Krooninen sairaus

tiivistelmä

PRR11 on potentiaalinen ehdokas onkogeeni, joka on patogeneesiin keuhkosyöpään, mutta rooli PRR11 maha- syöpä on tällä hetkellä epäselvä. Esillä olevassa tutkimuksessa olemme tutkineet rooli PRR11 mahasyövän arvioimalla sen ilmentymistä asema näytteitä kohortin 216 potilailla, joilla on mahalaukun syöpä. PRR11 havaittiin yliekspressoituvan 107 (49,5%) potilaalla immunohistokemialla kudossiruina tuotettu käyttämällä potilaan näytteitä. Lisäksi PRR11 yliekspressio havaittiin korreloivan merkitsevästi viittaavia tekijöitä, kuten kasvaimen invaasio, kasvaimen erilaistumiseen, ja taudin vaiheessa. Survival analyysi kohortin paljasti, että PRR11 on itsenäinen ennustetekijä mahasyövän potilaille. PRR11 stabiilisti vaiennettu joka mahakarsinoo- solulinja käyttäen shRNA perustuvaa lähestymistapaa, ja käsitellyt solut osoittivat laski solujen lisääntymistä ja pesäkkeiden muodostumista in vitro ja solujen kasvua in vivo, companied vähentynyt ilmentyminen CTHRC1 ja lisääntyneen ilmentymisen LXN, proteiineja, jotka liittyvät syövän etenemiseen. Arviointi ihmisen mahasyövän näytteet osoittivat, että PRR11 ilmentyminen liittyi myös lisääntynyt CTHRC1 ja laski LXN ilmentymistä. Nämä tiedot osoittavat, että PRR11 voidaan yleisesti aktivoida ihmisen mahasyövän ja ovat sopusoinnussa hypoteesin, että PRR11 toimii onkogeenin kehittymistä ja etenemistä mahasyövän.

Citation: Song Z, Liu W, Xiao Y Zhang M, Luo Y 1, Yuan W, et al. (2015) PRR11 Onko Prognostiset Marker ja mahdolliset Oncogene potilailla, joilla syöpään. PLoS ONE 10 (8): e0128943. doi: 10,1371 /journal.pone.0128943

Editor: Keping Xie, The University of Texas MD Anderson Cancer Center, Yhdysvallat |

vastaanotettu: 13 tammikuu 2015; Hyväksytty: 01 toukokuu 2015; Julkaistu: 07 elokuu 2015

Copyright: © 2015 Song et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään

Data Saatavuus: kaikki asiaankuuluvat tiedot kuuluvat paperin ja sen tukeminen Information tiedostoja.

rahoitus: kirjoittajat eivät tuki ja rahoitus raportoida.

kilpailevat edut: kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä olemassa.

Johdanto

Mahasyöpää (GC) on neljänneksi yleisin maligniteetti maailmanlaajuisesti arviolta esiintyvyys miljoona uutta tapausta vuonna 2008, jonka osuus 8% uusista syöpätapauksista. Kuolleisuus liittyy GC on myös huikea, 0,73 miljoonaa kuolemaa osuus 10% kaikista syöpään liittyvien kuolemien arvioitu 2008. Huomattavaa on, että noin 70% uusista GC tapauksissa ja GC liittyvistä kuolemista tapahtuu kehitysmaissa [1] . Vaikka on ollut tärkeä lääketieteen kehitys diagnosoinnissa ja hoidossa GC viime vuosikymmeninä, tämän taudin edelleen toiseksi yleisin syy syöpään liittyvien kuolleisuus maailmassa johtuu osittain siitä, että se on yleisesti havaittu potilailla, joilla myöhään edennyt sairaus, jolla kumotaan onnistunut parantava leikkaus monille potilaille [1, 2].

Vaikka ilmaantuvuus GC hinnat on vähentynyt huomattavasti Pohjois-Amerikassa ja useimmissa Pohjois- ja Länsi-Euroopassa, tauti on edelleen yleistä Itä-Euroopassa , Venäjä, Keski- ja Etelä-Amerikassa, ja Itä-Aasia [3]. Tällä hetkellä useita uusia kudospohjaisia ​​ennustetekijöitä ja terapeuttinen markkereita mahasyövän. Näitä ovat ihmisen epidermaalisen kasvutekijän reseptori-2 (HER2) [4, 5], verisuonten endoteelin kasvutekijän reseptori 2 (VEGFR-2) [6], Leikkauskorjauksessa rajat komplementaatioryhmässä 1 (ERCC1) [7], B-solu- lymfooma-2 (Bcl-2) ja Ki-67 [8]. Kuitenkin useimmat näistä merkeistä ei rutiininomaisesti käytetty kliinisessä käytännössä, koska ne eivät ole tarkasti ja tehokkaasti ennustaa lopputulosta tai terapeuttista tehokkuutta. Tällä hetkellä suuri kliininen kysyntää uusille molekyylimarkkereina jotka voivat parantaa havaitseminen, diagnoosi, ja ennustettavuutta mahasyövän ja poistaa tarvetta kalliin ja tehottoman endoskooppinen seulontamenetelmiä. Vuonna 2013 proliinipitoinen proteiinia 11 (PRR11) tunnistettiin uusi geeni ja toiminnallisesti tunnusomaista Ji Ying et al. jotka havaitsivat, että PRR11 on tärkeä rooli sekä solusyklin etenemisen ja kasvaimen kehittymisen. Tämä proteiini, koska sen onkogeenistä roolia, on esitetty mahdollisena uusi tavoite diagnosointiin ja hoitoon ihmisen keuhkosyöpä. Kautta säännellään tärkeitä geenien solusykleihin ja kasvaimen kehittymisen, PRR11 osallistuu taudin alkamisen ja etenemisen keuhkosyövän [9] ja epiteelin-to-mesenkymaalitransitioon rintasyövässä [10].

Kuitenkin tällä hetkellä, tieto koskee roolia PRR11 mahasyövän ei ole aikaisemmin raportoitu. Tässä tutkimuksessa arvioimme PRR11 ilmentymistilanne kohortin 216 potilailla, joilla on GC ja analysoidaan suhdetta PRR11 ilmaisun ja kliinis parametrit onko PRR11 voi ennustaa GC potilaan ennustetta. Lisäksi vaimentaminen PRR11 useita mahalaukun sinoomasolulinjoja estivät solujen lisääntymisen hinnat, syöpäsolun muuttoliikkeen solujen pesäkkeiden muodostumista, ja kasvaimen kasvua in vivo kokeessa. Nämä havainnot ovat tärkeitä, koska ne ovat yhdenmukaisia ​​aiempien olettamuksiin PRR11 voi olla tärkeä onkogeenisen tekijä erilaisissa syöpä.

Methods

Colson valinta ja kudosten hankinta

kohortti koostui 216 potilaalla on GC jotka saivat kirurginen asemointia klo Changhai Hospital Shanghaissa, People Kiina, vuodesta 2001 vuoteen 2005. potilaiden seurantaa saatiin kliinisissä raporteissa vasta maaliskuussa 2010 ja kukin potilaat vahvistettiin olevan riittävästi GC myymälän rakentamiseen kudoksen mikrosirulla (TMA) Niistä potilastiedot kerätyt olivat ominaisuuksia kuten ikä, sukupuoli, kasvaimen koko, T vaiheessa N vaiheessa M vaiheessa ja kasvaimen erilaistumiseen (taulukko 1). Kaikki kudosnäytteet saatiin sen jälkeen, kun potilaille tarjotaan kirjallinen suostumus. Kokeellinen suunnittelu hyväksyttiin Changhai Hospital Institutional Review Board ennen tutkimusta.

TMA ja immunohistokemia ja Scoring

kudossiruina rakennettiin tavalla aiemmin [11]. Lyhyesti, H HPA023923, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA), anti-LXN (Latexin) (1: 100; GT39981-16, Sigma-Aldrich); anti-CTHRC1 (1: 100; 11165-1G12, Sigma-Aldrich). IHC värjäys S-P kit (KIT-9710; MAIXIN Biology Corporation, Fuzhou, Kiina) käytettiin visualisoimaan vasta-sido dioja. Counterstaining suoritettiin hematoksyliinillä. IHC värjäytyminen PRR11, LXN, ja CTHRC1 näissä näytteiden arvioitiin käyttäen Olympus CX31 mikroskoopilla (Olympus, Center Valley, PA). Kasvaimet, jotka osoittivat 10% värjäyksen PRR11 katsottiin olevan positiivinen ilmentymistilanne

Solulinjat ja viljelyolosuhteet

Proteiinin ilmentymistä havaittiin käyttämällä viittä GC solulinjat SGC7901, MKN45, MKN28, HGC27, ja MGC803, jotka ostettiin Cell Bank, Kiinan tiedeakatemia. GC solulinjoja ylläpidettiin Dulbeccon modifioidussa Eaglen väliaineessa (DMEM) (Hi-klooni) plus 10% FBS, 37 ° C: ssa 5% CO2.

knockdovvn PRR11 by lentivirusvektori-ladattu shRNA GC soluissa

Pakkaus lentiviruksesta hiukkasen suoritettiin seuraavalla tavalla. Lyhyesti, lentivirus ekspressioplasmidin sisältää pieniä interferenssi-RNA (5′-ACGCAGGCCUUAAGGAGAATT-3 ’) kohdistaminen PRR11 konstruoitiin GENECHEM Corporation (Shanghai, Kiina) ja käytettiin infektoimaan GC-solujen läsnä ollessa, 6 ug /ml polybreeniä. Infected mahasyövän soluja valittiin käyttämällä puromysiini, ja knockdovvn PRR11 vahvistettiin immunoblottauksella solulysaateista anti-PRR11 vasta-aine.

Soluproliferaatiomääritys ja pesäkemuodostusta

Solut kanssa stably- transfektoitujen PRR11-shRNA (PRR11-KO) tai tyhjän vektorin (kontrolli) ympättiin 96-kuoppaisille levyille tiheydellä 5000 solua per kuoppa. CCK8 määritykset (Dojindo Kumamoto, Japani) suoritettiin kuten proliferaation mittana, joka on laskettu suhteessa absorbanssiin 48h verrattuna, että 24 h.

Pesäkkeenmuodostusta testit suoritettiin samalla tavalla. PRR11-KO, ja valvonta-solut ympättiin 6-kuoppalevyille kolmena kappaleena tiheydellä 500 solua kuoppaa kohti. Kaksi viikkoa inkuboinnin jälkeen pesäkkeet kiinnitettiin metanoli /asetoni (1: 1), värjättiin kristallivioletilla ja laskettiin. Pesäkkeet, joissa on alle 50 solua kuoppaa kohti katsottiin negatiiviseksi pesäkkeiden muodostumista.

Western blot

Yhteensä proteiini valmistettiin lysaateista SGC7901, MKN45, MKN28, HGC27, ja MGC28 mahalaukun sinoomasolulinjoja . Western blotit suoritettiin normaalilla tavalla käyttäen vuohen polyklonaalista vasta-ainetta ihmisen PRR11 (laimennus 1: 1000), LXN (laimennus 1: 1000), CTHRC1 (laimennus 1: 1000) ja piparjuuren peroksidaasiin konjugoitua anti-vuohi IgG-vasta-ainetta laimennettiin 1: 10000 toissijaisena vasta-aineena. Expression beta-aktiini arvioitiin normalisoimaan mittaukset proteiinin ilmentymisen. Proteiinit visualisoitiin käyttäen Amershamin tehostettua kemiluminesenssin mukainen valmistajan ohjeiden Image J ohjelmisto.

reaaliaikainen kvantitatiivinen Käänteiskopiointireaktioita (qRT) -PCR Pitoisuus

Reaaliaikainen kvantitatiivinen PCR-reaktion suoritettiin käyttäen SYBR1 Esiseos Ex TaqTM (Takara, Kioto, Japani) mukaan valmistajan ohjeiden ja tavanomaisia ​​PCR-määritykset suoritettiin, kuten aiemmin on kuvattu [12]. GAPDH käytettiin sisäisenä standardina. PCR sykli käytetty protokolla seuraavia parametreja: 95 astetta 1 min, 40 sykliä 15 s 95 ° C astetta ja 31 sekuntia 60 °. Kansi-ekspressio laskettiin käyttäen ACt menetelmää. Reaktioita ja analyysi suoritettiin käyttäen ABI PRISM 7300-PCR ja tunnistusjärjestelmä (Applied Biosystems, Carlsbad, CA). Käytetyt alukkeet ovat seuraavat: PRR11: eteenpäin: 5’CGT ATC TGC CAC CGA GAA CTT-3 ’, reverse: 5′- GAG ATG GTC TTC AGT GCT TCC T-3′; GAPDH: eteenpäin: 5’-TGA CTT CAA CAG CGA CAC CCA-3 ’, reverse: 5’- CAC CCT GTT GCT GTA GCC AAA-3.

eläinmallit

ihonalainen -tuumoriksenografti malleja tehtiin arvioimaan in vivo -toimintaa muuttamiseen PRR11-knockdovvn in SGC-7901 solulinja. PRR11-KO SGC-7901-soluissa ja valvonta (1 x 106 solua 0,1 ml PBS) injektoitiin ihon alle vasempaan kylkeen 4 viikon ikäiset Balb /c-nude-hiiriin (Animal Centerin toisen Military Medical University) ( n = 5). Tuumorin halkaisija mitattiin joka kolmas päivä. Kaksi viikkoa implantoinnin jälkeen, kaikki eläimet tapettiin. Kasvaimet kerättiin ja kasvaimen tilavuus (mm3) laskettiin kaavalla V = 0,52 (pituus x leveys x syvyys). Tämä eläinkoe ​​hyväksyttiin eläinten eettisen komitean toisen Military Medical University.

Tilastollinen analyysi

Tilastolliset analyysit tehtiin SPSS 13.0 ohjelmistolla (SPSS, Chicago, IL, USA). Väliset suhteet ilmaus PRR11 ja kliinis ominaisuudet arvioitiin käyttäen chi-potenssiin jakaumat. GC potilaat stratifioitiin ilmentymisen aseman PRR11, LXN, ja CTHRC1, ja eloonjääminen analyysi suoritettiin käyttäen Kaplan-Meier käyrät. Yhden ja usean analyysit perustuvat Coxin suhteellisen vaaran regressiomallin. Muuttujat osoittavat merkitys (p 0,05) mukaan yhden muuttujan analyysi tehtiin, kun monimuuttuja Coxin suhteellisen vaarat analyysi. Kvantitatiiviset muuttujat analysoitiin käyttämällä Studentin t-testiä. Kokeelliset tiedot esitettiin keskiarvona kunkin kunnossa ± S.D. ja p 0,05 katsottiin tilastollisesti merkitsevä.

Tulokset

PRR11 ilmentymistilanne korreloi tärkeä kliinis ominaisuuksia mahasyövän

ilmentymistä PRR11 arvioitiin immunohistokemia kohortin 216 potilasta mahalaukun syöpä. Pieni intensiteetti sytoplasmisen PRR11 immunovärjäyksen näkyi normaalia epiteelisoluissa (kuvio 1A). Korkea intensiteetti PRR11 immunovärjäyksellä havaittiin erityisesti mahalaukun syöpäsoluja, ja värjäytymisintensiteettiä vaihteli potilaiden välillä (kuvio 1 B ja 1 C). Näistä kasvain näytteet, 107 ulos 216 (49,5%) oli positiivisia PRR11 ilmaisun ja 109 tapausta osoittivat PRR11 negatiivinen ilmaus (kuvio 1 C). Western blotting ja RT-PCR-määritys vahvistivat lisäksi, että PRR11 proteiini ja mRNA lisääntyi Tuumorinäytteissä verrattuna että noncancerous kudoksissa (kuvio 1D ja 1E). Complimenting nämä tulokset, on suhteellisen korkea PRR11 ekspressiotaso havaittiin myös viisi GC solulinjoissa, mukaan lukien MKN45, MKN28, SGC7901, HGC27, ja MGC803 (S1 kuvio).

(A, A1) Normaali mahan limakalvon osoitti heikkoa värjäytymistä PRR11; (B, B1) Positiivinen värjäys PRR11 mahasyövän; (C, C1) Negatiivinen värjäys PRR11 mahasyövän. A1, B1, C1 ovat laajentuminen kudosten A, B, C, vastaavasti. Alkuperäinen suurennos A, B, C: 40 x; Alkuperäinen suurennus A1, B1, C1: 200 ×. (D) Western blotting paljasti lisääntyneen ilmentymisen PRR11 Tuumorinäytteissä (T) verrattuna, että noncancerous kudosten (N); (E) mRNA-tasot on PRR11 mahasyövän kudoksiin (T) ja normaalin kudosten (N).

PRR11 ilmentyminen korreloi merkitsevästi määrä kliinis parametrien, kuten T-vaiheessa, aste kasvaimen erilaistumiseen, ja TNM (taulukko 1). PRR11 ekspressiota ei havaittu liittyvän ikä, sukupuoli, kasvaimen koko ja N vaiheessa. Nämä tulokset viittaavat siihen, että korkea PRR11 proteiinin ilmentyminen liittyy aggressiivinen fenotyyppi mahasyövän.

PRR11 kasvaimeen ilmentyminen liittyy vähentynyt selviytymisen mahasyöpäpotilaista

Niistä 216 potilaasta 122 kuoli aikana seuranta-ajan mediaani kokonaiselinaika aika 51,5 kuukautta. Keskimääräinen elinaika potilailla, joilla on negatiivinen PRR11 proteiinin ilmentyminen oli 74,5 kuukautta, kun taas keskimääräinen elinaika potilailla, joilla on positiivinen PRR11 -proteiiniekspressio 46,4 kuukautta (kuvio 2A).

(A) Survival oli merkitsevästi pidempi potilailla kasvaimen puuttuu ilmentymistä PRR11 (OS, 76,6 kuukautta) verrattuna niihin, joilla on positiivinen PRR11 ilmentymistilanne (OS, 46,6 kuukautta; P 0,001). (B) Alaryhmäanalyysi vaiheen I II potilaat paljasti, että potilaalla on positiivinen PRR11 ilmentymistilanne liittyi lyhyempi selviytymisen kesto kuin potilailla, joilla ei PRR11 lauseke (58.5mon vs. 97.9mon;

P

0,001). (C) Alaryhmäanalyysi vaiheen III IV potilailla osoitti, että positiivinen PRR11 yliekspressio liittyi lyhyempi eloonjäämisaste kuin potilailla, joilla ei PRR11 lauseke (34.3mon vs. 51.3mon;

P

= 0,036).

Univariate COX regressio analyysit osoittivat, että kasvaimen koko, kasvaimen vaiheessa, imusolmukkeiden positiivisuus, TNM-luokitus, kasvaimen erilaistumiseen ja PRR11 ilmentyminen korreloi merkittävästi vähentynyt eloonjäämiseen (taulukko 2). Monimuuttuja-analyysi vahvisti, että kasvaimen kokoa, kasvaimen erilaistumiseen ja PRR11 ilmaisun olivat riippumattomia ennustetekijöiden ennustaja eloonjäämisaste mahasyöpäpotilaista (HR = 0,663; 95% CI: ,406-+0,961 kasvaimen koon, HR = 0,545; 95% CI: 0,372-0,798 for PRR11, HR = 0,548; 95% CI: 0,376-0,801 kasvainten erilaistumiseen).

Potilaat jaettiin kahteen ryhmään, joilla on TNM I /II ja ne vaiheen III /IV, ja vaikutus PRR11 tila eloonjäämiseen kesto arvioitiin. Tämä alaryhmä analyysi paljasti, että tuloksia potilailla, joilla PRR11 yliekspressio olivat huonompi kuin ilman PRR11 yliekspressio joko vaiheittain I /II (kuvio 2B) tai vaiheen III /IV (kuvio 2C).

PRR11 ilmentyminen liittyy lisääntynyt solujen lisääntymistä ja solujen pesäkkeiden muodostumista in vitro ja kasvaimen kasvua in vivo SGC7901 mahakarsinoo- solujen

PRR11 stabiilisti vaiennettu on SGC-7901 solulinja käyttäen lentivirusvektori ladattu PRR11 shRNA. Knockdovvn PRR11 (PRR11-KO) ollessa vahvistettiin Western blot-analyysi, ja vaikutus PRR11-KO on solujen lisääntymistä ja pesäkkeen muodostumiseen arvioitiin. Merkittävä ehtyminen PRR11 transfektoiduissa soluissa havaittiin (kuvio 3A), ja alas-säätely PRR11 liittyi dramaattinen väheneminen sekä solujen lisääntymisen (kuvio 3B) ja solujen pesäkkeiden muodostumiseen (kuvio 3C) tässä solulinjassa. Ei ole yllättävää, PRR11 down-regulation johtaa kasvun hidastumista mahalaukun syövän solulinjojen in vivo (kuvio 3D) B

(A) Western blot -analyysi PRR11 ekspression 48 tunnin transfektion jälkeen PRR11-shRNA in SGC7901 soluissa; (B, C) hiljentäminen on PRR11 inhiboi soluproliferaatiota (B) ja pesäkkeenmuodostuskyvyn in vitro (C). (D) vaiennettu PRR11 esti kasvaimen kasvua in vivo. * P 0,05, ** P 0,01, ** P 0,01 pidettiin tilastollisesti merkitsevä verrattuna ohjaus.

knockdovvn PRR11 johtaa alas-säätely CTHRC1 ja säätely ylöspäin LXN

Me tehdään Western blot-analyysi tutkia, onko ilmaus CTHRC1 ja LXN oli muuttunut PRR11-KO SGC-7901 mahalaukun syöpäsoluja. Tulokset osoittivat, että CTHRC1 säädeltiin vähentävästi ja LXN on yliaktiivista PRR11-KO-soluja verrattuna kontrolleihin (kuvio 4A). Edelleen koekspressio analyysi suoritettiin GC kasvaimen näytteitä immunohistokemiallinen (kuvio 4B). IHC tiedot vahvistivat, että CTHRC1 ilmentyminen positiivisessa yhteydessä PRR11 ilme (r = 0,299, p 0,001) ja LXN ilmentyminen negatiivisesti yhteydessä PRR11 ilme (r = -0,188, p = 0,005) GC kudoksissa (kuvio 4C).

(A) Western blot-analyysi osoittaa, että CTHRC1 säätyy alas ja LXN on säädellään ylöspäin PRR11-KO SGC07901 soluissa. (B) Expression of PRR11, CTHRC1 ja LXN potilailla johdettuja mahakarsinoo- kudosnäytteitä. (C) Korrelaatio analyysi PRR11, CTHRC1 ja LXN ilme. Nämä tulokset tulkittiin osoittavat, että CTHRC1 ilmentyminen on positiivisessa yhteydessä PRR11 ilme (r = 0,299, p 0,001), ja että LXN ilmentyminen on negatiivisesti liittyy PRR11 ilme (r = -0,188, p = 0,005) GC kudoksissa.

keskustelu

PRR11 on suhteellisen uutta proteiinia molekyyli, joka voi olla rooli syövän synnyssä, ja on tällä hetkellä vain muutamia artikkeleita kuvataan roolia PRR11 keuhkosyövässä [13]. Vaikka PRR11 oli tiettävästi säädellään ylöspäin keuhkosyöpä, mahdolliset mekanismit tätä voimistunutta ilmentymistä ei ole raportoitu, ja lisäksi paljon työtä on välttämätöntä arvioida kliinistä merkitystä PRR11. Kun pyritään koetin tähän kysymykseen, nykyinen tutkimus tehtiin luonnehtia PRR11 ilmaisun mahakarsinoo- yhdessä mitään yhteyttä ennusteeseen viittaavia ominaisuuksia.

tutkimuksen mukaan sekä PRR11 mRNA ja proteiini säädellään ylöspäin GC kudoksissa verrattuna normaaliin limakalvon; toteamus, joka tukee käsite pro-onkogeenisiä roolia PRR11 mahalaukun syöpä. Lisäksi positiivinen ilmaus PRR11 oli merkitsevästi yhteydessä aggressiivinen caner fenotyyppi, mukaan lukien kasvaimet lisääntyneisiin invaasio, lisääntynyt kasvain erilaistamattomuuden, ja edenneen taudin vaiheessa. Lisäksi olemme laatineet mahakarsinoo- solulinja, jossa PRR11 stabiilisti tippuu alas. Tämä solulinja näyttävät toteen vähentynyt solujen lisääntymistä ja oleellisesti vähentynyt pesäkkeenmuodostusta meidän määrityksissä. Yhdessä nämä tulokset viittaavat siihen, että PRR11 proteiinin ilmentyminen voi olla kriittinen rooli kehityksen ja etenemisen GC syövän.

TNM syöpä pysähdyspaikan on yleisesti hyväksytty luokittelujärjestelmän ohjaamisessa syövän hoidossa ja ennustamiseen ennustetta. Ei ole yllättävää, potilaat meidän tutkimuksessa asemointia aikaisemmassa vaiheessa ollut pidempi eloonjäämisen väli kuin ne, joilla on myöhemmin tauti. Viime aikoina biologisia merkkiaineita ovat korkeimmillaan kiinnostusta lääkärit keinona arvioida /ennustaa terapeuttista tehoa ja hoitotuloksia. Joitakin esimerkkejä tällaisista markkereita, jotka ovat tällä hetkellä käytössä ovat HER2, mTOR, ja ANXA1 [14-16]. Tutkimuksemme tukee mahdollisen ennustetekijöitä roolin mittaamiseen PRR11 mahalaukun karsinooma kuten Kaplan-Meier analyysit osoittivat, että positiivinen ilmentymistason PRR11 oli yhteydessä huonoon ennusteeseen sekä aikaisen TNM (TNM I /II) ja myöhään TNM (TNM III /IV). Edelleen monimuuttuja analyysit paljastivat, että PRR11 yliekspressio oli itsenäinen selviytyminen ennustaja GC potilaiden jälkeen resektio ensisijainen kasvaimia. Tämä on ensimmäinen raportti, joka PRR11 ilmentyminen liittyy huono postoperatiivisen tulos GC potilailla.

mahdollisia mekanismeja taustalla PRR11 edistävää syövän synnyn ei ole täysin tutkittu. Aikaisempi tutkimus PRR11 toteutettiin ja tulkittu asettaminen keuhkosyövän ja osoitti, että PRR11-Knockdown väärin säädellystä ilmentymistä useita tärkeitä geenin kriittinen reittejä kuten solusykliä, kasvaimen kehittymisen ja etäpesäkkeiden (esim CCNA1, RRM1, MAP4K4 ja EPB41L3) [ ,,,0],9].

oma mikrosiruanalyysi (S1 ja S2 taulukot) [17], huomasimme, että kaksi uutta kandidaattigeenit (CTHRC1 ja LXN) on huomattavasti muuttunut sen jälkeen, kun PRR11-kaatamalla. CTHRC1 raportoitiin ensimmäisen kerran uutena eritysproteiinia vaurioituneessa ja sairaat verisuonet, ja arvellaan, että CTHRC1 voivat toimia estää kollageenin ilmentymisen ja edistää solujen vaeltaminen, jotka molemmat ovat välttämättömiä toimintoja invasiivisen syövän [18]. Lisäksi tutkimukset ovat osoittaneet, että CTHRC1 proteiini ilmentyy erittäin etäpesäkeleesioita verrattuna nonmetastatic kasvaimia, ja inhibitio CTHRC1 ilmaisun tuloksia laski solumigraatiota in vitro [19]. Äskettäin on osoitettu, thatCTHRC1 proteiinin ekspressio liittyy läheisesti kehittämiseen maksasyövän [20, 21], haimasyöpä [22], mahasyöpä [23], ja peräsuolen syöpä [24]. LXN on suhteellisen uutta geeniä, joka on raportoitu vaimentua ihmisen GC. Canonically, LXN uskotaan näytteille tuumorisuppressoriproteiinia kaltaisia ​​toimintoja [25]. On myös raportoitu, että LXN on tuumoria tukahduttavan ominaisuuksia pahanlaatuisen melanooman [26] ja maksasyövän [27]. Osoitimme myös, että yli-ilmentyminen CTHRC1 korreloi positiivisesti kasvaimen invaasio, alueellinen imusolmuke etäpesäke, taudin etenemisen ja potilaiden tulos (S2 kuvassa), kun taas LXN yliekspressio oli negatiivisesti yhteydessä imusolmuke etäpesäke, kasvain eriyttäminen, ja taudin vaiheessa (S3 taulukko), mikä osoittaa onkogeenisia rooli CTHRC1 ja tukahduttava roolia LXN GC. Kiinnostavaa kyllä, tutkimuksemme osoitti, että hiljentäminen PRR11 aiheuttanut vähentynyt ilmentyminen CTHRC1 ja lisääntyneen ilmentymisen LXN, osoittaa välistä ylikuulumista PRR11 ja CTHRC1 ja LXN. Lisäksi oli merkittävä korrelaatio PRR11 ilmaisun ja CTHRC1 ja LXN ilmaisun GC yksilöitä. Nämä tulokset viittaavat siihen, PRR11 voisi edistää syövän etenemisen kautta vuorovaikutuksessa CTHRC1 ja LXN. Kuitenkin tarkka mekanismi on vielä tutkittava.

Yhteenvetona PRR11 usein ilmaistu ihmisen GC, ja sen ilmentyminen liittyy huono selviytymisen GC potilaista. Muihin in vitro ja in vivo tutkimukset osoittivat, että pudotus on PRR11 estää GC soluproliferaatiota, pesäkkeitä muodostava kyky, ja kasvaimen kasvua maha- karsinooman solulinjassa. Myöhemmät korrelaatio analyysi paljasti, että PRR11 ilmentyminen on myös korreloi positiivisesti CTHRC1 ilme ja korreloi negatiivisesti LNX ilme, joka tarjoaa vihjeitä mahdollisen mekanismin kasvaimia synnyttävän toiminnon PRR11. Nykyinen tutkimus tarjoaa perustan tulevaisuuden tutkimuksen näiden uusien ennustetekijöitä markkereita, jotka voivat osoittautua hyödyllisiksi tavoitteet havaitseminen, seulonta ja hoito GC potilaista.

tukeminen Information

S1 Kuva. Expression of PRR11 proteiinin mahasyövässä solulinjoissa paljasti Western blotting-analyysi.

Doi: 10,1371 /journal.pone.0128943.s001

(PPTX)

S2 Kuva.

Kaplan-Meier -käyrät säilyminen kestojen potilailla, joilla on mahasyövän mukaan ilmaus CTHRC1 ja LXN (A) Potilaat, joilla CTHRC1 yliekspressio oli lyhyempi selviytymisen kesto kuin ilman CTHRC1 lauseke (53 kk vs. 69 kuukautta; P = 0,019). (B) ei ole merkittävää eroa kokonaiselinaika sairastavien potilaiden välillä LXN ilme ja ilman LXN lauseke (68 kk vs. 55 kuukautta; p = 0,093).

Doi: 10,1371 /journal.pone.0128943.s002

( PPTX) B S1 Taulukko. Down-geenien in PRR11-KO soluissa verrattuna WT solujen QBC939 soluissa.

Doi: 10,1371 /journal.pone.0128943.s003

(DOCX)

S2 Taulukko. Up-geenien in PRR11-KO soluissa verrattuna WT solujen QBC939 soluissa.

Doi: 10,1371 /journal.pone.0128943.s004

(DOCX)

S3 Taulukko. Korrelaatio CTHRC1 ja LXN ilmaisun ja kliinis parametrit mahasyövän

doi: 10,1371 /journal.pone.0128943.s005

(DOC) B

Kiitokset

kiitos Dr. Ying Chen, Changhai sairaala, Shanghai, Kiina, joka ystävällisesti tarjoavat mahasyövässä yksilöitä.