Krooninen sairaus

tiivistelmä

Background

Maksan palautuminen (LR) kuuluu varhaisessa induktiivinen vaihe ominaista leviämisen hepatosyyttien, ja viivytetty angiogeenisten vaihe ominaista laajeneminen ei-parenkymaaliset osastoon. Kiinnostus mekanismin ymmärtämisessä LR on viime aikoina siirtynyt leviämisen ja kasvun parenkyymisoluissa verisuonten remontin aikana LR. Angiogeneesi mukana LR kohdistaa keskeinen asema suorittaa prosessia. Verisuonten endoteelin kasvutekijä (VEGF) on selvitetty kaikkein dynaaminen säädin angiogeneesin. Tästä näkökulmasta verihiutaleperäisen /sisäiset verihiutaleiden (IP) VEGF-A liittyä LR.

Materiaalit ja menetelmät

Kolmekymmentäseitsemän potilailla diagnosoitiin maksasyövän ja joille osittainen hepatektomiaa ( PH) oli mukana tutkimuksessa. Seerumin ja IP VEGF-A: ta seurattiin ennen leikkausta ja neljän viikon PH. Maksa volumetry määritettiin tietokonemalleihin peräisin tietokonetomografia (CT) skannaus.

Tulokset

Serum ja IP VEGF-A merkittävästi kohonnut neljän viikon PH. Preoperative IP VEGF-A oli suurempi potilailla, joilla on edennyt syöpä ja verisuoni- invaasiota. Leikkauksen jälkeinen IP VEGF-A oli suurempi suurten maksaresektio. Tilastollisesti merkitsevä korrelaatio postoperatiivisen IP VEGF-A: n ja tulevan jäännöksen maksa tilavuus. Lisäksi liukoinen verisuonten endoteelin kasvutekijän reseptori-1 (sVEGFR1) oli selvästi alassäädetty viittaa hienosäädetään angiogeneesin myöhemmässä vaiheessa LR.

Johtopäätös

IP VEGF-A on yliekspressoitu aikana myöhemmässä vaiheessa LR viittaa sen merkitystä angiogeneesin aikana LR.

Citation: Aryal B, Shimizu T, Kadono J, Furoi A, Komokata T, Inoue M, et al. (2016) A Kytke dynamiikka sisäinen Verihiutaleiden VEGF-A Cancer että myöhemmässä vaiheessa Maksa Regeneration osittaisen hepatektomian jälkeen ihmisissä. PLoS ONE 11 (3): e0150446. doi: 10,1371 /journal.pone.0150446

Editor: Domenico Ribatti, University of Bari Medical School, ITALIA

vastaanotettu: 19 tammikuu 2016; Hyväksytty: 15 helmikuu 2016; Julkaistu: 01 maaliskuu 2016

Copyright: © 2016 Aryal et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Data Saatavuus: Kaikki asiaankuuluvat tiedot ovat saatavilla paperi- ja sen tukeminen Information tiedostoja.

rahoitus: kirjoittajat eivät tuki ja rahoitus raportoida.

kilpailevat edut: kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä olemassa.

lyhenteet: HCC, maksasyövän; LR, maksan uudistaminen; PH, osittainen hepatektomiaa; VEGF-A, verisuonten endoteelin kasvutekijä A; TACE, transkatetri- valtimon chemoembolization; RFA, radiotaajuisen ablaatio; IP, intraplatelet; ALT, alaniiniaminotransferaasin; ALP, alkalinen fosfataasi; ASAT, aspartaattiaminotransferaasin; GGT, gamma-myylitransferaasi-; CRP, C-reaktiivinen proteiini; HGF, hepatosyyttikasvutekijä; EGF, epidermaalinen kasvutekijä; sVEGFR, liukoinen VEGF-reseptori; Ang-1, angiopoetin-1; IL-6, interleukiini-6; TNF-α, kudoksen nekroottista alfan; PDGF-BB, verihiutaleperäisen kasvutekijän-BB; ELISA, entsyymi-immunologinen määritys; ICG, indosyaniinivihreän; PRE OP, ennen leikkausta; POST OP, leikkauksen jälkeinen; RLV, jäännöksen maksa tilavuus; FRLV, tuleva jäännös maksa volyymi

Johdanto

Maksa uudistaminen on hyvin organisoidusta ilmiö välttämättömiä sekä välittömät palauttamista maksan tilavuuden resektion jälkeen ja ylläpidosta sen voimakkuutta kroonisen maksavaurion. Uudistamiseksi maksan, osittaisen hepatektomian jälkeen (PH), edellyttää, että kompleksin muodostuminen verkon maksan sinusoids, jonka kautta veri virtaa. Näin ollen, angiogeenisen vaihe on keskeinen prosessi, LR, esiintyy pääasiassa myöhemmässä vaiheessa [1]. Niistä seitsemän jäsentä verisuonten endoteelin kasvutekijä (VEGF) perheen (VEGF-A, VEGF-B, VEGF-C, VEGF-D, VEGF-E, VEGF-F, ja PIGF), VEGF-A sijaitsee kärjessä verisuonten muodostumista [2, 3]. VEGF-A on tunnettu tehokkain ja erityiset kasvutekijä sekä angiogeneesin että vaskulogeneesin [4, 5]. Tärkeää on, VEGF-A omistaa säätelevä rooli erilaistumiseen ja kasvuun maksan sinimuotoista endoteelisolujen (LSECs) [6]. VEGF-A on pidetty keskeisenä angiogeenisten pelaaja LR [7].

Maksavaurioita saa aikaan ansapyyntiin kertymistä verihiutaleiden maksaan, jossa ne noudattavat endoteeliin ja tämä vuorovaikutus katsotaan aktivoida LSECs by vapauttamaan erilaisia ​​kasvutekijöitä, mukaan lukien VEGF-A: [8]. Samaan aikaan, eri kasvutekijöitä vapautuu aktivoituneiden verihiutaleiden ovat myös vastuussa proliferatiiviset vaikutukset hepatosyyteissä [8]. Erityisesti viime

in vitro

tutkimus osoittaa, että verihiutaleet toimittavat RNA sisältöä maksasolujen ja tästä RNA siirto vaikuttaa verihiutaleiden välittämää maksasolujen proliferaation [9]. Uusi tuntematon mekanismi, jolla verihiutaleet kommunikoivat ympäristönsä kanssa on ollut tiedossa, johon liittyy

de novo

proteiinisynteesiä [10] sijasta kiinni verenkierrosta.

Verihiutaleiden erittyy VEGF-A, kestäväksi angiogeeninen tekijä, on saanut paljon huomiota sen tuskallisen roolin tuumoribiologiassa [11-14]. Verihiutaleet myös moduloida haavan paranemista ja kudosten uudistumista vapauttamalla sen kasvutekijät kuten VEGF-A [15]. Olisi havaittavissa vaihtelua patologinen ja fysiologinen angiogeneesin käyttövoimana verihiutaleiden VEGF-A. Tässä tutkimuksessa arvioimme taso IP VEGF-A ennen leikkausta ja neljän viikon PH potilailla, joilla maksasolusyövän (HCC). Tämän seurauksena huomattavasti korkeampi IP VEGF-A havaittiin neljän viikon PH. Preoperative IP VEGF-A positiivisesti yhteydessä HCC etenemiseen. IP VEGF-A tason todettiin näkyvästi aikana myöhemmässä vaiheessa LR ja korkeus liittyi tulevan jäännös maksan tilavuus (FRLV).

Potilaat ja menetelmä

Prospective Study Kohorteissa

Vuodesta toukokuu 2013 joulukuuhun 2014 37 potilaalla, joille maksaresektio otettiin tutkimukseen. Homogeenisuuden säilyttämiseksi kohortin, ainoa primaarisessa maksasolusyövän (HCC) sisällytettiin tutkimukseen. Diagnoosi tehtiin perusteella vatsan tietokonetomografia (CT), magneettikuvaus (MRI), alfa-fetoproteiini (AFP) ja protrombiini indusoi K-vitamiinin poissaolon-II (Pivka-II). Maksa asemointia luokiteltiin kansainvälisen Maksa Pancreato-sappeen Association, Brisbane (IHPBA) 2000 nimistö: suuret hepatektomiaa määritellään resektio 3 tai yli 3 Couinauds segmenttiä ja pienet hepatektomiaa kuin resektio alle 3 Couinauds segmenttiä.

näytteidenotosta

Laskimoveri kerättiin välittömästi ennen leikkausta (PRE OP) ja neljän viikon kuluttua leikkauksesta (POST OP). Täydellinen verenkuva (CBC) suoritettiin automatisoidulla hematologian analysaattori Sysmex XE-5000 (Sysmex Corporation, Kobe, Japan).

institutionaalisten eettisen komitean (Kagoshima University # 24-155 /26-77, Kirishima Medical keskusta # 2505 ja Kagoshima Medical center # 25-30) hyväksytty verestä tehtäviin analyyseihin ja potilastietoja; kaikki potilaat antoivat allekirjoitettu, tietoon perustuva suostumus. Kaikki kolme institutionaalisten etiikan komitea tarkistetaan ja erikseen hyväksynyt tämän tutkimuksen. Tutkimus tehtiin sopusoinnussa eettisten normien valiokunnan ihmiskokeita toimielimen, jossa kokeet tehtiin tai sopusoinnussa eettisten normien Helsingin julistuksen 1975.

seerumi ja plasma valmistelu

Kokoveri kerättiin seerumissa erottaa putken ja sitraatti putki, joka sisälsi 0,5 ml natriumsitraattia, ja EDTA-2k putkessa solujen määrä (Venoject II, Terumo Corp., Tokio, Japani). Seerumin putki inkuboitiin rauhassa huoneenlämpötilassa 30 minuuttia, jotta hyytymistä. Sekä seerumi ja plasma putkia sentrifugoitiin 1710 x g 10 minuutin ajan.

Tuloksena Supernatantit pipetoitiin varovasti, ainakin 5 mm hyytymä.

Verihiutaleiden eristäminen

verta otettiin kahdessa sitraatti putkiin. Putkia sentrifugoitiin 90 x g: ssä 15 minuutin ajan. Tuloksena verihiutalepitoinen plasma (PRP) pipetoidaan kevyesti kanssa varotoimenpiteet saastumisen. Seuraavaksi PRP sentrifugoitiin 2810 x g eristää verihiutaleita. Supernatantti (verihiutaleköyhä plasma) kerättiin hyvin tarkasti ja dekantoidaan täydellistä poistamista plasman pelleteistä. Verihiutaleiden pelletit eristetään kustakin 200 ul PRP suspendoitiin 220 ul: aan lyysipuskuria (150 mM natriumkloridi, 25 mM Tris-HCI, pH 7,6, 1% Tergitol-tyypin NP-40, 0,1% natriumdodekyylisulfaattia, 1% natriumdeoksikolaattia ); sen jälkeen, kun oli inkuboitu 20 minuuttia, lysaatti pipetoitiin ja pyöritettiin, kunnes pelletit täysin liuennut liuokseen.

CBC suoritettiin 3 valmisteissa: kokoverta, PRP ja PPP.

kvantifiointi kasvutekijöiden ja sytokiinien

seerumi, plasma ja verihiutaleiden uutteet analysoitiin yhdessä kaupallisesti saatavilla entsyymi-immunologinen määritys (ELISA) testit ihmisen VEGF-A, HGF, epidermaalinen kasvutekijä (EGF), Platelet kasvutekijä-BB (PDGF-BB), liukoisen VEGF-reseptori-1 (sVEGFR-1) ja liukoisen VEGF-reseptori-2 (sVEGFR-2), Angiopoetin-1 (Ang-1), interleukiini-6 (IL-6) (Quantikine, R mukaan valmistajan ohjeita.

laskeminen IP VEGF-A

Verihiutaleiden pitoisuus VEGF-A per 10

6 verihiutaleet laskettiin käyttämällä yhtälöä:

Intraplatelet (IP) Ang-1 laskettiin käyttäen samanlaisia ​​yhtälöä.

Maksan toiminnan arvioinnit

Serum bilirubiini, albumiini, aspartaattiaminotransferaasin (ASAT), alaniiniaminotransferaasin (ALAT), alkalinen fosfataasi (ALP) , gamma-glutamyyli (GGT), alfafetoproteiini (AFP), C-reaktiivisen proteiinin (CRP) ja protrombiiniaika (PT) mitattiin rutiininomainen verikoe.

maksan toimintaa arvioitiin indosyaniinivihreää (ICG) puhdistuma testi, 99m-galaktosyy- ihmisen seerumialbumiinia (GSA) gammakuvaus ja Child-Pugh pisteet.

Preoperatiivisen maksan tilavuuden analyysit saatiin käyttämällä kolmiulotteisen tilavuuden analysaattori (SYNAPSE VINCENT; FUJIFILM Medical Co, Tokio, Japani). Resektio tilavuus tai FRLV ilmaistiin prosentteina. Out of 37 potilasta, 33 potilaalle tehtiin maksan tilavuuden tarkastus ja käytettiin analyysin leikkauksesta havaittavissa muuttujia.

Tilastollinen analyysi

Tilastolliset analyysit tehtiin käyttäen Graph Pad Prism (versio 6.0d Mac OS X, USA, GraphPad ohjelmisto, San Diego Kalifornia, USA) ja perustuivat nonparametric testejä (Mann-Whitneyn U-testiä, Wilcoxonin testi, ja Spearmanin korrelaatio). IP VEGF-A: n ja IP Ang-1 tason esitettiin kohti 10

6 verihiutaleita; kaikki biomarkkerit on esitetty graafisesti käyttäen Rasia ja hiuksenhienosti tontteja. Kaksisuuntainen

P

arvot alle 0,05 pidettiin tilastollisesti merkitsevä.

Tulokset

Potilaiden demografiset

kliinis ominaisuudet kaikista potilaista on koottu taulukkoon 1. Vaikka ryhmä koostui vain potilaille, joilla on HCC, todisteet kirroosin ei ole jakautunut tasaisesti. Kaikki potilaat tutkimukseen kuului Child Pugh luokka A mukainen Child-Pugh luokitus. Yhdeksäntoista potilaat saivat ennen leikkausta transkatetri- valtimon chemoembolization (TACE) tai radiotaajuisen ablaatio (RFA). Kukaan potilaista sai intraoperatiivisessa trombosyyttisiirtojen. Kun preoperative IP VEGF-A referenssinä, 10 perustason merkkiä (ikä, sukupuoli, etiologia, maksakirroosi, tuumorin luokitus, kasvaimen koon, verisuonten invaasio, edellinen interventioita, resektion tyyppi ja seerumin AFP) analysoitiin. Paitsi kasvaimen kokoa, lavastus, verisuonten invaasio ja resektion ryhmä, ei havaittu tilastollisesti merkitsevää eroa lähtötilanteesta havaittiin ryhmien välillä (taulukko 1)

IP VEGF-A on koholla myöhemmässä vaiheessa LR

aikaisempien havaintojen seerumia sisälsi suuria allas kiertävän VEGF-A (

P

= 0,001; r = 0,378; S1A kuviossa), ja seerumin VEGF-A korreloi suoraan verihiutaleiden määrä (

P

0,01; r = 0,302; S1B Kuva). Oli marginaalisesti merkitsevä ero ennen leikkausta ja leikkauksen jälkeisiä verihiutalemäärät (mediaani verihiutalemäärä: PRE OP 14,80 x 10

4 verihiutaleiden POST OP, 16.30 x 10

4 verihiutaleet

P

= 0,08; S2A kuvassa), mutta ei merkittävää eroa trombosyyttiarvo välillä havaittiin osajoukon suurten ja pienten hepatektomiaa ryhmä (mediaani verihiutalemäärä: PRE OP suuret, 15 x 10

4 verihiutaleiden PRE OP vähäinen, 14,4 × 10

4 verihiutaleet

P

= 0,66 ja mediaani verihiutalemäärä: POST OP suuret, 15,10 x 10

4 verihiutaleiden POST OP vähäinen, 17,3 x 10

4 verihiutaleet

P

= 0,7; S2B Kuva).

tutkimus keskittyi angiogeenisen tai viivästynyt vaiheen LR. Seerumin VEGF-A analysoitiin kaksi tapahtumaa: leikkausta ja neljän viikon kuluttua PH; leikkauksen seerumin VEGF-A oli suurempi kuin ennen leikkausta tason (mediaani seerumin VEGF-A: PRE OP, 288,4 pg /ml; POST OP, 377,7 pg /ml,

P

0,01; kuvio 1A). Samoin leikkauksen IP VEGF-A oli merkitsevästi enemmän koholla kuin ennen leikkausta tason (mediaani IP VEGF-A x 10

6 verihiutaleet: PRE OP, 0,8612 s, POST OP, 1,362 s,

P

0,001; Kuva 1C). Ei ollut merkittävää eroa taso plasman VEGF-A välillä ennen leikkausta ja leikkauksen jälkeisiä valtioiden (

P

= 0,495; Kuva 1B). Tämä havainnot osoittavat, että sekä seerumin ja IP VEGF-A on kohonnut neljän viikon kuluttua PH.

Näytteitä kerättiin ennen (PRE OP) ja neljän viikon kuluttua osittaisen hepatektomian (POST OP). IP VEGF-A konsentraatio ilmaistiin kohti 10

6 verihiutaleita. *

P≤0

.

05

; **

P≤

0,01; ***

P

≤0.001.

Association of IP VEGF-A kasvaimen koon ja RLV

Potilaat jaettiin kahteen ryhmään; pieniä ja suuria hepatektomialla ryhmiä. Ero pitoisuudet seerumissa ja IP VEGF-A, verrattiin kahteen ryhmään (kuvio 2A ja 2B). Vaikka ennen leikkausta seerumin VEGF-A, pääryhmä oli ilmeisesti suurempi kuin vähäinen ryhmässä ei tilastollisesti merkitsevää eroa ei havaittu ryhmien välillä (mediaani seerumin VEGF-A: PRE OP suuret, 398,0 pg /ml; PRE OP vähäinen, 275,4 pg /ml;

P

= 0,082), mutta leikkauksen seerumin VEGF-A, pääryhmä oli huomattavasti suurempi kuin vähäinen ryhmän (mediaani seerumin VEGF-A: POST OP suuret , 485,0 pg /ml; POST OP vähäinen, 345,6 pg /ml;

P

0,05).

erot seerumin (A) ja IP VEGF-A (B) suurissa ja pienet hepatektomiaa ryhmiä. Tasot verrattiin ennen (PRE OP) ja sen jälkeen neljän viikon osittainen hepatektomiaa (POST OP). Sirontakuvaajan osoittaa korrelaatio: preoperative IP VEGF-A ja kasvaimen kokoa (C), leikkauksen jälkeinen IP VEGF-A ja resektio tilavuus (D) (ilmaistuna prosentteina). IP VEGF-A konsentraatio ilmaistiin kohti 10

6 verihiutaleita. *

P≤0

.

05

; **

P≤

0,01; ***

P

≤0.001.

IP VEGF-A samansuuntaisesti kuin seerumin VEGF-A; kuten kuviossa 2B, ennen leikkausta IP VEGF-A tasolla pääryhmä oli huomattavasti suurempi kuin vähäinen (mediaani IP VEGF-A x 10

6 verihiutaleet: PRE OP suuret, 1,362 s; PRE OP vähäinen, 0,619 pg;

P

0,01). Leikkauksen IP VEGF-A, pääryhmä oli merkittävästi kohonnut verrattuna vähäinen ryhmään (mediaani IP VEGF-A x 10

6 verihiutaleet: POST OP suuret, 1,938 s; POST OP vähäinen, 0,786 s;

P

0,001). Alaryhmässä vähäinen ryhmä, IP VEGF-A oli merkittävästi kohonnut leikkauksesta (mediaani IP VEGF-A x 10

6 verihiutaleet: PRE OP vähäinen, 0,619; POST OP pieniä, 0,786:

P

0.01). Huolimatta siitä, että 75% tapauksista oli leikkauksen jälkeen kohonnut IP-VEGF pääryhmä, tilastollisesti havaitsimme vain marginaalinen merkittävä ero ennen leikkausta ja leikkauksen jälkeisiä IP-VEGF A suurten osajoukossa (mediaani IP VEGF-A x 10

6 verihiutaleet: PRE OP suuret, 1,362, pg /ml; POST OP suuria, 1,938 pg /ml:

P

= 0,09).

Lisäksi, me nimenomaan analysoida korrelaatio kasvaimen koko ja ennen leikkausta IP VEGF-A. Suhde resektion tilavuusprosentteina leikkausta ja sen jälkeen IP VEGF-A analysoitiin tarkistaa vaikutusta RLV IP VEGF-A sitomiseen. Löysimme merkittävä korrelaatio ennen leikkausta IP VEGF-A ja kasvaimen kokoa (

P

0,01; r = 0,4789; kuvio 2C); Samoin postoperatiivinen IP VEGF-A ja resektio tilavuus oli myös tilastollisesti merkitsevä korrelaatio (

P

0,01; r = 0,452; Kuva 2D). Nämä havainnot osoittavat, että määrä IP VEGF-A liittyy kasvaimen koon ja resekoituun tilavuus.

ry Pro-inflammatoristen sytokiinien IL-6 IP VEGF-A sitomista

Aiemmat tutkimukset ovat osoittaneet rooli IL-6 VEGF-A tuotantoa [16, 17]. 37 tapausta, IL-6 oli havaittavissa leikkauksen jälkeen seerumin 25 potilasta. Leikkauksen seerumin IL-6 taso oli merkittävästi kohonnut verrattuna ennen leikkausta tasolle (mediaani seerumin IL-6: PRE OP, 0 pg /ml; POST OP, 4,246 pg /ml;

P

0,01; Fig 3A). Kuitenkin seerumin TNF-α taso oli alle havaittavalla alueella sekä ennen leikkausta ja leikkauksen jälkeen näytteet (kuvio 3B).

Seerumin IL-6 (A) ja TNF-α (B) analysoitiin ennen leikkausta (PRE OP) ja neljän viikon kuluttua osittaisen hepatektomian (POST OP). Seerumin IL-6 suuria ja pieniä hepatektomiaa ryhmä (C) (N = 25). Korrelaatio leikkauksen jälkeen seerumin IL-6 ja IP VEGF-A (D). Korrelaatio postoperatiivinen IP VEGF-A ja resektio tilavuus (E) (ilmaistuna prosentteina). IP VEGF-A konsentraatio ilmaistiin kohti 10

6 verihiutaleiden (N = 25). *

P≤0

.

05

; **

P≤

0,01; ***

P

≤0.001. ND = ei havaittu.

Verrattuna pieniä hepatektomiaa ryhmä, suuret hepatektomiaa ryhmä osoitti voimakkaampaa seerumin IL-6 (mediaani seerumin IL-6: Major 10,18 pg /ml; pienet , 4,70 pg /ml;

P

0,05) aikana LR kuten kuviossa 3C. Seerumin IL-6 on selvää, useita päiviä suuren leikkauksen, mutta korkeus on IL-6: ssa yhden kuukauden hepatektomian ei ennusteta. Löysimme tilastollisesti merkitsevä korrelaatio leikkauksen jälkeisen IL-6 ja IP VEGF-A (

P

0,05;

r

= 0,4905; kuvio 3D). Lisäksi merkittävä korrelaatio leikkauksen jälkeisen seerumin IL-6 ja tilavuusprosentti resektio (

P

0,05;

r

= 0,459; Kuva 3E) vastaa samanlainen yhdistys IP VEGF -A ja laajuus resektio. Yhdessä IL-6 on todettu olevan koholla neljän viikon PH, ja korreloi IP VEGF-A.

Major Mitogeenien ja muut keskeiset Platetet kasvutekijät eivät koholla myöhemmässä vaiheessa LR

Hepatosyyttikasvutekijä (HGF) ja orvaskeden kasvutekijät (EGF) ovat tärkeimmät mitogeeneja; repeämä signalointireittien liittyy näihin tekijöihin todennäköisesti poistaa prosessi LR [18]. Tilastollisesti merkitsevää muutosta seerumin HGF pitoisuuksina välillä ennen leikkausta ja leikkauksen jälkeisiä vaiheita havaittiin (mediaani seerumin HGF: PRE OP, 2401 pg /ml; POST OP = 2565 pg /ml;

P

= 0,511; Kuva 4A) . Seerumin EFG pitkälti erittävät verihiutaleita. Olemme myös löytäneet merkittävä positiivinen korrelaatio trombosyytit ja seerumin EGF (S3A kuvio). Seerumin EGF myös ei tuottanut merkittävää eroa kahden faasin (mediaani seerumin EGF: PRE OP = 291,3 pg /ml; POST OP = 287,5 pg /ml;

P

= 0,40; kuvio 4B). Verihiutaleiden kasvutekijä (PDGF) -BB, tunnettu tehokkain mitogeeni maksan tähtimäisiä solujen proliferaatiota, on oleellisesti tuotettu verihiutaleita. Ei ole yllättävää, seerumin PDGF-BB korreloi positiivisesti verihiutalemäärä (

P

0,001; r = 0,41; S3B Kuva). Emme löytäneet merkittävää eroa seerumin PDGF välillä preoperatiivisen ja leikkauksen jälkeisiä valtioiden (mediaani seerumin PDGF-BB: PRE OP 1912 pg /ml; POST OP, 2178 pg /ml;

P

= 0.30; Kuva 4C).

pitoisuus seerumissa suurten mitogeenejä, HGF (A) ja EGF (B) analysoitiin ennen leikkausta (PRE OP) ja neljän viikon kuluttua osittaisen hepatektomian (POST OP). Seerumin PDGF-BB (C) ja Ang-1 (D) analysoitiin ennen leikkausta (PRE OP) ja 4 viikkoa leikkauksen jälkeen (POST OP).

Seuraavaksi arvioimme angiopoetin (Ang ) -1 kuin toinen tärkeä merkki angiogeneesin aikana LR [19]. Suuri osa seerumin Ang-1 juontuu verihiutaleiden [20]. Suora korrelaatio seerumin Ang-1 ja trombosyytit todettiin (

P

0,01; r = 0,32; S3C Kuva). Yllättäen mitään merkittävää eroa ei havaittu seerumin Ang-1 välillä ennen leikkausta ja leikkauksen jälkeisiä vaiheita (mediaani seerumin Ang1: PRE OP = 24504; POSTOP = 25449 pg /ml;

P

= 0,79; kuvio 4D) . Lisäksi analyysi IP Ang-1 eristetyistä verihiutaleiden ei myöskään osoittanut mitään merkitsevää eroa ennen leikkausta ja leikkauksen jälkeisiä pitoisuuksia (mediaani IP Ang1 × 10

6 verihiutaleet: PRE OP = 13688 pg /ml; POST OP = 15262 pg /ml;

P

= 0,676; S3D Kuva). Yhdessä nämä havainnot viittaavat siihen, että on olemassa selektiivinen korkeus VEGF-A, myöhemmässä vaiheessa LR.

heikkeni liukoisen VEGF-reseptoriin 1 myöhemmissä vaiheen LR Kääntäen korreloi Resektio Volume

Liukoinen VEGF-reseptorien tason määrittämiseksi verenkierrossa VEGF-A [21]. Tuloksemme kuvata jatkuva angiogeenisten drive kuukauden hepatektomialla. Havaitsimme merkittävä lasku tason leikkauksen jälkeisen sVEGFR1 kuin ennen leikkausta (mediaani sVEGFR1: PRE OP, 189,6 pg /ml; POST OP, 124,3 pg /ml;

P

0,0001; kuvio 5A) . Toisin sVEGFR1, emme tarkkailla merkittävää eroa seerumin sVEGFR2 Näiden tapahtumien välillä (mediaani sVEGFR2: PRE OP, 7773 pg /ml; POST OP, 8306 pg /ml;

P

= 0,976; Kuva 5B). Ei suoraa yhteyttä liukoisen VEGF-reseptoreita ja IP VEGF-A todettiin. Silmiinpistävän kuitenkin jyrkkä pudotus tasoa sVEGFR1 (delta sVEGFR1) oli käänteisesti korreloi resektio volyymi (

P 0

.

05; r

= -0,3620; kuvio 5C) .

Soluble VEGF-reseptori-1 (A) ja liukoinen VEGF-reseptori-2 (B) arvioitiin ennen leikkausta (PRE OP) ja neljän viikon kuluttua osittaisen hepatektomian (POST OP). Korrelaatio delta sVEGFR-1 ja resektio tilavuus (C). *

P≤0

.

05

; **

P≤

0,01; ***

P

≤0.001, ****

P

0,0001.

Keskustelu

Kaksi erillistä vaihetta LR jälkeen PH on raportoitu: varhaisessa induktiivinen vaiheessa nopean leviämisen hepatosyyttien seurasi angiogeeninen vaihe ominaista laajentaminen ei- parenkymaaliset lokero. Tutkimuksemme tutkittiin IP VEGF-A, myöhemmässä vaiheessa LR.

Major seerumiyhdistelmällä VEGF-A johtuu aktivoitu verihiutaleiden syöpien ja muiden sairauksien [12, 13, 22]. Seerumin VEGF-A per verihiutalemäärä on tutkittu HCC potilaalla, joka kuvaa sen yhteys sairauden etenemisen [13]. Tutkimuksemme analysoi todellisen VEGF-A: n pitoisuus eristetyissä verihiutaleet potilaalla on HCC ja havaittiin sen yhdessä syövän etenemiseen. On runsaasti todisteita siitä, että verihiutaleet ovat suoraan mukana kasvaimen kasvua, angiogeneesin ja metastaasin. Haitalliset vaikutukset verihiutaleiden on HCC ovat olennaisesti johtuu kasvutekijöiden erittyy sen rakeista [23]. Lisäksi toinen tutkimus on ehdottanut, että VEGF saattaa parantaa LR jälkeen PH [8]. Erityisesti, me olemme osoittaneet, merkittävä seerumin ja IP VEGF-A: n kauko-vaiheessa LR. Meidän havainnot eteenpäin käsityksen dual roolit IP VEGF-A HCC ja LR.

Kirurginen haava indusoi aloittamisesta paikallisia ja systeemisiä reaktioita, jossa aktivoidaan verihiutaleet erittävät erilaisia ​​kasvutekijöitä korjata loukkaantunut rakenteita [15] . Analyysi varhaisessa vaiheessa suurten leikkausten jälkeen ei pelkästään heijastaa verihiutaleiden vastaus LR, koska leikkaushaavan paraneminen on aktiivinen ensimmäisten viikkojen toiminta. Bondestam J et ai. [24] havaittu seerumin VEGF-A suurten leikkausten jälkeen ensimmäisen ja kolmannen päivänä leikkauksen jälkeen, mutta ei myöhemmin näytteissä. Nykyisessä tutkimuksessa sytokiinien analysoitiin neljän viikon kuluttua leikkauksesta, kun CRP taso oli jo palautuneet normaaleiksi (S4 kuvassa), minimoitua päällekkäisyyden verihiutaleiden vastauksena kirurgisen haavan paranemista ja LR. Aktiivinen palautuminen lisääntynyt mitoosi aktiivisuus on osoitettu vasta 10-35 päivää seuraavien hepatektomiaa normaalissa maksa, kun taas maksat kanssa maksakirroosi tai hepatiitti osoitti histologinen näyttö palautumaan kahden ensimmäisen kuukauden [25]. Vaikka suuret tilavuus uusiutuu yhdellä kuukaudella, LR jatkuu koko ensimmäisen leikkauksen jälkeisen vuoden [26]. Useimmat leikkauksen jälkeinen maksan epäonnistumiset tiedetään esiintyvän kuukauden kuluessa maksaresektio [27]. Neljän viikon kuluttua PH on ratkaiseva aika LR. Lisäksi tavoitteena oli selvittää IP VEGF-A myöhemmässä vaiheessa LR kun angiogeneesin pitäisi olla näkyvämpi.

verenkierrossa suurten mitogeeneja maksasolujen proliferaation, HGF ja EGF [18], eivät osoittaneet merkittäviä muutoksia seerumin neljän viikon PH. Muita merkittäviä angiogeenisten tekijöiden, EGF, Ang-1 ja PDGF-BB, pidetään välttämättömänä LR [19], ovat suurelta osin erittävät verihiutaleita [20]. PDGF-BB on tunnettu voimakas proliferatiivinen vaikutus maksan tähtisolut [28]. Kuitenkin puute merkittäviä muutoksia tason suurten kasvutekijöitä mukaan lukien johdettu verihiutaleiden itse heijastavat ikuinen potentiaalia IP VEGF-A angiogeneesin moduloimiseksi aikana myöhemmässä vaiheessa LR.

Kaksi suurta proinflammatoristen sytokiinien IL-6 ja TNF-α ovat keskitetysti vastuussa aktivointi STAT-3, NF-KB, fosfoinositidi-3-kinaasi (PI3K) ja Akt reitit aikana LR [29, 30]. Puutos näistä sytokiinien luuytimestä peräisin verisolujen merkittävästi heikentynyt LR hiirissä [31]. Suhde IL-6: n ja VEGF-A tuotanto on jo perustettu eri solumalleissa [16, 17, 32]. Tämä ilmaisu VEGF-A säätelee IL-6 ihmisen megakaryoblastista solulinjassa MEG-01 [33] kysyy keinottelun IP VEGF-A voivat johtua megakaryocytes. Paitsi sen proliferatiivisen osaaminen alkuvaiheessa LR, IL-6 voi parantaa angiogeneesin aikana myöhemmässä vaiheessa LR edistämällä IP VEGF-A tuotantoa.

Kiertävä tasoilla sVEGFR1 oleellisesti määrittelevät patofysiologisia roolit VEGF- A se sitoutuu vapauttaa VEGF-A, vähentäen todellinen määrä sitoutumisen endoteeliin [34]. Lisäksi sVEGFR1 kuin antiangiogeneic aineena vähentää merkittävästi ja LSECs jälkeen PH, samalla poistetaan LR [35]. Angiogeneesi nojautuu tasapaino positiivisten ja negatiivisten endoteelin sääntelyviranomaiset [36]. Tukahduttaminen sVEGFR1 havaittu tutkimuksessamme heijastaa hienosäädetään angiogeneesin aikana myöhemmässä vaiheessa LR.

Kliininen näyttö verihiutaleiden merkityksellisenä induktori LR on osoitettu ihmisillä [37, 38]. Intrahepaattinen kertymistä verihiutaleiden havaittiin hiirillä malleissa [39]; Uudemmassa tutkimuksessa, Starlinger et. al [38] ovat raportoineet, että verihiutaleita valikoivasti kerääntyvät LR jälkeen PH ihmisillä. Vaikka taustalla olevan mekanismin maksansisäisten kertymistä ei täysin tunneta, oletetaan, että mahdollinen laukaista verihiutaleiden muuttoliikettä ja ansastusta tapahtuu maksassa voi olla hemodynaamisia muutoksia syntyy jäänne maksassa kirurgisen. Verihiutaleiden aktivoituminen saattaa aikaansaama leikkausjännitys itse tai verihiutaleiden sitoutumalla vielä tuntemattoman kalvoon sitoutuneen reseptorin LSEC tai maksasoluissa, tai verihiutaleiden sisäistämisen [8]. Riippumatta kiinteän oleva mekanismi, on tunnettua, että maksansisäisen verihiutakerääntymistä vaurion jälkeen on mitogeenisestä vaikutus LR. Verihiutaleet proliferatiivinen vaikutus maksan soluihin johtuu vapauttamaan sen kasvutekijän ja siirto verihiutaleiden RNA [9].

Tutkimuksessamme vaikka suurin osa potilaista oli kohonnut leikkauksen jälkeinen verihiutalemäärälle ei ollut tilastollisesti merkittävä ero laskee ennalta ja leikkauksen jälkeisiä tapahtumia eikä ollut mitään ilmeistä eroa havaittu verihiutaleiden määrä suurten ja pienten ryhmässä (S2 Kuva). Riippuen RLV kuitenkin kunkin verihiutaleiden lisättiin ylimäärän kanssa VEGF-A. IP VEGF-A, kuvataan ylimäärä syöpiä [11-14], on osoitettu tässä olevan paljon suurempi kun kuukauden PH.

Suuressa kohortin potilaiden mahalaukun syöpä, radikaali resektio kasvain johti vähentynyt merkittävästi ennen leikkausta seerumin VEGF-A yli 30 päivän jakson aikana [40]. Toisessa tutkimuksessa seerumin VEGF-A esitetty ensimmäisen 3-5 päivää, mutta ei myöhemmissä päivän kuluttua merkittävä sydän- leikkauksen potilailla ilman syövän [24]. Päinvastoin, löysimme merkittävä nousu pitoisuuden VEGF-A kuukauden PH, joka ilmaisee sen merkitys myöhemmässä vaiheessa LR. Koska rajoittaminen Tutkimuksessamme aste neo-angiogeneesiä ei ole tutkittu resektoitua näyte tai uudistava maksassa. Kuitenkin merkittävä nousu IP VEGF-A pitoisuus yhdistettynä merkittäviä alas-säätely neutraloivat sVEGFR1 ylläpitää jatkuvaa angiogeneesiä ympäristö uudissuonittumisen aikana myöhemmässä vaiheessa LR.

VEGF-A, säädellään ylöspäin eri syöpien, korreloi patologisiin ominaisuuksiin kasvaimen, metastaasin ja ennuste. Meidän havainnot osoittivat yhdistys IP VEGF-A HCC kasvaimen kokoa, vaihe ja verisuonten invaasio. Yhdessä nämä tulokset viittaavat siihen, että ennen leikkausta IP VEGF-A saattaa merkitä potentiaalisia ennustaja HCC etenemisen. Toisaalta, angiogeneesiä mukana LR on välttämätön kestävälle uudistumista. Useita angiogeenisten tekijöiden vaaditaan seuraavat maksaresektio tai maksavaurion, ja VEGF-A pro-proliferatiivinen mitogeeni on olennaista, LR. Lisäksi tuoreessa tutkimuksessa on osoitettu merkittävä yhdistyksen välillä viallinen tiedotteet verihiutaleiden VEGF-A: n ja maksan toimintahäiriön jälkeen PH ihmisellä [38]. VEGF-A vallitsevana käyttäytyy kuin täydellinen mitogeeni LSECs [41]. Löysimme selektiivinen korkeus VEGF-A viivästyneen vaiheen LR, kun taas muut suuret pro-proliferatiivinen mitogeeneja kuten HGF, EGF, Ang-1 ja PDGF-BB ei merkittävästi muuttunut ennen leikkausta tasolle.