Krooninen sairaus

tiivistelmä

Background

Kuihtuminen on yksi vakavimpia ja hengenvaaralliseen näkökohtia syövän. Se edustaa metabolinen oireyhtymä vaikuttaa olennaiset toiminnalliset piirit osallistuvat säätelyyn homeostaasin, ja sisältää ruokahaluttomuus, rasvan ja lihaskudoksen surkastuminen. Anoreksigeeninen peptidi α-MSH uskotaan ratkaisevasti mukana normaalin ja patologisen ravinnonsaannin säätelyn. Se oli arveltu, että saarto sen keskeinen fysiologisten tavoite, melanokortiini- (MC) -4-reseptori, voisi tarjota lupaava anti-kuihtuminen hoitostrategia. Tätä ajatusta tukee se, että eläinkokeissa, agouti-liittyvä proteiini (AGRP), endogeeninen käänteinen agonisti MC-4-reseptorin, havaittiin vaikuttavan kaksi tunnusmerkki piirteitä kuihtuminen, eli lisätä ruoan saannin ja vähentää energian menoja.

Menetelmät /Principal havainnot

SNT207707 ja SNT209858 kaksi äskettäin löydetty, ei peptidinen kemiallisesti sukua, oraalisesti vaikuttava MC-4-reseptoriantagonistien läpäisemään veri-aivoesteen. Molemmat yhdisteet havaittiin selvästi lisätä ruoan saanti terveillä hiirillä. Lisäksi hiirillä ihon alle istutettiin C26 adenokarsinoomasolua, toistuvan suun kautta (alkaa päivä kasvaimen istutuksen jälkeen) kummankin kahden yhdisteen lähes kokonaan esti kasvaimen aiheuttamaa laihtuminen, ja vähentynyt menetys kehon rasvattomaan massaan ja rasvan massan.

Johtopäätökset /merkitys

Päinvastoin kuin aiemmin raportoitu peptidiseen ja pienimolekyylisiä MC-4 antagonisteja, yhdisteitä tässä kuvatut työskentely suun kautta reittiä. Oraalisesti aktiiviset yhdisteet voivat tarjota huomattavaa etua kakeksian hoitoa potilaille.

Citation: Weyermann P, DALLMANN R, Magyar J, Anklin C, Hufschmid M, Dubach-Powell J, et al. (2009) suun kautta otettava selektiivinen melanokortiini-4 -reseptorin stimuloi ruoanottoa ja vähentää syövän aiheutetun Kuihtuminen hiirissä. PLoS ONE 4 (3): e4774. doi: 10,1371 /journal.pone.0004774

Editor: Cheng-Xin Gong, New York State Institute for Basic Research, Yhdysvallat

vastaanotettu 11 joulukuuta 2008; Hyväksytty: 23 tammikuu 2009; Julkaistu: 19 maaliskuu 2009

Copyright: © 2009 Weyermann et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Santhera Pharmaceuticals (Sveitsi) Ltd rahoitetaan ja hyväksyi julkaisemista tämän työn.

Kilpailevat edut: Kaikki kirjoittajat maksetaan työntekijöille Santhera Pharmaceuticals (Sveitsi) Ltd. PW, SN, MH ovat keksijät maailman patenttihakemuksista WO2009 /010299A1 ja WO2008 /116665A1 arkistoi Santhera Pharmaceuticals (Sveitsi) AG.

Johdanto

Kuihtuminen on yksi vakavimpia ja hengenvaaralliseen näkökohtia syövän. Se liittyy anoreksia, rasvan ja lihaskudoksen surkastuminen, ja vähitellen pienenee elämänlaatua [1]. Läsnäolo kuihtuminen on ennustaja huono selviytymisen. Jopa 80% potilaista, joilla on syöpä kehittyy kakeksia ennen kuolemaa, ja yli 20% kaikista tapauksista kuihtuminen on vastuussa potilaan kuolemaan [2], [3]. Tällä hetkellä diagnoosi, noin 80% potilaista, joilla ruoansulatuskanavan syöpiä ja 60%: lla potilaista, joilla keuhkosyöpä on huomattavia laihtuminen. Yleensä potilaat, joilla on kiinteitä kasvaimia (lukuun ottamatta rintasyöpä) on korkeampi taajuus kakeksian [4]. Kuihtuminen on ennustaja huono tulos paitsi syöpäpotilaiden lisäksi myös useita muita kroonisia sairauksia [5] – [8].

Vaikka tarkka luonne taustalla olevien mekanismien edelleen suurelta osin tuntemattomia, on ilmeistä, että kuihtuminen edustaa metabolinen oireyhtymä aiheuttama monimutkainen vuorovaikutus kasvain ja isäntä. Kakeksia on ominaista suuret aineenvaihdunnan häiriöt ja maladaptations: Ruoka ja siksi energian saannin vähenee, lepää energiankulutus lisääntyy usein ja hajoamista nopeutetaan [3]. Syntymässä näkemys on, että kuihtuminen edustaa kliininen seuraus krooninen, systeeminen tulehdusreaktio sekä monia fysiologisia, aineenvaihdunnan ja käyttäytymisen muutokset kuihtuminen on todettu olevan tiukasti säännelty sytokiineja. Esimerkiksi sytokiinien on todettu olevan mukana ehtyminen luustolihasten [9], signalointi synteesi akuutin faasin proteiinien [esim. 10], sääntely energiankulutuksen [esim. 11], ja vähentynyt ravinnonotto [esim. 12].

Yksi mekanismi, jolla sytokiinien (ja muut ruokahalu säätelevät molekyylit, kuten leptiini) voi aiheuttaa anoreksia on kautta sääntely pro-opiomelanokortiini (POMC) lauseke [13]. POMC on esiaste molekyyli tärkeä endogeeninen peptidit, kuten adrenocorticotropin (ACTH), α- ja β-melanosyyttejä stimuloivan hormonin (α-MSH: n ja β-MSH), γ-lipotropiini ja β-Endorphin, jotka on tuotettu kautta katkaisun kudosspesifistä entsyymejä. POMC neuronit sijaitsevat pääasiassa kaarevaan ydin hypotalamuksen. POMC neuronit katsotaan olevan merkittäviä sääntelytehtävistä ravinnon ja energian kulutukseen. Oletetaan, että nämä vaikutukset välittää pääasiallisesti α-MSH, 14 aminohapon peptidi, jossa ruokahalua estävä vaikutus [14].

Alpha-MSH, endogeenisen ligandin MC-4-reseptorin, ja muiden agonistien on MC-4-reseptoriin, on havaittu estävän ravinnon, lisäävät energiankulutusta ja alentaa kehon painoa. Kääntäen, häiriintyminen melanokortiinireseptoriagonisti signaloinnin kanssa agouti liittyvä peptidi (AGRP) tai pieni molekyyli MC-4-reseptorin antagonisti käsittelyä tai poistamista reseptorin lisäsi ravinnon ja vähentää energian kulutusta [15] – [18]. Näin ollen luotaessa hoitovaihtoehto kakeksian potilailla se oli arveltu, että keskeytyminen tämän signalointireitin voisi mahdollisesti vähentää etenemistä kakeksian [19], [20].

SNT207707 ja SNT207858 ovat tulokset merkittäviä ponnisteluja löytää valikoivia, tehokkaita ja suun kautta aktiivinen MC-4-reseptorin antagonisteja. SNT207707 sitoutuu MC-4-reseptorin kanssa, affiniteetilla, joka on 8 nM ja näyttää yli 200-kertainen selektiivisyys verrattuna MC-3 ja MC-5. SNT207858 on 22 nM MC-4-antagonisti, jossa on 170-kertainen selektiivisyys vs. MC-3 ja 40-kertainen selektiivisyys MC-5 [21], [22]. Jotta voidaan arvioida, hyödyllisyyttä näiden yhdisteiden hoitoon kakeksian arvioimme voivat aiheuttaa välitöntä ruokkia valoisan vaiheen aikana terveillä hiirillä. Lisäksi olemme tutkineet vaikutuksia toistuvan hoitojen mahdollisesti kliinisesti merkityksellisiä muuttujia hiirimallissa syöpäkakeksian.

Materiaalit ja menetelmät

Yleiset

SNT207707 ja SNT207858 syntetisoitiin vuonna Lääkkeen Chemistry osastolta Santhera Pharmaceuticals (Sveitsi) Ltd. Kaikki eläimet pidettiin standardeissa laboratorio-olosuhteissa (21 ± 1 ° C, 40-60% kosteus) 12 tuntia valoa päivässä (05:00 ja 17:00 h) ja vapaasti ruokaa (2018S Teklad Global, Harlan, CH) ja vesijohtovettä. Kaikki yhdisteet olivat äskettäin liuotettiin ja tapahtui suun kautta ilmoitettuina annoksina tilavuudessa 10 ml /kg 10% hydroksipropyyli-β-syklodekstriiniä (Acros Organics, Geel, BE) 100 mM suolaliuos, ellei toisin mainita. Syngeenisiin C26 paksusuolen adenokarsinooma-soluja (CLS Cell Line Service, Eppenheim, DE) viljeltiin seerumivapaassa väliaineessa (Quantum 263, PAA Laboratories, Linz, A) ennen istutusta eläimille. Kaikki eläinkokeet hyväksyttiin valtion viranomaisten (luvan numerot BL246, BL356).

Light Phase Food Intake

Kuusi viikkoa vanha nainen NMRI (RCC Ltd .; Füllinsdorf, CH) olivat satunnaisesti määritetty eri koeryhmään ja ajoneuvon hallintalaitteita. Heidän majoitettiin ryhmissä 3 hiirtä häkkiä kohti. Sen jälkeen kun vähintään yhden viikon akklimatisaatio koehuoneeseen, kunkin eläimen paino määritettiin ja yhdiste tai vehikkeli annettiin sopivina pitoisuuksina 5 h kuluttua valot. Sitten ruoan kulutus jokaisen häkin ryhmän kirjattiin punnitsemalla ruoka suppilon yli 4 tunnin ajanjakson ajan. Ravinnonoton jälkeen määritettiin ero ruokasäiliön paino alussa ja lopussa 4 tuntia annon jälkeen yhdisteen tai ajoneuvoon. Koska määrä ruokaa haltuun 4 tuntia yksittäisillä eläimillä oli lähellä toteamisrajaa, päätimme luottaa keskimääräistä elintarvikkeiden määrät otetaan häkkiä kohden (eli per 3 hiirtä), jolloin kummassakin hoitoryhmässä koostui n = 6 häkeissä. Mitatut arvot kussakin häkissä normalisoitiin 100 g paino (BW). Edellinen kokeet osoittivat erinomaista korrelaatiota ravinnon ja vähentää ruoan painosta.

C26 adenokarsinoomaa-indusoidun kakeksiamalliin

Kuuden viikon ikäisiä, koiraspuolisia BALB /c-hiiriä (Harlan, Alankomaat) käytettiin. Eläimiä single sijoitettu, ja sen jälkeen yhden viikon sopeutumisajan satunnaistetusti koe- tai kontrolliryhmiin. Sillä kasvaimen istutuksen jälkeen hiiret nukutettiin 200 pl ketamiini /ksylatsiini. Noin 1 x 10

6 C26 solut suspendoitiin fosfaattipuskuroituun suolaliuokseen implantoitiin sitten yksipuolisesti kylkeen hiirten ihon alle injektiona. Ei-kasvain valvontaa kävi samalla tavalla, mutta saivat PBS: ää injektiona (n = 9 per ryhmä). Alkaen ensimmäisenä päivänä kasvaimen istuttamisen jälkeen, yhdisteet tai vehikkeli annettiin oraalisesti 5 ml /kg 1-2 tuntia ennen puhkeamista pimeässä vaiheessa. Ravinnonotto ja painon kirjattiin päivittäin. Vähärasvaisen ja rasvan massa kunkin eläimen määritettiin MRI relaxometry (EchoMRI-500, Echo Medical Systems, Houston, TX, USA) ennen kasvaimen inokulaation (päivä 0) ja lopussa kokeen poistamisen jälkeen kasvain (tyypillisesti päivä 15).

Aivot ja plasmassa

in vivo

kaksitoista viikkoa vanha mies CD-1 (Hilltop Lab Animals, PA, USA) hiirille annosteltiin letkuruokinnalla joko SNT207707 tai SNT207858 60 mg /kg (n = 9 yhdistettä kohden). 1, 3, ja 6 tuntia annoksen jälkeen, 3 hiirtä kustakin yhdisteestä ryhmästä tapettiin CO

2. Veri kerättiin sydänpunktiolla, plasma eristettiin välittömästi ja pidettiin sitten kuivajäässä analyysiin asti. Aivot poistettiin, huuhdeltiin suolaliuoksella ja säilytettiin -80 ° C: ssa analyysiin asti. Tasoilla yhdisteen määritettiin HPLC: llä ja sen jälkeen massaspektrometrialla (MS /MS). Alueet käyrän alla (AUC) plasman ja aivojen tasot laskettiin mitatuista tasolle 1, 3 ja 6 tunnin kuluttua annoksesta. Brain /plasma suhde laskettiin sitten perustuen AUC. Arvioida eheyden veri-aivo-esteen kaikki eläimet samanaikaisesti annosteltiin 10 mg /kg atenololia. Brain tasot Atenololi lähelle tai alle toteamisrajan osoitti, että veri-aivo-esteen oli ehjä.

Tilastot

Erot ryhmien verrattiin (toistuva) varianssianalyysi (ANOVA), jossa Dunnettin post hoc testi tarvittaessa. Kaplan-Meier -käyrät esiintymisen kakeksian oli piirretty GraphPad Prism ja tilastollisesti verrattiin käyttämällä Mantel-Cox testi. Kaikki testit suoritettiin 2-hännitettiin α = 0.05. Kaikki tulokset esitetään keskiarvoina ± SEM.

Tulokset

Light Phase Food Intake

Yksi

ihonalainen

injektio 20 mg /kg joko SNT207707 tai SNT207858 selvästi lisääntynyt ravinnon hiirillä (ANOVA p 0,001). Lisäys oli tilastollisesti erittäin merkittävä sekä yhdisteiden (p 0,01). Ruokamäärä otettu neljän tunnin tarkkailujakson aikana oli noin 3-kertainen määrä ottanut ajoneuvon hoidettuihin kontrolleihin. Kuvio 1 kuvaa tulokset graafisesti.

Eläimet pidettiin kolmen ryhmissä. Ruoan nauttiminen häkkiä kohti (n = 6 häkit /ryhmä) rekisteröitiin yli 4 tunnin ajanjakson ajan alkaen injektion jälkeen yhdisteen. Jokainen pylväs edustaa keskiarvo ± SEM. Tilastollinen ero vs. Vehicle ** p 0,01.

mukaisesti tulosten kautta Ihonalaisen reittiä, yksi

suun

hoito letkuruokinnalla joko SNT207707 tai SNT207858 annoksesta riippuvaisesti lisäsi ravinnon (ANOVA: SNT207707 p 0,01 ja SNT207858 p 0,05). Kerta-annos vertailut paljastivat tilastollisesti merkitsevä ravinnon 60 ja 120 mg /kg SNT207858 (p 0,01), ja 120 mg /kg SNT207707 (p 0,01). Ruokamäärä otettu neljän tunnin havaintojakson aikana oli suunnilleen jopa neljä kertaa enemmän ottanut vehikkelikontrolliryhmään. Kuvio 2 on graafinen esitys tuotettujen tietojen.

Eläimet pidettiin kolmen ryhmissä. Ruoan nauttiminen häkkiä kohti (n = 6 häkit /annos) kirjattiin yli 4 tunnin ajanjakson ajan alkaen antamisen jälkeen yhdistettä. Jokainen pylväs edustaa keskiarvo ± SEM. Tilastollinen ero vs. Vehicle ** p 0,01.

C26 adenokarsinoomaa aiheuttaman kakeksiamalliin

Kerran vuorokaudessa suun kautta molemmat yhdisteet SNT207858 ja SNT207707 alkaa päivä kasvaimen istutuksen jälkeen merkittävästi vähentynyt kasvaimen aiheuttama laihtuminen. Tuloksia kahden kokeen olivat varsin vertailukelpoisia: Molemmissa kokeissa kasvain oli palpoitavissa noin päivänä 4 inokulaation jälkeen. Samoin molemmissa kokeissa ajoneuvo-kasvaimen valvontaa pysähtyi lihoo noin päivä 11 ja alkoi näyttää laihtuminen päivänä 13. Kummassakin kokeellinen sarja yhdisteitä lähes kokonaan esti laihtuminen, ja keskimääräinen paino on kasvainta kantavaan yhdiste hoidetuissa ryhmissä oli merkittävästi korkeampi kuin Vehicle + kasvain ryhmä. Kuva 3 (vasen paneeli) kuvaa tuloksia graafisesti.

Vasen paneeli: Mean kehon painon kehitys Vehicle ohjaus (avoimet neliöt), Vehicle + kasvain ohjaus (täytetyt neliöt), ja 30 mg /kg (A) SNT207707 ja (B) SNT207858 (harmaa kolmiot) ryhmä (n = 9 kukin). Keskimmäinen ja oikeanpuoleinen paneeli: Ero lihasmassan ja rasvan massan välillä kasvaimensiirrostuspäivänä (päivä 0) ja kokeen lopussa (päivä 15). Kukin arvo edustaa keskiarvo ± SEM. Tilastollinen ero vs. Vehicle + Kasvain * p 0,05, *** p 0,001.

Vaikka molemmat yhdisteet eivät suuresti parantaa oireita kuihtuminen, kasvaimen kasvua sekä yhdiste ryhmissä ei muuttanut verrattiin Ajoneuvo + Kasvain ryhmä. Kasvaimen painot käsitellyillä hiirillä SNT207707 (1,03 ± 0,07 g) ja SNT207858 (1,11 ± 0,09 g), eivät olleet erilaisia ​​kuin vastaavien verrokkiryhmien (1,17 ± 0,06 g ja 1,19 ± 0,05 g, vastaavasti). On huomattava, että vaikka kaikki inokuloitiin eläimille kehittyi kasvain, etteivät kaikki kasvaimen kantavissa hiirissä tullut kakektisten eli menettänyt enemmän kuin 5% kehon painosta kokeen. Tämän määritelmän mukaan, kuihtuminen ei havaittu 2 9 ja 3 9 eläimistä Vehicle + Kasvaimen verrokkiryhmien taas 8 ulos 9. SNT207707 ja 6 ulos 9 hiiret SNT207858 hoidetussa ryhmässä, vastaavasti, eivät osoittaneet kuihtuminen. Kaplan-Meier-analyysi alkaa kakeksian paljasti tilastollinen ero SNT207707 + Kasvaimen (p 0,05) ja SNT207858 + Kasvaimen (p 0,01), jotka kukin on verrattuna vastaaviin Vehicle + Kasvaimen kontrolleihin (Kuva 4).

(A) Vasen paneeli: Kaplan-Meyer kuvaaja Vehicle ohjaus (katkoviiva musta viiva), Vehicle + kasvain ohjaus (musta viiva), ja SNT207707 30 mg /kg (harmaa viiva) ryhmä (n = 9 kukin). (B) Oikea paneeli: Kaplan-Meyer kuvaaja Vehicle ohjaus (katkoviiva musta viiva), Vehicle + kasvain ohjaus (musta viiva), ja SNT207858 30 mg /kg (harmaa viiva) ryhmä (n = 9 kukin). Huomautus: Tilastollinen vertailu Vehicle + Kasvaimen ja ryhmissä oli merkittävä.

Molemmat yhdisteet havaittiin olevan selvä vaikutus kehon koostumukseen. Ei kasvain vehikkelikontrollit suurentunut rasvan massa ja vähärasvaisen painoindeksi taas ajoneuvon kasvaimen eläimet osoittivat selvästi menetykset molempien, rasvan massa ja kehon rasvattomaan massaan. Molemmat yhdisteet osittain torjua syövän aiheuttamiin muutoksiin, eli ei heikkene vaan pienikin voitto rasvaa ja vähärasvaisen painoindeksi havaittiin. Kuva 3 (keskimmäinen ja oikea paneeli) kuvaa tuloksia graafisesti.

Aivot ja plasman in vivo

Suun kautta annosteltuna, CD-1 hiirissä oli huomattavaa molemmat yhdisteet plasmassa ja aivoissa ( Pöytä 1). Laskennallinen maksimaalinen pitoisuudet aivoissa ovat 580 nM SNT207707 ja 110 nM SNT207858.

Keskustelu

Tuloksemme osoittavat merkittävää lisäävää vaikutusta SNT207707 ja SNT207858 ravinnosta yli 4 h tarkastelujakso jälkeen suun kautta hiirille. Luotettavaa orexigenic vaikutukset vahvistavat julkaisemat tulokset osoittavat, että endogeeniset peptidirakenteinen tai pienimolekyylinen MC-4-reseptoriantagonistien parantaa ravinnon terveillä eläimillä [23] – [25]. Merkitys yhdisteen parantavia vaikutuksia elintarvikkeiden saannin tukee lisäksi se, että meidän kokeissa lääkkeen aiheuttama ruokinta tapahtui aktiivinen valo vaihe, jossa normaaleissa (ei painotti) olosuhteissa, ruoan saanti on alhainen [26] . Lisäksi eläimillä oli 24 tuntia vapaa pääsy ruokaan ja veteen, eli ne eivät paastosivat. Näin ollen lääkkeen vaikutuksia voitaisiin tulkita suhteen akuutin ruokahalua lisäävä vaikutus.

tulokset kasvaimen aiheuttama kakeksia kokeet ovat yhtä selkeitä. SNT207858 ja SNT207707 osoitti selvästi kakeksian vastainen vaikutuksia käytetty annos, eli sekä yhdisteet lähes täysin tukossa kasvaimen aiheuttama painon menetys, ja oli myös myönteisiä vaikutuksia kehon koostumukseen. Sekä menetys kehon rasvattomaan massaan ja rasvakudoksen massan vähennettiin. Nämä kakeksian vastainen vaikutukset eivät johtuneet mitään antituumorivaikutuksia koska määrittämistä kasvaimen kasvua ja paino eivät osoittaneet mitään vaikutusta yhdisteiden kasvaimen. Vaikka kaikki kasvain istutettiin hiiriin teki kehittää kasvain, ja kaikki kasvaimet kehittynyt yhden erän kasvainsoluja oli yksi eläinten Vehicle + kasvain ryhmä ei näy yhtään kuihtuminen. Syynä puute kakeksian ei tiedetä, mutta se on syytä olettaa, että siellä saattaa olla ollut eläimiä ei näy kakeksian lääkekäsittelykokeen ryhmille sekä. Kuitenkin, määrä ei kakeksian hiiret Vehicle + Kasvaimen ryhmä on huomattavasti pienempi kuin hoitoryhmissä sekä yhdisteiden (kuvio 4), mikä edelleen tukee edullinen vaikutus hoitoon. Koska mitään hyödyllistä merkki erotella spontaania ja huumeiden aiheuttamia puuttuminen kakeksian ja jotta ei bias tuloksiin kokeen kaikki eläimet olivat mukana tilastollisen arvioinnin verrattaessa keino kehon painon tai kehon koostumukseen.

havaitut vaikutukset SNT207858 ja SNT207707 että C26 syöpä kakeksiamalliin ovat linjassa aiempien havaintojen meidän ja muiden ryhmien raportointi vaikutuksia MC4-R antagonismin eläimillä syövän aiheuttama anoreksia. Esimerkiksi MC-4 reseptorisalpaus läpi keskushallinto AGRP tai MC-3/4-antagonisti SHU-9119 ruokailun lisäämistä malleissa syövän aiheuttama anoreksia [20], [27]. Aiemmin tulokset osoittivat, että ihon alle ja pienen molekyylin MC-4R antagonisti ML00253764 oli tehokas vähentämään kuihtuminen eläimillä istutettu joko peräsuolen kasvain [28] tai Lewisin keuhkokarsinooma [23]. Yhdenmukaisesti näiden havaintojen intraperitoneaalitestissä anto NBI-12i, toinen MC-4R antagonisti, lievittää kuihtuminen hiirillä on implantoitu Lewisin keuhkokarsinooma ja uremia. Tämä pieni molekyyli antagonisti ei ainoastaan ​​vähennä kasvaimen aiheuttamaa anoreksia mutta myös lisääntynyt lihasmassaa [24]. Lopuksi on hiljattain yhteenveto raportin koko joukon yhdisteiden Neurocrine biotieteiden kuvattu olevan myönteisiä vaikutuksia jälkeen intraperitoneaalitestissä hallinto syöpäkakeksialle malleissa [29].

Kun otetaan huomioon

priori

hypoteesin tärkeä kysymys koskee osallistumista Keski hermo piirien havaitusta ruokahalua lisääviä vaikutuksia, tai toisin sanoen: ovat aivot saavutetut yhdisteillä tarpeeksi korkea kausaalisesti osallisena vaikutuksia? SNT207707 IC50 on 8 nM (sitova) ja 5 nM (toiminto) MC-4-reseptorin [21]. Likimääräinen aivojen konsentraatio hiiren laskettiin olevan 580 nM (taulukko 1). Vastaavasti keskittymisestä kannalta mitään panettelee keskeinen vaikutus. Sama pätee SNT207858 eli maksimaalinen aivot pitoisuus on noin 110 nM [22], ja näin, kun otetaan huomioon IC50 22 nM (sitova) ja 11 nM (toiminto), edellä vaadittu pitoisuus keskushermostovaikutukset (taulukko 1) .

Facing selkeä vaikutukset ravinnon seuraava kysymys on, kuinka pitkälle nämä vaikutukset

sinänsä

voi selittää havaitun anti kuihtuminen vaikutuksia. Ottaen huomioon mahdolliset tulkinta meidän vaikutusten kannalta ruokahalua lisäävä vaikutus välittömästi johtaa vertailun aktiivisen annoksilla valossa vaiheessa ravinnon ja syövän kakeksiamalliin. Näin ollen, on merkittävä edullinen vaikutus syövän indusoiman kakeksia kokeessa havaittiin 30 mg /kg p.o. (Kuvio 3). Tämä vaikutus sisältää väheneminen kehon painon ja myönteisiä vaikutuksia lihasmassan ja rasvan massan. Aivan samalla annoksella, kun otetaan vaiheessa ravinnon kokeilu, vain hieman suuntaus (jos mitään) kohti ruokailun lisäämistä voitiin havaita (kuvio 2). Tukeakseen ruokahalu perustuvan tulkinnan monessa vaikuttavat mahdolliseen annokseen epäsuhta voidaan esille. Ensinnäkin, kevyen faasin ravinnon kokeita on tehty meidän vakio laboratoriokannan (NMRI) katsoo, että koska tarvetta syngcenisiä kasvain ja hiiri linja, BALB /c-hiiret on käytetty syöpäkakeksialle kokeita. Lisäksi asetus ruoan kulutus perustuu erittäin monimutkainen, erittäin silloitetun verkon, joihin aivot, autonominen hermosto, ruoansulatuskanavasta, ja rasvakudoksesta otettava monien välittäjäaineiden, hormonien ja peptidit [30] – [32 ]. Kakeksia on seurausta syvällinen toiminnallisen häiriön näiden verkkojen; oletettavasti pro-inflammatoristen sytokiinien (katso edellä). Näin ollen lääkkeen vaikutuksia päällekkäiskuvaksi täysin erilainen tausta ja sen vuoksi jopa enemmän syvällisiä muutoksia, ei rajoitu muutosten herkkyyttä yhdisteitä, olisi voinut odottaa.

Tärkeä näkökohta, puhuminen vastaan ​​tulkintaa yksinomaan mitattuna ruokahalu lisälaite on se, että mittaukset ravinnon meidän syöpäkakeksialle kokeita edellyttäen ei lopullisia tuloksia, eli ruoan kulutus oli erittäin vaihteleva välillä päivän kokeen eikä selvää vaikutusta kohti ruokailun lisäämistä voidaan tunnistaa (tuloksia ei ole esitetty) . Lisäksi ei ole epäilystäkään siitä, että fysiologisia muutoksia kuihtuminen eivät ole vain liittyy ruokahaluttomuutta. Kakektisen potilas on selvästi erilainen suhteen aineenvaihdunnan muutoksia. Terveillä henkilöillä kalorien puute aiheuttaa fysiologisia muutoksia säästää energiaa ja suojella kudosta. Sitä vastoin syöpäpotilaille osoittavat maladaptive vasteet sopimattomissa korkea energiankulutus huolimatta alhainen kalorien saanti [3]. Niinpä terapeuttisia lähestymistapoja, joilla pyritään molempia, lisäämällä ravinnon ja vähentää energian menoja odotetaan olevan terapeuttisesti parempia lähestymistapoja, joiden tarkoituksena pelkästään ruoan saanti. Tämä erityisesti näkökohta voisi tehdä MC-4-reseptorin antagonisti lähestymistapa terapeuttisesti lupaavimmat koska vaikutusten vuorovaikutusta melanokortiini- signalointireitin odotetaan olevan vaikutuksia laajempi kuin vain modulaatio ruokahalu. Kuten aikaisemmin on mainittu, α-MSH, endogeeninen agonistinen ligandi tätä reseptoria havaittiin on kaksitoiminen, ts vähentävän ruuan nauttimista [14] ja myös lisäävät energian kulutusta, [33]. Puolestaan ​​agouti liittyvät proteiinin endogeeninen käänteisen agonistin tämän reseptorin havaittiin estää MC-4-reseptorin ja, käänteisesti toiminnan α-MSH, lisätä ruoan saannin ja vähentää energian kulutusta [34]. Niinpä kautta MC-4-reseptorin, kaksi keskeisiä näkökohtia kuihtuminen voidaan mahdollisesti käsitellään ja kakeksian vastaista vaikutusta meidän yhdisteiden C26 syövän malli saattaisi perustua tällainen yhdistelmä vaikutuksista. Niinpä tulevaisuudessa kokeissa vaikutukset energiankulutus ovat näkyvän kokeellisesti, esimerkiksi epäsuoralla kalorimetria.

Vaikka tuloksemme ovat täysin sopusoinnussa kirjallisuudessa on yksi suuri ero: Toisin kuin edellä edellä mainittuja kokeita peptidisiä ja pienimolekyylisiä MC-4-antagonistit, yhdisteitä tässä kuvatut toimivat suun kautta reittiä. Kun otetaan huomioon potilaiden hoidon, oraalisesti aktiivisia yhdisteitä voi tarjota huomattavaa etua. Lisäksi on huomattava, että SNT207707 ja SNT207858 edustavat kahta erilaista kemiallisesti sukua yhdiste luokat, MC-4 reseptorisalpaus on ainoa yhteinen nimittäjä.

Kiitokset

Kiitämme Imujärjestelmät (Exton , PA) määrittämiseen aivojen ja plasman tasoja meidän yhdisteitä, ja DL. Marks lukemiseen ja kommentoidaan aiemman version käsikirjoituksen.