Krooninen sairaus

tiivistelmä

Tavoitteet /Hypoteesi

syöpätyypin tyyppejä, insuliinin reseptori isoformikoostumuksen tai insuliinin reseptorin alustalle (IRS) isoformit ovat erilaisia ​​terveeseen kudokseen. Tämä voi olla molekyyli linkin lisääntynyt syöpäriskiä diabeteksen ja lihavuuden. Koska tämä on vielä epäselvää eturauhassyövän, tutkimme IR isoformikoostumuksen ja IRS tasapaino eturauhassyöpä verrattuna hyvänlaatuinen ja kasvain viereisen hyvänlaatuinen eturauhasen kudosta ja toi tämän huomioon suhteessa solujen lisääntymisen.

Methods

Tutkimme 23 hyvänlaatuista eturauhasen näytteitä radikaali cystectomy tai eturauhasen hyvänlaatuisen liikakasvun leikkauksen, 30 näytettä hyvänlaatuinen kudoksesta suoraan vieressä eturauhassyövän pesäkkeitä ja 35 syövän näytteitä eri potilailla. RNA-ekspression tasoa insuliinin reseptorin isoformeja A ja B, IRS-1, IRS-2, ja IGF-1-reseptorin kvantitatiivisen reaaliaikaisen RT-PCR: llä. Lisäksi RNA- ja proteiini ilmentymä solusyklin säädin p27

Kip1 kvantifioitiin reaaliaikaisella RT-PCR ja immunohistokemia.

Tulokset

Insuliini-isoformi A paikkaan B suhde oli huomattavasti korkeampi syövän sekä kasvaimen viereiseen hyvänlaatuista eturauhasen kudosta verrattuna puhtaasti hyvänlaatuinen prostatan (p 0,05). IRS-1 IRS-2-suhteet olivat alhaisempia pahanlaatuisia kuin eturauhasen hyvänlaatuisen kudoksen (p 0,05). Nämä muuttunut suhdeluvut sekä syövän ja viereisten kudosten liittyi merkittävästi alentunut p27

Kip1 sisältöä (p 0,02). Mielenkiintoista, IGF-1-reseptorin tasot olivat merkittävästi pienemmät potilailla, joilla on tyypin 2 diabetes (p = 0,0019).

Johtopäätökset /tulkinta

Löysimme merkittäviä eroja insuliinin signalointikaskadissa välillä hyvänlaatuinen eturauhasen kudosta ja eturauhasen syöpä. Histologinen hyvänlaatuinen kudoksen vieressä syövän osoitti ekspressiokuvioiden samanlainen syöpäsairauksia. Meidän tulokset viittaavat rooli insuliinin signalointireitin eturauhassyövässä ja ympäröivän kudoksen ja voi siten olla merkitystä sekä uusia diagnostisia ja terapeuttisia lähestymistapoja maligniteetti.

Citation: Heni M, Hennenlotter J, Scharpf M, Lutz SZ, Schwentner C, Todenhöfer T, et ai. (2012) Insuliini Reseptori isoformien A ja B sekä insuliinireseptoreihin substraatit-1 ja -2 ilmentyvät eri eturauhassyövässä. PLoS ONE 7 (12): e50953. doi: 10,1371 /journal.pone.0050953

Editor: Giorgio Sesti, Universita Magna-Graecia di Catanzaro, Italia

vastaanotettu: 14 kesäkuu 2012; Hyväksytty: 29 lokakuu 2012; Julkaistu: 10 joulukuu 2012

Copyright: © 2012 Heni et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tutkimus tukivat avustus (01GI0925) Saksan liittovaltion opetus- ja tutkimusministeriö (BMBF) Saksan Center for Diabetes Research (DZD eV). Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

tyypin 2 diabetes (tyypin 2 diabetekseen) liittyy lisääntynyt riski useita syöpätyyppejä [1] – [3]. Riskiä, ​​että yleisin syöpä miehillä, eturauhasen syöpä, näyttää muuttumattomana diabetes [4], mutta tämä on pidetty johtui testosteronitasoja tyypin 2 diabetekseen [3], [5], [6]. Lisäksi elinaika diagnoosin jälkeen eturauhassyövän on lyhyempi miehillä tyypin 2 diabetekseen verrattuna miehillä [7].

Monien syöpien, muutoksia insuliinin signalointikaskadissa on raportoitu. Tämä alkaa tasolla insuliinin reseptorin (IR). Tämä reseptori esiintyy kaksi isoformia, isoformin A, joka ilmenee pääosin ennen syntymää ja isoformin B, jota ilmennetään aikuisten eriytetty kudoksessa [8]. Vaikka IR isoformi B on korkea affiniteetti insuliini ja on vastuussa suurimmasta tämän hormonin n vaikutuksia aineenvaihduntaan, isoformin A: lla on lisäksi suuri affiniteetti insuliinin kaltainen kasvutekijä (IGF) -II ja edistää solujen lisääntymistä. IR isoformin A poikkeuksellisesti ilmaistu monissa syöpäsoluissa [8]. Vaikka yli-ilmentyminen IR eturauhassyövässä ja korkeampi aktiivisuus signalointi ketjun loppupään on raportoitu [9] – [11], isoformi konfiguraatio tässä syöpä ei ole tutkittu vielä.

telakointi proteiinit alavirtaan IR ja muita reseptorityrosiinikinaaseja (esim IGF-1-reseptori), insuliinin reseptori substraatti (IRS) -1 ja IRS-2 ovat ratkaisevan edelleen signaalien kommunikointiin nämä reseptorit [12], [13]. Huolimatta IRS-1: n ja IRS-2: n korkea homologia, ne ovat ei-tarpeeton toimintoja metabolisen ja solujen lisääntymistä [14]. Nämä telakointi proteiineja on hyvin ominaista suhteen aineenvaihduntaa ja diabetes, mutta vain harvat tutkimukset tutkitaan niiden roolit maligniteettien [15]. Rooli näiden proteiinien eturauhasen syöpä on edelleen epäselvä.

Viimeaikaiset tutkimukset kuvaavat molekyylitason muutoksia histologisesti hyvänlaatuinen kudoksessa eturauhassyövän varustettujen rauhaset [9], [16]. Lisäksi tieteellinen kiinnostus tuumoribiologiassa, tietoa tällaiset muutokset on suuri merkitys kliiniseen käyttöön, esim. vahvistettaessa diagnoosi biopsialaitteet tai määrittää kirurgisen marginaalit.

Tavoitteet Tämän tutkimuksen tutkimaan

(i) B IR isoformikoostumuksen ja IGF-1-reseptorin ilmentymisen ja

(ii)

IRS tasapaino eturauhassyöpä verrattuna hyvänlaatuinen kudosta sekä kasvaimen viereiseen hyvänlaatuinen kudokseen; ja

(iii)

tuoda näitä tuloksia suhteessa p27

Kip1, joka on hyvin kuvattu solusyklin estäjä eturauhassyövässä [17].

Methods

tutkittiin näytteitä 65 potilaista altistetaan eturauhasen eturauhasen syöpä (ikä 50-76 [mediaani 65] vuotta). Eturauhasen kudos potilailta, joille tehtiin radikaaleja cystoprostatectomy johtuu virtsarakon syöpään (n = 13, mediaani-ikä 67 vuotta) tai transvesical /virtsaputken eturauhanen-adenooma-enucleation takia liikakasvun (n = 10, mediaani-ikä 70 vuotta) ilman merkkejä eturauhassyövän olivat mukana. Kliiniset ominaisuudet annetaan taulukossa 1. Kaikki potilaat, joilla on eturauhassyöpä, ennen leikkausta PSA-tasot sekä TNM-lavastus ja Gleason pisteet olivat saatavilla. Analysoitaessa Gleason pisteet, vertasimme näytteitä ”eturauhassyövän” ryhmä, jossa on Gleason pisteet jopa 3 + 4 (= 7, N = 11), jossa tällainen jonka Gleason pisteet 4 + 3 = 7 b ja korkeampi (N = 24).

tutkimuksen hyväksyi paikallinen eettinen komitea (Tübingenin yliopisto) ja kaikki osallistuvat potilaat antoivat kirjallisen tietoisen suostumuksensa.

optimaalisen laadun eturauhasen kudoksen ja välttää viivästyneen jäädyttämistä tuoreesta kudoksesta, menettely tehtiin että jäädytys tapahtuu välittömästi. Tissue normaalista prostates jäädytettiin nestetypessä heti kirurgisen näytteen resektion ( ”hyvänlaatuinen” ryhmä; N = 23). Näytteitä otettiin tutkimukseen, jos a) histopatologinen muokkaus koko kirurgisen näytteen paljastaneet mitään merkkejä eturauhassyövän ja b) edustava dia otokseen kudoksesta osoitti hyvänlaatuisen eturauhasen histologia.

kudoksille radikaali prostatektomia näyte (jolloin kasvain viereiseen eturauhaskudoksiin ”ja” eturauhassyöpäkudoksille) otettiin näytteet seuraavasti: heti resektion näyte oli digitaalisesti tunnustellaan ja leikkaa klo lokalisoinnin oletetusta kasvaimen alueella (alue reuna-kovuus ). Sitten reuna näytteen koko on noin 5 x 5 x 3 mm, leikattiin pois ja jaettu pitkittäisesti 3 lamellit, joista ulompi kaksi (I ja III) jäädytettiin nopeasti nestetypessä. Keskimmäinen lamellin (II) oli formaliinilla, parafiiniin ja prosessoida histologista dia. Jatkokäsittely Keskimmäisen luistin kokenut uropathologist päätti ryhmään kuuluminen rinnakkaisten jäädytetty kudos: jos ei ollut merkkejä eturauhassyövän diassa, vastaava kudos johti ”kasvain viereisen hyvänlaatuinen eturauhasen tissue’-ryhmä (N = 30). Jos dia paljasti kasvainkudoksen alle 60% pinta-alasta, vastaavien kudos jätettiin pois tutkimuksesta, koska se on sekoitettu kudoksen merkkiä. Jos kasvain osuus oli yli 60% dia, rinnakkainen kudos sisällytettiin analyysiin ”eturauhassyöpäkudoksen ’(N = 35).

Koska tätä lähestymistapaa, kukin analysoitu näyte on peräisin erilaisten potilasryhmien.

pakastetut kudosnäytteitä käytettiin RNA: n eristämistä, vastaava parafiini kudoksia immunohistokemiaa. Jäädytetyt näytteet hajotettiin RLT käyttäen Tissue lyser (Qiagen). RNA uutettiin RNeasy Mini Kit (Qiagen). PCR: t (kaksoiskappaleissa) suoritettiin LightCycler 480 (Roche Diagnostics) käyttäen Probes Master ja fluoresoivat koettimet päässä Universal Probe Kirjasto (Roche Diagnostics). Seuraavat reaaliaikainen PCR-protokollan [18]:

Denaturointi ohjelman (95 ° C 5 minuuttia), vahvistusasteen ja kvantifiointi ohjelma toistetaan 45 kertaa (95 ° C 10 sekunnin ajan, 60 ° C: ssa 30 sekuntia, 72 ° C 1 sekunnin ajan [fluoresenssin]), ja lopuksi jäähtyy ohjelman 4 ° C: ssa. Alukkeet suunniteltiin käyttäen Roche Probe suunnittelu 2 ohjelmisto (Roche diagnostiikkatietoja) ja ostettu TIB MOLBIOL (Berliini, Saksa).

Insuliini-isoformi A monistettiin käyttäen seuraavia alukkeita: eteenpäin TTT TCG TCC CCA GGC CAT, käänteinen CCACCGTCACATTCCCAAC. Insuliini-isoformi B monistettiin käyttäen alukkeita: eteenpäin TTT CGT CCC CAG AAA AAC CTC T, käänteinen CCA CCG TCA CAT TCC CAA C. Molemmat reaktiot käytetään 5 ’6-FAM fosforamidiitti-TCG CCA AGG GAC CTG CGT T-BBQ (4, 4-bis- [2-butyloctyloxy] -p-quaterphenyl) koettimena. Koska sisäinen valvonta, käytimme näitä PCR osuutta laskettaessa insuliinin-isoformi A koko insuliinin reseptorin pitoisuus kolmen ihmisen kudosten: In HepG2 hepatoomasolujen, 69% insuliinin reseptorin oli isoformin A, kun taas eriytettyä ihmisen rasvasolut ja luurankolihaksessa, vain 30% oli isoformi A. Nämä arvot ovat verrattavissa raportoidut arvot näiden kudosten kirjallisuudessa [8]. P27

kip1 (CDKN1B) monistettiin alukkeilla: eteenpäin GAG AGC CAG GAT GTC AGC G, käänteinen TTG TTT TGA GTA GAA GAA TCG TCG GT. Tämän reaktion, 5 ’6-FAM fosforamidiitti-CCT TTA ATT GGG GCT CCG GCT AAC T-grilli käytettiin koettimena. Toinen reaktioita käytetty standardi Roche antureista ja seuraavia alukkeita: IGF-1-reseptorin eteenpäin TCA GCG CTG CTG ATG TGT, käänteinen GGC TCA TGG TGA TCT TCT CC; Insuliini reseptori substraatti (IRS) -1 välittämään GCC TAT GCC AGC ATC AGT TT, käänteinen TTG CTG AGG TCA TTT AGG TCT TC; IRS-2 eteenpäin TGA CTT CTT GTC CCA CCA CTT, käänteinen CAT CCT GGT GAT AAA GCC AGA.

Immunohistokemiaa dioja poistettiin parafiini, vedettömät ja upotettiin 3% vetyperoksidia ratkaisu. Antigeeni haku suoritettiin dia kiehuvat sitraatti buffer.p27

kip1 proteiini havaittiin käyttäen Vectastain Elite ABC -kittiä (Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA). Sen jälkeen estämällä endogeenisen avidiini /biotiini jonka Vector estämällä Kit (Vector) ja epäspesifistä värjäystä inkuboimalla normaali seerumi (hevonen, ABC-kitti) monoklonaalinen hiiren klooni SX53G8 vasta-ainetta (Dako, (Santa Barbara, CA, USA) käytettiin laimennus ja 1:150 4 ° C: ssa yli yön inkuboinnin jälkeen. Sekundaarinen vasta-aine on käytetty mukaisesti valmistajan suositusten ja DAB (Vector) käytettiin visualisointiin. Kaikki objektilasit vastavärjättiin Mayerin hematoksyliinillä. Tonsil kudoksen toimi positiivisena kontrollina. Värjäys kvantifioitiin mukaan semikvantitatiivinen immunohistokemia viittaus asteikon vaihtelevat 0-300 kuvattua [19].

tilastolliset analyysit, JMP 9.0 (SAS Institute, Cary, NC, USA) käytettiin. Ei yleensä jakautunut tietoja transformoidaan logaritmisesti ennen tilastollista analyysiä. erot kahden ryhmän välillä testattiin Studentin t-testiä. erot useita ryhmiä testattiin ANOVA: lla, jota seuraa Tukey Kramer post-hoc testit. korrelaatiot analysoitiin käyttäen lineaarista regressioanalyysiä. Tulokset p 0,05 katsottiin tilastollisesti merkittäviksi.

tulokset

arvioimiseksi suhteellisten ekspressiotasojen, laskimme suhteet kahden IR-isoformeja, kunkin IR-isoformi ja IGF-1-reseptorin sekä välillä IRS 1 ja 2. Vertaamalla hyvänlaatuinen kudosta eturauhasen syöpä, IR isoformin A paikkaan B-suhde oli merkitsevästi erilainen hyväksi isoformin A syöpä verrattuna hyvänlaatuinen kudokseen (kuva 1 A). IRS-1 IRS-2-suhde muuttui suhteellisesti suurempi IRS-2: n ilmentymisen (kuvio 1 B). Sekä suhde, histologiset hyvänlaatuinen kudoksen vieressä syöpä oli merkittävästi erilainen kuin hyvänlaatuinen kudokseen, mutta ei eturauhassyövän (kuviot 1 A ja B). Vaikka ei ollut eroja ryhmien välillä IR isoformin A IGF-1-reseptorin suhteen (kuvio 1 C), IR isoformi B IGF-1-reseptorin suhteen oli merkitsevästi pienempi syövän ja viereiseen kudokseen verrattuna hyvänlaatuinen eturauhasen (kuvio 1 D) . Kun toistuva analyysit alaryhmässä kaikilla potilailla ilman diabetesta, kaikki erot raportoitu koko ryhmälle edelleen merkittäviä (kaikki post-hoc p 0,05, tuloksia ei ole esitetty). Lisäksi tässä alaryhmässä IR isoformin A IGF-1-reseptorin suhteen oli merkitsevästi pienempi histologisia hyvänlaatuinen kudoksen vieressä syöpään verrattuna kahteen muuhun kudostyypeistä (ANOVA p = 0,0099, post-hoc p 0,05).

Pylväät edustavat keinoin + SEM., N = 88. tiedot olivat log

e

transformoiduista ennen tilastollista analyysiä. Kun vertailu ryhmien välillä ANOVA aiheutti tilastollisesti merkittäviä eroja, Tukey Kramer jälkikäteen testi suoritettiin. Tilastollisesti merkitsevä Tämän testin tulokset on esitetty kuvioissa. (A) insuliini-isoformi A /insuliini-isoformi B suhde. ANOVA p = 0,0002. (B) IRS-1 /IRS-2 suhde. ANOVA p = 0,0426. (C) insuliini-isoformi A /IGF 1 -reseptorin suhteen. ANOVA p = 0,2. (D) insuliini-isoformi B /IGF 1 -reseptorin suhteen. ANOVA p = 0,0016. ANOVA – varianssianalyysi; IGF – insuliinin kaltainen kasvutekijä; IR – insuliini reseptori; IRS – insuliini reseptori substraatti; RNA – ribonukleiinihappo; SEM – keskivirhe keskiarvon.

Immunohistokemian ilmentymistä p27

Kip1 oli homogeenisesti jakautuneet rauhas renkaat (kuva 2 A ja B). Useimmissa näytettä tumavärjäystä oli läsnä, kun taas vain siinä tapauksessa, vahva värjäys ylimääräisen solulimafraktio havaittiin. Tulehdussolujen ja alusten värjätään positiivinen, mutta ei otettu huomioon määrällisen arvioinnin. Näytteet olivat käytettävissä immunohistokemiaan ja värjäys onnistui 68 näytettä. Oli merkittävä negatiivinen korrelaatio p27

Kip1 IR isoformin A B suhde (kuva 2 C). IRS-1 IRS-2-suhde, havaitsimme merkittävä positiivinen korrelaatio pf27

Kip1 (kuva 2 D). Vaikka p27

Kip1 korreloi positiivisesti IR-isoformi B on IGF-1-reseptorin suhteen (kuvio 2 F), mitään korrelaatiota IR-isoformin A IGF-1-reseptorin suhteen havaittiin (kuvio 2 E).

(a) ja (B): edustaja värjäyksen p27

Kip1 a: eturauhasen syöpä näytteen vahva värjäytyminen. B: eturauhasen syöpä näytteen heikkoa värjäytymistä. Bar = 100 pm. (C) – (F): Geenien ilmentyminen suhteet blotattiin vastaan ​​kvantifiointiin p27

Kip1 värjäystä. Lines edustaa sopiva viiva ± luottamusväli, N = 69. (C) insuliini-isoformi A /insuliini-isoformi B suhde. (D) IRS-1 /IRS-2 suhde. (E) insuliini-isoformi A /IGF 1 -reseptorin suhteen. (F) insuliini-isoformi B /IGF 1 -reseptorin suhteen. Tiedot olivat log

e

transformoiduista ennen tilastollista analyysiä. Korrelaatiot analysoitiin lineaarisella regressioanalyysillä. IRS – Insuliini reseptori substraatti; IGF – Insuliinin kaltaisen kasvutekijä.

55 näytettä, myös määrällisesti ilmentymistä p27

Kip1 (CDKN1B) on RNA-tasolla ja havaittiin positiivinen korrelaatio immunohistokemiallista proteiinin ilmentymistä data ( p = 0,0306). Kuten proteiinin data, p27

Kip1 RNA merkittävästi korreloi negatiivisesti IR isoformin A B-suhde (p = 0,0069). Sillä p27

Kip1 RNA, oli suuntaus positiivinen korrelaatio IRS-1 IRS-2-suhde (p = 0,0675) sekä suuntauksena positiivinen korrelaatio IR isoformin A IGF-1-reseptorin suhteen (p = 0,0862). Ei korrelaatio IR-isoformi B on IGF-1-reseptorin suhteen on havaittu (p = 0,7).

eturauhassyöpänäytteissä, yksikään analysoitiin mRNA: n ekspression suhteet liittyi Gleason, ennen leikkausta PSA-tasot tai WHO: n T- tai N-vaiheen (kaikki p≥0.2).

Kun verrattiin näytteitä kärsivien potilaiden tyypin 2 diabeteksen kanssa niin potilailta, joilla ei havaittu olevan eroja IR isoformin A paikkaan B suhde tai IRS 1 /IRS 2-suhde (p = 1,0 ja 0,7, tässä järjestyksessä). IGF-1-reseptorin tasot olivat kuitenkin merkittävästi pienempi potilailla, joilla on tyypin 2 diabetes (p = 0,0019).

Keskustelu

tutkineet koostumus molekyylien tärkeitä insuliinin signaalitransduktion eturauhassyövässä verrattuna hyvänlaatuista eturauhasen kudosta. Hyvänlaatuinen kudos joko johdettu täysin hyvänlaatuinen eturauhasen tai se oli histologisesti hyvänlaatuinen kudoksen vieressä eturauhassyöpää. Kiinnostavaa oli merkittäviä eroja pahanlaatuisia ja hyvänlaatuisia eturauhasen muttei välillä kasvain ja viereiseen kudokseen. Molemmissa välinen suhde IR-isoformeja A ja B oli erilainen hyväksi isoformin A ja IRS-1 IRS-2 -suhde poikkesi hyväksi IRS-2. Vaikka IR isoformin A pisteeseen B sekä IRS-1 IRS-2 suhteet eivät olleet erilaisia ​​potilailla, joilla on tyypin 2 diabetes, löysimme IGF-1-reseptorin vähennetään tässä potilasryhmässä.

monissa muissa syövissä [8], löydettiin korkeampi ilmentyminen IR isoformin verrattuna isoformin B. Näin ollen, löysimme alenemisesta solusyklin estäjä p27

Kip1 näytteistä, joilla on korkeampi IR-isoformin A. sekä insuliinin ja IGF- II voi aktivoida tämän isoformin; kuitenkin eroja alavirran signalointia [20]. Lisäksi IGF-II sitoutuu IGF-1-reseptoriin, ja tämän reseptorin vallinnut metabolisesti aktiivisen IR-isoformi B meidän eturauhassyöpänäytteissä. Tämä oli taas liittynyt muuttuneisiin p27

Kip1 tasoilla. Siten kaikki havainnot ennustaa lisääntynyt proliferatiiviset vaikutukset insuliinin ja IGF-II eturauhassyövässä. Kiinnostaa, spesifisten vasta-aineiden IR-isoformin A kehitteillä syövän hoitoon [8]. Perustuu havaintojen nämä lääkkeet saattavat myös tarjota hoitovaihtoehtojen eturauhassyövän.

Huomasimme eturauhassyöpä yli-ilmentää IRS-2 yli IRS-1. Mielenkiintoista, IRS-2 tunnistettiin positiivisena säätelijänä etäpesäke rintasyövän, kun taas IRS-1 voi olla vaimennin etäpesäkkeiden [21], [22]. Tämä rooli IRS-2 patogeneesissä etäpesäke näyttää olevan yleinen pääasiallinen joka koskee muiden pahanlaatuisten kasvainten sekä [15], [21]. Koska IRS-2 on alavirtaan IR, jolle ligandia, insuliini, on selvästi koholla tyypin 2 diabetekseen, meidän havainnot korkeamman IRS-2 eturauhassyövässä ehdottaa lisääntyneen riskin etäpesäkkeitä miehillä, joilla on diabetes. Tämän mukaisesti hypoteesin, selviytyminen diagnoosin jälkeen eturauhasen syöpä on huomattavasti lyhyempi potilailla, joilla on tyypin 2 diabetekseen verrattuna sellaisenaan ilman [7].

merkittävästi pienemmästä IGF-1-reseptorin ilmentymisen näytteissä potilailta, joilla on tyypin 2 diabetes on yllättävä meille. Emme ole tietoisia mistään raportteja tällaisen ilmiön eturauhasen tai muuta kudosta. Kuitenkin perustuu suhteellisen pieni määrä diabetes tutkimuksessamme, emme voineet analysoida tätä päätelmää erikseen eturauhassyövässä verrattuna terveen eturauhasen. Tietenkin tämä olisi tutkittava tulevissa tutkimuksissa, koska alennettu IGF-1-reseptorin saatavuus eturauhassyövän potilailla, joilla on tyypin 2 diabetes voi tehdä niistä todennäköisemmin vastata tiettyihin radio- tai kemoterapian avulla [23], [24], mutta saattavat ne kestävät hoidot, jotka vaikuttavat välittömästi IGF-1-reseptorin [24].

Yksi ylimääräinen yllättävä havainto Tutkimuksemme on ominaisuuksia histologisesti hyvänlaatuinen kudoksen vieressä eturauhassyöpää. Vaikka tämä kudos näkyy normaalin eturauhasen kudosta histologisesti, sen koostumus insuliinin signalointimolekyylien on enemmän samanlainen kuin syöpään kuin terveeseen kudokseen. Vertailukelpoinen havaintoja on tehty aikaisemmissa tutkimuksissa sekä [9], [10]. Ainakin kaksi erilaista selitykset ovat mahdollisia: insuliini signalointi cascade koko eturauhanen voitaisiin muuttaa kauan ennen syöpä kehittyy toisen osuman olisi tarpeen käynnistää syövän syntymässä. Toinen mahdollinen selitys on, että syöpä muuttaa ympäröivää kudosta ja aiheuttaa kudoksen gradientti IR /IRS alatyypin ilme. Huolimatta histologisesti hyvänlaatuinen, viereisen kudoksen voitaisiin sen vuoksi jo muuttunut kasvain ja voi lopulta satama Tuumorigeenisuustutkimuksissa. Tämä ilmiö esiintyy muiden pahanlaatuisten kasvainten esimerkiksi epigeneettiset muutokset ovat läsnä niin paljon kuin 4 cm: n päässä rintasyövän [25]. Jos toinen hypoteesi on pätevä lisätutkimuksiin, se voi olla suuri vaikutuksia eturauhassyövän diagnoosia: vaikka syöpä painopiste jäisi on eturauhasen koepalan, muuttunut IR /IRS koostumus näytteessä osoittaisi syöpä sisällä elin ja nopea lisätoimia.

Yksi rajoitus Tutkimuksemme on, että emme mittaa paastoinsuliini ja paasto glukoosipitoisuus potilailla, joilta tutkittiin näytteet ovat peräisin. Tärkeimpiä tekijöitä näiden parametrien, nimittäin ikä ja painoindeksi (BMI) sekä esiintyvyys tyypin 2 diabetes ja käyttö diabetes huumeita, ei ollut eroa potilasryhmien tutkimuksessamme. Kuitenkin insuliini ja glukoosin osoitettiin säätelemään IR isoformikoostumuksen [8], [26], [27], ja lisätutkimuksia sen vuoksi käsitellä näitä parametreja.

Lisäksi olisi hyvin mielenkiintoista vertailla IR /IRS koostumus proteiinin tason lisäksi mRNA-tasolla. Käytettävissä oleva määrä kudosta tutkimuksessamme ei riittänyt tarpeeksi western blotit. Lisäksi meillä oli pääsy vain yksi näyte pois kunkin eturauhasen. Opiskelu useita näytteitä yhdestä elin eri läheisyys paikalle syöpä saattaa sallia yksityiskohtaisia ​​tutkimuksiin mahdollisista kaltevuudet IR- ja IRS isoformikoostumuksen syövästä ympäröivään kudokseen. Tällaiset analyysit voivat purkaa syy meidän havainnointi yhtäläisyyksiä eturauhassyövän ja viereiseen kudokseen.

Yhdessä löysimme merkittäviä eroja IR signalointikaskadissa välillä hyvänlaatuinen eturauhasen kudoksen ja syöpä. Histologinen hyvänlaatuinen kudoksen vieressä eturauhassyövän osoitti ekspressiokuvioiden samanlainen syöpäsairauksia. Meidän tulokset viittaavat rooli insuliinin signalointireitin eturauhassyövässä ja voi siten olla merkitystä sekä uusien diagnostisten sekä hoitomenetelmät tässä maligniteetti.

Kiitokset

Kiitämme erinomaista teknistä avustuksella C. Haas ja L. Nono (Tübingenin yliopiston Tübingenin, Saksa).