Krooninen sairaus

tiivistelmä

Background

Ihmisen papilloomaviruksen (HPV) on aiheuttava tekijä nielurisojen okasolusyöpä (TSCC) ja potilailla, joilla on HPV positiivinen (HPV

+) TSCC ovat parempi kliininen tulos kuin ne, joilla on HPV negatiivisia (HPV

-) TSCC. Koska kaikkia sairaalan HPV

+ TSCC reagoi hoitoon, uusia biomarkkerit tarvitaan yhdessä HPV asema paremmin ennustaa hoitovaste ja yksilöllisiä hoitoon. Tätä varten tutkimme onko määrä kasvaimeen soluttautua sytotoksisten ja säätelijä-T-solujen TSCC korreloi HPV- statuksesta ja kliiniseen tulokseen.

Methods

Formaliinifiksoidusta parafiiniin upotettuja TSCC, aiemmin analysoitu HPV-DNA, joka on johdettu 83 potilasta, jaettiin neljään ryhmään riippuen HPV asemasta kasvain ja kliiniseen tulokseen. Kasvaimet värjättiin immunohistokemiallisesti ja arvioitiin määrä soluttautua sytotoksisten (CD8

+) ja sääntelyn (Foxp3

+) T-soluihin.

Tulokset

korkea CD8

+ T-solujen infiltraatiota merkittävästi positiivisesti korreloi hyvän kliinisen tuloksen molemmilla potilailla, joilla HPV

+ ja HPV

– TSCC potilaille. Vastaavasti korkea CD8

+ /Foxp3

+ TIL suhdetta korreloi 3 vuoden taudista vapaan eloonjäämisen. Lisäksi HPV

+ TSCC piti verrattuna HPV

-TSCC, Useammat soluttautua CD8

+ ja Foxp3

+ T-soluissa.

Johtopäätökset

Lopuksi positiivinen korrelaatio on suuri määrä infiltroituvien CD8

+ solujen ja potilaan kliinisen osoittaa, että CD8

+ solut voivat edistää hyödyllisiä kliinistä tulosta TSCC potilailla, ja ne voivat mahdollisesti toimia biomarkkereiden. Samoin CD8

+ /Foxp3

+ solujen suhteen voidaan mahdollisesti käyttää samaan tarkoitukseen.

Citation: Näsman A, Romanitan M, Nordfors C, Grün N, Johansson H, Hammarstedt L , et ai. (2012) Kasvaimen infiltroivien CD8

+ ja Foxp3

+ Lymfosyytit korreloivat kliinistä hyötyä ja ihmisen papilloomaviruksen (HPV) Status Nielu syöpä. PLoS ONE 7 (6): e38711. doi: 10,1371 /journal.pone.0038711

Editor: Joseph Califano, John Hopkins Medical School, Yhdysvallat

vastaanotettu: 07 helmikuu 2012; Hyväksytty: 11. toukokuuta 2012 Julkaistu: 12 kesäkuu 2012

Copyright: © 2012 Näsman et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tämä työ tukivat Ruotsin Cancer Society (TD, 100258), Ruotsin Medical Research Council (TD, TR, K2011-56X-15282-07-6), Tukholman Cancer Society (TD, 101081), Henning ja Ida Perssons Foundation (TD), Karolinska Institutet (TD, TR) ja Tukholman kunnanvaltuutettu (TD, TR, EMW, 2010067). Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Co-kirjailija Torbjörn Ramqvist on PLoS ONE Editorial hallituksen jäsen. Tämä ei muuta tekijöiden noudattaminen kaikki PLoS ONE politiikan tietojen jakamista ja materiaaleja.

Johdanto

Viimeaikaiset tutkimukset Euroopassa ja Yhdysvalloissa on raportoitu lisääntymistä nielun squamous cell carcinoma (OSCC), erityisesti nielurisojen okasolusyöpä (TSCC). Tämä lisäys syyksi on lisääntynyt esiintyvyys ihmisen papilloomaviruksen (HPV) infektio [1], [2], [3], [4]. Niinpä 7-kertainen HPV-positiivisten (HPV

+) TSCC, rinnakkain laskuun HPV-negatiivinen (HPV

-) TSCC on osoitettu potilaille Tukholmassa, kolme viimeistä vuosikymmeniä [3] ja samanlainen suuntaus on osoitettu Yhdysvalloissa [2]. Tärkeää on myös, HPV: n on osoitettu olevan suotuisa prognostinen tekijä potilailla, joilla on OSCC lukien TSCC [5], [6], [7], [8]. Kuitenkin kaikki potilaat HPV

+ TSCC pärjää ja siten, vaikka HPV itsessään on tärkeä prognostinen markkeri, ylimääräinen biomarkkerit tarvitaan TSCC paremmin ennustaa hoitovastetta ennen yksilöllistä hoitoa voidaan toteuttaa kliinisessä käytännössä.

on ehdotettu, että HPV

+ ja HPV

-TSCC ovat kaksi eri kasvaintauti yhteisöihin eri kasvain ja potilaan ominaisuudet. Kun taas HPV liittyviä kasvaimia, mukaan lukien HPV

+ TSCC ohjaavat viruksen onkogeenien, esim. E6 ja E7, ja heillä on vähemmän cellular mutaatioita, HPV

-TSCC kehittyä kertyminen geneettisiä muutoksia lähinnä aiheuttamat ympäristötekijät, kuten tupakointi [9]. Kuten vieraita antigeenejä, E6 ja E7 voivat toimia mahdollisina kohteina immuunivasteen HPV tuumoreita ja

in vitro

tutkimukset ovat osoittaneet, että T-solut eristettiin HPV

+ kohdunkaulan syöpä voi tunnistaa ja tappaa E6 ja E7 ilmentäviä tuumorisoluja [10]. Lisäksi kasvainspesifin T-soluja havaittiin useimmissa kohdunkaulan syöpäpotilailla, vaikkakin alhaisilla ja riittämättömiä [11], [12] ja läsnäolo kasvaimen tunkeutuvia lymfosyyttejä (TIL) on yhdistetty paremmin ennusteen [13], [ ,,,0],14]. Tämä on havaittu myös muissa elimissä, joilla ei ole tunnettua virus- yhdistys [15], [16]. Kuitenkin TIL voi toimia kaksiteräinen miekka. Vaikka voimakas infiltraatio CD8

+ lymfosyyttejä on yhdistetty suotuisa ennuste monissa syöpäsairauksia, rooli soluttautua säätelijä-T-solujen (Tregs) (määritellään usein Foxp3

+ lymfosyytit) on usein päinvastainen [17] . Tregs voi edistää syövän etenemiseen, ja kohonneeseen Tregs on havaittu potilailla, joilla on erilaisia ​​kasvaimia ja liittyy huonompi ennuste [18], [19], vaikka on olemassa poikkeuksia, joissa Treg tunkeutuminen on yhdistetty suotuisan ennusteen [ ,,,0],20], [21]. Kuitenkin rooli soluttautua CD8

+ ja Foxp3

+ lymfosyyttien on, tietojemme mukaan ei ole tutkittu TSCC in korrelaatio potilaan lopputulokseen ja HPV- statuksesta.

tämän tutkimuksen tavoitteena oli tutkia läsnäolo kasvain soluttautua CD8

+ ja Foxp3

+ T-solujen TSCC suhteessa kliiniseen tulokseen ja kasvaimen HPV- statuksesta, ja vahvistaa, jos nämä TIL voidaan mahdollisesti käyttää klinikalla biomarkkereina joko yksin tai yhdessä HPV asema kasvaimen ennustaa kliiniseen tulokseen.

TSCC kanssa (A) alhainen ja (B) korkea CD8

+ soluttautuminen ja (C) alhainen ja (D) korkea Foxp3

+ tunkeutuminen.

Materiaalit ja menetelmät

Ethics lausunto

tutkimus hyväksyttiin eettisen komitean Karolinska institutet, Stockholm, Sweden, mukaan eettisissä 2005 /431-31 /4, 2005 /1330-32 ja 2009 /1278-31 /4. Kirjallinen suostumus saatiin kaikilta tutkimukseen osallistuneet.

A) määrä CD8

+ TIL, B) määrä Foxp3

+ TIL ja C) CD8

+ /Foxp3

+ solujen suhteen. ”Hyvä” ja ”huono” tarkoittaa kliinisistä tuloksista. Lisäksi neljän TSCC ryhmät on määritelty Menetelmät jaksossa, eri yhdistelmiä ryhmistä on myös verrattu. Näin ollen ”HPV

+ hyvä” vastaa ryhmää A; ”HPV

+ huono” B-ryhmän; ”HPV

– hyvä” ryhmään C; ”HPV

– huono” ryhmään D; HPV

+ ryhmiin A + B, HPV

– ryhmiin C + D; ”Hyvä” ryhmiin A + C; ja ”huono” ryhmille B + D. Jotta voidaan paremmin havainnollistaa yksityiskohtia alempi Kuva 1C yläosan kaavion mukaan lukien ylemmän viiksi (suhteessa 80) jätettiin pois.

A) HPV

+ TSCC ja B) HPV

-TSCC potilaita ositettu useissa CD8

+ TIL. Korkean ja matalan merkitsee CD8

+ TIL laskea ylä- ja alapuolella mediaaniarvot 33 HPV

+ TSCC ja 4,4 HPV

-TSCC. C) HPV

+ TSCC ja D) HPV

-TSCC potilaita ositettu suhde CD8

+ /FoxP3

+ solujen suhteen. Korkean ja matalan merkitsee CD8

+ /FoxP3

+ solujen suhteen ylä- ja alapuolella 1.

Potilaille ja materiaali

kohortti koostui kaikista potilaista, diagnosoitu 2000- 2006 TSCC (ICD-10 C09.0-9), jotka hoidettiin tarkoituksena kovettua Karolinska University Hospital, Tukholma, Ruotsi, ja oli käytettävissään esikäsittely parafiiniin kasvainbiopsioissa. Hoito koostui nopeutetun sädehoidon (RT) (1,1 + 2,0 Gy /vrk 4,5 viikkoa, kokonaisannos 68 Gy) tai perinteisiä RT (2,0 Gy /päivä, +6,5-7viikko, kokonaisannos 68 Gy), tai neljässä tapauksissa Induktiokemoterapia samanaikainen RT (CRT). Hoidon jälkeen potilaita seurattiin kliininen tutkimus 3 kuukauden välein ensimmäisten 2 vuotta ja 6 kuukauden välein 3. vuosi.

Tiedot läsnäolo korkean riskin HPV-tyypit (HPV-DNA: PCR) ja p16

INK4a tila (immunohistokemiallisesti) saatiin aikaisemmista tutkimuksista [3], [7], [22] ja potilaat jaettiin 4 ryhmään (AD) lähtötilanteessa (lisätietoja katso taulukot 1 ja 2); (A) satunnaisotos (n = 31) kaikista potilaista (n = 109) HPV

+, p16

INK4a positiivinen ( 75% p16

INK4a positiivisia kasvainsoluja) (p16

+) kasvainten, joilla on hyvä kliininen tulos (määritelty ei uusiutumisen ja elossa 3 vuotta diagnoosin jälkeen); (B) kaikilla potilailla (n = 21), jossa HPV

+, p16

+ kasvaimia, joilla on huono kliininen tulos (määritelty uusiutunut taudin ja /tai kuolleita taudin 3 vuoden kuluessa diagnoosin jälkeen); (C) kaikilla potilailla (n = 11), jossa HPV

-, p16

INK4a negatiivinen (p16

-) kasvainten hyvän kliinisen lopputuloksen; (D) kaikilla potilailla (n = 20), jossa HPV

-, p16

– kasvaimet, joilla on huono kliininen tulos (taulukko 1). Näyte 31 109 alkuperäisen kasvaimia A ryhmän valittiin saada useampia määrä potilaita kustakin ryhmän lisätutkimuksia TIL, koska tämä ryhmä hallitsee 68% kokonaismäärästä kasvaimia. Potilaat, joilla on HPV

+, p16

– (n = 17) ja HPV

-, p16

+ kasvain (n = 4) jätettiin pois lisäanalyysiä saada homogeeninen ryhmiä ja sisältää vain HPV

+ TSCC ilmentävät HPV E6 /E7, koska p16

INK4a ilmaisun HPV

+ kasvaimia pidetään osoituksena E7 ilmaisun [23]. Potilaat kuolevat muita syitä kuin TSCC myös ulkopuolelle. Kaikki HPV

+ TSCC oli HPV16

+ kanssa lukuun ottamatta yhtä kasvain HPV33 ja yksi HPV56.

immunohistokemia

Tavallinen streptavidiini-biotiini- peroksidaasi menetelmää käytettiin 4 um: formaliinilla, parafiiniin upotettuja, kohdat hiirellä monoklonaalisia vasta-aineita anti-CD8 (laimennus, 01:40, klooni 4B11; Novocastra Laboratories) ja anti-Foxp3 (laimennus 1:100, klooni 236A /E7; eBioscience). Kaikki osat myöhemmin inkuboitiin biotinyloidun sekundaarisen anti-hiiri-vasta-ainetta (1:200, Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA), jota seurasi inkubointi avidiini-biotiini-kompleksi-PO käyttäen VECTASTATIN® Elite® ABC-kitti (Vector Laboratories) ja kehitettiin DAB.

CD8

+ ja Foxp3

+ kasvain lymfosyyttien tunkeutumisen arvioitiin kaksi tutkijaa, sokaisi kliiniseen lopputulokseen, jokainen laskemalla solut 10 satunnaisesti valittua suuritehoisia kentät ( 40 ×) näytettä kohti. Keskiarvo ilmoitettiin kunkin kasvaimen. Suhde tuumoreihin tunkeutuvia CD8

+ ja Foxp3

+ solut laskettiin kunkin yksittäisen kasvaimen keskimääräinen näistä suhteista laskettiin sitten per alaryhmä.

Tilastollinen analyysi

Testit vertailtaessa jatkuvan datan suoritettiin käyttäen lineaarista regressiomalleja. Tulokset esitetään keskiarvona eroista tai kertoimet-suhteet yhdessä 95%: n luottamusväli. Vertailut potilaan ja kasvainten ominaisuuksiin eri ryhmien taulukoissa 1 ja 2 suoritettiin käyttämällä Fisherin testiä (kaksisuuntainen). Kaikki nämä analyysi suoritettiin vuonna STATA11 (StataCorp). P-value≤0.05 pidettiin merkittävänä.

Tautivapaa elinaika (DFS) määriteltiin aika alkaen diagnoosi päivämäärä viimeinen tunnettu tilaisuudessa, että potilas oli taudista vapaan tai jona tauti uusiutuu (paikallinen, alueellinen tai etäpesäkkeenä). Death ilman dokumentoitua toistuminen sensuroitiin klo kuolinpäivä. Kaplan-Meier -käyrät käytettiin esittää Eloonjääntitulokset ja log-rank-testiä käytettiin vertaamaan eloonjäämiskäyrien. Monimuuttujakalibrointiin analysoida, Coxin suhteellisten riskien mallia käytettiin säätää kovariantteja. Kaksipuolinen p-arvot on raportoitu. Nämä analyysit suoritettiin SPSS (IBM SPSS Statistics, v20).

Tulokset

kliiniset ja patologiset parametrit potilaan ja Kasvaimet

Tiedot kaikista potilaista ja niiden kasvaimet näkyvät taulukoissa 1 ja 2. Kuten edellä on kuvattu, potilaat jaettiin 4 opintoryhmistä riippuen kasvaimen HPV- statuksesta ja potilaan kliinisen 3 vuoden kuluessa. Ainoa merkittävä ero eri ryhmien välillä oli, että potilailla, joilla on HPV

-tumors ja hyvä kliininen tulos oli pienempi kliinisessä vaiheessa kuin potilailla, joilla on huono kliiniseen tulokseen (p = 0,005).

ei ollut eroja osalta johonkin tutkittu kliinisten parametrien välillä otos 31 potilasta ja koko väestöstä 109 potilailla, joilla on HPV

+ TSCC ja hyvän kliinisen lopputuloksen (taulukko 2).

määrä CD8

+ TIL korreloi HPV status ja kliinistä hyötyä potilaille, joilla on TSCC

TSCC potilaita, joilla on hyvä kliininen tulos oli huomattavasti suurempi määrä CD8

+ TIL niiden kasvaimet (kuvio 1), kuin ne, joilla huono kliinisistä tuloksista, riippumatta kasvaimen HPV tila (keskiarvo 50,4 ja 12,8 vast., p 0,001), (taulukko 3 ja kuvio 2A). Lisäksi kun ositettiin HPV tila, HPV

+ TSCC, potilailta, joilla on hyvä kliininen tulos, oli enemmän CD8

+ TIL kuin niillä, joilla on huono kliiniseen tulokseen (keskiarvo 61,4 ja 21,0 vast., P = 0,002 ), (taulukko 3). Keskimääräinen lukumäärä CD8

+ TIL oli myös merkitsevästi suurempi HPV

-TSCC potilailta hyvän kliinisen tuloksen verrattuna HPV

-TSCC potilailta, joilla on huono kliiniseen tulokseen (keskiarvo 19,4 ja 4,7 vast. , p = 0,001).

Lisäksi HPV

+ TSCC oli huomattavasti suurempi keskimääräinen määrä kasvaimeen infiltroituvien CD8

+ lymfosyyttien verrattuna HPV

-TSCC (keskiarvo 45,6 ja 9,9 vast. , p 0,001) (kuvio 2A). Tämä ero oli edelleen merkittävä, kun oikaistaan ​​ennustetta (p = 0,001).

Tutkia korrelaatio CD8

+ TIL ja DFS HPV

+ TSCC potilaille, Kaplan-Meier-analyysi suoritettiin . HPV

+ ja HPV

-TSCC potilasta kahtia perustuvat mediaani (33 ja 4,4 vastaavasti) CD8

+ TIL. Kuten on osoitettu kuviossa 3A potilailla, joilla HPV

+ kasvaimia ja suuri määrä CD8

+ TIL oli kumulatiivinen selviytyminen 84% verrattuna 55% potilailla, joilla on alhainen määrä CD8

+ (p = 0,02 ). Samanlaisia ​​kumulatiivinen selviytyminen suuntauksia (64% ja 36%, respecitvely) havaittiin myös HPV

– potilaat, vaikka nämä erot eivät olleet tilastollisesti merkitseviä (kuvio 3B). Erityisesti potilailla, joilla HPV

+ TSCC Kaplan-Meier -käyrät laskettiin otokseen tekstiilisuojalausekkeen kuuluvien ryhmä A ja kaikki TSCC ryhmästä B (kuvio 3A).

määrän Foxp3

+ TIL korreloi HPV status vuonna TSCC

Huomattavan suuri määrä Foxp3

+ TIL (kuvio 1) havaittiin HPV

+ TSCC verrattuna että HPV

-TSCC (keskiarvo 33,2 ja 14,7, vastaavasti., p 0,001) (kuvio 2B). Kun säätämisen prognoosi, tämä ero oli edelleen merkittävä (p = 0,001). Kuitenkaan mitään eroja tasojen Foxp3

+ TIL havaittiin kasvainten potilailta, joilla on hyvä tai huono kliininen tulos (keskiarvo 27,9 ja 24,6, vast.) (Taulukko 3).

High CD8

+ /Foxp3

+ ratio liittyy Hyvä kliinistä hyötyä potilailla, joilla TSCC

Koska mittaus suhteellinen määrä sytotoksisia ja säätelijä-T-solujen kasvaimia, suhde kasvain soluttautuminen CD8

+ ja Foxp3

+ soluja laskettiin kullekin kasvain. Korkea CD8

+ /Foxp3

+ solu suhde on osoitus siitä, että säätelijä-T-solut ovat vähemmistönä ja siten vähemmän todennäköisesti varjoonsa toiminnon sytotoksisten T-solujen. Jos potilaalla on TSCC korkea CD8

+ /Foxp3

+ suhde korreloi positiivisesti hyvän kliinisen lopputuloksen korjattuna ennustetta (p = 0,04) (taulukko 3). Kuitenkin ero liittyvän ennusteen CD8

+ /Foxp3

+ TIL suhde ei ollut merkittävä, kun potilaalla on HPV

+ TSCC tai HPV

-TSCC analysoitiin erikseen, vaikka suuntaus oli samanlainen että havaittu TSCC potilaille yleensä.

tutkia korrelaatio korkean /matalan CD8

+ /Foxp3

+ TIL suhde ja DFS varten TSCC, Kaplan-Meier analyysi. HPV

– ja HPV

+ TSCC potilasta kahtia perustuvat CD8

+ /Foxp3

+ TIL suhde yli tai alle 1. Kuten on osoitettu kuviossa 3D potilailla, joilla HPV

-TSCC ja korkea CD8

+ /Foxp3

+ TIL suhde oli kumulatiivinen selviytyminen 73% verrattuna 28% potilailla, joilla on alhainen CD8

+ /Foxp3

+ TIL suhde (p = 0,03) . Samoin HPV

+ TSCC potilailla, joilla on korkea CD8

+ /Foxp3

+ TIL suhde oli korkeampi kumulatiivinen selviytyminen (82%) kuin ne, joilla on alhainen CD8

+ /Foxp3

+ TIL suhde (54%, p = 0,04) (kuvio 3C).

Korrelaatio Clinical parametrit, CD8

+ ja Foxp3

+ Solut ja 3 vuoden DFS potilailla, joilla TSCC

Kun CD8

+ ja Foxp3

+ TIL arvot kaikille TSCC, ositettu HPV tila, analysoitiin iän, sukupuolen tai kliiniseen vaiheeseen, ei havaittu yhteyttä (tuloksia ei ole esitetty).

Hazard suhde (HR) laskettiin erikseen HPV

+ ja HPV

-TSCC, käyttäen sekä yhden ja usean testit (taulukko 4). HPV

+ TSCC riskisuhde varten suuri määrä CD8

+ soluja oli 0,27 (p = 0,029), kun taas HPV

-TSCC riskisuhde korkean CD8

+ /Foxp3

+ suhde oli 0,27 (p = 0,048). Sen määrittämiseksi, ovatko CD8

+ solujen ja CD8

+ /Foxp3

+ suhde olivat riippumattomia ennustetekijät, Monimuuttuja Cox analyysi suoritettiin kliiniseen vaiheeseen, ikä ja sukupuoli kovariantteja (taulukko 4). HPV

+ TSCC, sekä CD8

+ solut ja ikä oli itsenäisesti korreloi merkittävästi 3 vuoden DFS (p = 0,034 ja p = 0,009, vastaavasti).. HPV

-TSCC sekä CD8

+ /Foxp3

+ suhde ja vaihe merkittävästi itsenäisesti korreloi 3 vuoden DFS (p = 0,023 ja p = 0,039, vast.). Vastaavasti korkea CD8

+ /Foxp3

+ suhde korreloi 3 vuoden DFS sekä yhden ja usean analyysit myös HPV

+ TSCC (HR 0,33, p = 0,048 ja HR 0,23, p = 0,015 vastaavasti) (tuloksia ei ole esitetty).

keskustelu

tässä tutkimuksessa, löysimme merkittävä korrelaatio korkean CD8

+ T-solujen tunkeutuminen ja kliinisten tulosten sekä potilaiden HPV

+ ja HPV

-TSCC, välillä sekä korkean CD8

+ /Foxp3

+ TIL suhde ja taudista vapaan eloonjäämisen sekä potilaiden HPV

+ ja HPV

-TSCC. Lisäksi olemme osoittaneet korrelaatio molemmissa välillä kasvaimen soluttautua CD8

+ ja Foxp3

+ T-solujen HPV tilaansa TSCC.

Se, että CD8

+ tunkeutuminen oli jyrkempi ja vaikutti ennusteen positiivisesti tässä tutkimuksessa HPV

+ TSCC, voi olla tärkeä syy siihen, miksi suurin osa HPV

+ TSCC on hyvä kliininen tulos verrattuna HPV

-TSCC [6], [7 ]. Tämä olisi sopusoinnussa kokeellisten tutkimusten osoittavat, että on tärkeää immuunijärjestelmän torjumiseksi HPV

+ pään ja kaulan levyepiteelisyöpä (HNSCC) [24]. Tulos on myös yhdenmukaiset monia tutkimuksia kasvaimia muilta sivustoilta esim paksusuolen ja kohdunkaulan syöpä [13], [14], [15], [18]. Erityisesti, kohdunkaulan syövän, jossa valtaosa kasvaimet ovat HPV

+, sekä suuri määrä CD8

+ TIL ja korkea CD8

+ /säätelijä-T-solu-suhde oli verrannollinen puuttuessa imusolmuke etäpesäke [14]. Samanlainen tulos on myös julkaistu HNSCC, jossa Ogino ja kollegat osoittavat positiivista korrelaatiota korkean CD8

+ T-solujen tunkeutuminen ja aiheuttaa erityisiä eloonjääminen [25]. Lisäksi, HPV16: n läsnäolon spesifisten T-solujen HPV

+ HNSCC äskettäin osoittaneet, että vaikka korrelaatio ennuste ei ole tutkittu [26]. Vahva positiivinen korrelaatio CD8

+ TIL ja hyvää kliinistä tulosta potilaille, joilla on TSCC osoittavat, että arvio CD8

+ TIL voitaisiin käyttää ylimääräistä ennustetekijöiden biomarkkereiden yhdessä kasvaimen HPV- statuksesta.

Olemme myös osoittaneet, että suuri CD8

+ /Foxp3

+ T-solujen suhteen merkittävästi korreloi taudin elinaika sekä potilailla, joilla on HPV

+ ja HPV

-TSCC. Edelliset julkaisut ovat sidoksissa Foxp3

+ TIL huonompaan ennusteeseen esim munasarja- ja rintasyövän [16], [18]. Lisäksi suuri prosenttiosuus Tregs on korreloitu huonon 5 vuoden eloonjääminen kohdunkaulan syövän [27]. On kuitenkin olemassa myös tapauksia, joissa Foxp3

+ TIL on yhdistetty suotuisa ennuste kuten esim. paksusuolen syöpä, Hodgkinin lymfooma ja HNSCC [20], [21], [28]. Saatu tulos tässä tutkimuksessa osoittaa, että soluttautuminen T-solut ovat myös tärkeitä kliinisiä tuloksia potilaissa HPV

-TSCC, vaikka mahdollisesti vähemmässä määrin. Arviointi CD8

+ /Foxp3

+ T-solujen suhteen voitaisiin siis käyttää myös kliininen prognostinen merkkiaine potilaille, joilla on HPV

+ tai HPV

-TSCC.

Tärkeää on, arvioimalla CD8

+ ja Foxp3

+ TIL IHC voidaan suorittaa patologian yksiköiden sairaaloissa. HPV tila TSCC on jo arvioitu rutiininomaisesti joissakin klinikoilla, esim. Karoliinisen yliopistosairaalan Tukholmassa, ja jos sitä käytetään yhdessä arvioinnissa CD8

+ ja Foxp3

+ TIL patologian yksiköiden parempi ennustaminen kliinisen tuloksen voidaan saada. Kuitenkin koko kentän arvioidaan ja cut-off-arvot on tarkasti määritelty.

Lisäksi havaitsimme, että HPV

+ TSCC oli huomattavasti suurempi tunkeutuminen sekä CD8

+ ja Foxp3

+ soluja kuin HPV

-TSCC. Tämä ei ollut odottamatonta, koska HPV

+ TSCC ilmaisee ulko- viruksen antigeenejä. Itse asiassa tulokset osoittavat, että vaikka immuunipuolustuksen ei ole estää kehitystä HPV

+ TSCC, on edelleen immunologisen ero HPV

+ ja HPV

-TSCC.

on tärkeää huomata, että läsnäolo TIL in TSCC ei riitä kasvainta. Kuitenkin on osoitettu hiirimallissa että ehjän immuunipuolustuksen on tärkeää täydellinen kasvaimen välys upon sädehoitoa [24]. Lisäksi on mahdollista, että säteilytys voi aktivoida immuunivastetta sekä vastaan ​​jäljellä elävien solujen alkuperäisestä kasvaimesta ja vastaan ​​imusolmuke etäpesäke.

Viime aikoina monet kasvaimen biomarkkerit on tutkittu suhteessa ennusteeseen potilailla, joilla HNSCC [ ,,,0],29], [30], [31], [32]. Useimmissa näistä tutkimuksista HPV tilan kasvaimia ei otettu huomioon ja usein kasvainten eri HNSCC Alisivustoja ryhmiteltiin kun biomarkkerit oli korreloi ennustetta. Tulokset Tämän tutkimuksen merkityksen osoittamiseksi erottaa kasvaimia riippuen HPV- statuksesta. Lisäksi tämän kaltaisia ​​tutkimuksia, kasvaimet olisi myös ositettu riippuen kasvaimen alisivustosi koska esim. yleistä potilaiden elinaikaa HNSCC vaihtelee sekä HPV asemasta ja kasvaimen alisivustoa.

On joitakin rajoituksia esillä olevassa tutkimuksessa. Ensinnäkin se on retrospektiivinen tutkimus, jossa kaikki potilaat diagnosoidaan TSCC Tukholmassa vuosina 2000-2006 ja käsitellään aikomusta parantaa. On kuitenkin tärkeää huomata, että hoitoa tänä aikana oli vakioitu tavanomaisilla /kiihtyi RT. Lisäksi aiemmat julkaisut, analysoidaan kliininen tulos potilaiden mukana tässä tutkimuksessa, eivät ole osoittaneet eroja kliinisen tuloksen potilaille, joiden nielusta syöpiä riippuen hoito [33], [34].

Toiseksi useimmat TSCC nykyään HPV

+ kanssa suotuisa kliininen tulos potilaille. Siten tämä ryhmä oli vähennetty esillä olevassa tutkimuksessa satunnaistamisen. Toisaalta, emme pystyneet osoittamaan mitään merkittäviä eroja Tutkimuksen otokseen ja koko materiaali tässä ryhmässä. Toinen rajoitus on muutamia numeroita potilaista HPV

– ryhmät, vaikka kaikki potilaat olivat mukana tätä ominaisuutta. Paremmin tutkia HPV

-TSCC väestöä, muut terveyskeskukset olisi sisällytettävä.

Olemme lopuksi ole arvioinut jos kasvain soluttautuminen CD8

+ ja Foxp3

+ soluja kohdistettu tiettyjä kasvaimeen liittyviä antigeenejä tai analysoitiin funktionaalisen CD8

+ käyttäen esim grantsyymi B. Lisäksi koska Foxp3, vaikkakin matalalla tasolla, voidaan ohimenevästi indusoida CD4

+ ja CD8

+ T-solujen stimuloitaessa, kaikki Foxp3

+ TIL ei ehkä Tregs [35]. Kuitenkin Tämän tutkimuksen eli löytää kliinisesti merkittäviä ja helposti tunnistettavissa markkereita, tämä ei ollut merkitystä, vaikka se olisi mielenkiintoista käsitellä näitä kysymyksiä muissa tutkimuksissa.

Yhteenvetona kasvain soluttautuminen CD8

+ ja Foxp3

+ solujen TSCC näyttää eri profiileja riippuen kasvaimen HPV- statuksesta ja kliiniseen tulokseen. Siten yhdistämällä läsnäolo CD8

+ T-solujen ja /tai CD8

+ /Foxp3

+ solujen suhteen HPV asema, voi olla lisäaineen ennusteen arvioinnissa ja parempia yksilöllistämiseksi potilaan hoitoa.