Krooninen sairaus

tiivistelmä

Etäpesäke-liittynyt paksusuolensyöpä 1 (MACC1) on äskettäin tunnistettu novel riippumaton prognostinen indikaattori etäpesäkkeiden esiintyminen, kokonaiselossaoloaika ja syöpää vapaa potilaiden elinaikaa paksusuolen syövän ja muiden kiinteiden kasvainten. Tässä tutkimuksessa selvitimme roolia MACC1 kehittämisessä ja etenemisen munuaisaltaan karsinooma, eräänlaista ylemmän suolikanavan urothelial karsinoomat. MACC1-proteiinin on havaittu sytoplasmassa sekä tumassa siirtymäkauden epiteelisolujen normaalin munuaisaltaan immunohistokemiallisessa (IHC) määritykset. Quantitative IHC tutkimukset paljastivat, että MACC1 epänormaali runsautta syöpäkudokset saattaa merkitä biologinen indikaattori kliinisesti viittaavia kasvaimen pahanlaatuisuuden munuaisaltaan. Lisäksi tutkimus yhdistyksen MACC1 proteiinin tasoilla kliinis parametreja Tässä tutkimuksessa on ehdottanut korrelaatio MACC1 ilmaisun kanssa kasvaimeen imusolmukkeisiin etäpesäke vaiheessa ja histopatologisten arvosana munuaisten lantion syöpä, joilla on kohonnut MACC1 proteiinin tasot usein liittyy korkeampi aggressiivisuus taudin. Lisäksi sekä tautivapaan elinajan ja kokonaiselinaika potilaiden korkean MACC1 ilmaisua ryhmässä olivat merkittävästi alhaisemmat kuin alhaisen ilmentymisen ryhmässä. Monimuuttujamenetelmin kanssa Coxin suhteellisen vaarat malli ehdotti, että MACC1 on todellakin itsenäinen prognostinen indikaattori kokonaiselinaika ja syöpää vapaa potilaiden elinaikaa munuaisaltaan karsinooma. Siten MACC1 voi edustaa lupaavaa ennustetekijöiden biomarkkereiden ehdokas, sekä mahdollisena terapeuttisena kohteena tähän sairauteen.

Citation: Hu H, Tian D, Chen T, Han R, Sun Y, Wu C (2014) etäpesäke-Associated Colon Cancer 1 on uusi Survival-Related biomarkkeri ihmispotilailla munuaisaltaan syöpä. PLoS ONE 9 (6): e100161. doi: 10,1371 /journal.pone.0100161

Editor: William B. Coleman, University of North Carolina School of Medicine, Yhdysvallat

vastaanotettu 4 helmikuuta 2014; Hyväksytty: 22 toukokuu 2014; Julkaistu: 20 kesäkuu 2014

Copyright: © 2014 Hu et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tämä työ tukivat apurahan National Natural Science Foundation of China (Grant Number: 30700834), ja toinen avustusta Natural Science Foundation of Tianjin (Grant Number: 12ZCDZSY16600). Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Koska pahanlaatuinen kasvain johtuvat siirtymäkauden epiteelin (erittäin joustava epiteelikudoksen koostuvat useista kerroksista epiteelisolujen että linja sisäpinta virtsaelimet), munuaisten siirtymäkauden solu syöpä, tai munuaisten urothelial karsinooma (UC ) edustaa neljänneksi yleisin syöpä maailmassa [1]. Esiintyvät munuaisaltaan ja virtsanjohtimen, ylempi suolikanavan urothelial karsinooma (UTUC) on sairaus ensisijaisesti vaikuttaa ihmisten vuotiaita 50 ja 75. Pathologically, UTUC on yleensä enemmän invasiivisia kuin virtsarakon UC (60% vs. 15%) ja on usein liittyy korkeampi pahanlaatuisuuteen [2], [3], [4]. UTUC at munuaisaltaan tai munuaisaltaan karsinooma (RPC) osuus on noin 5%: sta 6% kaikista munuaisten UCS ja ovat vaikea diagnosoida kuin virtsarakon UC. Itse asiassa 5 vuoden pysyvyys RPC potilaista on alhaisempi kuin todettu virtsarakon UC kuten etäpesäkkeiden osuus on noin 70% syöpään erityisiä kuoleman RPC [5]. Tunnetusti vaikea kliiniseen diagnoosiin, UTUC edustaa valtava haaste luonnehdinta on radiologisen kuvantamisen sekä endoskooppiset visualisointi ja koepala. Tällä hetkellä viisi tekijää, jotka ovat useimmin arvioitiin muuttujien urothelial karsinooma riski kerrostumista ennen lopullista hoitoa: ikä, kasvaimen arkkitehtuuri, sytologia, koepala kasvaimen ja läsnäolo hydronephrosisand. Vaikka patologinen ennustavaa tekijät, kuten kasvain vaiheessa, laatu, karsinooma in situ, lymphovascular invaasio, ja imusolmukkeesta hyökkäys voi olla tarkempi kuin muut kliiniset tekijät ennustaa taudin uusiutumisen ja potilaan eloonjääminen [6], tällaisia ​​tietoja ei yleensä ole saatavilla ennen kuin potilas on kärsinyt merkittävä menetys munuaisten varauksesta ja on vähemmän todennäköisesti pystyy kestämään aggressiivisia hoitoja.

viimeisen 5 vuoden aikana, tutkijat ovat saaneet hyvän käsityksen ja kliininen käyttäytyminen UTUC. Huomattavaa edistystä on tapahtunut tunnistamiseksi molekyylitason ennustetekijöitä indikaattoreita potilaille, joilla urothelial karsinooma ja saattaa lisätä riskiä ennustearvon. Signalointimolekyylien, jotka liittyvät solun prosessit, kuten angiogeneesi, solukuoleman, solun adheesiota, ja solujen lisääntyminen on tutkittu laajasti, koska mahdollisten prognostisten indikaattoreita kehittämiseen ja taudin etenemisen, kuten p53, EGFR, surviviini, Bcl-2: Ki-67, E-kadheriinin, hypoksia-indusoituva tekijä 1a (HF1A), telomeraasi mRNA komponentti, metalloproteinaaseja (MMP-2, MMP-9, TIMP1 ja TIMP-2), ja (katsaus [7], [ ,,,0],8]). Tunnistettu genominlaajuisia analyysissä differentiaalisesti ilmaistu geeni ihmisen paksusuolen syövän kudosten ja etäpesäkkeitä, etäpesäke-liittynyt paksusuolensyöpä 1 (MACC1) on ehdotettu itsenäisenä prognostinen indikaattori etäpesäkkeiden muodostumisen ja etäpesäkkeiden elinaika paksusuolen syöpä potilaiden [9]. Havaittu erilaisissa normaaleissa kudoksissa, kuten suolessa, mahassa, aivolisäkkeen, munuaisen, henkitorvi, haima, rintarauhasen, luuytimen, munasarjojen, keuhkojen, sydämen, maksan, ja B-lymfoblastit, MACC1 on runsaampaa kudoksiin aiheutuvien alkaen endodermissä (esim suolisto ja maha) kuin kudokset peräisin mesodermistä (esim munuainen, sydän) tai ectoderm (esim aivolisäkkeen ja maitorauhasen). Ymmärrettävästi MACC1 voisi olla rooli Endodermi johdettuja organogeneesin alkionkehityksen aikana. Alun perin löydettiin paksusuolen syöpä, MACC1 yli-ilmentyminen on osoitettu edistää kasvaimen proliferaatiota, invaasio ja metastaasi on laaja kirjo kiinteiden tuumorien, mukaan lukien maha-suolikanavan syöpien (esim paksusuolensyöpä [9], [10], mahasyöpä [11]), hepatosellulaarinen karsinooma [12], [13], osteosarkooma [14], gliooma [15], [16], keuhkosyöpä [17], [18], [19], ruokatorven [20], haiman [21], munasarjasyöpä [22] , kohdunkaulan ja rintasyövän [23] (katsaus [24]). Lisäksi tarkastelu MACC1 ekspressiotasoja kasvainkudoksissa erilaisten kliinisten vaiheissa on paljastanut, että korkein MACC1 ilmentymistaso on havaittu useammin pahanlaatuinen kasvain potilaiden kudosten, jotka usein osoittavat epäedullisempi kliinis ominaisuuksia, kuten parannettu imusolmuke etäpesäke ja metachronously kehittyi etäispesäkkeitä . Muissa tapauksissa, kuten harvoin metastasoituneen ihmisen gliooman, MACC1 geenin ilmentyminen on dramaattisesti säädelty kudoksissa korkeamman maligniteetin, mikä oireenmukaista taudin pahenemiseen [15]. Kohonnut MACC1 ilme on siten ehdotettu toimia riippumattomana prognostinen indikaattori syövän uusiutumiseen, mahdolliset paheneminen hyvänlaatuisesta osaksi pahanlaatuisia kasvaimia, tai tietyissä tilanteissa, puhkeamista etäpesäke. Lisäksi MACC1 on myös muodostunut ennakoiva indikaattori uusiutumista elinaikaa, ja kokonaiseloonjääminen (OS) syöpäpotilaiden useissa kvantitatiivisia tehdyissä tutkimuksissa erilaisia ​​kiinteitä kasvaimia (tarkistetaan [24]). Perustettiin uutena prognostinen indikaattori etäpesäke useilla kiinteitä kasvaimia, MACC1 on myös ehdotettu olevan kohde ehdokas terapeuttisten strategioiden kehittämisen varten interventioon kasvainprogression ja etäpesäkkeitä.

tämänhetkisiin tutkimuksessa selvitimme roolia MACC1 kehittämisessä ja etenemiseen ihmisen munuaisaltaan karsinooma. Olemme osoittaneet immunohistokemialliset ekspressiokuviota MACC1 proteiinin ihmisen munuaisaltaan karsinooma kudosnäytteiden sekä normaalissa munuaisaltaan. Lisäksi selvitimme korrelaatio MACC1 yli-ilmentymisen ja kliinis parametrit (kuten ikä, sukupuoli, kasvaimen solmu-etäpesäke (TNM) vaihe ja patologinen grade), sekä taudista vapaan eloonjäämisen (DFS) ja kokonaiseloonjääminen (OS) in potilailla, joilla on munuaisaltaan karsinooma. Lopuksi tutkimme myös käyttämällä yhden ja usean analysoidaan kelpoisuuden MACC1 uutena riippumaton prognostinen indikaattori munuaisaltaan syöpä.

Materiaalit ja menetelmät

Ethics selvitys, potilaiden ja kudosnäytteet

yhteensä 73 RPC potilasta rekrytoitiin tutkimuksen tammikuussa 2002 ja tammikuussa 2005. RPC potilasta osallistui tähän tutkimukseen sisältyi 52 urosta ja 21 naarasta. Keski-ikä oli 61,2 vuotta vaihteluväli 48-79 vuotta. Potilaille tehtiin radikaali nephroureterectomy täydellinen kliininen hakuhistoriatietuetta laitoksella Urologisessa Kirurgian toinen sairaalan Tianjin Medical University. Potilaat, jotka olivat kehittäneet etäpesäke ja saivat leikkauksen jälkeinen kemoterapiaa tai sädehoitoa ei otettu tutkimukseen. Normaalin kudoksen kohdalla tässä tutkimuksessa, olivat peräisin 32 vieressä olevaan ei-tuumori- munuaisaltaan epiteelikudosten (ANRPETs, vähintään 2 cm: n etäisyydellä kasvaimen reuna) ja 34 normaalia munuaisaltaan epiteelikudosten (NRPETs, urothelial kudosten munuaisten syöpäpotilailla, jotka ovat alle 3 cm halkaisijaltaan ehjät kudossolun napaisuus ja pidetään normaaleissa epiteelikudoksissa).

Kaikki diagnoosit RPC vahvistettiin ja edelleen luokiteltu leikkauksen jälkeen histopatologisen tutkimuksen seuraavat kriteerit 2004 Maailman terveysjärjestön luokitus. Kasvain solujen erilaistumista laadut luokiteltiin kriteerien mukaan vuoden 1997 Maailman terveysjärjestön luokitus. Kasvaimen kliinisessä vaiheessa määritettiin seitsemännen painoksen TNM luokittelu American sekakomitean Cancer. Kukin näyte oli vahvistettu formaliiniin, rutiininomaisesti käsitelty, ja upotettiin parafiiniin. Leikkauksen jälkeiset seurantatiedot saatiin kaikista potilaista, joiden seuranta-ajan mediaani 41,5 kk (vaihdellen 8-54 kuukautta). Tutkimus hyväksyi eettinen komitea Second sairaala, Tianjin Medical University, ja kirjallinen lupa käyttöön yksilöiden kustakin potilaan osallistuneista saatiin vastaavasti.

Kliiniset tiedonkeruun

Kaikki kliiniset tiedot olivat takautuvasti kerättyjen, käsitelty ja varastoitu kriteerien mukaisesti /asetukset on kuvattu edellä. Kliiniset muuttujat tallennetaan mukana sukupuoli, ikä, histologinen tyyppi, TNM ja Ydinteollisuudessa (taulukko 1). Follow-up tiedot kerättiin väliaikainen lääkärintarkastuksissa potilaista. Kunkin potilaan tautivapaan elinajan (DFS) tässä tutkimuksessa määritetään aikaväli, jona diagnoosi ensin toistuminen (mukaan lukien paikallisten tai alueellisten uusiutumisen ja systeeminen etäpesäke). Kokonaiselinaika (OS) määritellään väli päivämäärä leikkaus ja kuolinpäivä. Potilaat, jotka olivat elossa viime seurannassa sensuroitiin mennessä viimeisen käynnin klinikalle, ja potilaat, jotka kuolivat muista syistä kuin RPC sensuroitiin aikaan heidän kuolemaansa.

immunohistokemia (IHC) B

edustaja parafiiniblokit näytetään tyypillinen tumorous RPC kudoksia, ja normaaleissa kudoksissa, mukaan lukien ANRPETs ja NRPETs valittiin immunohistokemiallista värjäystä kun olemme tutkinut huolellisesti hematoksyliini- eosiinivärjäykset dioja kaikista kirurgisista näytteistä. Teimme IHC värjäys MACC1 kahden vaiheen peroksidaasiin konjugoitu polymeeri menetelmällä käyttäen Chemmate Envision Detection Kit. Lyhyesti, leikkeitä de-vahattu ksyleenillä ja nesteytyksestä luokiteltujen sarjojen läpi etanolia. Objektilasit alistettiin sitten lämmön epitooppisup- haku käyttämällä mikroaaltouunia 0,01 M sitraattipuskurissa (pH 6,0) 18 minuutin ajan ja jäähdytettiin 30 min ajan huoneenlämpötilassa. Levyjä inkuboitiin 3% vetyperoksidia 10 minuuttia inaktivoimaan endogeeninen peroksidaasi. Sitten leikkeitä inkuboitiin anti-MACC1-vasta-ainetta (hiiren polyklonaalisen Ig G, ab106579, 1:50 laimennettu, Abcam, Cambridge, UK), kuten primaaristen vasta-aineiden yön yli 4 ° C: ssa kostutetussa kammiossa. Jälkeen pestiin PBS: llä, leikkeitä inkuboitiin biotinyloidulla kaniinin anti-hiiri-immunoglobuliini (Dakopatts, Glostrup, Tanska) laimennettiin 1:200 30 minuuttia, mitä seurasi toinen 30 minuutin inkuboinnin peroksidaasikonjugoidulla streptavidiini (Dakopatts) laimennettiin 1: 300. Tämän jälkeen leikkeet saatettiin diaminobentsidiinillä ja vastavärjättiin hematoksyliinillä. Osiot ihmisen paksusuolen syöpä kudoksia sisällytettiin positiivisena kontrollina kussakin aikavälillä. Positiiviset kontrollit osoittivat selkeää positiivista värjäytymistä ja intensiteetti oli hyvin samankaltainen eri ajoja. Negatiivinen kontrolli suoritettiin ei-immuuni naudan seerumialbumiinia korvaavan ensisijaisen vasta-aineen samana pitoisuutena kussakin värjäys aikavälillä. Leikkeitä pestiin kolme kertaa PBS: llä kunkin vaiheen välissä.

kvantitatiivinen arviointi on immunohistokemiallisella värjäyksellä

immunohistokemiallisella värjäyksellä MACC1 analysoitiin kvantitatiivisesti visuaalinen arviointi ja Image Pro-Plus tässä tutkimuksessa. Silmämääräinen arviointi pisteytystä MACC1 ekspressiotasoja suoritettiin yksi patologi seurasi uudelleentarkastelu /uudelleenvahvistaminen toisesta patologi. Osuus kasvainsolujen pisteytettiin seuraavasti: 0 (ei positiivisia kasvainsoluja), 1 ( 10% positiivisia kasvainsoluja), 2 (10-50% positiivisia kasvainsoluja), ja 3 ( 50% positiivisia kasvainsoluja ). Värjäytymisen intensiteetti oli porrastettu seuraavin perustein: 0 (ei värjäystä), 1 (heikko värjäystä = vaaleankeltainen), 2 (kohtalainen värjäytyminen = keltainen ruskea) ja 3 (voimakas värjäytyminen = ruskea). Värjäytyminen indeksi laskettiin kertomalla värjäytymisen intensiteetti pisteet ja osuus positiivisia kasvainsoluja. Käyttämällä tätä arviointimenetelmää, arvioimme MACC1 proteiinin ekspressiotasot hyvänlaatuista munuaisaltaan epiteelin ja pahanlaatuisen vaurioita määrittämällä värjäys indeksin, jolloin tulokset kuin 0, 1, 2, 3, 4, 6 tai 9. Tilastoinnissa IHC tulokset jaettiin kahteen ryhmään, heikkoa ilmentymistä ryhmä (≤4) ja korkea ilmaisun ryhmä (≥6).

Mitä Image Pro-Plus pisteytysjärjestelmä, MACC1 ilmentyminen arvioitiin kvantitatiivisesti käyttäen Image Pro Plus 6.0 analyysi järjestelmä (Media Cybernetics, Silver Spring, MD) otettiin Xavier ja tulokset tarkasteltava uudelleen vielä kaksi patologit itsenäisesti ensimmäisen kierroksen jälkeen analyysin. Lyhyesti, 10 digitaalisia kuvia 1360 x 1024 pikselin resoluutio ja 400 kertainen suurennus vangittiin DP 70 CCD-kamera (Olympus, Japani) kytkettynä Olympus AX-70 mikroskooppia (Olympus). Kvantitointi alueen värjätään ja integroitu optinen tiheys (IOD) on MACC1 kussakin kuvassa määritettiin jälkikäteen ja alistettiin tarkempaa analysointia. Keskimääräinen optinen tiheys (AOD = IOD /Area) käytettiin tässä tutkimuksessa tilastollisiin analyyseihin.

Helpottaakseen tilastollista analyysiä Eloonjääntitulokset, koko kohortin potilaista jaettiin kahteen ryhmään, high MACC1 ilmaisu ryhmä (60,6 %) ja alhainen MACC1 ilmaisun ryhmässä (39,4%), vastaavasti.

tilastollinen

tulokset ilmaistaan ​​keskiarvona ± keskihajonta. Vertailu kahden ryhmän välillä suoritettiin käyttäen itsenäinen näyte

t

testiä tai nonparametric 2-tailed

t

testiä (Mann-Whitney koe). Yksisuuntainen ANOVA (F) suoritettiin vertaamaan parametrien useita ryhmiä. Korrelaatio ekspressiotasot MACC1 (kvantitatiivisesti mitataan MACC1 immunohistokemiallisella värjäyksellä lujuus) ja kliinis-RPC potilailla arvioitiin käyttämällä Pearsonin korrelaatiokerrointa testi. Kaikki tilastolliset analyysit suoritettiin käyttäen SPSS ohjelmistopakettia (versio 17.0, SPSS, Inc., Chicago, IL). 2-puolinen koe tehtiin tässä tutkimuksessa, ja

p

0,05 pidetään tilastollisesti merkitsevä. Eloonjäämisaste arvioitiin käyttämällä Kaplan-Meier-menetelmällä. Yhden ja usean analyysit suoritettiin Coxin suhteellisen vaarat regressiomallit.

Tulokset

tutkiminen MACC1 proteiinin ilmentymisen munuaisaltaan karsinooma (RPC) kudos, viereisen ei-tuumori- munuaisaltaan epiteelin kudosten (ANRPET ) ja normaali munuaisaltaan epiteelikudoksen (NRPET) näytteet

immunohistokemiallinen (IHC) tutkiminen MACC1 proteiinin ilmentyminen suoritettiin 73 RPC kudosnäytteistä, 32 ANRPET (vähintään ~ 2 cm: n etäisyydellä kasvaimen reuna) ja 41 NRPET (urothelial kudokset munuaisten syöpäpotilaat, jotka ovat vähemmän kuin 3 cm halkaisijaltaan ehjät kudossolun napaisuus ja pidetään normaaleissa epiteelikudoksissa). Kuten kävi ilmi normaalissa ei-neoplastisia munuaisaltaan kudosleikkeiden johdettu potilailla, joilla on munuaissolukarsinooma, MACC1 värjättiin sytoplasmassa sekä tumassa epiteelisoluissa asuvat sisällä kerrostunut ja siirtymäkauden epiteelin (Fig. 1 B B ’). Sen sijaan, MACC1 värjäytyminen oli heikentynyt merkittävästi strooman kudoksessa. Kuvien kuvassa. 1A A ’ovat negatiivisia ohjaus IHC värjäykset varten MACC1.

(A) negtive kontrolli värjäys; (B) MACC1 positiivista värjäytymistä; (C-E) edustavat kuvat negtive, matala, korkea MACC1 ilmentyminen RPC kudoksissa, vastaavasti. (A’-E ’) on suurempi suurennos valitun alueen (A-E), vastaavasti. Suurennus: x 100 (A-E); × 200 (A’-E ’).

Positiiviset MACC1 signaaleja havaittiin 66 73 RPC syövän leesioiden näytteissä (~90.4%), sekä 24 32 ANRPET ( ~75.0%) ja 29 41 NRPET (~70.7%) näytteistä tarkastelimme tässä tutkimuksessa. Kuvien kuvassa. 1C-E, 1C’-E ’ovat edustavia MACC1 IHC värjäytymistä kuvien RPC kudoksiin MACC1 havaitaan negatiivinen (Fig. 1 C E ’) ekspressiotasojen, vastaavasti. Vaikka MACC1 ilmentyminen on pääasiassa läsnä sytoplasmassa RPC kudosleikkeissä, lokalisoituminen tumaan MACC1 on helposti havaittavissa, kuten on esitetty kuviossa. 1. Kiinnostavaa kyllä, huolimatta etuoikeutetut sytoplasmista värjäytymistä suurimmassa osassa epiteelisolujen RPC syöpäkudoksen osat, on todellakin pienet populaatiot, jotka ilmentävät huomattavasti vahvempi tumavärjäystä kuin sytoplasmista värjäytymistä. Vuonna NRPETs, MACC1 jaettiin enemmän tai vähemmän tasaisesti sytoplasmassa ja tumassa epiteelisolujen (Fig. 1 B B ”). Tässä vaiheessa emme ole selvillä biologisia vaikutuksia heikomman tumavärjäystä of MACC1 verrattuna sytoplasmista värjäytymistä näytteillä pahanlaatuinen RPC kudoksiin.

Seuraavaksi immunohistokemiallinen värjäys vahvuus MACC1 mitattiin kvantitatiivisesti Image Pro Plus arviointi. Kvantifiointi värjättyä alueella, integroitu optinen tiheys (IOD) ja keskimääräinen optinen tiheys (AOD = IOD /alue) ja MACC1 kussakin kuvassa tehtiin ja alistettiin lisäanalyysiä varten. Kuten taulukosta 1, AOD lukema MACC1 näkyi 0,0648 ± 0,0312 RPC kudoksissa, 0,0218 ± 0,0144 vuonna ANRPETs, ja 0,0210 ± 0,0151 in NRPETs, vastaavasti. Koska ei ollut merkittävää eroa ANRPETs ja NRPETs (

p

0,05), nämä kaksi ryhmää yhdistettiin yhdeksi ryhmä, ”normaali epiteelin”, kuten on esitetty seuraavassa tilastollisen analyysin me käsitellään jäljempänä. Tämän seurauksena, AOD pisteet normaalin epiteelin oli 0,0213 ± 0,0147. Yhdessä verrattuna RPC kudoksiin, AOD pisteet immunohistokemiallisesti värjättyä normaaleissa epiteelikudoksissa oli huomattavasti pienempi, lähentämällä kolmasosa värjäytymisen voimakkuuden tunnistettu RPC (

p

0,05) (taulukko 1). Nämä tulokset viittaavat siihen, että MACC1 epänormaali runsaus saattaa merkitä biologinen indikaattori kliinisesti viittaavia kasvaimen pahanlaatuisuuden munuaisaltaan kudoksissa.

Korrelaatio MACC1 proteiinin ekspressiotasot ja ennustetekijät munuaisten lantion syöpä

määrittämiseksi kliinistä merkitystä MACC1 yli- ilmeneminen kehittymistä ja etenemistä RPC, korrelaatio MACC1 proteiinin ekspressiotasot ja ennustetekijät (kuten ikä, sukupuoli, TNM ja Ydinteollisuudessa) on RPC potilailla tutkittiin tarkemmin (taulukko 2) . Kvantitatiivinen analyysi IHC värjäyksen Image Pro Plus analyysi. Kuten taulukosta 2, kohonnut MACC1 proteiinin tasot näytti liittyvän suurempi aggressiivisuus RPC, jossa AOD pistemäärä MACC1 TNM vaiheessa Ta, I, II ja III-IV paljastuu 0,0355 ± 0,0247, 0,0563 ± 0,0281, 0,0752 ± 0,0264, ja 0,0965 ± 0,0185, vastaavasti. Huomattavasti, MACC1 havaittu olevan runsaasti myöhäisessä vaiheessa tuumorikudoksissa kuten TNM vaiheissa III-IV, verrattuna että alkuvaiheessa, ja ero oli tilastollisesti merkitsevä (

p

0,05). Lisäksi AOD pisteet MACC1 RPC vaiheessa Ta oli huomattavasti suurempi kuin mitattu normaalissa epiteelissä (0,0213 ± 0,0147) (

p

0,05). Koska huomioon kasvaimen Reaktoriluokan oli myös tilastollisesti merkitsevä ero AOD tulokset MACC1 mitattuna huonolaatuisen (G1, G2: 0,0509 ± 0,0281), ja tulokset mitataan korkealaatuisia RPC kudokset (G3: 0,0729 ± 0,0304) (

p

0,05). Itse asiassa oli ~43.2% kasvu havaittiin kasvaimen kudoksissa Asteen 3 verrattuna luokan 1 tai 2, mikä viittaa siihen, että MACC1 proteiini runsaus voidaan korreloivat voimakkaasti kehittymistä ja etenemistä RPC.

kontrasti, vaikka MACC1 näytteillä lisääntynyt proteiinin tason ryhmässä iäkkäät potilaat ( 61 vuotias) kanssa AOD pisteet mitataan 0,0654 ± 0,0298 verrattuna ryhmään nuoremmilla potilailla (alle 61 vuotias) (AOD pisteet: 0,0628 ± 0,0343), ei tilastollisesti merkitsevää eroa ei havaittu näiden kahden ryhmän (

p

0,05). Samoin ei havaittu tilastollisesti merkitsevää eroa ei havaittu miehen ryhmän (AOD pisteet: 0,0662 ± 0,0305) ja naisen ryhmässä (AOD pisteet: 0,0612 ± 0,0335) (

p

0,05) (taulukko 2). Lisäksi tilastollisesti merkittävää korrelaatiota ei paljastanut välillä MACC1 proteiinin ilmentymisen ja virtsan sytologian tai nikotiiniriippuvuus (tuloksia ei ole esitetty).

välinen yhteys MACC1 proteiinin ekspressiotasot ja yleistä (OS), tautivapaan elinajan (DFS ) munuaisten lantion syöpä

helpottamiseksi tilastollinen analyysi, RPC potilaat jaettiin kolmeen ryhmään sen mukaan, tarkastetaan silmämääräisesti immunohistokemiallisella värjäyksellä vahvuus kudosleikkeiden selvitimme (negatiivinen, matala MACC1 ilmaisun ryhmä, ja korkea MACC1 ilmaisu ryhmä, vastaavasti). AOD pisteet MACC1 saatu Image Pro Plus analyysi lisääntyi selvästi matalan MACC1 ilmaisua ryhmässä verrattuna negatiiviseen ryhmään, ja oli edelleen kohonnut korkean MACC1 ilmaisu ryhmä (

p

0,001, Fig. 2A). Lisäksi Spearmanin korrelaatiokertoimen analyysi mittaa vahvuus lineaarinen suhde MACC1 AOD pisteiden Image Pro Plus analyysiä ja ulkoasun arvioinnin tulokset, tilastollisesti merkitsevä positiivinen lineaarinen suhde havaittiin näiden kahden tulokset potilailla, joilla RPC (

r

= 0,669,

p

0,001) (Kuva. 2B). Niinpä päätökseen MACC1 ekspressiokuviota päätellä ulkoasun arvioinnin todellakin uskollisesti muistuttaa poimittu analyysin käyttäen Image Pro Plus AOD pisteytysjärjestelmä.

(A), Potilaat, joilla RPC manuaalisesti kolmeen ryhmään sen mukaan, niiden ulkoasun arvioinnin tulokset in IHC värjätään kudosleikkeiden (negatiivinen, matala MACC1 ilmaisun ryhmä, ja korkea MACC1 ilmaisun ryhmä, vastaavasti). AOD arvo MACC1 saadun Image Pro Plus analyysi lisääntyi selvästi matalan MACC1 ilmaisua ryhmässä verrattuna negatiiviseen ryhmään, ja oli edelleen kohonnut korkean MACC1 ilmaisu ryhmä (

p

0,001). AOD = integroidun optinen tiheys (IOD) /alue positiivisen MACC1 värjäyksen kussakin IHC värjäystä kuva; B, Spearmanin korrelaatiokertoimen analyysi mittaa vahvuus lineaarinen suhde MACC1 AOD Image Pro Plus tulokset ja ulkoasun arvioinnin tulokset. Tilastollisesti merkittävä positiivinen lineaarinen suhde havaittiin näiden kahden tulokset RPC (

r

= 0,669,

p

0,001).

Seuraavaksi tarkastelimme ennustetekijöiden merkitystä MACC1 yli-ilmentymisen yleinen (OS) ja taudista vapaan eloonjäämisen (DFS) joukossa RPC potilasta. 28 potilasta kuoli 5-vuoden seurannan, ja joukossa 28 kuolleen, 18 kuoli syöpään etäpesäkkeitä tai paikallisen uusiutumisen. Kuten on esitetty kuviossa. 3A B, potilailla, joilla on korkea MACC1 ilmentymisen taso määräytyy ulkoasun arvioinnin pisteytysjärjestelmä, oli huomattavasti lyhyempi OS (

p

0,001) ja DFS (

p

0,001) kuin potilaiden ryhmässä alhainen MACC1 ekspressiotason. Kuten kuviossa. 3A, korkean MACC1 ilmaisua ryhmässä, keskimääräinen OS nopeus oli 29,9 kuukautta ja 5 vuoden OS korko lähentämällä 70%. Potilaille matalan MACC1 ilmaisun ryhmä, keskimääräinen OS oli 45,6 kuukautta, -50% korkeampi kuin korkean MACC1 ryhmä. Lisäksi DFS oli ~22 kuukauden paljastuu korkean MACC1 ryhmä, kun taas määrä lähes kaksinkertaistui matalan MACC1 ryhmä (~42 kk) (Fig. 3B). Samoin 5-vuoden DFS korko alhainen MACC1 ryhmässä oli ilmeisesti korkeampi kuin korkean MACC1 ryhmässä (57,5% vs. 42,3%). Lopullisesti, korkea MACC1 ekspressiotaso on merkittävästi korreloi vähentynyt kokonaiselossaoloaika ja taudista vapaan eloonjäämisen RPC potilailla paljastuu määrällisen immunohistokemiallinen analyysit.

Kaplan-Meier selviytymisen käyrät paljasti, että potilaiden korkean MACC1 ilmaisu ryhmä oli merkittävästi lyhyempi yleinen (OS) (

p

0,001) (A) ja taudista vapaan eloonjäämisen (DFS) (

p

0,001) (B) hinnat kuin matalan MACC1 ilmaisua ryhmässä.

yhden ja usean analyysit perustettu MACC1 uutena riippumaton prognostinen indikaattori RPC

tässä tutkimuksessa yhden ja usean analyysit tehtiin arvioinnissa prognostisia voima MACC1 yli-ilmentymisen (taulukot 3 4). Kuten taulukosta 4, Coxin monimuuttuja regressioanalyysi osoitti, että MACC1 ekspressiotasot ja Ydinteollisuudessa ovat todellakin riippumattomia ennustetekijöitä indikaattoreita eloonjäämisaste potilaiden kanssa RPC säädön jälkeen iän, sukupuolen ja TNM-luokitus (luokka,

p

= 0,001, Riskisuhde: 0,086, 95% CI: +0,019-+0,387; MACC1,

p

= 0,024, Riskisuhde: 0,282, 95% CI: ,094-,844. taulukko 4). Lisäksi MACC1 ekspressiotasot ja Ydinteollisuudessa todettiin myös itsenäisiä ennustavat tekijät syöpää elinaika potilailla, joilla on RPC (Grade,

p

= 0,001, Riskisuhde: 5.444, 95% CI: +1,964-15,093 ; MACC1,

p

= 0,002, Riskisuhde: 4,207, 95% CI: +1,668-10,613. taulukko 4).

keskustelu

Vaikka munuaisaltaan karsinooma ei ole yhtä yleinen, se on vaikea diagnosoida kuin virtsarakon urothelial karsinooma ja edustaa aggressiivinen tauti on korkea sairauden uusiutumisesta ja kehityksestä. Lisäksi tupakoinnin, tutkimalla muita ympäristön riskitekijöiden on ehdottanut, että työperäinen altistuminen teollisuuden kemiallisia aineita voitaisiin myös edistää kehitystä urothelial karsinooma, esim. kemoterapian (varsinkin, syklofosfamidi) ja sädehoito, krooninen virtsarakon ärsytystä ja tulehduksia, sekä arseeni altistuminen [25]. Kiina on maailman suurin tupakointi väestöstä – ~350 miljoonaa, noin neljäsosa kolmasosa maailman väestöstä tupakoitsijoita. Lisäksi seurauksena nopea, ennennäkemättömän teollisuuden kasvu, teollisuuden kemiallista pilaantumista on tullut hälyttävän yhä uhka terveydelle monet Kiinassa viime 2-3 vuosikymmeniä. Kemikaalit, joita on ehdotettu edistämään ylempään suolikanavan virtsaputken syöpä ovat aromaattiset amiinit, kuten bentsidiiniä (tulostimet), 2-naftyyliamiini (kumi ja väriaine työntekijät), 4-aminobifenyylin (kampaamot), polysyklisiä aromaattisia hiilivetyjä, kuten bentso (a) pyreenin (alumiini työntekijät) ja dieselin höyryt [26]. Lisäksi parannettu syövän seulonnan tarkkuus Kiinassa viime vuosina, dramaattinen nousu syövän esiintyvyys väestössä on edustanut valtava haaste viime 5-10 vuoden aikana. Itse asiassa korkeampi taajuus munuaisaltaan syöpä on todettu viimeisten 2-3 vuosikymmeninä Kiinassa. Näin ollen on tärkeää kehittää tehokkaampia prognoosi- indikaattoreihin, ja tunnistaa korkean riskin potilaita asianmukaista ja oikea-aikaisten toimien.

Kehittyvät potentiaalisesti vähemmän invasiivisia mittaus, tilan arvioimiseksi kudosspesifisten biomarkkerit on arveltu olevan kyky parantaa ja ennustavia tarkkuutta päätöksentekoprosessiin, kun ne yhdistetään nykyiseen ennustemalleja. Viime vuosina, biomarkkereita, jotka liittyvät ennusteeseen potilailla, joilla on ylemmän ruoansulatuskanavan urothelial karsinoomat on laajalti tutkittu. Itse asiassa erilaisia ​​kudospohjaisia ​​biomarkkerit on raportoitu ja arvioitiin niiden mahdollisten hakemuksen urothelial karsinoomat ennustetekijöiden indikaattoreita, kuten molekyylejä, jotka säätelevät solusyklin (esim p53, p21, pRb, P27, sykliini D1 ja sykliini E1), apoptoosin (esim surviviini, Bcl-2, osteopontiini, bax, kaspaasi-3), solujen kasvua ja signaalitransduktiota (esim HER-2, NF-kB, EGFR, beeta-kateniini, galektiini-3, RAS-MAPK), solujen vaeltaminen ja invaasio (esim MMP), ja angiogeneesin (esim vasohibin-1, VEGF, TSP-1) (katsaus [7], [8]). Kuten tässä tutkimuksessa osoitimme ensimmäistä kertaa, että epätavallisen korkea MACC1 ilmentyminen liittyy huonoon ennusteeseen munuaisaltaan karsinooma ja on todellakin riippumaton prognostinen indikaattori tautivapaan elinajan ja eloonjäämisaste potilaiden. Koska tässä vaiheessa meillä ei ole tehokasta hoitoa metastasoituneen munuaisaltaan karsinooma, havaitseminen korkeita MACC1 voisi auttaa ennustamaan etenemistä ja taudin ennusteen. Huomattavasti, metastaaseja kiinteä kasvain kudosten paljasti aiemmissa tutkimuksissa, lisäksi tiheämmin MACC1 värjäytymistä sytoplasmaan, ylimääräinen tumavärjäystä on huomattu myös viittaa parannettu tumaansiirtymiseen ja myöhemmin korkeus MACC1 transkription toimintaa [15], [27 ], [28].