Krooninen sairaus

tiivistelmä

NF-KB signaloinnin tärkeä rooli kasvainten solujen proliferaatiota ja eloonjäämistä, angiogeneesiä, invaasio, etäpesäke ja huumeiden /säteilyn kestävyys. Yhdistelmähoitoa johon NF-KB-reitin estäminen on houkutteleva strategia edenneen muotojen kilpirauhassyöpä. Tämä tutkimus suunniteltiin testaamaan tehokkuutta NF-KB-reitin inhibitio yhdessä sytotoksisen kemoterapian avulla doketakseli ja ionisoivan säteilyn

in vitro

malleissa kilpirauhassyövän. Huomasimme, että vaikka molemmat doketakseli ja ionisoivaa säteilyä aktivoidaan NF-KB signalointia kilpirauhasen syöpäsoluja, ei ollut synergistinen vaikutus solujen lisääntymistä ja /tai ohjelmoidun solukuoleman joko geneettisiä (transduktio määräävän negatiivisen mutantin muodossa IκBα) tai farmakologisen ( proteasomin estäjä bortetsomibi ja IKKβ estäjä GO-Y030) estämällä NF-KB-reitin kilpirauhassyöpä solulinjoissa BCPAP, 8505C, THJ16T ja SW1736. Doketakseli bortetsomibin synergistisesti laski

in vitro

hyökkäystä 8505C soluja, mutta ei muita solulinjoja. Seulonta paneeli kliinisesti merkittävää kohdennettujen hoitomuotojen synergiaa geneettisen NF-KB-esto huomattavaan lisääntymiseen /sytotoksisuuskoetta tunnistettu histonideasetylaasi (HDAC) estäjä suberoylanilide hydroksaamihappo (SAHA) mahdollisena. Kuitenkin synergistinen vaikutus varmistui vasta BCPAP soluissa. Nämä tulokset osoittavat, että NF-KB-inhibiittorit ovat todennäköisesti ole hyötyä, koska yhdistelmähoito taksaanin solunsalpaajahoidosta, ulkoista sädehoitoa tai radiojodin hoito. Voi olla ainutlaatuinen olosuhteissa, joissa NF-KB: n estäjät voidaan pitää yhdessä doketakselin kanssa vähentää kasvaimen invaasion tai yhdessä HDAC-estäjien kasvaimen kasvua vähentävästi, mutta tämä ei näytä olevan yhdistelmähoidon, joka voidaan laajasti soveltaa potilailla, joilla on kehittynyt kilpirauhassyöpä. Lisätutkimuksia voi tunnistaa, mitkä potilasryhmissä /kasvaimet voivat vastata tähän terapeuttiseen lähestymistapaan.

Citation: Pozdeyev N, Berlinberg A, Zhou Q, Wuensch K, Shibata H, Wood WM, et al. (2015) Targeting NF-KB Pathway kuin yhdistelmähoitoa Advanced kilpirauhassyöpä. PLoS ONE 10 (8): e0134901. doi: 10,1371 /journal.pone.0134901

Editor: Jacques Emile Dumont, Université libre de Bruxelles (ULB), BELGIA

vastaanotettu: 06 heinäkuu 2015; Hyväksytty: 10. heinäkuuta 2015 Julkaistu: 11 elokuu 2015

Copyright: © 2015 Pozdeyev et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään

Data Saatavuus: kaikki asiaankuuluvat tiedot ovat paperi.

Rahoitus: Tämä työ rahoittivat NIH /NCI tutkimus apurahan R01 CA100560 (www.nih.gov) ja BRH, jonka Mary Rossick Kern ja Jerome H. Kern Endowment hormonaalisia kasvaimet Research ja BRH, ja jota hormonaalisia Fellow Foundation tutkimusta avustus (www.endocrinefellows.org) NP. Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Kilpirauhasen syöpä on merkittävä kansanterveydellinen ongelma 60000 arvioitu uutta tapausta aiheuttaa noin 2000 kuolemantapausta Yhdysvalloissa vuonna 2015 [1]. Anaplastic kilpirauhassyöpä (ATC) on tappavin muoto kilpirauhassyöpä mediaani selviytymisen 5 kuukautta ja 20% 1 vuoden eloonjääminen huolimatta aggressiivinen hallinnan yhdistelmä kirurgian, säteilyn ja kemoterapiaa [2]. Solunsalpaajahoito dosetakseliannoksella on yksi harvoista hoitoja, jotka osoittivat rohkaisevia tuloksia ATC, varsinkin yhdistettynä sädehoitoon [3].

NF-KB on perheen transkriptiotekijöiden sekaantunut eri näkökohtia tuumoribiologiassa kuten solujen lisääntymistä, eloonjääntiä, angiogeneesiä, invaasio, etäpesäke ja lääkeresistenssin [4]. NF-KB-signaloinnin todettiin konstitutiivisesti aktivoitua maksasolukarsinoomassa [5], paksusuolen ja peräsuolen syövän [6], rintasyöpä [7], eturauhassyöpä [8], ja muut kiinteät ja hematologisia syöpiä [4]. Syöpälääkkeet ja ionisoivaa säteilyä upregulate NF-KB-reitin, joka johtaa hoidon kehittämiseen resistenssin [9,10]. Tämä johti merkittävään pyrkimys kehittää NF-KB-inhibiittorit ja tutkimus niiden tehokkuudesta syöpien hoitoon sekä kokeellisissa malleissa ja kliinisissä kokeissa [4,11].

Kuten on osoitettu muiden kasvainten, kilpirauhasen syöpä kudos on lisääntyneen ekspression NF-KB: n transkription tekijöitä, jotka on liitetty suuremman kasvaimen kokoa, läsnä solmukohtien etäpesäkkeitä, ekstratyroidaalisen laajennus ja

BRAF V600E

mutaatio [12-15]. Rooli NF-KB signalointia kilpirauhasen syöpäsolujen kasvua, muuttoliike, invaasio ja angiogeneesi on osoitettu [16-18]. Synergistinen vaikutus doketakselin ja NF-KB-reitin estäjä kurkumiinista lisääntymistä ja apoptoosia ATC solulinjan 8505C on raportoitu [19]. Yhdistelmä I

131 ja NF-KB: n eston kanssa joko IKB kinaasi (IKK) estäjä Bay 11-7082 tai p65 siRNA aiheutti suurempaa laskua kilpirauhassyövän kasvun

in vitro

[20] ja kylki ksenograftimallia hiirissä [21] kuin kumpikaan hoito yksinään. Rohkaisemana nämä havainnot suunnittelimme tämän tutkimuksen tavoitteena oli systemaattisesti tutkia hyödyt yhdistelmähoitoa joko dosetakselilla tai ionisoivan säteilyn ja NF-KB-reitin estäminen käyttämällä

in vitro

malleissa kilpirauhassyövän.

menetelmät

solulinjat ja geneettisellä rakenteella

Tämä tutkimus suoritettiin käyttäen papillaarinen kilpirauhassyövän (PTC) solulinjassa BCPAP ja kolme ATC solulinjoissa 8505C, THJ16T ja SW1736 jotka on validoitu lyhyt tandem toista profilointi [22,23]. Solulinjoja muokattu ilmentämään vallitsevan negatiivisen mutantin muodossa IκBα (mIκBα), joka on resistentti proteasomaalisten hajoamista [24]. Kertyminen valtavasti ylimääräistä sytoplasmista mIκBα estää tumaansiirtymiseen NF-KB transkriptiotekijöiden sammuttamista kanoninen NF-KB signalointi. Sukupolven pQCXIP-mIκBα konstrukti, transduktio ja antibiootti valinta on kuvattu yksityiskohtaisesti muualla [17]. Fenotyypin kustakin solulinjasta testattiin mittaamalla kertyminen IκBα proteiinin Western blot ja toiminnallisesti arvioimalla NF-KB-transkriptiotekijän p65 sitoutumisen KB: n DNA: n konsensus-sivustot (TransAm NFKB p65 ELISA kit, Active Motif). Tuumorinekroositekijä α (TNFa) käytettiin positiivisena kontrollina NF-KB: n aktivaatiota. Olemme osoittaneet, että mIκBα transduktion johtaa IκBα keskittymisen ja eston sekä lähtötilanteesta ja TNFa-stimuloiduista p65 DNA: ta sitova BCPAP-soluissa (kuvio 1) ja muut kilpirauhassyöpä solulinjat (tietoja ei esitetty).

Tulokset on normalisoitu ajoneuvoa käsitellyn vektorin ryhmässä. * P 0,01 vaikutuksen TNFa vektorin ryhmässä (kaksisuuntainen ANOVA seurasi Bonferroni posttest).

kätevästi seurata NF-KB-reitin aktiivisuuden rakensimme lentivirusvektorilla sisältää

Renilla

lusiferaasireportteri- ajaa minimaalisella

c-fos

promoottorin kontrollin alaisena neljä ylävirran NF-KB: n vaste-elementtien (KB). Tämä vektori transdusoitiin BCPAP ja 8505C kilpirauhasen syöpäsoluja jo ekspressoivat

Monkey

lusiferaasia ohjaa konstitutiivinen CMV-promoottori ei-NF-KB-säänneltyjen ohjaus. Transduktion jälkeen ja antibiootti valinta puromysiini solut arvioitiin ilmentymistä sekä

Firefly

ja

Renilla

lusiferaasiaktiivisuutta (kuvio 2, Dual-Luciferase Reporter Assay System, Promega).

Proteasome estäjä bortetsomibin ja IKK monimutkainen estäjä GO-Y030 vastapainoksi NF-KB: n aktivoitumisen doketakselia. Soluja inkuboitiin lääkeaineiden kanssa 48 h ennen reportteri lusiferaasiaktiivisuuden mittauksia. Erot ryhmien välillä ovat erittäin merkitseviä (p 0,0001, yksisuuntainen ANOVA). Tähdet osoittavat merkittävää muutosta (p 0,05, Newman-Keuls posttest) verrattuna vastaavaan verrokkiryhmään (TNFa, dosetakseli yksinään ja bortetsomibia yksinään verrattiin ajoneuvoon doketakselin ja bortetsomibin /GO-Y030 yhdistelmiä verrattiin dosetakselia ainoa ryhmä) .

Lääkkeet ja sädehoidot

Useimmat farmakologiset aineet saatiin jauheen muodossa LC Labs ja Sellekchem entistetään DMSO. Lopullinen DMSO-konsentraatio on elatusaineet ei ylittänyt 0,05%. Proteasomaalisten estäjä bortetsomibin, FDA hyväksytty lääke, joka estää NF-KB-reitin estämällä IκBα proteolyysin [25], käytettiin tutkittaessa lääkkeiden yhteisvaikutusta. Kokeellinen IKKβ estäjä GO-Y030 [26] toimi vaihtoehtona farmakologinen NF-KB signalointi estäjän ja saatiin tri Shibata laboratoriossa (Akita, Japani).

X-ray ionisoivaa säteilyä annettiin annoksena 2 ja 5 Gy jota RS2000 röntgen säteilyttäjällä (Rad Source Technologies).

Solun sytotoksisuus /leviämisen /luelinkykymäärityksillä

lääkkeiden vaikutuksia, ionisoivan säteilyn ja geenimuuntelun tuumorisoluihin selviytyminen ja lisääntymistä mitattiin 72 h sulforodamiini B määritys (SRB) [27] sekä suora laskenta elävien solujen lukumäärä käyttäen Vi-CELL XR elinkykyyn Analyzer (Beckman Coulter).

in vitro

invaasiomääritys

kilpirauhassyöpä-soluja ympättiin tiheydellä 5×10

6 solua levyä kohti, ja kasvatettiin RPMI-1640-alusta täydennettynä 5% FBS: ssa 6 tuntia. Media imettiin sitten ja korvataan-alusta täydennettynä 0,1% FBS: ää, ja soluja inkuboitiin 18 tunnin ajan. Solut kerättiin ja 1×10

6 solua ympättiin yläkammiot Matrigel päällystetyn transwell kammiot (24-kuoppaiset, 8 um huokoskoko; BD Biosciences) RPMI-1640: 0,1% FBS. Määritykset suoritettiin kahtena kappaleena. Solut hyökkäsi alempaan kammioon, joka sisältää mediaa 10% FBS. 18 tunnin jälkeen, ei-valtaavat soluja yläkammiossa heitettiin pois, ja tunkeutuvat solut kiinnitettiin metanolilla, värjättiin 3 ug /ml 4 ’, 6-diamino-2-fenyyli (DAPI; Invitrogen) ja laskettiin viisi mikroskooppikentäs- alle 10-kertainen suurennus käyttäen Metamorph ohjelmistoa (Molecular Devices).

seulonta kliinisesti merkittävää kohdennettuja lääkkeitä synergiaa NF-KB-reitin estäminen

leviämisen ilmentävien solujen mIκBα (kuten geneettinen malli NF -κB reitin esto, osoitettiin tuottavan erittäin tehokas fenotyypin (kuvio 1)) määritettiin SRB määrityksiä. Kolme kilpirauhassyöpä solulinjoja altistettiin useita sytotoksisia ja kohdennettuja hoitoja. 15 kohdistettuja hoitoja käytetään seulontaan, 12 oli estäjät, DAPT on γ-sekretaasi-inhibiittori, desitabiini on DNA methyltrasferase estäjä, ja suberoylanilide hydroksaamihappo (SAHA, vorinostat) estää histonideasetylaaseja. Kahdeksan pisteen annos-vaste-käyrät saatiin ja puoli maksimaalinen estävä lääkepitoisuus (IC

50) laskettiin sovittamalla kokeelliset tiedot käyttämällä 4 parametrin logistiseen epälineaarinen regressio tuella mittatilaustyönä R script. Osumien tunnistettiin vertaamalla IC

50 kontrollivektorille ja mIκBα transdusoidut solut ja arvioitiin edelleen käyttäen SRB määritystä ja elinkelpoisten solujen laskenta.

kaspaasi-3/7 määritys

Solut ympättiin 96-kuoppaisille levyille kahtena kappaleena tiheydellä 7.5×10

4 solua /kuoppa RPMI-1640-alusta täydennettynä 5% naudan sikiön seerumia (FBS). Yön yli inkuboinnin lääkkeiden lisättiin joko yksinään tai yhdistelmänä 24 tunnin ajan ja FBS median muutettiin 0,1%. Kaspaasi-3/7-aktiivisuus arvioitiin käyttäen luminesenssi-pohjainen kaspaasi määritys mukaan valmistajan ohjeiden (kaspaasi GloTM 3/7 Pitoisuus, GloMax Multimode Reader, Promega).

Tilastolliset ja synergia laskelmat

Tilastolliset laskelmat tehtiin käyttäen GraphPad Prism. Erityinen analyysimenetelmä käytetään sekä laskettu p-arvot on esitetty vastaava luku legenda. Data ilmaistaan ​​keskiarvona ± keskihajonta.

Bliss riippumattomuuden indeksi (BI) ja yhdistelmä-indeksi (CI) laskettiin mittana synergistisen vaikutuksen. BI ja CI 0,8 hyväksyttiin osoitukseksi synergiaa. BI laskettiin käyttäen seuraavaa kaavaa: BI = ((F

a + F

b) – (F

a * F

b)) /F

ab, missä F

a on vaikutus lääkkeen tai sädehoidon; F

b on vaikutus farmakologisen NF-KB: n estäjän tai mIκBα; (F

a + F

b) – (F

a * F

b) on ennustettu summa vaikutuksia kahdessa hoitojen; F

ab on todellinen vaikutus yhdistelmähoidon havaittu kokeellisesti.

Drug /lääkesynergiaa arvioitiin myös Chou yhdistelmä indeksi (CI) [28] avulla Compusyn ohjelmisto (http: //www. combosyn.com). Näissä laskelmissa rakensimme 8 pisteen annos-vaste käyrät yhden huumeiden ja lääkkeiden yhdistelmä. CI IC

50 raportoidaan.

Tulokset

Doketakseli ja ionisoiva säteily aktivoi NF-KB-reitin kilpirauhasen syöpäsoluja

Käyttämällä BCPAP ja 8505C solujen muokattu ilmentämään

Renilla

lusiferaasia NF-KB: n aktiivisuus toimittaja kuin lukeman NF-KB: n aktiivisuutta, sekä positiivinen kontrolli 25 ng /ml TNFa: aa ja 5 nM dosetakseli 48 tuntia lisäsi NF-KB reportteriaktiivisuutta (kuvio 2). Vaikutus Doketakselin oli suurempi BCPAP soluissa (kuvio 2A ja 2B). Farmakologiset NF-KB-reitin inhibiittorit olivat tehokkaita kumoamaan doketakselin aiheuttama nousu reportterin aktiivisuuden pitoisuuksissa ≥ 5 nM ja ≥ 250 nM Bortetsomibin (kuvio 2A ja 2C) ja GO-Y030 (kuvio 2B ja 2D), tässä järjestyksessä.

aika tietysti vaikutuksen ionisoivan säteilyn NF-KB aktiivisuus lusiferaasireportteri vuonna BCPAP ja 8505C soluissa esitetään kuviossa 3A ja 3B. Samanlaisia ​​Dosetakseliin NF-KB-reitin aktivoitiin jälkeen ≥ 48 h altistumista ionisoivalle säteilylle. Tämä havainto vahvistettiin käyttäen funktionaalista määritystä joka mitattiin p65 sitoutumalla DNA-segmenttejä, jotka sisältävät NF-KB sekvenssit BCPAP soluissa (kuvio 3C). Vuonna mIκBα yli-ilmentävät solut, sekä perustason ja säteilyn aiheuttamien NF-KB signalointi estettiin.

p65 DNA: ta sitovan koe suoritettiin 72 tunnin kuluttua säteilyaltistusta. Aineisto on normalisoitu ei säteilytetty ryhmä (kerrallaan 0 h paneelit A ja B). * P 0,05, (kaksisuuntainen ANOVA, Bonferronin posttest).

Puute synergiavaikutuksesta doketakselia tai ionisoivan säteilyn ja farmakologisen tai geneettinen NF-KB-reitin estäminen kilpirauhasen syöpäsoluja lisääntymistä /kuolema

seuraava joukko kokeita testattiin hypoteesia, että vaikutus kliinisesti merkittäviä hoitoja, kuten doketakselin ja ionisoivan säteilyn tiedetään aktivoivan NF-KB: n signalointi voimistaa farmakologinen (bortetsomibin ja GO-Y030) tai geneettinen (mIκBα ) NF-KB: n signaloinnin eston. Ei synergia havaittiin riippumatta synergiaa laskentamenetelmä, sytotoksisuus /solunelinkykyisyysmääritys tai kilpirauhasen syöpä-solulinjasta (taulukko 1). Samoin ei synergia havaittiin, kun ionisoivaa säteilyä 2 ja 5 Gy annoksia yhdistettiin NF-KB salpauksesta mIκBα 48 tai 72 h BCPAP ja SW1736-soluissa (taulukko 2).

Doketakseli ei aktivoi kaspaasi-3/7 kilpirauhasen syöpäsoluja

NF-KB: n signaloinnin inhibition herkistää solut indusoiman apoptoosin sytokiinien, kuten TNFa: n [24]. On raportoitu, että doketakseli myös indusoi apoptoosia kilpirauhassyöpä soluissa [29], mutta se ei näytä synergiaa NF-KB-reitin esto meidän kokeita. Kun tämä ristiriita huomioon päätimme arvioida, doketakseli indusoi apoptoosia mallimme. Toisin kuin julkaistut tiedot, dosetakseli, samalla kun se on erittäin tehokas SRB-määritys (IC

50 pikomolaarisia välillä, tietoja ei ole esitetty), ei onnistunut indusoimaan kaspaasi-3/7 aktiivisuutta BCPAP ja 8505C-soluissa (kuvio 4). Bortetsomibi, käytettiin positiivisena kontrollina, annosriippuvaisesti aktivoitu kaspaasi-3/7 näissä solulinjoissa.

Asteriskit viittaavat tilastollisen merkitsevyyden verrattuna alimman annoksen ryhmässä (p 0,05, yksisuuntainen ANOVA, Newman-Keuls posttest).

vaikutus doketakselin ja bortetsomibin kilpirauhasen syöpäsoluinvaasiota

in vitro

vaikutusta dosetakselin /bortetsomibin yhdistelmä on monimutkaisempi näkökohta tuumoribiologiassa, matriisi invaasio, testattiin (kuvio 5). Lääkeyhdistelmä synergistisesti inhiboi 8505C kilpirauhasen syöpäsoluinvaasiota

in vitro

(BI 0,47 viittaa kohtalaisesta synergia), mutta ei vaikuttanut hyökkäystä THJ16T soluja. Suuntaus kohti väheni hyökkäyksen BCPAP soluissa jälkeen dosetakselin /bortetsomibilla yhdistelmä ei ollut merkittävä.

Tähdet osoittavat merkittävää vaikutusta lääkeaineen yhdistelmän (p 0,05, toistuvissa mittauksissa yksisuuntainen ANOVA, Newman-Keuls posttest ). Vaikutus huumeiden hyökkäys BCPAP ja THJ16T soluja ei ollut merkittävä. BI-Bliss itsenäisyyttä indeksi.

Seulonta lääkkeiden sytotoksista /antiproliferatiivinen vaikutus kilpirauhasen syöpäsoluihin voimistaa NF-KB-reitin inhibitio mIκBα

Olemme laajentaneet pyrkimyksiä löytää lääke /NF-KB esto synergia suorittamalla seulonta käyttämällä sarjaa kliinisesti merkittävää kohdennettuja lääkkeitä. mIκBα valittiin ”puhdas” menetelmä NF-KB-reitin inhibitio, joka on vähemmän todennäköisesti tuottaa off-tavoite vaikutuksia verrattuna farmakologisen NF-KB: n estäjät. Kolme solulinjoja muokattu ilmentämään mIκBα ja fenotyyppi vahvistettiin, kuten on kuvattu menetelmät-osastossa ja näytetään kuviossa 1. SRB-määritys IC

50-arvot on esitetty yhteenvetona taulukossa 3. Viisi lääkkeet (cabozantinib, dabrafenib, DAPT , selumetinib ja vandetanib) olivat tehottomia maksimaalisesti testatut pitoisuudet ja IC

50 ei voitu laskea. Everolimuusi oli kaikkein voimakas lääke. Niistä kolme solulinjojen BCPAP oli herkempi ja 8505C vastustuskykyisempiä yleistä ja tämä korreloi nopeuden lisääntymistä (data esitetty). SAHA oli ainoa yhdiste, joka johdonmukaisesti osoitti synergiaa yhdistettynä mIκBα ja tutkittiin edelleen.

voimistumisen SAHA sytotoksinen /antiproliferatiivinen vaikutus mIκBα varmistettiin 12-pitoisuus SRB määritystä BCPAP soluissa, mutta ei 8505C tai THJ16T soluissa (kuvio 6). Synergia osoitettiin myös laskemalla suoraan elävien solujen jälkeen 3 päivää altistuksen 500 nM SAHA (BI = 0,69 ja 1,18 BCPAP ja 8505C-solut, vastaavasti).

ero vaste SAHA in BCPAP soluissa oli merkitsevä p 0,0001 (kaksisuuntainen ANOVA).

keskustelu

tässä tutkimuksessa olemme pyrkineet onko estämällä NF-KB-reitin voi synergisesti estää kilpirauhasen syöpäsolujen kasvua käyttämällä

in vitro

kilpirauhassyöpä malleja. Doketakseli ja säteily aktivoi NF-KB-reitin kilpirauhasen syöpäsoluja vahvistaa aikaisempien havaintojen [19,20,29]. Vaikka mittaus sytotoksisuus /lisääntymiseen, kannattavuus sekä invaasio kilpirauhasen syöpäsoluja käyttäen sekä farmakologisen ja geneettisen NF-KB-reitin estäminen ja käyttämällä kahta algoritmeja laskenta yhdistelmän vaikutus, todisteet synergistinen aktiivisuus oli rajallinen. Erityisesti todettiin, että doketakseli ja bortetsomibilla synergistisesti laski

in vitro

hyökkäyksen 8505C soluissa vain. Out of the 16 lääkkeet (myös doketakseli ja 15 muiden lääkkeiden seulonnassa) ainoa SAHA synergistisesti vähensi solujen kasvua, kun NF-KB-reitin estettiin, ja tämä vaikutus rajoittui yhteen solulinjaan (BCPAP).

näennäinen ristiriita nykyiseen havainnot ja aiemmin julkaistu tutkimuksia doketakselin [19] ja I

131 [20,21] on todennäköisesti selittää erot menetelmiin perustamisesta synergistisen vaikutuksen. Todellinen synergiaa esiintyy, kun yhdistelmän tuloksena hoito

suurempi

kuin

summa

vaikutuksista kunkin yksittäisen hoidon ja tämä on todistettava kvantitatiivisesti. Tietääksemme yksikään aiemmin julkaistu tutkimuksia käsitelleet synergia NF-KB signaloinnin esto käyttämällä samaa määrällistä lähestymistapaa kuin tässä tutkimuksessa.

Lisääntynyt NF-KB signalointi syöpäsoluissa tiedetään estävän apoptoosin [ ,,,0],30]. NF-KB-reitin inhibition on osoitettu herkistää soluja pro-apoptoottinen vaikutus TNFa: n [24]. Spekuloida, että korkea teho SAHA synergiaa määritys on seurausta pro-apoptoottista aktiivisuutta histonideasetylaasi-inhibiittorit [31]. Puute apoptoosin induktion dosetakselia ja huono suorituskyky tämän aineen tätä synergiaa tutkimuksessa lisänäyttöä Tätä hypoteesia tukevat. Kuitenkin yksityiskohtainen kokeellinen tutkimus roolin apoptoosin lääkeaine /NF-KB-reitin estäminen synergia ei kuulu tämän kohdennettuja hankkeiden. Saha vaikutus voimistumista NF-KB-reitin inhibitio saattaa olla kliinistä merkitystä. Kuitenkin innostus on vähentynyt se, että tämä vaikutus havaittiin vain yksi kolmesta

in vitro

kilpirauhassyöpä mallien (ja mekanismit vastuussa tästä valikoivuus ovat epäselviä). Lisäksi SAHA monoterapiaan ollut tehokas faasin II tutkimuksessa metastasoituneen radiojodin tulenkestävä kilpirauhaskarsinoomaa [32].

Tässä tutkimuksessa tutkittiin useita näkökohtia tuumoribiologiassa kuten solujen selviytymistä, proliferaatiota ja hyökkäys, joka voi mitata kätevästi

in vitro

. On edelleen mahdollista, että anti-kasvain hyöty NF-KB-reitin inhibitio saattaa välittää enemmän monimutkaisia ​​prosesseja, joita on vaikea tutkia solulinjoissa, kuten angiogeneesin, immuunivasteen ja muut. Myös kilpirauhasen syöpäsoluja viljeltiin

in vitro

ovat dedifferentoituneiden [33] ja saattaa puuttua fenotyypin ominaisuuksia, jotka ovat tärkeitä synergistisen vaikutuksen NF-KB: n signaloinnin inhibiittorit.

Emme osoittaa synergiavaikutuksesta doketakseli ja bortetsomibin kilpirauhasen syöpäsoluinvaasiota, mutta tämä oli vain yhteen solulinjaan (8505C), mikä taas tekee kuin harkitaan tämän yhdistelmähoitoa pitkälle kilpirauhassyöpä vähemmän houkuttelevalta.

Yhteenvetona todettiin että yhdistelmähoito, johon NF-KB-reitin estäjiä on vähän hyötyä in kilpirauhassyöpä. Ei voi olla vielä tuntemattomien olosuhteissa, joissa NF-KB: n estäjät voidaan pitää yhdessä doketakselin kanssa vähentää kasvaimen invaasion tai yhdessä HDAC-estäjien kasvaimen kasvua vähentävästi, mutta tämä ei näytä olevan yhdistelmähoidon, joka voidaan laajasti soveltaa joilla on pitkälle edennyt kilpirauhassyöpä. Lisätutkimuksia voi tunnistaa, mitkä potilasryhmissä /kasvaimet voivat vastata tähän terapeuttiseen lähestymistapaan.