Krooninen sairaus

tiivistelmä

CAR on transmembraaninen proteiini, jota ilmennetään useissa epiteeli- ja endoteelisoluissa. CAR välittää adenovirusinfektio, sekä adenovirus-välitteisen oncolysis of AxdAdB-3, joka on E1A /E1 B-double-rajoitettu onkolyyttinen adenovirus, eturauhasen syöpäsoluja. Tutkimuksessa arvioidaan tarkemmin terapeuttinen teho AxdAdB-3 Arg-Gly-Asp (RGD) kuitu muutos (AxdAdB3-F /RGD), joka mahdollistaa integriini-riippuvaisen infektio, eturauhassyövässä. Herkkyys eturauhassyöpäsolujen LNCaP, PC3 ja DU145 adenoviruksen infektion liittyi CAR ilme. Kaikki eturauhassyövän solulinjoissa ilmaisi integriini α

Vp

3 ja α

Vp

5. AxdAdB-3 oli sytopaattisen in CAR-positiivisten syöpäsolujen kuin CAR-negatiivisia soluja, kun taas AxdAdB3-F /RGD aiheutti voimakas oncolysis sekä CAR-positiivisia ja CAR-negatiivisten syöpäsolujen. Sen sijaan, AxdAdB3-F /RGD ei sytopaattisen vastaan ​​normaalin eturauhasen epiteelisolut, RWPE-1. Kasvaimensisäistä injektio AxdAdB3-F /RGD osaksi CAR-negatiivinen eturauhassyövän solu nude-hiirissä inhiboi kasvaimen kasvua. Nykyinen tutkimus osoittaa, että E1A /E1 B double-rajoitettu onkolyyttinen adenovirus, jossa on RGD-kuitu muutos parantaa infektiotehokkuus ja kasvaimen aktiivisuus CAR-puutosta eturauhassyövän solut, säästäen normaalit solut. Jatkotutkimuksissa arvioi terapeuttista potentiaalia AxdAdB3-F /RGD eturauhassyövän.

Citation: Shen Y-H, Yang F, Wang H, Cai Z-J, Xu Y-P, Zhao A, et al. (2016) Arg-Gly-Asp (RGD) modifioituja E1A /E1 B Double Mutant adenovirus Tehostaa antituumorivaikutus eturauhassyöpäsoluissa

In vitro

ja hiirissä. PLoS ONE 11 (1): e0147173. doi: 10,1371 /journal.pone.0147173

Editor: Ilja Ulasov, ruotsalainen Neuroscience Institute, Yhdysvallat |

vastaanotettu: toukokuu 10, 2015; Hyväksytty: 30 joulukuu 2015; Julkaistu: 22 tammikuu 2016

Copyright: © 2016 Shen et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Data Saatavuus: Kaikki asiaankuuluvat tiedot ovat paperin.

Rahoitus: Tämä tutkimus tukee osittain avustusta Natural Science Foundation of Zhejiang Kiina (# LY12H16031) ja Health Bureau of Zhejiang Kiina (# 2012KYA025) .

kilpailevat edut: kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Eturauhassyöpä on yleisimmin esiintyviä maligniteetti maailmassa, erityisesti länsimaissa. On arvioitu, että eturauhasen syöpä aiheuttaa 220800 uutta tapausta ja 27540 syöpään liittyvät kuolemat Yhdysvalloissa vuonna 2015. [1] Kiinassa eturauhassyövän ilmaantuvuus on kasvanut nopeasti viime vuosikymmeninä, ja yli 70% eturauhassyöpäpotilaalla on edennyt tai etäpesäkkeitä. [2] Tähän mennessä hormonihoito on edelleen eniten hyötyä potilaille, joilla eturauhasen syöpä, mutta sitä annetaan jonkin rajoitetun ajan ja lähes kaikki eturauhassyövän potilailla, jotka saavat androgeeniablaatio lopulta edetä androgen tulenkestävät tauti, [3] tunnetaan kastraatio kestävä eturauhassyöpä (CRPC). Doketakseli kemoterapian käytetään usein potilaiden hoitoon CRPC, mutta ilman taudin etenemistä kestää vain kuusi kuukautta. [4] Vaikka romaani androgeenireseptorin estäjä (Enzalutamide) ja sytokromi P450, perhe 17, subfamily Polypeptidi (CYP17) estäjä ( abirateronin) on raportoitu tehokkaammin hoitaa CRPC potilaita, tällainen kohtelu voi vain parantaa selviytymistä muutaman kuukauden. [5, 6] Siksi uusia ja tehokkaampia hoitostrategioita tarvitaan kiireellisesti parantaa eturauhassyövän ennustetta.

Aiemmat tutkimukset osoittivat, että onkolyyttistä adenovirus pystyi replikoitua selektiivisesti ja tappaa syöpäsoluja säästäen normaalit solut. Tämä onkolyyttinen virus hoito voisi olla kliinisesti lupaavalta hoidettaessa ihmisen syövissä, mukaan lukien eturauhassyöpä. [7-9] Aikaisemmat Tutkimus osoitti, että E1A /E1 B Kaksoismutantissa onkolyyttinen adenovirus, AxdAdB-3, oli antituumorivaikutus käytettäessä potilaalle tehdä, eturauhassyöpä SCID (vakava yhdistetty immuunipuutos) hiirimallissa. [10] kuitenkin AxdAdB-3 osoitti riittämätöntä sytopaattisia vaikutuksia joissakin eturauhassyövän solulinjoissa, jotka ekspressoivat alhaisia ​​coxsackievirusinfektiot adenoviruksen reseptorin (CAR). [10] CAR on transmembraaninen proteiini, joka ilmentyy useissa epiteeli- ja endoteelisolujen ja toiminnot välittää adenovirusinfektio. Syöpäsolut vähentynyt CAR ilmentyminen on raportoitu olevan vastustuskykyisiä virusinfektion ja adenovirus-välitteisen geeniterapiassa. [11] eturauhasen syöpä, CAR ilmentyminen on usein läsnä, [12, 13], jotka voivat rajoittaa käyttöä adenovirus-toimitetaan geeniterapia . Aikaisempi tutkimus osoitti, että insertio Arg-Gly-Asp (RGD) peptidin HI silmukan kuidun nupin verkkotunnuksen parannettu adenoviruksen välittämä geenin transduktion CAR-negatiiviset solut sitoutumisen kautta RGD-peptidin integriinien kohdesoluihin . [14] Näin ollen tässä tutkimuksessa arvioimme terapeuttinen teho on E1A /E1 B kaksoismutantissa onkolyyttinen adenovirus, AxdAdB-3, jossa Arg-Gly-Asp (RGD) kuitu muutos (AxdAdB3-F /RGD) eturauhasen syöpä

in vitro

ja nude-hiirissä.

Materiaalit ja menetelmät

Solulinjat ja kulttuuri

Ihmisen androgeeniriippuvaisissa eturauhassyövän LNCaP (etäpesäke että imusolmuke), ihmisen androgeenistä riippumattoman eturauhassyövän solulinjoissa PC3 (etäpesäke luun) ja DU145 (etäpesäke aivot), ja normaalin aikuisen eturauhasen epiteelisolujen infektoitu yksi kopio ihmisen papilloomavirus 18 (nimeltään RWPE- 1) saatiin American Type Culture Collection (ATCC) (Manassas, VA, USA). LNCaP-solut ovat villityypin p53 ja p16 ilme, [15, 16] PC3-solut ovat p53 mutta metyloituja villityypin p16, [15, 16] ja DU-145-solut ovat molemmat mutatoitunut p53and p16. [15, 16] Ihmisen alkion munuaisen 293 (HEK-293) solut saatiin Cell Bank of Kiinan tiedeakatemia (Shanghai, Kiina). Solulinjoja ylläpidettiin Roswell Park Memorial Institute tai Eaglen minimal essential väliaineessa (ja HEK293), jota oli täydennetty 10% naudan sikiön seerumia, 100 IU /ml penisilliiniä ja 100 ug /ml streptomysiiniä kosteutetussa, 5% CO

2-ilmakehässä 37 ° C. RWPE-1 pidettiin K-SFM täydellistä kasvualustaa (Cell Systems, Kirkland, WA, USA) ja sitten pidätetty K-SFM ilman seerumia kasvutekijä ennen virusinfektio.

Rekombinanttinen adenovirus ja soluinfektiomalleissa

AxCAZ3-F /RGD [17] ja AxCAlacZ [18] ovat E1 poistetaan replikaatiopuutteisten adenovirus ilmentävät

Escherichia coli

lacZ-geeni kontrollin CAG-promoottorin kanssa tai ilman RGD-peptidin HI silmukka kuidun nupin verkkotunnus. AxdAdB-3 on mutantti replikaatiokompetentin Ad5 sisältävät SXGXE (STGHE) mutaation sijasta LXCXE (LTCHE) Rb sitovan motiivin E1A ja poistetaan E1B55 KD [19]. Jotta rakennettaisiin AxdAdB3-F /RGD käyttäen pWEAxKM-F /RGD, kloonasimme RGD-4C-aminohappoja HI silmukan kuidun nupin verkkotunnuksen aminohappotähteiden 546 ja 547 kanssa E3 deleetio. Aminohapposekvenssit RGD-mutaatio, olivat T 546 CDCRGDCFCP 547. AxdAdB3-F /RGD tuotettiin kotransfektoimalla HEK293 solujen pWEAxKM-F /RGD kosmidi-DNA, joka oli pilkottu

Cla

I ja

Pac

I yhdessä

EcoR

I- ja

Ase

I-pilkottu DNA-TPC (terminaali proteiinikompleksi) on AxdAdB3 [17]. Virusvektorit toimittivat RIKEN Gene Bank (Tsukuba, Japani) ja transfektoitiin HEK293-soluja tuottamaan adenovirusten ja virustiitteri määritettiin standardin plakkimäärityksellä.

infektion,-solut ympättiin 6- kuoppaiset levy ja kasvatettiin yön yli. Seuraavana päivänä solut infektoitiin AxCAlacZ tai AxCAZ3-F /RGD on infektiokertoimella (MOI) 100 24 tuntia. Expression adenovirus heksoniproteiinia infektoiduissa soluissa määritettiin Western blot -analyysillä. Samaan aikaan, solut infektoitiin AxCAlacZ tai AxCAZ3-F /RGD adenovirusten MOI 100: ssa 24 tuntia ja tasot adenoviruksen heksoniproteiinia infektoituneissa soluissa arvioitiin sitten käyttäen virtaussytometriaa (kuvattu seuraavassa kohdassa), jossa hiiren monoklonaalisella anti- heksoni-vasta-ainetta (MAB805, Chemicon International, Temecula, CA).

proteiinin uuttaminen ja Western blot

Solut lyysattiin 100 ui: aan lyysipuskuria, ja proteiinikonsentraatio mitattiin BCA-menetelmällä. Seuraavaksi yhtä suuret määrät proteiinia näytteitä supernatantista erotettiin käyttämällä natriumdodekyylisulfaatti-polyakryyliamidigeelielektroforeesi (SDS-PAGE) on 12% SDS-PAGE-geelillä ja tämän jälkeen siirrettiin polyvinylideenidifluoridi (Millipore, Billerica, MA, USA) . Sitten membraania inkuboitiin hiiren monoklonaalisella anti-heksoni-vasta-ainetta (MAB805, Chemicon International, Temecula, CA, USA) ja sen jälkeen inkuboitiin anti-hiiri-IgG-vasta-ainetta 1 tunnin ajan, jota seuraa parannettu kemiluminesenssin (ECL; Cell Signaling Technology, MI , CA, USA). Kalvo altistettiin sitten röntgen- filmit ja skannataan kvantitoimiseksi Image J ohjelmisto (National Institute of Heath, Bethesda, MD, USA).

Virtaussytometria ekspression määrittämiseksi CAR ja integriinin tasoja soluissa

Solut ympättiin 6-kuoppaiselle levylle ja kasvatettiin yön yli. Havaitsemiseksi ilmentymisen CAR ja integriinin α

Vp

3 ja α

Vp

5, solut irrotettiin käyttämällä entsyymiä vapaa dissosiaation ratkaisu ja sitten inkuboitiin hiiren monoklonaalisella anti-ihmisen CAR-vasta (Upstate Biotechnology, Lake Placid, NY, USA), joka on hiiren monoklonaalinen anti-ihmisen integriini α

Vp

3-vasta-ainetta (Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA, USA), tai hiiren monoklonaalisella anti-ihmisen integriini α

Vp

5-vasta-aineen (R 0,05 katsottiin tilastollisesti merkitsevä.

Tulokset

CAR ja integriinin ilmentyminen eturauhas- syöpäsolujen ja normaalien eturauhasen epiteelisolujen

Virtaussytometria tiedot osoittivat korkeaa CAR ilmaisun DU145 solut, maltillisina LNCaP ja RWPE-1-soluissa, ja hyvin alhainen PC3-soluissa (kuvio 1). Integriinin ilmentyminen oli myös erilainen näissä solulinjoissa, mutta CAR-negatiivinen PC3 solulinjaa ilmensivät runsaita tasoja integriinin α

Vp

5 (kuvio 1).

Soluja kasvatettiin ja immunovärjättiin CAR , integriini α

Vp

3, tai α

Vp

5-vasta-aineen ja sen jälkeen niille virtaussytometrinen analyysi. Pylväät, prosenttiosuudet ilmentävien solujen CAR, avp3 ja a vp 5. Data esitetään keskiarvoina ± keskihajonta kolmesta itsenäisestä kokeesta.

RGD-kuitu modifioitu infektion kapasiteetti adenovirusten

24 tunnin kuluttua infektion adenovirukset, Western blot-analyysiä käytettiin havaitsemaan ilmentymisen adenoviruksen heksoniproteiinia infektoituneissa soluissa (kuvio 2A). Heksoniproteiinia ilmentyminen oli samankaltainen CAR-positiivisissa solulinjoissa DU145, LNCaP ja RWPE-1 jälkeen joko AxCAlacZ tai AxCAZ3-F /RGD infektio. Kuitenkin CAR-negatiivinen PC3-solulinjassa (ekspressoi integriinin α

Vp

5) osoitti korkeita heksoniproteiinia ilmentymisen jälkeen AxCAZ3-F /RGD-infektion verrattuna infektoitujen solujen AxCAlacZ (kuvio 2A), mikä osoittaa, että RGD kuitu muutos parannettu adenovirus (AxCAZ3-F /RGD) infektio kapasiteettia CAR-negatiivisten syöpäsolujen.

, RGD-kuitu modifioitu infektio kapasiteetti adenovirusten. Western blot-analyysi heksoniproteiinia ilmentymisen mock-infektio (1) tai infektion AxCAlacZ (2) ja AxCAZ3-F /RGD (3) eturauhasen syöpäsoluja. B, virtaussytometrinen analyysi heksoniproteiinia ilmentymisen AxCAZ3-F /RGD adenovirus-infektoiduissa soluissa tai AxCAlacZ adenovirus-infektoiduissa soluissa. Data esitetään keskiarvoina ± standardipoikkeama kolmesta itsenäisestä kokeesta. ** P 0,01 ja N. S., ei ollut tilastollisesti merkitsevä. C, sytopaattiset vaikutukset RGD-kuidun osalta modifioitujen adenovirusten eturauhasen syöpäsoluja. Solut infektoitiin AxCAlacZ (timantit), AxCAZ3-F /RGD (neliöt), AxdAdB-3 (kolmiot) ja AxdAdB3-F /RGD (ympyrät) MOI-arvolla 30 0, 1, 3, 5, ja 7 päivää ja saatetaan sitten solunelinkykyisyysmääritys. Data esitetään keskiarvoina ± standardipoikkeama kolmesta itsenäisestä kokeesta. ** P 0,01 ja N. S., ei ollut tilastollisesti merkitsevä.

arvioitiin myös tarttuvuuden fluoresenssilla aktivoitujen solujen lajittelu havaitsemiseksi adenoviruksen heksoniproteiinia infektoituneissa soluissa (kuvio 2B). CAR-positiivisia DU145, LNCaP ja RWPE-1 solut osoittivat samanlaisia ​​ilmentymistä heksoniproteiinia jälkeen joko AxCAlacZ tai AxCAZ3-F /RGD infektio. Jyrkästi, CAR-negatiivinen solulinja PC3, jotka ilmentävät a vp 5, osoitti ilmentymistä heksoniproteiinia infektoiduissa soluissa AxCAZ3-F /RGD mutta ei AxCAlacZ, mikä oli yhdenmukainen tulosten kanssa Western blot.

sytopaattiset vaikutukset adenovirusten eturauhasen syöpäsolujen

AxdAdB-3 oli sytopaattisen CAR-positiivisten syöpäsolujen (LNCaP tai DU145) kuin CAR-negatiiviset solut (PC3). AxdAdB3-F /RGD aiheutti voimakas oncolysis sekä CAR-positiivisia ja CAR-negatiivinen eturauhassyövän solulinjoissa (kuvio 2C), mikä osoittaa, että RGD-kuitu modifioitu adenovirus (AxdAdB3-F /RGD) parannettu antituumorivaikutus in CAR-negatiivisten eturauhas- syöpäsolujen . Kuitenkin AxdAdB3-F /RGD ei sytopaattisen HPV-kuolemattomiksi normaalin eturauhasen RWPE-1 epiteelisolulinja (kuvio 2B).

antituumorivaikutuksen AxdAdB3-F /RGD

in vivo

ensin eturauhassyövän PC3 solu nude-hiirissä ja sitten suoraan injektoida AxdAdB3-F /RGD tai ohjaus virus AxdAdB-3 osaksi tuumorileesioissa kerran päivässä kolmen päivän ajan. Hiiret tapettiin päivänä 28 ja AxdAdB3-F /RGD antituumorivaikutus. Kasvaimen kasvua käyrä, ja kasvaimen tilavuus mitattiin (kuvio 3). Tuumoriksenografteja analysoitiin myös ilmentymisen viruksen heksoniproteiinia (kuvio 4). Tuloksemme osoittivat, että AxdAdB3-F /RGD inhiboi merkittävästi kasvaimen kasvua ksenograftien

in vi

vo on 4 viikkoa hoidon jälkeen verrattuna AxdAdB-3 (P 0,005; kuvio 3).

Eturauhassyöpä PC3-solut injektoidaan subkutaani- nude-hiiriin. Sen jälkeen, kun kasvain vaurioita oli noin 6-7 mm: n kokoisia virusta ruiskutettiin tuumorivaurioon kerran päivässä kolmen päivän ajan ja hiiret tapettiin päivänä 28. Kasvaimen tilavuus mitattiin sen jälkeen, kun eläimiä käsiteltiin viruksia (n = 5 ryhmää kohden) . Tiedot esitetään keskiarvona kasvaimen tilavuuden ± keskihajonta. ** P 0,005.

AxdAdB3-F /RGD hoito johti laajempi tuumorinekroositekijä kuin AxdAdB-3 (HE värjäystä, alkuperäinen suurennos x 200 yläpaneelin, x 400 keskellä paneeli). Immunohistokemiallinen värjäys AxdAdB3-F /RGD-käsiteltyjen kasvainten havaittiin adenoviruksen heksoniproteiinia (alapaneeli, alkuperäinen suurennos x 400).

Keskustelu

Nykyinen tutkimus osoittaa, että RGD kuitu pystyy muuttamaan antituumorivaikutuksen E1A- /E1B kaksinkertainen mutantti adenovirus AxdAdB3-F /RGD eturauhassyöpäsoluissa

in vitro

ja paljaan hiiren ksenograftimallissa. Nykyinen tiedot osoittavat, että AxdAdB3-F /RGD hallussaan voimakas terapeuttinen vaikutus eturauhassyövässä. AxdAdB3-F /RGD aiheutti voimakasta sytopaattisia vaikutuksia kaikissa eturauhassyövän solulinjoissa testattu riippumatta CAR ilmaisun. AxdAdB3-F /RGD myös esti kasvun eturauhassyövän nude-hiirissä. Kuitenkin ilman RGD muutoksia, AxdAdB-3-virus oli vain kasvaimia torjuvaa aktiivisuutta in CAR-positiivisten syöpäsolujen. Lisätutkimuksia tarvitaan arvioimaan yleistä turvallisuutta näiden adenovirusten ennen käyttöä ihmispotilaille.

adenovirusinfektio vaatii kiinnityksen viruksen pinnan kohdennettuja soluja sitomalla nupin verkkotunnus kuidun CAR, ja sitten myöhemmin sisäistämisen vuorovaikutuksessa RGD motiiveja Pentoniprote- pohja integriinireseptoreita α

Vp

3 ja α

Vp

5. [14, 20] Siten CAR on keskeinen rooli välittämisessä ja edistää adenovirusinfektio. Yleensä, syöpäsolut ilmentävät hyvin alhainen CAR-proteiinin ja vastustaa adenovirusinfektio, ja ovat näin ollen tulenkestävän adenoviruksen välittämän viruksen hoidon. [11] Nykyisessä tutkimuksessa olemme vahvistaneet, että AxdAdB-3-infektion pystyi vähentämään elinkelpoisuuden eturauhassyövän DU145 ja LNCaP solulinjat, jotka ilmentävät korkeita tai kohtuullisesti CAR, mutta oli pieni vaikutus PC3-solujen, joka ilmentää hyvin alhainen CAR. Itse asiassa, eturauhassyövän solulinjoissa ja kasvainkudoksissa usein ovat heikkeneminen tai CAR ilmaisun. [12] parantamiseksi tarttuvuuden onkolyyttinen adenoviruksen CAR-negatiivinen eturauhassyöpä, muutimme virus, jossa RGD tuottamiseksi AxdAdB3-F /RGD virus, joka merkittävästi parannettu onkolyyttisiä adenoviruksen toimintaa eturauhassyövässä.

AxdAdB3-F /RGD on virus, joka sisältää RGD-peptidi, joka voi välittää paitsi CAR riippuvaista viruksen pääsyn myös CAR-riippumaton ja RGD-integriinin (α

Vp

3 ja α

Vp

5) -riippuvaisella viruksen pääsyn kohdennettuja soluihin. Syöpäsolut ilmentävät CAR tai integriiniä olisi siten alttiita AxdAdB3-F /RGD infektio. Siten vaikka menetys tai vähentynyt CAR ilmentymistä esiintyy usein eturauhasen syöpä, runsas integriini α

Vp

3 ja α

Vp

5 pitäisi helpottaa virustartunta. [21] Nykyinen tutkimus vahvisti tämän hypoteesin ja osoittivat, että AxCAZ3-F /RGD parannettu infektio kapasiteettia verrattuna AxCAlacZ (ilman RGD) in CAR-negatiivinen PC3-soluissa. Lisäksi AxdAdB-3 oli sytopaattisen in CAR-positiivisten solujen verrattuna CAR-negatiivisia soluja; kuitenkin, AxdAdB3-F /RGD aiheuttama voimakas solutuhovaikutus vaikutuksia sekä CAR-positiivisten solujen ja CAR-negatiivisia soluja. Myös AxdAdB3-F /RGD esti ksenograftin kasvun nude-hiirimallissa. Nämä tiedot viittaavat siihen, että RGD kuitu modifioitu adenovirus lisää adenovirusinfektio kapasiteetti ja oncolysis teho kautta integriini (a vp 3 ja a vp 5) -riippuvaisella merkintä. Koska sen lisääntynyt infektion kapasiteetti, AxdAdB3-F /RGD pienemmällä viruksen annos voi mahdollisesti välttää joitakin haitallisia sivuvaikutuksia samalla kasvattaa tehoa viruslääkkeitä.

Nykyinen tiedot osoittavat, että tasot CAR ja integriinin α

Vp

3 ilmaisu ovat korkeat DU145 ja vähän PC3-soluissa, joka on samanlainen kuin havaintoja aikaisemmassa tutkimuksessa Adams

et

.

al

. [22]. Mielenkiintoista, nykyinen tutkimuksessa todettiin, että integriinin α

Vp

5 ilmaisu oli korkea DU145 ja PC3-soluissa. Tämä on ristiriidassa Adamsin tutkimuksen [22], joka osoitti, että integriini α

Vp

5 ilme on korkea DU145, mutta alhainen PC3-soluissa. Kuitenkin vastaa meidän tuloksia, tasot integriinin α

Vp

5 olivat korkeammat kuin integriini α

Vp

3 PC3 soluissa Adamsin raportissa. [22]. Kuitenkin määrät integriinin α

Vp

5 vaihteleva. Toinen edellinen tutkimus [23] osoitti myös, että PC3 ja LNCaP-soluista ilmensi integriini α

Vp

5 samalla tasolla, joka on sopusoinnussa nykyisen tuloksia. Siten lisätutkimuksia tarvitaan tarkistaa nämä tiedot ja niiden taustalla molekyylitason mekanismit.

Lisäksi nykyinen tulokset osoittavat, että AxdAdB3-F /RGD on vähemmän sytopaattisia vaikutuksia HPV-kuolemattomaksi normaalin eturauhasen epiteelisolujen. Adams

et

.

al

., [22] ilmoitetaan, että onkolyyttisiä adenoviruksen mutantti AdΔΔ eturauhassyövässä malleissa (AdΔΔ on mutaatio E1A CR-2) poistettava sitoutumista pRb, ja poisto 19 KD E1B tehosti onkolyyttisten teho. Kuitenkin julkaistut tutkimukset ovat osoittaneet, että joko E1A tai E1B yksittäinen mutantti pystyi replikoitumaan normaaleissa soluissa. [24,25] Aikaisemmat tutkimus osoitti, että E1A /E1 B Kaksoismutantissa onkolyyttinen adenovirus, AxdAdB-3, ei merkittävästi indusoi toksisuutta verrattuna että E1A tai E1B yksittäinen mutantti adenovirus normaalissa johdetut solulinjat eturauhasen. [10] nykyinen tutkimus on yhdenmukainen aiempien tutkimukset osoittavat, että E1A /E1 B kaksinkertainen mutantti onkolyyttinen adenovirus oli vähemmän myrkyllisiä kuin E1A tai E1B yksittäinen mutantit normaalissa soluissa, mutta oli samanlainen onkolyyttisten vaikutus syöpäsoluissa. [19, 26] Äskettäin kliiniset kokeet onkolyyttisten adenovirusten toimitettu kasvaimensisäisesti, vatsaonteloon ja laskimoon potilaille, joilla on uusiutuva tai kehittynyt kemoterapia tulenkestävää kiinteitä kasvaimia ilmoitettiin olevan turvallinen ja potentiaalisesti tehokkaita. [27] Siten, nämä tutkimukset ovat rohkaisevia ja tukevat käyttöä AxdAdB3 /F-RGD terapeuttisena aineena eturauhassyövän. Lisäksi eturauhasen syöpä on hyvin onkolyyttisiä adenoviruksen hoidon vuoksi helppo toimituksen adenoviruksen osaksi sisäiseen eturauhasen, joka mahdollistaa korkeat titterit adenoviruksen tartuttamaan kasvainsolut ilman levittäminen muille sivuille. [9] adenoviruksen replikaatio johtaa vapautuminen jälkeläisten tartuttaa vierekkäisten kasvainsoluja, mikä johtaa monistumiseen tulo virus. Jälleen E1A /E1 B kaksinkertainen mutantti onkolyyttinen adenovirus kykenee replikoitumaan kohdennettuja soluja ja hajottamaan syöpäsolujen on poikkeavuuksia p53 ja /tai p16 /Rb /E2F reittejä. [19] Eturauhassyöpä on usein monenlaisia ​​geneettisiä mutaatioita, mukaan lukien p53, pRb, ja p16 polkuja, [28] ja olisi ihanteellinen elin sivusto onkolyyttistä adenoviruksen terapia.

nykyinen tutkimus tarjoaa proof-of-periaate, ja lisää työtä tarvitaan ennen kuin meidän havainnot voivat olla käännetty kliinisissä sovelluksissa. Nykyinen tiedot osoittavat, että E1A /E1 B double-rajoitettu onkolyyttinen adenoviruksen RGD-kuitu muutos parantaa virusinfektio kapasiteetti ja antituumorivaikutus sekä CAR-positiivisten ja negatiivisten syöpäsolujen

in vitro

ja nude mouse ksenografteja, kun taas säästävät normaalit solut.