Krooninen sairaus

tiivistelmä

Background

Näyttö viittaa häiriövaikutukset mismatch korjaus (MMR) tilan immuunivasteen peräsuolen syöpä. Tunnistaminen synnynnäisen ja adaptiivisen immuunijärjestelmän soluja, jotka voivat täydentää vakiintunut ennustetekijöiden vaikutus CD8 MMR taitavia peräsuolen syöpiä potilaalla, jotka edustavat 85% kaikista tapauksista, ei ole tehty.

Menetelmät /Principal Havainnot

peräsuolen syöpiä peräisin testi (n = 1197) ja ulkoinen validointi (n = 209) kohortin MMR-taitavia ja peräsuolen syöpiä asennetaan yhden ja useiden lyönti kudossiruina. Immunohistokemiallista kvantifiointi (pisteet 0-3) suoritettiin CD3, CD4, CD8, CD45RO, CD68, CD163, FoxP3, GranzymeB, iNOS, syöttösolujen tryptaasi, MUM1, PD1 ja TIA-1 tuumori-tunkeutumisatmosfäärin (TIL) reagoivien solujen. -parin Kokeita tuore peräsuolen syövän yksilöitä käyttämällä erityisiä solupopulaation markkereita tehtiin. Testiryhmässä, Useammat CD3 + (p 0,001), CD4 + (p = 0,029), CD8 + (p 0,001), CD45RO + (p = 0,048), FoxP3 + (p 0,001), GranzymeB + (p 0,001), iNOS + (p = 0,035), MUM1 + (p = 0,014), PD1 + (p = 0,034) ja TIA-1 + TIL (p 0,001) olivat yhteydessä myönteisen tuloksen. Säätäminen iän, sukupuolen, TNM ja leikkauksen jälkeistä hoitoa, korkeampi CD8 + (p 0,001; HR (95% CI): 0,66 (0,64-0,68)) ja TIA-1 + (p 0,001; HR (95% CI ): 0,56 (0.5-0.6)) olivat riippumattomia ennustavat tekijät. Lisäksi potilailla, joilla on CD8 + infiltraatit, TIA-1 edelleen ositettu 355 (35,6%) potilaista tulee ennustetekijöitä alaryhmiin (p 0,001; HR (95% CI): 0,89 (95% CI: 0,8-0,9)). Tulokset vahvistettiin validoinneista kohortin (p = 0,006). TIA-1 + -soluissa olivat pääasiassa CD8 + (57%), mutta myös värjättiin TCRγδ (22%), CD66b (13%) ja vain harvoin CD4 +, makrofagien ja NK-solujen markkereita.

Päätelmät

TIA-1 lisää ennustetekijöiden tietoa TNM ja adjuvanttihoito MMR taitavia peräsuolen syövän potilaille. Prognostisia vaikutus CD8 + TIL on sekoitti läsnäolo TIA-1 + mikä tarkoittaa parannettu riski kerrostuminen noin 35% kaikista potilaista, joilla MMR-taitavia peräsuolen syöpiä.

Citation: Zlobec I, Karamitopoulou E, Terracciano L, Piscuoglio S, Iezzi G, Muraro MG, et ai. (2010) TIA-1 Sytotoksinen rae-Associated RNA sitova proteiini Parantaa Prognostic Suorituskyky CD8 Mismatch Repair-Taitavan peräsuolen syövän. PLoS ONE 5 (12): e14282. doi: 10,1371 /journal.pone.0014282

Editor: Alfons Navarro, University of Barcelona, ​​Espanja

vastaanotettu: 03 kesäkuu 2010; Hyväksytty: 16 marraskuu 2010; Julkaistu: 10 joulukuu 2010

Copyright: © 2010 Zlobec et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Kirjoittajat rahoitti Institute for Pathology, University Hospital of Basel, Research allas huomioon. Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

ennustetta potilaille, joilla peräsuolen syöpä voidaan nähdä vuorovaikutuksena kasvain- ja isäntä liittyvät tekijät [1]. Kokeelliset todisteet yli viimeisten 20 vuoden tukee käsitettä immunosurveilllance syövän, syytetään sekä synnynnäisen ja adaptiivisen immuunivasteen [2]. Kolorektaalisyövässä, CD3, CD4, CD8, CD20, grantsyymi B, ja FoxP3 + kasvaimen tunkeutuvia lymfosyyttejä (TIL), on tunnistettu mahdollisina indikaattoreina tuloksista, kun taas tunnistus sytotoksiset T-lymfosyytit, syöttösolut ja dendriittisolut elisiittoreina anti -tumor vasteet on korostanut uusia mahdollisuuksia mahdollisten immunoterapioiden [3], [4], [5].

kolorektaalisyövässä tasapaino host- ja kasvaimeen liittyvät tekijät ovat esimerkkeinä mismatch korjaus (MMR) vajausta satunnaisia ​​tapauksia, osuus on noin 15% kaikista kasvaimista ja tunnusomaista puutteellinen MMR koneet [6]. Näiden potilaiden MMR-puutteellisia syöpiä, on kuvattu olevan runsaasti sytotoksisten CD8 + T-solujen tunkeutumista varten [7] ja ovat usein yhteydessä enemmän ”suotuisa” kasvaimeen liittyviä ominaisuuksia, eli läsnä on työntää kasvaimen raja kokoonpano, kun läsnä on erottuva bändi peritumoraalista lymfosyyttinen tulehdus ja vähän kasvain orastava, jälkimmäinen histomorphological tunnusmerkki epiteelin mesenkymaalitransitioon [8]. Tämä fenotyyppiset tähdistö, jonka ”kaatopaikalle asteikko” hyväksi vahva puolustus voi osittain olla vastuussa edullisempia yleistä ennusteeseen potilailla, joilla on MMR-puutteellinen verrattuna MMR-taitavia kasvaimia [9]. Mielenkiintoista, vaikka tiedetään häiriövaikutukset MMR tilan immunologisia vasteita kolorektaalisyövässä, laajat analyysit solutyyppejä mukana immuunivastetta ja tulehdusta ei ole vielä systemaattisesti suoritettu MMR-taitavia syöpiä, joka kattaa 85% kaikista kolorektaalisyövän tapauksissa.

Siksi tämän tutkimuksen tarkoituksena oli määrittää ylimääräisiä ennustetekijöiden hyöty, yli suorituskykyä CD8 yksin, 12 kudospohjaisia ​​immunologisia biomarkkerit MMR taitavia peräsuolen syövän potilaille. Nämä proteiinimarkkereita kuten CD3, CD4, CD45RO, CD68, CD163, FoxP3, GranzymeB, iNOS, syöttösoluja tryptaasi, MUM1p, PD1 ja TIA-1 oli nimenomaan valittu kattamaan laajan valikoiman mahdollisimman solutyyppejä mukana synnynnäisen ja adaptiivisen immuunivasteen . Tämä suoritettiin käyttäen aluksi testiryhmä 1197 potilasta ja ulkoisen validointi kohortin 209 potilailla, vastaavasti täysin kliinis-patologisten ja seurantatietoja.

Methods

Ethics Statement

Kirjallinen lupa on annettu potilailta heidän tiedot voidaan tallentaa sairaalassa tietokantaan ja käyttää tutkimustarkoituksiin. Pehmopaperin käyttö hyväksyttiin vastaavan eettisten toimikuntien yliopistollisen sairaalan Basel ja University of Athens. Vastaleikattu kliinisissä näytteissä mukana tässä tutkimuksessa kerättiin suostumuksensa potilailla, joille tehdään kirurginen hoito Basel yliopistollisessa sairaalassa.

Test ryhmä

Potilaille ja mallin ominaisuudet.

1420 ensisijainen pre- operatiivisesti hoitamatta, valitsemattomat satunnaista kolorektaalisyöpä potilasta hoidettiin yliopistollisen sairaalan Basel vuosina 1987 ja 1996 olivat mukana tässä tutkimuksessa. Hematoksyliinillä ja eosiinilla (H Neomarkers, MS-1103, monoklonaalinen, 1:40, sitraattipuskuria pH 6, 100 ° C, 30 ”; CD20; Dako, M0755, monoklonaaliset, 1:50 sitraattipuskuria, pH 6, 100 ° C, 30 ”; CD4; Neomarkers, MS-1528, monoklonaalinen, 1:40, sitraattipuskuria pH 6, 100 ° C, 60 ”; CD68; Dako, M0876, monoklonaaliset, 1:200, sitraattipuskuria pH 6, 100 ° C, 15 ”; GranzymeB; Novocastra, NCL-L-GRAN-B, 01:10, sitraattipuskuria pH 6, 120 ° C, 10 ”, iNOS; Abcam, ab15323, polyklonaaliset, 1:100 ER1 puskuri, 20 ’, Mast cell tryptaasi; Dako, M7052, monoklonaaliset, 1:2000, ei haku; Mum1; Dako, M7259, monoklonaaliset, 1:50, sitraattipuskuria pH 6, 100 ° C, 30 ”; PD1; R TIA-1; Immunotech, IM2550, monoklonaalisia, 1:250, ei haku; CD3; Dako, monoklonaaliset, sitraattipuskuria; 1:50; ja CD45RO; Thermo Scientific UCHL-1, monoklonaaliset, sitraattipuskuria, 1:500. Negatiivinen kontrolli kudokset testattiin ja koki samaa protokollaa ensisijaisen vasta-aineen pois.

Proteiini markkereita tekee kolme tarkkailijaa (A. L., S. P., A. T.) analysoimalla useita myönteisiä solua kudosta microarray lyönti. Ei kuva-analyysi-ohjelmistoa käytettiin. Kokonaismäärä immunoreaktiivisten solujen kasvain microenvironment arvioitiin, riippumatta lokalisointi (kasvaimensisäisenä tai strooman). Kokonaismäärä solua kudosten microarray punch annettiin tulokset 0, kun mitään positiivisia soluja oli läsnä, ja tulokset 1, 2 ja 3, kun 1-10-positiivisia soluja, 11-50 positiivisten solujen ja 50 positiivista solua lyönti voi olla havaittu, vastaavasti. Sillä PD1 ja iNOS, tapaukset pisteytettiin täydellinen puuttuminen tai esiintyminen mitään positiivisia soluja.

Validation Ryhmä

221 valitsematta, jotka eivät ole peräkkäin kolorektaalisyöpä potilasta hoidettiin Attikon University Hospital, University Ateenan Kreikka vuosina 2004 ja 2006 olivat mukana itsenäisenä validointi ryhmä. H 0,001), CD4 + (p = 0,029), CD8 + (p 0,001), CD45RO + (p = 0,048), FoxP3 + (p 0,001), GranzymeB + (p 0,001), iNOS + (p = 0,035), MUM + 1 (p = 0,014), PD1 + (p = 0,034) ja TIA-1 + TIL (p 0,001). Edustaja mikrovalokuvia näistä proteiinimarkkereita ja immunoreaktiiviset solut on esitetty kuvassa 3.

Korostettu markkereita ovat ne, jotka osoittavat merkittävää yhteyttä ennuste.

A) CD3, B) CD4, C ) CD8, D) CD45RO, E) FoxP3, F) grantsyymi B, G) iNOS, H) MUM1, I) PD1, J) TIA-1.

Syöpä-tautivapaalle analyysi- Monimuuttujalähettimet .

Huomattava markkereita testattiin kaksi monimuuttuja mallia. Ensin arvioitiin ennustetekijöiden vaikutusta merkkiaineiden säätämisen vaikutuksia ikä diagnoosin, sukupuoli, pT, PN, kasvaimen ja verisuonten invaasio. CD3 (n = 945, 434 kuolemantapausta; p = 0,128), CD4 (n = 1026, 491 kuolemantapausta; p = 0,463), CD45RO (n = 866, 401 kuolemantapausta; p = 0,181), FoxP3 (n = 1091; 519 kuolemantapausta ; p = 0,185), GranzymeB (n = 987, 479 kuolemantapausta; p = 0,091), iNOS (n = 1023, 493 kuolemantapausta; p = 727), MUM1 (n = 1082, 516 kuolemantapausta; p = 0,173), ja PD1 (n = 1096, 523 kuolemantapausta; p = 0,389) ei osoittanut vaikutusta elinaika säätämisen jälkeen näille perustettu ennustetekijöiden parametrit. Sen sijaan, CD8 (n = 1019, 489 kuolemantapausta; p 0,001) ja TIA-1 (n = 1005, 481 kuolemantapausta; p 0,001) säilyttivät erittäin myönteinen ja merkittävä vaikutus potilaiden hoitotuloksiin.

toisen elinaika malli (taulukko 2) vaikutus CD8 ja TIA-1 oli jälleen testattiin tällä kertaa yhdessä potilaan ikä diagnoosin, sukupuoli, pT, PN, etäpesäke ja adjuvanttihoito. Tulokset korostavat erittäin merkittävä positiivinen vaikutus kahden merkin: (1) CD8 + (n = 292, 75 kuolemantapausta, HR: 0,66 (95% CI: 0,64-0,68) ja (2) TIA-1 + (n = 290; 82 kuolemantapausta , HR: 0,56 (95% CI: 0,5-0,6)).

karakterisointi TIA-1-ilmentäviä soluja.

koska TIA-1 on oletettu, markkerina aktivoitu CD8 + T-solujen, me todennettujen -parin TIA-1 CD8 + T-solujen virtaussytometrialla kasvaimen tunkeutuvia lymfosyyttejä (TIL) 10 juuri leikattiin kliinisistä näytteistä. Prosenttiosuudet yhteensä TIA-1 + -soluissa vaihteli 0,86-+6,52 (keskiarvo : 3,7 ± 1,6) (kuvio 4A). Costaining markkereiden kanssa, jotka ovat spesifisiä määritellyn solupopulaatioiden vahvistettu, että suurten väestöstä TIA-1 + -soluissa edustaa CD8 + T-solut (57 ± 8%), jota seurasi TCRγδ soluja (22 ± 10% ) ja CD66b + neutrofiilien (13 ± 12%). Sitä vastoin vähäinen prosenttiosuudet CD4 + T-solujen, makrofagien (tunnistettu CD16 + CD56- solut), NK-solut (tunnistettu CD56 + solut), ja NK /T-solut, (ilmentävät Va24-Ja18 TCR), havaittiin (kuvio 4 B, C). TIA-1 ekspressio havaitaan enemmistö soluttautua CD8 + solujen (64 ± 22%), kun taas jäljellä oleva osuus (35 ± 22%) oli TIA-1 negatiivinen (kuvio 4C, D).

Yhden solun suspensiot saatu juuri leikattiin Tuumorinäytteet (n = 10) olivat pinta värjättiin FITC- tai APC-leimattua vasta-aineita, jotka ovat spesifisiä ilmoitettu pinta-markkereita ja solunsisäisesti värjättiin PE-leimatulla anti-TIA-1-vasta-aineita. A) Prosenttiosuudet koko TIA-1 + solujen B) Prosenttiosuudet CD8 + solujen TCRγδ solut, neutrofiilit (tunnistettu CD66b + solut), CD4 + soluja, makrofageja (tunnistettu CD16 + CD56- solut), NK-solut (CD16 + CD56 +) ja NKT-solujen (Vα24-Jα18 TCR +) havaita aidatulla TIA-1 + -soluissa. C) Edustavia dot-plot havainnollistaa koekspressoimalla TIA-1 ja CD8 molekyylien aidatulla lymfosyyttien kokonaismäärään saatuja soluja kliinisestä näytteestä. D) Prosenttiosuudet TIA-1 + ja TIA-1- solujen aidatulla CD8 + soluja.

fenotyyppinen yhdistelmiä CD8 /TIA-1.

vieressä analysoineet fenotyyppinen taajuudet 1019 kolorektaalisyövissä sekä arvioitavissa CD8 ja TIA-1 värjäystä. Kolme suurta fenotyypit havaittiin: kasvaimet negatiivinen sekä CD8 (0 pistettä) ja TIA-1 (0 pistettä) (n = 223; 21,9%), kasvaimet positiivisia CD8 mutta negatiivinen TIA-1 (n = 366; 36%) ja kasvaimet positiivisia sekä CD8 ja TIA-1 (n = 350; 34,3%). Vain 80 kasvaimet olivat negatiivisia CD8 ja positiivisia TIA-1 (7,8%). Johtuen näiden pienien ryhmä CD8 syöpäkasvain luokiteltiin yhtenä alaryhmä riippumatta TIA-1 ilmentymisen.

Syöpä-erityisiä eloonjääminen analyysi CD8 + TIL ositettu TIA-1.

Survival aikaerot analysoitiin kolme CD8 /TIA-1 fenotyyppejä 998 potilailla, joille elinaika oli myös saatavilla. Kaiken kaikkiaan merkittävä ero syövän erityisiä eloonjäämisajasta välillä todettiin kolmen ryhmän kanssa potilailla, joilla on suurempia määriä CD8 + /TIA-1 + TIL kokevat kaikkein parhaimpiin tuloksiin, jonka jälkeen CD8 + /TIA-1- tapauksissa ja lopuksi CD8- potilailla (p 0,0001; kuvio 5). Me seuraavaksi suoritetaan monimuuttuja-analyysi mukaan lukien ennustetekijät ikä, sukupuoli, pT PN pM vaiheessa sekä leikkauksen jälkeinen hoito ja määrittää lisäetuna kerrostamiselintä potilaalla on kasvaimien suurempia määriä CD8 + TIL TIA-1. Potilailla, joilla CD8-positiivisia kasvaimia, suhteellinen kuolemanriski 0,89 (95% CI: 0,8-0,9) havaittiin niille, joilla on samanaikainen TIA-1-positiivisia kasvaimia (p 0,001; taulukko 2). Nämä tulokset osoittavat, että lisäämällä TIA-1 tapauksissa CD8-positiivisuus parantaa riski kerrostuminen 35,6% (n = 355) potilaista.

Validation Ryhmä

Ulkoinen validointi setti analysoitiin CD8 + ja TIA-1 + TIL. Tässä ryhmässä MMR-taitavia peräsuolen syöpä, vain 7 potilaalla oli kasvaimista CD8 + /TIA-1- TIL in univariable analyysi, elinaika eroja potilailla, joilla on CD8 + /TIA-1 + TIL olivat huomattavasti korkeammat verrattuna potilaisiin, joiden puuttuessa CD8 + TIL (p 0,0001). Elinaika eroja potilailla, joilla on eri CD8 /TIA-1 fenotyypit arvioitiin monimuuttuja analyysin pT vaiheessa PN vaiheessa pM ja adjuvanttihoito. Potilailla, joilla CD8-positiivisia kasvaimia, TIA-1 positiivisuus johti suhteellinen riski 0,79 (95% CI: 0.7-0.9) verrattuna potilaisiin, joiden TIA-1-negatiivinen syöpiä (p = 0,006).

keskustelu

uudet tämän tutkimuksen tulokset on 1406 MMR-taitavia peräsuolen syövän potilailla viittaavat ensin, että suurempi määrä TIA-1 + TIL edustavat suotuisa ja itsenäinen prognoosi- parametrien ja toiseksi, että lisäksi CD8, TIA- 1 parantaa ennustetekijöiden kerrostuneisuus potilaista 35%.

Vaikka ennustetekijöiden merkitys runsas CD8 + TIL on aiemmin vahvistettu [3], [5], [15], [16], [17], tämä tutkimus menee askeleen pidemmälle tunnistaa merkki TIA-1 osuva ennustetekijöiden parametri peräsuolen syövän ja erityisesti kasvaimissa, joilla on merkittävä sytotoksisten CD8 + TIL. TIA-1 on sytoplasminen rae liittyvän RNA sitovan proteiinin tiettävästi ilmaistaan ​​solujen sytolyyttisen potentiaalin, mukaan lukien 50-60% CD8 + T-lymfosyytit [18]. TIA-1: n on osoitettu olevan osallisena Fas-välitteisen apoptoosin erilaisissa ihmisen pahanlaatuisissa ja herkistää endoteelisolujen pro-apoptoottisen ärsykkeen parantaen samalla NK-solujen sytotoksinen aktiivisuus [19], [20], [21]. Tuloksemme ovat yhtä mieltä näiden havaintojen. Tässä osoitamme, että 64% CD8 + TIL myötäilmentävät TIA-1. Lisäksi olemme tunnistaa pieni populaatio CD8 mutta TIA-1 + kasvaimen infiltroituvat solut edustavat populaatioiden TCRγδ solujen ja neutrofiilien ja vähemmässä määrin CD4 + T-solut, makrofagit, NK-solut, ja NK /T-solut.

Tutkimukset kliinisen ja ennustetekijöiden vaikutuksia TIA-1 + lymfosyyttien on enimmäkseen rajoitettu verisyöpiin sekä edullisia että epäedullisia vaikutuksia johtuvan yli-ilmentyminen tämän proteiinin [22], [23]. Vain kourallinen tutkimukset ovat arvioineet TIA-1 ilme TIL kolorektaalisyövässä, jotka liittyvät ylössäätöä apoptoosin ja määrän kasvuun TIA-1 + TIL MMR-puutosta kasvaimia [24], [25]. Mielenkiintoista on, että meidän MMR-taitavia tapauksissa emme löytäneet mitään korrelaatiota Useammat TIA-1 + solujen ja kasvaimen ilmentyminen apoptoosin vastaisen merkki Bcl-2, pro-apoptoottiset markkerit Apoptosis aktivoiva tekijä-1 (Rahastolla-1 ) ja Mammalian Sterile20 kaltainen kinaasi 1 (MST-1), eikä p53: n kanssa tai leviämisen markkeri Ki67 (tuloksia ei ole esitetty). Emme kuitenkaan ole vain raportti, että lisääntynyt määrä TIA-1 + TIL liittyy vahvasti parantuneen kliinisen tuloksen, mutta edustaa itsenäinen ennustetekijä, kokeessa ja validointitutkimuksessa ikäryhmät. Tärkeintä on, tuloksemme osoittavat, että vaikutus TIA-1 tuloksista on lisäaineena CD8, tulos, joka vaikuttaa 35% kaikista potilaista. Näin ollen huomattavasti enemmän myönteiseen tulokseen potilailla, joilla on CD8 + /TIA-1 + TIL verrattuna tapauksiin, joissa CD8 + /TIA-1- TIL saattavat viitata tehokkaamman immuunitutkimusohjelmasta by TIL aktivoitu ja erittäin sytotoksinen potentiaali.

tämän tutkimuksen tulokset on myös tunnistettu useita muita tyyppejä TIL sisällä kasvaimen keskelle olevan positiivinen vaikutus ennusteeseen, esimerkiksi FoxP3. Prognostisia rooli Tregs näyttää vaihtelevan merkittävästi kasvaimen tyypin mahdollisesti osoittaa ero rooleja näiden solujen kudokseen riippuvalla tavalla [26] – [28]. Kolorektaalisyövässä, useimmat tutkimukset ovat linjassa havainnot osoittavat, että suuri joukko FoxP3 Tregs on suotuisa ennustetekijä taudista vapaan ja yleisen eloonjäämisajan [10], [29], [30]. Kuitenkin tämä vaikutus, kuten korostettiin täällä, ei näytä olevan riippumaton CD8 +.

Vaikka tutkimus voidaan rajoittaa puutteellisia kliiniset tiedot joissakin tapauksissa, voisimme silti vahvistaa riippumaton ennustetekijöiden vaikutus TIA-1 ja sen muokkaamista vaikutus CD8 500 potilailla, joilla on täydellinen TNM ja hoidon tietoja. MMR tila analysoitiin ilmentyminen proteiinimarkkereita MLH1, MSH2 ja MSH6 ja vain kasvaimista positiivisuus kaikkiaan kolme merkkiä otettiin mukaan tähän analyysiin. Näillä merkeillä sekä TIA-1 ja CD8 rutiininomaisesti käyttää diagnostisissa patologian, jälkimmäinen kaksi T-solulinjan määrittämistä ja alatyypitys lymfoomat tuetaan näin niiden arvoa luotettava tutkimus työkaluja sekä [31], [32]. Käyttö TMA usein herättää huolta siitä, että proteiinin ilmentymistä heterogeeninen kasvaimia ei ole riittävän hyvin edustettuna tällä tekniikalla. Kuitenkin päivittäisessä diagnostista työtä, esiintyminen TIL tiedetään olevan varsin homogeeninen, ja vaikka yksi kasvain lyönti otettiin näytteet testiryhmässä, ylimääräiset sisällyttäminen validointi kohortti on keskimäärin 4 kasvaimen lyöntejä per kasvain näytteet pitäisi minimoida harha mahdollinen kasvain heterogeenisyys [33]. Lisäksi tutkimuksemme hyötyy käytöstä testin ja validointi ikäluokat, jälkimmäinen edustaa riippumaton ulkopuolinen validointi alaryhmä, johon proteiinimarkkereita arvioitiin useita itsenäisiä patologia, mikä edelleen vahvistaa toistettavuus CD8 /TIA-1 pisteytysjärjestelmä ja vaikutus lopputuloksesta.

Yhteenvetona TIA-1 on kestävä ennustetekijöiden immunologisen biomarkkereiden joka edesauttaa kliiniseen tulokseen potilailla, joilla MMR-taitava kolorektaalisyövissä riippumatta TNM ja adjuvanttihoito. Yhdistetty analyysi CD8 /TIA-1 tunnistaa suuren potilasryhmälle, jotka saavat parempaa riskin kerrostuneisuus, joka pitäisi tukea räätälöidä enemmän yksittäisiä kliinisessä hoidossa potilailla, joilla peräsuolen syöpä potilas, samalla uusia potentiaalisia avenue tutkimuksen kehittämiseen kohdennettujen immunoterapian.