Krooninen sairaus

tiivistelmä

Background

vuorovaikutus ympäristökemikaalien ja niiden aineenvaihduntatuotteiden biologisten makromolekyylien voi johtaa sytotoksisten ja genotoksisia vaikutuksia. 4-Aminobifenyyli (4-ABP) ja useita muita niihin liittyviä aryyliamiineja on osoitettu olevan syy mukana induktio ihmisen virtsarakon syöpiä. Genotoksisista ja karsinogeenisista vaikutuksista 4-ABP ovat esillä ainoastaan ​​silloin, kun se on metabolisesti muunnetaan reaktiiviseksi elektrofiili, aryyli- nitrenium ionit, joka myöhemmin sitoutuu DNA: han ja aiheuttaa vaurioita. Vaikka useat tutkimukset ovat raportoineet muodostumista 4-ABP-DNA additiotuotteet, ei paljon työtä on tehty tutkia immunogeenisyyttä 4-ABP-muunnetun DNA: n ja sen mahdollista osallistumista sukupolven vasta-aineiden virtsarakon syöpäpotilailla.

Menetelmät /Principal havainnot

Ihmisen DNA muutettiin N-hydroksi-4-acetylaminobiphenyl (

N

OH-AABP), reaktiivinen metaboliitti 4- ABP. Rakenteelliset häiriöt

N

OH-AABP muunnettu DNA arvioitiin UV, fluoresenssi, ja pyöreä dichroic spektroskopian sekä agaroosigeelielektroforeesilla. Genotoksisuus

N

OH-AABP muunnettu DNA varmistettiin comet. Korkean suorituskyvyn nestekromatografia (HPLC) analyysi natiivin ja modifioitu DNA-näytteitä vahvisti muodostumista

N

– (deoksiguanosiinia-8-yyli) -4-aminobifenyyli (dG-C8-4ABP)

N

-OH-AABP vaurioitunut DNA. Kokeellisesti indusoidun vasta-aineita vastaan ​​

N

-OH-AABP-modifioitu DNA osoitti paljon paremmin tunnustamista eristetty DNA virtsarakon syöpä potilailla verrattuna DNA saatiin terveiltä henkilöitä kilpailevan sitoutumisen ELISA: lla.

Johtopäätökset /merkitys

Tämä työ osoittaa epitooppi jako DNA eristettiin virtsarakon syöpäpotilaita ja

N

OH-AABP-muunnetun DNA syyllistämättä rooli 4-ABP aineenvaihduntatuotteiden DNA vahinkoja ja neo-antigeeniepitooppia sukupolven, joka voi johtaa induktioon vasta-aineiden virtsarakon syöpäpotilailla.

Citation: Shahab U, Moinuddin, Ahmad S, Dixit K, Habib S, Alam K, et al. (2013) Genotoksiset vaikutus

N

-hydroksi-4-Acetylaminobiphenyl ihmis- DNA: Implications in Virtsarakon syövän. PLoS ONE 8 (1): e53205. doi: 10,1371 /journal.pone.0053205

Editor: Rizwan Hasan Khan, Aligarh muslimien yliopisto, Intia

vastaanotettu: 31 heinäkuu 2012; Hyväksytty: 26 marraskuu 2012; Julkaistu: 31 tammikuu 2013

Copyright: © 2013 Shahab et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tämä työ rahoitettiin osittain ICMR myönnä. Immuno 18/11/18/2008-ECD-I (joka nyt seisoo päätökseen) ja varat yliopistosta (Aligarh Muslim yliopisto). Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

DNA solujen altistetaan kemiallinen karsinogeeni lähes aina sisältää joukon rakenteellisesti monipuolinen karsinogeeni-nukleotidin addukteja [1]. Arvellaan, että misreplication tai misrepair osajoukon näiden additiotuotteiden aiheuttaa mutaatioita, jotka puolestaan ​​voivat olla geneettinen esiasteita syöpä fenotyypin. Yksi tällainen karsinogeeni on 4-aminobifenyylin, aromaattinen amiini. Nämä pystyvät indusoimaan erilaisia ​​myrkyllisiä vaikutuksia, kuten syövän ja met-hemoglobinemia [2]. 4-ABP on ympäristö- ja ammatillista epäpuhtauden syntyy pääasiassa tupakansavun, fossiilisten polttoaineiden poltosta ja kumi, hiili, tekstiili- ja tulostaa teollisuuden [3] – [5]. 4-ABP: n on osoitettu olevan merkittävä etiologinen ihmisen virtsarakon syövän, ja myös voimakas virtsarakon syöpää aiheuttavaksi aineeksi koe-eläimillä [6], [7]. 4-ABP tähteet on raportoitu hemoglobiinin ja DNA eristettiin virtsarakon tupakoitsijoiden [8], [9]; mahdollisesti syyllistämättä 4-ABP etiologiassa virtsarakon syöpään. Kemiallinen rakenne 4-ABP ja sen fysiologisten metaboliitin,

N

OH-AABP, sijoitetaan niin kuvassa 1A.

agaroosigeelielektroforeesi natiivin ja

N

– OH-AABP modifioitua ihmisen DNA: ta [b]. DNA-näytteet kaistat 2-5 käsiteltiin konsentraation kasvaessa

N

-OH-AABP. Kaista 1: Native ihmisen DNA; Kaista 2: Native ihmisen DNA: 0,378 mm

N

-OH-AABP; Kaista 3: Native ihmisen DNA: 0,757 mm

N

-OH-AABP; Kaista 4: Native ihmisen DNA: 1,136 mm

N

-OH-AABP; Kaista 5: Native ihmisen DNA: 1,515 mm

N

OH-AABP.

genotoksisia ja karsinogeenisia vaikutuksia ovat esillä, kun 4-ABP on metabolisesti muunnetaan reaktiiviseksi elektrofiili. Ensisijainen vaihe on

N

oksidaation fenyyliamiineja ja arylacetamides erityisillä sytokromi

P

450 (CYP1A2) maksan kudoksissa [10], jota seuraa konjugaatio

N

hydroksyyliamiinia toiminto asetaatti, sulfaatti, tai glukuronaatti [11] – [14]. Aktivoidut elektrofiilisen johdannaiset 4-ABP käyttää niiden genotoksinen vaikutus vuorovaikutuksessa DNA muodostavat addukteja, jotka on raportoitu rooli virtsarakon syövän synnyn sekä koe-eläimillä [15] – [17] ja ihmisissä [18], [19]. DNA addukteja on myös raportoitu altistettaessa ihmisen virtsarakon solujen

N

OH-ABP,

N

OH-AABP ja

N

-OAc-AABP [20 ] – [22]. Kuitenkin suuri (80%) DNA-addukti on muodostettu on havaittu

N

– (deoxyguanosin-8-yyli) -4-aminobifenyyli (dG-C8-ABP) [19]. Vaikka suuria DNA-vauriot ovat seurausta kovalenttisen adduktin muodostumisen näiden metaboliittien myös aiheuttaa oksidatiivisen DNA-vaurioita tuottavat reaktiivisia happiradikaaleja [23], joka lopulta tuottaa DNA-juosteen katkoksia ja emäksen muutoksia, kuten 8-okso-guaniini ja niihin liittyvät tuotteet [24] , [25].

toimintatapa eri karsinogeenien paremmin selville analysoimalla niiden genotoksisuuden [26]. Tämä tutkimus raportoi rakenteellisia muutoksia ihmisen DNA inkuboitaessa kanssa

N

OH-AABP 24 tuntia. Modifioitu DNA ominaista eri spektroskopian menetelmiä, geelielektroforeesi ja lämpödenaturaatiota tutkimuksia. Genotoksisuuden

N

OH-AABP varmistettiin kautta comet. Vasta-aineet

N

-OH-AABP-DNA: ta indusoitunut naaras kanit ja käytetään immunokemiallinen koettimena vaurioiden aiheuttamia 4-ABP metaboliittien, DNA virtsarakon syöpäpotilailla.

Ethics -Tämän

hyväksyi tutkimuksen institutionaalisten eläinten eettisen komitean JN Medical College, UMA, Aligarh, Intia (lupa nro. 401 /CPCSEA). Verinäytteitä potilailta ja terveiltä yksilöiltä kerättiin sen jälkeen kun tietoon suullinen suostumus.

Materiaalit ja menetelmät

N

OH-AABP oli peräisin keskilännen tutkimuslaitos Kansas. Ihmisen istukan DNA: ta, metyloitu naudan seerumin albumiini (MBSA) etidiumbromidia, proteiini A-agaroosi (2,5 ml valmiiksi pakattu pylväs), anti-kani-IgG alkalinen fosfataasi konjugaatit, p-nitrofenyylifosfaatti, Tween-20, Freundin täydellinen epätäydelliset adjuvantit, Histopaque 1077, matalan sulamispisteen agaroosia (LMPA), RPMI 1640, Triton-X 100, trypaanisinistä, ja fosfaattipuskuroitu suolaliuos (PBS) Ca

2+ ja Mg

2+ olivat Sigma Chemical Company , USA. Polystyreenimikrotiitteri- tasapohjainen ELISA-levyille olivat Nunc (Tanska). Kaikki muut kemikaalit ja reagenssit olivat korkeinta analyyttistä laatua.

muuttaminen ihmisen istukan DNA

Ihmisen istukan DNA: ta (15 uM) oli muutettu inkuboimalla 37 ° C: ssa 24 h vaihtelevilla (0,378 mM, 0,757 mM, 1,136 mM ja 1,515 mM)

N

OH-AABP DMSO. Sitoutumattoman aineosat poistettiin dialysointi natriumfosfaattipuskuria (10 mM, pH 7,4), joka sisälsi 150 mM NaCl: a.

Agaroosigeelielektroforeesi

muutos elektroforeettinen kuvio natiivin ja muunnetun DNA: n havaittiin 1% agaroosia 30 mA 2 tunnin TAE-puskurissa (40 mM Tris-asetaatti, 2 mM EDTA, pH 8,0). Geelit värjättiin etidiumbromidilla ja visualisoitiin UV-valon alla.

eristäminen Lymfosyyttien

Heparinisoituun verinäytteitä (2 ml) terveistä luovuttajista ja potilaat laimennettiin sopivasti Ca

2+ ja Mg

2 + ilmaiseksi PBS. Lymfosyytit eristettiin verestä käyttäen Histopaque 1077, ja solut suspendoitiin lopuksi RPMI 1640

elinkelpoisuus arviointi lymfosyyttien

lymfosyytit tarkastettiin niiden elinkelpoisuus ennen ja jälkeen päättymisen reaktiossa käyttäen trypaanisiniekskluusiolla testi [27]. Elinkelpoisuuden solujen havaittiin olevan suurempi kuin 93%.

Lymfosyyttien hoito

lymfosyyttien (1 x 10

5 solua) altistettiin eri pitoisuuksia N-OH-AABP (0,378 mM, 0,757 mM, 1,136 mM, 1,515 mM) kanssa reaktion kokonaistilavuus 1 ml ja inkuboitiin 37 ° C: ssa 90 min. Inkuboinnin jälkeen seosta sentrifugoitiin 4000 rpm, supernatantti heitettiin pois ja pelletoidaan lymfosyytit lietettiin uudelleen 100 ul: aan PBS: ää (Ca

2+ ja Mg

2+ free), ja käsitellään edelleen Comet määrityksessä.

Comet määritys

Comet määritys suoritettiin kohti protokolla annetaan aiemman julkaisun meidän lab [28].

Fysikaalis Analysis

fluoresenssi analyysi oli suoritettiin Shimadzu (RF-5301-PC) spectrofluorophotometer. Näytteet viritettiin 325 nm ja emissio profiili kirjattiin 500-700 nm alueella. Sirkulaaridikroismispektrejä (CD) mittaukset natiivin ja modifioitu ihmisen DNA rekisteröitiin Jasco J-815 spektropolarimetrissa on 220-400 nm aallonpituusalueella. Kaikki skannaukset tallennettiin välein 1 nm.

korkean suorituskyvyn nestekromatografia

Suuren erotuskyvyn nestekromatografiaa (HPLC) analyysi natiivin ja muunnetun DNA suoritettiin Biologinen Duo virtauksen järjestelmä, BioRad (USA), joissa on UV-Visible monen aallonpituuden detektoriin. Absorbanssi tarkkailtiin 245 nm: ssä. Lyhyesti 50 uM DNA-näytettä hydrolysoitiin 0,1 N HCl: lla (1 ml /mg DNA: ta) 100 ° C: ssa 30 min (vapauttamiseksi emäksiä) ja kuivattiin vakuumissa. Emäkset liuotettiin 50 ul: aan 0,1 M Tris-HCl-puskuria, pH 8,5 ja suodatettiin 0,42 uM Milex, kertakäyttöinen ruiskusuodatin ennen lastausta C-18-käänteisfaasi-kolonnia (Supelco, Discovery 25 cm x 4,6 mm). Eluentti puskuri oli 12,5 mM sitruunahappoa, 25 mM natriumasetaatti, 25 uM etyleenidiamiinitetra-asetaatti (EDTA), pH 5,2 ja virtausnopeus on 1 ml /min säilyi koko.

immunisaatio

Random kasvatetaan, New Zealand White (NZW) naaraskanilla immunisoitiin kuten aiemmin on kuvattu [28], [29]. Lyhyesti, kanit (n = 4, kaksi kukin natiivin ja muunnetun DNA: n) immunisoitiin lihaksensisäisesti useisiin paikkoihin 50 ug vastaavien antigeenien kanssa kompleksin metyloituja BSA 1:01 suhde (paino /paino) ja emulgoitiin yhtä suureen tilavuuteen Freundin adjuvanttia.

puhdistus Vasta-aineet,

immunoglobuliini G (IgG) oli affiniteettia puhdistettiin esi-antiseerumeita proteiini A-agaroosi sarake [30]. Homogeenisuus eristetyn IgG varmistettiin 7,5% SDS-PAGE.

DNA eristäminen ihmisen verestä

verinäytteet kerättiin EDTA pulloihin eri virtsarakon syöpäpotilaiden ja normaalin terveen yksilön. Lymfosyyttien DNA eristettiin kohti valmistajan ohjeiden. 5 ml verta lisättiin 500 ul: aan Qiagen-proteaasi ja sen jälkeen puskuri AL (6 ml) sekoitettiin sen jälkeen voimakkaasti ravistellen. Seosta inkuboitiin 70 ° C: ssa 10 min ja 5 ml: lla etanolia (98%), lisättiin näytteeseen ja sekoitettiin kääntämällä putkea ylösalaisin ja voimakkaasti ravistellen. Liuos siirrettiin varovasti päälle QIAamp Maxi kolonniin pantiin 50 ml: n sentrifugiputkeen ja sentrifugoitiin 1850 x g (3000 rpm) 3 min. Suodos heitettiin pois, ja 5 ml: lla puskuri AW2 lisättiin ja jälleen sentrifugoitiin 4500 x g (5000 rpm) 1 minuutin ajan. Jälleen 5 ml AW2 puskuria lisättiin ja sentrifugoitiin 4500 x g (5000 rpm) 15 minuutin ajan ja suodos heitettiin pois. Sitten 600 ui puskuria AE kaadettiin suoraan kalvon sarake, joka myöhemmin inkuboitiin 5 minuuttia, ja sentrifugoitiin 4500 x g (5000 rpm) 2 minuuttia. Eluentti ladataan kalvolle sarakkeen, inkuboitiin 5 minuuttia, ja sentrifugoitiin 4500 x g (5000 rpm) 5 minuuttia. Eluentti, joka sisälsi DNA ilmakuivattiin ja liuotettiin PBS: ään, pH 7,4. Puhtaus ja pitoisuus DNA: n valmistus varmistettiin A

260 ja A

280 mittausta.

ELISA

spesifinen sitoutuminen vasta varmistettiin kilpailevan sitoutumisen määrityksessä [31]. Prosentuaalinen esto laskettiin annetaan kaavalla:

inhibitioprosenttia = 1- (A

esti /A

estoton) x 100.

Tulokset ja keskustelu

geeli kuvio (kuvio 1 B) esittää lisääntyminen liikkuvuuden muunnettua DNA: ta konsentraation kasvaessa

N

-OH-AABP (kaistat 2-5). Suurin liikkuvuus havaittiin 1,515 mm

N

-OH-AABP; ja muita lisääntyminen sen pitoisuus johti täydellinen menetys DNA rakenteen. Liikkuvuuden lisääntyminen N-OH-AABP käsitellyn DNA: n voi johtua siitä, että syntyy yhden katkeamisen, mikä voi johtaa siihen, että muodostuu pieni koko DNA, jotka ovat nopeammin liikkuvuuden verrattuna natiivin DNA: n kaistalla 1. menetys fluoresenssin DNA havaittiin myös funktiona kasvusta pitoisuuden

N

OH-AABP. Tässä tulee jälleen kerran kohti vaurioita kierrejouset rakenne DNA.

yksisoluiset geelielektroforeesin (SCGE) tai komeetta määritys on hyvin herkkä arviointimenetelmä DNA-vaurioita. Elektroforeesin aikana vaurioitunut DNA kulkeutuu tumasta anodia kohti, muodostaen muoto ”komeetta” ja pää (solun tuma ehjät DNA) ja häntä (rento ja rikki DNA). Siksi komeetta määritystä voidaan käyttää testaamaan genotoksisuuden karsinogeenisia aineita viljellyissä soluissa kuten tuoretta eristetty ihmisen lymfosyyteissä. Tässä tutkimuksessa olemme käyttäneet komeetta-määritys analysoida vahinkoa ihmisten lymfosyytti-DNA:

N

OH-AABP hoitoa. Komeetta kuvia, käsittelemällä lymfosyyttien eri pitoisuuksilla

N

OH-AABP, on esitetty kuvassa 2. komeetta hännän ilmaisee DNA rikkoutumisen yhden solun geelielektroforeesilla. Tuloksemme selvästi osoittaa DNA-vaurioita käsittelemällä 1,515 mm

N

OH-AABP, kuten käy ilmi muodostumista erillinen hännän päässä leviää pään (kuvio 2E). Havaitsimme, että kasvavien pitoisuuksien kanssa

N

-OH-AABP, DNA: n prosenttiosuus hännän myös lisääntynyt. Klo 0,378 mM pitoisuus

N

OH-AABP, 19% DNA: löytyi häntää. Kuitenkin 0,757 mM ja 1,136 mM

N

OH-AABP osuus hännän DNA nousi 27% ja 58% vastaavasti. Lisäksi se nostetaan 89%: iin 1,515 mm

N

OH-AABP. DNA vaurioita parametrit, eli oliivi takaosan liike (OTM) ja hännän pituus mitattiin myös ja havaittiin merkitsevästi lisääntynyt 1,515 mm

N

OH-AABP verrattuna 0,378 mM, 0,757 mM ja 1,136 mM

N

OH-AABP. Huomattava kasvu OTM (94%) havaittiin lymfosyyttien käsitelty 1,515 mm

N

OH-AABP verrattuna kontrolliin (käsittelemätön lymfosyyttejä). Lisäksi huomattava kasvu hännän pituus tallennettiin myös. Sen havaittiin olevan 72% korkeampi kuin käsittelemättömien lymfosyyttikontrolli. Tulokset on esitetty yhteenvetona taulukossa 1.

Kaikki lymfosyyttejä käsiteltiin 24 tunnin ajan 37 ° C: ssa.

aiemmin julkaistu, havaitsimme 62% hyperchromicity at 260 nm: ssä UV-absorptiospektri

N

-OH-AABP modifioitua ihmisen DNA: ta [32]. Havaitut hyperchromicity edustaa altistuminen kromoforisista ryhmien seurauksena sukupolven säikeen katkoksia ja dissosiaatio vetysidosten kun kyseessä on muunnettu DNA.

Kumpikaan natiivi DNA: ta tai sen modifioitua muotoa on oma fluoresenssi ja siksi extrinsic fluoroforin etidiumbromidia, käytettiin fluoresenssispektroskopia DNA: n ja sen

N

-OH-AABP-muutetussa muodossa. Native ja

N

-OH-AABP muunnettua DNA: ta inkuboitiin etidiumbromidilla 30 minuutin ajan ja päästöjen profiili on tallennettu käyttäen eksitaatioaallonpituutta (325 nm) ja etidiumbromidia (kuvio 3A). Pieneneminen 43.17% vuonna fluoresenssin voimakkuus muunnettu DNA, verrattuna sen alkuperäisessä muodossa, merkitsee häiriöt DNA Kaksoiskierteisessä rakenteen seurauksena

N

OH-AABP muutos.

fluoresenssiemissiospektrit natiivin ihmisen DNA (—) ja modifioitua ihmisen DNA: 1,515 mm

N

OH-AABP (-) [a]. Pyöreä dikromaattinen spektrit ihmisen natiivin DNA: n (-) ja

N

-OH-AABP ihmisen modifioitua DNA: ta (—-) [b].

Muutokset DNA-rakenne oli arvioitiin elliptisyys mittauksia.

N

OH-AABP muunnettua DNA näytteillä 5 nm siirtyminen (275-280 nm) CD-signaalin yhdessä kasvua elliptisyytenä 5,57-9,27 mdeg (kuvio 3B), mikä osoittaa, rakenteelliset muutokset DNA-molekyylin. Kasvu elliptisyys vastaa 39,9% tappio DNA rakenteen päälle muutos. Tämä rakenteellinen menetys voi johtua lajittelulevyyn DNA emäksistä seurauksena kierteen epävakautta. Rakenteellinen häiriöt ehdottavat piirtyy DNA, voi johtua siitä, että syntyy yhden säikeen katkoksia.

Kuva 4A ja 4B edustavia HPLC- kromatogrammit happo hydrolysoitu näytteitä natiivin ja

N

-OH- AABP muunnettu ihmisen DNA vastaavasti. Hyvin määritellyt piikit retentioajalla 4,467 min, 7,332 min ja 8,727 min havaittiin natiivin ihmisen DNA. Kuitenkin, kun kyseessä on muunnettu DNA näistä piikeistä siirtynyt 4,631 min, 7,443 min ja 9,164 min vastaavasti, mikä viittaa siihen, muuttaminen DNA perustaa. Ylimääräiset piikki retentioajalla 22,029 min happohydrolysaatin muunnettua DNA: ta on ominaista dG-c8-4-ABP adduktia, joka on tunnettu merkkiaine DNA vahingoittunut 4-ABP ja

N

-OH- AABP [33]. Tunnistaminen dG-c8-4-ABP addukti on yhtä mieltä julkaistut raportit DNA-addukteja fenyyliamiineja koe-eläimillä [15] – [17]. Vastaavia DNA-addukteja on raportoitu biopsianäyttei- ihmisen virtsarakon [18], [19].

edustaja HPLC happohydrolysaatin

N

-OH-AABP modifioitua ihmisen DNA: [b].

nainen immunisoidut kanit

N

OH-AABP muokattu ihmisen DNA osoitti voimakkaasti humoraalivaste nostattamaan korkea titteri immunogeeni spesifisten vasta-aineiden. Kokeellisesti indusoidun vasta-aineita käytettiin immunokemiallinen koettimena

N

-OH-AABP tai liittyvät aryyliamiineja indusoi vaurioita genomisen DNA virtsarakon syöpäpotilailla. Sitoutuminen DNA eristettiin virtsarakon syöpäpotilailla oli varsin paljastavia kilpailukykyinen inhibitiomäärityksessä. Esto anti-

N

OH-AABP-DNA IgG lymfosyyttien DNA virtsarakon syöpäpotilailla kirjattiin välillä 60,5% ja 77,6%. Vaikka aiheuttama esto lymfosyyttien DNA normaalin terveen yksilön oli melko alhainen (taulukko 2). Huomattavan korkea tunnustamista lymfosyytin DNA virtsarakon syöpäpotilaiden kokeellisesti indusoidun vasta-aineita

N

-OH-AABP muunnettua DNA: ta on selkeä osoitus epitoopin jakaminen genomisen DNA virtsarakon syövän potilaiden ja ihmisen DNA: n modifioitu

in vitro

by

N

OH-AABP. Tämä johtaa päätelmään, että

N

OH-AABP, tai siihen liittyvän aryyliamiinina, luo neo-epitooppien DNA-molekyylin, jotka tunnistetaan ”

ulkomaalainen

” tai

ei- itse

immuunijärjestelmä johtaa autovasta sukupolven virtsarakon syöpäpotilailla. Merkittävästi korkeatasoinen tunnustamista genomi-DNA virtsarakon syöpäpotilaiden kokeellisesti indusoidun vasta-aineita

N

OH-AABP modifioitua ihmisen DNA on näyttöä kohti osallistumista modifioituja emäksiä ja yksisäikeinen alueilla taudin synnyssä .

Kiitokset

Tekijät myöntävät infrastruktuurin tuen DST-FIST laitos Department.