Krooninen sairaus

tiivistelmä

Background

Merkit, jotka voivat syrjiä veltto ja aggressiivinen eturauhasen kasvaimet tarvittu. Tutkimme geeni metylaatio ei-kasvainkudoksessa vieressä eturauhasen kasvain (NTAT) yhdessä eturauhassyövän kuolleisuus.

Methods

Kahdesta kohortteja peräkkäisen eturauhassyöpäpotilaalla diagnosoitu yksi patologian osastolla Torino, Italia, valitsimme 157 potilaalla, joiden NTAT ja seurasi niitä yli 14 vuotta. Saimme DNA NTAT parafiiniin upotetut eturauhassyövän kudosten ja käytetyn koettimen real-time PCR analysoida metylaation glutationi-S-transferaasin (GSTP1) ja adenomatoottisen polypoosin coli (APC) -geenin promoottorit.

Tulokset

yleisyys APC ja GSTP1 metylaatio NTAT oli välillä 40 ja 45%. Se liittyy metylaation eturauhassyövän kudosta samalla kaksi geeniä sekä korkean Gleason. Riskisuhde (HR) eturauhassyövän kuolleisuus oli 2,38 (95%: n luottamusväli: 1,23-4,61) APC metylaation, ja 2,92 (1,49-5,74) varten GSTP1 metylaatio NTAT. Se muuttui 1,91 (1,03-3,56) ja 1,60 (0,80-3,19) säätämisen jälkeen Gleason ja metylaatio eturauhasen kasvain kudosta. Vertailu 2 vs. 0 metyloituja geenien NTAT paljasti HR 4,30 (2,00-9,22), joka laski 2,40 (1,15-5,01) säädön jälkeen. Tulokset olivat vahvempia ensimmäiset 5 vuotta seurannassa (oikaistu HR: 3,29, 95% CI: 1,27-8,52).

Johtopäätökset

Muutokset geeni metyloinnin ovat varhainen tapahtuma eturauhasen syövän synty ja voi olla rooli syövän etenemiseen. Gene metylaation NTAT on mahdollista prognostinen merkitsemisaine arvioitu kliinisissä tutkimuksissa.

Citation: Richiardi L, Fiano V, Grasso C, Zugna D, Delsedime L, Gillio-Tos A, et al. (2013) metylointi APC ja GSTP1 in Non-kasvainkudoksessa Vieressä Eturauhasen Kasvain ja kuolleisuus eturauhassyöpään. PLoS ONE 8 (7): e68162. doi: 10,1371 /journal.pone.0068162

Editor: Jindan Yu, Northwestern University, Yhdysvallat

vastaanotettu: 26 marraskuu 2012; Hyväksytty: 29 toukokuu 2013; Julkaistu: 09 heinäkuu 2013

Copyright: © 2013 Richiardi et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tutkimus oli osittain tukee Italian Association for Cancer Research (AIRC), ja Piemonten alueen. Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, keräämiseen, analysointiin ja tulkintaan tietojen kirjoittamisessa käsikirjoituksen ja päätös jättää käsikirjoituksen julkaistavaksi.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Eturauhassyöpä on yleisin kasvain miehillä monissa populaatioissa, joissa raakaöljyn esiintyvyys 120-130 per 10

5 Euroopassa ja Yhdysvalloissa [1]. Yli 65% eturauhasen syöpiä diagnosoidaan jälkeen 70 vuotta, ja suurin osa näistä potilaista kuolee kilpailevien tapahtumien. Ilmaantuvuus eturauhasen syöpä on lisääntynyt dramaattisesti käyttöönoton jälkeen eturauhasen antigeenin (PSA) testaus lopussa 1980 [1]. Opportunistisia PSA-seulontaa eturauhassyövän on laajalle levinnyt, vaikka sen kyky vähentää kuolleisuutta keskustellaan edelleen. Päätelmät äskettäisessä katsauksessa Yhdysvaltain Preventive Services Task Force eivät tue PSA-seulontaa kuten edut eivät arvioitiin olevan suurempi kuin haitat [2].

korkea levinneisyys veltto eturauhassyövän ja käyttö opportunisti PSA-seulontaa eturauhassyövän voi johtaa yli-hoitoon. Ei tällä hetkellä ole yksimielisyyttä siitä, eturauhasen tai aktiivista valvontaa pitäisi tarjotaan sopiva hoito, varsinkin kun se tulee potilaita, joilla on alhainen riski eturauhassyövän [3], [4]. Sen vuoksi on tarpeen ymmärtää paremmin tekijöitä eturauhassyövän etenemisen sekä tunnistaa ennustetekijöitä merkkiaineita aggressiivinen eturauhassyöpä, joka voidaan havaita aikaan ensimmäisen diagnostisen koepala. Useat ryhmät, kuten meidän, ovat tutkineet epigeneettiset muutokset eturauhasen kasvain kudoksen pyritään tunnistamaan mahdolliset ennustetekijöitä markkereita [5] – [8]. Erityisesti useat tutkimukset ovat arvioineet läsnä CpG-saarekkeen (klustereita dinukleotidit on sytosiini ja guanosiini) metylaatio promoottori tiettyjä geenejä yhdessä biokemiallisten uusiutuminen tai kuolleisuus eturauhassyöpään. Edellisessä tutkimuksessa havaittiin, että APC (adenomatoottisen polypoosin coli) metylaation eturauhassyövän kudos liittyy 50% lisääntynyt riski kuolla eturauhassyöpään. Muutama tutkimukset tukevat tätä päätelmää [9] – [12], ja toiset löysi ennustetyövälineenä rooli metylaation muissa geeneissä [13], [14]. Metylointi GSTP1 (glutationi S-transferaasi) promoottori on laajimmin tutkittu epigeneettiset muutos eturauhasen syöpä. Se löytyy yli 80% eturauhasen syöpiä, jolla on pienempi esiintyvyys hyvänlaatuista kudoksessa [15]; se liittyy vahvasti Gleason pisteet, mutta sen ennustetekijöiden rooli riippumaton Gleason on epäselvä [5].

Tässä tutkimuksessa selvitettiin, jos metylaatiomuutokset ei-kasvainkudoksessa vieressä eturauhasen kasvain (NTAT) liittyvät eturauhassyövän ennustetta. Eturauhasen kasvaimet ovat usein multifokaalinen, ja useissa tutkimuksissa havaittu kentän cancerisation (eli muutoksia normaalin kudoksen vieressä kasvain) eturauhassyövässä. Tutkimuksissa verrattiin NTAT hyvänlaatuinen eturauhasen kudoksen ja /tai syövän kudoksen tunnistettu muutokset geenien ilmentyminen [16] – [20], telomere DNA-pitoisuus [21], mitokondrio-DNA [22], ja esiintyvyys metylaation joissakin geenejä, kuten APC [23 ], GSTP1 [24], [25] ja RARβ2 [23], [24]. Mekanismit nämä muutokset eivät ole ymmärretty (joko laajennettu vaikutukset syöpää sivuttaislaajenemista kasvain, tai vaikutus kasvaimen viereisen kudoksen), mutta kenttä cancerisation todennäköisesti on kliinistä merkitystä. Kuitenkin muutamia aikaisempia tutkimuksia tästä asiasta kuuluu seurannan kuolleisuuden, mikä haittaa arvioinnin ennustetekijöiden merkityksestä muutoksia NTAT. Tämä tutkimus keskittyy metyloinnin GSTP1 ja APC ei-kasvainkudoksessa. Sen tarkoituksena on arvioida, ovatko nämä molekyylimuutokset ovat mahdollisia ehdokkaita kuin ennustetekijöitä markkereita arvioimalla yhdessä kuolleisuus eturauhassyöpään.

Potilaat ja menetelmät

Tutkimus Väestö

Tutkimus sisäkkäisiä kaksi kohorttia yhteensä 459 peräkkäisen eturauhassyövän potilailla, joille tehtiin koepala, eturauhasen tai höyläysleikkaus eturauhasen (TURP) vuosien 1982 ja 1988 välillä tai 1993 ja 1996, on patologia osastolla San Giovanni Battista Hospital, Torino , Italia. Tiedot näiden kahden ikäryhmät on julkaistu aiemmin [5]. Saimme DNA varastoidaan parafinoidut eturauhasen kasvain kudosten kaikille 459 potilasta. DNA analysoitiin sitten APC, GSTP1 ja RUNX3 (Runt liittyvät transkriptiotekijä 3) -geenin metylaation käyttäen bisulfiittimodifikaatio ja metylaatiospesifinen PCR [5]. Tiedot iästä, lähde eturauhasen kasvain kudosten, oleskelu- ja kasvaimen oli saatavissa patologiaraporteista. Kaikki alkuperäiset diagnostisia dioja vastaavat suojaa käytetään molekyylitason analyysit jäljitettiin ja sitä tarkastellaan yhden uropathologist (LD), jotta määrittää yhtenäinen Gleason pisteet vallitsevien ohjeiden mukaan. Meillä ei ollut tietoa PSA-arvot tai muita kliinisiä tekijöitä. Aluksi kaksi ikäluokat seurattiin vuoteen 2007 [5], mutta tähän tutkimukseen, jatkoimme seurantaan asti 8. elokuuta 2010. Käytimme tietoja kuolintodistuksista luokitella kuolinsyy joko eturauhassyöpä, tai muista syistä.

Diagnostic diat potilaista kaksi ikäluokat analysoitiin tunnistaa NTAT. Me ulkopuolelle

a-priori

potilaita 1980 joiden diagnostinen dioja sisältyvät pääasiassa kasvainkudoksessa ja liittyi huomattavia teknisiä ongelmia eristämään NTAT ilman tartuntaa eturauhasen kasvain kudosta. Kaikki muut kudoksen lähteet, nimittäin tärpätti (n = 11) ja radikaali prostatectomies (n = 23) 1980-luvulta, ja biopsiat (n = 164), tärpätti (n = 45) ja radikaali prostatectomies (n = 34) 1990-luvulta, sisällytettiin olevassa arvioinnissa. Uropathologist havaitut ja yksi alue NTAT kullakin diagnostisen dian. Alueet eturauhasen intraepiteelisen neoplasian suljettiin pois. Jos useampi kuin yksi alue NTAT oli läsnä, patologi valitsi kauimpana kasvain. Jos oli enemmän kuin yksi alue, joka sai kriteereillä, suurin alue valittiin. Valittu osia NTAT oli vähintään 1,5 mm etäisyyden kasvainsoluista, linjassa aiempien tutkimusten epigeneettiset kentän vaikutus eturauhasen syöpä [23]. Tämä minimaalinen välimatka säilyi myös, kun kudokset oli suhteellisen huono (eli koepaloja); Muussa tapauksessa potilas jätettiin pois tutkimuksesta. Dioja lukien fyysisesti erillään kudosfragmenttien (97 potilasta), sekä NTAT ja kasvainkudoksen, in vivo välinen etäisyys fragmentit oli tuntematon, vaikka todennäköisesti se oli suurempi kuin 1,5 mm. Muutaman potilaille, jotkut levyt mukana NTAT vain; Näiden Objektilasit mukana tutkimuksessa.

Lopussa tämän prosessin, NTAT todettiin 157 potilaalla, joista kaikki olivat mukana tässä tutkimuksessa. Valintaprosessi alkuperäisestä 459 potilasta toimi eri tavalla riippuen lähteestä kasvainkudoksen ja kohortin (1980 tai 1990 ikäryhmät). Erityisesti valitsimme 91% alkuperäisestä potilaalla tehtiin TURP tai eturauhasen jommallakummalla kahdesta kohorttien, 33% niistä, jotka tehtiin biopsia vuoden 1990 kohortissa ja johdonmukaisesti meidän a-priori kriteerit, mikään näistä joka tehtiin biopsia 1980 kohortissa. Tämä valinta, joka lähtötilanteessa (ennen esiintymistä lopputulos), on epätodennäköistä, että ovat ottaneet harha Järjestöaktiivisuudella arviot ([26]).

Neljän viidestä (10 pm paksu) peräkkäinen leikattiin alkaen parafinoidut kudoksen 157 valitun diagnostisen dioja. Viipaleet päällekkäin tarkalleen liukuu johon uropathologist korostettuna valitun NTAT alueella. He olivat käsin leikeltiin, poistamalla osa NTAT kertakäyttöinen ohut terä, joka muutettiin väliin aihe. Sitten DNA onnistuneesti uutettu kaikille koehenkilöistä.

Tutkimus hyväksynyt eettinen komitea San Giovanni Battista Hospital – CTO /CRF /Maria Adelaide Hospital Torinon (Prot. N. 0021727, 19 maaliskuu 2007 ). Nimettömiksi geenien metylointi ovat saatavilla pyynnöstä päteviä tutkijoita varten akateemista, ei-kaupallinen tutkimus.

Molecular Analyysit

Kaupallinen QIAamp ® DNA FFPE Tissue Kit (Qiagen, Hilden, Saksa) käytettiin uuttamiseen ja puhdistukseen genomista DNA: ta. Riittävyys DNA tarkistettiin käyttäen PCR-monistus β-globiini taloudenhoito geeni [27].

genomisista DNA-näytteistä, mukaan lukien positiiviset kontrollit metyloidulle ja metyloitumaton tila, tehtiin bisulfiittimodifikaatio käyttäen Epitect bisulfiittimodifiointi Kit (Qiagen , Hilden, Saksa).

jälkeen bisulfiittimodifikaatio, PCR-määritys, jossa spesifisiä koettimia määrittää metylaatiostatuksen APC ja GSTP1 promoottoreita on käytetty. Tämän määrityksen avulla voidaan todeta metyloitu sytosiini suurella herkkyydellä (1 metyloitu sytosiini ulos 10000 metyloitumattomien sytosiinien [28]). Kukin PCR-reaktio sisälsi 1 x PCR-puskuria, 5,5 uM MgCl2, 200 uM dNTP: itä, 600 nM sekä alukkeita, 200 nM ja 80 nM spesifistä koetinta varten metyloinnin APC ja GSTP1 promoottorit, vastaavasti, 5 U Taq-, 2 ui muunnettua DNA: ta kanssa natriumbisulfiitin ja tislattua H

2O, jolloin saatiin lopullinen tilavuus on 25 ui. Reaktio suoritettiin thermocycler (iCycler, BioRad, CA, USA), jolla on seuraavat PCR-olosuhteissa: 1,30 minuuttia 95 ° C: ssa, 15 sekuntia 95 ° C: ssa, 1 minuutti alukkeen-spesifinen hehkutus lämpötilassa (60 ° C ) 50 syklin ajan, ja 10 minuutin ajan 72 ° C: ssa. Universal metyloitua DNA CpGenome (Intergen Co., Oxford, UK) käytettiin positiivisena kontrollina. Negatiiviset kontrollit olivat mukana kaikki reaktiot.

Alukkeet ja koettimet oli valittu perustuen julkaistuihin sekvensseihin (taulukko 1) [29], [30]. Koettimet suunnattu neljä-CpG-saarekkeiden kussakin geenissä.

Tiedot APC, GSTP1 ja RUNX3 metylaatio eturauhasen kasvainkudoksessa oli saatavissa jo aikaisemmissa tutkimus [5]. Kuitenkin, edellisen analyysien käytimme metylaatiospesifinen PCR sijasta koettimen real-time PCR. Koska jälkimmäinen menetelmä on suurempi herkkyys, me testata uudelleen kaikki eturauhasen kasvain kudosnäytteitä, joissa APC tai GSTP1 oli metyloimatonta, jotta tulokset eturauhasen kasvain kudosten ja NTAT enemmän vertailukelpoisia. Metylaatio RUNX3 ei arvioitava uudelleen, koska analyysit NTAT mukana vain APC ja GSTP1 ja mahdollinen ylimääräinen häiriövaikutukset RUNX3 metylaatio kasvainkudoksessa odotettiin olevan rajallinen. Johdonmukaisesti, kasvainkudoksen metylaation RUNX3 ei ole käsitellä tässä paperissa.

TILASTOANALYYSI

Käyttämällä monimuuttuja logistinen regressio, arvioimme esiintyvyys kertoimella suhteet APC tai GSTP1 metylaation NTAT valituille ominaisuudet (Gleason, metylointi eturauhasen kasvain kudosta).

vaikutus NTAT metylaation kussakin kaksi geenien kertyvä kuolleisuus eturauhassyöpään tutkittiin ottamalla huomioon kilpailevat riskit, ja erot kuolleisuudessa arvioitiin Gray testi [31]. Käytimme Coxin suhteellista vaaraa regressiomalleja arvioida riskisuhde (HR) kuolla eturauhassyöpään yhdessä metylaatio NTAT. Seuranta kesto käytettiin ajassa ja ikä diagnoosin otettiin jatkuvana muuttujana. Sekä graafinen tarkastukset ja virallisia testejä, jotka perustuvat Schoenfeld jäämät (p 0,14), osoitti, että suhteellinen vaara olettamus täyttyi. APC ja GSTP1 metylaatio NTAT analysoitiin erillisissä malleissa, sekä mallina tutkittaessa määrä metyloitu geenejä, 0 2. Kaikki mallit tehtiin molemmat ole säätämällä, ja korjattuna Gleason pisteet ja läsnäolo GSTP1 tai APC metylaatio eturauhasen kasvainkudoksessa.

Koska ennustetekijöitä markkereita tarvitaan lähinnä matala- ja keskiaktiivisen riskin kasvainten, ja aikaan diagnoosi, ennen kuin päätetään eturauhasen, teimme kaksi alaryhmäanalyyseissa rajoitettu: i) oppiaineista joiden Gleason pisteet 7 tai vähemmän tai ii) potilaista, joille tehtiin biopsia. Olemme myös arvioinut yhdistys metylaation NTAT lyhytaikaisia ​​kuolleisuus tekemällä erilliset analyysit rajoitu ensimmäiset 5 vuotta seurannassa.

Tulokset

Valitut ominaisuudet 157 oppiaineista ovat esitetty taulukossa 2. Useimmat aiheita diagnosoitiin 1990-luvulla, jossa on mediaanielossaolosta 6,79 vuotta. Niistä 128 henkilöillä, jotka kuolivat seurannan aikana, 43 miestä kuoli eturauhassyöpään. Lähde Kudos jakautunut tasaisesti koepala, TURP ja eturauhasen. Oli korkea esiintyvyys sekä APC metylaation (82,2%) ja GSTP1 metylaatio (84,1%) vuonna eturauhasen kasvainkudoksessa.

esiintyvyys metylaation NTAT oli 43,9% APC ja 42% GSTP1. Kuten esitetty taulukossa 3, kuvio metylaation NTAT korreloi että eturauhasen tuumorikudoksen: metylaatio joko kahden geenin eturauhassyövän kudos liittyy metyloinnin saman geenin NTAT. Gleason oli myös tärkeä tekijä sekä APC: n ja GSTP1 metylaatio NTAT.

Kuten kuviossa 1 NTAT metylaation sekä APC (Fig. 1a) ja GSTP1 (Fig. 1b) on liittynyt lisääntynyt riski pitkän aikavälin kuolleisuus eturauhassyöpään. Riskisuhteita läsnäolo metylaation korotettiin noin kolme poimuja (taulukko 4). Nämä heikennetty ottamisen jälkeen metylaation eturauhasessa kasvainkudoksessa, ja oikaistu Gleason (HR = 1,91, 95% CI: 1,03-3,56 APC ja HR = 1,60, 95% CI: 0,80-3,19 varten GSTP1). Analyysi määrä Metyloitujen geenien NTAT paljasti positiivinen yhteys kuolleisuus eturauhassyöpään (p-arvo suuntaus = 0,001): raakaa HR kuolla eturauhassyöpään 2 vs. 0 metyloitu geenit oli 4,30 (95% CI: 2,00 -9,22), joka laski 2,40 (95% CI: 1,15-5,01) säätämisen jälkeen molempien geenin metylaatio eturauhasen kasvain kudosten ja Gleason (taulukko 5). Samanlaisia ​​yhdistysten Löytöpaikka kun analyysit rajattu tutkimaan potilaalla on Gleason pisteet 7 tai vähemmän. Emme löytäneet todisteita vaikutus käyttöön otettua muutosta lähde kasvainkudoksen (p-arvo = 0,37). Tulokset rajoitettu potilaista, joille tehtiin biopsia on esitetty taulukossa 5. Taulukko 5 osoittaa myös tulokset analyyseistä rajoittuu ensimmäisen 5 vuoden seurannan. Vertailu 2 vs. 0 metyloitu geenien antoi raakaa HR 5,71 (95% CI: 2,23-14,6), ja 3,29 (95% CI: 1,27-8,52) ottamisen jälkeen geenin metylaatio eturauhasen kasvain kudosten ja Gleason pisteet.

keskustelu

Löysimme vahvan yhteyden läsnäolon APC ja GSTP1 metylaatio NTAT ja pitkän aikavälin kuolleisuus ja 5 vuoden kuolleisuus eturauhassyöpään. Yhdistys pysyi oikaistu Gleason pisteet ja analyyseissä rajoitettu tutkia aiheita, joiden Gleason seitsemän tai vähemmän ja potilailla, joille tehtiin biopsia.

Nämä tulokset tukevat hypoteesia, että DNA hypermetylaation on varhainen tapahtuma syövän synnyn joka voidaan havaita ennen kasvaimen tulee morfologisesti ilmeinen; ne tukevat myös käsitteen kentän cancerisation eturauhassyövässä ja sen rooli eturauhassyövän etenemiseen. Se, että rakenteessa metylaation on samanlainen NTAT ja eturauhasen kasvainkudoksen viittaa siihen, että muutokset todettu näissä kudoksissa ovat seurausta vastaavia mekanismeja, mukaan lukien sivusuunnassa laajentamisen tai vaikutuksen kasvaimeen tai diffuusi vaikutukset saman syöpää aiheuttavia aineita.

tutkittu metylaation GSTP1 ja APC koska niiden osallistuminen ratkaiseva keskeinen solukontrolli reittejä. GSTP1 on ”talonmies” geeni, estää genomista vahingot välittämä karsinogeenien tai hapettimien. Viat ”talonmies” geenit (so hypermetylaation) voi suosia alttiuden syövän kehittymisen. Lisäksi GSTP1 voivat häiritä kasvua tai selviytymistä signalointireittejä toimimalla tuumorisuppressorigeenin [32]. Analogisesti APC on hyvin tunnettu tuumorisuppressorigeeniä aluksi tunnistettu peräsuolen syöpä, joka on tärkeä osuus siinä Wnt-signalointireitin ja väliseen adheesioon. Se on vuorovaikutuksessa beeta-kateniinin, proteiinin mukana soluadheesiota ja liikkuvuutta. Sääntely beeta-kateniinin estää geenejä, jotka stimuloivat solujen jakautumista ja solujen liikakasvua [33].

Tutkimuksessamme käytimme kuolleisuus eturauhassyöpään kuin lopputulos (vastakohtana biokemiallisten uusiutuminen) ja meillä oli hyvin pitkä seuranta-ajan. Meillä oli sekä tutkimuksen koehenkilöillä, joilla matalan eturauhassyövän riskiä, ​​ja ne on aggressiivisempaa eturauhassyöpä. Lähde eturauhasen kasvain kudoksen mukana koepaloja, tärpätti ja radikaali prostatectomies.

esiintyvyys metylaation NTAT että löysimme on samanlainen tai korkeampi kuin havaittu aiemmissa tutkimuksissa, mikä kuitenkin on huomattavia välinen tutkimus vaihtelu [23] – [25], [34], [35]. Kaikki nämä arviot eivät ole suoraan vertailukelpoisia, koska tutkimukset käytetty eri protokollia kudosten näytteenottoa ja eri molekyylitekniikkaa. Meidän molekyylimenetelmät pyrkinyt maksimoimaan herkkyys ja seurasimme yksinkertainen protokolla saada viipaletta NTAT vähäisempi riski saastuminen eturauhasen kasvain kudosta. Vaikka emme voi sulkea pois

a-priori

että saastuminen ei esiinny joitakin näytteitä, sen taajuus oli korkeintaan rajallinen, mikä on osoituksena se, että yhdistyksen välillä metylaation NTAT ja eturauhassyövän kuolleisuus pysyi käytännössä ennallaan jälkeen oikaisu metylaation eturauhasen kasvain kudosta. Oli läsnäolo metylaation NTAT johtunut saastuminen metylaation eturauhasen kasvain kudosta, yhdistyksen välillä metylaation NTAT ja kuolleisuus eturauhassyöpään olisi voimakkaasti vähentänyt säädön jälkeen.

Tärkein rajoittava Tutkimuksemme on puute kliiniset ja patologiset muita tietoja kuin Gleason pisteet. Lisäksi olemme tutkineet asukkaan kanssa, keskimäärin korkeampi kuolleisuus eturauhassyöpään kuin tyypillinen nykyajan potilaan sarjassa. Nämä rajoitukset haittaavat mahdollisuutta arvioida todellisen ylimääräistä ennusteen arvioinnissa metylaation vuonna NTAT verrattuna nykyisin käytössä nomogrammit. Tutkimuksemme voi siten ehdottaa mahdollista roolia methytlation vuonna NTAT eturauhassyövän etenemiseen, mutta myös kliinisen käännös tämän havainnon vaatii lisätutkimuksia paremmin määritelty hoitopaikassa. Olemme myös puuttui tietoa hoitoa ilmoittautuminen, mikä tarkoittaa, että meidän kohortin sisältää heterogeeninen ryhmä potilaita, mikä edelleen estää suoraa kliinistä käännös havaintomme. Kuitenkin se, että lähde kasvainkudoksen (koepala, eturauhasen, TURP) ei ollut vaikutusta muokkaaja viittaa siihen, että meidän havaintoja metylaation NTAT ei selitä sekoittavat potilasjärjestöjen erilaisuuteen ja /tai hoidon aloittamisesta.

suuruus yhdistyksen välillä metylaation NTAT ja kuolleisuus eturauhassyöpään että löysimme on vahvempi kuin yleensä löytyy metylaation eturauhasen kasvainkudoksessa [5], [8] – [14]. Vaikka kaksi geeniä, jotka olemme tutkineet valittu

a priori

perusteella merkittäviä todisteita niiden mahdollinen rooli eturauhasen syövän synnyn, on todennäköistä, että ylimääräinen prognostisia tiedot voitiin saada tutkimus useampia geenejä .

Yhteenvetona havaintomme usein APC ja GSTP1 metylaatio NTAT ja niiden yhteydessä kuolleisuus eturauhassyöpään tukevat käsitystä, että muutoksia geenien metylointi on varhainen tapahtuma eturauhasen syövän synnyn ja rooli syövän etenemisessä . Vahvuus yhdessä kuolleisuus eturauhassyöpään ja se, että yhdistys pysyy potilaille, joiden Gleason alle 8 viittaavat siihen, että metylaatiokuvion vuonna NTAT voisi olla mahdollinen prognostinen markkeri eturauhassyövän testattavien tulevissa kliinisissä tutkimuksissa.