Krooninen sairaus

tiivistelmä

Muutokset mitokondrioiden DNA (mtDNA) on yhdistetty riski useita ihmisen syövistä; kuitenkin, suhde mtDNA kopioida numeron ääreisverivalkosolut (PBL: t) ja eturauhassyövän riskiä (PCA) ei ole tutkittu. Eräässä tapauskontrollitutkimuksessa 196 PCa potilaiden ja 196 ikä-pariksi terveillä verrokeilla kiinalaisessa Han väestö, yhdistyksen välillä mtDNA kopioluvun PBL: issä ja PCa riski arvioitiin. Suhteellinen mtdna kopioluku mitattiin kvantitatiivisen tosiaikaisen PCR; näytteet kolmessa tapauksessa ja kaksi tarkastuksia ei voitu määrittää, jättäen 193 tapausta ja 194 säätimet analyysiä. Eturauhassyövän potilailla oli merkitsevästi suurempi mtDNA kopioida numeroita kuin valvonta (mediaanit 0,91 ja 0,82, vastaavasti;

P

0,001). Kahtia at mediaaniarvon mtDNA kopioluvun kontrolleissa, korkea mtDNA kopioluku oli merkitsevästi liittyy suurentunut riski Eturauhassyövän (oikaistu riskisuhde = 1,85, 95%: n luottamusväli: 1,21-2,83). Merkittävä annos-vaste-suhde havaittiin mtDNA kopiomäärä ja riski PCA neljänneksessä analyysi (

P

trendi = 0,011). Kliinis-analyysi osoitti, että korkea mtDNA kopiomäärän PCa potilasta merkitsevästi liittyy korkea Gleason ja kehittynyt kasvain vaiheessa, mutta ei seerumin eturauhasen antigeenin tason (

P

= 0,002, 0,012 ja 0,544, tässä järjestyksessä). Nämä havainnot Tämän tutkimuksen mukaan lisääntynyt mtDNA kopiomäärä PBL: issä on huomattavasti liittyy suurentunut riski Eturauhassyövän ja saattaa olla heijastusta kasvaintaakka.

Citation: Zhou W, Zhu M, Gui M, Huang L, Long Z, Wang L, et ai. (2014) ääreisveren mitokondrioiden DNA Kopioi numero liittyy Eturauhassyöpä Risk ja kasvaintaakkaa. PLoS ONE 9 (10): e109470. doi: 10,1371 /journal.pone.0109470

Editor: Craig N. Robson, Northern Institute for Cancer Research, Yhdistynyt Kuningaskunta

vastaanotettu: 23 kesäkuu 2014; Hyväksytty: 22 elokuu 2014; Julkaistu: 03 lokakuu 2014

Copyright: © 2014 Zhou et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Data Saatavuus: Tällä kirjoittajat vahvistavat, että kaikki tiedot taustalla olevat havainnot ovat täysin saatavilla rajoituksetta. Kaikki tiedot ovat saatavilla Dryadi: doi: 10,5061 /dryad.88896.

Rahoitus: Tämä tutkimus tukee perustutkimus rahastoja Central yliopistojen Keski Etelä yliopisto (72150050368). Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Ihmisen mitokondriaalisen DNA (mtDNA) on 16569 bp kromosomi, joka on kaksijuosteista ja pyöreä luonnossa. Se on emolle perinnöllinen ja koodaa 13 ydin polypeptidialayksiköstä jotka muodostavat Hengitysketjun komplekseja, kaksi rRNA, ja joukko 22 tRNA, joita tarvitaan mitokondrioiden proteiinisynteesin [1]. Verrattuna tuman DNA, mtDNA puuttuu sekä intronit ja suojaava histonien ja on myös vähentynyt DNA korjaus kapasiteetti. Nämä ominaisuudet tekevät siitä erityisen alttiita reaktiivisia happiradikaaleja (ROS) ja muita vaurioita, jotka voivat johtaa sekvenssin mutaatioiden tai kopioluvun muutoksia [2], [3]. Sellaiset muutokset mtDNA voivat myöhemmin vaikuttaa ilmaus mitokondrioiden geenien sekä monenlaisia ​​mitokondrioiden toimintoja, kuten energian tuotannon, signaalitransduktion, solusyklin säätelyssä, solujen erilaistuminen, apoptoosi, ja kasvu [4]. Niinpä epänormaali muutokset mtDNA saattaa johtaa puutteisiin oksidatiivinen fosforylaatio, parannuksia tuotannon ROS aikana aerobista aineenvaihduntaa, tai jopa johtaa pahanlaatuisen tilassa.

Eturauhassyöpä (PCA) on toiseksi yleisin diagnosoitu syöpä ja kuudenneksi yleisin syy syövän liittyvän kuoleman miehillä, arviolta 914000 uutta tapausta ja 258000 kuolemista tapahtuu vuosittain maailmanlaajuisesti [5]. Historiallisesti ilmaantuvuus PCa on ollut huomattavasti alhaisempi Aasian kuin valkoihoisia miehiä; kuitenkin, Kiinassa, sillä elämäntavat ovat yhä Westernized, esiintyvyys Eturauhassyövän on lisääntynyt merkittävästi viime vuosina. Tähän mennessä seerumin prostataspesifinen antigeeni (PSA) on paras käytettävissä oleva prostataspesifisen tuumorimarkkeri. Kuitenkin on käynnissä kiistanalainen keskustelua käytöstä seerumin PSA testaus PCA [6]. Arviolta nopeus ylidiagnostiikka peräti 50% on raportoitu, ja haitallisia sivuvaikutuksia, jotka liittyvät tarpeettomien hoitojen tehdä yleistä hyötyä PSA massan seulonnan epäselvä [7]. Siten löytää uusia molekyylimarkkereita parantamiseksi tarvitaan seulontaa ja diagnosointia Eturauhassyövän.

Useita takautuva ja mahdollisille tutkimukset ovat tutkineet yhdistyksen perustava mtDNA kopioluvun perifeerisen veren leukosyytit (PBL: t) kanssa vaara syövät [8] – [21]. Tähän asti suhde mtDNA kopioluvun PBL: issä ja PCa riskiä ei ole vahvistettu. Seuraavissa kokeissa käytimme retrospektiivinen tapauskontrollitutkimuksessa Han kiinalaisia ​​arvioida yhdistys mtDNA kopioluvun PBL: issä riskiin Eturauhassyövän. Myös tutki mtDNA kopioluvun korreloi kliinis ominaisuuksiin PCa potilaista.

Materiaalit ja menetelmät

Tutkimuskanta ja epidemiologiset tiedot

Kaikkiaan 196 potilasta, joilla on histologisesti vahvistettu ensisijainen eturauhasen adenokarsinooma otettiin peräkkäin palvelukseen välillä 01 tammikuu 2006 ja 01 syyskuu 2012 kolmannessa Xiangya sairaalan ja Hunanin maakunnan kasvain sairaala, jotka molemmat ovat sidoksissa Keski Etelä yliopisto (Changsha, Kiina). Nämä potilaat edustivat 84% kaikista uusista tapauksista diagnosoidaan sekä sairaaloissa tutkimusjakson aikana. Mikään tapauksista oli saanut edellisen PCa Päihdehuoltolain, oli ollut mitään muiden syöpien tai vakavia terveysongelmia samanaikaisia ​​sairauksia kuten sydänsairaus, aktiivinen aivoinfarkti tai vaikea infektio viimeisten kolmen kuukauden aikana. Kaikki potilaat kävivät esikäsittely arviointi, mukaan lukien luukuvaus, rintakehän röntgen-, ja joko tietokonetomografia (CT) tai magneettikuvaus (MRI) vatsan ja lantion arvioida kasvaimen vaiheessa. Eturauhassyövän vaihe luokiteltu seitsemännen American sekakomitean Cancer (AJCC) järjestelmä.

Koska valvonta, 196 samanikäisiin (± 2 vuotta) terveillä koehenkilöillä Hunan maakunnassa samana ajanjaksona tapauksen ilmoittautuminen otettiin Center for Health Management kolmannen Xiangya sairaalassa. Verrokeilla oli PSA taso on alle 4 ng /ml, oli normaali eturauhasen, ja ei ollut aikaisemmin sairastanut syöpää tai minkä tahansa edellä mainitun lääketieteellisen samanaikaisia ​​sairauksia. Noin 82% yksilöiden kutsuttava verrokkien suostui ilmoittautua tutkimukseen.

Kaikki tapauksessa ja ohjaus osallistujat olivat Han-kiinalaisia. Kaikki haastateltiin koulutettu haastattelijat keräämään tietoja, kuten ikä, painoindeksi (BMI), tupakointi historia, ruokailutottumuksiin, ja suvussa syövän ja sairaushistoria. Koskaan tupakoitsija määriteltiin yksittäisen joka koskaan tupakoineet tai tupakoivat 100 savuketta aikana hänen elinaikanaan. Henkilö, joka polttaa 100 savuketta määriteltiin yhä tupakoitsija. Päivittäinen ravinnon rasvan saanti luokiteltiin kolmeen luokkaan mukaan Kiinan Dietary Reference Intake tasoilla [22]. Prosenttiosuus päivittäinen rasvan energian saanti kokonaisenergian 20%, 20-30% ja 30% määriteltiin alhainen, kohtalainen ja korkea päivittäinen ravinnon rasvan saanti, vastaavasti. Seuraavana aamuna haastattelun jälkeen, 10-ml paasto otettiin verinäytteet.

Tutkimus hyväksyi Research eettiselle toimikunnalle Keski Etelä yliopisto (Changsha, Kiina). Kirjallinen suostumus saatiin kaikilta osapuolilta. Tärkeimmät ominaisuudet Tutkimuksemme kohortin on koottu taulukkoon 1. Emme pystyneet määrittämään näytteet kolmessa tapauksessa ja kaksi säätimet, jättäen 193 tapausta ja 194 säätimet analyyseihin.

mtDNA kopiomäärä arvio kvantitatiivinen reaaliaikainen PCR

Laadukas genomista DNA uutettiin osallistujien ääreisverenkierron käyttäen QIAamp DNA Mini Kit (Qiagen, Valencia, CA) ja mukaan valmistajan protokollaa. Suhteellinen mtdna kopioluvun mitattiin kvantitatiivisella reaaliaikaisella PCR: llä (qPCR) kuten aiemmin on kuvattu [23], [24]. Lyhyesti, kaksi paria alukkeita suunniteltiin ja käytettiin kvantifiointia varten mtdna kopioluvun. Ensimmäinen alukeparia käytettiin monistamiseen

ND1

geenin mtDNA. Alukesekvenssit olivat seuraavat: eteenpäin aluke (ND1-F), 5′-CCCTAAAACCCGCCACATCT-3 ’; reverse-aluke (ND1-R), 5’-GAGCGATGGTGAGAGCTAAGGT-3 ’. Toinen alukeparia käytettiin monistamiseen ydin- geenin ihmisen globuliinin (

HGB

). Alukesekvenssit olivat seuraavat: eteenpäin aluke (HGB-1), 5′-GTGCACCTGACTCCTGAGGAGA-3 ’; reverse-aluke (HGB-2), 5’-CCTTGATACCAACCTGCCCAG-3 ’. PCR reaktioseos (10 ui) varten mtDNA vahvistusta koostui 2 x SYBR Green Mastermix (Cowin Biotech, Peking, Kiina), 200 nmol /l ND1-F (tai HGB-1) pohjamaali, 200 nmol /l ND1-R (tai HGB-2) aluketta ja 5 ng genomista DNA: ta. Lämpökäsittelyyn olosuhteet olivat 95 ° C: ssa 10 min, mitä seurasi 40 sykliä 95 ° C: ssa 15 s ja joko 60 ° C: ssa (

ND1

vahvistus) tai 56 ° C: ssa (

HGB

vahvistus) 1 min. Kukin näyte ajettiin kolmena rinnakkaisena 96-kuoppalevyn ABI PRISM 7000 Sequence Detection System (Applied Biosystems, USA).

qPCR menettelyt

ND1

ja

HGB

suoritettiin erillisessä 96-kuoppalevyillä samoista näytteistä samassa hyvin kannat välttämiseksi asentoon vaikutuksia. Kunkin ajon aikana negatiivinen kontrolli (vesi), positiivinen kontrolli (kalibraattori DNA), ja standardikäyrä olivat mukana. Kalibraattori DNA oli genomista DNA-näyte terveen ohjaus aihe, jota käytettiin vertaamaan tuloksia eri riippumattomat määrityksissä. Jokainen levy sisälsi satunnaisesti valitut näytteet, jolloin varmistetaan yhtäläinen edustus kaikissa tapauksissa ja valvontaa. Lab henkilöstö olivat sokeita case tai ohjata tila. Käytimme yhdistettyä DNA: referenssinä DNA 30 osallistujaa, jotka oli valittu satunnaisesti valvontaa tällä tutkimuksessa (200 ng genomista DNA: ta jokaisesta näytteestä). Standardikäyrää varten, viite DNA-näyte laimennettiin peräkkäin kaksitahoisen inkrementaalinen laimennus tuottamaan viiden pisteen standardikäyrä. Tämä mahdollisti välillä 40 ja 2,5 ng DNA kussakin reaktiossa.

R

2 korrelaatio kutakin standardikäyrää oli ≥0.99, hyväksyttävien keskihajonta (SD) asetettiin 0,25 varten Ct-arvoja. Muutoin näyte toistettiin. Suhde mtdna kopioida numeron yksittäinen geeni (

HGB

) kopioluku määritettiin jokaisesta näytteestä tavallisilla käyriä. Tämä suhde oli verrannollinen mtDNA kopion määrä kussakin näytteessä. Suhde Kunkin näytteen oli sitten normalisoitiin kalibraattorin DNA-näyte voidaan standardoida eri kulkee. Lopuksi, jotta voidaan arvioida tahansa määrityksen sisäinen vaihtelu, me analysoitiin 10 veren DNA-näytteet terveiden verrokkien kolme kertaa samana päivänä. Sitten toistettiin määritys samalla veren DNA-näytteet kolmella eri päivää arvioida määritysten välinen vaihtelu. Keskimääräinen kertoimia määrityksen sisäinen ja määritysten välinen vaihtelu oli 3,6% (vaihteluväli, 1,1% -9,1%) ja 3,9% (vaihteluväli, 0,8% -7,3%), vastaavasti. Nämä tulokset viittaavat siihen sekä korkea määrityksen sisäinen ja määritysten välinen luotettavuus.

Tilastolliset analyysit

Kaikki tilastolliset laskelmat tehtiin käyttäen SPSS 16.0 ohjelmistoa (IBM, Chicago, IL, USA). Erot jakelu isäntä ominaisuuksien välillä tapausten ja valvonta arvioitiin Pearsonin χ

2 testi kategorinen muuttujia ja, Student

t

testi (ikä ja BMI) ja Mann Whitneyn U-testi (mtDNA kopio numero) jatkuvien muuttujien. Spearmanin analyysiä sovellettiin tutkimalla suhde mtDNA kopiomäärä ja kliinis tekijät Eturauhassyövän. MtDNA kopiomäärän analysoitiin myös kategorisena muuttuja käyttäen mediaani tai kvartiili jakelun valvontaa. Sitten ehdoton monimuuttuja logistinen regressio, oikaistu PCA mahdolliset riskitekijät kuten ikä, painoindeksi, päivittäinen ravinnon rasvan saanti, tupakointi ja suvussa PCA käytettiin arvioimaan yhdistyksen välillä mtDNA kopioiden määrä ja riski PCa arvioimalla kertoimet suhdeluvut ( OR) ja 95%: n luottamusväli (95% CI). Testi suuntaus suoritettiin käyttäen mediaani mtDNA kopioluku arvo kullekin neljännekseen. Tämä regressio suoritettiin käyttäen koko asian ja kontrolliryhmää, sekä alaryhmien määritelty eri demografiset ja kliinis ominaisuudet. Kaikki tilastolliset testit olivat kaksipuolisia, ja tilastollisen merkitsevyyden asetettiin

P

0,05.

Tulokset

Kaikkiaan 196 potilasta PCA ja 196 terveitä kontrolleja mukana tässä tutkimuksessa. Näytteitä kolmessa tapauksessa ja kaksi tarkastuksia ei voitu määrittää, jättäen 193 tapausta ja 194 säätimet analyysiä. Ominaisuudet tutkimusväestöstä on koottu taulukkoon 1. ei ollut tilastollisesti merkitseviä eroja tapausten ja kontrollien välillä ikä ja tupakointi historiaa. Kuitenkin tapaukset olivat todennäköisemmin kuin valvonta on korkeampi BMI, suurempi päivittäinen ravinnon rasvan saanti, ja suvussa Eturauhassyövän (taulukko 1). Mediaani mtDNA kopiomäärä oli suurempi keskuudessa tapauksissa kuin kontrollien joukossa (0,91 ja 0,82, vastaavasti;

P

0,001, kuva 1).

rasiakuvaajien kuvaavat mediaani (kiinteä viiva box), välinen neljännekseen alue ja harha (ympyrät ulkopuolella päät viikset) kunkin valmisteluryhmän.

P

-arvo on vertailusta mtDNA kopioluvun jakelu tapausten ja kontrollien välillä käyttäen Mann Whitney U-testi.

suoritetaan ehdoton logistista regressioanalyysiä arvioimaan yhdistyksen välillä mtDNA kopiomäärä ja PCa riski. Kun yksilöt jaettiin korkea tai matala ryhmien perusteella mediaani mtDNA kopiomäärä arvo terveillä verrokeilla, havaitsimme, että korkean mtDNA kopioluvun liittyi suurentunut PCa säätämisen jälkeen ikä, painoindeksi, päivittäinen ravinnon rasvan saanti, tupakoinnista ja suvussa Eturauhassyövän (korkeampi mediaani

vs

alempi, kerroinsuhde (OR) = 1,85, 95% CI: 1,21-2,83, taulukko 2). Analyysi tiedoista, joita neljännekseen jakelun mtDNA kopioluvun kontrolleissa paljasti annos-vaste assosiaatio mtDNA kopioluvun ja PCa riski (korkein neljänneksessä

vs

alin: OR = 2,52, 95% CI: 1,35-4,70

P

suuntaus = 0,011; taulukko 2).

Voit selvittää havaitun assosiaation suurempi mtDNA kopioiden määrä ja PCa riskejä vaikuttivat demografiset tai ruokavaliotekijät, me kerrostunut tiedot iän ( 70 tai ≥70 v), BMI ( 25 tai ≥25 kg /m2), tupakoinnista (ei koskaan tai koskaan), ja päivittäinen ravinnon rasvan saanti (matala /kohtalainen tai suuri) ja toistuva logistinen regressio. Tulokset osoittivat merkittävää yhteyttä vain keskuudessa henkilöt, jotka olivat 70 v vanha, ylipaino (BMI ≥25 kg /m

2), ei koskaan tupakoineet, tai ne, joilla oli alhainen tai kohtuullinen päivittäinen ravinnon rasvan saanti (taulukko 3 ). Kuitenkin ehdoton logistinen regressio käyttäen Wald testi osoitti, että suhde mtDNA kopiomäärä ja PCa riski ei vaikuttanut merkittävästi iän (

P

= 0,127), BMI (

P

= 0,185) , tupakointi tila (

P

= 0,654) tai päivittäinen ravinnon rasvan saanti (

P

= 0,543).

tutkittava yhdistys mtDNA kopioida numeron riski Eturauhassyövän voi heijastaa rooli taudin etenemistä, selvitimme mahdollinen korrelaatio mtDNA kopioluvun kanssa kliinis ominaisuuksia PCA potilailla. Havaitsimme, että potilailla, joilla on suurempi mtDNA kopioluvun olivat todennäköisemmin kasvaimia korkeampi AJCC vaiheissa (

P

= 0,002) ja on korkeampi Gleason pisteet (

P

= 0,012; taulukko 4) . Kuitenkin mtDNA kopiomäärä eivät osoittaneet yhdessä PSA (

P

= 0,544). Nämä tulokset tukevat Spearmanin analyysi, joka osoitti, että mtDNA kopioluvun korreloi positiivisesti AJCC vaiheessa (

r

= 0.260,

P

0,001) ja Gleason (

r

= 0,216,

P

= 0,003), mutta se ei korreloinut PSA (

r

= 0,012,

P

= 0,872).

Tämän lisäksi valvota sitä, että mtDNA kopiomäärä vaihteli tiettyjen kliinis ominaisuuksiin potilaiden PCA, suoritimme ehdoton logistinen regressio säätämisen jälkeen mahdollisten sekoittavien tekijöiden, kuten ikä, PSA, AJCC vaiheessa ja Gleason (Taulukko 5). Potilaat AJCC vaiheessa III olivat todennäköisesti suurempi mtDNA kopioluvun kuin vaiheessa II (OR = 2,93, 95% CI: 1,01-8,50), kuten oli potilaita AJCC vaiheessa IV (OR = 3,38, 95% CI: 1,33 -8,57,

P

trendi = 0,009). Potilaat, joilla on Gleason 7 taipumus olla suurempi mtDNA kopioluvun kuin vähemmän tulokset, mutta tämä ero ei ollut merkittävä (OR = 1,80, 95% CI: 0,83-3,92). Samanlainen tulos saatiin potilaalla on Gleason tulokset 8-10 (OR = 1,61, 95% CI: 0,73-3,53,

P

trendi = 0,063). Potilaat, joilla PSA pitoisuus 10-20 ng /ml, oli yhtä mtDNA kopiomäärä potilaita, joilla PSA 10 ng /ml (OR = 0,66, 95% CI: ,17-+2,58), samoin kuin potilailla, joilla PSA ≥20 ng /ml ( OR = 0,55, 95% CI: ,20-+1,53).

keskustelu

tulokset tästä tapauskontrollitutkimuksessa, tietojemme mukaan ovat ensimmäinen molekyyli epidemiologinen tutkimus leukosyyttien mtDNA kopiomäärä ja PCa riski. Tutkimuksemme osoittaa, että korkea mtDNA kopiomäärä liittyy lisääntynyt riski PCa. Lisäksi mtDNA kopioluvun positiivisesti korreloi AJCC kasvain vaiheessa ja mahdollisesti kanssa Gleason pisteet, mikä viittaa rooli tuumoritaakka määritetään veren mtDNA kopioluvun.

Biologinen mekanismi mtDNA kopioiden määrä PBL: issä ja syövän riskiä ei ole täysin ymmärretty. Verisolujen toimivat kuljettajan soluja ja välittäjinä immuunivasteen. Siten veren yhteyksiä ja on vuorovaikutuksessa kaikkien ihmiskudosten ja voi välittää erilaisia ​​bioaktiivisten molekyylien, kuten happi, ravinteet ja aineenvaihduntatuotteiden, vasta-aineet, sytokiinit ja hormonit [25]. Siksi verisolujen profilointi edustaa tehokas keino tutkia sairauksien synnyssä ja fysiologiset homeostaasiin ja yleisemmin monimutkaisuudesta systeemibiologian [26]. Viimeisten vuosien ajan useiden tutkimusten retrospektiivinen ja ennakoiva tutkimus mallit ovat osoittaneet vahvan yhteyden konstitutiivisen mtDNA kopiomäärä PBL: issä ja riski eri syöpiä. Tarkemmin, lisääntynyt kopiomäärä havaittiin rinta-, haima-, colorectum, ja keuhkosyövässä, ja non-Hodgkin-lymfooman [8] – [13]. Kuitenkin, muissa tutkimuksissa on havaittu lasku mtDNA kopioluvun rinta-, maksa-, maha-, ruokatorven, ja munuaisten syövät, sekä pehmytkudoksen sarkooma [14] – [20]. U-muotoinen assosiaatio mtDNA kopioluvun PBL: issä ja peräsuolen syövän riski oli raportoitu ennakoiva tutkimus, jossa alin ja ylin kvartiileihin molemmat antavan merkittävästi lisääntynyt syöpäriski verrattuna toiseen neljännekseen [27]. Äskettäin on tehty ennakoiva tutkimus munuaissyövän paljasti, että korkeat mtDNA kopioluvun PBL: issä oli yhteydessä lisääntyneeseen tulevaa riskiä munuaissyövän [21], mikä oli käänteinen edelliseen kahden retrospektiivisen tutkimuksen [18], [19]. Nämä tulokset voivat merkitä sitä, että mtDNA kopiomäärä korreloi syöpäriskiä eri tavoin eri syöpätyyppien. Valitettavasti nämä tulokset voivat heijastaa eroja tutkimuksen suunnittelu, koeolosuhteissa ja potilasryhmissä. Jatkotutkimuksissa tulisi pyrkiä selvittämään nämä havainnot; sillä välin, turvallisin johtopäätös on, että tarkka yhdistyksen välillä mtDNA kopiomäärä ja syöpäriski on määritettävä jokaiselle syövän erikseen.

Ikä on tärkein riskitekijä Eturauhassyövän, minkä vuoksi valvottuja se kaikissa regressioanalyyseilla. Uskotaan, että iän myötä, kertyminen somaattisten mutaatioiden mtDNA aiheuttaa puutteita oksidatiivisen fosforylaation ja elektroninsiirtoketju, mikä puolestaan ​​aiheuttaa sekä lisääntynyt tuotanto ROS ja niiden myöhempää vuoto sytoplasmaan [28]. Aikana ikääntyminen, kohonnut oksidatiivisen stressin liittyy lisääntynyt runsaasti mitokondrioita sekä kopioluvun ja eheyden mtDNA ihmissoluissa [3], [29]. Oksidatiivisen stressin ja mtDNA mutaatioita aikana kertyviä ikääntymisen arvellaan johtavan suurempiin mtDNA kopioida numeron kompensoivaa mekanismia [3], [30]. Tämä prosessi voi selittää vain osa yhdistyksen että me havaittu mtDNA kopiomäärä ja riski PCA koska löysimme suurempi mtdna kopioluvun olevan merkittävä riskitekijä Eturauhassyövän riippumatta iästä. Niinpä yhdistys havaittu tutkimuksessamme voi myös heijastaa ikään riippumaton oksidatiivista stressiä. Itse asiassa tutkimukset ihmisillä ovat osoittaneet välistä positiivista mtDNA kopiomäärä ja useita markkereita oksidatiivisen stressin, kuten tiobarbiturihappoon reagoivia aineita ja 8-hydroxyguanosine [31]. Lisääntynyt mtDNA kopiomäärän on myös liitetty alhaisempi antioksidantteja veren [9], [31]. Nämä tulokset korostavat tarvetta tutkia, miten muut tekijät kuin ikääntymisen lisääntyminen oksidatiivisen stressin ja siksi riski Eturauhassyövän.

Tuloksemme perustuva mtDNA kopiomäärän verisolujen, tukevat myös aiemman kudospohjaisia ​​tutkimus, joka osoitti keskimääräinen mtDNA pitoisuus nostettiin PCA kudoksessa verrattuna normaaliin eturauhasen kudosta [32]. Kaksi muuta tutkimuksessa myös raportoitu, että kohonneet mtDNA tasot seerumissa tai plasmassa oli läsnä PCa verrattuna verrokkeihin [33], [34]. Lisäksi verrattaessa mtDNA kopioi numerot kliinis ominaisuudet, havaitsimme, että korkeammat mtDNA kopiomäärän PCa potilailla korreloivat sekä korkea AJCC kasvain vaiheessa ja Gleason pisteet, jotka ovat tärkeimpiä merkkejä, jotka heijastavat kasvaintaakka, mikä viittaa mahdollista yhteyttä. Tämä voi selittää, miksi lisääntyminen verenkierrossa mtDNA havaittiin korreloivan huonon ennusteen PCA potilaista radikaali prostectomy [33]. Samoin on raportoinut Xia et al. [14], sisältö mtDNA kokoveren I vaiheessa syöpäpotilaista oli huomattavasti pienempi kuin korkeammilla asteilla. Vaikka emme voi sulkea pois mahdollisuutta suora osallistuminen kohonnut mtDNA kopioluku maligniteetti muutos, nämä rivit todisteet ovat ehdottaneet, että mtDNA voi toimia mahdollisena korvike biomarkkeri kasvaintaakkaa heijastamalla taustalla onkogeenistä prosessi, kuten mtDNA mutaatioita ja oksidatiivisen stressin [9].

on syytä huomata, että PCA solulinjoissa, vähentäminen mtdna sisällön vuoksi PCA etenemiseen, mikä todennäköisesti läpi siirtyminen androgeeniriippuvaisissa PCa solujen androgeenin riippumaton fenotyyppi [35], epiteelin-to-mesenkymaalitransitioon muutokset [36], hypermetylaatiota CpG-saarekkeiden oletetun tuumorisuppressorigeeneille [37], ja epänormaalin aktivoitumisen Akt2 [38], Ras [39], ERK ja JNK [36]. Itse asiassa, alempi mitokondrion tasot eturauhasessa havaittiin liittyvän aggressiivisempaa PCa [39]. Muissa syöpätyypit kuten hepatosellulaarinen [40], mahalaukun [41], munasarjojen [42] ja rintasyöpiä [36], [43], ehtyminen mitokondriaalisen genomin sisällön pidettiin myös yhteinen piirre syövän etenemiseen. Kuitenkin tutkimuksessamme Eturauhassyövän potilaita, löysimme positiivinen korrelaatio valkosolujen mtDNA kopiomäärä ja kaksi indeksiä pahanlaatuisten etenemisen (AJCC vaihe ja Gleason). Nämä tulokset saattavat johtua erilaisista biologista käyttäytymistä syöpäsolujen ja PBL: t. Syöpäsoluissa, alhainen mtdna kopioiden lukumäärä voi estää hengitysteiden ketjun toiminto, jolloin vahvempi toleranssi hypoksia ja vähentää riippuvuutta mitokondrioiden oksidatiivisen fosforylaation, mikä antaa kasvainsoluja etuja kasvun [39], [44], [45]. Seerumista tai PBL: issä kuitenkin lisääntynyt mtDNA kopiomäärä näyttää osoittavan kohonneeseen hapettumista, joka on liittynyt syöpäriskiä [9], ja voi heijastaa kasvaintaakkaa joka liittyy pahanlaatuisen määrin [14], [33], pikemminkin kuin suora syy tumorigeneesin.

Koska toistettujen mittausten mtDNA kopioluvun hoitojakson aikana tässä tutkimuksessa tai edellisen ei ole tehty, muuttaminen mtDNA kopioluvun PBL: issä hoidon jälkeen ja aikana sairauden eteneminen pysyvät epäselvä. Siksi tuleva tehtyjen tutkimusten toistuvat toimenpiteet voivat auttaa selventämään ajallista suhdetta mtDNA kopiomäärä ja PCa kehittämiseen.

Tutkimuksemme on useita rajoituksia, jotka olisi otettava huomioon sovellettaessa tulokset. Kuten minkä tahansa retrospektiivinen asiakirja-ohjaus biologisten merkkiaineiden tutkimuksessa Tutkimuksemme ei salli meidän onko suurempi mtDNA kopioida numeroihin PCa potilaat ovat syynä tai seurauksena syövän puhkeamista ja etenemistä. Lisäksi suhteellisen pieni otoskoko tässä tutkimuksessa rajoittanut tilastollisia valmiuksia havaita vuorovaikutuksia mtDNA kopiomäärä ja muita keskeisiä riskitekijöitä, kuten PSA-arvot. Puute tilastollinen voima voi myös johtanut meidän epävarmoja tuloksia noin yhdistyksen välillä mtDNA kopiomäärä ja Gleason pisteet. Lisäksi prospektiiviset tutkimukset mahdollistaisi vahvistuksen Näiden alustavien tulosten kanssa käyttämällä suurempaa otoskoko. Myös meidän tutkimus rajoittui Han-kiinalaiset; yleistettävyyttä muihin etnisiin ryhmiin on vielä arviointia. Lopuksi, vaikka keräsimme verinäytteistä vasta diagnosoitu PCa tapauksissa ennen aloittamista mitään hoitoa, mikä osaltaan hillitsee mahdollisia vaikutuksia kohtelu mtDNA kopioiden määrä, erityisen tärkeää on, onko hoito Eturauhassyövän aikana eteneminen androgeenireseptorin vastustuskyky vaiheessa johtaa muutos mtDNA kopioluvun.

Yhteenvetona tietomme ovat ensin osoitettava, että kasvua mtDNA kopioluvun PBL: issä liittyy korkea PCa riski sekä myös korkea tuumoritaakka PCA potilailla. Kvantifiointi mtDNA kopioluvun PBL: issä voi olla avuksi diagnoosin Eturauhassyövän ja arvioinnin kasvaintaakkaa, ja niiden mahdollinen arvo olisi edelleen arvioitava suurempi, mahdollisille, monikeskustutkimuksissa.