Krooninen sairaus

tiivistelmä

Beclin 1, keskeinen säätelijä autophagy, on havaittu olevan poikkeavasti ilmaistaan ​​erilaisissa ihmisen syöpäsairauksia. Tässä käytimme immunohistokemia (IHC) havaitsemiseksi proteiinin ilmentymistä Beclin 1 ei-pienisoluinen keuhkosyöpä (NSCLC) ja pariksi normaalin viereisen keuhkojen kudoksia, ja analysoidaan sen kliinispatologiset /prognostista merkitystä NSCLC. Vastaanotin toimii (ROC) käyrä analyysi käyttää määrittämään sulku piste ( 2 VS. ≤2) varten Beclin 1 ilmentämiseen koulutus asettaa (n = 105). Validointiin, ROC-johdettu kynnysarvon alistettiin analyysi yhdistyksen Beclin 1 potilas- kliinisiä piirteitä ja lopputulos on testaus joukko (n = 111) ja yleinen potilaan kohortin (n = 216). Tuloksemme osoittivat, että Beclin 1 oli merkitsevästi pienempi NSCLC kudoksissa verrattuna viereisen normaaleissa kudoksissa, negatiivisesti kanssaan kasvain uusiutui (65,8% vs 32,3%;

p

0,001). Testaukseen asettaa ja yleistä potilaan kohortin alhainen ilmentyminen Beclin 1 verrokkeja heikompi yleinen (OS) (

p

0,001) ja ilman taudin etenemistä (PFS) (

p

0,001) verrattuna korkea ilmentymisen Beclin 1. testaus asettaa ja yleistä potilaan kohortin keston mediaani OS potilaille, joilla on korkea ja matala ilmentymisen

Beclin 1

oli 108 VS. 24,5 kuukautta (

p

0,001) ja 108 VS. 28 kuukautta (

p

0,001), tässä järjestyksessä. Lisäksi alhainen ilmentyminen

Beclin 1

oli myös huono ennustetekijä jokaisessa jaksossa NSCLC potilaiden. Monimuuttujamenetelmin tunnistettu, että

Beclin 1

oli itsenäinen ennustetekijä varten NSCLC. Meidän havainnot tässä tutkimuksessa esitti näyttöä siitä Beclin 1 voi siis syntyä itsenäisenä ennustetekijöiden biomarkkereiden tässä kasvain kokonaisuuden tulevaisuudessa.

Citation: Zhou W, Yue C, Deng J, Hu R, Xu J, Feng L, et al. (2013) Autophagic Protein Beclin 1 toimii Independent Positiivinen Prognostiset biomarkkeri ei-pienisoluinen keuhkosyöpä. PLoS ONE 8 (11): e80338. doi: 10,1371 /journal.pone.0080338

Editor: Andreas-Claudius Hoffmann, Länsi-Saksan Cancer Center, Saksa

vastaanotettu: 02 kesäkuu 2013; Hyväksytty: 2. lokakuuta 2013. Julkaistu: 15 marraskuu 2013

Copyright: © 2013 Zhou et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Työ tukivat National Nature Science Foundation of China (Grant nro 81160305 ja Grant nro 81160306), National Science rahasto Distinguished Young Scholars (Grant nro 30888003), ja valtion Key Program National Natural Science of China (Grant No. 81130040). Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Keuhkosyöpä osuus 15% syövän diagnoosit, esittää yhtenä tärkeimmistä syistä syöpään liittyvän kuoleman maailmanlaajuisesti [1]. Ei-pienisoluinen keuhkosyöpä (NSCLC) edustaa 80-85% keuhkosyövässä [2]. Vaikka merkittäviä edistysaskeleita kirurgisten tekniikoiden ja sairaanhoidon, 5 vuoden pysyvyys, jos potilaalla on NSCLC jää vain 15% [2]. Vaikeudet varhaisen diagnoosin, korkea potentiaali etäpesäke ja esiintyminen hoidon vastus edenneen taudin vastaavat köyhiä eloonjäämisaste NSCLC. Vaikka paljon tiedetään aiheuttajia, kliiniset piirteet, ja patogeneesi NSCLC, molekyyli merkki, joka on tärkeä kliininen ennustetekijöiden ennustearvo pysyy olennaisesti rajoitettu. Useat tutkimukset ovat osoittaneet, että useita geneettiset muutokset ja epigeneettiset muutokset vastaavat kehittymistä ja etenemistä NSCLC [3]. Läsnäolo

KRAS

mutaatio edustaa yleisintä molekyylipainon muutos NSCLC ja sen on osoitettu liittyvän huonoon ennusteeseen [4]. Aktivoituminen PI3K /AKT reitin ja menetys PTEN NSCLC potilaat liittyy korkea laatu ja kehittyneempää tautien [5]. Lisäksi poikkeava DNA: n metylaatio toimi markkerina varhaiseen toteamiseen keuhkosyövän [6]. Promoottori metylaatio p16 on merkki huonosta ennusteesta NSCLC [7]. Siten tunnistaminen biologinen merkkiaineiden voisi auttaa arvioimaan ennustetta tarkemmin tai päättämään selvemmin käyttöä adjuvanttihoito.

Autophagy viittaa solun catabolic prosessi, joka tuottaa sytoplasmisen komponentteja lysosomeihin myöhempää hajoamista tai kierrättää pitkä -lived proteiineja ja soluelimiin säilyttämiseksi solunsisäisen homeostaasin solussa [8]. On olemassa kolme periaatteessa autophagic reittejä, mukaan lukien microautophagy, kaperonia välitteisen autophagy (CMA), ja macroautophagy [9]. Macroautophagy on tärkein alatyypin autophagy (jäljempänä autophagy) [9]. Beclin 1, kun ensimmäinen tunnistettu nisäkkään autophagy efektori, on välttämätöntä aloittamisen autophagy muodostamalla Beclin 1-vuorovaikutuksessa kompleksin, joka koostuu BCL-2: n perheen proteiinit, luokan III fosfatidyyli-3-kinaasin (VPS34), ja ATG14L [10]. On selvää, että Beclin 1 hallussaan novel Bcl-2-homologia-alueen-3 (BH3) domain [11-13]. Bcl-2-perheen proteiinit voivat sitoutua BH3-domeenin Beclin 1 ja estävät Beclin 1-välitteisen autophagy sitomalla Beclin 1 päässä hVps34 [11-13]. Modulaatio Beclin 1 tai BCL-2: n fosforylaation tai ubikinaation voidaan erottaa BCL-2: n perheen jäsentä Beclin 1 ja aktivoi VPS34 kinaasiaktiivisuutta, joka johtaa lisääntymiseen autophagy [14]. Siten apoptoosin ja autophagy voidaan käyttää samanaikaisesti säädellään samalla suuntiin.

Äskettäin autophagy vika raportoidaan kriittinen rooli kasvainten synnyssä ja syövän etenemistä [10,15-17]. Todellakin, Beclin 1 on raportoitu olevan mono-allelically vähentynyt tai poistettu ihmisen munasarja-, rinta-, ja eturauhasen syövät [10]. Becn1

+/- kasvaimia osoitti vähentynyt autophagy, kohonnut solujen stressiä ja genomin epävakautta lopulta nopeuttaa rintarauhasen kasvaimien syntyyn [18]. Knockdovvn

Beclin 1

hiirissä johtaa inhibitioon autophagy ja myöhemmin esiintyy paljon spontaaneja kasvaimia, kuten lymfooma, maksa- ja keuhkosyövän [19,20]. Lisäksi, vähentynyt ilmentyminen Beclin 1 on havaittu liittyvän ensisijaisen kasvaimen kasvua NSCLC [21]. Nämä tiedot osoittavat, että

Beclin 1

toimii haploinsufficient kasvaimeen soriproteiini kautta sääntelyn autophagy. Jopa niin, autophagy näyttää solua suojaavana prosessia ja ehdotettiin vaihtoehdoksi mekanismi lääkeresistenssimutaatioiden edistämällä kasvainsolun eloonjäämistä epäsuotuisissa olosuhteissa. Vuonna keuhkosyöpä, useat tutkimukset osoittavat, että autophagy esto edustaa lupaava lähestymistapa parantaa hoidon tehokkuutta potilailla, joilla on edennyt ei-pienisoluinen keuhkosyöpä [22,23].

Tässä olemme analysoineet ilmentymistä autophagic proteiinin

Beclin 1

216 NSCLC näytteet ja analysoitiin sen korrelaatio kliinis tekijät NSCLC potilaiden. Tuloksemme osoittivat, että

Beclin 1

, havaittuna immunohistokemiallisesti, oli merkitsevästi pienempi NSCLC kudoksissa verrattuna viereisen normaaleista kudoksista, ja negatiivisesti yhteydessä kasvaimen uusiutumisen nopeudella. Alhainen ilmentyminen Beclin 1 ennusti huonompi OS ja PFS in NSCLC. Lisäksi monimuuttuja-analyysi paljasti, että

Beclin 1

oli itsenäinen ennustetekijä varten NSCLC.

Materiaalit ja menetelmät

Potilaiden ja kudosnäytteiden

Yhteensä 244 ensisijainen NSCLC yksilöitä arkistoista patologian osaston syövän keskustassa Sun Yat-sen University (Guangzhou, Kiina) sisällytettiin tutkimukseen. Kaikki potilaat hyväksytty parantava leikkaus vuodesta 2001 vuoteen 2003. Olemme edelleen seuloa potilaita käyttäen tiukat kelpoisuusvaatimukset protokollaa seuraavasti: mikroskoopilla vahvisti NSCLC (mukaan lukien okasolusyöpä, adenokarsinooma ja adenosquamous karsinooma); ilman kaukainen metastaattisen sairaudet; ole aiempaa kemoterapiaa tai sädehoitoa historia; ottaa yli 5 vuoden seurantajakson lopussa; mukaan lukien tupakoimattomien (päivittäin savukkeiden kulutusta × vuotta tupakoinnin = 0) ja tupakoitsijat (entiset tupakoitsijat ja /tai tupakoijilla) [24]. Lopulta 28 potilasta menetys seurantaa ei sisällytetty tässä tutkimuksessa, mikä 216 NSCLC potilaat altistetaan edelleen kliinisen ja eloonjääminen analyysi. Niistä kaikista potilaista (n = 216), 116 (116/216, 53,7%) sensuroitiin kuolema aikana 5-vuotiaat seuranta-ajan (4 tapausta kuoli leikkauksen jälkeisiä komplikaatioita ja 112 tapauksessa kuoli syövän etenemiseen).

Näistä 216 pienisoluista keuhkosyöpää (mediaani-ikä, 47,0 vuotta, alue, 22-74 vuotta), joilla on positiivinen imusolmuke etäpesäke (n = 100) hoidettiin neljä-kuusi sykliä sisplatiinin + Navelbinen adjuvantti chemotherapies jälkeen kirurgisen resektio, kun taas potilailla, joilla on negatiivinen imusolmuke etäpesäke (n = 116) ei saanut adjuvanttia chemotherapies. Lisäksi ei ole adjuvanttia sädehoito annettiin tahansa potilailla leikkauksen jälkeen. Kohortti 216 NSCLC potilaat olivat satunnaisesti jaettu opetusjoukolla (n = 105) ja testaus sarja (n = 111) tai tietotekniikkaa (SPSS 17.0 ohjelmisto). Lyhyesti, koulutukseen asettaa, on 78 urosta ja 27 naarasta, jossa 38 tapausta portaalle I, 31 tapauksessa vaiheessa II ja 36 tapausta varten vaiheen III. Samaan aikaan on 81 urosta ja 30 naarasta testauksen setti, jossa 41 tapausta portaalle I, 28 tapauksessa vaiheessa II ja 42 tapausta varten vaiheen III. Histologinen ja vaihe tyyppi määritettiin luokituksen mukaan NSCLC WHO ja Kansainvälinen Union syöpää kasvain-Node-Metastasis (TNM) pysähdyspaikan järjestelmä [25]. Kirjallinen suostumus käytöstä kudosten saatiin kaikista potilaista ennen leikkausta, ja hyväksyi tutkimuksen instituutin Research Ethics komitean Sun Yat-Senin yliopistossa.

Tissue mikrosirujen rakentamiseen ja immunohistokemia värjäys

Kaksi edustaja ydin kudosbiopsioista (0,6 mm halkaisijaltaan) on lävistetty edustettuina NSCLC kudoksista ja yksi sylinteri, jolla on sama halkaisija viereisistä normaalin keuhkojen kudoksiin. Moniosaista (5 pm paksu) leikattiin TMA lohkot ja asennettu objektilaseille. Yksi jakso alkaen TMA lohko värjättiin hematoksyliinillä ja eosiinilla (H Santa Cruz, SC-11427) kosteassa kammiossa. Sitten laseja inkuboitiin vastaaviin sekundaarisia vasta-aineita (HRP-anti-kani, Thermo Scientific, Cat. No. 31460) huoneenlämpötilassa 30 min. Reaktiotuotteet visualisoitiin värjäämällä 3, 3-diaminobentsidiiniä (3, 3-diaminobentsidiiniä, Dako, Cat. No. K5007). Sen jälkeen kun vasta- värjättiin hematoksyliinillä, kaikki diat olivat kuivattu ja varastoidaan. Negatiiviset kontrollit saatiin korvaamalla

Beclin 1

vasta-aineen kanssa, joka vastaa ei-immuuni seerumi-immunoglobuliini. Jo aiemmin hyvin määritelty immunostaining- positiivisen mahasyövän dioja, käytettiin positiivisena kontrollina. [27]

Värjäys arviointi

värjäytymisen voimakkuus ja laajuus

Beclin 1

luokiteltiin kuten aiemmin on kuvattu [27]. Lyhyesti, värjäytymisintensiteettiä luokiteltiin negatiiviseksi (pisteet 0), joka rajoittuu (pisteet 1), heikko (pisteet 2), kohtalainen (pisteet 3) ja vahva (pisteet 4). Lisäksi värjäytyminen määrin myös luokiteltu viiteen tasoon mukaan prosenttiosuus solujen kohonnut Beclin 1 värjäystä, myös negatiiviset (pisteet 0), 0-25% (pisteet 1), 26-50% (pisteet 2), 51 -75% (pisteet 3) ja 76-100% (pisteet 4).

Beclin 1

värjäytyminen arvioitiin kaksi patologit jotka eivät tienneet mitään kliinisiä liittyviä yksityiskohtia potilaille. Arvioinnin yhteneviä vuonna 85% tapauksista, mikä viittaa erittäin toistettava pisteytysjärjestelmä. Vuonna poikkeavia tapauksissa uusi arviointi tehtiin. Arvo valittiin kunnes molemmat patologian kanssa sovitun tuloksen.

Valinta sulku pisteen

Beclin 1

ilmaisu

receiver operating (ROC) käyrä analyysiä käytetään yleensä kliinisissä onkologian arvioida ja vertailla herkkyys ja diagnostisten testien [28,29], tai tunnistaa kynnysarvo, jonka yläpuolella testitulos olisi pidettävä positiivisena joidenkin lopputulokseen [28]. ROC-käyrä analyysi on osoitettu olevan toistettavissa arvioida IHC proteiinin ilmentymisen ja valita biologisesti tai kliinisesti merkityksellinen cut-off pisteet kasvaimen positiivisuus [27,28,30]. Tässä käytimme ROC käyräanalyysi valita cutoff pisteen

Beclin 1

OS ja PFS koulutukseen joukko (n = 105). Lyhyesti, pisteet lokalisoitu lähinnä pisteeseen sekä maksimi herkkyys ja spesifisyys (0,0, 1,0) valittiin cutoff pisteet

Beclin 1

, mikä eniten kasvaimia, jotka olivat oikein luokiteltiin tai joilla ei ole lopputulos. ROC-käyrä analyysi helpotti dichotomizing ominaisuudet potilaiden tulosten muuttaminen eloonjäämisen (kuolema VS. muut (censored, elossa tai muista syistä johtuvat kuolemat)) ja eteneminen (paikallinen vika tai kaukana etäpesäke).

Seuranta

Kaikilla potilailla oli seuranta kirjaa yli 5 vuotta. Valmistumisen jälkeen hoidon, potilaita seurattiin 3 kuukauden välein ensimmäisen 3 vuotta ja 6 kuukauden välein sen jälkeen. Uusin seuranta-päivitettiin syyskuussa 2011. OS määriteltiin aika kasvaimen resektiota on kuolinpäivästä tai sensuroitu viimeistään ajankohtana, jos potilasta oli elossa; PFS määriteltiin aika kasvaimen resektiota päivämäärään taudin uusiutumisen /etenemisen tai kuolinpäivästä tai sensuroitu viimeistään päivämäärä.

Tilastollinen

ROC-analyysiä käytettiin saamaan optimaalisen cutoff pisteen

Beclin 1

ilmaus selviytymisen analyysin harjoitussarjassa (n = 105). Validointiin, suhde

Beclin 1

ilmaisun ja OS, PFS arvioitiin testausta joukko (n = 111) ja yleinen potilaan kohortin (n = 216). Suhde

Beclin 1

ilmaisun ja kliinis muuttujia analysoitiin chi-neliö testi tai Fisherin testiä. Kaplan-Meier-analyysi käytettiin arvioimaan suhdetta

Beclin 1

ilmaisun ja käyttöjärjestelmän ja PFS. Erot selviytyminen todennäköisyyksien välillä potilaiden alaryhmissä arvioitiin log-rank testejä. Monimuuttujakalibrointi Coxin suhteellisten riskien mallia käytettiin arvioimaan riskisuhteita ja 95%: n luottamusväli potilaiden hoitotuloksiin. Kaikki

p

arvot olivat kaksipuolisia ja

p

0,05 pidettiin tilastollisesti merkittävänä. Tilastollinen analyysi suoritettiin SPSS-v. 17,0 (SPSS, Inc., Chicago, IL).

Tulokset

Beclin 1

ilmentäminen NSCLC ja viereisistä normaaleista kudoksista

Immunohistokemiaa käytettiin tutkimaan proteiinin ilmentymistä

Beclin 1

perusterveydenhuollossa NSCLC yksilöiden ja normaalin viereisen kudoksiin. Immunoreaktiivisuus

Beclin 1

havaittiin pääasiassa sytoplasmassa (kuvio 1 ja kuvio S1). Perustuen yhdistelmä värjäytymisen voimakkuus ja laajuus, näytteet luokiteltiin neljään ryhmään, ryhmästä 1 lähes negatiivinen värjäytyminen (+), ryhmä 2 jossa heikkoa värjäytymistä (++), ryhmä 3 joilla on kohtalainen värjäytyminen (++ +), ryhmän 4 vahvan värjäytymistä (++++; kuvio 1A-C). Kuten kuviossa 1, korkea ilmentyminen

Beclin 1

esiintyy pääasiassa normaaleissa keuhkojen kudoksissa, ilmentää useita näytteitä ryhmässä 3 (74 216, 34,3%, kuvio 1 D) ja ryhmä 4 (93 216, 43,1%, kuvio 1 D), kun taas keuhkojen kasvain kudoksia, riippumatta kasvaimen alatyyppejä, osoitti kohtalaista

Beclin 1

värjäytymistä (kuvio 1A, B, D) B

(AC), NSCLC kudosmatriisien sisältävä normaali keuhkojen ja kasvainten kudokset värjättiin

Beclin 1

ilme. Stained normaali ja kasvainten kudokset luokiteltiin neljään ryhmään (+ ja ++++) mukaan värjäytymisintensiteettiä ja laajentaminen Kunkin kudoksen. (D), prosenttiosuus normaali tai tuumorikudoksissa kussakin värjäystä ryhmässä. Kudosnäytteet eri värjäytymisen intensiteetti ja laajennus ryhmiteltiin ja taulukoitu.

Lisätietoja selviytyminen analyysiä ja välttää ongelmat useiden cutpoint valinta, ROC-käyrä analyysi suoritettiin määrittämään kohtuullinen cutoff pisteen

Beclin 1

koulutukseen joukko (n = 105).

Beclin 1

sulku pisteen OS ja PFS koulutukseen setti oli 2,7 (

p

0,001, kuva 2A) ja 2,9 (

p

= 0,001, Kuva 2B), vastaavasti. Pistemäärä 2 ( 2 VS. ≤2) ja

Beclin 1

ilmentymisen valittiin yhtenäinen cutoff pisteen erottaa NSCLC potilaiden korkea tai matala ilmentymisen

Beclin 1

.

(A) ja (B) osoitti

Beclin 1

sulku pistettä kokonaiselossaoloaika ja ilman taudin etenemistä koulutuksessa asetettu. Jokaisessa immunohistokemiallista pisteet, herkkyys ja spesifisyys tuloksista tutkitaan piirrettiin muodostaen täten ROC käyrä. Cutoff pisteen

Beclin 1

yleisen eloonjäämisen ja ilman taudin etenemistä oli 2,7 ja 2,9 vastaavasti.

Beclin 1

ilmaisun ja kliiniset piirteet

kliiniset piirteet potilaiden, kuten ikä, sukupuoli, tupakointi historia, CEA tasolla, alustava kliininen vaihe, histologia, erilaistuminen, kasvain vaiheessa imusolmuke etäpesäke, toistuminen, ja

Beclin 1

ilme, tehtiin yhteenveto taulukossa 1.

Beclin 1

sulku pisteet 2 johdettu koulutuksen asetettu onnistuneesti erillisiä testaus asettaa kahteen alaryhmään. Lyhyesti, potilaalla on sulku pisteet 2 pidetään Beclin 1 korkea ilmentymisen (50/111, 45,0%) ja ne, joilla on pisteet ≤2 nähdään Beclin 1 heikkoa ilmentymistä (61/111, 55,0%). Alhainen ilmentyminen

Beclin 1

pääasiassa havaittu potilailla, joilla positiivinen toistuminen (78/117, 65,8% potilailla, joilla oli positiivinen toistuminen VS. 32/99, 32,3% potilailla, joilla on negatiivinen toistuminen,

p

0,001). Lisäksi korrelaatio analyysi osoitti, että

Beclin 1

ilmentyminen korreloi negatiivisesti kasvaimen uusiutumisen nopeus kummassakin (

p

0,001 koulutuksessa set ja

p

= 0,001 testauksessa asettaa, taulukko 1). Lisäksi

Beclin 1

ilmaisu myös korreloi negatiivisesti alkuperäisen kasvaimen vaiheessa (

p

0,001, taulukko 1). Alhainen ilmentyminen

Beclin 1

liittyi metastaattinen levisi imusolmukkeisiin (

p

= 0,001, taulukko 1) koulutukseen asetettu, ja korreloi erilaistumista (

p

= 0,020, taulukko 1) ja CEA tasolla (

p

= 0,002, taulukko 1) testauksessa asetettu. Voisimme ole mitään korrelaatiota Beclin 1 ilmaisun ja muut potilasryhmät kuten ikä, sukupuoli, tupakointi historia jne

Variable

Kaikki tapaukset

Training Set (n = 105) B Testing Set (n = 111)

korkea

Low

P

korkea

Low

P

Ikä (vuotta ) ≥ +60,010526212533 ​​ 60.011130280.71325280.667GenderMale15943353447Female5713140.53116140.285Smoking historyYes12835272739No8821220.44223220.289CEA (ng /ml) 5.09722241536≤ 5.011934250.31835250.002Initial kliininen stagei7927112318II5920110.00012160.169III789271527HistologySquamous solu carcinoma451491012Adenocarcinoma16542400.41238450.839Adenosquamous carcinoma60024DifferentiationWell441271015Moderately7223150.19222120.020Poorly10021271834Tumor stageT

1 + T

216044314243T

3 + T

45612180.0838180.095Lymph solmu metastasisNegative11640192928Positive10016300.00121330.205RecurrencePositive11717332245Negative9939160.00028160.001Table 1. Association of

Beclin 1

ilmaisutapoja potilaan ennusteeseen viittaavia ominaisuuksia NSCLC.

CSV Lataa CSV

Beclin 1

ilmaisun ja eloonjääminen analyysi: univariate selviytyminen analyysi

Kuten kuviossa 3, Kaplan-Meier-analyysi osoitti, että alhainen ilmentyminen

Beclin 1

voimakkaasti ennusti huonompi OS ja PFS testaukseen set (

p

0,001 sekä käyttöjärjestelmän ja PFS, kuvio 3A ja 3B) ja yleinen potilaan kohortin (

p

0,001 sekä käyttöjärjestelmän ja PFS, kuvio 3C ja 3D). Testaukseen asettaa ja yleistä potilaan kohortin mediaani kokonaiselinaika potilaille, joilla on korkea ja matala ilmentymisen

Beclin 1

oli 108 VS. 24,5 kuukautta (

p

0,001) ja 108 VS.28 kuukautta (

p

0,001), tässä järjestyksessä. Tarkempi analyysi suoritettiin välillä

Beclin 1

ilmaisun ja osajoukkoja NSCLC potilaiden kussakin kliinisessä vaiheessa. Alhainen ilmentyminen

Beclin 1

toimi myös huono ennustetekijä jokaisessa vaiheessa NSCLC potilaiden testaukseen set: vaihe I (

p

= 0,002 OS ja

p

= 0,030 PFS, kuvio 4A ja 4B), vaihe II (

p

= 0,018 OS ja

p

= 0,049 PFS, kuvio 4C ja 4D), ja vaiheen III (

p

0,001 OS ja

p

= 0,003 PFS, kuvio 4E ja 4F). Sillä yleistä potilaan kohortin tulokset olivat samankaltaisia ​​kuin testauksessa setti (Kuva 4G-L).

(A) Matala ilmentymä

Beclin 1

läheisesti korreloi yleensä ottaen heikkoa selviytyminen ja (B) ilman taudin etenemistä testauksessa joukko (n = 111). (C) Potilaat, joilla on alhaisempi

Beclin 1

ilmaisu hankki myös huonompi kokonaiselinaikaa ja (D) ilman taudin etenemistä on yleinen potilaan kohortin (n = 216). Testaukseen asettaa ja yleistä potilaan kohortin mediaani kokonaiselinaika potilaille, joilla on korkea ja matala ilmentymisen

Beclin 1

oli 108 VS. 24,5 kuukautta (

p

0,001) ja 108 VS.28 kuukautta (

p

0,001), tässä järjestyksessä.

(A) todennäköisyys yleistä selviytyminen ja (B) ilman taudin etenemistä NSCLC potilaiden vaiheen i testauksessa set: alhainen lauseke, n = 18; korkea ilme, n = 23 (C) todennäköisyys kokonaiselinaika ja (D) ilman taudin etenemistä NSCLC potilaiden vaiheen II testauksessa set: alhainen lauseke, n = 16; korkea ilme, n = 12 (E) todennäköisyys kokonaiselinaika ja (F) ilman taudin etenemistä NSCLC potilaiden vaiheen III testaus sarja: alhainen lauseke, n = 27; korkea ilme, n = 15 (G) todennäköisyys kokonaiselinaika ja (H) ilman taudin etenemistä NSCLC potilaiden vaiheen Ⅰin yleistä potilaan kohortti: alhainen lauseke, n = 29; korkea ilme, n = 50. (I) Todennäköisyys kokonaiselinaika ja (J) ilman taudin etenemistä NSCLC potilaiden vaiheen II on yleinen potilaan kohortti: alhainen lauseke, n = 27; korkea ilme, n = 32 (K) todennäköisyys kokonaiselinaika ja (L) ilman taudin etenemistä NSCLC potilaiden vaiheen III on yleinen potilaan kohortti: alhainen lauseke, n = 54; korkea ilmentyminen, n = 24.

monimuuttuja Coxin regressioanalyysiä

tarkoituksena on välttää vaikutuksen aiheuttama univariate analyysin ilmaus

Beclin 1

kuin sekä muita parametrejä tutkittiin Coxin monimuuttuja-analyysin testaus asettaa ja yleistä potilaan kohortin (taulukko 2 ja taulukko 3). Kuten taulukosta 2,

Beclin 1

oli itsenäinen biomarkkerina ennustaa ennuste OS (riskisuhde 4,235; 95% CI, 2,382-7,528;

p

0,001, taulukko 2) ja PFS (riskisuhde 3,420; 95% CI, 1,936-6,042;

p

0,001, taulukko 2) testauksessa asetettu. Samanlaisia ​​havainto todettiin myös yleistä potilaan kohortin (OS, riskisuhde 3,721; 95% CI, 2,453-5,645;

p

0,001, taulukko 3, PFS, riskisuhde 2,987; 95 % CI, 2,004-4,453;

p

0,001, taulukko 3). Lisäksi CEA tasolla, imusolmuke etäpesäke, tupakointi historia, ja ikä myös tunnistettu itsenäisiksi ennustetekijöitä parametrit OS ja /tai PFS testaukseen asettaa ja /tai yleistä potilaan kohortin (taulukko 2, taulukko 3). Kuitenkin alustava kliininen vaihe, kuten hyvin tunnettu riippumaton ennustetekijä, ei havaittu itsenäisinä ennustetekijä tuloksemme.

Variable

Kuolema

For ilman taudin etenemistä

Hazard suhde

95%: n luottamusväli

P

riskisuhde

95%: n luottamusväli

P

Ikä (vuosia) ≥ 60,00 ( VS. 60,0) 1.266 (+0,734-+2,185) 0.3961.053 (0,613-1,808) 0.852Gender Mies (VS. nainen) 3,289 (1,336 to8.096) 0.0103.449 (1,535-7,747) 0.003Smoking Kyllä (VS. o) 4,643 (1,958-11,009) 0.0002.443 (1,158-5,152) 0.019CEA (ng /ml) 5 (VS. ≤ 5) 2,556 (1,516-4,309) 0.0002.133 (1,271-3,581) 0.004Initial kliininen stageI0.998 (+0,277-+3,603) 0.9981.063 (0,267-4,231) 0.931II0.785 (0,340-1,813) 0,5710 0,928 (0,387-2,228) 0.868III1111HistologySquamous cell carcinoma1.558 (0,443-5,478) 0.4901.195 (0,405-3,523) 0.747Adenocarcinoma1.474 (0,378-5,742) 0.5760.640 (0,179-2,293) 0.493Adenosquamous carcinoma1111DifferentiationWell0.886 (0,414 ja 1,897) 0.7560.538 (0,258-1,121) 0.098Moderately1.159 (0,578-2,324) 0.6770.641 (,315-1,303) 0.219Poorly1111Tumor vaiheessa T

4 + T

3 (VS. T

2 + T

1) 1,091 (0,583-2,042) 0.7851.359 (0,715-2,585) 0.350Lymph etäpesäke Positiivinen (VS. Negative) 2,448 (1,428-4,199) 0.0011.854 (1,098-3,130) 0,021

Beclin 1

Low (VS. korkea) 4,235 (2,382-7,528) 0.0003.420 (1,936-6,042) 0.000Table 2. tulokset monimuuttujaisesta Coxin suhteellisen vaarat analyysi testaus joukko (n = 111).

CSV Lataa CSV Variable

kuolema

For ilman taudin etenemistä

riskisuhde

95%: n luottamusväli

P

riskisuhde

95 % luottamusväli

P

Ikä (vuosia) ≥ 60,00 (VS. 60,0) 1,375 (0,951-1,988) 0.0911.039 (0,708-1,524) 0.846Gender Mies (VS. nainen) 1,422 (0,794-2,546) 0.2361.285 (0,744-2,219) 0.369Smoking Kyllä (VS. Ei) 1,493 (1,021 ja 2,184) 0.0391.105 (0,637-1,917) 0.723CEA (ng /ml) 5 (VS. ≤ 5) 2,186 (1,484-3,220) 0.0002.043 (1,395-2,992) 0.000Initial kliininen stageI0.758 (0,286-2,012) 0.5780.969 (0,354-2,652) 0.951II0.853 (0,467-1,558) 0,6050 0,928 (0,494-1,742) 0.816III1111HistologySquamous cell carcinoma1.239 (+0,379-+4,047) 0.7230.987 (0,354-2,746) 0.979Adenocarcinoma1.070 (0,305-3,763) 0.9160.632 (0,199-1,950) 0.417Adenosquamous carcinoma1111DifferentiationWell0.765 (0,434 ja 1.347) 0.3530.640 (0,369-1,110) 0.112Moderately0.959 (+0,619-1,485) 0.8500.931 (0,606-1,430) 0.745Poorly1111Tumor vaiheessa T

4 + T

3 (VS. T

2 + T

1) 1.122 (0,701-1,794) 0.6311.195 (0,678-1,814) 0.477Lymph etäpesäke Positiivinen (VS. Negative) 2,576 (1,725-3,847) 0.0001.862 (1,262-2,746) 0,002

Beclin 1

Low (VS. korkea) 3,721 (2,453-5,645) 0.0002.987 (2,004-4,453) 0.000Table 3. tulokset monimuuttujaisesta Coxin suhteellisen vaarat analyysi yleisessä potilaan kohortin (n = 216).

CSV Lataa CSV

keskustelu

Autophagy, joka on erittäin hyvin säilynyt hiivasta ihmisen, on olennainen kataboliareitti hajoamista solun komponenttien lysosomiin [8]. Eroaa Ubiquitin-Proteasome System (UPS), joka suoraan heikentää erilaisten sääntelyyn proteiinien sytoplasmassa tai tumassa, autophagy kohdistuu monenlaisia ​​alustoilla proteiinin aggregaatteja, pitkäikäinen proteiineja, tai vahingoittunut soluelimiin kohti lysosomeihin myöhempää hajoamista. Autophagy käsittää sarjassa normaali ja patologisia prosesseja. Äskettäin autophagy nousi keskeiseksi säätelijänä useita ominaisuuksia syövän biologian, mukaan lukien taudin alkamisen ja etenemisen syövän, sekä vaikutus tehokkuuteen hoitointerventioiden tämän taudin [31,32]. Autophagy voi näyttää antikarsinogeenisia funktio alkusolut turvaamalla vastaan ​​metabolisen stressin kautta homeostaattiseen liikevaihdon mitokondrioiden ja poistamiseen proteiinin aggregaatteja.

Beclin 1

, keskeisenä säätelijänä autophagy, saa paljon huomiota viime vuosina, koska sen osallistuminen syövän synnyn ja syövän etenemistä. Kliiniset tutkimukset ovat liittäneet huono ennuste ja aggressiivinen kasvain fenotyyppejä poikkeava ilmentymä

Beclin 1

kasvainkudoksissa [27,33-36]. Lisäksi Beclin 1 riippuva autophagic toiminto on osoitettu vaimentaa ihmisen syövässä aktivoimalla AKT [37].

Äskettäin vähentynyt ilmentyminen

Beclin 1

ja

LC3

havaittiin ihmisen keuhkosyöpä kudoksiin, mikä viittaa mahdolliseen rooliin patogeneesissä keuhkosyöpä. Kuitenkaan mikään edellä mainituista tutkimuksista käsiteltiin ennustetekijöiden roolia Beclin 1 keuhkosyövän toistaiseksi [38]. Lisäksi toinen tutkimus osoitti, että

Beclin 1

ilmentyminen oli käänteisesti yhteydessä kasvaimen koon ja primaarikasvaimen vaihe (PT) keuhkojen okasolusyöpä ja adenokarsinooma, mutta ei osoita suhdetta eloonjäämiseen [39]. Täällä, jotta vältetään ongelmat useiden cutpoint valinta ja saada puolueeton

Beclin 1

sulku piste kliinisiin epäsuorasti käytimme ROC käyräanalyysi vaihtoehtoisena menetelmänä valinnassa ja validointi cut-off pisteet määrittämiseksi useimmat kliinisesti merkityksellistä raja immunohistokemiallista kasvain positiivisuutta. Analysoimme kliinis /ennustetekijöiden merkitys

Beclin 1

on kokonaismäärä 216 NSCLC potilaiden, joka koostuu kohortin I (n = 105) opetusjoukolla ja kohortti II (n = 111) testattavaksi asetettu. ROC-johdettu kynnysarvon alistettiin analyysi yhdistyksen

Beclin 1

potilas- kliinisiä piirteitä ja lopputulos on testaus joukko (n = 111) ja yleinen potilaan kohortin (n = 216).

Näin ollen

Beclin 1

ilme, pääasiassa havaittiin olevan alhainen potilailla, joilla sairaus on uusiutunut (taulukko 1), mikä osoittaa, että

Beclin 1

saattaa olla mukana NSCLC etenemistä . Lisäksi Kaplan-Meier selviytymisen analyysi osoitti, että alhainen ilmentyminen

Beclin 1

ennustettu merkittävä käyttöjärjestelmä ja PFS haitta yli korkea ilmentyminen

Beclin 1

alaryhmä testaukseen asettaa ja yleistä potilaan kohortin ( kuvio 3). Lisäksi alhainen Beclin 1 ilme pysyi huono ennustetekijä jokaisessa vaiheessa NSCLC potilaiden (kuva 4), kehittyvien itsenäisenä ennustetekijä varten NSCLC (taulukko 2, taulukko 3). Kuitenkin alustava kliinisessä vaiheessa ei havaittu itsenäisinä ennustetekijä tuloksemme. Oli miten oli, on olemassa suuntaus parempaan eloonjäämiseen alemmassa kliinisissä vaiheissa, joiden osuus pieniä tapauksia ja eivät ole tilastollisesti merkitseviä.

Koska ennustetekijöiden vaikutus

Beclin 1

proteiinin eri ihmisen syöpiä, raportit ovat tehneet monimutkaisia ​​johtopäätöksiä. Aiemmin useat tutkimukset ovat dokumentoitu, että

Beclin 1

ilmentyminen säätyy alas rintasyövän, maksasyövän, kohdunkaulan ja munasarjasyöpä, liittämällä huonompi ennuste [33,34,36].