Krooninen sairaus

tiivistelmä

Background

olemassaolo Tc17 solujen äskettäin esitetty useita erilaisia ​​tartuntatautien ja autoimmuunisairauksien, mutta niiden jakelu ja tehtävät kohdun kohdunkaulan syöpää (UCC) ei ole täysin selvitetty.

Methods

taajuus Tc17 solujen ääreisveren näytteistä saatujen UCC potilaista, CIN-muutos (CIN) potilaiden ja terveiden verrokkien määritettiin virtaussytometrialla. Lisäksi esiintyvyys Tc17 solujen ja niiden suhteita Th17 soluihin ja Foxp3-ilmentävien T-solujen sekä pienten verisuonten kudosnäytteitä potilaista arvioitiin immunohistokemiallisesti värjäystä.

Tulokset

Verrattuna tarkastukset, potilailla, joilla UCC tai CIN oli suurempi osuus Tc17 solujen sekä ääreisverenkierron ja kohdunkaulan kudoksissa, mutta taso Tc17 solujen UCC kudoksissa oli huomattavasti korkeampi kuin CIN kudoksissa. Lisäksi tehostetun Tc17 UCC potilailla liittyi asema lantion imusolmukemetastaaseja ja lisääntynyt mikroverisuonitiheys. Lopuksi merkittäviä korrelaatioita tunkeutumisen välillä Tc17 solujen ja Th17 soluja tai Foxp3 ilmentäviä T-soluja havaittiin UCC ja CIN kudoksissa.

Johtopäätökset

Tämä tutkimus osoittaa, että Tc17 solutunkeutumisen kohdunkaulan syöpiä on syöpään liittyvä etenemiseen liittyy lisääntynyt virustartuntoja on Th17 solujen ja säätelijä-T-solujen sekä edistää kasvainten vaskulogeneesillä.

Citation: Zhang Y, Hou F, Liu X, Ma D, Zhang Y, Kong B, et ai . (2014) Tc17 solut potilailla, joilla Kohdun Kohdunkaulan syöpä. PLoS ONE 9 (2): e86812. doi: 10,1371 /journal.pone.0086812

Editor: Jian-Xin Gao, Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, Kiina

vastaanotettu: 27 maaliskuu 2013; Hyväksytty: 19 joulukuu 2013; Julkaistu: 11 helmikuu 2014

Copyright: © 2014 Zhang et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tämä tutkimus tukivat avustuksia National Natural Science Foundation of China (nro. 81172486, 81170515 ja 81072122) ja Shandong teknologisen kehittämisen hanke (nro 2006BS03060). Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Kohdun kohdunkaulan syöpää (UCC), toiseksi yleisin pahanlaatuinen kasvain naista maailmassa [1], pidetään tärkeänä immunogeeninen kasvain, kuten ihmisen papilloomaviruksen (HPV) korkean riskin alatyyppejä aiheuttaa monivaiheisessa syövän synnyn kohdunkaulan intraepiteliaalisia neoplasia (CIN) kautta karsinooma in situ kohdunkaulan syöpä ja metastaattinen syöpä. Samaan aikaan vasteita isännän immuunijärjestelmä, erityisesti soluvälitteisen immuunivasteen, on tärkeä rooli valvonnassa sekä HPV-infektioita ja HPV: hen liittyvän neoplastisia muodostumiseen [2], [3]. Vaikka solu immuniteetin on tärkeä osa kasvaimen immuunivalvonnan, mekanismeista kasvain koskemattomuutta ei täysin ymmärretä [4].

alkusolut vastuussa solun immuunivasteen ovat joukko T subsets, mukaan lukien T-auttajasolujen (Th), sytotoksisten T-solujen (Tc), ja estäjä-T-soluja (Ts). Äskettäin on kuvattu Th osajoukko, CD4

+ T-solujen IL-17 tuotantoa (Th17 solut), on osoitettu olevan tärkeä rooli olosuhteissa tulehduksen, autoimmuniteetin ja allergiset reaktiot [5] – [7]. Tuoreessa tutkimuksessa havaitsimme, että Th17 solut korkeasti rikastetun ääreisverenkierrossa ihmisen UCC potilaita, ja niiden tasot korreloivat positiivisesti tilan imusolmukemetastaaseja ja vasoinvasion [8]. Kuitenkin osajoukot IL-17

+ CD8

+ T-soluja (Tc17 solut), äskettäin löydetty useita ehtoja infektion ja autoimmuunisairauksien [9] – [12], ei ole täysin tutkittu ja sen biologinen toiminnot puuttuvat edelleen.

CD8

+ sytotoksisten T-solujen (Tc-solut) on ratkaiseva rooli isännässä immuunivasteen solunsisäisiä taudinaiheuttajia ja syöpä. Johtuen tarpeeton ilmentymistä T-box transkriptiotekijä Eomes ja T-bet, Tc solut kohtalona kehittyä sytolyyttisen efektorisolujen jotka tuottavat IFN-γ ja ilmaista grantsyymi B ja Perforiinin tappaa kohdesoluja [13], [14] . Kuitenkin tutkimukset vaikutuksista Tc17 solujen immuunivasteet ovat niukkoja. Toisin kuin perinteiset CD8

+ Tc-solut, Tc17 solut ovat negatiivisia grantsyymi B sekä Perforiinin ja puuttuu sytolyyttinen aktiivisuus

in vitro

[9], [12], [15], ja puuttuessa of Eomes kasvaimen tunkeutuvia lymfosyyttejä korreloi parannettu imusolmuke etäpesäke kolorektaalisyövissä [16]. Kuitenkin on mielenkiintoista, että sen jälkeen, kun adoptiivinen siirto erittäin hyvin puhdistettua, Ag-spesifisiä, IL-17-erittävien CD8

+ T-solut Ag-ilmentävät isännät, siirretty Tc17 solut voitaisiin muuntaa IFN-γ-tuottavien efektorisolujen puuttuu IL-17 ilmentyminen, joka voi kerätä merkittävästi ja aiheuttaa merkittäviä keuhkojen patologisten muutosten [12], tai regressio suurten olevien kasvainten [15], [17]. Nämä löydökset voidaan selittää olemassaolo plastisuus Tc17 soluja. Kuitenkin tarkka vaikutukset luonnollisesti olemassa Tc17 solut

in vivo

, kuten keuhkoissa, ruoansulatuskanavan limakalvon [18] ja kasvaimen kantavien hiirten [19] ovat suurelta osin tuntemattomia. Tc17 soluja äskettäin havaittu ihmisen maksasyövän [20], mutta tiedot koskevat niiden biologinen toiminto sekä sääntelymekanismeja ei vielä ole. Täällä pyrimme tutkimaan tasot sekä mahdollinen biologinen toiminnot Tc17 solujen UCC, jonka tiedetään olevan eräänlainen erittäin immunogeenisiä syövän alulle jatkuva infektio korkean riskin HPV.

tässä tutkimuksessa olemme pyrkineet määrittämään jakelua Tc17 solujen bothperipheral veressä ja kohdunkaulan kudoksia terveiden verrokkien, CIN ja UCC potilaita. Lisäksi määrittää mahdolliset roolit Tc17 solujen suhde Tc17 solujen ja kliinisiä piirteitä UCC sekä mikroverisuonitiheys kohdunkaulan kudoksissa tutkittiin. Lisäksi yhdistettynä aiemmin raportissa [8], [25], korrelaatiot tasojen Tc17 solujen Th17 soluja tai Foxp3 ilmentäviä T-soluja määritettiin myös.

Suunnittelu ja menetelmät

etiikka selvitys

Enrollment käytiin toukokuun 2009 ja huhtikuun 2012 Qilu sairaalan, Shandong University. Tutkimuksemme hyväksyi Medical eettinen komitea Qilu sairaalan Shandong University. Kirjallinen tietoinen suostumus asiakirja saatiin kullekin osallistujalle. Tietoon perustuva suostumus julisti, että jäänteitä potilaan ääreisverenkierron ja kohdunkaulan kudoksissa leikattiin leikkauksen aikana käytettäisiin tutkimiseen T osajoukkoja. Näitä näytteitä käytettiin tunnistamaan Tc17 soluihin UCC ja CIN, ja ääreisverenkierron myös peräisin terveiltä vapaaehtoisilta tähän tutkimukseen.

Patient ja ohjaus yksilöitä

Kasvain tai ääreisveren näytteistä saatiin 88 hoitamatta UCC potilailla (ikäjakauma 34-70 vuotta, mediaani 44 vuotta) ja 53 käsittelemätöntä CIN potilailla (28-60 vuotta, mediaani 42 vuotta), jossa patologisesti vahvistettu aktiivinen taudin Qilu sairaalan Shandong University. Näytteitä 46 UCC potilailla, joille tehtiin parantava resektio, ja 28 CIN potilasta joille tehtiin kohdunkaulan conization käytettiin immunohistokemiaan. Verinäytteistä 49 UCC potilaista ja 25 CIN potilasta käytettiin virtaussytometria-analyyseja. Yksilöiden samanaikainen autoimmuunisairaus, aktiivinen tai krooninen infektio, sydän- ja verisuonitaudit, sidekudoksen sairaudet tai aiemmin pahanlaatuisia kasvaimia, suljettiin pois. Kukaan potilaista ei saanut aiemmin immunosuppressiivista, sädehoitoa tai kemoterapiaa. Ominaisuudet tutkittiin väestöstä on esitetty taulukoissa 1 ja 2. Verinäytteitä (n = 28; 26-67 vuotta, mediaani 42 vuotta) ja histologista yksilöt cervices (n = 18; 31-60 vuotta, mediaani 46 vuotta) alkaen terveillä naisilla, joille tehtiin hysterectomies hyvänlaatuisen kohdun sairauksia ilman kohdunkaulan poikkeavuuksien kerätty. Nämä histologiset näytteet saatiin parafinoidut korttelin päässä patologian osaston Qilu sairaalan, Shandongin yliopistossa.

virtaussytometrianalyysin Tc17 solujen

analysoimiseksi esiintyvyys ja Tc17 soluja, IL-17-tuottamiseen CD8 (+) lymfosyytit arvioitiin virtaussytometrialla. Lyhyesti, heparinisoi- perifeerisen kokoveren (200 ui), jossa on yhtä suuri tilavuus RPMI-1640-väliaine inkuboitiin 4 tunnin ajan 37 ° C: ssa, 5% CO

2: n läsnä ollessa 25 ng /ml forbolimyristaattiasetaattia ( PMA), 1 ug /ml ionomysiiniä, ja 1,7 ug /ml monensiinia (kaikki Alexis Biochemicals, San Diego, CA). Sitten soluja inkuboitiin PE-Cy5-konjugoidulla anti-humaani-CD3: n ja FITC-konjugoitua anti-ihmis-CD8-monoklonaalisia vasta-aineita (eBioscience, San Diego, CA) huoneenlämpötilassa pimeässä 15 min värjäämiseksi pintaan. Kiinnittämisen ja permeabilisaation jäl- mukaan valmistajan ohjeiden solut värjättiin PE-konjugoitua anti-IL-17-monoklonaalista vasta-ainetta 15 minuutin ajan. Isotyyppikontrolleja käytettiin, jotta oikea korvaus ja vahvistaa vasta-spesifisyys. Värjätään solut analysoitiin virtaussytometrianalyysillä käyttäen FACScan-sytometrillä varustettu CellQuest-ohjelmaa (BD Bioscience PharMingen).

immunohistokemia havaitseminen Tc17 solujen ja mikroverisuonitiheys (MVD) B

Parafiini upotettujen kudosleikkeiden parafiinista ja uudelleen hydratoituja seurasi mikroaaltouuni antigeeni hakuja EDTA (pH 9,1). Immunohistokemiallista kaksinkertainen värjäys Tc17 solujen, leikkeet prosessoitiin Doublestain järjestelmän (kit-9999), ja seuraavia vasta-aineita käytettiin: kanin anti-humaani IL-17-vasta-ainetta (1:700 v /v; Abcam, USA) ja hiiren anti-humaani CD8-vasta-ainetta (1:30 v /v; Abcam, USA). Immunohistokemiallista analyysiä mikroverisuonitiheys, kohdat blokattiin blokkausliuoksella (seerumialbumiini) fosfaattipuskuriin laimennettuna suolaliuoksella (PBS), 3 kertaa 5 minuutin ajan. Sitten leikkeitä inkuboitiin primaarisen vasta-aineen kosteassa kammiossa 4 ° C: ssa yön yli. CD34 monoklonaalinen vasta-aine (Abcam, USA) käytettiin tässä tutkimuksessa. Kun oli pesty 3 kertaa PBS: llä 5 minuutin ajan, piparjuuriperoksidaasi (HRP) polymeeri-sidottu sekundääristä vasta-ainetta lisättiin ja inkuboitiin 15 min 37 ° C: ssa. Sitten leikkeitä visualisoitiin diaminobenzadine (DAB) ja vastavärjättiin hematoksyliinillä. Negatiivinen kontrolli värjäys suoritettiin isotyyppikontrolli ja PBS sijaan primaarisen vasta-aineen.

Tilastollinen analyysi

Arvot ilmoitetaan keskiarvona ± SD. Tiedot arvioitiin ANOVA. Vertailut kahden ryhmän välillä arvioitiin opiskelijan

t

testiä. Korrelaatiot muuttujat määritettiin käyttäen lineaarista regressioanalyysiä. Kaikki testit suoritettiin käyttäen SPSS 13.0 järjestelmään.

P

0,05 katsottiin tilastollisesti merkitsevä.

Tulokset

Kohonnut verenkierrossa Tc17 solut käsittelemättömiä UCC ja CIN potilaat

Analysoimme IL -17 CD8-

+ T-soluja (Tc17 solut) ääreisveren virtaussytometriaa käyttämällä. Ilmaisu tyypillisten Tc17 solujen edustava potilaiden ja verrokkien oli kuvassa. 1. Lisäksi prosenttiosuus Tc17 solujen oli merkittävästi korkeampi UCC potilailla (0,49 ± 0,37%,

P

= 0,0076) ja CIN potilailla (0,51 ± 0,39%,

P

= 0,0149) , verrattuna terveisiin kontrolleihin (0,27 ± 0,27%) (Fig. 2a). Mitään merkittävää eroa ei havaittu tason välinen Tc17 solujen CIN ja että UCC potilailla (

P

0,05). Tutkia mahdollista roolia lisääntyneen Tc17 solut, meidän vieressä pyrittiin määrittämään, onko tämä Tc17 vinoonajon liittyi kliiniset piirteet tauti. Erityisesti havaitsimme merkittävän kasvun taajuus Tc17 solujen UCC potilailla, joilla imusolmuke etäpesäke (0,77 ± 0,43%;

P

= 0,0026) verrattuna, että potilailla, joilla ei imusolmukemetastaaseja (0,36 ± 0,26%) (Fig. 2b). Ei havaittu yhteyttä välisiä Tc17 solujen ja muut kliiniset ominaisuudet kuten kliinisessä vaiheessa tunkeutumisen syvyys, vasoinvasion, histologinen kasvaimen tyyppi, tai primäärikasvain koko UCC potilailla (

P

0,05).

Yläoikea neljännesten ovat domeenien Tc17 (CD8

+ IL-17

+) solujen ja prosenttiosuudet niistä esitetään kussakin paneelissa.

(a) Tc17 taajuuksien kolmeen ryhmään. Merkittävästi lisääntynyt Tc17 solujen havaittiin käsittelemättömissä UCC potilailla (

P

= 0,0076, n = 49) ja CIN potilailla (

P

= 0,0149, n = 25) verrattuna terveisiin kontrolleihin (n = 28). (B) Tc17 taajuus positiivinen tai negatiivinen imusolmukemetastaaseja UCC potilailla. Verrattuna potilaisiin ilman imusolmukemetastaaseja (n = 15), huomattavasti Tc17 taajuuden (

P

= 0,0026) todettiin imusolmukemetastaaseja potilailla (n = 35). Studentin t-testiä käytettiin ja pylväät edustavat SD, *

P

0,05, **

P

0,01.

jakelu Tc17 solujen ja mikroverisuonitiheys (MVD) kudosnäytteistä UCC ja CIN potilaat

aiemmin havaittu, että IL-17

+ -soluissa runsaasti ihmisen UCC, ja suurin osa kiertävän IL-17

+ solujen olivat CD4

+ solupopulaation (Th17 solut) [8]. Kuitenkin kasvaimen kudokset, enemmän runsaasti soluja CD8

+ T-soluja (Tc17 solut). Tutkia jakautuminen Tc17 solujen paikallisella tasolla, tutkimme esiintyvyys Tc17 solujen kasvain kudoksissa 46 UCC potilaista ja kohdunkaulan kudoksia 28 CIN käyttävillä potilailla immunohistokemiallista kaksoisvärjäystä (Fig. 3). Kuten on esitetty kuviossa. 4a, taso Tc17 solujen lisäsi merkittävästi kudoksissa UCC potilaista (142,50 ± 28,24 solua /HPF) ja CIN potilailla (23,42 ± 7,65 solua /HPF), verrattuna että kudoksissa terveillä verrokeilla (5,52 ± 2,25 solua /HPF

P

UCC = 0,0007,

P

CIN = 0,026). Merkittävä ero havaittiin myös välillä CIN ja UCC potilaat (

P

= 0,0086). Jälleen taso Tc17 solujen kudoksia UCC potilaiden korreloi positiivisesti tilan imusolmukemetastaaseja, koska huomattavasti korkeampi Tc17 solujen havaittiin kudoksissa UCC potilaalla on imusolmukemetastaaseja (178,20 ± 35,47 solua /HPF) verrattuna sen, että UCC potilailla, joilla ei imusolmukemetastaaseja (116,59 ± 25,57 solua /HPF,

P

= 0,035) (Kuva. 4b). Ei korrelaatio löytyi tason Tc17 solujen muiden kliinisiä piirteitä, kuten kliinisessä vaiheessa tunkeutumisen syvyys, vasoinvasion, kasvaimen koko ja histologinen kasvaintyyppi UCC potilaista (

P

0,05).

(A) immunohistokemiallinen kaksinkertainen värjäys Tc17 solujen kontrolliryhmässä (a ja d), CIN ryhmä (b ja e) ja UCC ryhmä (c ja f). Edustavia sivustoja, joilla on alhainen (200 ×, ylemmät paneelit) ja korkea (400 ×, alempi paneeli) suurennuksen näytettiin. (B) IL-17-tuottavia soluja värjättiin punainen (sytoplasmassa) ja CD8

+ solut värjättiin musta (kalvon). Koekspressio CD8: n ja IL-17 vahvisti, että osa Tc17 soluja.

(a) verrattuna terveisiin kontrolleihin (n = 30), lisääntyi merkittävästi numerot Tc17 solujen havaittiin sekä kudoksia UCC potilaista (

P

= 0,0007, n = 46) ja CIN potilaat (

P

= 0,026, n = 28). Merkittävä ero havaittiin myös välillä CIN ja UCC kudoksissa (

P

= 0,0086). (B) kasvaimen alueella, niitä UCC potilailla, joilla on etäpesäkkeitä imusolmukkeissa (n = 30) havaittiin merkittävästi tilastollinen korkeampi Tc17 soluja taajuudella kuin potilailla, joilla ei imusolmukemetastaaseja (

P

= 0,035, n = 16). *

P

0,05, **

P

0,01, ****

P

0,001.

Seuraava tiheys pienten verisuonten kohdunkaulan kudoksissa määritettiin immunohistokemiallisesti värjäämällä vasta-ainetta vastaan ​​angiogeenisten Merkkigeenin CD34. Kuten on esitetty kuviossa. 5b, MVD havaittiin useammin UCC (38,37 ± 7,04 /HPF,

P

0,0001) ja CIN kudosten (23,36 ± 5,34 /HPF,

P

0,0001) kuin kontrolliryhmässä kudoksissa (11,81 ± 2,47 /HPF). Myös huomattavasti korkeampi MVD todettiin UCC ryhmässä verrattuna CIN ryhmän (

P

0,0001). Koska IL-17 tiedetään olevan voi edistää kasvaimen etenemistä edistämällä angiogeneesiä [21], [22], analysoitiin suhde tason Tc17 solujen ja määrää mikrosuonten. Kuten on esitetty kuviossa. 5a, tasot Tc17 soluja havaittiin korreloivan positiivisesti mikroverisuonitiheys kohdunkaulan CIN ja UCC kudoksissa (r = 0,923,

P

0,001 CIN, ja r = 0,938,

P

0,0001 UCC, vastaavasti).

(A) Lineaarinen regressioanalyysi välisiä Tc17 solujen ja MVD (Total: r = 0,987,

P

0,0001, n = 65; ohjaus: r = 0,814,

P

0,001, n = 18, CIN: r = 0,923,

P

0,001, n = 17; UCC: r = 0,938

P

0,0001, n = 30). MVD kustakin näytteestä piirrettiin Tc17 soluja tasolla samalta henkilöltä. (B) edustaja immunohistokemiallisella värjäyksellä MVD kohdunkaulan kudoksissa kolmeen ryhmään. Edustavia sivustoja, joilla on alhainen (100 x, ylemmät paneelit) ja korkea (400 ×, alempi paneeli) suurennuksen näytettiin.

korrelaatiot välisiä Tc17 solujen ja Th17 solujen sekä Foxp3-ilmaisun T solut

Koska Tc17 solut ovat samanlaisia ​​Th17 solujen osalta kehityskulku ja mahdolliset vaikutukset [23], [24], on järkevää tutkia suhde niiden välillä. Ensisijainen tiedot ja menetelmät Th17 solujen havaitsemista samassa kolmeen ryhmään (UCC, CIN ja kontrolliryhmien) näytettiin meidän kahdessa edellisessä julkaistuja [8], [25]. Tulokset osoittivat, että tasot Th17 solujen ja Tc17 solut korreloivat positiivisesti vuonna CIN ja UCC ryhmät molemmissa ääreisverenkierrossa (r

CIN = 0,435,

P

= 0,042; r

UCC = 0,403,

P

= 0,016) (Kuva. 6 a ja b) ja kohdunkaulan kudoksissa (r

CIN = 0,441,

P

= 0,039; r

UCC = 0,693,

P

= 0,026) (Kuva. 6 c ja d).

(a, b) Lineaarinen regressioanalyysi välillä taajuuksien Tc17 solun ja Th17 verisolujen (r

CIN = 0,435,

P

= 0,042, n = 22; r

UCC = 0,403,

P

= 0,016, n = 36). (C, d) Lineaarinen regressioanalyysi välisiä Tc17 solujen ja Th17 soluja kohdunkaulan kudoksissa (r

CIN = 0,441,

P

= 0,039, n = 17; r

UCC = 0,693,

P

= 0,026, n = 30).

lisäksi, koska Foxp3-ilmentävät T-solut ovat hyvin tiedetään olevan immuuni-tukahduttava varten T-soluvasteiden [25] [26] välinen suhde tasojen Tc17 ja Foxp3-ilmentävien T-solujen potilaan (CIN ja UCC) kohdunkaulan kudokset analysoitiin myös. Ensisijainen tiedot ja menetelmät Foxp3 ilmentävien T-solujen havaitsemisen olivat viitaten 38. Kuten kuvassa. 7, tasot Tc17 solujen ja Foxp3-ilmentävien T-solujen potilaan kaulan kudosten korreloivat positiivisesti (r = 0,841,

P

0,001).

(r = 0,713,

P

0,001, n = 47).

keskustelu

immuunijärjestelmä näyttelee monimutkainen rooli kasvainten synnyssä. Se oli aiemmin uskottiin, että CD8

+ T ovat pääasiassa CD8

+ sytotoksisten T-solujen, Tc-solut, joiden merkitys keskeinen rooli isännän immuunivasteita solunsisäisiä taudinaiheuttajia ja kasvainten muodostumisen avulla ilmentymistä IFN-γ, grantsyymi B ja perforiinin [13], [14]. Kuitenkin osajoukko CD8

+ T-solujen immunosuppressiiviset on kuvattu [27], [28]. Roberts et ai. [29] havaitsivat, että CD8

+ T-solut voivat myös edistää ihon syövän synnyn käyttämällä kaksivaiheista kemiallisia aloittaminen /edistäminen protokolla (DMBA ja TPA). DMBA /TPA karsinogeenisia hoito voi säätää ylös ilmaisuja TGF-β ja IL-6, jolloin Tc17 solussa vinouttaa [30], [31]. Lisäksi ne on myös havaittu, että osajoukko kasvaimen edistää IL-17

+ CD8

+ solupopulaation voi olla olemassa tässä mallissa.

Tc17 solut äskettäin määritelty IL-17-tuottamiseen CD8

+ T osajoukko, joka poikkeaa TC1 ja TC2 soluja. Vaikka jotkut on edistytty ymmärtämään erilaistumista ja toimintaa Tc17 solujen joidenkin ihmisten sairauksien ja homeostatic asetuksissa [9], [10], [32], tiedetään vain vähän biologista toimintaa ja mekanismi taustalla sääntelyä Tc17 solujen ihmisen kasvaimissa. Tutkimuksemme osoitti, että tasot Tc17 solujen ja Th17 solujen näkyvästi lisääntyi sekä ääreisverenkierron ja tuumorikudoksia UCC potilaista. Lisäksi huomasimme, että taajuus Tc17 solujen korreloi positiivisesti että Th17 solujen sekä ääreisverenkierron ja kohdunkaulan kudoksissa potilailla CIN ja UCC. Toinen tutkimus on osoittanut myös runsaasti Tc17 solujen kasvaimen kantavien hiirten, samanlainen kuin tulehdustila [18]. Lisäksi, Kuang et ai. [20] havaitsivat, että IL-17

+ solut (mukaan lukien Th17 solut ja Tc17 solut) kerääntynyt ihmisen maksasolukarsinoomat (HCC) ja Tc17 solut rikastettu tunkeutuvat reunaan HCCs. Siten Tc17 solut rikastettu UCC potilailla voi olla tärkeä rooli kehittämistä tämän syöpätyyppi.

Kerrottiin, että Tc17 solut ja Th17 solujen jakoi samanlaisia ​​kehitys- polkuja suhteen erilaistumisprosessia [10 ]. Esimerkiksi TGF-β, IL-6 ja IL-21 voi stimuloida erilaistumista sekä Tc17 ja Th17 soluihin [10], [19], [24]. Lisäksi tutkimukset ovat osoittaneet, että Tc17 solut saattavat näyttää vaimentaa sytotoksisten toimivat samalla toiminnalle Th17 solujen autoimmuunisairauksien [23], [33], infektio [9], [23] ja tuumorin vastaista immuniteettia [15]. Lisäksi IL-17 on pro-inflammatoristen sytokiinien, joka on tuotettu sekä Th17 solut ja Tc17 soluja. IL-17 tuottavat T-solut ovat efektoreja mukana indusoimaan tulehdukseen ja autoimmuunisairauksien kudosvaurion [34]. Niinpä spekuloida, että IL-17 voi välittää mahdolliset roolit Tc17 solujen syövän etenemisessä. Kuitenkin, pakko ektooppinen yli-ilmentyminen IL-17-kasvainsoluissa osoittanut ristiriitaisia ​​vaikutuksia kasvaimen kasvuun: tuumorin estämällä [35], [36] versus kasvaimen edistämiseksi [21], [37]. Erityisesti Nam et al. [31] kertoi, että IL-17 vaimentaa apoptoosin useissa tuumorisolulinjoissa

in vitro

, ja knockdown IL-17-reseptorin 4T1 hiiren maitorauhasen syöpäsoluja parannettu apoptoosin ja laski kasvaimen kasvua

in vivo

. Lisäksi havaitsimme kohonneita TGF-β, IL-6, IL-17 ja IL-21 kohdunkaulan syövistä (julkaisemattomia havaintoja). Nämä havainnot viittaavat siihen, että UCC voi aktiivisesti erittää suuria määriä TGF-βwhich voivat aiheuttaa erilaistumista IL-17

+ T-solujen, ja tämä voi puolestaan ​​edistää ja selviytymistä syöpien IL-17-riippuvaisesti [31], vaikka lisätutkimuksia tarvitaan edelleen.

Viime aikoina on osoitettu, että sekä Th17 ja Tc17 solut ovat läsnä tuumorin mikroympäristöihin useita erilaisia ​​ihmisen ja hiiren kasvaimissa [19], mikä viittaa siihen, että tämä voi olla suhteellisen yleinen ilmiö kasvainten synnyssä. Sitä paitsi, me aikaisemmin raportoitu, että Th17 solut voivat aiheuttaa pahanlaatuisia etenemistä ja huono eloonjäämiseen UCC potilailla [8]. Tässä tutkimuksessa olemme myös havaittu, että positiivinen korrelaatio Tc17 solujen ja Th17 solut vähitellen lisätä etenemistä CIN UCC. Lisäksi esiintyvyys Tc17 solujen korreloi myös imusolmukemetastaaseja UCC. Näin ollen, on mahdollista, että rikastamista Tc17 solujen edistää etenemistä UCC yhteistoiminnassa Th17 soluja.

Huolimatta siitä, että Tc17 solut ovat efektorisoluja, he eivät voi tappaa kohdesolut siten, että klassisen CD8

+ T-solujen tehdä [24]. Epidemiologiset tutkimukset ovat osoittaneet, että tulehdus liittyy kasvaimen etenemistä [38]. Tulehdus johtaa kasvutekijöiden, angiogeenisten tekijöiden, ja matriisi hajottavia proteaaseja leukosyyttien, jotka ovat tärkeässä osassa kasvaimen edistäminen ja eteneminen [4], [38]. Kuang et ai. [20] mukaan Tc17 solut pääasiallisesti rikastettu tunkeutuvat reunaan ihmisen maksasolusyövän (HCC). Nämä soluttautuminen Tc17 solut ilmensivät korkeita proinflammatoristen sytokiinien, jotka edistävät kasvaimen laajennuksen kautta tulehdusreaktiota. Uudissuonitus on toinen tärkeä tunnusmerkki syövän etenemisen. Proinflammatoristen sytokiinien, kuten IL-17 voi myös edistää kasvaimen kasvua edistämällä angiogeneesiä [21], [22]. Tutkimuksessamme olemme löytäneet myös positiivinen korrelaatio taajuuden Tc17 solun ja mikroverisuonitiheys, tukemalla proinflammatoristen omaisuutta IL-17-tuottavia soluja. Lisäksi olemme myös havaittu korrelaatiota Tc17 solujen Foxp3 ilmentäviä T-soluja kohdunkaulan syövän kudoksissa, Foxp3 ilmentäviä T-solut välittävät vahvan immuunijärjestelmän heikentävän aktiivisuuden T-soluvasteita [39], [40]. Nämä tulokset osoittavat, että Tc17 solut voivat edistää syövän etenemiseen, mutta tarkka toiminta Tc17 solujen UCC vaatii lisätutkimuksia.

Yhteenvetona osoitimme ensimmäistä kertaa, että taajuus Tc17 solujen lisääntynyt ilmeisesti CIN ja UCC potilasta, ja lisääntynyt esiintyvyys Tc17 solujen liittyi imusolmukemetastaaseja ja mikroverisuonitiheys, mikä osoittaa merkittävä rooli Tc17 solujen taudin alkamisen ja etenemisen UCC. Parempi ymmärrys oleva mekanismi IL-17 säätelevä antituumorivaikutuksen immuunivasteita voi johtaa kehitystä uusien hoitostrategia UCC potilaille.