Krooninen sairaus

tiivistelmä

Krooninen Hepatiitti delta-virus (HDV) on riskitekijä maksakirroosi ja maksasyövän (HCC), mutta vähän tiedetään, onko tulos hepatiitti ennustetaan seerumin merkkiaineet HDV ja hepatiitti B-virus (HBV) infektio. Tavoitteena oli tutkia näitä korrelaatioita 193 kroonista HDV-infektio, joka oli seurattiin keskimäärin 9,5 vuotta (4,8-19,3). HDV-RNA mitattiin ensin laadullisella talon nested RT-PCR ja kvantifioidaan in-house reaaliaikainen PCR. HDV RNA-tasot vain ilmestyi merkittävästi liittyvät HCC (yhden muuttujan analyysi: OR 1,32, 95% CI 1,02-1,71; p = 0,037; monimuuttujamenetelmin: OR 1,42, 95% CI 1,04-1,95; p = 0,03). Ei-Kirroosipotilailla aluksi esitys (n = 105), HDV RNA-tasot olivat etenemiseen liittyvä maksakirroosi (yhden muuttujan analyysi: OR = 1,57, 95% luottamusväli 1,20-2,05, p 0,001; monimuuttujamenetelmin: OR = 1,60, 95% CI 1,20-2,12, p = 0,007) ja kehittäminen HCC (yhden muuttujan analyysi: OR = 1,66, 95% luottamusväli 1,04-2,65, p = 0,033; monimuuttujamenetelmin: OR = 1,88, 95% luottamusväli 1,11-3,19, p = 0,019) . ROC-analyysi osoitti, että noin 600000 HDV RNA kopiota /ml oli optimaalinen raja-arvo meidän Potilaskohortti syrjivät kehittämiseen maksakirroosi. Korkea HDV-viremian ei-Kirroosipotilailla liittyy huomattavan todennäköistä etenemistä maksakirroosi ja kehittämiseen HCC. Kun kirroosi on kehittänyt rooli HDV lisääntymään ennustajana negatiivisen tuloksen vähentää.

Citation: Romeo R, Foglieni B, Casazza G, Spreafico M, Colombo M, Prati D (2014) Korkea pitoisuus seerumissa HDV RNA ennustavat maksakirroosi ja maksasyöpä kroonista hepatiitti Delta. PLoS ONE 9 (3): e92062. doi: 10,1371 /journal.pone.0092062

Editor: Heiner Wedemeyer, Hannover Medical School, Saksa

vastaanotettu 25 marraskuuta 2013 Hyväksytty: 17 helmikuu 2014; Julkaistu: 21 maaliskuu 2014

Copyright: © 2014 Romeo et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Kirjoittajat ei ole tukea tai rahoitusta raportoida.

Kilpailevat edut: MC on seuraavat edut: Grant ja tutkimus tuki: Merck, Roche, BMS, Gilead Science Neuvottelukunnat: Merck, Roche, Novartis, Bayer, BMS, Gilead Science, Tibotec, Vertex, Janssen Cilag, Achillion, Lundbeck, Abbott, Boehringer Ingelheim, GSK, GenSpera, Abbvie puhuminen ja opetus: Tibotec, Roche, Novartis, Bayer, BMS, Gilead Science, Vertex. Ei ole olemassa patentteja, tuotteiden kehittämiseen tai kaupan tuotteiden julistaa. Tämä ei muuta tekijöiden noudattaminen kaikki PLoS ONE politiikan tietojen jakamista ja materiaaleja.

Johdanto

Hepatiitti delta-virus (HDV) on ainutlaatuinen aine ominaista yksijuosteinen RNA genomin kapseloi hepatiitti B pinta-antigeeni (HBsAg), ja erikoinen strategia infektion kohde-elimen [1]. Itse asiassa, HDV vaatii auttaja tehtävistä säädetään hepatiitti B -virus (HBV), jotta levittää maksasoluihin, se voi vain tartuttaa aiheista on samanaikaisesti HBV-infektio johtuvat joko samanaikainen lähettäminen kahden viruksen tai sienen vakiintunut HBV carrier [2], [3]. Ei ole yllättävää siksi, esiintyvyys HDV-infektion laski nopeasti Etelä-Euroopassa ja Välimeren alueella, kun 1990-luvun alussa käyttöönoton jälkeen HBV rokotuksista [4], mutta monet maahanmuuttajat erittäin endeemisillä alueilla kuljettavat krooninen HDV-infektio on johtanut syntymistä uusi skenaario Länsi-Euroopassa koko [5] – [7].

krooninen HDV-infektio on aina pidetty vaikea ja nopeasti etenevä, joka johtaa loppuvaiheen maksasairauden muutamassa vuodessa, kun taas hitaammin etenevä on tunnistettu, joka kehittyi kirroosi 30%: lla potilaista seurattiin aikana enintään 28 vuotta, maksan vajaatoimintaan sijaan maksasyöpä (HCC) on ensimmäinen maksakirroosi liittyvä komplikaatio näkyvän [8]. Nämä havainnot viittaavat siihen, että on olemassa potilasryhmiä kanssa heterogeenisesti kehittyviä muotoja krooninen HDV-infektio, mutta patogeneesin HDV liittyvien maksavaurio on yhä kiistanalainen. Vaikuttaa epätodennäköiseltä, että virus on suora solutuhovaikutuksen koska tutkimuksissa on havaittu maksasta köynnöksen ilmentävät HDAg yksin ilman kudosvaurioita [9]. Toisaalta, ns replikaation liittyvän sytopatogeenisyys virus saattaa selittää kudosvaurion potilailla, joilla on akuutti HDV-infektio, jolle on ominaista korkea virusreplikaation, kun taas krooninen infektio on ominaista alhainen viruksen tuotannon ja patogeenisyyden [2], [10]. Lisäksi viimeaikaiset havainnot osoittavat, että on olemassa suoraa korrelaatiota seerumin HBsAg ja HDV RNA puuttuessa käänteinen korrelaatio HBV DNA -arvo viittaa vaihtoehtoinen tulkinta HDV patogeenisyyden joka on läheisempää sukua HBV biology [11].

tämän tutkimuksen tavoitteena oli tutkia korrelaatioita viremian (seerumin HBsAg, HBV DNA ja HDV RNA-tasot) ja kliinisiä tuloksia kroonisen HDV-infektion, mukaan lukien eteneminen maksakirroosi, kehittämistä HCC, dekompensaatio, ja maksan liittyvät kuolemat.

Potilaat ja menetelmät

Potilaat

Potilaat valittu aiemmin julkaistu kohortin osallistuvat maksa keskus Ospedale Maggiore Milano (Italia) [8 ]. Ainoa valintakriteerit oli mahdollisuus valita useampi pakastettujen seeruminäytteitä (-70 ° C) kerättiin ensin vierailu meidän jako (perustason näyte), sekä ainakin yksi jäädytetty näyte kerätään yli seurannassa. Tutkimuksen hyväksyi Institutional Review Board of Department of Internal Medicine Maggiore sairaalassa. Potilaat ovat antaneet kirjallisen tietoon perustuvan suostumuksen ottaa verta kokeisiin ja antoi luvan käyttää niiden potilastietoja.

Diagnoosi HDV Infection

HDV-infektion määriteltiin läsnäolo HDV-antigeenin (HDAg) maksakudoksessa, tai havaitseminen seerumissa HDV-RNA: n anti-HDV /HBsAg seropositiivisten potilaiden yksityiskohtaisesti muualla [12].

HDV RNA uuttaminen

HDV-RNA uutettiin 200 ui plasmaa käyttämällä High Pure virusnukleiinihapon kit (Roche Applied Science, Basel, Sveitsi). Koska monet näytteissä hyvin pieninä pitoisuuksina HDV RNA: ta, oli välttämätöntä varmistaa tehokas viruksen nukleiinihapon uuttamista. Siksi muutettu erottamisessa protokolla sisältää esivaiheen yhden tunnin inkubaation lyysiä /sitomispuskurissa pakkauksen mukana (kaotrooppinen suola, poly (A), ja proteinaasi K) huoneenlämpötilassa.

Quantitative HDV RNA reaaliaikainen PCR

HDV RNA referenssistandardin kvantifiointiin HDV RNA: Real Time PCR ei ole tällä hetkellä käytettävissä. 569 bp: n fragmentti, että HDV: n genomin, mukaan lukien 5 ’UTR HDV alue on kloonattu plasmidiin, jota käytettiin positiivisena kontrollina transkriptin HDV Real Time PCR. Tasaus täyspitkän HDV GenBank viittaus genomeja edustavat kaikkia HDV genotyyppien käytettiin paikantamaan säilyneitä alueita sopii HDV RNA vahvistusta, ja 5 ’transloimattomassa (UTR) aluetta tunnistettiin sopivin, jotka on määritelty muiden [13]. Näin ollen alukkeet ja koettimet on suunniteltu monistamaan 110 bp: n fragmentin 5 ’UTR, ottaen huomioon geneettisen monimuotoisuuden HDV-genotyyppien. Määritys perustuu käyttöön fluoresenssiresonanssienergiansiirto (FRET) koettimia, ja mukana eteenpäin aluke HDV-s AGTGGCTCTCCCTTAGCCAT, reverse-aluketta HDV-as CGTCCTTCTTTCCTCTTCGGGT, 3′-fluoreskeiini-leimatun koettimen HDV-FL TCCTCCTTCGGATGCCCAGGTCG, ja 5’-LC640-leimattu koetin HDV-LC CCGCGAGGAGGTGGAGATGCCAT. Reaktio suoritettiin käyttäen LightCycler-2,0 välineen (Roche Diagnostics), ja 20 ui kokonaistilavuudessa, joka sisälsi 1 x LightCycler RNA Master Hybridisaatiokoetin, 55 nM Mn (OAC)

2, 10 uM kutakin aluketta ja koetinta, ja 5 ui RNA, ja se koostui alkuperäisen RNA retrotransskription (ja Taq aktivointi) 25 ’61 ° C: ssa, jota seuraa 30 ”95 ° C: ssa, ja sitten 45 monistussykliä (1” 95 ° C: ssa, 5 ”, 62 ° C: ssa, ja 4 ”72 ° C: ssa), ja lopullinen sulamiskäyräanalyysi (30” 72 ° C: ssa, 20 ”95 ° C: ssa, 30” 40 ° C: ssa, 1 ’85 ° C: ssa, ja 30 ”40 ° C: ssa ). Kaikki kvantifiointi suoritettiin suhteellisen plasmidiin standardin kuvattu, jota käytettiin määrittämään 4-pisteen määrän käyrä jokaisessa määrityksessä. Lisäksi todellinen näyte samasta potilaasta otettiin käyttöön kunkin Reverse Transcription-Real Time PCR-analyysin positiivisen sisäisen tarkastuksen. Lineaarisuus PCR vaihteli 10

3 -10

8 kopiota /ml, ja herkkyys oli 500 kopiota /ml. Kaikki näytteet testattiin kahtena kappaleena, ja keskiarvo kahden analyysin pidettiin tilastollista analyysiä. Validointiin määrityksen, osajoukko 50 näytettä testattiin myös kaupallisella CE IVD HVD Real Time PCR (LifeRiver Diagnostics, Shanghai, Kiina), joissa yhtäpitävät tulokset (tuloksia ei ole esitetty).

HBsAg kvantifiointi

HBsAg kvantifioitiin automaattisten kemiluminesenssi mikrohiukkasten immunomääritykset (arkkitehti HBsAg, Abbott, Chicago, IL).

HBV DNA: n kvantifiointiin

tässä tutkimuksessa kaikki potilaat valittiin uudelleen testattiin HBV DNA avulla kvantitatiivisen tosiaikaisen PCR käyttämällä COBAS AmpliPrep /COBAS TaqMan automatisoitu järjestelmä (HBV Test, Roche Diagnostics).

maksabiopsian

maksa koepaloja saatiin käyttämällä Tru-cut neula (16 gaugea, Travenol, Hyland, CA, Uro-Cut 16G, TSK, Tokio, Japani), ja leikkeet värjätään tavanomaisilla menetelmillä. Maksasolunekroosi, tulehdus ja fibroosi luokiteltiin perusteella Metavir pisteytysjärjestelmä [14].

sairauden eteneminen

Eteneminen kirroosi potilailla, joilla on krooninen hepatiitti at merkintä on määriteltävä perusteella fibroosi maksan histologian (F 4) [14], verihiutaleet 100,000 mm

3, ultraääni (US) ominaisuudet pinnan nodularity, pernan, portaali vein halkaisija 15 mm, endoskooppisesti paljasti ruokatorven laskimolaajentumat.

potilailla, joilla on maksakirroosi maahantulon, taudin etenemisen määriteltiin tullessa korkeamman Child-Pugh-luokka, ja kehittämällä kliinisiä dekompensaatioon tai HCC [15].

Kaikki potilaat, joilla on kliinisiä tai histologisia diagnoosi maksakirroosi tehtiin Yhdysvaltain valvonta- ja seerumin AFP määrityksissä 6 kuukauden välein kuten aikaisemmin on kuvattu [16]. HCC diagnosoitiin pohjalta käytettyjen kriteerien aikaan potilaan arviointi; vuodesta 2001, käytimme julkaisemat ohjeet European Association for Study of maksan (EASL) [17]. Potilailla, joille tehdään echo-ohjattu maksabiopsiassa HCC luokiteltiin kansainvälisesti hyväksytyt kriteerit perustuvat mallia invasiivisia tai korvaamalla kasvua [18]. Komplikaatiot kirroosi muuta kuin HCC, kuten askites, keltaisuus, maksan enkefalopatia ja ruuansulatuskanavan verenvuotoja, oli diagnosoidaan ja hoidetaan mukaisesti asetetut kriteerit [19],.

Tilastollinen analyysi

Kategorisen muuttujat on annettu numerot ja prosentit, ja jatkuvien muuttujien keskiarvoina ± keskihajonta tai mediaani arvoja ja alue tarvittaessa. Serologisiin muuttujia log-transformoitiin (base 10 logaritmi) ennen analyysiä. Chi-neliö testi ja t-testiä riippumattomille näytteille vastaavasti käytettiin vertaamaan mittasuhteet ja keskiarvot. Ei parametrinen Mannin-Whitneyn testiä käytettiin kyse muuttujista, joihin normaalijakaumat. Univariate logistinen regressio malleja käytettiin vaikutuksen arvioimiseksi serologisten muuttujien aikaan esitys ja riski kehittää tapahtuman kohteisiin (kirroosi, HCC, maksan vajaatoimintaan, maksan liittyvät kuolemat, ja ”ainakin yksi näistä”) aikana seurannan. Lisäksi monimuuttuja logistinen regressio analyysit tehtiin myös edellä kuvatulla yhden muuttujan malleja joitakin mahdollisia asiaan sekoittavien tekijöiden (ikä, sukupuoli, alkoholin kulutus, HBeAg ja IFN). Lopuksi Alaryhmäanalyysi tehtiin vaikutusten arvioimiseksi muuttujien kiinnostava erikseen kaksi rajatuissa alaryhmissä mukaan kliininen diagnoosi lähtötilanteessa (krooninen hepatiitti tai kirroosi). Kertoimet suhde (syrjäisimmillä alueilla) kanssa 95%: n luottamusväli laskettiin muuttujien mukana malleissa. Logistisessa malleissa, ainoastaan ​​potilaille, joilla on käytettävissä serologisen määrittämisen ennen kehitystä tapahtumaa mukana. Vastaanotin toimii (ROC) analyysiä käytettiin aasin kykyä log-transformoitujen HDV RNA ennustaa kehitystä maksakirroosi potilailla, joilla on krooninen hepatiitti. Alue käyrän alla (AUC) laskettiin kokonaisarvion ennakoivan kyky HDV RNA.

herkkyys, spesifisyys, positiivinen ennustearvo (PPV) ja negatiivinen ennustearvo (NPV) mittausten olivat laskettu, ja optimaalinen HDV RNA cut-off-arvon ennustamiseksi kehittämiseksi maksakirroosi valittiin perusteella suurimman Youdenin indeksi (summa herkkyyden ja spesifisyyden miinus yksi). P-arvot 0,05 (kaksisuuntainen) katsottiin tilastollisesti merkittäviksi. Kaikki tilastolliset analyysit tehtiin käyttäen SAS-tilasto-ohjelmalla (release 9.2) (SAS Institute Inc., Cary, NC, USA).

Tulokset

Valitsimme 193 potilasta, joille lähtötilanteen seerumin näyte oli saatavilla, sekä ainakin yksi näyte kerättiin seurannan, jossa mediaani oli kolme (2-6) näytettä /potilas. Pystyimme valita homogeeninen joukko potilaita, jotka heijastuvat alkuperäistä väestöä 299 potilasta. Todellakin, joukossa 193 tapausta valittiin tässä tutkimuksessa (65% alkuperäisestä väestöstä) oli 35 potilasta, joille kehittyi HCC (46 alkuperäisessä kohortti) ja 35, jotka kokivat maksan vajaatoimintaan (54 alkuperäisessä kohortissa).

taulukossa 1 esitetään tärkeimmät epidemiologiset ja virologiset ominaisuudet 193 potilasta ajankohtana tutkimuksen alkaessa, eli sillä diagnoosin HDV-infektion, verrattuna yleiseen kohortin 299 potilailla [8], että myös potilaat, jotka diagnosoitiin olevan HDV-infektion muissa toimielimissä.,. Potilaat olivat vallitsevasti italialaiset (94%), miehistä (76%), joiden keski-ikä oli 41 vuotta. Modaliteetista infektio oli satunnaista useimmissa tapauksissa (146/193, 76%), ja 15 potilasta (8%) oli HBeAg. Kolmekymmentä kahdeksan tapausta (20%) oli aiempi alkoholin saannin 40 g /päivä. HBsAg voitaisiin määrällisesti 187 tapauksessa (97%), ja HBV DNA oli havaittavissa 169 tapauksessa (87%). Kaikki näytteet olivat HDV-RNA on positiivinen, kun Kvalitatiivisiin, ja viremia voitiin määrittää 157 näytettä (81%); loput 36 näytettä (19%) oli pitoisuudet, jotka olivat alle määritysrajan kvantitatiivisen määrityksen. Maksakirroosi todettiin lähtötilanteessa 88 tapauksessa (45%), jonka histologinen kriteereillä 75 (85%) ja kliinisiä kriteerejä loput 13 (15%). Osuus maksakirroosi oli hieman suurempi nykyisessä kohortti koska olemme lähete keskus sekä HBV-infektio ja kehittynyt maksasairaus. Siksi me usein muilta Italian laitosten potilaille, joilla on HBV liittyvä maksakirroosi ennen diagnoosia HDV -yhteisinfektio tehtiin. Kliiniset kriteerit diagnosointiin kirroosi oli verihiutaleita alle 100.000 mm

3 kaikissa 13 potilaalla, ultraääni (US) piirteitä pinnan nodularity kaikille potilaille, pernan kahdeksassa, portaali vein halkaisija 15 mm viidessä, läsnäolo ruokatorven suonikohjut kolmessa. 82 (93%) potilaista oli Child-Pugh luokka A, kuusi (7%) oli Child-Pugh luokan B

Emme voineet arvioida eroja kahden kohortteja kannalta viruskuormaa, koska lähtötasot HBsAg, HDV RNA ja HBV DNA ei voitu määrittää yleisessä kohortissa. Lopuksi alkuperäisessä kohortissa, keski-ikä ja seuranta-ajan mediaani laskettiin ensimmäiset todisteet krooninen maksasairaus, vaikka kuluvalla kohortti, keski-ikä ja seuranta laskettiin tullessa Nykyisessä tutkimuksessa, joka vastaa ensimmäistä pääsyä meidän yksikkö, kun ensimmäinen seerumia näytettä säilytettiin.

taulukossa 2 esitetään tärkeimmät ominaisuudet potilaiden kanssa ja ilman maksakirroosi. Potilaat, joilla on krooninen hepatiitti olivat huomattavasti nuorempia kuin ne, joilla on maksakirroosi (37,3 ± 11,0

vs

44,9 ± 10,3, p 0,001), oli eri säännöt infektion (p = 0,024) ja pidempi seuranta-aika (p = 0,0003). Ei ollut eroja sukupuolen, alkoholin nauttiminen tai lähtötasolle HBsAg, HBV DNA: n tai HDV RNA.

88 potilasta (45%) olivat aikaisemmin saaneet standardin interferoni annoksilla välillä 6 ja 9 MU, mediaani 18 kuukauden (6-94). 51/88 oli krooninen hepatiitti lähtötilanteessa mutta 20 heistä eteni maksakirroosi yli seurannassa (histologinen diagnoosi kaikissa tapauksissa), kun mediaani hoidon 24 kuukautta (6-56). 33/88 oli virologinen vaste (eli jatkuvasti negatiivinen seerumi HDV RNA: n tai maksan HDAg vähintään 2 pisteen analyysin aikana 3 vuotta seurannan, 18, joilla on krooninen hepatiitti). Kuitenkin huolimatta virologisen vasteen, 5 krooninen hepatiitti edennyt maksakirroosi dokumentoitu maksan histologian.

Kun otetaan huomioon esiintyminen HCC, maksan vajaatoimintaan ja maksan liittyvät kuolemat kliininen päätepisteet tutkimuksessa olemme suorittaneet yhden muuttujan ja monimuuttuja-analyysissä tärkeimmistä epidemiologisista, kliininen ja virologinen muuttujia. Niistä 193 potilasta lähtötilanteessa, 28 (14,5%) kehittyi HCC, 26 (13,5%) kehittyi maksan vajaatoimintaan ja 25 (13%) kuoli maksan liittyviä tapahtumia. Vuoteen univariate analyysi, virologisten muuttujat vain noussut liittyvät kliiniseen tulokseen (taulukko 3). Erityisesti HDV-RNA: ta ilmestyi merkittävästi liittyvät HCC kehitykseen (OR 1,32, 95% CI 1,02-1,71; p = 0,037) ja on esiintynyt ainakin yksi epäsuotuisa tapahtuma (eli HCC, maksan vajaatoimintaan, maksan liittyvä kuolema) (OR 1,36, 95% CI 1,10-1,68; p = 0,004). Tasot HBsAg liittyivät merkittävästi esiintyminen maksan vajaatoimintaan (OR 2,31, 95% CI 1,09-4,91; p = 0,03). Kuitenkin Monimuuttuja-analyysissä seerumin HDV-RNA: ta vain vahvistettiin niin liittyvät HCC kehitykseen (OR 1,42, 95% CI 1,04-1,95; p = 0,03) ja on esiintynyt ainakin yksi epäsuotuisa lopputulos (OR 1,41, 95% CI 0.99- 3,21; p = 0,007).

esiintyi myös yhden ja usean analyysi erikseen potilailla, joilla on krooninen hepatiitti sekä Kirroosipotilaiden. Niistä 105 potilailla, joilla on krooninen hepatiitti lähtötilanteessa, 31 (29%) kehittyi kirroosi, 10 (9%) kehittyi HCC, 7 (6%) kehittyi maksan vajaatoimintaan ja 7 (6%) kuoli maksan liittyviä tapahtumia. Tulokset yhden muuttujan analyysien potilailla, joilla on krooninen hepatiitti lähtötilanteessa esitetään yhteenvetona taulukossa 4. univariate analyysi osoitti, että lähtötason HDV-RNA-tasoja potilailla, joilla on krooninen hepatiitti oli etenemiseen liittyvä maksakirroosi (OR = 1,57, 95% CI 1.20- 2,05, p 0,001) ja kehitetään HCC (OR = 1,66, 95% luottamusväli 1,04-2,65, p = 0,033). Nämä havainnot varmistettiin monimuuttuja-analyysi (kirroosi: OR = 1,56, 95% CI 1,14-2,12; p = 0,005; HCC: OR = 2,64, 95% CI 1,13-6,16; p = 0,025). Niistä 88 Maksakirroosi lähtötilanteessa, 25 (28%) kehittyi HCC, 28 (32%) kehittyi maksan vajaatoimintaan ja 28 (32%) kuoli maksan liittyvä kuolema. Univariate analyysit osoittivat, ettei assosiaatio serologisten parametrien ja riski tahansa epäsuotuisa tapahtumia. Lopuksi, jotta voitaisiin tunnistaa tasoja HDV-viremian korreloi suuremman taipumuksen taudin etenemiseen, suoritimme ROC-analyysi potilaille, joilla on krooninen hepatiitti. ROC-analyysi tunnistettu 5,78 logHDV RNA (eli noin 600000 kopiota /ml) parhaana raja-arvo ennustamiseksi kehittämiseen maksakirroosi (AUC = 0,73) potilailla, joilla on krooninen hepatiitti (Fig. 1). Tämä arvo laskettiin meidän potilaan kohortin ja meidän HDV RNA kvantifiointimenetelmät. Tämä raja herkkyys oli 74%, spesifisyys 64%, joka on PPV on 46,9%, ja NPV 85,4%.

tunnistamiseksi tasoa HDV-viremian korreloi suuremman taipumuksen tauti etenemisen, ROC analyysi tunnistettu 5,78 logHDV RNA (eli noin 600000 kopiota /ml) parhaana raja-arvo ennustamiseksi kehittämiseen maksakirroosi (AUC = 0,73) potilailla, joilla on krooninen hepatiitti.

keskustelu

Tässä tutkimuksessa tarkastellaan suuren kohortin potilaista seurattiin keskimäärin ajaksi 9,5 vuotta, on valittu laajemmasta kohortin jo julkaistu [8]. Ainoa valintakriteerinä oli mahdollisuus valita useampi pakastettujen seeruminäytteitä kerätään perustasolla sekä seuranta-aikana, siinä suhteessa yleisen piirteet alkuperäisen väestön. Tutkimus tarjoaa uusia oivalluksia rooliin ja vastavuoroinen vuorovaikutusta HBV ja HDV vaikuttavat kliininen tulos HDV liittyvien krooninen maksasairaus. Kuten kirroosi on merkittävä riskitekijä myöhään kliinisiä komplikaatioita, ei-kirroosipotilailla histologisia merkkejä krooninen hepatiitti yksin, ja ne, joilla histologisesti tai kliinisesti todistettu kirroosi analysoitiin, kun taas taso HDV RNA, HBV DNA ja HBsAg analysoitiin kaikki näytteet kerätään aikaan kliinisen esityksen, sekä kerätyistä näytteistä potilailta aikaan myöhemmän kehityksen maksakirroosi tai sattuu suuri tapahtuma kuin HCC, kliininen dekompensaatio ja maksan liittyvät kuolemat.

tärkein havainto oli selvittää, että kliininen merkitys HDV-viremian on erilainen potilailla, joilla on krooninen hepatiitti yksin ja joilla on todettu maksakirroosi. Todellakin, yhden ja usean analyysit osoittivat, että taso HDV-viremian oli ainoa virologisia liittyvä parametri etenemistä maksakirroosi ja loppuvaiheen komplikaatioita HDV, kuten HCC ja kliininen dekompensaatiota, että potilailla, jotka eivät kirroottiset aikaan kliininen esitys. Tämä on ensimmäinen tutkimus, joka osoittaa, että taso HDV-viremian on merkittävä tekijä taudin etenemistä potilailla, joilla on krooninen hepatiitti D, vaikka tuloksemme ovat linjassa aiempien havaintojen että jatkuva HDV replikointi on ainoa ennustaja haitallisen tuloksen sairastavilla potilailla hepatiitti delta [8]. Kun otetaan huomioon tunnettu estävä vaikutus HDV on HBV: n replikaatiota [21], [22], ei ole yllättävää, että useimmat kiertävän tarttuvien viruspartikkelien sisältää HDV-RNA: sen sijaan, että HBV-DNA. Eräässä tutkimuksessa todettiin HBV-infektio yksin jonka suunnittelu oli samanlainen kuin meidän, Iloeje

et al

. löysi läheinen korrelaatio etenemistä maksakirroosi ja pitoisuudet verenkierrossa virus mitattuna ajankohtana ensimmäisen kliinisen havainnon jälkeen sensurointi tärkeitä liitännäissairauksia tekijät kuten ikä, sukupuoli, tupakointi ja alkoholin väärinkäyttö [23].

Mielenkiintoista, löysimme samanlainen lähtötilanteen HDV-RNA: ta meidän kirroottisilla ja ei-kirroosipotilailla, mikä viittaa siihen, että sen lisäksi, että vain etenemisen ennustamisessa pitkällä aikavälillä määrällisesti HDV-viremia ei ole mitään arvoa poikkileikkaus arviointeja. Tätä hypoteesia tukee äskettäin poikkileikkauksen analyysi 80 potilasta eri maista, jotka eivät osoittaneet mitään korrelaatiota HDV RNA ja histologista necro-tulehdus ja fibroosia tulokset [11].

Toinen mielenkiintoinen havainto Tutkimuksemme on että kun kirroosi on kehittänyt, HDV-RNA: ta menettää mitään merkittävää suhdetta taudin etenemiseen, eli esiintyminen HCC, dekompensaatio ja maksan liittyvä kuolema. Tämä havainto voi näkyä kiistanalainen aikaisemmista tuloksista. Koska itse asiassa, edellisessä julkaisun olemme osoittaneet, että jatkuva HDV RNA ajan oli riskitekijä liittyy esiintyminen kliinisten vajaatoimintaan riippumatta määrällisistä tasoilla HDV RNA. Löysimme erot seuranta-ajan mediaani, joilla on krooninen hepatiitti potilailla merkittävästi pitempi havainto aikaa. Yksi mahdollinen selitys on, että kunkin potilaan me pidetään ensimmäisenä saatavilla näytteen lähtötilanteen havainto, riippumatta ensimmäisestä merkkejä maksasairaudesta. Aiemmassa tutkimuksessa [24] on todettu, että HDV virusreplikaation yleensä vähenee kaikkein pitkälle edennyt maksasairaus, kun taas seerumin HBV DNA pitoisuudet voivat nousta ja yhdessä tietomme, tämä viittaa siihen, että jotkut tekijät eivät sisälly esillä olevaan analyysiin, mukaan lukien perussairaus, elämäntavat ja geneettinen alttius, voivat vaikuttaa puhkeamista komplikaatioiden Kirroosipotilaiden. Tätä tulkintaa tukee myös havainto, että seerumin HDV RNA itsenäisesti etenemiseen liittyvä maksakirroosi ja kehittämiseen HCC potilailla, joilla on krooninen hepatiitti yksin.

Kun olemme analysoineet serologisen muuttujien varalta kehittää ainakin yksi epäsuotuisa tapahtuma kuin eteneminen maksakirroosi, HCC, kliininen dekompensaatio tai maksan liittyvät kuolemat näillä potilailla oli olemassa selkeä suuntaus kohti määrällistä suhdetta viremian ja maksavaurion riskin komplikaatio. HDV RNA tasot 600000 kopiota /ml ennustaa meidän kohortissa riski kirroosi noin 50% potilaista, joilla on krooninen hepatiitti (PPV = 46,9%) kun taas pienemmät arvot ovat käyttökelpoinen keino kehittämistä lukuun ottamatta kirroosi suuressa tapausten määrä (NPV = 85,4%). Yksi mahdollinen selitys korkeamman HDV RNA olla mukana suurempi riski taudin etenemiseen potilailla, joilla on krooninen hepatiitti delta, on vaikutus virusreplikaation solujen immuunivaste HDV-tartunnan maksasoluissa, kuten äskettäin ehdottanut tutkimuksia isännän T solujen immuunivasteita hepatiitti delta genotyypit 1 ja 2 [25], [26]. Se mahdollisuus, että geneettinen monimuotoisuus HDV on rooli hepatiitin eteneminen on vähemmän todennäköistä, koska meidän kohortissa pääasiassa Italian potilaista (95%), HDV genotyyppi 1 oli yleisin tartuttamisesta rasitusta [27].

Vaikka meidän toteaa selvästi on validoitu tulevaisuudentutkimusta suurempia potilasryhmissä, silti ne korostavat hoitoa ennen maksakirroosi tapahtuu siksi, kun se on kehittynyt, tuloksemme osoittavat, että ei ole yhdistyksen välillä tahansa serologisia parametreja ja esiintyminen at ainakin yksi epäsuotuisa tapahtuma, kuten kehitystä HCC, maksan vajaatoimintaan tai maksan liittyvät kuolemat.

Emme löytäneet mitään suoraa tai epäsuoraa korrelaatio HDV RNA: n ja HBV DNA -arvon. Koska HDV proteiinien p24 ja p27 tukahduttaa HBV tehostajana estämällä HBV: n replikaatiota, ja HDV p27 transaktivoi interferoni alfa-indusoitavissa MxA geeni, joka estää myös HBV: n replikaatiota [28], se ei ollut yllätys todeta, että suurin osa potilaista ei ollut havaittavissa HBV. Sama havaittiin pitkäaikaista kliinisessä tutkimuksessa mahdollisesti erittäin vireemisiä HBeAg-positiivisilla potilailla, joilla on krooninen hepatiitti delta [29], joka osoitti, että suurin osa potilaista oli HBV DNA tasoja 200000 IU /ml vähintään kerran seurannan aikana , ja 60% oli tasoja 2,000 IU /ml. Äskettäin on havaittu, että HDV potilaat mutaatioita nukleotidikohdissa 1762, 1764 ja 1896 pohjapinta ydin promoottori /preCore alue on myös alhainen HBV tasolla [30].

Yhdenmukainen epidemiologiaa HDV Välimeren altaan, vain 8%: lla potilaista meidän kohortin olivat HBeAg lähtötilanteessa, eikä ollut mitään merkittävää korrelaatiota kliinisten tutkimusten tulosten kanssa, kuten aiemmin raportoitu [29]. Kuitenkin meidän havainnot ja ne Espanjasta [31] ristiriidassa hiljattain havainto Turkista olemassaolosta korrelaatio seerumin HBsAg tasojen ja HDV viremia riippumatta histologinen luokka ja arvosteluasteikko maksasairaus potilailla, joilla on krooninen hepatiitti delta [11 ].

Yhteenvetona krooninen hepatiitti D on erittäin todennäköistä edetä kirroosi ja HCC Italiassa, ja tämä taipumus on suurempi korkeampi HDV-viremian aikaan esityksen. Kuitenkin, kun kirroosi on kehittänyt, millainen yhteys HDV tasojen ennustajana kielteiseen tulokseen tulee heikkoja.

Kiitokset

Tämän tutkimuksen tulokset esiteltiin osittain vuoden 2012 vuosikokouksessa American Association for Study maksasairaudet (AASLD) ja palkittiin Presidential juliste Distinction.