Krooninen sairaus

tiivistelmä

Tarkoitus

Sisplatiini perustuu samanaikainen chemoradiation (CRT) on tavallinen hoito paikallisesti edennyt kohdunkaulan syöpä (CC). Glutationi-S-transferaasi (GST), faasin II antioksidantti-entsyymin indusoi oksidatiivista stressiä syntyy lääkkeiden ja reaktiivisia hapettimia. Tässä tutkimuksessa tehtiin arvioimaan yhdistys

GSTM1

,

T1

ja

P1

polymorfismien lopputulokseen CRT hoidon CC potilailla.

menetelmät

yhteensä 227 kohdunkaulan syövän potilaiden osuuksilla IIB-IIIB käsitelty samalla kemosädehoito hoito otettiin ja genotyypitettiin

GSTM1

,

T1

ja

P1

geenipolymorfismien by multiplex polymeraasiketjureaktiolla (mPCR) ja PCR-restriktiofragmenttipituuspolymorfismin (PCR-RFLP). Kokonaiselossaoloaika arvioitiin käyttämällä Kaplan-Meier selviytymisen toiminto ja Coxin suhteellisten riskien mallia. Kaikki tiedot analysoitiin SPSS (versio 21.0).

Tulokset

ositettu analyysi osoitti, että

GSTM1

null (M1-) genotyyppi liittyi merkitsevästi parempi eloonjäämisen potilailla vaiheen II B kohdunkaulan syöpä (log-rank

P

= 0,004) kuin tapaukset, joissa vaihe IIIA /IIIB. Kuolema ja uusiutumisen olivat merkittävästi suurempi potilailla, joilla

GSTM1

läsnä genotyyppi (M1 +) (

P

= 0,037 ja

P

= 0,003 vastaavasti) ja ne, joilla M1- oli vähentynyt vaara kuoleman, jonka korjattu riskisuhde ”HR” 0,47 (95% CI, 0,269-0,802,

P

= 0,006). Naiset, joilla M1- genotyyppi sekä yhdistettynä

GSTT1

null (T1-),

GSTP1

(AG + GG) ja

GSTT1

null /

GSTP1

(AG + GG) osoitti parempaa eloonjäämistä ja vähensi myös kuoleman riskiä (HR = 0,31,

P

= 0,016; riskisuhde = 0,45,

P

= 0,013; riskisuhde = 0,31,

P

= 0.02 vastaavasti).

Johtopäätökset

parhaan tietomme mukaan tämä on ensimmäinen tutkimus korreloivan yhdistys

GSTM1

,

T1

ja

P1

geenipolymorfismien hoidon lopputulokseen CRT käsitellyn CC potilaista. Tuloksemme ehdotti, että yksilöiden

GSTM1

null genotyypin ja yhdessä

GSTT1

null ja

GSTP1

(AG + GG) oli selviytymisen etu. Sellaiset geneettiset tutkimukset saattavat prognostista tietoa CRT käsitelty CC potilaista.

Citation: Abbas M, Kushwaha VS, Srivastava K, Banerjee M (2015) glutationi S-transferaasi geenipolymorfismien ja hoitotuloksia kohdunkaulan syövän Potilaat samanaikainen chemoradiation. PLoS ONE 10 (11): e0142501. doi: 10,1371 /journal.pone.0142501

Editor: Ken Mills, Belfastin yliopisto, Yhdistynyt Kuningaskunta

vastaanotettu: 24 huhtikuu 2015; Hyväksytty 22 lokakuuta 2015 Julkaistu: 16 marraskuu 2015

Copyright: © 2015 Abbas et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään

Data Saatavuus: kaikki asiaankuuluvat tiedot ovat paperi.

Rahoitus: Tätä työtä tukivat neuvoston Science and Technology, Uttar Pradesh, Intia; Huippuyksikön (Higher Education) Uttar Pradesh, Lucknow, Intia; Intian neuvoston Medical Research, New Delhi, Intia; ja Ministry of Science and Technology, New Delhi, Intia.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Sisplatiini perustuu samanaikainen chemoradiation (CRT ) on tavallinen hoito käytetään potilaille, joilla on paikallisesti edennyt kohdunkaulan syöpä. On tunnettua parantaa selviytymistä ja vähentää toistumisen määrä [1-2]. Kuitenkin ensisijainen tai hankittu chemoradioresistance ovat vakavia kliinisiä ongelmia, jotka edistävät taudin uusiutumisen, etenemistä ja kuolleisuutta [3-4]. Paikallinen ja etäinen pahenemisvaiheita johtua eloonjäämistä joidenkin syöpäsolujen johtaa hoidon epäonnistumiseen. Siksi tarvitaan uusia ja tehokkaampia lähestymistapoja tarvitaan tämän kysymyksen ratkaisemiseksi. Taustalla olevia mekanismeja heterogeeninen hoitovaste potilailla ovat monitekijäinen ja niihin vaihtelua geneettisen perustuslaissa. On yhä enemmän todisteita siitä, että geenit osallistuvat aineenvaihduntaan, DNA: n korjaukseen ja solunsisäisen signalointireitin vaikuttavat eri vaihtelevuutta hoitovasteen ja myrkyllisyys [5-6]. On olemassa jatkuva etsiä uusia ennustetekijöitä ja ennakoivan tekijöihin sen yksilöllisiä hoito-ohjelmia.

sytotoksisia vaikutuksia sekä säteilyn ja kemoterapian välittyvät pääasiassa sukupolvi reaktiivisia happiradikaaleja (ROS) ja niiden sivutuotteet aiheuttavat soluvaurioita . Kasvain solukuoleman ROS on joko suora sytotoksinen vaikutus tai solunsisäisiä apoptoottisia reittejä. Siksi eri entsyymien vaikuttaa ROS tasoilla vaikuttavat todennäköisesti potilaan ennustetta hoidon jälkeen [7-8]. Glutationi-S-transferaasi (GST) on vaiheen II metabolista entsyymiä, joka on tärkeä rooli solun puolustus vastaan ​​lukuisia haitallisia kemikaaleja tuotetaan sekä ulkoisesti ja endogeenisesti [9-10]. Se suojaa soluja oksidatiivista vaurioita kataly- konjugointi ROS [11-12], ja myös puhdistavat eri kemoterapeuttisten aineiden, kuten alkyloivat aineet, platina-yhdisteet ja adriamysiini [3]. Glutationi (GSH) on yksi tärkeimmistä detoxifying aineita, joita voidaan metabolisia entsyymejä, jotka käyttävät tripeptidit substraatteina. Tuolloin kemoterapiaa, riittävä aktiivisuus GST on ratkaiseva, koska aikana entsyymikatalysoitua Konjugointireaktio GSH, vesiliukoisuus lääkkeiden ja muiden myrkyllisten materiaalien kasvaa ja voidaan poistaa elimistöstä [13-14]. Monet tutkimukset ovat osoittaneet, että geneettistä vaihtelua näiden entsyymien, kuten

GSTP1

A313G (rs1695, Ile105Val) ja koko geenin deleetioita

GSTM1

ja

GSTT1

olla vaikutusta eloonjäämiseen ja toksisuudessa syöpätyypin hoidettu platinaa aineita ja säteilyä [9, 15-17].

Koska vapaan radikaalinsieppausaktiivisuus ja vieroitus platinaa aineita, rooli GST hoidon tehokkuuden ja eloonjäämisen kohdunkaulan syövän potilaille on uskottavalta. Tässä tutkimuksessa olemme tutkineet potilaan selviytymistä ja tauti uusiutuu suhteessa

GSTM1

,

T1

ja

P1

geenipolymorfismien hoidon jälkeen sisplatiinilla perustuu samanaikaisen chemoradiation ( CRT).

Materiaalit ja menetelmät

Ethics lausunto

Kohdunkaulan syöpää sairastavaa alle sisplatiinin perustuu samanaikainen chemoradiation (CRT) klo Sädehoito Department of king George Medical University (KGMU ), Lucknow, Intia (vuodesta 2009 vuoteen 2011) on mukana tässä tutkimuksessa. Tutkimus hyväksyi institutionaalisten eettisen komitean KGMU ja kaikille potilaille tarjotaan kirjallinen lupa niiden osallistumista tutkimukseen.

Potilaiden valinta ja Sample Collection

Viisi millilitraa laskimon verinäytteitä saatiin 244 aiheita alussa hoito. Potilaat olivat samoja etnisyyden, vaiheet II B-IIIB mukaan International Federation of Gynecology and Obstetrics (FIGO), joihin ei liity oheissairauksia ja altistetaan ensimmäinen kurssi hoitoon CRT. Demografiset ja kliinisiä tekijöitä potilaiden saatiin potilastiedot samalla lavastus ja kliininen diagnoosi potilaiden suoritettiin asiantuntijan kliinikot kohti suuntaviivojen FIGO.

Hoito ja Response arviointi

Kemoterapia ja säteilyannos oli sama kaikille potilaille. He saivat lantion ulkoisen säteen sädehoito (yhteensä annos 50 Gy 25 jaetta) viikoittain samanaikaisesti sisplatiinin (40 mg /m

2) seurasi kolme sovellusten korkea annosnopeus (HDR) intracavitory brakyhoito 7 Gy /jae yksi viikon välein. Potilaat, jotka eivät toteuttaa suunnitellut chemoradiation annosta tai rikkoneet hoito-protokollaa jätettiin pois tutkimuksesta. Hoitovastetta mitattiin RECIST kriteerien version 1.0 jälkeen kuukauden hoidon. Naiset Potilaita seurattiin hoidon jälkeen ja tarkastetaan hengissä. Ensisijainen päätepiste oli kokonaiselinaika (OS) alkaen diagnoosi kuolinpäivä mistä tahansa syystä. Naiset, jotka olivat elossa lopussa tutkimuksen sensuroitiin.

genotyypin

Perimän DNA uutettiin ääreisveren näytteistä standardin suolaamalla ulos menetelmää vähäisin muutoksin [18-19], tarkistetaan 1% agaroosigeelillä ja kvantifioida biophotometer (Eppendorf, Saksa).

GSTM1

ja

T1

null genotyyppien (M1- ja T1-) havaittiin käyttämällä multiplex polymeraasiketjureaktio (mPCR) spesifisiä alukkeita käyttäen.

GSTP1

313A G-polymorfismi genotyyppi PCR-restriktiofragmenttipituuspolymorfismin (PCR-RFLP) käyttäen spesifisiä alukkeita ja

Alw26

restriktioentsyymiä [20].

tilastollinen analyysi

Väestörakenteen ja kliiniset tiedot verrattiin poikki genotyyppien käyttäen χ

2 analyysiä ja Fisherin testiä. Genotyypin vaikutusta eloonjäämiseen (OS) arvioitiin Kaplan-Meier-toiminto ja Coxin suhteellisten riskien mallia. Erot OS eri genotyypit verrattiin käyttäen log-rank-testi. Hazard suhde (t) ja 95% luottamusväli (CI) arvioitiin monimuuttujamenetelmin Coxin suhteellisen vaarat malli /Coxin regressioanalyysi korjattuna iän, patologinen vaiheessa ja histopatologia. Kaikki

P

arvot olivat kaksipuolisia ja erot katsottiin tilastollisesti merkitsevä

P

0,05. Tilastolliset analyysit suoritettiin SPSS (versio 21.0).

Tulokset

Niistä 244 kohdunkaulan syövän potilaasta 227 oli mukana tutkimuksessa. Seitsemäntoista potilaalla oli protokolla rikkomuksia, joista kolme ei aloittaa hoitoa, kaksi eivät saaneet samanaikaisesti kemoterapia, yksi sai lisää kemoterapiaa ja yksitoista ei suoritettu käsittelyä.

Kliiniset ominaisuudet Potilaiden

potilaiden keski-ikä oli 49,0 ± 8,68 vuotta. Histopatologisia analyysi osoitti 216 potilasta (95,2%) ja okasolusyöpä ja loput 11 (4,8%) ja adenokarsinooma. Jakauma okasolusyöpä kolmeen ryhmään olivat 96 hyvin (44,4%), 79 kohtalainen (36,6%) ja 21 kehno (9,7%), kun taas ei erilaistumista ilmoitettiin histopatologisia raportissa 20 tapausta (9,3%). Lavastus kasvaimen mukaan FIGO oli 117 tapausta (51,5%), joilla on vaiheen II B ja 110 (48,5%), joilla on vaiheen III A + IIIB (taulukko 1).

genotyypin

jakelu

GSTM1

genotyyppien osoitti 64,8% tapauksista, joissa

GSTM1

läsnä (M1 +) ja 35,2%: lla

GSTM1

null (M1-) kun jakelu

GSTT1

osoitti 77,5% tapauksista, joissa

GSTT1

hetkellä (T1 +) ja 22,5%: lla

GSTT1

null (T1). Jakauma

GSTP1

genotyyppien osoitti 56,4% tapauksista AA, 43,6% Ag + GG. Adenokarsinooma kohdunkaula oli merkitsevästi suurempi potilailla, joilla AG + GG genotyypin

GSTP1

(

P

= 0,02). Kuitenkin jakelu

GSTM1

,

T1

ja

P1

ei (

P

0,05) osoittaa merkittävää yhteyttä iän ja kliinisen vaiheen ( Taulukko 1).

Survival potilaista

mediaani seuranta kesto kaikille potilaille oli 34 kuukautta (vaihteluväli, 4,2-63,0 kuukautta). Opintojen aikana (2009-2011) 31,3% potilaista sortunut kuolemaan. Keskimääräinen elinaika ei ollut saavutettu ja keskimääräinen elinaika oli 49,4 kuukautta (95% CI = 46,78-52,01). Havaittiin vaiheelta-ositettu analyysi että eloonjäämisaste potilailla, joilla on vaiheen II B oli merkittävästi parempi kuin ne, joilla on vaiheen III A /IIIB tapauksessa

GSTM1

null (M1-) yksilöt (log-rank

P

= 0,004). Uusiutunut tallennettiin 42 naista (18,5%). Suurin osa potilaista, joilla

GSTM1

null genotyyppi (M1-) olivat elossa ja taudista vapaan lopussa ajaksi (

P

= 0,037 ja

P

= 0,003, vastaavasti), kun taas yhtään vastaan ​​

GSTT1

P1

genotyyppien näytteillä samanlainen vaste (taulukko 1). Useiden testaus kaikkien kolmen tutkittu geenejä kliinis ominaisuudet osoittivat, että toistumisen riskiä väheni merkittävästi

GSTM1

null /

GSTT1

null ja

GSTM1

null /

GSTP1

AG + GG (

P

= 0,004 ja

P

= 0.021 vastaavasti). Mikään muu yhdistelmät osoittivat mitään merkittävää yhteyttä.

vaikutus GST genotyyppien eloonjäämiseen

Kaplain-Meier-toiminto ja Log rank testi hengissä tapauksissa

GSTM1

,

T1

ja

P1

genotyypit on esitetty kuvioissa 1 ja 2. Kaplain-Meier käyrä,

GSTM1

null genotyyppi (M1-) liittyi parempaan eloonjäämiseen (log-rank,

P

= 0,004). Yleinen eloonjääminen naisilla

GSTM1

null (M1-) genotyypin ja

GSTT1

null (M1- /T1-) ja

GSTP1

(M1- /AG + GG ) oli merkitsevästi parempi (log-rank,

P

= 0,021 ja

P

= 0.032 vastaavasti).

Survival ero log-rank-testi.

Survival ero log-rank-testi.

Association of

GSTM1

,

T1

ja

P1

genotyypit kanssa kokonaiselinaikaa analysoituna Coxin suhteellisten riskien mallia, ikä-, vaihe ja histopatologia on esitetty taulukossa 2. oli merkittävä väheneminen vaara kuoleman 0,47 naisten kanssa

GSTM1

null genotyyppi (M1-) verrattuna naisten ottaa

GSTM1

läsnä (M1 +) genotyyppi (95% CI, 0,269-0,803,

P

= 0,006). Ei ollut merkittävää yhteyttä

GSTT1

null ja

GSTP1

AG + GG genotyyppiä. Lisäksi yhdistetty vaikutus osoitti, että kaikki kolme geeniä on vaikutusta eloonjäämiseen. Naiset, joilla on

GSTM1

null genotyypin yhdistettynä

GSTT1

null (M1- /T1-) ja

GSTP1

(M1- /AG + GG) osoitti edelleen vähäisempi riski kuolema [riskisuhde oikaistu (HR) = 0,31, 95% CI, 0,121-0,805,

P

= 0,016; 0,45, 95% CI, 0,243-0,846,

P

= 0,013 vastaavasti]. Säädetty HR liittyvä kolminkertainen GST genotyyppi yhdistelmät on esitetty taulukossa 2. Analyysi osoitti parempaa eloonjäämistä potilailla, joilla on

GSTM1

null /

GSTT1

null /

GSTP1

AG + GG genotyypin yhdistelmä (riskisuhde = 0,31, 95% CI, 0,120-0,836,

P

= 0,02).

keskustelu

tärkein ennustettaessa kohdunkaulan syöpä potilaita pääasiassa hoidettu kemoterapia ovat vaiheessa ja kasvainhistologiaa [21]. Kuitenkin prognostisen tietojen kasvaimen vaiheesta ja histologia ei siinä määrin, että niitä voidaan käyttää vastaamaan nykyisiä vaatimuksia optimihoito. Myrkyllisyyttä ja kustannukset lisähoitoa voidaan perustella vain siinä potilasryhmässä on suuri riski paikallisia sekä kaukainen uusiutumisen. Vaikka chemoradiation eloonjäämistä ja Paikallista hallinnassa, 5 vuotta yleinen pysyvyys olento ~ 60% [22].

vaikutukset kemoterapiaa ja sädehoitoa ovat mahdollisesti muutettu GST entsyymit [23-24]. Yritettiin tunnistaa geneettinen polymorfia

GST

geeni, joka voi olla ennustavan merkkiaine vastaus ja selviytymisen sisplatiiniin perustuu samanaikainen chemoradiation (CRT) potilailla, joilla on edennyt kohdunkaulan syöpä. Sisplatiini (CDDP), joita käytetään yleisesti kohdunkaulan syövän hoitoon on myrkyttömäksi osittain

GST

enzyme.It vahvistettiin, että lisääntynyt GST ilmentyminen kasvainsoluissa määrittää resistenssin sisplatiinia ja muiden platina-yhdisteet [25-27] . Suora osallistuminen

GSTP1

vieroitus CDDP on muodostamalla CDDP-GSH addukteja [28-29].

Monet tutkimukset ehdotti, että GST tärkeä rooli kehityksessä tuumorisolujen vastustuskyky hoitoon. Reaktiivisia happiradikaaleja (ROS) muodostuu käsittelyn aikana sekä hoito

eli

. kemoterapiaa ja sädehoitoa. ROS on myös tuotettu osana sytotoksista aktiivisuutta kemoterapeuttisten aineiden [30-31]. Sädehoito voi tappaa syöpäsoluja joko suoraan vaikutusta kohde- molekyylien tai välillisesti ROS. Nämä ROS voivat vahingoittaa soluja, proteiineja ja DNA: n tai muiden solujen molekyylejä.

Kaksi mahdollisia mekanismeja on ehdotettu yhdistyksen välillä GST genotyyppien ja hoitotulokset, joista yksi on eroja karsinogeeni vahingoittaa DNA ja muut erot vieroitus käsittelemällä aineilla tai GST välittämä suoja hapettumista vastaan ​​hoidon aikana [23]. Lisäksi GST, geneettisten polymorfismien DNA korjaavien geenien tiedetään myös liittyvän kohdunkaulasyövän ja hoitotuloksia CRT [32-33]. Yksi tärkeistä DNA korjaus geenit vaikuttavat reaktio kohdunkaulan syöpä on neoadjuvanttikemoterapian oli

XRCC1

geenivariantin kodonissa 399 [34]. Toinen geenivariantin

RAD51

G172T osoitti myös yhdistys eloonjäämisaste kohdunkaulasyövän hoidetuilla potilailla CRT [2].

Useat tutkimukset osoittivat yhdistyksen välillä polymorfismia

GSTM1

ja

T1

kanssa hoitotuloksia potilailla, joilla on rintasyöpä tai lapsuuden leukemia [7,35], mutta ei havaittu yhteyttä kolorektaalisyövässä [11]. Mikään yksittäinen vaikutus

GSTM1

tai

T1

genotyyppien löydettiin mutta yhdistelmänä, null genotyypin molemmat liittyy huono selviytyminen munasarjasyöpä [36-37]. Esillä olevassa tutkimuksessa, alennettua vaara kuoleman ja parempi yleinen eloonjääminen havaittiin keskuudessa CRT hoidetuista naisista null genotyyppi

GSTM1

(M1-

) B, erityisesti yhdessä

GSTT1

null (M1- /T1-) ja

GSTP1

(M1- /AG + GG) (taulukko 2). Nämä tulokset vastaavat hypoteesin, että hoito olisi onnistunut potilailla, joilla on vähemmän tai ei ollenkaan GST aktiivisuutta.

Mukaan Stanulla et al., Uusiutumisen riskiä pienennettiin lasten kanssa

GSTM1

null,

GSTT1

null ja

GSTP1

GG genotyyppien akuutti lymfaattinen leukemia [38]. Tämä johti luultavasti vähentää tai ei entsyymiaktiivisuutta. Tämä tutkimus osoitti myös samanlainen tulos

i

.

e

. vähennetään merkittävästi uusiutumisen naisten vain

GSTM1

null genotyyppi (M1-).

yhteenliittymä

GSTP1

sekä hankittu ja luontainen vastustuskyky sisplatiinia havaittiin ihmisen paksusuolen syöpäsoluissa [39]. Ruokatorven syöpäpotilaat vähentynyt kasvaimensisäisenä

GSTP1

tasoilla rinnastettavalle FU /sisplatiinin perustuu kemosädehoito osoitti parempi eloonjääminen [40]. Kuitenkin McLeod et al., Ei löytänyt korrelaatiota

GSTP1

-A313G polymorfismin ja vastaus oksaliplatiinille kemoterapiaan kolorektaalisyövässä [41]. Tämä tutkimus osoitti, että

GSTP1

AG + GG polymorfismi yksilöllisesti eivät osoittaneet mitään yhteyttä selviytymisen mutta yhdistettynä

GSTM1

null genotyyppi (M1- /AG + GG) ja molemmat

GSTM1

ja

GSTT1

null genotyyppi (M1- /T1- /AG + GG) oli vähentynyt riskisuhde mikä tarkoittaa parempaa eloonjäämiseen.

Johtopäätös

tulokset osoittivat, että

GST

genotyypit korreloi kliininen tulos CRT käsitellään kohdunkaulan syöpäpotilailla. Yksilönvälisen ero johtaa ero aktiivisuuden GST entsyymit siten, jotka vaikuttavat hoitotulokseen. Kuitenkin geneettinen vaihtelu

GST

polymorfismit yksilöiden kesken voidaan tutkia suurempia potilasryhmissä, jotta voidaan kehittää käyttökelpoinen lääkehoidossa.

Kiitokset

Kiitämme neuvoston Science ja teknologia-Uttar Pradesh (CST-UP) ja huippuyksikkö (Higher Education) UP Govt., Lucknow, Intia; Intian neuvoston Medical Research (ICMR) ja Department of Science and Technology (DST), New Delhi, Intia heidän taloudellista tukea. M. A. on kiitollinen ICMR tutkimuksen apurahan.