaukset /valvonta = 441/549) [15].

huolimatta taannehtivuus tutkimuksessamme havaitsimme, että syöpää vaikutti fCRC-X yksilöä oli pidempi telomeres kuin syöpää vapaa jäsenet samantyyppistä X perheitä, valvontaa ja syöpää asianosaisille LS perheet (

MMR

geenimutaatio kantajia). Siksi pidempi telomeres liittyy syöpäriskin MMR-taitavia perinnöllinen ei-polypoosin CRC, jota on havaittu suuria mahdollisille väestöpohjaisen CRC sarja [14], [15]. Lisätutkimukset arvioitaessa telomeeripituuden ennen ja jälkeen syövän diagnoosi fCRC-X tapauksissa on tärkeää osoittaa tarkkaa vaikutusta syöpään veren telomeeripituuden tässä potilasryhmässä.

Edellinen näyttö tukee oletusta, että pitkä telomeres saattaisi lisätä syöpäriskiä: ensimmäinen, pitkä telomeres voi viivästyttää solujen vanhenemista ja apoptoosia, lisäämällä mahdollisuus että geneettiset poikkeavuudet kertyy [5], [20]; toiseksi osajoukko Kolorektaalituumorien on pidempi telomeres kuin viereisen ei-kasvain paksusuolen limakalvon [21]. Telomeeripituuden arviointi fCRC-X kasvaimia antavat lisänäyttöä siitä, MMR-taitavia perinnöllinen kasvaimia on myös pitkänomainen telomeres. Samoin tietäen tasoja telomeraasin ilmentymisen tai entsyymiaktiivisuustaso ääreisveren ja kasvaimen näytteitä voisi tukea suunnitteluun erityisiä terapeuttisia ja /tai ennaltaehkäiseviä lähestymistapoja fCRC-X potilasta tulevaisuudessa [22].

Meidän tulokset yhdessä ne havaitaan suuria väestöpohjaisen CRC sarja [14], [15] viittaavat siihen, että enää telomeres ovat riskitekijä perinnöllinen ja satunnaista MMR-taitavia CRC. Tämän havainnon on uskottavaa oletuksen, että enää telomeres toimivat myös määritteet n alkamisiällä syövän ja /tai polypoosin muissa MMR-taitavia CRC oireyhtymät.

Yhteenvetona toisin huomautuksissa LS mutta linjassa tulosten suurten CRC tulevaisuutta koskevia tutkimuksia, pitkänomainen telomeres liittyy lisääntynyt syöpäriskiä Amsterdam-positiivisten MMR-taitavia perinnöllinen ei-polypoosin CRC.