Krooninen sairaus

tiivistelmä

Background

Bone etäpesäke on kaikkein vaarallisin muoto useita syöpiä. Β2-mikroglobuliinin (β2-M) /hemochromatosis (HFE) kompleksi on tärkeä rooli syövän kehittymisessä ja luun etäpesäke. Osoitimme aikaisemmin, että yli-ilmentyminen β2-M eturauhasessa, rinta-, keuhko- ja munuaissyövän lisäävästi luumetastaasipotilailla hiirimalleissa. Siksi me arveltu, että β2-M on järkevä tavoite eturauhassyövän luuhun etäpesäke.

Tulokset

Tässä tutkimuksessa osoitamme rooli β2-M ja sen sitova kumppani, HFE , moduloimaan säteilyherkkyydestä ja chemo-herkkyys eturauhassyövän. Geneettinen poisto β2-M tai HFE tai käyttämällä anti-β2-M-vasta-aine (Ab), osoitamme, että eturauhassyövän solut ovat herkkiä säteilylle

in vitro

ja

in vivo

. Esto β2-M tai HFE herkistynyt syöpäsolujen säteilylle lisäämällä rauta ja reaktiivisten happiradikaalien ja vähentämällä DNA: n korjaukseen ja stressin vastaus proteiineja. Käyttäen ksenografti hiirimallissa, osoitamme, että anti-β2-M Ab herkistää syöpäsolujen sädehoitoa. Lisäksi anti-β2-M Ab kykeni estämään kasvaimen kasvua käytettäessä immunokompetenteilla spontaanisti eturauhassyöpää hiirimallissa. Koska luun etäpesäkkeiden on tappava, käytimme luun ksenograftimallia kyvyn testaamiseksi anti-β2-M Ab: n ja säteilyn estää kasvaimen kasvua luuhun. Yhdistelmähoito merkitsevästi esti kasvaimen kasvua luussa ksenograftimallia estämällä β2-M ja asiakkuutta raudan ylikuormitus. Sen lisäksi, että säteilylle herkkä vaikutuksia, inhibitio β2-M herkistyneet eturauhasen syöpäsolujen kemoterapeuttisten aineiden.

Johtopäätös

Koska eturauhassyövän luuhun metastaattinen potilailla on korkean β2-M tuumorikudokseen ja erittyvän muodon, kohdistaminen β2-M anti-β2-M Ab on lupaava terapeuttinen aine. Lisäksi esto β2-M herkistää syöpäsolut kliinisesti käytetty hoitomuotoja, kuten säteilyn aiheuttamalla raudan ylikuormitus ja vähentämällä DNA korjaukseen entsyymejä.

Citation: Josson S, Matsuoka Y, Gururajan M, Nomura T, Huang WC, Yang X, et al. (2013) esto β2-mikroglobuliinin /hemochromatosis Parantaa säteilyherkkyydestä indusoimalla Iron Overload eturauhassyöpäsoluissa. PLoS ONE 8 (7): e68366. doi: 10,1371 /journal.pone.0068366

Editor: Dean G. Tang, The University of Texas M. D Anderson Cancer Center, Yhdysvallat

vastaanotettu: 24 huhtikuu 2013; Hyväksytty: 16 toukokuu 2013; Julkaistu: 10. heinäkuuta 2013

Copyright: © 2013 Josson et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tämä työ tukevat osittain tutkimusapurahoja PO1CA098912 ja RO1CA122602 National Institutes of Health /National Cancer Institute (LWK Chung). Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Eturauhassyöpä luumetastaasipotilailla on tappava. Yli 70% eturauhassyövän potilailla on luumetastaasipotilailla ruumiinavauksessa [1]. Mediaani 5 vuotta eloonjäämisaste on vain 31% metastasoineeseen potilaista. Eturauhassyövän potilailla, joilla on luun etäpesäkkeitä on osoitettu olevan korkea ilmentymisen β2-mikroglobuliinin (β2-M) syöpäsoluissa [2]. β2-M on solukalvon proteiini, joka komplekseja MHC-luokan 1 perhe. β2-M on kohonnut useissa aggressiivinen kiinteitä ja nestemäisiä kasvaimia. Se on pleotropic tekijä, joka välittää useita prosesseja, kuten syövän kehittymisen [3], syövän etäpesäkkeiden [4], ja osteomimicry [2]. Aiemmat tutkimukset osoittavat, että kohdistaminen β2-M anti-β2-M-vasta-aine (Ab) on lupaava terapeuttinen strategia eturauhasessa, munuaisten ja neste kasvaimia [5] – [7]. Aiemmat tutkimukset osoittavat, että β2-M vuorovaikutuksessa hemochromatosis proteiini (HFE), joka on ei-klassisen MHC luokka 1 jäsen [8]. β2-M /HFE kompleksi on vuorovaikutuksessa transferriinireseptori (TFRC1), ja alentaa affiniteettia transferriinin sitoutumista TFRC1 [9]. Siten β2-M /HFE estää liiallisen raudan ottoa. Hiiret puuttuu β2-M tai HFE kehittää raudan ylikuormitus myöhemmin elämässä ja rauta liittyviä sairauksia [10], [11]. Tässä tutkimuksessa osoitamme, että inhibitio β2-M käyttäen vasta-ainetta tai geneettinen deleetio β2-M tai HFE syöpäsoluissa aiheuttaa raudan ylikuormitus ja herkistää syöpäsolujen säteilylle

in vitro

ja

in vivo

ja kemoterapeuttiset aineet

in vitro

.

Materiaalit ja menetelmät

bioetiikan lausunto

Kaikki eläinkokeet oli hyväksynyt IACUC on Emory University ja Cedars-Sinai Medical Center ja tehdään vakiintuneiden ohjeiden mukaisesti.

Cell Culture

ARCaP

M, ARCaP

E [12], C4-2, ja C4 2B [13] syöpäsolujen saatiin meidän laboratoriossamme, kuten aikaisemmin on kuvattu, ja p69 (ei-tuumorigeenisiä soluja), LNCaP, PC-3, DU145, TRAMP C1 ja TRAMP C2 eturauhassyövän solut hankittiin ATCC: ltä. Soluja viljeltiin T-väliaineessa (GibcoBRL, Grand Island, NY), jota oli täydennetty 5% lämmöllä inaktivoitua naudan sikiön seerumia (FBS) (Bio-Whittaker, Walkersville, MD), 50 IU /ml penisilliiniä ja 50 ug /ml streptomysiiniä (GibcoBRL ) ja pidettiin 5% CO

2 37 ° C: ssa. Kaikki solut testattiin mykoplasman kuuden kuukauden välein, ja olivat negatiivisia (Mycoplasma havaitseminen kit, R 0,01, *** p 0,001, Studentin t-testi). B. ARCaP

M-solut herkistyneet säteilyn läsnä ollessa anti-β2-M Ab käyttäen clongenic määritystä. (* P 0,03, *** p 0,008, ANOVA). C. Vaikutus anti-β2-M Ab (0,8 mg /kg) ja säteilyä (15 Gy) kasvaimen kasvua ihonalaisen ARCaP

M ksenografti karvattomia hiiriä malli. (** P 0,01, Studentin t-testi).

. Iron värjäystä ohjaus ja anti-β2-M Ab (5 ug /ml) käsitellyissä soluissa käyttäen rautaa värjäystä sarja ARCaP

M eturauhassyövän solulinjoissa. B. Mitokondrioiden superoksidi tasoa vastauksena anti-β2-M Ab hoidon aikana ja annoksesta riippuvaisella tavalla in i. ARCaP

M, ii. ARCaP

E eturauhassyövän solulinjoissa (*** p 0,001, Studentin t-testi) ja iii. P69 kuolemattomaksi eturauhasen epiteelisolujen käyttäen MitoSOX väriainetta. C. Mitokondrioiden superoksidia ARCaP

M, KD

HFE1 ja KD

HFE3 käyttäen MitoSOX väriainetta (* p 0,05, Studentin t-testi). D. ilmentäminen stressin vasteen proteiinien ja DNA: n korjaus-entsyymien C4-2B Neo ohjaus ja β2-M knockdown solulinjoissa. i.β2-M-proteiinin ilmentymistä, ii. HSP27 ja HSP70 proteiinin ilmentymiseen ja iii. NUDT1 ja MPG proteiinin ilmentymiseen. NUDT1 ja MPG proteiinin ilmentymistä vasteena anti- β2-M Ab hoito LNCaP ja C4-2 syöpäsolujen.

. Solujen elinkelpoisuus TRAMP C1 ja TRAMP C2 syöpäsolujen vastauksena anti-β2-M Ab. (*** P 0,001, Studentin t-testi). B. Yhdistetty lähellä infrapuna- ja röntgenkuvan vatsan TRAMP hiiriä hoidettiin kontrolli IgG ja anti-β2-M Ab (n = 4). Edustavia vanhempien hiirien käyttää ylimääräisenä ohjaus (C57BL /6). Tumorigenecity ohjaus IgG-vasta-ryhmässä oli 100% (n = 4) ja tumorigenecity anti-β2-M Ab hoidetussa ryhmässä oli 25% (n = 4). C. H 0,006, Studentin t-testi). B. immunohistokemiallinen värjäys sääriluu valvonta- ja yhdistelmänä hoitoryhmässä värjättiin H 0,001, Studentin t-testi) B. Solujen elinkelpoisuus DU154 eturauhassyöpäsolujen vasteena yhdistelmä anti-β2-M Ab (0,5 ug /ml) ja sisplatiinia (100 uM) /doksorubisiini (100 uM) . (*** P 0,001, Studentin t-testi). C. Solujen elinkelpoisuus PC-3 eturauhasen syöpäsolujen vasteena yhdistelmä anti-β2-M Ab (1 ug /ml) ja sisplatiinia (100 uM). (*** P 0,001, Studentin t-testi).

In vivo eläinkokeet

ihonalainen Vieraslajisiirteen Study.

neljä viikkoa vanhoja koiraspuolisia karvattomia hiiriä ((NCRNU, Taconic) injektoitiin subkutaanisti 2 x 10

6 ARCAP

M syöpäsolujen kanssa matrigeeliä (01:01) kylkeen. Kun kasvaimen saavutti 4 mm

3, hiiriä käsiteltiin IgG tai anti-β2-M Ab gelform®. gelform® upotettiin vasta-ainetta (0,8 mg /kg), ja istutetaan kirurgisesti vieressä kasvaimia. Kaksikymmentäneljä tuntia myöhemmin kasvaimia säteilytettiin 15 Gy. Jokainen ryhmä oli viisi hiirtä . Kasvaimen tilavuus mitattiin viikoittain.

kulkuri hiiret Study.

TRAMP-hiiret saatiin Emory ydin hiiren laitokseen. Vanhempien C57BL /6-hiiriä käytettiin myös kontrolleina. Aikaisemmat tutkimukset osoittivat, anti- β2-M Ab oli myrkyllistä tramp eturauhassyöpäsoluihin

in vitro

. Hiiret 21-26 viikkoa iässä olivat pariksi ikä-viisasta ja erotetaan kontrolli-IgG ja anti-β2-M Ab ryhmä. alkaen 21 /26 viikko sen 32/37 viikkoa hiirille annettiin IgG Ab tai anti-β2-M Ab (8 mg /kg) kolmen päivän välein kaikkiaan 11 viikkoa. Kehon painot mitattiin viikoittain. Kasvaimen kehitystä seurattiin käyttämällä lähi-infrapuna väriaine (NIR) IR-783 15 käyttäen Kodak kuvausasema 4000 MM kone. Röntgenkuvia otettiin samanaikaisesti ja päällekkäin määrittämään kasvaimen sijainti. Hiiret lopetettiin 33/38 viikkoa ja prostates poistettiin, kiinnitettiin ja leikattiin ja H 0,05 katsottiin olevan tilastollisesti merkitsevä.

Tulokset

Anti-β2-M Ab herkistää syöpäsolujen säteilylle

In vivo

Aikaisemmat tutkimukset osoittavat, että β2-M ja HFE on tärkeä rooli syövän etenemisen 4. inhibitio β2-M, käyttäen anti-β2-M Ab on osoitettu aiheuttavan solukuolemaa useissa syövissä, mukaan lukien eturauhassyöpä. Enemmän kuin 50% syöpäpotilaiden aina sädehoitoa aikana taudin etenemisen. Kuitenkin sädehoito on haitallisia vaikutuksia. Kohdennettu hoidot, mukaan lukien terapeuttiset vasta-aineet voivat mahdollisesti toimia sädeherkistävä aineina. Sen hypoteesin testaamiseksi, että hoito anti-β2-M Ab herkistää eturauhasen syöpäsolujen säteilylle, käytimme hyvin karakterisoitu ARCaP eturauhassyövän malli, joka metastasizes luun hiiren ksenograftimalleissa. ARCaP

E solulinja on epiteelin kaltainen ja on alhainen taipumus etäpesäkkeiden ja ilmaisee myös alhainen β2-M ja ARCaP

M solulinja, on mesenkymaalisten kaltainen ja sen sijaan on erittäin metastaattinen luuhun ja ilmentää korkeita β2-M 4. säteilyherkkyydestä määritettiin käyttäen klonogeeniset määritystä. Osoitamme, että ARCaP

M-solut ovat vastustuskykyisiä säteilylle verrattuna ARCaP

E-solujen (kuvio 1A). Sen määrittämiseksi, β2-M on mukana säteilyn kestävyys, me syntyy β2-M Knockdown vakaa ARCaP

M syöpäsolujen (kloonit KDII ja KDI). Suoritimme klonogeeniset määritys määrittää niiden säteilyherkkyydestä. Sekä KDI ja KDII olivat herkempiä sädehoitoa verrattuna ARCaP

M säätökennoja (kuvio S3A). Sen lisäksi, että geneettisen lähestymistavan, käytimme anti-β2-M Ab inhiboida β2-M ennen sädehoitoa. Yhdistelmähoito anti-β2-M Ab (3 ug /ml), ja säteily oli synergistinen vaikutus eturauhassyövän solukuolemaa in vitro (kuvio 1 B). Synergia analysoitiin ANOVA, ja anti-β2-M Ab ja säteily oli synergistinen vaikutus 4 Gy ja 6 Gy annoksia säteilyä. Koska β2-M vuorovaikutuksessa HFE välittävän sen soluprosessien 4, me pudotti HFE in ARCaP

M syöpäsolujen käyttäen lentiviral shRNA hiukkasia. HFE ilmentyminen väheni HFE pudotus soluissa (kloonit KD

HFE1 ja KD

HFE3) verrattuna kontrolliin ARCaP

M-solut (kuvio S3B). Esto HFE väheni myös β2-M ilmaisun ja siten β2-M /HFE komplekseja. Säteily vaste KD

HFE1 ja KD

HFE3 soluihin määritettiin käyttäen klonogeeniset määritystä. KD

HFE1 ja KD

HFE3 solut olivat herkempiä säteilylle kuin vertailuryhmän ARCaP

M syöpäsolujen.

Voit määrittää, onko anti-β2-M Ab ja säteilytys synergoida

in vivo

injektoimme ARCaP

M solujen ihonalaisesti osaksi paljaiden hiirien kylkiin. Kun kasvaimet olivat saavuttaneet kooltaan 4 mm

3 -ksenografteja implantoidaan kirurgisesti anti-β2-M Ab IgG: tä (0,8 mg /kg) gelform®. Kaksikymmentäneljä tuntia myöhemmin kasvaimia säteilytettiin 15 Gy. Kukin ryhmä oli viisi kasvaimia ja tuumorin tilavuus mitattiin viikoittain. Anti-β2-M Ab ja säteilyn yksin osittain vähentynyt kasvaimen kasvua. Kuitenkin yhdistelmä hoitoryhmässä, mikään kasvaimia kasvoi hiirissä (kuvio 1C). Nämä tulokset osoittavat, että anti-β2-M Ab on tehokas aine eturauhassyövän hoitoon, ja yhdistelmä hoito anti-β2-M Ab ja säteily on huomattavasti tehokkaampi kuin vasta-ainetta ainoastaan ​​tai säteilyä ainoa hoito.

esto of β2-M Lisäykset Iron Overload, reaktiivisen hapen ja vähentää DNA Repair Entsyymit ja stressi Response proteiinit

siirtogeenisiä hiiriä puuttuu β2-M tai HFE ovat lisääntyneet rautaylikuormituksen 11. β2-M /HFE muodostavat monimutkaisen ja vuorovaikutuksessa transferriinin reseptorin (TFRC1) 8,9. Β2-M /HFE kompleksin estää muodostumista transferriini-TFRC1 komplekseja. Näin ollen, rautaa, joka on sidottu transferriini on estetty pääsemästä solun ja siten, joilta puuttuu β2-M HFE on kasvanut raudan ylikuormitus. Testasimme jos anti-β2-M Ab voi aiheuttaa raudan ylikuormitus ja reaktiivisia happiradikaaleja (ROS) eturauhasen syöpäsoluja. ARCaP

M-soluja käsiteltiin anti-β2-M Ab (5 ug /ml 24 h) ja rautapitoisuus määritettiin käyttäen preussinsinisen rautaa värjäystä. Lisääntynyt tummansininen-musta värjäytyminen raudan havaittiin anti-β2-M Ab käsitellyissä soluissa verrattuna isotyyppikontrolli käsiteltiin ARCaP

M syöpäsolujen (kuvio 2A). Sen määrittämiseksi, anti-β2-M Ab aiheuttama lisääntynyt reaktiivisia happiradikaaleja (ROS) seurauksena kasvusta raudan ylikuormitus, testasimme tasojen mitokondrioiden superoksidi avulla MitoSOX. Kaksi eturauhasen syöpäsolujen (ARCaP

M ja ARCaP

E) ja p69 kuolemattomaksi normaalissa eturauhasessa epiteelisolujen käytettiin testata tätä hypoteesia. Kasvu mitokondrion superoksidi, reaktiivisen hapen laji, havaittiin syöpäsolujen ja ei normaalit solut annoksesta ja ajasta riippuvalla tavalla vasteena anti-β2-M Ab (kuvio 2B). Aiemmat tutkimukset osoittavat, että HFE pudotus solut ovat kasvaneet tyvi rauta 4. Testasimme jos esto HFE eturauhassyöpäsoluissa muuttaisivat mitokondrioiden superoksidi tasoilla. Pohjapinta taso mitokondrioiden superoksidi mitattiin MitoSOX ja huomasimme, että pohjapinta kohoamiseen vuonna HFE pudotus klooneja (KD

HFE1 ja KD

HFE3) kontrolliin verrattuna (kuvio 2C). Säteilyn kestävyys on kasvanut kohonnut DNA korjaus- entsyymejä ja stressin vastaus proteiineja. Seuraavaksi pyrittiin määrittämään muutoksiin stressivasteeseen proteiinien β2-M Knockdown syöpäsolujen. Käyttämällä C4-2B ohjaus ja β2-M pudotus syöpäsolujen (KD

β2-M) testasimme stressiä vasteen proteiineja, kuten lämpöshokkiproteiini 27 (HSP27), 17 ja lämpöshokkiproteiini 70 (HSP70) 18 ja DNA: n korjaukseen entsyymejä, kuten N-metyylipuriinidinukleotidi-DNA-glykosylaasi (MPG) 19 ja nudix (nukleosididifosfaattia liittyy osa X) tyypin motiivi 1 (NUDT1) 20. Mielenkiintoista, stressivasteen ja lämpösokkiproteiinit oli vaimentua in β2-M pudotus kloonien KD

β2-M (kuvio 2D). Lisäksi eturauhassyövän soluja käsiteltiin anti-β2-M Ab (10 ug /ml) 24 h, ja proteiinin tasot DNA: n korjaukseen entsyymien MPG ja NUDT1 tutkittiin. Anti-β2-M Ab kohtalaisesti vähentynyt tasot MPG ja NUDT1 proteiineja. Nämä tutkimukset osoittavat, että anti-β2-M Ab aiheuttaa useita sytotoksisia vaikutuksia, kuten raudan ylikuormitus, lisääntynyt vapaiden radikaalien tasoa laski DNA: n korjaukseen entsyymejä ja stressin vasteen proteiinien eturauhassyövän soluissa ja siten herkistää syöpäsolujen säteilylle.

Anti-β2-M Ab Estää kasvaimen kasvua spontaani Immuno-Toimivaltaiset Siirtogeenisten adenokarsinooma Mouse eturauhasen (kulkuri) Hiiret Malli

TRAMP C1 ja TRAMP C2 eturauhassyövän solut 21 ovat johdetut solulinjat spontaani hiirimallissa adenokarsinooma. Olemme suorittaa in vitro tutkimuksissa vaikutuksen testaamiseksi anti-β2-M Ab TRAMP solulinjoissa. Sekä TRAMP C1 ja TRAMP C2 hiiren syöpäsolujen läpi solukuoleman kasvavien pitoisuuksien kanssa anti-β2-M Ab (kuvio 3A). Seuraavaksi testasimme vaikutuksia vasta-aineen

in vivo

. TRAMP-hiirille (ikä 21-26 viikkoa) on yhdistetty ja hoidettiin joko kontrollina IgG tai anti-β2-M Ab ryhmä (n = 4). Vanhempien hiiret (C57BL /6-hiiriä) pidettiin loppuun saakka kokeen. Alkaen 21/26 viikkoa, hiirille annettiin 8 mg /kg IgG Ab tai anti-β2-M Ab joka kolmas päivä, kunnes hiiret saavutti 32/37 viikkoa ja tapettiin viikon kuluttua. Ruumiinpainot hiirillä määritettiin viikoittain. Kasvaimen kehitystä seurattiin lähellä infrapunaväri (IR-783) 15 puolikuukausijulkaisu. Kuvaus suoritettiin käyttämällä infrapuna-kuvantaminen ja röntgenkuvaus Kodak kuvantamisen kone. Sen jälkeen, kun hiiret lopetettiin eturauhasissa leikeltiin ja värjättiin käyttäen H 0,006) (kuvio 4A). Käyttäen immunohistokemia osoitamme laski β2-M värjäytymistä anti-β2-M Ab + säteilytys käsitellyssä ryhmässä verrattuna kontrolliryhmään (kuvio 4B). Lisäksi anti-β2-M Ab ja säteilytys hoidettu ryhmä oli kasvanut merkittävästi rautaa värjäytymisen luussa (42%) verrattuna kontrollihiiriin (6%) (kuvio 4B), mikä viittaa raudan ylikuormitus vasta-hoidetussa ryhmässä. Me tarkasteltiin myös alavirran reittejä suunnattu anti-β2-M Ab ja totesi, että on olemassa lasku tasoilla näiden tavoitteiden (p-CREB) säären vasta-aineen ja säteilyn hoidetuissa hiirissä kontrolliin verrattuna 2. Lisäksi anti-β2-M Ab ja säteily hoidettu ryhmä oli vähentynyt mitoosia, osoitetaan mitoosi markkeri, p-histoni H3 (kuva 4B). Pitkäaikainen hoito anti-β2-M Ab ollut myrkyllinen hiirille kuin kehon paino hiirillä oli stabiili (kuvio S4). Yhdessä nämä tutkimukset osoittavat, että anti-β2-M Ab ja säteilytys yhdistelmä hoito voi vähentää tumorigenecity ja hidastaisi merkittävästi ja /tai estävät kasvun eturauhassyövän luuytimessä.

inhibitio β2-M herkistää Eturauhasen syöpäsolujen Solunsalpaajalääkeaineet

Koska esto β2-M tuloksia raudan ylikuormitus, kasvaa reaktiivisten happiradikaalien ja laskee stressin vastaus proteiineihin

in vitro

, testasimme jos hoito anti-β2 -M Ab voisi herkistää syöpäsolujen kliinisesti käytetty kemoterapia-aineiden. Käyttämällä C4-2B ja C4-2B β2-M pudotus syöpäsolujen (KD

β2-M) 2, testasimme jos β2-M Knockdown solut olivat herkempiä taksoteerin, sisplatiinin ja PS341. β2-M ilmentyminen oli vähäistä KD

β2-M-soluissa verrattuna Neo (kontrolli) soluissa (kuvio 2D). Esto β2-M merkittävästi herkistyneet eturauhasen syöpäsolujen taksoteeri (0,3 uM), sisplatiinin (10 uM) ja PS341 (1 uM) (kuvio 5A). Anti-β2-M Ab herkistyneet DU145-soluja sisplatiinin ja doksorubisiini (kuvio 5B) ja PC-3-soluja sisplatiinin (kuvio 5C). Käyttämällä autuus riippumattomuus analyysi synergistinen vuorovaikutus havaittiin DU145 soluissa, joita käsiteltiin anti-β2-M Ab: n ja doksorubisiinin ja PC-3-solujen hoidettu anti-β2-M Ab ja sisplatiinilla.

Nämä tutkimukset osoittavat, että anti -β2-M Ab on lupaava aine yhdistelmähoitoa yleisesti käytettyjen hoitojen syövän kuten säteilyn ja kemoterapiaa. Koska eturauhassyöpä luumetastaasipotilailla on vaikea hoitaa, yhdistelmähoidot anti-β2-M Ab ehkä vähentää tehokkaammin kasvaintaakka.

Keskustelu

Eturauhassyöpä on toiseksi yleisin kuolinsyy miesten Pohjois-Amerikassa. Kohonnut β2-M: n ilmentyminen liittyy etenemiseen ihmisen eturauhassyövän 22, rintasyöpä 23, munuaissyövän 24, keuhkosyöpä 25, paksusuolen syöpä 26 ja useita nestettä kasvaimia, kuten multippeli myelooma, lymfooma ja leukemia 3. β2-M välittää epiteelin ja mesenkymaalitransitioon, ja syövän etäpesäkkeiden luun ja muut pehmeät kudokset 4. Siten kohonnut β2-M kudostasot osoittaa huonoon ennusteeseen. Näin ollen, on tärkeää kohdistaa β2-M eturauhassyöpäpotilailla estää etäpesäkkeiden. Aiemmin me ja muut osoittivat, että hoito anti-β2-M Ab aiheuttaman syövän solukuolemaa sekä kiinteitä että nestemäisiä kasvaimia 3,6,27. Koska esto β2-M johtaa vähentynyt stressin vastaus, me arveltu, että yhdistelmä hoito anti-β2-M Ab säteilyä tai kemoterapiaa voi lisätä syövän solujen tappamisen (säteilylle herkäksi ja Chemosensiti-). Inhibitio joko β2-M tai HFE eturauhassyöpäsoluissa johtaa niiden Sädeherkistämään (kuvio 1 B, kuvio S3A, S3B). Käyttämällä spontaani eturauhassyöpä TRAMP kasvainmuoto, myös osoittaa, että anti-β2-M Ab yksin, estää tai viivyttää kasvaimen kasvua ilman myrkyllisiä sivuvaikutuksia (kuva 3). Käyttäen ihonalaisen ksenografti hiirimallissa ja sisäisen sääriluun luu hiirimallissa osoitamme, että yhdistelmähoito anti-β2-M Ab ja säteily on tehokkaampaa hoitoon kasvaimen verrattuna vasta-aineen tai säteilyn ainoa hoito lähestymistapa (kuvio 1C, kuva 4) . Siten osoitamme, että anti-β2-M Ab yhdistettynä säteilytys merkittävästi kasvaimen kasvu estyy

in vitro

ja

in vivo

ja immuunijärjestelmän puutteesta sekä immuunijärjestelmän hiirissä. Nykyiset hoidot eivät kohdista syöpäsolut luun mikroympäristössä. Siksi ehdotamme, että anti-β2-M Ab on lupaava agentti aggressiivinen eturauhassyövän luuhun metastaattisen potilaiden ja siksi yhdistelmähoito vasta-aineen kanssa ja säteily vähentää tuumoritaakka näillä potilailla.

β2-M on aiemmin osoitettu aktivoivan useita reittejä syöpäsoluissa, kuten proteiinikinaasi A: n 28, endoteelikasvutekijä 29, androgeenireseptorin 7, rasvahappojen syntaasia 7 ja lipidilautan signalointireitteihin 3. tässä tutkimuksessa osoitamme, että β2-M säätelee solujen tasapainon rautaa ja reaktiivisen hapen (kuvio 2, 4B). Lisäksi, β2-M säätelee myös ilmentymisen stressin vasteen proteiineja, kuten HSP27 ja HSP70 ja DNA: n korjaukseen entsyymejä NUDT1 ja MPG (kuvio 2). Siten vähentynyt stressin vastaus proteiineja tehdä syöpäsolut alttiita soluvauriot.