Krooninen sairaus

tiivistelmä

Monipuolinen NER geenit ja tupakointi ovat kaksi tärkeää riskitekijöitä virtsarakon syövän, mutta mekanismi NER proteiinia ja tupakointi syövän etenemisessä on kuitenkin edelleen epäselvä. Tässä raportissa, vertasimme ilmauksia NER geenien 79 virtsarakon syöpä kudoksia tai ilman toistumisen reaaliaikaisella PCR ja sitten analysoidaan monipuolinen NER geenien immunokemialla 219 virtsarakon syöpä kudosnäytteitä. Kliinisen tiedon, analysoimme kliininen arvo vaihteli NER geenien ja tupakoinnin 219 virtsarakon syöpien Kaplan-Meier menetelmällä ja Coxin suhteellista riskiregressioanalyysiä. Löysimme ilmauksia NER geenin XPF ja XPC olivat huomattavasti alhaisempi virtsarakon syövän kudoksiin toistuminen verrattuna ilman toistuminen mRNA tasolla. Myös potilailla, joilla on XPF ja XPC vika oli tilastollisesti merkitsevästi vähemmän mediaani uusiutumista vapaan eloonjäämisen ajan kuin ilman XPF ja XPC vika, ja tupakointi voi tehdä tätä eroa merkittävämpää. Tuloksemme viittaavat siihen, että XPF ja XPC ilme voi olla mahdollinen ennustava tekijä virtsarakon syövän, ja tupakointi voi vain vaikuttaa toistumisen virtsarakon syövän yhtenä tekijänä, vaan myös pahentaa tulokset XPF vika ja XPC vika.

Citation: Qiu J, Wang X, Meng X, Zheng Y, Li G, Ma J, et al. (2014) Heikennettyä NER-ilmaisujen XPF ja XPC Associated kanssa Tupakointi osallistuvat uusiutuminen virtsarakon syövän. PLoS ONE 9 (12): e115224. doi: 10,1371 /journal.pone.0115224

Editor: Xinbin Chen, University of California at Davis, Yhdysvallat

vastaanotettu 23. huhtikuuta 2014; Hyväksytty: 20 marraskuu 2014; Julkaistu: 23 joulukuu 2014

Copyright: © 2014 Qiu et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Data Saatavuus: Tällä kirjoittajat vahvistavat, että kaikki tiedot taustalla olevat havainnot ovat täysin saatavilla rajoituksetta. Kaikki asiaankuuluvat tiedot ovat paperin.

Rahoitus: Tutkimusta tukivat National Science Teknologia pilari ohjelma Kiina (nro 2011A322). Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

kasvaimet virtsarakon ovat toiseksi yleisin syövistä urologic kenttään. Virtsarakon syöpä on neljänneksi yleisin syöpä miehillä ja yhdeksäs yleisintä naisilla [1]. Potilaista noin 50% kokee toistuminen 2 vuoden jälkeen alustavan diagnoosin, ja 16-25% on toistuminen jälkeen endoskooppinen resektio [2]. Siksi usein toistumisen virtsarakon syöpä on merkittävä lääketieteellinen ongelma.

Tupakka tupakoinnin, koska vallitseva riskitekijä virtsarakon syöpä, vastaa noin puolessa tapauksista miehillä ja kolmas naisilla [3], [4]. Koska tupakan aiheuttamien karsinogeenien muodostavat usein tilaa vieviä DNA addukteja, pohja vaurioita, single-säikeen katkoksia ja double-säikeen katkoksia [5]. Lisäksi, koska luonteen virtsarakon tärkeä mitätön elimen kuvaamiseksi, missä urothelial solut altistuvat jatkuvasti paljon DNA: ta vaurioittavien reagenssit sisältyvät virtsaan. Näin ollen, DNA: n korjaukseen on tärkeä rooli estämään vahingollisia DNA-vaurion aiheuttama vaikutuksia, kuten mutaatio, keskittymisen ja kasvaimen esiintyminen [6].

On olemassa useita DNA: n korjautumista reittejä olemassa olevien ihmisen soluissa, ja kukin polku poistaa tehokkaasti erityisesti tyyppisiä DNA-vaurion [7]. Perustuen tyypin DNA-vaurioita, DNA korjaukseen reitit voidaan luokitella nukleotidin Leikkauskorjauksessa (NER), pohja Leikkauskorjauksessa, epäsuhta korjaus- ja rekombinaatiotapahtumia korjaus [8], [9]. NER polku on merkittävä DNA korjaukseen liittyvä reitti korjaamiseen vieviä DNA-vaurioita syntyy eniten ympäristötekijät säilyttää geneettinen eheys ja kehittymisen estämiseksi monien sairauksien [10], [11].

NER koostuu noin 30 proteiinien että poistaa spiraali vääristävän vaurioiden kautta neljä vaihetta: (a) tunnustaminen DNA; (B) avaaminen kupla ympärille vauriota; (C) viiltäminen DNA ylävirtaan ja alavirtaan vaurion endonukleaaseilla; ja (d) DNA resynthesis ja ligaatiota [12], [13]. XPA G (xeroderma pigmentosum ryhmiin A-G), ERCC1 (Leikkauskorjauksessa cross komplementoinnin konsernista1), RPA1, RPA2 (replikointi proteiini A1, replikointi proteiini A2) ovat tärkeimmät proteiinit tämän reitin ja kaksi vahinkoja tunnustamista käsivarret NER polku: maailmanlaajuinen genomin korjaus (GGR) ja transkriptio-kytketty korjaus (TCR). GGR kattaa ei-koodaavan osia genomista, hiljainen geenit ja ei-kopioidut stand aktiivisen geenejä. TCR varmistaa, että transkriboitu nauha aktiivisten geenien korjataan korkeampi prioriteetti kuin muualla genomiin käyttämällä RNA-polymeraasi II leesion anturi. Kun vahinko on tunnustettu kautta yksi näistä prosesseista, loput korjaus prosessi seuraa yhtenevä reitin [14], [15].

Tässä tutkimuksessa tutkimme mRNA ilmentymistä 9 geenien (XPB kohteeseen XPG, ERCC1, RPA1, RPA2) mukana NER väylän virtsarakon syövän kudoksissa /ilman toistumisen, verrattuna normaaliin virtsarakon syöpä kudosta. Potilaat uusiutumatta 2 vuodessa sisältyivät ei-uusiutumisen ryhmä ja potilaat, joiden tauti uusiutui 2 vuodessa toiminut uusiutumisen ryhmään. Heidän kasvain näytteet resekoitu ensimmäisellä toiminnassa tutkittiin. Sitten yllä mainittujen geenien merkittävästi erilaisia ​​mRNA: n analysoitiin immunohistokemiallista menetelmää (219 potilailla, joilla on virtsarakon syöpä) ja korrelaatio näiden geenien ja toistumisen virtsarakon syöpä määritettiin.

Koska tupakointi on hallitseva riskitekijä virtsarakon syövän, olemme analysoineet kliininen arvo vaihteli NER geenien ja tupakoinnin 219 virtsarakon syöpien kliinisen datan Kaplan-Meier menetelmällä ja Coxin suhteellista riskiregressioanalyysiä.

Materiaalit ja menetelmät

2,1 Ethics lausunto

kaikki tutkimussuunnitelmassa hyväksyi etiikka hallituksen Bethune International Peace sairaala ja Xinqiao sairaalan kolmannessa Military Medical University ja kaikki osallistujat kirjallinen lupa.

2.2 Tutkittavat

tutkimus suunniteltiin kaksi erillistä sarjaa.

ensimmäinen mukana 79 potilasta, joille tehtiin virtsaputkeen tai osittainen cystectomy (keski-ikä 62,4 ± 12 vuotta 52 miestä ja 27 naista) meidän osastolla vuodesta 2007 vuoteen 2011. kukaan 79 potilasta oli saanut syöpälääkkeiden ennen ensimmäistä cystectomy. Näistä 79 potilasta, 37 heistä ei ollut toistuminen vähintään 24 kuukauden kuluttua ensimmäisestä cystectomy ja olivat vielä elossa nyt, 29 niistä oli saanut toisen cystectomy ja 13 heistä oli kuollut (5 tapauksessa sai toisen cystectomy ja 8 tapausta ei). Tuumorinäytteet Kaikkien kirurgisten potilaiden kerättiin ja pidettiin asianmukaisesti. Potilaat uusiutumatta 2 vuodessa sisältyivät ei-uusiutumisen ryhmä ja potilaat, joiden tauti uusiutui 2 vuodessa toiminut uusiutumisen ryhmään. Heidän kasvain näytteet resekoitu ensimmäisellä toiminnassa tutkittiin. Näytteet jäädytettiin mahdollisimman varhaisessa ajan kuluttua resektion.

Toinen mukana 219 potilasta, jotka eivät olleet samat kuin 79 potilasta yllä. Parafiinien upotetut kudoksissa virtsarakon papillaarisen urothelial karsinooma kerättiin potilailta, joille tehtiin höyläysleikkaus virtsarakkokasvain meidän osastolla vuodesta 2002 vuoteen 2007. kudoksiin, mukaan WHO: n uusi luokitus, jaettiin patologisesti ja papillaarinen urothelial kasvain alhainen pahanlaatuista (PUNLMP; 58 tapausta), matala-asteista papillaarinen urothelial karsinooma (93 tapausta) ja korkea-asteen papillaarinen karsinooma (68 tapausta). Potilaat uusiutumatta 36 kuukauden aikana sisältyvät ei-uusiutumisen ryhmä ja potilaiden toistumisen 36 kuukautta toiminut uusiutumisen group.The ekspressiotasot NER geenien virtsarakon syövän kudoksissa näistä potilaista analysoitiin immunohistokemiallisesti menetelmällä.

2.3 RNA ja cDNA-synteesi

Kasvainten fragmentit homogenisoitiin RNA lyysipuskuria jäissä Ultra-Turrax ja RNA puhdistettiin käyttämällä SV Yhteensä RNA Purification Kit. Retro-transkriptio cDNA tehtiin käyttäen suuren kapasiteetin cDNA Archive Kit mukaisesti valmistajan ehdotukset.

2.4 Reaaliaikainen PCR

Suhteellinen geenin ilmentyminen mitattiin kolmena kappaleena ja normalisoitiin

β

aktiini (ACt) käyttäen TaqMan-geenin ilmentymisen määrityksissä ja 7500 reaaliaikainen PCR-järjestelmä seuraavista geenitranskriptien: XPB (Hs0554450_ml), XPC (Hs01104206_m1), XPD (Hs00361161), XPE (Hs00172018_ml), XPF (Hs00193342), XPG (Hs00164482), ERCC1 (Hs01012161), RPA1 (Hs00161419_m1), RPA2 (Hs00358315_m1). Varmistaakseen thatâ-aktiini itse ei muutu eri näytteiden suhde OFA-aktiini toiseen viite GAPDH [16], mitattiin.

2.5 immunohistokemia

Kudosleikkeet 5 pm poistettiin parafiini, niihin lisätään porrastettu alkoholeja, ja käsitellään käyttäen streptavidiini immunoperoksidaasimenetelmällä. Lyhyesti, leikkeitä toimitettiin antigeenin noudettavaksi mikroaaltouuni hoito 10 min 0,01 mol /l sitraatti- puskuria (pH 6,0). Objektilasit jälkeen inkuboitiin 10% normaalin seerumin 30 min, minkä jälkeen inkuboitiin yön yli 4 ° C: ssa kanssa sopivasti laimennettua primaarista vasta-ainetta. Hiiret anti-humaani monoklonaalinen vasta-aine (XPC, XPF): tä käytettiin 1:100 laimennus. Jälkeen primaarisessa vasta-aineessa, näytteitä inkuboitiin biotinyloidun anti-hiirillä tai anti-kaniini-immunoglobuliinien 15 minuuttia 37 ° C: ssa, minkä jälkeen streptavidiinin peroksidaasi komplekseja 15 minuuttia 37 ° C: ssa. 3,3′-diaminobentsidiiniä käytettiin Kromogeenin ja hematoksyliinillä käytettiin ydin- vastavärinä.

immunohistokemiallinen arviointi tehtiin vähintään kaksi riippumatonta tarkkailijaa sijoittuneita arvioitu prosenttiosuus kasvainsolujen osoittaa tumavärjäystä riippumatta signaalin vahvuus. Tulokset maalin urothelial carcinoma vaurioita arvioimalla prosenttiosuus kasvainsolujen havaita karakteristisia tumavärjäystä. Mielivaltaisesti määritelty 10% raja otettiin luokitella TCC tiedot kategorisen ryhmiin (positiiviset versus negatiiviset).

2.6 Tilastollinen

Tilastollinen analyysi tehtiin SPSS 13.0. Suhteellinen geenin ilmentymistä laskettiin 2

-ΔCT, ja parittomat kaksisuuntainen t testejä käytettiin tunnistamaan merkittävästi muuttunut ilmaisut toistuvat syövän kudoksissa verrattuna kertaluonteisia syöpäkudoksessa. Valmiussuunnitelma pöytä tuottamista varten on chi-neliö tai Fisherin tarkka todennäköisyys testi immunohistokemiaa tietoja. Toistumisen todennäköisyys laskettiin Kaplan-Meier menetelmällä tilastollisia eroja arvioitiin log rank-testi. Suhteellinen riski toistumisen virtsarakon syövän arvioitiin Monimuuttuja Coxin suhteellisen riskin malliin. Kaikkien tilastolliset testit, p 0,05 pidettiin merkittävänä.

Tulokset

3.1 NER geenejä ja uusiutumisen virtsarakon syövän

Täsmennetään korrelaatio NER mekanismi ja virtsarakon syöpä relapsivaihe, ekspressiotasot NER geenejä, mukaan lukien XPB ja XPG, ERCC1, RPA1 ja RPA2 syövän kudoksissa 79 virtsarakon syöpä määritettiin reaaliaikaisella PCR: llä. Näillä 79 potilaalla, 37 potilaalla ei ollut uusiutunut 24 kuukautta, ja nämä sisällytettiin kuin uusiutumisen ryhmä; 29 potilaalla oli uusiutuivat 24 kuukautta ja sisällytettiin uusiutumisen ryhmä; ja toinen 13 potilasta kuoli ja kuuluivat kuolemaan ryhmässä. Tutkimustulokset osoittivat ekspressiotasot XPC ja XPF vähensi merkittävästi toistumisen ryhmässä ja kuoleman ryhmässä verrattuna ei-uusiutumisen ryhmä (Fig. 1 ja taulukko 1). Kuitenkin XPB, XPD, XPe, XPG, ERCC1, RPA1 ja RPA2 ei muuttunut merkittävästi. Verrattuna toistumisen ryhmä, ekspressiotasot XPC ja XPF olivat huomattavasti alhaisemmat kuoleman ryhmä; mutta se ei ollut tilastollinen merkitystä.

NER geenien transkriptio havaittiin reaaliaikaisella kvantitatiivisella RT-PCR virtsarakon syöpää kolmeen alaryhmään: Non-uusiutuminen ryhmän potilaat, joilla ei ole toistumisen 2 vuodessa ; Toistuminen Group, potilaat, joilla oli toistumisen 2 vuoden; Dead-ryhmän potilaista, jotka olivat kuolleet leikkauksen jälkeen kahden vuoden kuluessa. Taitteen Muutos oli normalisoidaan GAPDH ja sitten kaikkien geenien verrattuna ilmauksia XPC toistumiseen Group (+ signaali). *, P 0,01 verrattuna the.Non-uusiutumisen ryhmä.

3.2 ekspressiotasot XPF ja XPC ja patologian virtsarakon syövän

Tutkiakseen suhteen välillä XPF, XPC ja kehittää virtsarakon syöpä, välinen yhteys ekspressiotasot XPF ja XPC ja patologian virtsarakon syöpä analysoitiin. Todettiin, että osuudet XPF (-) ja XPC (-) oli 54,4% ja 50,0% vuonna korkealuokkaisesta papillaarinen syöpäkudoksessa, 39,7% ja 37,9% vuonna PUNLMP syövän kudoksissa ja 49,5% ja 45,2% vuonna huono laatu papillaarinen syöpä kudosten (taulukko 2 ja kuvio. 2). Tulosten tilastollisen analyysin immunohistokemia tiedot osoittivat, että osuudet XPF (-) ja XPC (-) olivat merkittävästi korkeammat korkealaatuista papillaarinen syöpä kudoksiin kuin PUNLMP syövän kudoksissa (P 0,05). Tilastollista eroa ei havaittu välinen PUNLMP ja huonolaatuisen kasvaimia (P 0,05). Lisäksi osuudet XPF ja XPC kanssa samanaikaisesti vähennetään ilme olivat merkittävästi korkeammat korkealaatuista papillaarinen syöpä kudoksiin kuin PUNLMP syövän kudoksissa (P 0,05).

(a) ilmaisuja XPF ja piirtoheitinkalvosovitin normaalissa virtsarakossa kudosta. (B) positiivinen XPF ilmaisun ja positiivinen XPC ilme. (C) Positiivinen XPF ilmaisun ja negatiiviset XPC ilme. (D) Negatiivinen XPF ilmaisun ja positiivinen XPC ilme. (E) Negatiiviset XPF ilmaisun ja negatiivinen XPC ilme.

3,3 ilmentäminen NER geenien ja tupakoinnin

Yhteys ekspressiotasot NER geenien ja tupakoinnin 79 virtsarakon syöpäpotilailla analysoitiin. Tupakoinnin tilanne oli jaettu 4 tasoa: koskaan tupakoineet, 20 pack-vuotta, 20-50 pack-vuotiaat ja 50 pack-vuotta. Tutkimustulokset osoittivat, että vaikka mitään tilastoa merkitystä olemassa joukossa 4 tupakointi ryhmien oli vielä selvä trendi. Ilmaisu tasot XPF ja XPC olivat hieman alhaisemmat kasvainkudoksessa raskaiden tupakoitsijoita kuin niissä lievästi tupakoinnin potilaista (Fig. 3).

ilmauksia XPF ja XPC 79 virtsarakon syövän 4 tupakoinnin alaryhmiä. Karkea kiinteä viiva edustaa keskiarvoa CT arvo ja virhepalkkien edustaa keskivirheen.

Tutkimaan edelleen yhteys ilmaus NER geenien ja tupakoinnin ekspressiotasot XPF ja XPC 219 virtsarakon syöpäpotilaiden ja heidän tupakoinnin tilanteissa analysoitiin. Löysimme eroa osuuksissa XPF (-) ja XPC (-) joukossa 20 pack-vuotta ryhmä, 20-50 pack-vuotiaat ryhmässä ja koskaan tupakoineet ryhmä. Mielenkiintoista, osuudet XPF (-) ja XPC (-) on 50 pack-vuotiaat ryhmässä olivat korkeampia kuin koskaan savustettu ryhmä ja 20 pack-vuotta ryhmä (taulukko 2 ja taulukko 3).

3,4 ilmentäminen XPF ja XPC virtsarakon syövän uusiutumiseen

Jotta voitaisiin edelleen tutkia suhdetta alennetaan ekspressiotasot XPF ja XPC ja kehittää virtsarakon syöpä, välinen yhteys ekspressiotasot XPF ja XPC virtsarakon syövän uusiutumisen analysoitiin. Kuva. 4 esittää Kaplan-Meier käyrät kahden geenin ja tupakointi kanssa säätää P-arvot. Huomasimme, että potilailla, joilla on alhainen XPF ja XPC oli korkeampi toistumisen määrä kuin ne, joilla on korkea XPF ja XPC (Fig. 4a ja 4b P 0,05), lisäksi tämä ero oli selvempi ryhmässä XPF (- ) XPC (-) (Fig. 4c). Niistä ennusteeseen viittaavia muuttujia, kasvaimen ja vaihe johti merkittäviksi ennustetekijöiksi at yhden muuttujan analyysi (taulukko 3). Monimuuttuja analyysia Cox tehtiin, mukaan lukien kaikki muuttujat merkitsevästi yhteydessä eloonjääminen yksiulotteista ja osoitti, että taudin vaiheesta oli ainoa itsenäinen tekijä ennustettaessa potilaiden tulokset (taulukko 4).

Kaplan-Meier käyrät käyttäen log rank testit uusiutumisen virtsarakon syöpä potilailla. (A) toistumisen virtsarakon syövän potilaille, joilla XPF (-) ja XPF (+); (B) toistumisen virtsarakon syövän potilaille, joilla on XPC (-) ja XPC (+); (C) toistumisen virtsarakon syövän potilaille, joilla XPF (-) yhdistettynä XPC (-) ja XPF (+) yhdistettynä XPC (+), samanaikaisuutta; (D) toistuminen virtsarakon syöpä potilailla, joilla ei koskaan savustettu ja koskaan tupakoinut.

Cum, kumulatiivinen

.

3.5 tupakoinnista ja virtsarakon syövän uusiutumiseen

Se oli vahvistettu, että tupakointi on yhteydessä virtsarakon syöpä [30] , ja huomasimme, että tupakointi oli myös liittyy toistumisen virtsarakon syöpä. Kuva. 4d esittää Kaplan-Meier -käyrät tupakoinnin aseman kanssa säätää P-arvot, potilaat, joilla oli aikaisempi tupakointi oli korkeampi toistumisen määrä kuin potilailla, jotka eivät ole tupakoinnin historiaa. Lisäksi olemme havainneet, että tupakointi ei ole erillistä tekijä virtsarakon syövän, se voi toimia XPF ja XPC geenien samanaikaisesti, erityisesti potilailla, joilla on alhainen XPF (Fig. 5 a ja c) ja XPC (Fig. 5 b ja d). Lisäksi määrä tupakoinnin potilaan liittyi toistumisen virtsarakon syöpä (Fig. 5), erityisesti ryhmä XPF (-) ja XPC (-) (Fig. 5 e ja f).

Kaplan-Meier käyrät käyttäen log rank testit uusiutumisen virtsarakon syöpä potilailla. (A) toistumisen virtsarakon syövän XPF (-) ryhmän eri asemaan tupakoinnin (koskaan tupakoineet, 20 pack-vuotta, 20-50 pack-vuotiaat ja 50 pack-vuotiaat); (B) toistumisen virtsarakon syövän XPC (-) ryhmän erilaisine asema tupakoinnin; (C) toistumisen virtsarakon syövän XPF (+) ryhmä eri asemaan tupakoinnin; (D) toistuminen virtsarakon syöpään XPC (+) ryhmä eri asemaan tupakoinnin; (E) toistumisen virtsarakon syövän potilaiden XPF (-) kanssa ei koskaan savustettu ja XPF (-) ja savustettu yli 50 pack-vuotta (f) toistumisen virtsarakon syövän potilaiden XPC (-) kanssa koskaan tupakoineet ja XPC (-) ja savustettu yli 50 pack-vuotta (g) toistumisen virtsarakon syövän potilaiden XPF (+), jossa ei koskaan savustettu ja XPF (+) ja savustettu yli 50 pack-vuotta; (H) toistumisen virtsarakon syövän potilaiden XPC (+), jossa ei koskaan savustettu ja XPC (+) ja savustettu yli 50 pack-vuotta.

Keskustelu

Virtsarakon syöpä uusiutumisen on kliinisesti yleinen ongelma. Tässä tutkimuksessa selvitimme yhteys virtsarakon syövän uusiutumisen ja NER geenejä. Tutkimuksen tulokset viittaavat siihen, että kaksi NER geenejä, XPF ja XPC, olivat mukana uusiutumisen virtsarakon syöpään. Lisäksi olemme myös havainneet, että koska ulkoisen tekijän, tupakointi ei mukana vain uusiutumisen virtsarakon syövän itsenäisesti, mutta myös yhdistettynä NER geenien pelata pahanlaatuinen rooli.

XPF, joka tunnetaan myös Leikkauskorjauksessa crosscomplementing ryhmä 4 (ERCC4), on kriittisesti mukana NER koulutusjakson [17]. XPF hasan tärkeä rooli rekombinaatio korjaus, yhteensopimattomuuden korjaus- ja mahdollisesti immunoglobuliini luokanmuutoksen [18], [19]. XPF sisältää katalyyttisen domeenin nukleaasia ja ERCC1 tarvitaan DNA: ta sitova ja vakauttamiseen XPF. ERCC1-XPF kompleksi voisi poistaa 3 ’single-standed läpät DNA loppuu ja lohkaisee 5’ puolelle kupla NER valmisteveron kohti vaurio [20]. Löysimme XPF merkitsevästi vähemmän tuumorikudoksissa uusiutunutta virtsarakon syöpä ja tulokset patologian vertailu osoitti, että mahdollisuus uusiutumisen 3 vuoden kuluessa oli suurempi virtsarakon syövän potilaille, joilla XPF (-) kuin niille, joilla on XPF (+). Se osoitti selvästi, että XPF oli mukana uusiutumisen virtsarakon syövän, joka oli yhdenmukainen tulosten Z Zhang et al [21]. He havaitsivat, että polymorfismin XPF-357 site läheisesti korreloi ilmaus XPF ja edelleen vaikuttanut uusiutumisen virtsarakon syöpään. Ne eivät kuitenkaan olleet tutkinut eri ekspressiotasoja XPF kasvainkudoksissa uusiutunutta ja ei-uusiutunut virtsarakon syöpä ja ei ollut saatu selkeää johtopäätöstä. Meillä ei vain tutkittu eri ekspressiotasoja XPF kasvainkudoksissa uusiutunutta ja ei-uusiutunut virtsarakon syöpä, mutta myös tutkittu yhteys osuus XPF (-) ja virtsarakon patologinen luokittelu. Löysimme osuus XPF (-) oli merkitsevästi korkeampi korkealaatuista papillaarinen syöpä kudoksiin kuin PUNLMP syövän kudoksissa ja huono laatu papillaarinen syöpä kudoksiin, mikä viittaa XPF pelataan paitsi tärkeä rooli uusiutumisen virtsarakon syövän vaan myös suojaava rooli kehittäminen virtsarakon syöpä. Alentuneesta XPF on mukana kehittämässä virtsarakon syöpään.

XPC on DNA-vaurion tunnustamista proteiini, jolla on tärkeä rooli NER prosessissa. XPC proteiini sitoutuu tiukasti paikoilleen HR23B proteiinin muodostamaan stabiilin XPC-HR23B monimutkainen. Tutkimukset osoittavat, että XPC-HR23B kompleksi on ensimmäinen proteiini komponentti, joka tunnistaa ja sitoutuu vaurioitunut sivustoja [22]. XPC proteiini voi myös olla tärkeä rooli muiden DNA-vaurioita aiheuttama soluvasteita, mukaan lukien solusyklin Checkpoint sääntelyä ja apoptoosin [23] – [25]. XPC vikoja on havaittu monissa syöpätyypeissä, mukaan lukien keuhko- ja ihosyövän [26], [27]. XPC knock-out siirtogeenisiä hiiriä tutkimukset paljastavat yleisyys on alttius monille syöpätyypit [28]. Vaikka useat tutkimukset ovat osoittaneet läheiset suhteet XPC ja kehittämisen virtsarakon syövän, ei ole vielä näyttöä siitä, että XPC osallistuu uusiutumisen virtsarakon syöpään.

Löysimme XPC heikennettiin ilmaistu uusiutunut virtsarakon syöpään kuin ei uusiutunut virtsarakon syöpä. Se viittaa siihen, että alennettu XPC voi olla mukana uusiutumisen virtsarakon syöpään. Vahvista Tämän hypoteesin, analysoimme välinen yhteys ekspressiotasot XPC kasvainkudoksissa 219 virtsarakon syövän potilaiden ja heidän ennustetta ja löysi XPC (-) potilailla oli merkittävästi korkeampi taudin uusiutumista. Lisäksi osuus XPC (-) korreloi patologisten luokittelu virtsarakon syöpä. Tämä on sopusoinnussa tulosten Chen et al: XPC tappio oli läheisessä ja mukana kehittämässä virtsarakon syöpään [29].

Vaikka alhainen ilmaus XPF ja XPC oli mukana uusiutumisen virtsarakon syöpä, kattava analyysissä havaittiin, että ei ollut synerginen parannusefektin välillä alennettu ilmaus XPF ja XPC. Tapaus-ohjattu analyysi osoitti, että taudin uusiutumista potilaiden kanssa samanaikaisesti vähennetään ilmaus XPF ja XPC ollut merkittävästi korkeampi kuin potilailla, joiden ainoa alennettu ilmaus XPF tai XPC. Tämä viittaa siihen, että XPF ja XPC ovat molemmat liittyvät uusiutumisen virtsarakon syövän ja mukana useissa soluvasteen reittejä. Koska varten korvata virtsarakon syövän, XPF ja XPC pelata niiden roolit samalla mekanismilla, NER mekanismi, mutta ei eri mekanismeja.

Useat tutkimukset ovat osoittaneet, että tupakoinnilla on pahanlaatuinen rooli kehitettäessä virtsarakon syöpä [30] – [32]. Tutkimuksemme vahvistaa lisäksi tämän päätelmän. Huolellisesti analysoimalla tupakointistatus, ilmaus NER geenien ja uusiutumisen virtsarakon syövän, olemme johdettu tulokseen, että tupakointi ei ole mukana vain uusiutumisen virtsarakon syövän itsenäisesti, mutta myös yhdistyy NER geenien kuten XPF ja XPC pelata pahanlaatuinen rooli samanaikaisesti, mikä edelleen pahentaa pahanlaatuinen tuloksia virtsarakon syöpään. Aiemmat tutkimukset ehdotti, että tupakointi saattaa vaikuttaa uusiutumisen virtsarakon syövän kautta NER mekanismi. Kuitenkin meidän tutkimus osoitti tupakointi ei vaikuta vain suojaavaa roolia NER mekanismi virtsarakon syövän, mutta myös luultavasti vaikuttanut muita suojamekanismeja kehittämisen aikana virtsarakon syöpään.

Huolimatta Tutkimuksemme osoittaa, että XPF, XPC ja tupakointi olivat tiiviisti sidoksissa uusiutumisen virtsarakon syövän, syy alhaisen ilmentymisen XPF ja XPC oli edelleen epäselvä. Sen lisäksi, että polymorfismi XPF ja XPC promoottorit voivat vaikuttaa näiden geenien ilmentymistä, mahdollisesti joitakin tuntemattomia mekanismeja, jotka vaikuttavat transkription ja translaation XPF ja XPC geenit, vaikka vaikuttavat niiden proteiinien hajoaminen ja proteiinin tehokkuus, jne perusteellisesti valaista biologinen mekanismi virtsarakon syövän uusiutumisen, näillä aloilla tarvitaan lisätutkimuksia. Kuitenkin se, että XPF ja XPC osallistuvat uusiutumisen virtsarakon syövän tuo uuden luotettavan vihjeen lisätutkimuksia mekanismia virtsarakon syövän uusiutumisen.

Kiitokset

Tekijät haluavat kiitos Xinhong Zhao ja Dr. Junlei Zhang (Department of Microbiology) heidän erinomaisesta teknisestä avusta ja kriittinen lukeminen ja arvokkaita kommentteja käsikirjoituksen.