Krooninen sairaus

tiivistelmä

Erot leikkauksen tulokseen ja talteenotto potilaiden välillä alistetaan laparoscopic-avusteisen vs. avoimen leikkauksen ja peräsuolen syöpä (CRC) resektio on laajalti dokumentoitu, mutta ei nimenomaan oikeanpuoleista kasvaimia. Olemme tutkineet immunologisia vasteita eri kirurgisia lähestymistapoja, vertaamalla leikkauksen jälkeinen tietoja samanaikaisesti saadaan systeeminen, paikallinen ja solujen tasolla. Kaikkiaan 25 oikeanpuoleista CRC potilaiden ja verrokkien hallinnoitiin, arvioidaan -jos välitön followup- perinteisen leikkaussalin parametrit ja suuri paneeli sytokiinien plasman, vatsakalvon nesteitä ja lipopolysakkaridi (LPS) stimuloidut ääreisveren mononukleaarisia soluja (PBMC) solukkoviljelmät. Yleinen parempi elpyminen potilaille liikennöidään laparoscopy verrattuna tavanomaista menettelytapaa, kuten analysoimalla tyypillisiä ennen ja jälkeen kirurgisten parametrit, havaittiin. Synkroninen arviointi 12 sytokiinien osoittivat, että ennen leikkausta plasmatasoja tulehdusta edistäviä sytokiineja IL-6, IL-8, IL-1β, TNFa olivat merkittävästi alhaisemmat terveillä luovuttajien versus CRC potilaita ja että tällaiset erot vähitellen kasvaa kasvain vaiheessa. Leikkauksen jälkeen, IL-6 ja IL-8 nousu oli merkittävästi suurempi avoimissa verrattuna laparoskooppisella lähestymistapa vasta CRC varhaisessa vaiheessa. Postsurgical koko paneeli sytokiinien tasot olivat merkittävästi korkeammat vatsakalvon nesteissä verrattuna vastaavaan plasma, mutta ilman merkittäviä eroja riippuen sellainen leikkaus tai taudin vaiheeseen. Sitten havaittiin, että ennen verrattuna vastaaviin leikkauksen jälkeisen peräisin LPS-stimuloitujen PBMC kulttuureissa tuotti korkeampia supernatantti tasoilla koko sytokiinin paneeli. Erityisesti IL-6

in vitro

tuotanto oli merkittävästi korkeampi PBMC-potilaista peräisin altistetaan laparoskooppista vs. avoin väliintuloa, mutta -again- vain CRC varhaisessa vaiheessa sairauden. Tuloksemme siis osoittavat, että Laparoskopia verrattuna avata oikealle resektiota liittyy lyhyempi compromission immunologisen homeostaasin, lähinnä alkuvaiheissa oikean CRC potilailla.

Citation: Ferri M, Rossi Del Monte S, Salerno G , Bocchetti T, Angeletti S, Malisan F, et ai. (2013) talteenotto Immunologiset Homeostasis positiivisesti korreloi Molemmat alkuvaiheet hiiren peräsuolen syövän ja laparoskopinen. PLoS ONE 8 (9): e74455. doi: 10,1371 /journal.pone.0074455

Editor: Kjetil Tasken, University of Oslo, Norja

vastaanotettu: 26 huhtikuu 2013; Hyväksytty: 01 elokuu 2013; Julkaistu: 09 syyskuu 2013

Copyright: © 2013 Ferri ym. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tämä työ oli osittain tuettu avustusta Minstero dell’Instruzione, dell’Università e della Ricerca ja Associazione Italiana per la Ricerca sul Cancro (IG 10272), Italia. Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen. Ei ylimääräistä ulkoista rahoitusta saatiin tähän tutkimukseen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

peräsuolen syöpä (CRC) on kolmas yleisin syy syöpään liittyvien kuolleisuus kaikkialla maailmassa, jonka standardi hoito on edelleen leikkaus [1], [2]. Ilmaantuvuus oikea- verrattuna vasemman puoleinen koolonsyöpien ovat kasvaneet viimeisten kolmen vuosikymmenen aikana niin, että tällä hetkellä oikeanpuoleista kasvaimia edustavat noin 50% kaikista paksusuolen syövän [3], [4]. Lisäksi jotkut kirjoittajat havainnut vaatimattomasti parempi ennuste vasemman puoleinen verrattuna oikeanpuoleinen kasvaimia, vaikka tämä väite jää Kiistanalaista [4] – [6].

Laparoskooppinen segmentaalisen kolektomian on vakiintunut kirurginen tekniikka, että verrattuna perinteisiin avoin kolektomian, on ominaista vähemmän sairastuvuutta, vähemmän leikkauksen jälkeinen kipu, nopea leikkauksen jälkeinen toipuminen ja lyhyen sairaalassa, vaikka molemmat menetelmät liittyvät samalla radikaaleja [7], [8]. Vaikka lyhyen aikavälin hyödyt laparoscopy verrattuna perinteisiin avoimen leikkauksen ovat nyt hyvin tunnustettu hallintaan eri peräsuolen sairauksien, tämä on edelleen kiistanalainen kysymys oikean puolinen kasvaimia [9], [10].

nyt on yleisesti hyväksytty, että laajuus kirurgisen trauman vaikuttaa akuutti tulehdusreaktio [11], joka puolestaan ​​voi olla vastuussa paitsi mahdollisia komplikaatioita (kuten infektiot ja pitkäaikainen vatsan kiinnikkeistä) [12], mutta myös kasvaimen etäpesäkkeiden muodostumista [9], [13], [14]. Vaikka vain harvat ja kiistanalaisia ​​tietoja leikkauksen jälkeisestä toipumisesta on immuuni homeostaasiin CRC potilailla on julkaistu, se on nyt yleisesti hyväksytty, että aikaisempi palauttaminen immuunikompetenssin voivat vaikuttaa taudin uusiutumisen ja ennusteen [9], [13], [15], [16]. Lisäksi viime aikoina on vakuuttavia merkkejä siitä, että immunologinen vaste syövän ja muutoksia solujen immuunijärjestelmän voitaisiin vaikuttaa merkittävästi leikkauksen [17].

Nyt on hyvin tunnettua, että -beyond C- reaktiivinen proteiini (CRP), joka on luultavasti tärkein seerumimarkkerina inflammation- solujen määrä valkosoluja (WBC) ja polymorfonukleaaristen solujen (PMN) on hyvä tuki leikkauksen jälkeen immunologista arviointia syöpäpotilailla [18], [19]. Kuitenkin jopa enemmän kuin vaihtelut solujen määrä, se vaikuttaa hyvin tärkeää tarkistaa mahdollisimman muutoksia niiden toiminnot, kuten salainen toiminta [20]. Erityisesti enemmän perinpohjainen tulehduksellisten prosessien jälkeen vamma voi nykyään tarjoamia arvioinnissa sytokiineja.

Näin ollen, tavoitteena tutkia immunologisia vasteita erilaisia ​​kirurgisia lähestymistapoja potilailla, joille tehdään oikeassa paksusuolen resektiota syövän, suoritimme -For ensimmäistä aikaa vertaamalla lyhyen aikavälin tietoja sytokiinioireyhtymän samanaikaisesti saadaan systeeminen, paikallinen ja solujen tasolla. Järjestämiseksi kattavan arvioinnin postoperatiivisesta profiilien näkyvät ne potilaat, olemme tutkineet sytokiinien pitoisuus sekä plasman ja vatsakalvon kerättyjen nesteiden eri aikoina sen jälkeen, kun tavanomaisen leikkauksen jälkeisen sijoittamisesta viemärijärjestelmä, koska paikallinen vatsakalvon vaste voidaan pitää tärkeä tekijä postsurgical elpyminen [21]. Kuitenkin, kuten aiemmin on raportoitu [22], joka on edelleen vakuuttava indeksi tulehduksellinen tila vieressä leikkaus voisi edustaa analyysi perifeerisen veren mononukleaarisia soluja (PBMC) kyky erittää sytokiineja,

in vitro

, vuonna läsnäollessa (LPS) -välitteisen stimulaatiota.

uusi menetelmä käyttää multiplex biosiruun array samanaikaiseen havaitsemiseen suuren paneelin useiden sytokiinien kunkin yksittäisen näytteen on viime aikoina herättänyt huomattavaa kiinnostusta. [23] Tässä synkroninen arviointi 12 eri sytokiinien suoritettiin, mukaan lukien tulehduksellinen proteiineja, kuten tuumorinekroositekijä-α (TNF-α), IL-1 (α ja β), IL-2, IL-4, IL-6, IL- 10 ja interferoni-γ (IFN-γ), kemokiinit (IL-8, ja monosyyttien kemoattraktantti proteiini-1: MCP-1) ja kasvutekijät (verisuonten endoteelin kasvutekijä VEGF ja epidermaalinen kasvutekijä EGF). Kaikki tiedot lopulta arvioitiin verrattuna clinicobiological ominaisuuksia ja tavanomaisen leikkaussalin parametrit kerätään välittömässä followup.

Yhdessä tuloksemme osoittavat siten, että Laparoskopia verrattuna avata oikealle resektiota liittyy lyhyempi compromission immunologisen homeostaasin, mutta pääasiassa alkuvaiheessa oikealla CRC potilailla.

Materiaalit ja menetelmät

Tutkimusasetelma

Tutkimusasetelma hyväksyi yliopiston eettisen komitean ja kaikki kirjoilla potilaat antoivat tietoon perustuvan suostumuksen (Prot. CE 843/2012). Osallistujat antaa kirjallinen suostumus osallistua tähän tutkimukseen.

Toukokuun 2008 ja huhtikuussa 2011 kaikki potilaat diagnosoidaan oikealla paksusuolensyöpä klo Surgery yksikkö Sant’Andrea sairaalan arvioitiin ja 25 heistä peräkkäin kirjoilla tämän tutkimuksen, joka perustuu seuraaviin kriteereihin.

kelpoisuusvaatimuksia säädetty sairastavien potilaiden ensisijainen koolonadenokarsinoomasolulinjalla, suunniteltu valittavia resektio oikealla kolektomian, otettiin ennen mitään neoadjuvant hoitoa ja alistettiin postsurgical sijoittaminen matalan tyhjiö viemärijärjestelmä varten vatsakalvon nesteiden keräämistä.

Hylkäämiskriteerit olivat: potilaiden aikaisemmista vatsan leikkaus tai syövän ja tulehdussairauksien, alusta sisäisten ja leikkauksen jälkeiset komplikaatiot, The admnistration sisäisten ja leikkauksen jälkeisiä veren verensiirtoa häiritsee immuunivasteen, esi- tai intraoperatiiviseen havaitseminen vatsakalvon carcinomatosis, kiireellistä leikkausta tai vatsan komplikaatioita. Tutkimus koostui 25 potilasta (12 miestä ja 13 naista vuotiaiden 59-83 vuotta), jotka hoidettiin leikkauksen jälkeen (10 altistetaan vähän invasiivisia ja 15 tavanomaiseen avoimet menettelyt) noudattaen samaa protokollaa: (a) sarja verinäytteitä kerätty ennen leikkausta, 6, 24, 48 ja 72 tuntia (h) leikkauksen jälkeen; (B) postsurgical vatsakalvon nesteiden keräys suoritettiin 24 ja 48 tuntia; (C) mononukleaarisolut peräisin ääreisveren (PBMC) ennen ja 24 tuntia leikkauksen jälkeen ja viljeltiin vielä 48 tuntia: sen jälkeen supernatantit kerättiin kutakin viljelmää. Saavutimme kaksi erilaista kontrolliryhmiin. Ensimmäinen sisältyi 10 tervettä vapaaehtoista (5 miestä ja 5 naista vuotiaiden 47-70 vuotta), joiden verinäytteitä otettiin samanaikaisesti ja sarja- annokset sytokiinien ja PBMC viljelmät (kuten yllä). Ylimääräinen kontrolliryhmä koostui 2 täydentävää potilailla, joille tehtiin oikealla kolektomian avoimen leikkauksen ei-neoplastisia ja peräsuolen sairauksia ja sitten käsitelty soveltamalla täsmälleen samoja menettelyjä käytetään syöpäpotilaille, kuten plasma, vatsakalvon nesteiden keräämistä ja PBMC kulttuureissa.

seuraavat parametrit kirjattiin kaikilla potilailla: ikä, sukupuoli, painoindeksi (BMI), American Society of Anesthesiologists (ASA) pisteet, pituus viilto, arvioidun verenhukka, käyttöaika, aika uudelleen suun kautta, määriä kipulääkkeitä käytetään kivun hallintaan, aika ensimmäiseen suolen, aika deambulation, sairaalahoidon. Kliinis potilaiden ominaisuuksiin saatiin patologisen raportit leikkauksen jälkeen. Kasvaimet luokiteltiin ehdottama 6

th painos TNM luokittelu pahanlaatuisten kasvainten International Union Against Cancer (UICC). Potilaat sitten ositettiin kahteen ryhmään sen mukaan, kasvaimen vaiheesta: 13 ”aikaisin” potilaiden I-II vaiheissa tauti ja 12 ”kehittynyt” potilaiden III-IV vaiheissa taudin.

Surgery

Kaikki potilaat kävivät läpi oikealta kolektomian ja jaettiin kaksi mahdollista kirurgista lähestymistapaa: (a) vähän invasiivisia laparoscopic tekniikkaa tai (b) tavanomaisen avoimen leikkauksen. Kaikki asemointia suoritettiin mukaisesti hyväksytyt onkologisesta periaatteiden kanssa samassa määrin resektio molemmille ryhmille, kuten korkea aluksen ligaatio, solmukohtien tila ja riittävä suoliston marginaali. Saat laparoscopic asemointia, pneumoperitoneum- luotiin ja intrakorporeaaliseen lähestymistapa 4 vatsan porttia (1-1,2 cm halkaisijaltaan) käytettiin kirurgista liikkeitä. Suoli oli exteriorized kautta pieni periumbilical viilto (5-7 cm pituus) ja resektion ja anastomosis. Avoin kolektomian oli tehty kautta keskilinjaviilto (16-20 cm pituus) käyttäen tavanomaisia ​​kirurgisia menetelmiä. Kaikilla potilailla palauttaminen suoliston jatkuvuutta toteutettiin kanssa niitata ohut- ja poikittainen anastomosis ja matalan tyhjöpoistojärjestelmä sijoitettiin varten vatsakalvon nesteiden keräämistä.

Kaikki potilaat saivat i.v. morfiinia 24 tuntia leikkauksen jälkeen ja i.v. Steroideihin tulehduskipulääkkeet (NSAID) pyynnöstä. Potilaat saivat ottaa nestettä niiden suolistoäänet tullut kuultavissa, ja he olivat edenneet kiinteää ravintoa sietokyvyn. Mobilisointi ja katetrin poistoa kannusti heti potilas oli fyysisesti kykenee. Potilaat päätetään, kun täysin avohoidossa ja sietävät kiinteää ravintoa.

Blood, Peritoneaalisille ja solut Näytteitä

neljä millilitraa heparinisoidun laskimoverta kerättiin, kuten potilaiden ja verrokkien, ennen ja 6, 24, 48 ja 72 tuntia leikkauksen jälkeen (T0-6-24-48-72). Sentrifugoinnin jälkeen näytteitä säilytettiin -80 ° C: ssa, kunnes Määrityksissä sytokiinien konsentraatio, C-reaktiivisen proteiinin (CRP, akuutin vaiheen markkerin) lukumäärien kokonaismäärä leukosyyttien, lymfosyytit ja polymorfonukleaaristen granulosyyttien.

24 ja 48 tuntia leikkauksen jälkeen, vatsakalvon nesteet kerättiin ja sitten sytokiinin mitattiin, kuten on kuvattu alla. Noin kymmenen millilitraa 24 tunnin verinäytteet kerättiin myös eristää perifeerisen veren mononukleaaristen solujen (PBMC) käyttäen tiheysgradienttisentrifugaatiolla Ficoll-Paque ™ PLUS (Amersham Biosciences /GE Healthcare), joko 25 CRC potilaista tai 10 terveiltä luovuttajilta käytetään valvontaa. Soluja viljeltiin sitten kolmena kappaleena tiheydellä 1 x 10

6 solua /ml 24 kuoppiin /levy (Becton Dickinson, Oxnard, CA) RPMI-1640, johon oli lisätty 10% naudan sikiön seerumia (FCS) ja antibiootteja, ja stimuloitiin 1,0 ug /ml lipopolysakkarideja (LPS) (kaikki reagenssit yhtiöltä Sigma Chemicals Co., St. Louis, MD). Sen jälkeen kun vielä 48 tuntia kulttuurin, solusupernatanttien saatiin ja kerättiin määrittämiseksi sytokiinien pitoisuuden.

perioperatiivinen tulehduksellinen profiilit kaikki potilaat olivat tutkittiin eri aikoina arvioimaan 12 sytokiinien plasmassa, vatsakalvon nesteet ja solujen viljelysupernatantit kerättiin kuten edellä on kuvattu.

määritys sytokiinimäärien

samanaikainen arviointi seuraavien 12 sytokiinien: IL-1α, IL-1β, IL-2, IL-4, IL- 6, IL-8 ja IL-10; verisuonten endoteelin kasvutekijä (VEGF); epidermaalinen kasvutekijä (EGF); tuumorinekroositekijä-α (TNF-α); interferoni-γ (IFN-γ) ja monosyyttien kemoattraktantti proteiini-1 (MCP-1), multiplex biosiruun array Evidence laitteet (Randoxin Labs. Ltd. Crumlin, UK) käytettiin, kuten aikaisemmin on raportoitu [23]. Määritykset suoritettiin plasma, vatsakalvon nesteet ja PBMC viljelmäsupernatanteissa, seuraten valmistajan ohjeita. Analyytin konsentraatio näytteessä laskettiin automaattisesti käyttäen rutiininomaisesti luotu kalibrointikäyriä (Evidence ohjelmiston versio 1.4).

Tilastollinen analyysi

Tulokset ilmaistaan ​​keskiarvona ± keskihajonta (SD), keskiarvo ± keskivirhe (SEM) tai mediaani ja kvartiiliväliä.

tilastollinen merkittävyys määriteltiin

p

0,05.

normaalius tietojen jakelun tarkistettiin Shapiro-Wilk testi, ja ei-normaalisti jakautunut tietoja transformoidaan logaritmisesti ennen analyysiä. Vertailu ja ryhmien sisällä tehtiin Mann-Whitneyn tai Parittomat testejä ja Parilliset tai Wilcoxonin-Pratt testaa vastaavasti. Pearsonin tai Spearmanin korrelaatiokerrointa käytettiin arvioitaessa suhteita muuttujien. Kategorisen muuttujien Chi-square tai Fisherin testiä käytettiin. Tilastollinen analyysi suoritettiin käyttäen Graph Pad Prism 5.0 (GraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA), ja SigmaPlot V.1 1 (Copyright © 2008 Systat Software, Inc.).

Tulokset

Pre- ja Post-kirurginen potilaiden ominaisuudet

25 oikeanpuoleista CRC potilasta -uniformly kerrostunut 13 alussa (I-II) ja 12 edennyt pitkälle (III-IV) sairaus- otettiin varten laparoscopic tai tavanomainen avoin interventio, joka on määritelty kaksi eri ryhmää verrattavissa suhteen numerosity, ikä, sukupuoli, ASA pisteet ja BMI (taulukko 1).

jotta vertailla perioperatiivisen parametrien laparoscopy verrattuna tavanomaisten avoin menettely, pituus viilto, kesto intervention ja verenhukan sekä lähtö- ensimmäisen suolen ja kiinteät ruokavalion, kipulääke vaatimus, aika deambulation ja sairaalahoidon kerättiin (taulukko 2). Kaikkiaan ne osoittavat yleensä paremmin elpyminen potilaille liikennöidään laparoscopy, kuten huomattava ero kaksi kirurgista lähestymistapaa pituinen viilto (

p

0,0001), (

p

= 0,0008), aika kiinteää ravintoa (

p

= 0,005), aika deambulation (

p

= 0,003) ja sairaalahoidon (

p

= 0,0002), vaikka vaikka operatiivinen aika oli pidempi (

p

= 0,0008).

Pre- ja postoperatiivinen määrä WBC ja PMN arvioitiin eri ryhmien ja valvontaa. Ensimmäisessä 72 tuntia leikkauksen jälkeen verrattuna ennen leikkausta analyysin sekä terveille luovuttajille, merkittävän kasvun solujen lukumäärän havaittiin (huippu välillä 6 ja 24 tuntia), joka pyrki normalisoida, riippumatta joko sellainen leikkaus tai taudin vaiheesta . Samoin plasman CRP osoittaa progressiivinen kasvaa, alkaen 6 tuntia ja korkeimmillaan 48 tunnin kuluttua intervention. Kuitenkin, tämä analyysi osoittaa merkittäviä eroja suhteessa erilaisia ​​kirurgisia lähestymistapoja, mutta ei perustuen kasvaimen vaiheessa alaryhmiä. Erityisesti CRP 24 tunnin kuluttua oli huomattavasti suurempi (

p

0,01) potilailla alistetaan avata vs. laparoskopinen, nämä erot -Vaikka aina detectable- johti tilastollisesti merkitsevä muina aikoina ( 6, 48 ja 72 tuntia).

esikirurginen Esitulehduksellisten sytokiinitasoja Suoraan korreloi taudin vaiheesta

jotta voidaan paremmin vertailla kahta eri kirurgisia lähestymistapoja me mitattava samanaikaisesti plasman tasot 12 sytokiinien verestä peräisin CRC potilailla ennen ja jälkeen resektion.

esikirurginen (T0) tasot IL-6, IL-8, IL-1β, TNFa (lähtökohdat) olivat merkitsevästi (

p

0,05) pienempi terveiltä luovuttajilta verrattuna CRC potilaille ja nämä erot vähitellen kasvaa kasvain vaiheessa (Fig. 1), kun taas muiden sytokiinien ei havaittu merkittäviä eroja (tietoja ei esitetty). Erityisesti paitsi TNFa, kaikki mainittu sytokiinien osoittavat merkittävää kasvua lähtötasolle kun vertasimme aikaisin (I-II) pitkälle (III-IV) vaiheissa taudin (

p

0,05) (Fig. 1).

Sytokiinit mitattiin plasmasta kontrolliryhmän (Ctrl) tai 25 CRC potilailla ennen leikkausta (Total), joista 13 aikaisin (I-II) ja 12 edennyt pitkälle (III-IV ) taudin. Arvot ilmaistaan ​​keskiarvona ± SEM ja tilastojen suoritettiin käyttämällä paritonta Studentin t-testiä. P-arvot oletetaan tilastollisesti merkitsevä

p

0,05 (*);

p

0,01 (**);

p

0,001 (***). ns = ei merkitsevä.

Mielenkiintoista, ylimääräisiä verrokeilla kuljettavan ei neoplastisia maha pathologies- näytä sytokiinitasoja samanlainen terveillä vapaaehtoisilla (tuloksia ei ole esitetty). Lisäksi peruslinjoista sytokiinien tasot olivat vertailukelpoisia sekä laparoscopic ja avoin resektio ryhmät (tuloksia ei ole esitetty).

IL-6 ja IL-8 postsurgical plasmassa Ala jälkeen Laparoskopia Verrattuna Avaa Surgery Vain alkuvaiheet Potilaat

Kun vertasimme leikkauksen jälkeisiä pitoisuuksia plasmassa koko sytokiinin paneeli, huomattava ero laparoskooppisia vs. avoin resektio potilaille havaittiin vain IL-6 ja IL-8 (Fig. 2). Yllättäen vaikka tietomme näkyvät erilliset kinetiikka kustakin sytokiinien, havaitsimme, että nousu avoimissa vs. konservatiivinen lähestymistapoja sekä IL-6 ja IL-8 voidaan selvästi havaita vasta CRC alkuvaiheessa, kun taas in kehittynyt tumors- valinta leikkaus ei vielä vaikuta leikkauksen sytokiinitasoja. Erityisesti, postsurgical IL-6 havaitseminen näkyy merkittävä nousu sen jälkeen, kun 24 ja 48 tuntia potilailla altistaa tavanomaisille invasiivisen tekniikan verrattuna laparoscopy, vaikka huippu sytokiinin tuotanto saavutettiin 6 tunnin molemmissa ryhmissä (Fig. 2). Merkittävä välein IL-6 T24 e T48 pääasiassa osallistui alkuvaiheessa, kun taas pitkälle taudin ei ole merkittäviä eroja laparoscopic ja avoimen leikkauksen ryhmissä havaittiin. Lisäksi, samalla tavalla kuin IL-6, vaikka IL-8 postsurgical tasot olivat yleensä suurempi avoin verrattuna laparoskopinen, mutta tämä ero johti merkittävästi 48 tuntiin ja jälleen, erityisesti alkuvaiheessa taudin (Fig. 2) . Erityisesti progressiivinen lasku IL-8 havaittiin vasta 48 tunnin kuluttua laparoscopy mutta ei sen jälkeen invasiivisia intervention (Fig. 2).

Pre- (T0) postoperatiivisesti (T6-48) IL-6 ja IL -8 tasot mitattiin plasmasta 25 CRC potilasta ennen leikkausta (vaihe I-IV), joista 13 aikaisin (vaiheen I-II) ja 12 kehittyneet (III-IV) taudin vaiheeseen. Arvot ilmaistaan ​​keskiarvona ± SEM ja tilastojen suoritettiin käyttämällä paritonta Studentin t-testiä. P-arvot oletetaan tilastollisesti merkitsevä

p

0,05 (*).

Kahden muun sytokiineja, jotka olivat merkittävästi erilaiset perustason ennen leikkausta havaitseminen, (IL-1β ja TNFa), ei merkittäviä muutoksia yksinkertainen verrattuna tavanomaisella kirurgisella tekniikalla on havaittu (tuloksia ei ole esitetty). Tasot muut kahdeksan sytokiinien, joiden esikirurginen arvot CRC ja muiden neoplastisten potilaiden eivät olleet merkittävästi erilaiset kuin terveiden luovuttajien, lisääntynyt jälkeen kasvaimen resektion, mutta riippumatta siitä, millainen leikkaus tai sairauden vaiheessa (tuloksia ei esitetty). Mielenkiintoista, IL-6 kasvaa suoraan korreloi CRP tasoja, joko 24 h (r

2 = 0,51 kanssa

p

= 0,0086) tai 48 tuntia (r

2 = 0,49 kanssa

p

= 0,012) leikkauksen jälkeen, kun taas jäljellä oleva plasman sytokiinien ei suhteet CRP havaittiin (tuloksia ei ole esitetty).

Sytokiinitasot CRC potilaiden vatsakalvon kerättyjen nesteiden 24 ja 48 tuntia leikkauksen jälkeen olivat myös mitattu. Merkittävä kasvu sytokiinin pitoisuuden verrattuna vastaaviin plasman aina 400-kertainen lisäys IL-6-2-kertainen nousu MCP-1 (tuloksia ei ole esitetty) huomautettiin. Kuitenkin mitään merkittäviä eroja koko paneelin sytokiinien -Riippuen ajallaan (T24 ja T48) ja laji leikkaus tai vaiheen taudista koskaan havaittu (tuloksia ei ole esitetty).

IL-6

vuonna vitro

Tuotanto PBMC, kun LPS stimulointi, on merkittävästi lisääntynyt jälkeen Laparoskopia, ainoastaan ​​alkuvaiheet Disease

kapasiteetti PBMC peräisin terveiltä luovuttajilta, laparoscopic tai avata leikkauspotilas tuottamaan sytokiineja analysoitiin edelleen in vitro mittaamalla sytokiinien supernatantista LPS-stimuloitujen PBMC: sekä ennen 24 tuntia leikkauksen jälkeen. Ensin havaittiin korkeampi sytokiinien tasot supernatanteissa kerätty LPS-stimuloitujen PBMC: verrattuna stimuloituihin soluviljelmiin peräisin verinäytteestä, joko terveiltä luovuttajilta tai CRC potilailla ennen ja 24 tuntia leikkauksen jälkeen (tuloksia ei ole esitetty). Sitten esikirurgisen verrattuna vastaavaan leikkauksesta johdettu soluviljelmissä tuotti korkeampia supernatantti tasoilla koko sytokiinin paneeli (tuloksia ei ole esitetty). Sisällä esikirurginen näytteet, sytokiinien tuotanto oli suurempi supernatanteista, jotka ovat peräisin varhaisessa vaiheessa kuin ne, jotka ovat peräisin pitkälle CRC (tuloksia ei ole esitetty). Toisaalta, postsurgical PBMC johdettu CRC potilaat altistetaan laparoscopic vs. avoin resektio, tuottaa suurempia määriä sytokiinien ja tehostuminen LPS stimulaation (aina 15-kertainen lisäys IL-6, 2,5-kertainen lisäys MCP-1 LPS-stimuloiduissa vs stimuloimattomasta näytettä). Erityisesti IL-6 havaitseminen supernatanteissa viljellyistä PBMC-johdettu CRC potilaista 24 tuntia leikkauksen jälkeen on osoitti, kuviossa 3, on enemmän edustaa koko paneelin sytokiinien. LPS indusoi huomattavaa parannusta sytokiinin tuotannon joko sen jälkeen, kun laparoskooppista tai avoimen intervention, vaikka tehokkuus stimulaatio oli merkittävä supernatanteissa PBMC-soluja, jotka ovat peräisin potilaista suoritettiin laparascopic vs avoimen leikkauksen (

p

0,01 vs

p

0,05) (Fig. 3).

IL-6: n tasot mitattiin supernatanteista kerättiin LPS-stimuloitujen PMBC kulttuureissa. Näytteitä on johdettu 25 CRC potilaista (yhteensä, vaihe I-IV), joista 13 aikaisin (vaiheen I-II) ja 12 kehittyneet (III-IV) taudin vaiheeseen. Arvot ilmaistaan ​​keskiarvona ± SEM ja tilastojen suoritettiin käyttämällä paritonta Studentin t-testiä. P-arvot oletetaan tilastollisesti merkitsevä

p

0,05 (*);

p

0,01 (**);

p

0,001 (***). ns = ei merkitsevä.

On huomattava, että kun vertasimme LPS-välittyvät vaikutukset in postsurgical johdetut viljelmät varhaisessa versus pitkälle taudin merkittävä stimulaatio IL-6 eritys on havaittu yksinomaan alussa (I-II), kun taas mitään merkittäviä eroja havaittu myöhemmissä vaiheissa taudin, joiden arvot (± LPS) oli aina pienempi verrattuna vastaavaan alkuvaiheessa (Fig. 3). Lisäksi LPS stimuloiva vaikutus oli merkittävämpi soluissa, jotka ovat peräisin laparoskooppisten (

p

0,01) verrattuna avata (

p

0,05) menettelyä, CRC potilailla, joilla on varhaisessa vaiheessa taudin (I-II), nämä erot eivät olleet merkittäviä, kun laparoscopy verrattiin avata kirurgian ryhmän potilailla vaikuttaa CRC klo vaiheissa (III-IV) (Fig. 3). Kun verrataan käsittelemättömään kontrolliin ja LPS stimuloi supernatantit, ei havaittu merkittäviä eroja kontrolleissa avoimista ja laparoskopinen, kun taas merkittävä kasvu LPS stimuloiduissa soluissa, jotka ovat peräisin potilaista altistetaan laparoscopic vs. avoin interventio havaittu (

p

0,01) (Fig. 3).

Samalla tavoin IL-6, myös IL-8, IL-1β, TNFa ja MCP-1, LPS-indusoitu merkittävä nousu (

p

0,05) supernatanteista viljellyissä soluissa on havaittu, mutta riippumatta sellainen leikkaus, ja vaihe, CRC potilaista (dataa ei esitetty). Muissa jäljellä sytokiinien havaittu supernatanteissa viljellyistä PBMC syöpäpotilaita, LPS stimulaatio ei tuottanut mitään merkittävää kasvua tuotannon ja lisäksi mitään merkittäviä eroja ei ole havaittu vertaamalla aiheista läpikäynyt konservatiivinen tai avoimen leikkauksen ja laakerin aikaisin tai pitkälle taudin (tietoja ei esitetty).

keskustelu

tässä tutkimuksessa osoitamme ensimmäistä kertaa samanaikaisesti analyysin 12 sytokiinien systeemisiä (veri), paikallinen (vatsakalvon nesteitä) ja solujen (supernatantit soluviljelmistä) näytteet peräisin oikealta paksusuolen syöpäpotilaiden altistetaan erilaisia ​​kirurgisia lähestymistapoja tuumoriresektion. 25 potilasta kärsivät syöpä oikean paksusuolen, 13 laakeri alkuvaiheessa ja 12 pitkälle taudin, tarkoitus invasiivisia laparoskopiassa tai tavanomainen avoin interventio, tutkittiin lyhyellä aikavälillä ennen ja leikkauksen jälkeen sytokiinituotannosta. Itse asiassa, vaikka kausaalinen yhteys paksusuolen syövän ja tulehdus on vakiintunut [24], mahdollisia vaikutuksia sytokiinien lyhytaikaisia ​​vasteita potilailla alistetaan erilaisia ​​kirurgisia menettelyjä oikeaan peräsuolen syöpä resektio ei ole vielä selvitetty. Tuloksemme osoittavat, että elpyminen immuuni homeostaasiin CRC potilaita altistetaan kolektomian voi vain liittyä sellainen leikkaus [25], mutta myös vaiheessa kasvaintauti.

analyysi perinteisen akuutin vaiheen merkkiaineita osoittaa -as odotetaan [2], [20], [25], [26] – merkittävä postoperatiivinen parannusta WBC ja PMN numero, 72 tunnin kuluttua leikkauksesta, joka pyrki asteittain normalisoida, mutta riippumatta joko sellainen leikkaus tai taudin vaiheeseen. Päinvastoin, CRP välein alkaen 6 tuntia ja korkeimmillaan 48 tunnin kuluttua intervention ja on enemmän koholla avoimessa versus laparoskopinen, esiintyi merkittävästi erilainen suhteessa sellaista intervention (odotetusti vrt. [2], [27] – [29]), mutta ei perustuen kasvaimen vaiheessa alaryhmiä. Vaikka nämä markkereita pidetään vakuuttava indeksi akuuttia tulehdusreaktiota kirurgisen trauman, lisätutkimukset ovat tarpeen luoda rooli erilaisia ​​kirurgisia lähestymistapoja määritettäessä -ei ainoastaan ​​leikkauksen jälkeisestä toipumisesta immuunisolujen functioning- vaan yleisemmin lopputulos CRC potilailla [24]. Tällä Näiden havaintojen postsurgical lyhyen aikavälin arviointi systeemistä, paikallisen ja solujen sytokiinien profiili voi tulla itsenäinen muuttuja ennustetekijöiden arvioinnissa oikean paksusuolensyöpä vaikuttanut potilaille. Itse asiassa, kuten aikaisemmin on raportoitu [19], [30], [31], jotkin sytokiinit voidaan pitää ei ainoastaan ​​biomarkkeri akuutin vaiheen vaste, liittyvät tiiviisti astetta kirurgisen trauman, mutta mahdollisesti myös voi vaikuttaa lyhyen aikavälin postoperatiivinen tulos [32], palauttaminen immuuni homeostaasiin [13], ilmaantuvuus infektiokomplikaatioita ja paikallisen uusiutumisen [14], [33] ja pitkän aikavälin onkologisesta tuloksia [16].

Meidän esikirurginen analyysi osoittaa, että jotkut sytokiinitasoja (IL-6, IL-8, IL-1β ja TNFa) olivat merkittävästi korkeammat plasmassa sairastuneiden potilaiden peräsuolen syöpä verrattuna terveiden luovuttajien ja nämä erot asteittain lisätä pitkälle kasvaimen vaiheissa. Tämä ei ole yllättävää, koska useat tutkimukset osoittivat suoraa korrelaatiota kasvaa pitoisuuksina plasmassa proinflammatoristen sytokiinien ja peräsuolen kasvaimen vaiheen ja etenemisen, erityisesti IL-6, jonka ilmentymistä usein lisääntynyt syöpäsairaus ja pitää ennustaja huono tulos [23] , [24], [34] – [41]. Tuloksemme vahvistivat aikaisempien tutkimusten osoittaa suhdetta IL-6 eritystä (korkeimmillaan 6 tunnin kuluttua leikkauksesta) ja seuraavat CRP tuotanto (korkeimmillaan 48 tunnin kuluttua leikkauksesta) [27], [42]. Vaikka nouseva lausunnot roolia tukevat CRP ennustajana alemman eloonjäämisluvut potilailla, joilla on useita syöpiä, kuten CRC [43], ei lopullisia tuloksia on julkaistu koskien sen todellisen arvon itsenäisenä muuttujan postsurgical hyödyntämistä [29]. Kuitenkin aiemmat raportit osoittivat joitakin ristiriitaisia ​​havaintoja plasman sytokiinien esikirurginen tasoilla, luultavasti johtuivat eroista suoritetaan menetelmien [23].

On ehdotettu, että postsurgical plasman sytokiinien tasoja voidaan pitää tarkkaa merkkiaine yleinen akuutin vaiheen vaste ja käytetään seurata vaikutuksia leikkauksen, joka on mahdollisesti erilainen mukaan erillisten operatiiviset menettelyt [20], [44], [45].