Krooninen sairaus

tiivistelmä

pienisoluinen keuhkosyöpä (SCLC) on yksi aggressiivinen syövät, silti molekyylitason mekanismit sen tuhoisa kliininen tulos jäävät hämäräksi. Tässä tutkimuksessa tutkimme onko microRNA (miRNA) ekspressioprofiileja voi ennustaa kliinisiä tuloksia SCLC potilaista. Kaikkiaan 82 potilaalla on rajoitettu SCLC, joita hoidettiin poistettu kirurgisella ja adjuvanttihoitoa, otettiin tässä tutkimuksessa. Ensin kartoitettiin ilmaus 924 miRNA 42 SCLC potilaiden löytää selviytymisen kannalta tärkeiden miRNA ja kehittää ennustemalleja, jotka sitten validoitu riippumattomalla kohortin 40 tapauksessa käyttäen kvantitatiivisen tosiaikaisen PCR. Huomasimme, että miR-150 /miR-886-3p allekirjoitusta korreloi merkitsevästi yleiseen eloonjäämiseen (OS) SCLC potilaista (p = 0,02) koulutuksessa asetettu, ja molemmat miRNA ekspressiotasot olivat huomattavasti alhaisemmat SCLC näytteissä kuin normaali keuhko näytteitä. Mirna allekirjoitus osoittautui myös merkittävä ennustaja hengissä validointi asetettu. Potilaat, joilla on korkean riskin miRNA allekirjoitukset oli huono kokonaiselinaikaa (p = 0,005) ja ilman taudin etenemistä (p = 0,017) verrattuna alhaisen riskin tulokset. Nämä havainnot säilytti tilastollisen merkittävyyden säätämisen jälkeen iän, sukupuolen ja tupakointi (HR: 0,26, 95%: n luottamusväli 0,10-0,69, p = 0,007), joka ehdotti, että se voi olla itsenäinen ennustaja selviytymisen. Yhteenvetona, kehitimme ennustetyövälineenä miR-150 /miR-886-3p allekirjoitus ja validoitu ilmaisun itsenäinen aineisto on kokoisen SCLC. Nämä alustavat tulokset osoittivat, että miRNA voivat toimia lupaavana molekyyli- ennustetekijöitä markkereita ja uusia terapeuttisia kohteita SCLC.

Citation: Bi N, Cao J, Song Y, Shen J, Liu W, Tuuletin J, et al. (2014) MicroRNA Signature ennustaa Survival in Early Stage pienisoluinen keuhkosyöpä Käsitelty Surgery ja adjuvanttihoitoa. PLoS ONE 9 (3): e91388. doi: 10,1371 /journal.pone.0091388

Editor: Bernard Mari, IPMC, CNRS UMR 7275 UNS, Ranska

vastaanotettu: 26 marraskuu 2013; Hyväksytty: 10 helmikuu 2014; Julkaistu 17. maaliskuuta 2014

Copyright: © 2014 Bi et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tämä työ tukivat 973 National Key Fundamental Research Program of China (2009CB521801, 2010CB912800) ja National Natural Science Foundation of China (81021061, 81071830). Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

keuhkosyöpä on edelleen johtava kuolinsyy maailmassa, ja pienisoluinen keuhkosyöpä (SCLC) osuus 15-25% tapauksista [1]. Kliinisesti SCLC eroaa ei-pienisoluinen keuhkosyöpä (NSCLC) nopea kasvaimen kasvua ja iällä etäpesäkkeitä. Toisin kuin useimmissa länsimaissa, SCLC hinnat lisääntyvät edelleen Kiinassa, jossa tupakointi myös kasvaa. Vaikka SCLC pidetään erittäin reagoi kemoterapiaa ja sädehoitoa, uusiutuminen tapahtuu usein kahden vuoden kuluessa ja kokonaiselinaika (OS) yli viiden vuoden noin 3% -8%. Parantaa hoitotuloksia, uusia lääkkeitä on kehitetty, mutta se lannistaa että selviytymisen sekä paikallista ja kehittyneet SCLC juurikaan voi viimeisten 20 vuoden aikana.

SCLC uskotaan kuljettaa erilaisia ​​molekyyli poikkeavuuksia, jotka ovat aivan erilainen kuin NSCLC. Esimerkiksi, TP53 mutaatioita, Rb inaktivaatio, ja c-Myc-monistus ovat yleisiä SCLC verrattuna NSCLC [2], [3]. Sen sijaan, epidermaalisen kasvutekijän reseptori (EGFR) mutaatiot, K-ras-mutaatioiden ja P16 inaktivoitumisen esiintyy usein ei-pienisoluisessa keuhkosyövässä, mutta ei SCLC [2] – [4]. Kuitenkin taustalla mekanismeja, joilla SCLC nopeasti etenee vielä määrittelemättä, ja tunnistaminen nämä mekanismit voisivat edistää uusia terapeuttisia aineita ja hallinnan parantamiseksi tämän haastava tauti.

MikroRNA (miRNA) ovat luokka ei-koodaavaa RNA: iden, jotka ovat noin 22 nukleotidin pituisia ja ovat posttranskriptionaalisen sääntelyviranomaisten geenien ilmentymisen. Koska niiden olennainen merkitys kehityksen ja erilaistumisen, osallistuminen biologisten mekanismien taustalla kasvainten synnyssä ja etenemiseen sekä alhainen monimutkaisuus, vakautta, ja helppo havaitseminen, miRNA tarjoavat lupaavan luokkaa kudos- ja veripohjaisten biomarkkerit syöpään.

Useat tutkijat ovat osoittaneet, että poikkeava miRNA ilmentyminen liittyy läheisesti kehittymistä ja etenemistä monien syöpien, käyttäytyy tuumorisuppressorit tai onkogeenien [5] – [10]. Viimeaikaiset tiedot useista tutkimuksista tukevat voimakkaasti potentiaalia MikroRNA kuten biomarkkereita NSCLC [11] – [17]. Lisäksi muuttunut microRNA ilmentyminen liittyy myös syövän etenemiseen ja eloonjäämiseen NSCLC syöpäpotilailla. Globaali miRNA ekspressiokuviota arvioitiin käyttäen microarray perustuva analyysi on perustettu, ja useat NSCLC ”miRNA allekirjoitukset” on ehdotettu parempaa molekyylitason lavastus ja luokittelu NSCLC [18] – [21]. Kuitenkin kliininen merkitys miRNA vuonna SCLC ei ole vakiintunut.

roolin tutkimiseksi poikkeavasta miRNA ilmaisun profiileja SCLC, ensin tutkituista 924 tunnetaan miRNA in formaliinilla kiinnitetyt, parafiiniin upotetut (FFPE) yksilöt 42 potilasta ja tunnistettu dual-miRNA allekirjoituksen ennustaa kliininen tulos alkuvaiheessa SCLC hoidettujen potilaiden kirurginen resektio seurasi adjuvanttihoitoa. Tämä yhdistys edelleen validoitu kvantitatiivinen RT-PCR (qRT-PCR) analyysi 40 ylimääräistä potilasnäytteiden, ja ennusteen arvioinnissa allekirjoituksen näyttää olevan riippumaton iästä, sukupuolesta ja tupakointi monimuuttuja Coxin regressioanalyysiä.

Materiaalit ja menetelmät

Ethics lausunto

Tämä Potilasaineisto hyväksyi Institutional Review Board of Cancer sairaalan ja Institute of Chinese Academy of Medical Sciences ja Pekingin unionin Medical College. Kaikki potilastietojen tässä tutkimuksessa käytetyt tehtiin nimetön ja de-tunnistettava ennen analyysiä.

Potilaat ja näytteet

takautuvasti tutkittiin formaliinilla kiinnitetyt, parafiiniin upotetut (FFPE) yksilöt potilaalla diagnosoitiin kokoisen rajoitettu SCLC ja leikattiin sen jälkeen adjuvanttihoitoa (platina-pohjaiset hoidot kuten sisplatiini /etoposidi ja karboplatiini /etoposidin) klo Cancer sairaalan ja Institute of Chinese Academy of Medical Sciences (Peking, Kiina) tammi 2000 joulukuu 2005. Kaikilla potilailla oli ECOG-suorituskykyluokkaan 0-1, ja potilaille, joilla on sekoitettu pienisoluinen /suuri-cell carcinoma tai yhdistää pieniä cell carcinoma suljettiin pois. Yhteensä 82 SCLC potilaan näytteet analysoitiin, joista 42 näytettä käytettiin seulontaan asetettu tunnistamaan miRNA liittyy selviytymisen käyttäen miRNA microarray. Valitut miRNA sitten validoitu loput 40 potilasta käyttäen reaaliaikaista PCR. Hematoksyliinillä ja eosiinilla (H miR-150, TCTCCCAACCCTTGTACCAGTG; miR-150 RT-aluketta, GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACCACTGG; miR-150 eteenpäin pohjamaali, GTCTCCCAACCCTTGTACCA; miR-886-3p, CGCGGGTGCTTACTGACCCTT; miR-886-3p RT-aluketta, GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACAAGGGT; miR-886-3p eteenpäin pohjamaali, CACGCGGGTGCTTACTGAC; U6 eteenpäin pohjamaali, CTCGCTTCGGCAGCACA; ja U6 käänteisaluke-, AACGCTTCACGAATTTGCGT. qRT-PCR suoritettiin käyttäen ABI Prizm 7300 Sequence Detection System LightCycier DNA Master SYBR Green I mix (Roche Molecular Biochemicals, Mannheim, Saksa) valmistajan ohjeiden mukaisesti. Taso miRNA määritettiin käyttämällä 2

-ΔΔCt menetelmällä SDS 1,3 ohjelmisto, normalisoitu tasolle sisäisen valvonnan, U6, ja piirretään solujen välinen vertailu.

Endpoints

ensisijainen päätepiste oli tutkia OS. Toissijaiset päätetapahtumat olivat ilman taudin etenemistä (PFS), paikallinen alueiden ohjaus (LRC), ja kaukainen etäpesäke-elinaika (DMFS). OS laskettiin alkaen diagnoosia kuolema mistä tahansa syystä tai viimeinen tiedossa päivämäärä, että potilas oli elossa. PFS määriteltiin ajaksi alkaen diagnoosi päivämäärä epäonnistumisen joko rintakehän tai kaukaisia ​​sivustoja, kuolinpäivä mistä tahansa syystä, tai viimeisimmän potilaan seurantaan.

LRC laskettiin alkaen diagnoosi ensimmäinen paikallinen alueen (rintakehän) toistuminen, ja DMFS laskettiin alkaen diagnoosi ensimmäiseen kaukainen etäpesäke, kuolinpäivä mistä tahansa syystä, tai viimeisimmän potilaan seuranta up.

tilastollinen

kliininen ominaisuuksia eri ryhmien verrattiin käyttämällä riippumattomien opiskelijan t-testi, χ

2 testiä, tai Fisherin testiä. Korrelaatio microarray tietojen ja qRT-PCR Aineisto analysoitiin Spearmanin korrelaatiota. OS, PFS, LRC ja DMFS arvioitiin kanssa Kaplan-Meier menetelmä ja log-rank-testi. HRS laskettiin Coxin regressioanalyysiä. Monimuuttujafunktiokehitettiin Coxin regressiomallin käytettiin testaamaan jos miRNA allekirjoitus oli itsenäinen ennustetekijä korjattuna ikä, sukupuoli, ja tupakoinnista. Kaikki analyysit suoritettiin SPSS ohjelmistopakettia (versio 11.5, SPSS Inc., Chicago, IL). Kaksipuolinen p-arvo on vähemmän kuin 0,05 katsottiin olevan tilastollisesti merkitsevä.

Tulokset

kliininen ominaisuudet 82 SCLC potilailla on lueteltu taulukossa 1. Seuranta-ajan mediaani aika oli 57,2 kuukautta. Neljäkymmentäneljä potilaat ovat yhä elossa. Neljäkymmentäkaksi potilaalla oli uusiutuva sairaus, ja keskimääräinen aika diagnoosi uusiutumisen oli 12,3 kuukautta.

harjoitussetti tunnistimme kaksi miRNA, miR-150 ja miR-886-3p, jotka olivat yhteydessä huonoon OS Coxin suhteellista vaaraa regressiomallin. Molemmat olivat suojaavia (taulukko 2). Vertailtaessa NL ja SCLC kudosten varmisti myös, että miR-150 ja miR-886-3p ekspressiotasot SCLC kasvaimet olivat huomattavasti alhaisemmat kuin NL näytteissä (kuvio 1).

sitten johdettu kaava laskea riski pisteet jokaiselle potilaalle ilmentymistason kahden miRNA liittyy OS painotettuna Cox regressiokertoimia: Risk Score = (0,545 x ilmentymistaso miR-150) + (0,617 x ilmentymistason miR -886-3p). Potilaat harjoitussarjassa jaettiin korkean riskin tai alhaisen riskin ryhmissä käyttäen mediaani miRNA allekirjoituksen diabetesriskitestiin cutoff. Potilaat, joilla on suurempi riski tulokset odotetaan olevan huono OS. Verrattuna potilaisiin, joilla on alhaisen riskin miRNA allekirjoitusta, potilaita, joilla on suuri riski allekirjoitus oli huomattavasti lyhyempi mediaani (12,6 kuukautta, kun se ei ole saavuttanut, p = 0,02) (Fig. 2A). Samoin potilasta riskiryhmään oli lyhyempi PFS ja DMFS kertaa kuin matalan riskin ryhmään (Sekä p-arvot olivat 0,045) (Kuva. 2B-C). Kuitenkin LRCs olivat samanlaiset ryhmien välillä (p = 0,36) (Fig. 2D).

validoimiseksi microarray hybridisaatio ilmaisu tietojen ekspressiotasot kahden miRNA liittyy OS kvantitoitiin käyttäen qRT-PCR 10 SCLC kudoksissa satunnaisesti valittu koulutus asetettu. Merkittävää korrelaatiota ei havaittu log 2-transformoidut array signaali intensiteettiä ja qRT-PCR Ct-arvot sekä miR-150 (r = 0,94, p 0,001) ja miR-886-3p (r = 0,75, p = 0,01) (kuvio. 3).

(C) välinen korrelaatio ilmentymistä U6 RNA qRT-PCR ja log 2-uudistettua globaalia keskiarvoa array ilme. (D) Expression of U6-RNA ihmisen normaalia keuhkojen (NL, n = 3) ja pienisoluinen keuhkosyöpä (SCLC, n = 42) näytteiden microarray menetelmällä. Whiskers kuvaavat 10 ja 90 prosenttipisteet. p-arvo lasketaan U-testi.

Seuraavaksi käytimme saman riskin pisteet kaavalla saatu koulutus asetettu laskemaan miRNA allekirjoituksen riski sijoituksen 40 potilasta testaukseen asetettu, jota varten miRNA tasot FFPE näytteet määritettiin qRT-PCR. Jälleen suuren miRNA allekirjoitus riski pisteet potilaat osoittivat lyhyempi selviytymistä kuin matalan riskin ryhmään (mediaani OS 18,9 kuukautta verrattuna ei saavutettu, p = 0,005) (Kuva. 4A). PFS, DMFS ja LRC myös merkittävästi lyhyempi korkea kuin matalan riskin ryhmään (PFS p = 0,017, DMFS p = 0,019 ja LRC p = 0,031, Fig. 4B, 4C ja 4D). Monimuuttujakalibrointi Cox-regressioanalyysi suoritettiin edelleen arvioida, onko dual-miRNA allekirjoitus on itsenäinen ennustetekijä liittyy selviytymisen tässä testaus asetettu. Tuloksemme osoittivat, että miRNA allekirjoitus jäi riippumaton ennustetekijä OS (HR: 0,26, 95%: n luottamusväli 0,10-0,69, p = 0,007), PFS (HR: 0,36, 95%: n luottamusväli 0,15-0,86, p = 0,02) , DMFS (HR: 0,34, 95%: n luottamusväli 0,13-0,86, p = 0,02), ja LRC (HR: 0,26, 95%: n luottamusväli ,07-0,99, p = 0,05) korjausten jälkeen ikä, sukupuoli ja tupakointi tila (taulukko 3).

keskustelu

tässä tutkimuksessa aloitimme tietojenkeruuvaiheessa harjoitus tunnistamaan keskeiset miRNA kartoittamalla ilmaus 924 tunnetaan miRNA sisään FFPE yksilöt 42 SCLC tapauksissa. Havaitsimme, että dual-miRNA allekirjoitus, miR-150 ja miR-886-3p, liittyi käyttöjärjestelmän ja PFS. Nämä havainnot vahvistivat myöhemmin riippumattomalla kohortin 40 SCLC käyttävän potilaan qRT-PCR-menetelmällä, ja välistä yhdenmukaisuutta näillä alustoilla oli korkea.

Hakeminen optimaalinen normalisoinnin menetelmää on erityisen tärkeää miRNA profiloinnin minimoimiseksi teknistä muunnelmia ja saada mielekkäitä biologisia muutoksia. Kuitenkaan ei ole yksimielisyyttä normalisoinnin menetelmää ja suositusten läsnä joko microarray tai qRT-PCR-menetelmät suhteen miRNA profilointia. Tässä tutkimuksessa käytimme globaali normalisoinnin menetelmää koulutukseen joukko, joka pidetään sopii paremmin suuren mittakaavan miRNA-profilointi aineistoja [27]. Testauksessa asetettu, käytimme U6-RNA normalisoimiseksi tietoja, koska se on yleisimmin raportoitu viittaus geenin miRNA ilmentymisen tutkimukset keuhkosyövän kirjallisuudessa [21], [28] – [30]. Olemme myös korreloi lausekkeet kahden miRNA on qRT-PCR array ilmaisuja, ja vahvisti, että eri miRNA-profilointi menetelmiä ei vaikuttanut tuloksiin miR-150 ja miR-886-3p ilmauksia (3A-B). Lisäksi korrelaatio U6 ilmaisun qRT-PCR maailman keskilämpötila array ilmentymistä havaittiin (r = 0,71, p 0,001; Fig. 3C). U6-RNA osoitti absoluuttinen kertamuutoksia pienempi kuin 1,2-kertaa ja ei ollut merkittäviä eroja NL ja SCLC näytettä (p = 0,96, Fig. 3d).

Tällä hetkellä on vain kaksi julkaistuissa tutkimuksissa tutkitaan miRNA ilmaisun ihmisen SCLC näytteitä [31], [32]. Lee et ai. tutki ilmaus paneelin seitsemästä miRNA (miR-21, miR-29b, miR-34a /b /c, miR-155, ja anna-7a) 31 SCLC kasvaimissa [31]. He kertoivat, että ilmaus näiden seitsemän miRNA ei liittynyt kliinisiä ominaisuuksia SCLC potilaiden ja ei prognostisten kannalta OS tai PFS eikä ollut ekspressiotaso ennustavan hoitovasteen. Nämä tiedot olivat yhdenmukaiset havaintomme. Ranade ja työtovereiden arvioida ilmaus 880 validoitu ihmisen kypsän miRNA ylimääräisellä 473 validoitu ihmisen ennalta miRNA 34 formaliinilla kiinnitetyt, parafiiniin upotetut SCLC kasvain yksilöitä ja totesi, että miR-92a-2 * oli itsenäisesti liittyy selviytymisen. Vaikka tämä tutkimus osoitti ensimmäistä kertaa, että miRNA voi olla ennustetekijöiden varten SCLC, se sisältyy tapauksia sekä rajoitettu vaiheessa (12,1%) ja laaja vaihe (87,9%) syövän diagnoosin, ja potilaille, joilla on laaja-vaiheen sairaus on syöpiä, joita pidetään enemmän heterogeeninen. Lisäksi tässä tutkimuksessa, kasvaimen kudokset kerättiin paitsi primaarikasvaimista mutta myös imusolmukkeisiin ja etäispesäkkeitä, mikä sekoitti arvioinnin tuloksia, koska miRNA ilmentymistä pidetään kudosspesifistä. Lisäksi vain puolet tutkimuspotilaat saivat säteilyn ensivaiheen hoidolle. Tämä on tärkeää, koska säteily saattaa merkittävästi vaikuttaa säilymiseen sekä rajoitetun vaiheen [33] ja laaja-vaiheen SCLC [34]. Tähän mennessä meidän tutkimus on ensimmäinen osoittaa, että alkuvaiheessa SCLC hoidetuista potilaista kirurgian ja adjuvanttihoitoa, joka on miR-150 /miR-886-3p allekirjoitus ennustaa OS ja PFS sekä koulutusta ja testaus sarjaa. Tämä yhdistys oli iästä, sukupuolesta ja tupakoinnista. Nämä havainnot osoittavat, että miR-150 /miR-886-3p allekirjoitus voisi olla hyvä ehdokas kuin molekyyli- prognostinen markkeri ja saattaisi auttaa lääkäreitä tunnistamaan potilaiden suuri riski, jotka voivat hyötyä laajempia adjuvanttihoito.

Olemme myös havainneet, että molemmat miR-150 ja miR-886-3p oli negatiivisesti yhteydessä OS. Verrattaessa miRNA tasojen NL ja SCLC kudosten varmisti myös, että miR-150 ja miR-886-3p ekspressiotasot SCLC oli paljon alhaisempi kuin NL näytteissä. Johtuen pienestä NL otoskoko, emme pystyneet tunnistamaan mallia jatkuvasti pieniä p-arvot. Näitä tietoja johdonmukaisesti ehdottanut, että miR-150 ja miR-886-3p voisi toimia tärkeänä tuumorisuppressoreilla kehittämisessä ja etenemistä SCLC ja toimisi mahdollisten syövän vastaisen tavoitteita. Aikaisemmat kokeellinen tutkimus on esitetty uusi miR-886-3p välittyvä mekanismi taustalla poikkeava ilmentyminen in polo kaltainen kinaasi 1 (PLK1) ja transformoiva kasvutekijä beeta 1 (TGF-β1) in SCLC [23]. 3 tulkitsemattoman alueet PLK1 ja TGF-β1 sisältävät hyvin säilyneitä miR-886-3p sitovia motiiveja, ja suora vuorovaikutus miR-886 down-regulation endogeenisen PLK1 ja TGF-β1 proteiinin tasot. Osoitimme myös, että miR-886-3p yliekspressio inhiboi proliferaatiota, migraatiota ja invaasiota in SCLC soluissa sekä tukahduttaa kasvua ja etäpesäkkeiden SCLC nude-hiirissä. Lopuksi kävi ilmi, että mekanismi takana alassäädetty ilmentyminen miR-886-3p in SCLC välitti DNA hypermetylaatiota sen promoottorin. Kaiken kaikkiaan nämä havainnot perustaa miR-886-3p-PLK1 /TGF-b1 yhteys uutena säädin ja lupaava terapeuttinen kohde SCLC.

Havainto miR-150 tuumorisuppressorina in SCLC on yhdenmukainen samanlaisia ​​havaintoja haimasyövän [35], maksasyöpä [36], peräsuolen syöpä [37], NSCLC [38], pahanlaatuinen lymfooma [39] ja akuutti leukemia [40]. Kuitenkin sen osallistuminen SCLC ei ole raportoitu, ja tarkka molekyylitason mekanismeja sen muuttunutta ilmaisua ovat epäselviä. Jiang et al. äskettäin todennut, että miR-150 kypsyminen tukahduttaa MYC in MLL-liittyvä leukemia. Lisäksi, miR-150 on raportoitu olevan suojaava miRNA suoraan kohdistuu c-Myb ja muut tekijät [36], [40]. miR-150 vuorovaikuttaa 3’UTR c-Myb-mRNA, ja yli-ilmentyminen miR-150 alas-säätelee c-Myb-proteiinin tasot [36]. Mielenkiintoista, molemmat MYC perheenjäsenet ja c-Myb geeni ovat kaksi tunnettua ja hallitseva proto-onkogeenien, jotka ovat usein todettu monistaa tai yliekspressoitu SCLC [41]. Yhdessä nämä äskettäin julkaistujen tietojen kanssa meidän, viittaa siihen, että miR-150 on tuumorisuppressorina vaikutus SCLC koska alhainen miR-150 ilmentyminen korreloi huonoon säilymiseen. Kuitenkin lisätutkimuksia tarvitaan selvittämään molekyylitason mekanismeja sekä syy ja seuraus muuttunut miR-150 ilmentymisen kehittymistä ja etenemistä SCLC.

rajoitukset Tämän tutkimuksen kuuluvat sen suhteellisen pieni otoskoko, välttämättömyys koska vain pieni määrä potilaita (alle 5%) varhaisen perifeerinen tautiin [42] ovat kirurgisia ehdokkaita. Yli kahdeksansataa SCLC potilasta sai kemoterapiaa meidän sairaalassa samana ajanjaksona. Tämän seurauksena biomarkkereiden analyysejä SCLC potilaista raportoidaan huomattavasti harvemmin verrattuna NSCLC potilaat. Lisäksi, koska tämä seikka, multi-testi korjauksia ei ole sovellettu tässä tutkimuksessa, koska nämä korjaukset estävät tyypin I virheitä hinnalla nousu tyypin II virheitä. Kuitenkin korrelaatio miRNA allekirjoitus ja kliinisiin tuloksiin olivat itsenäisesti vahvistettiin toisessa potilaan asetettu. Laajamittaiset tutkimuksia tarvitaan vahvistamaan havaintomme. Toinen rajoitus on retrospektiivinen suunnitteluun. Kuitenkin kaikki mittaukset suoritettiin sokea tavalla. Lopuksi, mahdollinen vuorovaikutus miR-150 ja miR-886-3p olisi tutkittava valottaa taustalla olevaa mekanismia ennustetekijöiden rooli tämän dual-miRNA allekirjoitus.

Yhteenvetona alustavien tulosten ehdotti, että miR -150 /miR-886-3p allekirjoitus voi ennustaa syövän etenemistä ja eloonjäämistä alkuvaiheen SCLC potilaille ja voisi olla lupaava prognoosi- biomarkkereiden ja mahdollisia terapeuttisia kohteita SCLC potilaille.

Kiitokset

tutkimus hyväksyttiin suun esitettäviksi 15. maailmankonferenssissa Keuhkosyöpä, Sydney, Australia, 27.10.-31.10., 2013.