Krooninen sairaus

tiivistelmä

Tämän tutkimuksen tavoitteena on selvittää, onko potilaalla on paraneoplastic pikkuaivojen degeneraatio (PCD) ja pienisoluinen keuhkosyöpä (SCLC) on erityinen ohjelmisto vasta, jos SOX1 vasta-aineita (SOX1-ab) voi ennustaa läsnäoloa SCLC, ja jos vasta-solun pinnan antigeenejä esiintyy tämä oireyhtymä. Vasta-aine-analyysi tehtiin käyttämällä immunohistokemia rotan aivojen, immunoblottauksella rekombinanttiantigeeneihin, seulonta cDNA ilmaisun kirjastojen, ja immunoleimaus elävien hermosolujen 39 potilailla, joilla on PCD ja SCLC. VGCC-ab mitattiin RIA, ja SOX1-ab, Hu-ab, ja ZIC4-ab immunoblottauksella. Lambert-Eaton myastenic oireyhtymä (LEMS) oli läsnä 10 23 sairastavilla potilailla Elektrofysiologiset tutkimukset. Ainakin yksi vasta-aineen havaittiin 72%: lla potilaista. Yksittäiset taajuudet olivat: 49% SOX1-ab, 44% VGCC-ab, 31% Hu-ab, ja 13% ZIC4-ab. SOX1-ab esiintyi 76%: lla potilaista, joilla VGCC-ab ja 27% niistä ilman VGCC-ab (p = 0,0036). SOX1-ab ei havaittu 39 potilaalla, joilla satunnaista viiveellä ilmaantuvia pikkuaivojen ataksia, 23 kanssa pikkuaivojen ataksia ja glutamiinihappodekarboksylaasi vasta-aineita ja 73 kanssa PCD ja syöpätyyppeihin muu kuin SCLC (31 ilman onconeural vasta, 25 Yo-ab, 17 jossa Tr-ab). Viidellä potilaalla (13%) oli vasta-aineita ei tunneta hermosolujen pinta-antigeenit, mutta yksikään niistä parantunut immunoterapian. Yksi seerumi immunologisesti vastaan ​​Axon alkuperäisen segmenttiin neuronien ja toisen seerumin vastaan ​​ELKS1, proteiini ilmentyy suuresti pikkuaivoissa, joka on vuorovaikutuksessa beta4-alayksikköä VGCC. Lopuksi 72%: lla PCD ja SCLC oli yksi tai useampia vasta-aineita, jotka osoittavat esiintyminen kasvain. Näiden potilaiden VGCC-ab ja SOX1-ab esiintyä tiukasti sitoutunut. SOX1-ab ennustavat SCLC ataksia potilailla, joiden spesifisyys 100% ja herkkyys 49%. Toisin limbic enkefaliitti kanssa SCLC, vasta-aineita solun pinnan antigeenejä muu kuin VGCC-ab, ovat harvinaisia ​​eivätkä ennustaa hoitovastetta.

Citation: Sabater L, Höftberger R, Boronat A, Saiz A Dalmau J, Graus F (2013) Vasta-ohjelmistoon Paraneoplastinen pikkuaivorappeuma ja pienisoluinen keuhkosyöpä. PLoS ONE 8 (3): e60438. doi: 10,1371 /journal.pone.0060438

Editor: Michael Platten Yliopistosairaalassa Heidelberg, Saksa

vastaanotettu: 08 marraskuu 2012; Hyväksytty: 27 helmikuu 2013; Julkaistu 25 maaliskuuta 2013

Copyright: © 2013 Sabater et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tämä tutkimus on tuettu osittain Fondo de Investigaciones Sanitarias. Madrid. Espanja (#FIS PS09 /0193 FG), Fonds zur Förderung der wissenschaftlichen Forschung, Itävalta, Project J3230 (RH), ja NIH RO1NS077851, NCI RO1CA089054, Fondo de Investigaciones Sanitarias (FIS, 11/01780), ja Fundació la Marato de TV3 (JD). Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Dr. Dalmau on tutkimus avustusta Euroimmun, ja saa rojalteja patenttien käyttöä MA2 ja NMDAR kuin autovasta testejä. Hänellä ei ole taloudellisia kilpailevia intressejä kuten omistuksen osakkeet, palkkatyön tai neuvonta hallituksen jäsenyys, matka-apurahoja ja palkkioita puhumiseen tai osallistumisen kokouksiin, tuotteiden kehittämiseen tai kaupan tuotteita tai lahjoja minkäänlaisia ​​jne suhde Dr. Dalmau yhtiön Euroimmun ei muuta kirjoittajat, noudattaminen kaikki PLoS ONE politiikan tietojen jakamista ja materiaaleja. Mikään muu osallistujien mitään eturistiriitoja.

Johdanto

Purkinje- solu on yksi yleisimmistä tavoitteista immuunivasteen, että joillakin potilailla, joilla on syöpä rakentanut vastaan ​​antigeenejä yhteinen kasvain ja hermoston [1]. Kuolema Purkinjen solujen johtaa pancerebellar oireyhtymä nimeltään paraneoplastic pikkuaivorappeuma (PCD) [1]. Pienisoluinen keuhkosyöpä (SCLC) on yksi yleisimmistä kasvaimia, jotka liittävät PCD [2]. Kun monet potilaat ( 80%) ja muiden paraneoplastic neurologisia oireyhtymiä ja SCLC satama Hu vasta-aineita (Hu-ab), taajuus Hu-ab in PCD on alhainen (23%) [3]. Noin 40% PCD potilailla, joilla on SCLC on vasta jänniteherkkiin kalsiumkanavien (VGCC), ja joissakin on myös läsnä kliinisiä tai neurofysiologisia näyttöä Lambert-Eatonin myasteenisen oireyhtymän (LEMS) [3]. Jopa 60%: lla potilaista, joilla LEMS ja SCLC on SOX1-ab, joka on serologinen markkeri SCLC [4].

Koska usein yhdistys PCD kanssa SCLC, ja joskus LEMS, päättelimme, että määrittäminen SOX1-ab voisi olla hyötyä myös ennustaa, joilla epäillään PCD olla taustalla SCLC. Lisäksi potilailla, joilla on limbisen aivotulehdus ja SCLC mutta ilman onconeural vasta usein vasta-aineita hermosolun pinnan reseptoreihin, jos tämä paradigma koskee myös PCD on tuntematon [5].

Tässä tutkimuksessa olemme analysoineet vasta-ohjelmistoon on sarja potilailla, joilla on PCD ja SCLC keskittyen taajuus SOX1-ab ja läsnäolo uusia vasta-aineita on hermosolujen pinta-antigeeneja.

Methods

potilaat

Valitsimme tietokannastamme, potilaita, joilla diagnoosia PCD ja SCLC. Me nimenomaan poissuljettu potilaat, joilla oli ataksia mutta nopeasti kehittynyt oireita pidemmälle pikkuaivojen toimintahäiriö. Nämä potilaat katsottiin olevan paraneoplastic enkefalomyeliittiä, joka toisin kuin PCD melkein aina on yhteydessä Hu-ab [6]. Neurologinen vamma arvioitiin modifioitu Rankin asteikon kuvatulla [6], [7]. Kliiniset tiedot on saatu täyttämät pyytäneen neurologit ja puhelinhaastatteluilla.

Standard Protocol hyväksynnät, rekisteröinnit, ja potilaan suostumukset

Serum ja käytetyt CSF-näytteet tutkimuksessa on talletettu kokoelma biologisten näytteiden nimeltä ”neuroinmunología” rekisteröity biopankissa on Institut d’Investigació BioMedica elokuu Pi i Sunyer (IDIBAPS), Barcelona, ​​Espanja. Ottaen huomioon, että monet potilaat olivat kuolleet aikaan tutkimus suoritettiin ja tutkimus on täysin anonyymi niin ei näyte voidaan tunnistaa tietylle potilaalle, se hyväksyttiin luopua nimenomaista kirjallista suostumus potilailta tai lähiomaisen Comité Etic d’investigació Clínica (CEIC) of Hospital Clinic. Eläinten käsittelymenetelmien hyväksyi paikallinen eettinen komitea (99/1 Barcelonan yliopisto) ja Katalonian (1094/99), mukaisesti direktiivin 86/609 /EU Euroopan komission. Tutkimus kuten tähän hyväksyi CEIC on Hospital Clinic.

Detection of anti-hermosolujen vasta

Serum ja CSF, kun käytettävissä, arvioitiin läsnäolon onconeural (Hu, Yo, Ri, CV2, amphiphysin, MA2, Tr), anti-neuropil (NMDAR, Ampar, GABA

BR, CASPR2, LGI1, mGluR1 ja mGluR5) tai mahdolliset uudet vasta immunohistokemiallisesti jääleikkeillä paraformaldehydiä-perfuusio tai post-kiinteä rotta pikkuaivot raportoitu [8]. Onconeural vasta-aine positiivisuus vahvistettiin kaupallista immunoblot (Bucher Diagnostika GmbH, Freiburg, Saksa) ja anti-neuropil vasta-aineiden soluun perustuvan määrityksen käyttäen HEK293-solut, jotka oli transfektoitu sopivilla plasmideilla, kuten aiemmin on kuvattu [9]. Vasta-aineita alayksikön β4 ja γ2 on VGCC havaittiin immunofluoresenssilla on HEK293-solut transfektoitiin plasmideilla (MC201619 ja SC312948; Origene, Rockville, Maryland, USA). Vasta-aineita P /Q tyyppi VGCC mitattiin kaupallisella radioimmunologisella (DLD Diagnostica GMBH, Hampuri, Saksa). SOX1-ab ja ZIC4-ab määritettiin käyttämällä nitroselluloosafilttereille sekavin faagiplakkia (50% plakkien positiivisista klooneista ja 50% merkityksettömistä klooneista). Suodattimia paloitellaan, jokainen inkuboitiin eri potilaan seerumia (laimennus 1:1000) ja kehitetty avidiini-biotiini immunoperoksidaasitesti tekniikkaa on kuvattu [4].

Vahvista spesifisyyden SOX1-ab vuonna diagnoosi PCD liittyy SCLC, SOX1-ab analysoitiin myös seerumin 31 potilasta, joilla PCD ja eri syöpätyyppejä, muut kuin SCLC, jotka eivät satama onconeural aineita, jotka voivat vahvistaa diagnoosin PCD, 25 kanssa PCD, rinta- tai munasarjasyöpä, ja Yo-ab, 17 kanssa PCD, Hodgkinin tauti, ja Tr-ab, 39 potilaalla on satunnaista viiveellä ilmaantuvia pikkuaivojen ataksia, ja 23 kanssa pikkuaivojen ataksia ja glutamiinihappodekarboksylaasi aineita.

Ensisijainen soluviljelmässä ja in vivo immunosytokemiassa

aivotursoneuronit saatiin E18 Wistar rotan alkioista. Solut entsymaattisesti ja hajotetaan mekaanisesti ja resuspendoitiin Neurobasal väliaineessa, jota oli täydennetty B27 (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) [9]. Rakeinen soluviljelmät valmistettiin leikattiin pikkuaivoja 8 päivän ikäisten Wistar-rottia ja käsitellään yhtä hippokampuksen neuronien mutta käyttäen Neurobasal-A alustaa, joka sisälsi 25 mM KCI: ää, ja johon oli lisätty B27 [10]. Solut maljattiin poly-L-lysiinillä päällystetty etukäteen P24 levyille ja 10 uM sytosiini-D-arabinofuranosidia (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) lisättiin viljelmiin 20 h maljaamisen jälkeen, estää proliferaation hermosoluihin.

immunosytokemia kokeissa näytteet (01:05 CSF laimentaminen ja 1:200 seerumilaimennoksella) inkuboitiin elävien neuronien 1 tunnin ajan, sitten kiinnitettiin 4% paraformaldehydillä ja permeabilisoitiin 0,3% Triton TX -100. Värjäys anti-MAP2-vasta suoritettiin, jotta voidaan vahvistaa hermosolujen spesifisyys positiivisten solujen. Sopivat fluoresoivat toissijainen vasta levitettiin ja peitelaseja asennettu Vectashield DAPI kiinnitysväliaineet (Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA) ja visualisoitiin kanssa Axio Imager M2 ZEISS mikroskoopilla.

seulominen cDNA ilmaisun kirjastojen

Uni-ZAP XR kirjastoja ihmisen pikkuaivot ja ihmisen sikiön aivojen (Stratagene, La Jolla, CA) immunoseu- 10 PCD SCLC seerumia (4 potilaalla on SOX1-ab ja VGCC-ab, 4 seronegatiivisia, 1 VGCC- ab ja 1 SOX1-ab), käyttäen tekniikoita aikaisemmin raportoitu [4]. Lyhyesti, immunoseulomalla cDNA-kirjastoa seerumeilla (laimennus 1:1000) suoritettiin päästä eristetty positiivista plakkia. Faagikloonia subkloonattiin pBluescript plasmidiin käyttäen in vivo excision faagin pelastus-protokollaa (Stratagene, La Jolla, CA). Plasmidi-DNA puhdistettiin QIAprep Spin Miniprep Kit (Qiagen, Santa Clarita, CA) ja sekvensoitiin DNA sekvensseri ABI 377 (Applied Biosystems, Foster City, CA) käyttäen Big Dye Terminator valmisseosten (Applied Biosystems). Positiiviset kloonit sekvensoitiin molemmat juosteet. Ihmisen genomin BLAST-ohjelmaa (NCBI, NIH, Bethesda, MD) käytettiin etsimään homologioiden.

Tilastollinen analyysi

Korrelaatio SOX1-ab ja VGCC-ab analysoitiin ennakoimattomia pöytä ja kaksisuuntainen Fisherin tarkkaa testiä käytettiin.

tulokset

potilaat

tunnistettu 39 potilaalla, joilla PCD ja SCLC. Mediaani-ikä potilaista oli 64 vuotta (vaihteluväli: 47-85 vuotta) ja 34 oli miehiä. PCD varhennetun diagnoosi SCLC 36 potilaalla on keskimäärin 2 kuukautta (vaihteluväli: +0,5-42kuukausi). Tuolloin PCD diagnoosin 10 potilaalla oli LEMS ja 13 eivät (vahvistettu ainakin normaalissa yhdistettä lihas toiminta potentiaalit elektromyografialla (EMG) tutkimukset [11]). Loput 16 potilaista ei viitata oireita LEMS mutta ei EMG tutkimukset tehtiin. Kaksikymmentä seitsemän potilasta sai vähintään yhden täyden kurssin (laskimoon immunoglobuliineja tai steroideja, tai molemmat) immunoterapian (6 potilasta), kemoterapian (14) tai molemmat (7). Ei parannusta tai stabilointi on keskivaikea-vaikea pikkuaivojen toimintahäiriö (Rankin pisteet 3) esiintyi 13 21 potilasta (62%), joilla oli asianmukainen seuranta. Kolme potilasta parani ja 5 pysyi vakaana kanssa Rankin pisteet 3 tai vähemmän.

VGCC ja onconeural vasta: yhdessä SOX1 vasta

Seitsemänkymmentä kaksi prosenttia potilaista oli vähintään yksi ilmoitettu vasta-aineita. Yksittäiset taajuudet vasta-aineet olivat: 49% SOX1-ab, 44% VGCC-ab, 31% Hu-ab, ja 13% ZIC4-ab. Kaksikymmentäkahdeksan sera esittää vähintään yhtä vasta-ainetta, ja 11 olivat negatiivisia (kuvio 1). Oli selvä korrelaatio SOX1-ab ja VGCC-ab. SOX1-ab todettiin 76,5%: lla potilaista VGCC-ab mutta vain 27,3% niistä ilman VGCC-ab (Fisherin tarkka testi p = 0,0036) (kuvio 2). Positiivinen VGCC-ab löydettiin 9 (90%) ja 10 potilasta, joilla LEMS ja 7 (54%) ja 13 ilman kliinisiä tai EMG näyttöä LEMS. Samoin, SOX1-ab oli läsnä 80%: lla potilaista, joilla LEMS ja 38% niistä ilman LEMS. Ei yhdistysten välillä ei havaittu VGCC-ab tai SOX1-ab ja Hu-ab. Kukaan potilaista oli positiivinen onconeural vasta-aineiden, muiden kuin Hu, tai esittää hyvin tunnettu anti-neuropil-vasta-aineita. SOX1-ab ei havaittu kontrollisarjassa 73 potilasta, joilla PCD ja eri syöpien muuta kuin SCLC, 32 potilaalla on satunnaista viiveellä ilmaantuvia pikkuaivojen ataksia, ja 23 kanssa pikkuaivojen ataksia ja glutamiinihappodekarboksylaasi aineita.

jakelu SOX1-, VGCC-, Hu-, ja ZIC4-ab meidän potilaiden kohortissa. Kukin rivi edustaa potilaan ja kun positiivinen solu täytetään väri.

pylväsdiagrammi välisen korrelaation SOX1-ab ja VGCC-ab. (Fisherin tarkka testi p = 0,0036).

tunnistaminen uusien vasta-aineiden

Yksi seerumista SOX1-ab osoitti myös vahvaa immunologista vastaan ​​Axon alkuperäisen segmentti neuronien rutiinia immunohistokemiallinen tutkimuksissa ( Kuva 3A). Seulomalla ihmisen pikkuaivojen cDNA-ekspressiokirjasto tämän seerumin ei tunnistaa oletetun antigeenin. Toinen uusi vasta-aine tunnistettiin aikana cDNA-kirjastojen seulontaan yhdellä seerumista VGCC-ab. Kohdeproteiinin, jota kutsutaan ELKS1, on erittäin runsaasti pikkuaivoissa. Suoritimme tietty faagi seulomismäärityksessä havaitsemiseksi ELKS1 mutta emme löytäneet muita positiivinen seerumi. PCD seerumit ei myöskään näytä immunoreaktiivisuus HEK293 transfektoitu β4 tai y2 apu- alayksiköitä VGCC. Viidellä potilaalla (12,8%) oli vasta-aineita solun pinta-antigeenejä ilmaistaan ​​elävien, ei-läpäiseviksi hippokampuksen neuronien (kuvio 3B), mutta vain 1 niistä reagoimaan pikkuaivojen rakeinen neuronien.

. Vasta-aineet kumpu neuronien rotan pikkuaivoissa. Immunohistokemia rotta sagittaalisissa pikkuaivoleikkeiden. Huomaa vahva epätyypillinen reaktiivisuutta PCD SCLC seerumin vastaan ​​kumpu Axon neuronien, lähinnä Purkinjen soluissa. Ytimet vastavärjätään hematoxilin. B. Immunofluoresenssikoe live hippokampuksen neuronien. Hippokampuksen neuronien inkuboitiin CSF 1/5 laimennettua PCD SCLC potilaalle. Reaktiivisuus potilaan vastaan ​​kalvon neuronin nähdään vihreä ja MAP2 värjäytymistä punainen varmistamiseksi hermosolujen linjaa. Ytimien nähdään sininen DAPI. (Tavoite 100x öljy)

Keskustelu

Nykyisessä tutkimuksessa halusimme selvittää, onko potilaalla on PCD ja SCLC oli vasta muu kuin VGCC-ab Tämä selittäisi pikkuaivojen ataksia tai vähiten auttaa diagnosoinnissa PCD. Eristetty määritys VGCC-ab potilaalla, pikkuaivojen ataksia tai ilman LEMS melkein vahvistaa aina paraneoplastic alkuperä, koska kliiniset yhdistyksen pikkuaivojen ataksia ja LEMS hyvin harvoin esiintyy ilman syövän [12], [13]. Lisäksi jos pikkuaivojen ataksia on paraneoplastic ja potilaalla on VGCC-ab taustalla kasvain on aina SCLC [14].

Tämän rajoituksen voittamiseksi, analysoimme läsnäolo SOX1-ab, serologinen markkeri SCLC [15]. Meidän sarjassa PCD ja SCLC huomasimme, että SOX1-ab oli läsnä lähes 50%: lla näistä potilaista. Sen sijaan SOX1-ab ei havaittu seerumissa potilailla, joilla on PCD ja muissa elimissä tai ilman onconeural vasta-aineiden ja potilailla, joilla pikkuaivojen ataksia ilman syövän. Tuloksemme osoittavat, että SOX1-ab ovat hyviä ennustajia taustalla SCLC potilailla, joilla pikkuaivojen ataksia. Taajuus SOX1-ab oli jopa korkeampi (76,5%) vuonna PCD potilailla, joilla on SCLC joka myös oli VGCC-ab. Tämä taajuus on samankaltainen kuin potilailla, joilla LEMS ja SCLC (67%) [16]. Yhdessä nämä tiedot viittaavat siihen, että potilailla, joilla on PCD ja SCLC, co-esiintyminen VGCC-ab ja SOX1-ab liittyy vahvasti vaikka 41% PCD potilaalla on VGCC-ab nykyisen sarjan ei ollut LEMS.

Aiemmat tutkimukset osoittivat, että kaikilla potilailla, joilla LEMS ja SCLC oli Hu-ab oli myös SOX1-ab [16]. Siksi lisätutkimuksia varten Hu-ab ei parantanut diagnoosia paraneoplastic LEMS [16]. Kuitenkin havainto nykyisen tutkimus on eri vaikutuksia. Kun taas SOX1-ab, esiintyi 48,7%: lla potilaista, joilla PCD, vielä 20%: lla potilaista oli Hu-ab tai VGCC-ab. Kaiken kaikkiaan yhdistämällä testaus kaikkien 3-vasta-aineiden (kaikki kaupallisesti saatavilla) tunnistaa lähes 70%: lla PCD ja SCLC. Muutamat potilaat voivat olla muita onconeural vasta kuten ZIC4, CV2 tai amphiphysin ja kaikki vaan ZIC4 seulotaan rutiininomaisesti samalla sarjat yleisesti käytetään havaitsemaan Hu-ab.

Emme löytäneet muita mahdollisesti käyttökelpoisia vasta tässä sarjassa . Seerumin Yhden potilaan osoitti reaktiivisuutta Axon alkuperäisen segmenttiin suurten neuronien. Tämä vasta-aine on aiemmin raportoitu potilaalla, jolla enkefalomyeliittiä ja SCLC joka kehittyi kouristuksia ja vaikea kävelyn ataksia [17]. Olemme aiemmin tunnistettu tämä immunoreaktiivisuus sairastavalla potilaalla SCLC ilman neurologisia oireita, jotka viittaavat vasta-aine voi olla merkki taustalla SCLC (julkaisematon). Toinen potilas oli vasta-aine ELKS1, proteiini ekspressoituu pääasiassa Purkinjen soluissa [18]. Vaikka ELKS1 co-immunosaostumissa kanssa β4 VGCC alayksikkö, emme voi tunnistaa reagoivia vasta-aineita suoraan β4 tai γ2, jotka ovat VGCC alayksikköä, jotka ovat erittäin ilmaistaan ​​pikkuaivoissa [18], [19]. Tutkimuksemme ei sulje pois mahdollisuutta, että seerumit näistä potilaista voi olla vasta-aineita muita VGCC alayksiköt tai vuorovaikutuksessa proteiineja. Esimerkiksi potilaiden seerumi ei-paraneoplastic LEMS reagoivat useammin verkkotunnus IV alpha1A on VGCC verrattuna potilaisiin, joilla LEMS ja SCLC [20].

äskettäin löytyneen vasta-aineita hermosolujen pinta-antigeenejä on muuttunut käsite, joka vasta-aineet CNS paraneoplastic oireyhtymät ovat vain sijaismarkkereiden taustalla kasvain. Vaikka potilailla, joilla limbisen aivotulehdus ja SCLC noin 50%: lla on Hu-ab ja toisessa 50%: lla on vasta-aineita synaptic proteiineja (lähinnä GABA

B-reseptori) [5], meidän tutkimus osoittaa, että potilailla, joilla on PCD ja SCLC esiintyminen vasta-aineiden solun pinnan proteiineihin kuin VGCC-ab, on harvinaista.

käytännössä tämä merkitsee Tutkimuksemme on, että potilailla, joilla pikkuaivojen ataksia, SOX1-ab ovat hyviä ennustajia siihen liittyvän SCLC joiden spesifisyys 100 % ja herkkyys 49%. Lisäksi, yhdistelmä testaus SOX1-, VGCC-, ja Hu-ab tunnistaa lähes 70%: lla potilaista, joilla PCD ja SCLC. Koska PCD kehittyy yleensä ennen diagnoosin kasvain, tämä ohjelmisto vasta-aineiden on hyödyllistä todeta, että pikkuaivojen oireyhtymä on paraneoplastic, taustalla kasvain on SCLC, ja mahdollisuus neurologisen toipumisen on alhainen.

Kiitokset

Tekijät Kiitokset Mercè Alba ja Eva Caballero erinomaisesta teknistä tukea. Tekijät Kiitokset myös tohtori Xavier Xifró tarjoamiseksi pikkuaivojen rakeinen soluviljelmissä protokollaa.