Krooninen sairaus

tiivistelmä

Background

aiemmin raportoitu roolia IL-6 hiirimallissa syöpäkakeksialle ja tällä hetkellä dokumentoitu potilaan, jolle tosilitsumabin, anti-IL-6-reseptorin vasta-aine, merkittävästi parantunut kakeksia indusoiman IL-6 yli-ilmentävät keuhkosyöpä. Tästä huolimatta potentiaalia lievittää syöpäkakeksialle tosilitsumabi ei ole hyväksytty tähän kliiniseen käyttöön. Siksi edeltävä meidän suunnitellun kliinisen tutkimuksen tosilitsumabin, suunnittelimme kaksi tutkimusta tässä kuvatut arvioimiseksi tasoja IL-6 potilailla, joilla on keuhkosyöpä ja vaikutus tosilitsumabin hiirimallissa ihmisen syöpäkakeksian.

menetelmät

Ensimmäinen mittasimme seerumin IL-6 tasoa potilailla, joilla on keuhkosyöpä ja analysoitiin sen yhdessä kakeksia ja selviytymistä. Seuraavaksi tutkittiin, mikä vaikutus jyrsijän analoginen tosilitsumabin (MR16-1) kokeellisessa kakeksiamalliin.

Tulokset

Serum IL-6-tasot olivat korkeampia potilailla, joilla oli kakeksia kuin ilman kuihtuminen. Potilailla, joilla on kemoterapian vastustuskykyisten keuhkosyöpä, korkea IL-6 seerumin tason korreloi voimakkaasti selviytymisen, ja cut-off tasolla vaikuttavat heidän ennuste oli 21 pg /ml. Samaan aikaan, transplantaatio IL-6-ilmentävien Lewis-keuhkokarsinooma solujen aiheuttama kakeksia hiirillä, jotka sitten saivat joko MR16-1 tai 0,9% suolaliuosta. Kasvaimen kasvu oli samankaltainen molemmissa ryhmissä; kuitenkin MR16-1- ryhmä menetti vähemmän painoa, ylläpitää parempaa ruokaa ja otto- ja oli lievempi kakektisia ominaisuuksia veressä. MR16-1 myös lisäsi elinaikaa LLC-IL6 siirrettyjen hiiriä (36,6 vs. 28,5 päivää, p = 0,016).

Johtopäätös

kliiniset ja kokeelliset tutkimukset osoittivat, että seerumin IL-6 on surrogaattimarkkerina arvioimiseksi kakeksian ja ennusteen potilaiden kemoterapian kanssa resistenttejä metastaattisen keuhkosyövän ja että tosilitsumabi on potentiaalia parantaa ennustetta ja parantaa tehokkaasti kakeksia, että niin tuhosi heidän elämänlaatuaan. Tämä tulos suuresti rohkaisee kliinisissä tutkimuksissa arvioitiin turvallisuutta ja tehoa Tosilitsumabin hoito potilailla, joilla seerumin IL-6.

Citation: Ando K, Takahashi F, Kato M, Kaneko N Doi T, Ohe Y , et ai. (2014) Tosilitsumabi, ehdotetusta Therapy varten Kuihtuminen on Interleukin6 ilmentävien Lung Cancer. PLoS ONE 9 (7): e102436. doi: 10,1371 /journal.pone.0102436

Editor: Rossella Rota, Ospedale Pediatrico Bambino Gesu ”, Italia

vastaanotettu: Marraskuu 9, 2013 Hyväksytty: 18 Kesäkuu 2014; Julkaistu: 10. heinäkuuta 2014

Copyright: © 2014 Ando et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tämä tutkimus tukivat Apurahat-in-Aid tieteellisen tutkimuksen no.21591003 (Kazuhisa Takahashi) ja no.23591906 (Fumiyuki Takahashi) alkaen opetus-, kulttuuri-, urheilu-, Science and Technology of Japan. Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Syöpä kuihtuminen on hypercatabolic tila ominaista potilaiden väheneminen lihas- ja rasvakudokseen sekä anoreksia, voimattomuus ja anemia. Tämä ehto on usein potilailla, joilla on pitkälle kehittynyt syöpä ja mukana on heikentynyt elämänlaatu ja lyhentää elinaika [1] – [5]. Nämä muutokset näyttävät olevan osa tulehdusvasteen, joka sisältää laatimista proinflammatoristen sytokiinien, kuten interleukiini-6 (IL-6) ja tuumorinekroositekijä-alfa (TNF-α) [6] – [8]. Myös tutkimuksessa keuhkosyöpään, potilaalla on kakeksia oli kohonnut tulehdusreaktioita ilmenee nousua seerumin IL-6, liukoinen TNF-α-reseptoria ja C-reaktiivisen proteiinin (CRP) [9]. Näin ollen johto Näiden sytokiinien on tärkeää kuin on lievittää oireita ja vähentäminen hädässä hoidettaessa potilaita, joilla on syöpä kuihtuminen.

IL-6, joka on monitoiminen sytokiini osallistuu tulehdus- ja immunologisten vastauksia, jotka ovat ominaisuus monissa autoimmuunisairauksissa, katsotaan olevan keskeinen välittäjäaine kakeksian [10], [11]. Selvittämiseksi rooli IL-6 kakeksiaa aiheuttama keuhkosyöpä, olemme aikaisemmin perustettu keuhkosyöpä solulinja transfektoitiin IL-6-cDNA: n ja siirrettyjen nämä solut C57BL /6-hiirissä [12]. Tämän seurauksena IL-6 indusoi merkitty kakektisia muutoksia näissä hiirissä, kuten lyhennetty selviytymisen kertaa. Verraten, tulokset hiirillä käsitelty tosilitsumabia analoginen että vähentynyt oireet ja pidentyneet elinkaaret ehdotti, että tämä hoito kohdistuu erityisesti syöpäkakeksialle [12]. Lisäksi tällä hetkellä kokenut ja kuvattu potilas, jolle tosilitsumabin, anti-IL-6-reseptorin vasta-aine, merkittävästi lieventää kakeksia indusoiman IL-6 yli-ilmentävät keuhkosyöpä [13]. Tämä potilas, jonka diagnoosi oli suuri karsinooma syöpä kuihtuminen, kärsi suorituskyky (PS), joka kuihtunut ECOG pisteet 4 lisäystä seerumin IL-6-173 pg /ml. Kuitenkin, kun IL-6 kohdistaminen hoidon Tosilitsumabin alkoi, hänen kakektisia oireita, PS ja albumiinitasoja nopeasti parantunut, ja yhdeksän kuukauden elinaikajakson seurasi ilman kuihtuminen liittyviä oireita [13]. Tämä tulos ja aiemmat raportit osoittavat, että Tosilitsumabin, jota on käytetty pääasiassa hoitoon nivelreuma, systeeminen lastenreumaa sairastavalle ja Castleman tauti, on hyvät kuin terapiaa syöpäkakeksialle, mutta se ei ole vielä hyväksytty. Näin ollen, tehoa ja turvallisuutta Tosilitsumabin olemme suunnittelee parhaillaan kliinisessä tutkimuksessa.

MR 16-1, rotan anti-hiiren IL-6-reseptorin vasta-ainetta, on luonnehdittu sopiva jyrsijä analoginen tosilitsumabin [14], [15]. Aiemmin Mori et ai. raportoitu, että MR16-1 esti syövän kehittymiseen liittyvien anemia kokeellisessa mallissa, LC-06 JCK hiirissä [16]. Kuitenkin myös MR16-1- tukahduttaa kuten kakektisia muutokset painon ja ruokahalun menetys jää epäselväksi ja on arvioitava ennen kliinisen tutkimuksen. Siksi, koska alustava vaihe, olemme päättäneet täällä onko seerumin IL-6 on luotettava surrogaattimarkkerina potilaille, joilla on keuhkosyöpä ja kakeksia, ja tarkasti tehoa MR16-1 meidän aiemmin perustettu kokeellinen malli, joka kunnossa.

Materiaalit ja menetelmät

Tietojen keruu arviointia seerumin IL-6 tasoa potilailla, joilla on keuhkosyöpä

vuosina huhtikuussa 2010 maaliskuuhun 2011 perifeeristä verta otettiin 33 potilaalla, keuhkosyöpä, joilla oli diagnosoitu patologisen testausta Kameda Medical center, 1000 hengen erikoissairaanhoidon keskus. Seerumi erotettiin ja varastoitiin -70 ° C: ssa analyysiin saakka. Me poissuljettu potilaat, jotka eivät suostu tai joiden tila häiritsisi tutkimustulokset, esimerkiksi tarttuva tauti tai muut olemassa sairaus. Kuten tiedot mittaus verinäytteestä, saimme heidän suullinen suostumus ja dokumentoitu niiden kliiniset tiedot. Meidän retrospektiivinen tarkastelu, suullinen suostumus menettely ja analysointi tietonsa hänen tutkimuksessa oli hyväksynyt eettinen komitea Kameda Medical Center.

arviointi kakektisten parametrien potilailla, joilla on keuhkosyöpä

Ensimmäinen, arvioida potilaan kliinisiä piirteitä, meillä on nimetty kaksi ryhmää edustavat läsnäolo tai puuttuminen syöpäkakeksialle aikaan seerumin näytteenotto. Kakeksian ryhmä ja ei-kakeksia ryhmässä verrattiin sitten kannalta lähtötilanteesta ja tekijöitä niiden verinäytteistä. Diagnoosi syöpäkakeksialle perustettiin perustuu julkaistun kansainvälisen konsensuksen, joka oli painonpudotus yli 5%, tai painonpudotus yli 2% yksilöissä jo osoittaa ehtymisen mukaan nykyinen paino ja korkeus [painoindeksi (BMI) vähemmän yli 20 kg /m

2] tai rappeutunut menetyksen luustolihasten (sarcopenia) [1]. Seuraavaksi arvioida suhde näiden muuttujien ja eloonjäämisen kakektisilla Metastasoivassa keuhkosyöpä, valitsimme 19 potilasta, joilla on vaiheen IIIb tai IV syöpä joiden tukihoitoon oli saatu vasta IL-6 arviointi. Sitten analysoimme korrelaation potilaiden ominaisuuksien ja elinaika. Lopuksi lasketaan sopivin cut-off seerumin IL-6 niiden säilymistä.

Solulinjat ja kulttuurien syövän eläinmalleissa kuihtuminen

Lewis keuhkosyöpää (LLC) solut ovat peräisin spontaani keuhkon C57BL /6 hiiren [17], [18]. Loimme LLC-solut, jotka on transfektoitu ihmisen IL-6-geenin (LLC-IL6), joka on voimakas kyky indusoida syöpäkakeksia hiirissä, kuten aiemmin on kuvattu [12]. Lyhyesti, ihmisen IL-6-cDNA vietiin Sal I -kohtaan eukaryoottisen cDNA ekspressiovektoriin BMGNeo, ja transfektoitiin LLC-soluihin käyttäen Lipofectin-reagenssia (Gibco BRL, Gaithersburg, MD) mukaan valmistajan ohjeiden [12], [19 ]. Soluja ylläpidettiin Iscoven muunnettuun Dulbeccon alustaan ​​(IMDM, Wako, Osaka, Japani) 20% naudan sikiön seerumia, penisilliiniä ja streptomysiiniä (100 U /ml ja 100 ug /ml, vastaavasti).

Hiiren malleja kakeksia

Virus-free-5 viikkoa vanhoja C57BL /6J-hiiret saatiin Japan SLC (Hamamatsu, Japani). Eläimet olivat ryhmissä, (5 häkkiä kohti) lämpötilassa 24 ± 2 ° C, suhteellinen kosteus 55% ± 10%, ja 12 tunnin valo /12 tunnin pimeä jakso. Jälkeen tottumisen ja 1 viikko, hiiret häkissä pareittain koko kokeen ajan. Kloorivesi ja säteilytettyä ruokaa tarjottiin

halun

. Kaikki toimenpiteet suoritetaan eläimet hyväksyi laitoksen eläinten hoidon ja käytön komitea (IACUC) on Juntendo yliopistosta.

aiemmin määritettyihin kokeellisessa kakeksiamalliin by LLC-IL6 siirrettäväksi 6 viikon ikäisiä hiiriä [12 ]. Lisäksi monissa muissa tutkimuksissa, että määritetään patogeneesiin syöpäkakeksia ja farmakologisen tehon, hiiriä käytettiin viiden viikosta kuuteen viikkoon iän transplantaation syöpäsolulinjoissa, kuten on raportoitu [16], [20], [21]. Niinpä myös tässä tutkimuksessa, LLC-IL6 (1 x 10

6) ympättiin ihonalaisesti oikeaan kylkeen kunkin hiiren 6 viikon ikäisiä jälkeen Edellä ajan asuntojen, ja me nimetty päivä LLC- IL6 ruiskuttamisesta päivänä 0.

MR16-1 hoitokäytäntö

MR16-1 (matala. nro MC45038) on rotan anti-hiiri-IL-6-reseptorin vasta-ainetta, ja sen ystävällisesti syötetään laboratorio Chugai Pharmaceutical Co. (Kamakura, Japani). Kuten esitetty Introduction, Mori et al. aikaisemmin määritetty tehoa MR16-1 syöpään liittyvän anemian, kun injektoidaan intraperitoneaalisesti kerran viikossa 20 mg /kg [16]. Toisaalta, olemme aiemmin arvioitu yksityiskohtaisesti kakektisissa parametreja kaksikymmentäyksi päivää tuumorin istuttamisen jälkeen ja myös vahvistanut, että meidän kokeellisia kakeksiamalliin kanssa LLC-IL6 tuotettu selviytymisen noin kolme viikkoa ilman hoitoa [12]. Lisäksi kliininen tilanne, tosilitsumabi tavallisesti annetaan joka kahden tai neljän viikon samalla aikaväli nivelreuman (RA) ja Castlemanin tauti [22], [23]. Samoin aloitimme MR16-1- hoito kerran viikossa annoksella 20 mg /kg alkaen päivänä 3 siten hallinnoida sen samalla aikavälillä ja arvioidaan kakektisen parametrien kaksikymmentäyksi päivää tuumorin istuttamisen jälkeen.

arviointi MR16-1 vaikutus cachecia ja selviytymistä

Ensinnäkin, tehon arvioimiseksi MR16-1 kakeksiaan, kaksikymmentä hiiret jaettiin neljään ryhmään. Hiiret ryhmässä 3 ja 4 edustivat syöpäkakeksialle mallia, jossa LLC-IL6 siirrostettiin ihonalaisesti (syöpäkakeksialle ryhmä), kun taas ryhmät 1 ja 2 sai vain saman määrän suolaliuosta, 0,9% natriumkloridia (terve kontrolliryhmiin). Lisäksi ryhmät 2 ja 4 saivat MR16-1- hoitoa kuin edellisessä protokollan (merkitty ”kanssa MR16-1-”), ja ryhmät 1 ja 3 saivat saman määrän suolaliuosta (merkitty ”ilman MR 16-1”).

arvioitiin ruumiinpaino, ruoan ja veden saanti ja kasvaimen tilavuus kaksi kertaa viikossa, kuten aikaisemmin on kuvattu [20]. Kasvaimen tilavuus ryhmissä 3 ja 4 on laskettu (pituus) x (leveys)

2/2 (cm

3) [24]. Kaksikymmentä vuorokautta tuumorin istuttamisen jälkeen, hiiret nukutettiin somnopentyl ja lopetettiin. Tuolloin uhrauksen, keräsimme verinäytteitä, sitten leikellään ja punnitaan lihakset raajoissa ja rasvakudoksen ympärillä kivekset [25], [26]. Voit selvittää ravitsemustilan näiden eläinten, mittasimme glukoosin ja triglyseridien seerumeissa ja arvioitiin valkosolujen (WBC), hematokriitti (Ht) ja verihiutaleiden (Plt) laskee veressä. Kukin ryhmä koostui viidestä hiirestä, ja kaikki kokeet suoritettiin kahdesti.

Seuraavaksi vaikutuksen määrittämiseksi MR16-1 eloonjäämiseen, kaksikymmentä hiiriä myös, joihin on siirretty LLC-IL6 ja satunnaisesti kahteen ryhmään: yksi ryhmä sai MR16-1 kanssa samaa protokollaa kuin edellä, ja toinen ryhmä sai vain sama määrä suolaliuosta. Kukin ryhmä koostui kymmenen hiirtä, ja niiden elinaika analysoitiin tuumorin istuttamisen jälkeen. Viikko hoitoa oli jatkunut samalla välein kunnes kuolema vahvistettiin.

mittaaminen kakektisissa parametrien veren

arvioimiseksi potilaiden tietoja meidän kliinisessä tutkimuksessa seerumin IL-6-tasot olivat määritettiin käyttäen kaupallisesti saatavilla olevia entsyymi-radioimmunomäärityksellä ja entsyymi-immunologinen määritys (ELISA-pakkauksia), mukaisesti valmistajan ohjeiden (SRL Inc., Tokio, Japani). Muut parametrit mitattiin myös rutiinitarkastus klo Kameda Medical Center. Lisäksi tehokkuuden arvioimiseksi MR16-1 koe-eläimissä, seerumin IL-6 mitattiin käyttäen hiiren IL-6 ELISA Kit, ja kaikki muut parametrit mitattiin käyttämällä rutiininomaisia ​​laboratoriotestejä (KAC Inc., Kioto, Japani) .

tilastolliset analyysit

Me tehdään tilastollisia analyysejä SPSS version 20, ja tiedot ilmoitetaan keskiarvoina ± keskihajonta. Chi-neliö testi tai Mann-Whitneyn testiä käytettiin tarkoituksenmukaista verrata potilaiden ominaisuudet meidän kliinisessä tutkimuksessa. Korrelaatiot potilaiden ominaisuuksien pelastautumiskoulutukseen arvioitiin Spearmanin listalla korrelaatio analyysi. Määrittämään sopivimman cut-off seerumin IL-6 kuukauden selviytymisen, käytimme Akaike tiedot kriteeri (AIC), joka on indikaattori arvioimiseksi sovituksen hyvyys varten tilastollisen mallin [27], [28]. Pienempi AIC-arvo osoitti luotettavampi malli ennustamaan tuloksia. Eloonjäämisluvut arvioitiin kanssa Kaplan-Meier-menetelmällä cut-off-arvo lasketaan AIC analyysi.

tehon arvioimiseksi MR16-1 vertasimme muuttujia kaksi ryhmää käyttäen paritonta

t

-testi tai Tukeyn Rehellinen merkittävät erot jälkeen varianssianalyysillä (ANOVA). Selviytymisen käyrä jokaisen ryhmän analysoitiin log rank -testi. Kaikkien tilastolliset analyysit, ap arvo alle 0,05 pidettiin merkittävänä.

Tulokset

Clinical profiilia 33 potilaiden keuhkosyöpä

Kuten taulukko 1 osoittaa, joukossa 33 potilasta profiloitu tässä kliinisessä tutkimuksessa keski-ikä oli 71,3 ± 10,0 vuotta, ja 76% oli miehiä. Seitsemäntoista potilaista oli diagnosoitu adenokarsinooma (52%), kolmetoista jossa okasolusyöpä (39%), yksi iso cell carcinoma (3%) ja kaksi pienisoluinen karsinooma (6%). Kaikkiaan 26 potilasta oli hoidettu kemoterapian (n = 22), sädehoito (n = 4) tai leikkaus (n = 1) ennen tai jälkeen arvion IL-6. Seitsemän potilasta sai oireenmukaista hoitoa vain. Kun arvioinnit Tässä tutkimuksessa 19 potilasta oli tukihoito vain; 11 oli historian kemoterapiaa ja yhdellä oli sädehoitoa. Kahdeksantoista potilasta oli diagnosoitu syöpä kuihtuminen, määritettyä kansainvälistä konsensusta tutkimuksen [1].

Potilaiden ominaisuudet määritellään kakeksian ryhmässä (n = 18) verrattuna ei-kakeksia ryhmä (n = 15) on esitetty taulukossa 1. Keskimääräinen ikä, sukupuoli, BMI, histologisia tilan ja taudin vaiheessa ei ollut tilastollisesti erilainen kahdessa ryhmässä. Kakeksian ryhmä oli suurempi osa potilaista, joilla on heikko (ECOG pisteet 2, 77,8% vs. 20,0%), ja yhä useampi heistä hoidettiin tukihoitoon jälkeen suorituskyvyn arviointiin, (77,8% vs. 33,3%) kuin ei-kuihtuminen ryhmä. Verinäytteissä, valkosolut olivat korkeammat kakeksian ryhmässä (11722 vs. 5873 /ul), samoin kuin CRP (7,1 vs. 2,5 mg /dl), ja seerumin IL-6 tasot (40,2 vs. 13,0 pg /ml ); kuitenkin kuihtuminen ryhmän albumiinitasoja olivat pienempiä (2,7 vs. 3,5 g /dl) kuin ei-kuihtuminen ryhmä. Kokonaisproteiinista ollut erilainen ryhmien välillä (6,4 vs. 6,7 g /dl).

tulokset muistuttivat aiemmassa suuren kohortin potilaiden haimasyöpä tutkineet Bachmann et al [29]. Näin ollen vaikka potilaiden määrä mukana meidän analyysi oli suhteellisen pieni, tulokset varma, että tiedot olivat arvokkaita tarkempaa analyysia.

korrelaatio seerumin IL-6 tasoa pelastautumiskoulutukseen

sitten korreloi kakektisen parametrit analysoitiin eloonjäämisen 19 potilaalla asteen IIIB tai IV syöpä jotka saivat oireenmukaista hoitoa jälkeen IL-6 arviointi (taulukko 2). Kaikki nämä potilaat oli diagnosoitu ei-pienisoluinen keuhkosyöpä (NSCLC); Kymmenen adenokarsinooma, kahdeksan levyepiteelisyöpä ja yksi iso cell carcinoma. Survival kertaa sen jälkeen arvioinnin oli tilastollisesti merkittävä negatiivinen korrelaatio ECOG-toimintakykyluokka (r = -0,621, p = 0,005), CRP (r = -0,529, p = 0,020) ja seerumin IL-6 tasoa (r = -0,639, p = 0,003), ja positiivinen korrelaatio albumiinitasoja (r = 0,588, p = 0,008). Valkosolut (r = -0,425, p = 0,069) ja kokonaisproteiinin (r = 0,515, p = 0,060) myös yleensä korreloivan pitkäaikainen säilyminen, mutta ei tasolla tilastollista merkitystä. Samaan aikaan, seerumin IL-6 tasot korreloivat hyvin albumiinin (r = -0,449, p = 0,054) ja CRP (r = 0,543, p = 0,016), mutta ei proteiinin kokonaismäärän (r = -0,006, p = 0,981).

myös katsoi, että oli tärkeää sisällyttää analyysi potilaista, jotka oli diagnosoitu pienisoluinen keuhkosyöpä (SCLC) tai jotka olivat olleet alle hoidon vaikutuksen määrittämiseksi IL-6 kemoterapiaa. Koska monet näistä potilaista oli pieni, emme pystyneet vahvistamaan sen vaikutus kemoterapiaa tai niiden ennusteen tässä tutkimuksessa.

Serum IL-6 tasoa ja selviytymisen

määritellä sopivin cut-off tasoa potilaiden seerumin IL-6 sisältöä ja sen suhdetta selviytymisen, AIC laskettiin (kuvio 1A). Tämän seurauksena pienin AIC-arvo oli saatu 20 tai 21 pg /ml seerumin IL-6 tasoa ja liittyy 21-28 päivää säilymiseen ajan, vastaavasti (AIC = -10,395, kukin yhdistelmä on sama arvo). Tämä osoitti, että potilailla, joiden seerumin IL-6 tasoa ≥21 pg /ml voitaisiin ennustaa olevan alemman elinaika enintään kuukauden.

(A) konservatiivisen kynnys liittyy 20 tai 21 pg /ml IL-6 seerumissa (y-akseli) kanssa 21-28 päivää elossapysymisaikojen (x-akseli), määritettynä AIC analyysi (katso menetelmät), tyydyttävästi löytää sopivimmat cut-off tasoa (z-akseli, AIC = -10,395). Huomaa, että potilaat, joiden seerumin IL-6 tasoa ≥21 pg /ml ennustettiin olevan vähemmän elinaika. (B) todennäköisyys elossa yhden ja kolmen kuukauden kuluttua arvioinnin oli pienempi potilailla, joilla on IL-6 21 pg /ml kuin 21 pg /ml (kuukausi eloonjääminen, 20,0% vs. 77,8%, p = 0,007, ja kolme kuukautta eloonjääminen 10,0% vs. 33,3%, p = 0,025). (C) osuus potilaista, joilla IL-6 ≥21 pg /ml oli 80,0% potilailla elossa alle kuukauden, 20,0% potilailla elossa yksi-kolmekuukautta ja 25,0% potilailla elossa yli kolme kuukautta.

Perustuu AIC tilastoista, potilaat olivat jaettu niitä IL-6 21 pg /ml ja 21 pg /ml ja analysoitiin eloonjäämisen todennäköisyys käyttäen Kaplan-Meier-menetelmällä. Kuvio 1B paljastaa selviytymisen kuvion jälkeen IL-6 arviointi. Siellä eloonjäämistodennäköisyys yhden ja kolmen kuukauden kuluttua arvioinnin on selvästi pienempi potilailla, joilla on IL-6 21 pg /ml kuin 21 pg /ml (kuukausi eloonjääminen, 20,0% vs. 77,8%, p = 0,007 , ja kolme kuukautta eloonjääminen 10,0% vs. 33,3%, p = 0,025). Olemme edelleen luokiteltu potilaat kolmeen ryhmään sen mukaan, elinaika: yhden kuukauden kuluessa yhdestä kolmeen kuukauteen ja yli kolme kuukautta. Analyysi seerumin IL-6 tasoa kussakin ryhmässä, kuten kuviossa 1C esittää, osoitti, että niiden potilaiden osuus, IL-6 ≥21 pg /ml oli 80,0%, joka selvisi sisällä yhden kuukauden ajassa, kun taas 20,0% selvisi yhden kolme kuukautta, ja 25,0% selvisi yli kolme kuukautta.

vaikutus MR16-1 on syöpäkakeksialle LLC-IL6 kantavien hiirten

päivänä 21 meidän kaksoiskokeista, yhteensä kahdeksan kymmenestä hiirillä selviytyi kussakin syöpäkakeksialle (ryhmät 3 ja 4), kun taas kaikki kymmenen hiirtä säilynyt terveenä kontrolliryhmissä (ryhmät 1 ja 2). Uhrasimme yhteensä 36 hiirillä, ja niiden kakektisia parametrit esitetään taulukossa 3.

Kuten vertailu käsittelemättömien hiirten terveillä verrokeilla (ryhmä 1) ja syöpäkakeksialle ryhmän (ryhmä 3), ruhopainot (ryhmä 1, 25,9 g vs. ryhmä 3, 22,1 g, p 0,001), painot kaksoiskantalihas (128,1 mg vs. 60,4 mg, p = 0,006), quadriceps lihasten (102,7 mg vs. 14,7 mg, p 0,001), kaksipäinen reisilihas (145,4 mg vs. 27,1 mg, p 0,001), ja rasvakudos ympärillä kivekset (490,5 mg vs. 169,4 mg, p 0,001) olivat merkittävästi korkeampia ryhmässä 1 kuin ryhmän 3. arvot ht (32,8 vs. 9,4%, p = 0,001), triglyseridien (87,0 vs. 23,0 mg /dl, p 0,001) ja glukoosia (311,6 vs. 29,6 mg /dl, p 0,001) olivat myös korkeampia ryhmässä 1 kuin ryhmässä 3, vastaavasti. Koska nämä tulokset olivat samanlaiset kuin edellisessä raportissa [12], varmistimme toistettavuus meidän perustettu kokeellista mallia.

Mitä vertailu käsitellyn ja käsittelemättömän syöpäkakeksialle hiirillä (ryhmä 3 [ilman MR 16-1 ] ja 4 [kanssa MR16-1-]), ja toisaalta, ruhopainot (ryhmä 3, 22,1 g vs. ryhmä 4, 24,1 g, p = 0,032), painot kaksoiskantalihas (60,4 mg vs. 106,6 mg, p 0,001).

Kuva 2 esittää sarja muutoksia kehon painon (A) , kasvaimen kasvua (B), ja ruokaa (C) ja vettä (D) saanti. Mitä vertailu syöpä kuihtuminen ryhmien, kasvaimen kasvu ei ollut tilastollisesti merkitsevää eroa (kuvio 2B, p = 0,061), mutta painon oli suurempi ryhmässä 4 (kuvio 2A, p = 0,032). Asteittainen vähentäminen ruoan ja veden saanti havaittiin molemmissa ryhmissä siirrostuksen jälkeen LLC-IL-6, mutta MR 16-1 taipumus parantaa näitä arvoja kohtaan, että merkittävät erot olivat näkyvästi päivänä 14 (kuviot 2C, p 0,001, ja kuvassa 2D p 0,001). Nämä tulokset osoittavat, että antaminen MR16-1 merkittävästi vähentynyt vähentämiseen ruhon paino, ruoan ja veden saanti vaikuttamatta kasvaimen kasvua hiirimallissa kuihtuminen.

Transplantation IL-6-ilmentävien LLC solujen aiheuttama kakeksia vuonna hiiriä (ryhmät 3 ja 4), kun taas ryhmien 1 ja 2 sai vain sama määrä suolaliuosta, 0,9% natriumkloridia (terveisiin ryhmät). Me annettiin MR16-1 (ryhmät 2 ja 4) tai 0,9% suolaliuosta (ryhmät 1 ja 3), tässä järjestyksessä. Kehon paino, kasvaimen koon ja ruoan ja veden saanti mitattiin päivinä 0, 3, 7, 10, 14, 17 ja 21 siirron jälkeen. Mitattu määrä ruokaa tai vettä jaettuna hiirten ja päivää määrittämään jokaisen otetun eläintä kohti päivässä. Tilastollinen merkitsevyys arvioitiin Tukeyn Rehellinen merkittäviä eroja (HSD) jälkeen yksisuuntainen ANOVA. Tiedot edustavat keskiarvoa ja S.D. (S.D. tiedot paino on esitetty taulukossa 4). Kasvaimen kasvu ei ollut merkitsevää eroa ryhmien 3 ja 4 (B), mutta kehon paino (A) ja ruoan (C) ja veden saanti (D) paranivat merkitsevästi ryhmässä 4 (†, p 0,01). Merkittäviä eroja ei havaittu ruhon painon ja ruokaa ja vettä saanti välillä käsittelemättömän (ryhmä 1) ja käsiteltiin terve hiiret (ryhmä 2).

turvallisuus MR16-1 terveillä ohjaus hiirillä

turvallisuuden määrittämiseksi MR16-1, me arvioitiin myös muita biokemiallisia parametreja terveillä verrokeilla hiirillä ja verrattiin niitä ryhmien välillä 1 ja 2. Kuten taulukoissa 3 ja 4, biokemialliset parametrit eivät olleet tilastollisesti merkitsevää eroa näiden kahden ryhmiä. Laskurit WBC (4667 vs. 3867 /ul, p = 0,8644) ja verihiutaleiden (548000 vs. 693.000 /ul, p = 0,249) eivät myöskään olleet merkittävästi erilaiset, mutta arvot Ht (32,8 vs. 35,4%, p = 0,049) oli suurempi ryhmässä 2 kuin ryhmässä 1. Serial muutoksia kehon painon ja saanti ruoan ja veden eivät olleet erilaisia ​​ryhmien välillä (kuva 2).

vaikutus MR16-1 eloonjäämiseen LLC-IL6 kantavien hiirten

Kaksikymmentä hiiriä, joihin on siirretty LLC-IL6 solujen ja jaettu kahteen ryhmään; kanssa (käsitelty) tai ilman MR16-1- (käsittelemätön). Elinaika määritettiin, kuten on esitetty kuviossa 3. Survival kertaa käsitellyn ja käsittelemättömän hiiret olivat 36,6 ± 11,1 ja 28,5 ± 4,1 päivää, tässä järjestyksessä, ja MR16-1 merkittävästi parantaneet elinaika tuumorin istuttamisen jälkeen (p = 0,016). Nämä tulokset osoittavat, että MR16-1 on mahdollista parantaa selviytymistä sekä estää etenemisen syöpäkakeksian.

Jokainen ryhmä koostui kymmenestä LLC-IL6 siirrettyjen hiirillä. Yksi ryhmä sai MR16-1- (yhtenäinen viiva), ja toinen ryhmä sai vain sama määrä suolaliuosta (katkoviiva). Viikko hoitoa oli jatkunut samalla välein kunnes kuolema vahvistettiin. Keskiarvo ± S.D. selviytymisen LLC-IL6 siirrettyjen hiirillä ilman MR16-1- oli 28,5 ± 4,1 päivää. Injektointi MR16-1 lisäsi elinaikaa LLC-IL6 siirrettyjen hiirillä 36,6 ± 11,1 päivää (p = 0,016).

Keskustelu

Meidän kliinisessä ja

vuonna vivo

tutkimuksissa osoitimme hyödyllisyyttä seerumin IL-6 sijaismarkkerina arvioimiseksi ennusteen tehoa ja anti-IL-6-reseptorin vasta-aineen välittäjänä syöpäkakeksialle. Olemme havainneet, että (1) läsnäolo seerumin IL-6 korreloi voimakkaasti eloonjäämisen potilailla joissa kemoterapiaa kestäviä metastaattisen keuhkosyövän; (2) potilaat, joilla seerumin IL-6 tasoa ≥21 pg /ml ennustettiin olevan lyhyemmät eloonjäämisajan; (3) MR16-1 oli edullinen vaikutus ameliorating syöpäkakeksian ja selviytymistä. Niinpä me osoitti ensimmäistä kertaa, että IL-6 oli hyödyllinen, hyvin kohdistettuja hoito kemoterapiaa kestäviä metastaattisen keuhkosyövän, ja tosilitsumabi näytti lupaavalta ja uusi kakeksian vastainen aine hoitoon potilailla, joilla on IL-6 yli-ilmentäviä kasvaimia.

Tällä hetkellä yhdistys biokemiallisten merkkiaineiden kanssa ennusteen on laajalti raportoitu metastasoituneen syövän. Eli korkea CRP tasot osoittavat näiden potilaiden systeeminen tulehdusreaktio ja liittyvät niiden tyypillisesti alhainen luurankolihasten indeksin ja seerumialbumiinia keskittyminen sekä huonon ennusteen [30] – [32]. Joissakin tutkimuksissa on raportoitu, että cut-off CRP ja albumiiniliuoksella vaikuttavat ennusteen olivat 10 mg /l ja 3,5 g /dl, vastaavasti [33] – [35]. Koska nämä reaktiot johtuvat vaikutuksesta sytokiinien, tuloksemme osoittavat myös, että seerumin IL-6 tasoa loogisesti oltava vahva korrelaatio elossaoloaika potilailla kemoterapiaa kestäviä metastasoitunut keuhkosyöpään. Lisäksi olemme havainneet, että seerumin IL-6 tasolle 21 pg /ml on konservatiivinen kynnys vaikuttaa niiden ennustetta. Tämä raja-pisteen perustui tietoihin tässä tutkimuksessa, mutta katsomme, että se voisi olla tarkempi mittari kuin CRP ja albumiini.

Mitä syövän kakeksian, että useat aineet arvioidaan niin pitkälle, kortikosteroidit ja progestational aineita ollut paras osoitettu lievittävän syöpään liittyvien anoreksia mahdollisille tutkimuksissa ja meta-analyysi [36] – [38]. Ei kuitenkaan ainetta, joka parantaa elinikä tai elämänlaatu ei ole koskaan dokumentoitu. Siksi perustamalla uuden hoitomuoto lievittämään syöpäkakeksialle tarvitaan kiireesti. Tässä yhteydessä olemme aiemmin raportoitu, että tosilitsumabin oli Fazerin merkittävästi parantunut potilaan syöpäkakeksialle indusoi IL-6 yliekspressoivissa keuhkosyöpä [13]. Vaikka tämä potilaan kasvain oli pikkuhiljaa, hänen yleinen kunto oli stabiloitunut, ja hän selvisi yhdeksän kuukauden kuluttua alkaa tosilitsumabihoitoon [13]. Vastaavasti koe-eläinmalleissa, MR16-1 vähentynyt etenemisen kakeksian. Lisäksi, seerumin IL-6-tasot nousivat on MR 16-1-käsitellyssä ryhmässä verrattuna käsittelemättömään kontrolliryhmään. Mitä tulee näiden mekanismien, Nishimoto et al. analysoidaan kinetiikka seerumin IL-6: n ja liukoisen IL-6-reseptorin (sIL-6R), sekä osuuden sIL-6R kyllästettyä tosilitsumabihoitoon ta sen antamisen jälkeen potilaille, joilla on RA ja Castleman tauti. Kirjoittajat raportoitu, että sIL-6R kasvoi merkittävästi IL-6 tekivät. Eli hallinto tosilitsumabin johti muodostumista tosilitsumabin /sIL-6R immuunikomplekseilla mikä pitkittää eliminaation puoliintumisaika sIL-6R. Myöhemmin ei ole saatavilla Tosilitsumabin vapaan IL-6R sitten inhiboi IL-6R-välitteisen kulutus IL-6 [39]. Tuloksemme yhtyä niihin vastaukset aikaisemmassa tutkimuksessa ja meidän raportoitu tapauksessa [13], [39]. Näin ollen uskomme, että tosilitsumabin on käyttökelpoinen hoidettaessa kakeksian indusoiman IL-6 yli-ilmentävät syöpä.

Samalla olemme myös pitää joitakin huolia estävä rooli IL-6. Ensinnäkin, jotkut sytokiinien tiedetään osallistuvan kasvaimen vastaisen immuniteetin aktivoimalla tai säätelemällä toiminnan antitumor efektori-T-solujen [40] – [42]. Näin ollen, estää IL-6 signalointia voitaisiin edistää kasvua ja erilaistumista kasvainsolujen inhiboimalla kasvaimen vastaisen immuniteetin. Päinvastoin, meidän tulokset paljastivat, että kasvaimen kasvu ei ollut tilastollisesti erilainen, vaikka vaatimaton kasvusta MR16-1- käsitellyillä hiirillä kuin hoitamattomaan verrokkiryhmään.