Krooninen sairaus

tiivistelmä

Background

prekliinisissä, ei-pienisoluinen keuhkosyöpä (NSCLC) vaativat parempaa kliinistä merkitystä tutkia tautimekanismien ja innovatiivisia hoitomuotoja. Olemme pyrkineet vertailla ja tarkentaa bioluminescent potilaalle tehdä hiiri malleja ihmisen lokalisoitu NSCLC.

Methods

Kateenkorvattomiin

nude

hiiriin tehtiin ihonalainen injektio (ryhmä 1-SC, n = 15, ohjaus), ihon kautta potilaalle tehdä injektio (ryhmä 2-POI, n = 30), kirurgiset potilaalle tehdä istuttaminen ihon alle kasvanut kasvaimia (ryhmä 3-SOI, n = 25), tai transpleural potilaalle tehdä injektion (ryhmä 4-TOI, n = 30) A549-lusiferaasi-soluja. Bioluminescent

in vivo

kuvantaminen Sitten suoritettiin viikoittain. Kiertävä kasvainsolujen (CTC) etsittiin käyttäen Cellsearch® järjestelmää SC ja TOI malleja.

Tulokset

ryhmä 2-POI liittyi odottamattomia suoraan keuhkopussin leviäminen solujen liuosta 53% tapaukset, jotka kieltävät tutkitaan tarkemmin lokalisoitua keuhkojen kasvain. Ryhmä 3-SOI oli ominaista korkea Leikkauskuolleisuus aluksi paikallinen keuhkokasvaimia, ja paikallinen kehitys. Ryhmä 4-TOI liittyi pieni Leikkauskuolleisuus aluksi paikallinen keuhkokasvaimia, loco alueellinen laajennus, ja kaukainen etäpesäke. CTC havaittiin 83% on

nude

hiirillä ihon alle tai potilaalle tehdä NSCLC kasvaimia.

Johtopäätökset

Transpleural potilaalle tehdä injektion A549-luc solujen

alaston

hiiri keuhko indusoi paikallisia kasvain, jonka jälkeen imusuonten laajennus ja kuolleisuudessa, ja annettiin ensimmäistä kertaa tunnistamisen CTC on NSCLC hiirimallissa.

Citation: Mordant P, Loriot Y, Lahon B, Castier Y, Lesèche G, Soria JC, et ai. (2011) Bioluminescent Orthotopic Mouse mallit Ihmisen Paikallinen ei-pienisoluinen keuhkosyöpä: Feasibility ja tunnistaminen Kiertävä Syöpäsolut. PLoS ONE 6 (10): e26073. doi: 10,1371 /journal.pone.0026073

Toimittaja: Wafik S. El-Deiry, Penn State Hershey Cancer Institute, Yhdysvallat

vastaanotettu: 24 kesäkuu 2011; Hyväksytty: 19 syyskuu 2011; Julkaistu: 11 lokakuu 2011

Copyright: © 2011 Mordant et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: PM on tukenut Ranskan Society of Thoracic Surgery (SFCTCV). BL on tukenut Ranskan Medical Research Foundation (FRM) ja Generation Thorax. Hanke on tukenut Ranskan Cancer Research Association (ARC MCV ja ED) ja Gustave Roussy Foundation (Fondation Gustave Roussy MCV ja ED). Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

ei-pienisoluinen keuhkosyöpä (NSCLC) on johtava syy syövän liittyvän kuolleisuuden maailmanlaajuisesti. Huolimatta lukuisista kliinisissä tutkimuksissa esikliinisesti lupaavia lääkkeitä, ei ole suuria puhkeaminen on tehty NSCLC johdon viime vuosikymmeninä. Vaikka on olemassa vahvaa näyttöä perustuvan lääketieteen tukevat kliinistä käyttöä sytotoksisten, noin 3 tyyppisiä aineita on osoittanut jatkuvan mutta rajoitettu tehoa (platina, taksaanit, gemsitabiini). Viime aikoina kohdennettuja hoitomuotojen luopuneen tärkeitä toiveita antaneet mahdollisuuden suoraan osuma syöpäsolujen erityisiä selviytymisen mekanismeja. Jyrkässä ristiriidassa luotettavuutta taustalla biologisen järkevä, kliininen translationaalinen tämän tiedon osaksi kliinistä hyötyä edelleen haastavaa, koska kohdistettuja hoitomuotoja kertyi vain hieman eloonjäämishyötyä harkittaessa koko pienisoluista keuhkosyöpää väestöstä [1] – [4]. Kun nämä alkuvaiheen tutkimuksissa, retrospektiivinen molekyyli- analyysejä kasvainkudoksen johti määritelmään potilasalaryhmissä joka suotuisasti vastata tutkimukselliset hoidot, johdon tiettyjen syöpien on mullistanut [5]. Potilailla, joilla NSCLC jotka saavat erlotinibin, läsnäolo EGFR mutaatio herkempiä agentti [6], [7], vaan se koskee ainoastaan ​​16%: lla potilaista [8]. Viime aikoina esto anaplasic lymfooman kinaasin (ALK) on raportoitu aiheuttavan kasvaimen kutistuminen tai stabiili tauti useimmilla potilailla NSCLC kätkeminen EML4-ALK -fuusiogeenit, vaan se koskee ainoastaan ​​2-7% NSCLC [9]. Kuitenkin tällä välin huomattavia ponnisteluja on käytetty kliinisissä tutkimuksissa testaus aktiivinen hoitoja resistenttejä kasvaimia [2], [3], [10] – [12].

Ristiriita arvojen kliinisen perustelut, määrä prekliinisiin tietoihin ja toisaalta alhainen tuotanto niiden siirron kliinisissä tutkimuksissa viittaavat siihen, että merkitystä prekliinisissä voidaan asettaa kyseenalaiseksi. Varsinkin esikliinisiä tutkimuksia pitäisi olla enemmän hakkuun positiivinen verrattuna negatiivinen ennustearvo [13]. Nykyinen in vivo kokeellisissa malleissa eivät kuvaa vaiheet pahanlaatuisten etenemisen normaalista kudoksesta precancerous leesio ja sitten syöpään (paikallinen ja sitten metastaattisen). Ihanteellinen malli pitäisi jäljitellä luonnon historiasta ihmisen syövän, parantaakseen ymmärrystä syövän synnyssä, ennustaa tehoa tutkittiin hoidon ja mitkä hoito sopii, johon potilas ennen kliinisten kokeiden suunnitteluun. Tässä yhteydessä ksenografteissa malleissa on kulmakivenä prekliinisen kokeiluja ja hyötyvät josta teknisiä parannuksia yhdessä viimeaikainen kehitys tietokoneavusteisen lääkeaineen suunnittelun, tietokonemallinnuksen ja geenitekniikalla eläimet [14]. Ihmisen NSCLC ksenografteissa voidaan istuttaa immuunivajaisiin eläimiin joko ihon alle (SC) tai ortotooppisesti. Yhdellä kädellä, SC ksenografteissa keuhkosyöpään on helppo suorittaa ja seurata, mutta ei ole merkitystä koskevat (i) luonnollinen historia syöpä puuttumisen vuoksi imusuonten tai metastaattisen laajennus, ja (ii) ennustaminen lääkkeen kliinisissä kokeissa Tästä osoituksena on suuri osuus negatiivinen kliinisissä tutkimuksissa [13]. Vuonna Toisaalta potilaalle tehdä malleja keuhkosyöpään ovat teknisesti haastavia, eivät aina jäljittelee luonnollista historiaa keuhkosyöpää, mutta nostaa huomattavasti toivo koskien lääkeseulontamenetelmä [15]. Viimeaikainen kasvu ymmärrystämme rajat puhua kasvaimen strooman [16] – [18] ja sen osallistumista lääkeresistenssi, etäpesäke, immuuni paeta, angiogeneesi viittaa vahvasti siihen, että potilaalle tehdä mallien pitäisi antaa arvokasta tietoa, että yksi ei voinut saada sub -cutaneous malleja.

Kun otetaan huomioon rintakehä kasvaimia, tekninen haaste on kasvattaa ”keuhkojen kasvain solujen rinnassa”. Useita tekniikoita voidaan käyttää tämän tavoitteen, mukaan lukien sisäiset henkitorven hallinto [19] tai ihon kautta potilaalle tehdä injektio [20] NSCLC-solujen liuoksessa, ja kirurgiset potilaalle tehdä istuttaminen ihon alle kasvanut kasvain peräisin NSCLC solulinjasta [21]. Henkitorven liittyy diffuusi alkuperäisen leviämistä solujen sekä keuhkot, häiritsevät etenemistä ja keuhkojen etäpesäkkeiden prosessi, siis suosivat perkutaaninen ja kirurgiset malleja. Kuitenkin tekninen toteutettavuus ja luonnon historiasta nämä kaksi mallia ei ole koskaan verrattuna. Tämä tutkimus vertasi ja tarkentaa näiden kahden potilaalle tehdä ksenografteissa mallia keuhkosyöpään, ja lopullisena tavoitteena toisintaa ihmisen NSCLC etenemistä, mistä alun perin paikallinen intraparenchymatous kasvain, etäpesäkkeiden kehitys ja yleinen heikentyminen. Tätä tarkoitusta varten olemme verrattuna neljä ksenografteja malleja, kuten SC injektiolla, jota käytettiin verrokkina, ihon kautta ortotooppisten injektio ja kirurgiset ortotooppinen implantaatio kuten aiemmin on kuvattu, ja transpleural ortotooppisten injektiona uusi malli. Sallimaan pitkittäinen seurata syövän etenemisen ja edelleen arviointiin hoidon tehokkuuden, käytimme solulinja on transfektoitu lusiferaasi ja suoritetaan

in vivo

bioluminescent kuvantaminen. Toteutettavuus arvioitiin Leikkauskuolleisuus ja siirteen korko. Kliinistä merkitystä arvioitiin aluksi intra parenkymaalisen sijainti, paikallista alueellista laajentamista, metastaattinen laajennus, mediaanielinajassa ja histologisia näkökohta. Eksploratiivisessa analyysi, tunnistaminen Kiertävä kasvainsolujen (CTC) suoritettiin käyttäen Cellsearch® määritystä (Veridex LLC, USA).

Materiaalit ja menetelmät

Solun viiva

ihmisen A549-keuhko-adenokarsinoomasolulinja stabiilisti transfektoitu lusiferaasin (A549luc) hankittiin Etu Lifesciences Corp. Soluja viljeltiin täydellisessä väliaineessa, joka koostuu 10% (v /v) naudan sikiön seerumia, 2 mmol L-glutamiinia, 50 yksikköä /ml penisilliini-streptomysiiniä RPMI (kaikki Invitrogen). Soluja kasvatettiin 37 ° C: ssa ja 5% CO 2: ssa inkubaattorissa, testataan mykoplasma free käyttämällä PCR mykoplasman detektioreagenssipakkaus (MycoProbe, R 0,05 pidettiin merkittävänä. Kaikki tiedot analyysit suoritettiin vapaiden R ohjelmisto (https://www.r-project.org, R Foundation for Tilastollinen tietojenkäsittely, Wien, Itävalta).

Tulokset

Feasibility

toteutettavuus arvioitiin määrittämällä Leikkauskuolleisuus ja siirteen korko. Leikkaussalin kuolleisuus oli null ryhmässä 1-SC käytettiin kontrollina, ja merkitsevästi korkeampi ryhmässä 3-SOI (60%, p 0,001), mutta ei ryhmissä 2-POI (6%, p = 0,79) tai 4- TOI (3%, p = 0,72). Vaikutusta arvioitaessa oppimiskäyrä on Leikkauskuolleisuus ryhmän 3-SOI, havaitsimme ei vähentynyt merkittävästi kuolleisuus ensimmäisen 10 eläintä ja entisen 15 yksilöä (kuolleisuus 80% vs. 47%, vastaavasti, p = 0,21 ). Mitään merkittävää eroa ei havaittu ryhmien 2-POI ja 4-TOI koskien leikkaussalin kuolleisuus (p = 0,99, taulukko 1). Siirrostumi- oli 100% ryhmässä 1-SC käytettiin kontrollina, ja huomattavasti alhaisempi ryhmässä 2-POI (68%, p = 0,037), ryhmä 3-SOI (60%, p = 0,034) ja ryhmä 4 -TOI (65%, p = 0,027). Mitään merkittävää eroa ei havaittu välinen 3 koeryhmien koskien engraftmentissa rate (p = 0,90, taulukko 1).

kliinistä merkitystä

kliinistä merkitystä arvioitiin sijainnin alkuperäisen kasvain, kuvantaminen kasvain laajennus, selviytyminen analysointi ja histologinen tutkimus. Alkuperäinen kasvain rajoittui SC kudokseen ryhmässä 1-SC sekä keuhkoparenkyymistä ryhmässä 3-SOI. Ryhmässä 2-POI, 53% eläimistä tehtiin keuhkopussin kylvö aikana ihon kautta potilaalle tehdä injektion ja kehittänyt alkuperäisen loco alueellinen laajentaminen molemmille pleurae. Koska Tutkimuksen tarkoituksena oli saada keuhkonsisäistä lokalisoitu NSCLC malli, tämä välitön keuhkopussin kylvö esteellinen tekniikka. Ryhmässä 4-TOI, kasvain oli alun perin ainoastaan ​​keuhkojen peruskudokseen (taulukko 1, kuvio 2a ja 2b). Bioluminescent kuvantaminen löytyy epäsäännöllinen käyrät ryhmässä 1-SC ja 3-SOI, joilla on korkea muun yksilön ja kronologisessa muunnelmia. Eläintä ei kehitetty Paikallista tai metastaattinen laajennusten aikana seurata. Ryhmässä 2-POI, ei bioluminesenssi käyrä piirrettiin koska perioperatiivisen keuhkopussin kylvö. Yksi eläin kehitetty luun etäpesäke. Ryhmässä 4-TOI, bioluminesoiviin kuvantaminen löysi säännöllisesti, eksponenttikäyrän jälkeen päivä 21. Seitsemän prosentteja eläimille kehittyi Paikallista laajennus homolateral keuhkosairaudet kuin evoluution primaarikasvaimen. Yksi eläin kehitetty luumetastaasi (taulukko 1, kuvio 2a). Survival-analyysi paljasti, että mediaanielinajassa ei saavutettu sen jälkeen, kun seuranta 2 kuukauden ryhmässä 1-SC ja 3-SOI. Ryhmässä 2-POI, eikä eloonjääminen käyrä piirrettiin koska perioperatiivisen keuhkopussin kylvö. Ryhmässä 4-TOI, mediaani elinaika oli 40 päivää (taulukko 1, kuva 2c). Histologinen tutkimus paljasti SC pyöreä kasvaimia kanssa säännöllisen muotoinen, suuri osuus erilaistumaton karsinooma, harvat kapselimainen repeämät, ja harvat verisuoni tai lymfaattinen embolusten ryhmässä 1-SC. Ryhmässä 2-POI, säännöllinen intraparenchymatous kasvaimet saatiin, jossa on pieni osuus erilaistumaton karsinooma, suuri määrä Kapselipolysakkaridiantigeenin repeämät, ja verisuoni tai lymfaattinen veritulppien. Ryhmässä 3-SOI, epäsäännöllinen intraparenchymatous kasvaimet saatiin, jossa on pieni osuus erilaistumaton karsinooma (+), kapselimainen repeämiä (++) ja suuri määrä verisuonten tai imusuonten veritulppien. Havainnot olivat samanlaiset 4-TOI ja ryhmä 2-POI (kuva 3, taulukko 2).

a. Evolution fotonien määrä (ilmaistuna 10

6 fotonit /s) ajan, päivästä 0 (istutusta) päivään 63 (pää bioluminescent seuranta). Sillä joka kerta, keskiarvo ja keskihajonta eläimet elossa raportoidaan. Ryhmässä 2-POI, perkutaaninen injektio johti keuhkopussin kylvö 53% tapauksista, kuten leikkauksen jälkeinen röntgen osoitti varjoainetta joko vasemmalle keuhkopussin tilaa, oikealle keuhkopussin tilaa (anatominen jatkumo), tai molempia. b. Edustavia kehitys bioluminescent signaalin, päivästä 14 päivään 42. ryhmässä 2-POI, keuhkopussin kylvö luonut signaali sijaitsee oikealla perusteella rintakehän, ristiriidassa kanssa ensisijaisena tavoitteena tässä tutkimuksessa. Ei jatkotoimia kuin tehty tälle ryhmälle. c. Survival käyrä aika kasvaimen istutuksen 2 kuukautta käyttäen Kaplan-Meier menetelmää ja 95%: n luottamusväli baaria. 2 kuukauden eloonjääminen on 100% ryhmässä 1-SC, 40% ryhmässä 3-SOI, ja 65% ryhmässä 4-TOI.

Kirurginen potilaalle tehdä istutusta (ryhmä 3) johti lokalisoitu soluttautuminen kasvaimia, kun taas ihon läpi potilaalle tehdä injektion (ryhmä 2) ja transpleural potilaalle tehdä injektion (ryhmä 4) johti lokalisoitu pyöristetty kyhmyt. Histologinen tutkimus paljasti suuren osan erilaistumaton karsinooma ryhmässä 1-SC kasvain, mutta alhainen osuus 3 koeryhmään. Lisäksi 3 koeryhmään liittyi enemmän kapseli repeämä ja verisuonten emboli kuin ryhmä 1-SC.

tunnistaminen CTC

Vieraslajisiirteen istutusta hinnat olivat 100% CTC ryhmä 1 (SC, n = 6) ja 60% CTC ryhmässä 2 (TOI, n = 9). Kolme Cellsearch® määritykset suoritettiin kussakin kontrolliryhmässä, ja 6 Cellsearch® määritykset suoritettiin kunkin koeryhmän. Negatiiviset kontrollit osoittivat, nolla tai yksi CD45-, DAPI +, CKPE + solun määritystä kohti (tuloksia ei ole esitetty). Positiiviset kontrollit osoittivat korrelaation tuumorisolujen lukumäärän liuoksessa ja Cellsearch® CTC määrä (kuvio 4a ja 4b). CTC ryhmä 1-SC, 5 määritykset (83%) oli positiivisia CTC tunnistus (CTC tason alue 2-5, keskiarvo 2,5 ± 1,76). CTC ryhmä 2-TOI, 5 määritykset olivat positiivisia CTC tunnistus (CTC tason alue 2-21, keskiarvo 9,5 ± 9,35). Kaikki yhdessä 3 viikon kuluttua kasvaimen istutuksen, CTC havaittiin 83% on

nude

hiirillä joko SC tai potilaalle tehdä NSCLC kasvaimet (kuvio 4c ja 4d). Verrattaessa ryhmiä, ero CTC tasoilla oli suuntaus kohti tilastollista merkitsevyyttä (p = 0,058, kuvio 4c, taulukko 2).

a. Edustus värjäytymisen verenkierrossa olevien solujen avulla Cellsearch® määritystä. CTC määritellään CD45-, DAPI +, ja CKPE + solut. – Ylempi rivi: positiivisena kontrollina, 50 ja 500 A549luc solut analysoitiin liuoksessa, joka sisälsi 600 ui väliainetta ja 7 ml: aan terveen ihmisen veressä. Tässä, kuten esimerkiksi sekä CD45-, DAPI +, CKPE + solut ovat syöpäsoluja. – Bottom line: esitys tuloksista koeryhmään. Tässä, kuten esimerkiksi tämän CD45-, DAPI +, CKPE + solu on CTC. b. Korrelaatio Cellsearch ® CTC laskea ja tuumorisolujen lukumäärän liuoksessa. Kontrolleina, 0 (negatiivinen kontrolli), 50 ja 500 (positiiviset kontrollit) A549luc solut analysoitiin liuoksessa, joka sisälsi 600 ui väliainetta ja 7 ml: aan terveen ihmisen veressä. Tämä koe osoitti, korrelaatio Cellsearch® CTC määrä ja määrä tuumorisolujen liuoksessa (R

2 = 0,99857). c. Määrä CTC mukaan koeryhmän, CTC ryhmä 1 (SC) tai CTC ryhmä 2 (potilaalle tehdä). Yleinen positiivisuus on Cellsearch ® määritys on samanlainen molemmissa ryhmissä (83%), jossa suuntaus enemmän CTC että potilaalle tehdä pikemminkin kuin ihonalaisen mallissa. d. Edustus bioluminescent signaalin ja määrää CTC havaittujen kussakin 12 eläintä.

Keskustelu

Kasvain implantaatiokohdasta ja menetelmä vaikutuksia kasvainten kehittymiseen ja kinetiikka

vertailu SC, perkutaaninen potilaalle tehdä injektio ja kirurgiset potilaalle tehdä istutusta mallien kanssa aikovat tarkentaa seurata syövän etenemisen avulla bioluminesoivat kuvantamisen, kohtasimme rajoja näiden mallien, kuten elin ristiriita (SC), usein keuhkopussin kylvö (perkutaaninen potilaalle tehdä injektio) ja korkea leikkauksiin kuolleisuus (kirurginen potilaalle tehdä istutusta). Lisäksi mikään näiden mallien avulla luotettavaa seurantaa syövän etenemisen avulla bioluminescent kuvantaminen. Siksi olemme kehittäneet transpleural potilaalle tehdä injektio, jossa yhdistyvät alhainen Leikkauskuolleisuus, kohtuulliset siirteen toimiminen korko, niukkuus keuhkopussin kylvö, ja kasvaimen etenemistä metastasiaa joille syövän etenemistä voidaan seurata bioluminescent kuvantaminen. Lisäksi tämä tutkimus mahdollistaa tunnistamisen CTC hiirimalleissa NSCLC ensimmäistä kertaa tähän mennessä. Uskomme, että lisäksi toiminnallinen kuvantaminen, sovellus on prekliinisen in vivo vaiheessa CTC auttaa määrittämään biomarkkerit kasvaintaakkaa ja hoidon tehon myöhemmissä kliinisissä tutkimuksissa.

SC ksenografteissa mallit

SC ksenografteja ihmisen solulinjat on immuunivajaisiin eläimet ovat olleet kultakantaan prekliinisissä syövän kokeita vuosikymmeniä [14]. Tämä malli esitetään useita etuja, mukaan lukien tekninen toteutettavuus (puuttuminen anestesian helposti suorittaa injektio) ja kasvaimen saavutettavuus (suora mittaus SC kasvaimen mahdollistaa pituus- seuranta). Kuitenkin SC malleja rajoittavat ristiriita ksenografti alkuperä ja isäntä microenvironnement, kuten soluväliaineen, paracrine signaaleja, joten ne eivät malli Pagetin ”siemen ja maaperä” teoria [22]. Tämä ero on todettu vaikuttavan kasvaimen vasteen sytotoksisille aineille ja sädehoidon [23], [24] ja varmasti vaikuttaa vaste uusia syövän vastaisia ​​aineita. Tämä ero saattaa olla ratkaisevan tärkeää NSCLC, oli hypoksia ja neoangiogeneesiin on tärkeä rooli syövän etenemistä [25], ja niitä esiintyy eri tavalla SC ja rintaontelon ksenografteissa [26]. Viime, vain pieni osa SC mallien levittämiseksi ja edetä etäpesäkkeitä, puuttuminen etenemistä lokalisoitu etäpesäkkeitä kautta paikallista alueellista imusolmuke laajennus on siis merkittävä rajoitus SC malleja, kun taas suurin syy (2/3) syöpä kuolema on etäpesäkkeitä.

Nämä erot vaikuttavat merkittävästi koskien syövän etenemiseen, muutamia verenkierrossa olevia kasvainsoluja eikä etäpesäkkeitä meidän kokeissa osoittaa suuren raja huumeiden arviointi, jossa on kaksi riskiä. Ensimmäinen riski on työntää klinikalle molekyyli tai lääkeyhdistelmän vähän tai ei lainkaan tehoa. Esimerkiksi yhdistelmä kemoterapiaa ja EGFR: n estäjien on osoittautunut tehokkaaksi SC malleissa NSCLC [27], [28], mutta ei koskaan saavuttanut merkittävää kliinisissä kokeissa myös valitsematta NSCLC potilaat upon EGFR tila [3], [10] , [29]. Toinen riski on pysäyttää lupaavien huumeita. Esimerkiksi HIF-1-alfan antagonisti PX-478 ei osoittanut mitattavissa olevaa aktiivisuutta NSCLC SC ksenografteja, mutta esti etenemistä ja leviämistä potilaalle tehdä ihmisen pienisoluisen keuhkosyövän ja keuhkojen adenokarsinooma hiirissä, ja lopuksi testataan vaiheessa 1 tutkimuksessa [30].

Kaiken kaikkiaan nämä tiedot viittaavat siihen, että SC ksenografteissa eivät ole täysin riittäviä prekliinistä tutkimusta NSCLC, ja tulisi käyttää vain ja analysoidaan huolellisesti. Samanlaisia ​​päätelmiä on poimittu SCLC prekliinisissä huumetestejä [31].

Aiemmat potilaalle tehdä malleja

ottaa vaikutuksen elimeen spesifisyys ja kasvaimen mikro environnement huomioon, potilaalle tehdä malleja on vähitellen kehitetty viimeisten 20 vuoden aikana, ja lopullisena tavoitteena saada yhden intraparenchymatous keuhkojen kasvain, jotka jäljittelevät kliinisestä tilanteesta ja mahdollistavat pitkittäinen seurata. Suonensisäinen [32], intrabronkiaalinen [33] – [35] ja intrapleural hallinto [36], [37] keuhkosyövän solulinjoja johti keuhkopussin, paikallisesti edennyt tai useita synkroninen kasvaimia. Siksi nämä mallit voi olla mielenkiintoista tutkia näitä erityistilanteissa, mutta sitä ei voida ulottaa koskemaan lokalisoitu intrapulmonaalisesti NSCLC, jotka muodostavat suurimman osan pienisoluista keuhkosyöpää ja perusteella edelleen syövän etenemiseen.

geneettisesti hiiren malleissa (GEMMs) on myös kehitetty tutkia NSCLC hiirillä. Nämä eläimet ovat yleensä p53 muuntunut, suosimalla geneettinen epävakaus ja kasvainten muodostumista, ja kehittää keuhko- kasvainten vetämänä EGFR [38], KRAS [39], PIK3CA [40], BRAF [41] onkogeenisiä aktivointia tai läsnäolo EML4-ALK fuusio onkogeeni [42]. KRAS mutatoitunut keuhkosyöpä voidaan havaita hiirilajilla kuljettavat onkogeenisia alleelin KRAS jotka voidaan aktivoida vain spontaanin rekombinaatiotapahtuman koko eläimen [43], tai sen jälkeen KRAS satunnaista aktivoinnin kautta Cre-lox välittämä somaattinen rekombinaatio jälkeen adenovirus-välitteistä toimittamisen Cre-rekombinaasi keuhkon epiteeli [39]. Molemmat mallit voidaan kehittää KRAS-mutatoidun keuhkosyöpä lyhyessä ajassa. Nämä mallit ovat rajoitettu niiden etäisyys kliininen tilanne, koska mutaatioita yhden tai kahden onkogeenien tai tuumorisuppressorigeeneille ovat kaukana monivaiheinen etenemistä keuhkosyöpään esiintyvien taustalla krooninen tulehdus. Lisäksi GEMM malleja johtaa satojen ensisijainen NSCLC saman ajan niille on vaikea seurata ja mitata aikana esikliinisiä ja noninvasiivinen kuvantaminen. Huolimatta näistä haitoista, GEMM etuna tarkentaa määritelmää onkogeenien ja ottamaan immuunivasteen huomioon. Viimeaikaiset tutkimukset ovat raportoineet, että GEMM saattaa kiinnostaa tutkittaessa tehoa yhteisen NSCLC hoitojen [44].

Kirurginen kiinnittymisestä NSCLC fragmentti keuhkoihin immunopuutoksesta hiirille thoracotomy raportoitiin ensimmäisen kerran vuonna 1992 [21], [45], [46].