Krooninen sairaus

tiivistelmä

CD44 arvosanat kantasolujen kaltaisia ​​soluja useissa kasvain tyypit, mukaan lukien peräsuolen syöpä (CRC), kun taas poikkeava CD44 ilmaisu välittää lisääntynyt kasvaimia, invasiivisia, ja metastaattinen potentiaali. Aiemmat tulokset osoittavat, että CD44 on välittömänä kohteena p53-välitteisen transkription repression rintasyövässä. Koska inaktivoimalla

p53

mutaatiot ovat usein geneettisiä tapahtumia CRC nämä voivat vapauttaa ilmaisua CD44. Esillä olevassa tutkimuksessa olemme siis tutkittava suhde

p53

mutaatiostatuksesta riippumatta ja CD44 ilmaisun kohortin 90 paikallista ensisijaisen CRC ja tutki vaikutusta säteilyn aiheuttamista p53 aktivoinnin CD44 ilme. Kiinnostavaa kyllä, havaitsimme, että toisin kuin rintasyövän, toimintakyvyn menetystä

p53

mutaatioita ei liittynyt kohonneisiin CD44 ilmaisun paksusuolensyöpä. Lisäksi DNA-vaurioita aiheuttama p53 aktivaation ei aiheuttanut tukahduttaminen CD44 ilmaisun, eikä paksusuolen syöpäsoluissa eikä normaaleissa suolen epiteelisolujen. Tuloksemme osoittavat, että CD44 ilmentymistä normaalissa ja pahanlaatuiset suolen epiteelisolujen ei ole säännelty p53, mikä tarkoittaa, että sääntely tämän mahdollisesti merkittävän terapeuttinen tavoite on kudosta ja syöpä-tyypistä.

Citation: Zeilstra J, Joosten SPJ, Vermeulen L, Koster J, Medema JP, Versteeg R, et al. (2013) CD44 ilmentäminen suoliepiteeliin ja peräsuolen syövän on riippumaton p53 tila. PLoS ONE 8 (8): e72849. doi: 10,1371 /journal.pone.0072849

Editor: Kanaga Sabapathy, National Cancer Centre, Singapore

vastaanotettu: 1 maaliskuu 2013; Hyväksytty: 15 heinäkuu 2013; Julkaistu: 29 elokuu 2013

Copyright: © 2013 Zeilstra et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tämä työ on rahoitettu Alankomaiden Cancer Foundation. Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

CD44 käsittää perheen soluadheesion ja molekyylejä, jotka aiheuttavat dalmatialaistäpläisiä tärkeistä biologisissa prosesseissa, kuten solujen lisääntymisen, selviytyminen, muuttoliike, epiteelin ja mesenkymaalitransitioon (EMT), ja syövän etäpesäkkeiden (tarkastelleet Zöller [1]) . Suolen limakalvolla, CD44 on tärkeä välittömänä kohteena Wnt signalointia ja on näkyvästi ilmentyy suoliston kantasolujen [2] – [4]. On kertynyt todisteita siitä, että CD44 on mukana taudin alkamisen ja etenemisen suoliston kasvaimia ja etäpesäkkeiden kehittymisessä [1], [3], [5] – [9]. Lisäksi merkittävä ilmentymä CD44 on tunnusmerkki erittäin kasvaimia CRC soluihin [10]. Niinpä se oli viime aikoina osoittaneet, että

CD44

on osa suoliston kantasolu geeni allekirjoitus, joka ennustaa taudin uusiutumisen CRC potilailla [11]. Tämä allekirjoitus on nimenomaan liittyy CRC soluihin jolla on korkea-kasvain aloittamista potentiaali sekä pitkän aikavälin kyky uusiutua. Siksi CD44 on potentiaalinen terapeuttinen kohde hoidettaessa CRC ja siksi on tärkeää ymmärtää eri mekanismeihin, jotka ovat sääntelyn CD44. Useimmissa tapauksissa CRC, ilmentymisen CD44 lisääntyy seurauksena säädeltyyn Wnt /β-kateniinin signalointi [2], [12]. On kuitenkin olemassa runsaasti todisteita siitä, että muut ei-vielä tunnistettu reittejä ja mekanismeja edistää Wnt /β-kateniinin kohdegeenin ilmentyminen suoliston kasvaimet [13]. Kasvain vaimennin proteiini p53 on transkriptiotekijä, joka on keskeisessä asemassa tukahduttamiseen syöpä. Vastauksena kasvaimia stressiä, kuten DNA-vaurioita, aktivoitu p53-proteiini sitoutuu sekvenssin-spesifisen DNA sivustoja, jolloin säätelemiseksi transkription monenlaisia ​​kohdegeenien mukana solusyklin ohjaus ja selviytymisen merkinanto [14]. Mutaatiotapahtumaa inaktivointi

p53

geeni on usein geneettinen tapahtuma etenemistä monentyyppisiä ihmisen kasvaimista, kuten rintasyövän ja peräsuolen syöpä (CRC) [15]. Se on äskettäin osoitettu, että p53: n transkriptionaalisesti tukahduttaa

CD44

ilmentymistä sekä normaaleissa että tuumorista peräisin nisäepiteelisoluissa suoraan sitoutuminen

CD44

promoottori [16]. Tämä p53-riippuvaista sääntely CD44 havaittiin sekä ihmisen ja hiiren rintarauhasiin, mikä osoittaa evoluution säilytetyn toiminto. Tärkeää on, alas-säätely CD44 ilmentymisen todettiin olevan edellytys p53-riippuvaisen kasvun säätelyssä ja apoptoosin induktio rintaepiteelin [16]. Samanlainen toiminnallinen vuorovaikutus p53 ja CD44 voi tapahtua suolen epiteelisolujen ja kasvaimia. Tutkitaan, onko CD44 ilmentymistä kontrolloi p53-proteiinin CRC, analysoimme kohortin ensisijaisen paksusuolikarsinoomat varten

p53

mutaatiostatuksesta riippumatta ja CD44 ilme. Tutkimuksemme osoittaa, että menetys p53-toiminto ei ole kohonnut CD44 ilmaisun CRC. Lisäksi osoitamme, että aktivaatio villityyppinen p53 ei pysty tukahduttaa CD44 ilmentymistä ihmisen paksusuolen syöpäsoluissa sekä primääriviljelmien hiiren suolen krypta-villus organoids.

Materiaalit ja menetelmät

Eettinen linjaus

tutkimus liittyy ihmisen biopsianäytteissä suoritettiin noudattaen Helsingin julistuksen ja hyväksymä paikallinen eettinen komitea on Amsterdamin yliopisto, AIEC (Algemene Instellingsgebonden Ethische Commissie). Potilaat antoivat tietoon suostumus näytteen keräämistä.

Kasvain Näytteet, p53 Mutaatioanalyysi ja Gene Expression Assay

Tutkimus kohortti koostui 90 AJCC vaiheen II CRC potilaita, jotka tehtiin tarkoituksellisesti parantava leikkaus Academic Medical Center (AMC) Amsterdam, Alankomaat, vuosina 1997-2006 [17]. Edustavia tuore kasvainkudoksessa leikattiin 20 pm paksun kappaleissa pantiin välittömästi TRIzol reagenssia (Invitrogen Life Technologies, Breda, Alankomaat), minkä jälkeen kokonais-RNA uutettiin. Kasvainten kuormitus tutkittiin rutiininomaisesti kokenut patologi.

p53

mutaatiostatuksesta riippumatta määritettiin käyttämällä RT-PCR. Lyhyesti, 2 ug kokonais-RNA: ta käänteistranskriptoituneet 25 ui reaktiotilavuudessa käyttäen pdN6 (Amersham Biosciences, Roosendaal, Alankomaat) ja MMLV transcriptase (Gibco BRL, Breda, Alankomaat). PCR suoritettiin 1 ui cDNA-templaattia käyttäen platinaa Taq-polymeraasia (Invitrogen Life Technologies). Oligo alukkeet on lueteltu taulukossa 1. PCR-tuotteet monistettiin 35 sykliä 45 s 95 ° C: ssa, 45 s 60 ° C: ssa, ja 1 min ja 30 s 72 ° C: ssa, ja sekvensoitiin suoraan käyttäen Big Dye Terminator Kit (Amersham) yhdessä joko sense tai antisense-oligo pohjamaali. Sekvenssit analysoitiin käyttämällä CodonCode aligner ohjelmistoa (CodonCode Corp., Dedham, MA). Geeniekspressiotasot kasvaimissa arvioitiin käyttäen Affymetrix GeneChip- Human Genome U133 Plus 2.0 array alustan (Affymetrix, Santa Clara, CA). Puhdistettu RNA käsiteltiin, hybridisoitiin ja skannataan valmistajan protokollaa. Aineisto analysoitiin ohjelmistopaketti R2 (https://r2.amc.nl), web-pohjainen mikrosiruanalyysi kehittämä sovellus J.K. Tietoja MAS5 normalisoitu ja ilmaisun arvot loki2 muuttunut. Tilastollinen merkitsevyys arvioitiin käyttämällä yksisuuntaista varianssianalyysiä (ANOVA). Probe sarjaa analysoitiin olivat:

CDKN1A

(

p21

), ID: 202284_s_at;

MDM2,

229711_s_at; ja

CD44,

209835_x_at. Muut koetin asetetaan määrittämällä

CD44

tuotti samankaltaisia ​​tuloksia, esimerkiksi; 204489_s_at,

P

0,01 ja 210916_a_at,

P

0,01).

immunohistokemia

parafinoidut kasvainkudoksessa värjättiin käyttämällä ensisijaista mAb hiiren anti-humaani-p53 (Dako, Glostrup, Tanska) ja ensisijaisen mAb hiiren anti-humaani CD44 (VFF18), joka tunnistaa CD44v6 [18]. Vasta-aineen sitoutuminen visualisoitiin käyttäen PowerVision poly-HRP tunnistusjärjestelmä (ImmunoVision Technologies, Daly City, CA) ja DAB + (Dako). Intensiteetti (I) värjäys pisteytettiin semikvantitatiivinen asteikot seuraavasti: ”0”, ei reaktiota; ”1”, heikko reaktio; ”2”, kohtalainen reaktio; ja ”3”, voimakkaan reaktion. Se, missä määrin signaalin pisteytettiin positiivisten solujen prosenttiosuuden (P). Kaiken kaikkiaan värjäytyminen pisteet laskettiin kertomalla intensiteetti että positiivisten solujen prosenttiosuuden (Pisteet = P * I maksimi = 300). Fisherin testiä käytettiin tilastollista analyysiä (

P

0,001).

Soluviljely, Immunoblottausmääritys ja Reaaliaikainen käänteistranskriptio-PCR

RKO-soluja viljeltiin McCoyn 5A keskipitkän supplementented 10% FCS kunnes subkonfluenteista. Hiiri ohutsuolen kryptissa eristettiin mukaisesti protokollien hyväksymien paikallinen eläin eettinen komitea on Amsterdamin yliopisto, joulukuu (Dier Ethische Commissie) ja viljeltiin viikon aikana kuvannut

Sato et al

. [19]. Viljelmät altistettiin yksi annos 10 Gy peräisin

137Cs γ-ray säteilylähteen annosnopeus 0,8 Gy /min tai inkuboitiin 500 ng /ml neokarsinostatiini (NCS) joko yhdessä 10 uM nutlin vai ei . Solut kerättiin lyysipuskurissa on ilmoitettuina ajankohtina. Vasta-aineita käytetään immunoblottauksella olivat anti-pan CD44 mAb Hermes-3 [20], anti-p21 mAb sx118 (Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), ja anti-p53 mAb DO-1 (Santa Cruz Biotechnology). p-aktiini käytettiin latauskontrollina. Samanaikaisesti, kokonais-RNA eristettiin käyttäen PicoPure RNA: n eristäminen Kit (Arcturus Bioscience, Mountain View, CA) ja reaaliaikainen qRT-PCR suoritettiin, kuten aikaisemmin on kuvattu [3], [21]. Yksi tapa-varianssianalyysi (ANOVA) käytettiin määrittämään merkittäviä muutoksia (

P

0,05) ajassa.

Tulokset

lakkaa toimimasta mutaatio p53 on ei kohonnut CD44 Expression Colon Cancer

viime tunnistaminen p53 transkription repressori on

CD44

rintasyövän ja maitorauhasepiteelisoluihin [16], sai meidät tutkimaan, onko samankaltaisia ​​toiminnallisia suhteessa olemassa paksusuolensyöpä ja suoliston epiteelin. Siksi tutkittiin suhdetta p53 mutaatiostatuksesta riippumatta ja

CD44

mRNA tasot kohortin 90 peräsuolen karsinoomat. Kaikki kasvaimet mukana tässä tutkimuksessa olivat adenokarsinooman kanssa hyökkäyksen kautta muscularis propriaa mutta ilman imusolmuke tai kaukana etäpesäke (Dukes B, AJCC vaihe II). Mutaatiotutkimukset tila arvioitiin cDNA sekvensoimalla koko koodaavan alueen

p53

geenin, joka ulottuu eksonien 1 11 sekvenssianalyysi tunnistettiin 25 kasvaimia (28%), jossa on mutaatio, tuloksena on transkriptionaalisesti inaktiivinen p53-proteiinin mukaan määritelmän Soussi et al. [22] (taulukko 2). Vertailu ryhmien villityypin ja mutantti

p53

paljasti merkittävästi vähentynyt mRNA ilmaus kaksi kanonisen p53 transkription tavoitteita,

CDKN1A

(

P21

) (

P

0,01) [23] ja

MDM2

(

P

0,001) [24] kasvaimissa kanssa

p53

toiminnan menetys mutaatioiden ( Kuvio 1A ja B). Mielenkiintoista on, että toisin kuin nisäkasvainten jossa menetys p53-toiminto havaittiin korreloi merkitsevästi kohonnut

CD44

ilmaisun [16],

p53

mutaatio paksusuolikarsinoomat korreloi laski

CD44

mRNA ekspressiotasot (

P

0,01; kuvio 1 C). Nämä tulokset osoittavat, että p53 ei toimia transkription repressori on

CD44

ilmaisun CRC.

Suhteellinen geeniekspressiotasot in

p53

mutantti ja

p53

villityypin adenokarsinoomat varten (A)

CDKN1A

(

p21

) (**, P 0,01), (B)

MDM2

(***,

P

0,001), (C)

CD44,

(**,

P

0,01).

CD44 Protein Expression ei ole lisääntynyt paksusuolikarsinoomat kanssa

p53

mutaatio

sen varmistamiseksi, että

p53

mutaatiostatuksesta riippumatta ja mRNA tasot

CD44

vuonna ensisijainen paksusuolensyöpä näytteet heijastavat proteiinin tasot, tutkimme p53 ja CD44 ilmentymisen immunohistokemia osajoukko kasvaimia (n = 15 /ryhmä). Mutaatiot

p53

johtavat usein sopimattoman vakauttaminen proteiinin ja tumakertymään [25]. Mukaisesti, kun taas kasvaimissa, kätkeminen vain villityyppistä

p53

geenisekvenssien osoittivat joko ei värjäystä p53-proteiinin tai tumavärjäystä hajallaan soluissa, kasvaimet sisältävät

p53

Mutanttigeeni osoitti vahvaa tumavärjäystä enemmistön pahanlaatuisia soluja (

P

0,001, kuvio 2A ja B). CD44 ilmentyminen havaittiin solukalvon valtaosa kasvaimista joko mutatoimattomia

p53

(14 15: sta) tai mutantit

p53

(14 out of 15) (Fig. 2A). Mikä tärkeintä, ei ollut merkittävää eroa CD44 värjäytyminen pisteet välillä kasvaimet molemmissa ryhmissä (

P

0,05; kuva 2B). Nämä havainnot osoittavat, että muut kuin rintasyöpä, menetys p53-toiminto paksusuolen syöpä ei liity lisääntynyt CD44-proteiinin ilmentymisen.

(A) Serial osia paksusuolen karsinooma kanssa ja ilman p53: n toiminnan menetys mutaatio (

eli

., R175H, taulukko 2), värjättiin p53 ja CD44-proteiinia (palkit osoittavat 50 pm). (B). Immunohistokemiallinen (IHC) pisteet p53 ja CD44-proteiinin ilmentyminen, vastaavasti (***,

P

0,001, ns = ei merkitsevä).

p53 ei tukahduttaa

CD44

Colon Cancer Cells and Normal suoliepiteeliin

edellä esitetyt havainnot eivät sulje pois mahdollisuutta, että villityyppinen p53 voi (osittain) estää CD44 ilmentymistä normaalissa ja neoplastisia suoliepiteeliin aktivoitaessa genotoksisten stressi . Käsitellä tätä mahdollisuutta, määritimme vaikutuksia DNA-vaurion aiheuttaman p53 aktivoinnin CD44 tasoilla ihmisen RKO koolonkarsinoomasoluissa. Nämä solut ilmentävät villityyppistä p53: a ja K-Ras, ja ovat diploideja [26]. Erityisen kiinnostavia, RKO solut sisältävät myös villityypin

APC

ja

CTNNB1

geenejä ja puuttuu perustava β-kateniinin /TCF-4-välitteisen transkription [27]. Tämä on tärkeää, koska transkription säätelyyn

CD44

p53 voisi peittää konstitutiivisen Wnt-reitin aktivaatio, mikä johtaa p-kateniinin /TCF-4-välitteisen

CD44

ilmaisua. RKO solut altistettiin 10 Gy γ-säteilyä, jonka jälkeen ilmaus

CDKN1A

(

p21) B ja

CD44

ja analysoitiin reaaliaikaisella qRT-PCR. Expression of

c-MYC

, suora Wnt kohdegeenin [28], [29] Myös määritettiin valvoa ylläpitämiseen vakaan tilan β-kateniinin /TCF-4-driven transkriptionaalista aktiivisuutta. Lisäksi p53, p21 ja CD44-proteiinia tasot analysoitiin immunoblottauksella. Kuten odotettua, ionisoivan säteilyn aiheuttama DNA-vaurioita johti p53 stabilointi (kuvio 3A) ja sen seurauksena transaktivaatiota p21 havaittiin kaikissa aikapisteissä (kuvio 3A ja B). Kuitenkin

CD44

geeniekspressiota ja CD44-proteiinia tasoa ei laskenut ajan myötä (kuvio 3A ja B), kun taas

c-MYC

mRNA pysyivät vakaina (kuvio 3B). Nämä tiedot osoittavat, että p53 ei pysty tukahduttaa

CD44

ilmentymistä ihmisen paksusuolen syöpäsoluissa.

(A) Immunoblottaus analyysi p53, p21 ja CD44-proteiinin tasot RKO koolonkarsinoomasoluissa käsitelty ionisoivalla säteilyä. Aktiini käytettiin latauskontrollina. (B) qRT-PCR tulokset osoittavat suhteelliset geeniekspressiotasot varten

CDKN1

A (

p21

),

CD44,

ja

c-MYC

. Tiedot edustavat keskiarvoa ± SEM päällekkäisiä kokeita,. (*,

P

0,05 verrattuna t = 0).

laajentaa havaintoja normaaliksi suoliepiteeliin, me seuraavaksi tutkittiin CD44 vaste p53 aktivaation epiteelisolujen krypta-nukkalisäkkeen akselin hiiren ohutsuolessa. Tätä tarkoitusta varten käytimme

in vitro

viljellyissä hiiren suolen epiteelin crypts-villus organoids [19]. Organoids, joka käsittää useita crypt domeeneja (kuvio 4A) altistettiin 10 Gy γ-säteilyä, jonka jälkeen

Cdkn1a

,

CD44

, ja

c-Myc

mRNA: n ekspression taso oli analysoitiin reaaliaikaisella qRT-PCR. Samanlainen RKO-solujen,

Cdkn1a

mRNA-tasot olivat kasvaneet organoids vasteena ionisoivalle säteilylle (kuva 4B). Nämä tulokset ovat yhdenmukaisia ​​aiempien tutkimusten säteilyn aiheuttamista p53 aktivaation hiiren krypta [30].

CD44

mRNA ilmentyminen ei muuttunut merkittävästi sen jälkeen, kun säteilyaltistusta, kun taas ekspressiotasot

c-Myc

pysyi vakaana (kuva 4B). Samoin kemiallinen induktio p53 aktivaation avulla NCS johti myös kohonneeseen

Cdkn1a

mRNA. Samanaikainen inkubaatio p53 stabilointiaineen nutlin edelleen korkeissa

Cdkn1a

mRNA-tasoja. Molemmissa olosuhteissa

CD44

mRNA ilmentyminen ei muuttunut merkittävästi, kun taas

c-Myc

ekspressiotasot pysyi vakaana (kuvio 4C) .Nämä tulokset vahvistavat havaintomme ihmisen RKO soluissa ja ensisijainen paksusuolen karsinoomat, ja osoittaa, että

CD44

geenin ilmentyminen ei säännellä p53 sekä normaali ja muutettiin suolen epiteelisolujen.

(A) Crypt-villus organoidikappaleen viikon kuluttua viljelyn. Nuolet osoittavat krypta kaltainen osastoja (B) qRT-PCR tulokset osoittavat suhteelliset geeniekspressiotasot jälkeen sädehoitoa varten

Cdkn1a

,

CD44,

ja

c-Myc.

Data edustavat keskiarvoa ± SEM päällekkäisiä kokeita; (*,

P

0,05 verrattuna t = 0). (C) qRT-PCR tulokset osoittavat suhteelliset geeniekspressiotasot hoidon jälkeen NCS yksinään tai NCS plus nutlin varten

Cdkn1a

,

CD44

ja

c-Myc

(*,

P

0,05, **,

P

0,01 verrattuna t = 0).

keskustelu

tunnistaminen p53 transkription repressori CD44 ilmaisun rintasyövässä [16] sai meidät tutkimaan suhde

p53

mutaatiostatuksesta riippumatta ja CD44 ilmaisun paksusuolensyöpä. Osoitamme, että muut kuin rintasyöpä,

CD44

mRNA ja proteiini tasoilla eivät suurentuneet paksusuolikarsinoomat menetys toimiva p53, verrattuna tuumoreihin

p53

mutaatioita (kuvio 1 C, 2B ). Lisäksi,

CD44

ilmentymistä sekä normaaleissa että neoplastisissa suolen epiteelin ei vaikuttanut kemiallisesti tai säteilyllä aktivaatio p53, mikä osoittaa, että p53 ei toimi transkription repressori

CD44

vuonna suolen epiteelisolujen.

Havaittu kudosspesifisiä ero rinta- ja paksusuolen transkription säätelyyn

CD44

saattavat selittyä monimutkaisuus p53-toiminto. Ainakin kaksi ominaisuuksia p53-proteiinin vaaditaan sen geenin säätelytoimintaa: p53 on tunnistaa ja sitoa tiettyyn DNA-sekvenssit promoottori kohdegeenin ja p53 on rekrytoida useita transkription co-säätölaitteet (katsaus Laptenko ja Prives [14 ]).

CD44

promoottori sisältää ei-kanoninen p53 sitoutuva sekvenssi [16] kuitenkin useita vuorovaikutuksia yhteistyössä aktivaattoreita ja yhteistyön repressoreja sekä komponenttien yleisen transkriptiokoneiston sanella sen kyky ohjata promoottori aktivointi [14]. Esimerkiksi vuorovaikutus ASPP1, BRCA1 tai PTEN, tai koordinoitua toimintaa sekä p63 ja p73, on tunnistettu vaikuttavia tekijöitä, jotka suoraan vasteita [14], [31]. Erot ilmaisun ja toimintaa näiden samanaikaisesti sääntelyviranomaisten välillä rinta ja suoliepiteeliin voi siten edistää eriäviä rooli p53 transkriptionaalisen säätelyn

CD44

geenin rinta- ja paksusuolen epiteelin ja syöpäsoluja. Lisäksi p53 voivat käydä läpi useita erilaisia ​​translaation jälkeisiä muutoksia, mukaan lukien fosforylaatio, asetylaatio ja ubikitinaatio [32], jotka voivat ohjata promoottorin valinta [33]. Siten p53 toiminta riippuu monimutkaisesta ja tiukka sääntely, ja solu-erityisiä muutoksia tai yhteisvaikutuksia saattaa selittää sen kyvyttömyys tukahduttaa CD44 suolen epiteelisolujen. Meidän todetaan, että CD44 ilmentyminen normaalissa suoliepiteeliin ja paksusuolikarsinoomat on riippumaton p53 ilmaisun ja p53 mutaatiostatuksesta tila on merkitystä ymmärtämiseksi patogeneesissä CRC ja voi olla merkittäviä terapeuttisia vaikutuksia. Poikkeava CD44 lauseke on edullinen kasvua, selviytymistä ja levittäminen syöpäsolujen [1]. CRC nämä biologiset toiminnot CD44 ulottuvat sen kyky antagonisoida pro-apoptoottisen ja sytostaatit toiminnot p53 [16], [34]. Tämä voi johtua ainakin osittain, selitä rajoitettu rooli p53 moduloimaan välittömässä fenotyyppi vastaperustetun suoliston adenoomia [35]. Lisäksi useat tutkimukset ovat osoittaneet, että CD44 on vankka merkki, jossa toiminnallinen merkitys paksusuolensyöpä kantasolujen [10], [11], [36] – [38]. Nämä solut, joiden uskotaan olevan suhteellisen resistenttejä ja vastuussa kasvaimen leviämistä, mikä tekee CD44 houkutteleva kohde syövän kantasolujen suunnattu hoito, riippumaton p53.