Krooninen sairaus

tiivistelmä

Huolimatta viimeaikaisista edistysaskel lääketieteessä, lähes 50%: lla kolorektaalisyövän osoittavat taudin uusiutumista. Vaikka syyt korkean uusiutumisen ei täysin ymmärretä, kun läsnä on kemo- ja sädehoidon kestävä syövän varsi /kantasolujen kaltaisia ​​soluja, joissa monet oncomirs kuten microRNA-21 (miR-21) on voimistunut, voisi olla yksi taustalla aiheuttaa. miR-21 säätelee prosessit ja metastaasit mukaan vähen- tämisessä useita kasvain /metastaattinen synnyssä lukien PTEN (fosfataasi ja tensin homologi). Tuumorisuppressoriproteiinia PTEN ohjaa itseuudistumisen kantasoluja. Itse asiassa nykyinen tulokset osoittavat selvästi downregulation PTEN SCID-hiirissä ksenografteissa Mir-21 yliekspressoivissa paksusuolensyöpä HCT116-soluissa. Colonospheres jotka ovat hyvin rikastettu syövän varsi /varsi kuten solujen paljastaa nousi miR-21 ilmentyminen ja laski PTEN. Difluorinated kurkumiini (CDF), uusi analogi ravinnon ainesosan kurkumiinin, jonka on osoitettu estävän kasvua 5-fluorourasiili + Oksaliplatiini resistenttejä paksusuolen syöpäsoluja, vaimentua miR-21 kemiallis-resistenttejä paksusuolen syövän HCT116 ja HT-29-solujen ja palauttaa PTEN tasoilla edelleen alentamiseen Akt fosforylaation. Samanlaisia ​​tuloksia havaittiin myös metastaattisessa paksusuolen syövän SW620-soluissa. Koska PTEN-Akt antaa lääkeresistenssin eri maligniteetteja, mukaan lukien peräsuolen syöpä, havaintomme normaaliksi miR-21-PTEN-Akt-reitin CDF viittaa siihen, että yhdisteellä voisi olla potentiaalinen terapeuttinen aine kemoterapiaan kestävä peräsuolen syövän.

Citation: Roy S, Yu Y, Padhye SB, Sarkar FH, Majumdar AP (2013) Difluorinated-Curcumin (CDF) Palauttaa PTEN ilmentäminen koolonkarsinoomasoluissa Down-Regulating miR-21. PLoS ONE 8 (7): e68543. doi: 10,1371 /journal.pone.0068543

Editor: Ajay Goel, Baylor University Medical Center, Yhdysvallat

vastaanotettu: 28 maaliskuu 2013; Hyväksytty: 30 toukokuu 2013; Julkaistu: 24 heinäkuu 2013

Tämä on avoin-yhteys artikkeli, vapaa kaikki tekijänoikeudet, ja saa vapaasti jäljentää, levittää, välittää, modifioitu, rakennettu, tai muuten käyttää kuka tahansa laillista tarkoitusta. Teos on saatavilla Creative Commons CC0 public domain omistautumista.

Rahoitus: Tätä työtä tukivat apurahoja tohtori Majumdar National Institutes of Health /National Institute on Aging (AG014343) ja Department of Veterans Affairs (VA Merit Review). Rahoittajat Tämän tutkimuksen ei ollut roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistelua käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

syntymässä haaste hoidossa peräsuolen syöpä (CRC), kolmanneksi yleisin syöpä, on uusiutuminen tauti. Lähes 50% CRC potilaista osoittavat taudin uusiutumista. Läsnäolo kemo- ja radio-terapia vastustuskykyisten syövän varsi /varsi kaltaisia ​​soluja (CSCS /CSLCs) voisi olla yksi taustalla olevia syitä [1]. Nämä solut ovat pieniä väestö erilaistumattoman kasvaimen aloittamista soluja, joilla on ääretön itse uusiutumiskyky ja siksi kutsutaan kasvain aloittamista solut [2]. PTEN (fosfataasi ja tensin homologi), kasvainsuppressorigeenin on raportoitu pelata rooli kantasolujen itseuudistumista [3]. PTEN toimii lipidejä fosfataasi defosforyloivan fosfatidyyli 3,4,5-trisfosfaattia (PIP3), antagonisoi PI3-K /Akt-reitin. Downregulation PTEN eri ihmisen kasvaimissa on osoitettu johtavan vastustuskyvyn tavanomaiseen hoitoon ja syövän uusiutumisen hoidon aloittamisesta [4]. PTEN-Akt-reitin antaa lääkeresistenssin eri maligniteetteja, mukaan lukien peräsuolen syöpä [5], [6], [7], [8].

PTEN on yksi tavoite proteiinien miR-21, joka on yläreguloituja monissa maligniteetteja, mukaan lukien peräsuolen syöpä [9]. MikroRNA negatiivisesti säätelemään kohdegeenien pilkkomalla mRNA tai käännös tukahduttaminen [10]. miR-21 ei ainoastaan ​​säätelee kasvaimen kasvua vaan myös hyökkäyksen ja etäpesäkkeiden kohdistamalla useita kasvain /metastaattinen synnyssä kuten PTEN [11]. Olemme raportoineet, että 5-Fluorouracil ja Oksaliplatiini (FU-Ox) resistenttejä [kemiallis-resistenttejä (CR)] paksusuolensyöpä HCT116 ja HT29 näytteille rikastus CSCS /CSLCs ja kohonneet kypsän miR-21 ja että miR-21 indusoi stemness paksusuolen syöpäsoluissa [12]. Nämä havainnot sai meidät etsimään aineen (aineiden), jotka moduloivat solun tapahtumia, jotka liittyvät miR-21-induktio stemness paksusuolen syöpäsoluissa.

Difluorinated kurkumiini (CDF), joka on myrkytöntä analogi ruokavalion ainesosa curcumin kanssa paljon suurempi biosaatavuus kuin kanta-aineella [13], [14], on yksi tällainen yhdiste. CDF on osoitettu ilmentymisen moduloimiseksi miR-21 ja PTEN haimasyövän [15], [16], [17], [18] ja kasvua estäviä CR paksusuolen syövän soluja, ja indusoi hajoamisen colonospheres, jotka ovat hyvin rikastettu CSCS /CSLCs [19]. Lisäksi löysimme CDF jopa säätelemään miR-34 [20], joka on raportoitu vaimentua paksusuolen syöpä [21]. Sen määrittämiseksi, oliko CDF estoa kasvun CR paksusuolen syöpä saattaa osittain johtua palauttaminen miR-21-PTEN-Akt akseli, olemme tutkineet (a) suhde miR-21 ja PTEN ja (b) vaikutus CDF ilmenemistä koskevat miR-21, PTEN ja aktivointi Akt akselin eri koolonkarsinoomasoluissa.

Materiaalit ja menetelmät

Solulinjat ja viljelyolosuhdetta

ihmisen paksusuolen syöpäsolut HCT-116 (p53 villityyppi;

K-ras

mutantti), HCT-116 (p53 null;

K-ras

mutantti), HT-29 (p53 mutantti;

K-ras

wt) ja SW620 saatiin American Type Culture Collection (ATCC, Rockville, MD). Chemo-resistenttejä (CR) paksusuolen syövän soluja tuotettiin laboratoriossamme, kuten aiemmin on kuvattu [12]. Lyhyesti, HCT116 ja HT29-soluja inkuboitiin kliinisesti merkittävää annoksen FU-Ox (25 uM 5-FU: n ja 0,625 uM oksaliplatiinin) 72 tuntia. Väliaine poistettiin ja kiinnittyneet solut, jotka selvisivät FU-Ox loukkaus, viljeltiin DMEM: ssä, joka sisälsi 10% FBS: ää ilman lääkkeitä 3-4 päivää. Lisäosa remove FU-Ox toistettiin 12 kertaa. Elossa jälkeen solut jatkoviljeltiin ja altistetaan suurempia annoksia yhdistelmästä FU-Ox (100 uM 5-FU + 2,5 uM oksaliplatiinin) varten 2-3 viikkoa. Lopuksi, kemoterapia-resistentit solut pidettiin normaalissa elatusaineessa, joka sisälsi 50 uM 5-FU + 1,25 uM oksaliplatiini. SW620 paksusuolen syövän solulinjaa ylläpidettiin RPMI, jota oli täydennetty 10% naudan sikiön seerumia (FBS).

Colonospheres muodostettiin vanhempien HCT116 ja HT29-solulinjoja käyttäen DMEM /F12 (1: 1), johon oli lisätty B27 (Life Technologies, Gaithersburg, MD), kuten on raportoitu aiemmin [12] [22]. Lyhyesti, solujen annettiin kasvaa kuin erottaa ehto (kantasolujen media) ultra low-kiinnityslevyt (Corning Inc, Lowell, MA) 10-14 päivää. Kantasolujen alustaan ​​lisättiin B27 ,, 20 ng /ml EGF: ää (Sigma, St Louis, MO), 10 ng /ml fibroblastikasvutekijää (Sigma), ja antibiootti /antimykoottia. Vuoden loppuun 5 päivää, vain varsi kaltaisia ​​soluja kykenivät selviämään tarttumattomat olosuhteissa kun taas ei-kantasolujen kaltaisia ​​soluja kuoli pois. Tuore kantasolujen media toimitettiin eloonjääneiden solujen välein 5 päivää. Pallojen muodostunut valokuvattiin 10-kertainen suurennus. Solut siirrostettiin käyttäen 0,05% trypsiini-EDTA: a (Invitrogen), kun konfluentteja.

Hoito koolonsyöpäsolulinjoissa

CDF liuotettiin DMSO: hon. Tarvittaessa, CR HCT116, CR HT29 tai SW620-soluja käsiteltiin 100 nM CDF 72 tuntia. Kontrollisolut sai 0,05% DMSO: ta. 72 tunnin kuluttua solut altistetaan DNA, RNA ja proteiinien eristämiseksi.

Vieraslajisiirteen kudosnäytteiden

Eläin tutkimuspöytäkirja hyväksyttiin Wayne State University Institutional Animal Care ja Käytä komitea (IACUC) . -ksenografti Johdettu HCT116-soluja, jotka on stabiilisti transfektoitu joko miR-21 tai vektorin (pCMV), tuotettiin SCID-hiirissä, kuten on raportoitu aiemmin [12]. Formaliini-parafiiniin upotetut (FFPE) Ksenograftikudoksista käytettiin eristetty RNA: sta käyttäen miRNeasy FFPE Kit (Qiagen) kuten aiemmin on kuvattu [20].

Reaaliaikainen RT-PCR

RNA eristetty FFPE kudoksista käyttäen miRNeasy FFPE Kit (Qiagen) ja viljellyistä soluista käyttäen miREasy (Qiagen). Kaksikymmentä nanogrammaa kokonais- RNA: ta käänteistranskriptio cDNA: ksi käyttäen Universal cDNA Synthesis Kit (Exiqon, Woburn, MA) mukaan valmistajan protokollaa. Arvioida suhteellinen taso PTEN-mRNA: n, 500 ng RNA: ta käänteistranskriptio cDNA: ksi käyttäen Gene Amp Gold RNA PCR Kit (Applied Biosystems). Reaaliaikainen PCR suoritettiin käyttäen alukkeina miR-21 (Exiqon) ja PTEN [23] yhdessä SYBR

® Green PCR reagenssit (Applied Biosystems). Suhteellinen määrä miR-21 ja PTEN-mRNA: lle normalisoitiin RNU1α (Exiqon) ja ihmisen β-aktiini-geenissä, vastaavasti.

Western blot-analyysi

Western blot-analyysi suoritettiin myös standardin protokolla [22]. Lyhyesti, solut hajotettiin; proteiinipitoisuus määritettiin Bio-Rad Protein Assay -kittiä (Bio-Rad). Lysaatit elektroforeesilla SDS-PAGE: lla ja proteiinit siirrettiin polyvinylideenidifluoridi (PVDF) (Millipore) ja sen jälkeen estämällä BSA huoneenlämpötilassa 1 tunti. Sitten ne inkuboitiin primaarisilla vasta-aineilla yli yön 4 ° C: ssa, tämän jälkeen pestiin ja inkuboitiin yhteensopivien sekundaarisia vasta-aineita. Proteiinivyöhykkeet visualisoitiin ECL-prime western blotting detektioreagenssi (GE Healthcare Biosciences). Kalvot riisuttu tarpeen edelleen hyvää.

lusiferaasimäärityssysteamiä

HCT116-CR-soluja transfektoitiin joko anti-sense miR-21 tai negatiivinen kontrolli [NC] (Ambion) yhdessä lusiferaasireportteriplasmidi ottaa PTEN 3’UTR siementen sekvenssi miR-21 [11] ja pMIR-REPORT b-gal-ohjaus plasmidi-DNA: ta (Applied Biosystems) käyttäen Lipofectamine

TM 2000 mukaan manufaturer protokollan. Kuusi tuntia transfektion jälkeen, väliaine vaihdetaan ja solut transfektoitiin NC inkuboitiin 100 nM CDF 24 tuntia. Lusiferaasiaktiivisuus määritettiin käyttäen Promega lusiferaasin sarja sarjan manufaturer protokollan. β-galaktosidaasi analyysit suoritettiin normalisoida transfektion vaihtelua. Tiedot esitettiin suhteellinen lusiferaasiaktiivisuus mikrogrammaa proteiinia.

Tilastollinen analyysi

Tulokset ilmaistiin keskiarvoina ± SD. Vertailuja jatkuvia muuttujia kahden itsenäisen ryhmien lasketaan käyttäen kaksisuuntaisia ​​opiskelijan t-testiä. P-arvo 0,05 pidettiin tilastollisesti merkitsevä.

Tulokset

PTEN ilmentymistä vaimentua vuonna miR-21 yli- ilmentävien ksenografti

PTEN on tavoite oncomir miR-21. Tutkia suhdetta miR-21 ja PTEN, SCID-hiirten ksenograftien johdettu miR-21-ilmentävien HCT116-soluja (miR-21) ja vektori transfektoitiin kontrolli-soluja (pCMV) analysoitiin ilmentymisen miR-21 ja PTEN . Kuten odotettua, tiedot qRT-PCR-analyysi paljasti, että suhteelliset tasot miR-21 olivat merkitsevästi korkeammat ksenografteissa päässä miR-21 over-ilmentävät HCT-116-solujen, verrattuna kontrolleihin (Fig. 1A). Sen sijaan, PTEN mRNA-tasot on ksenografteissa päässä miR-21-ilmentäviä soluja merkittävästi vähentynyt verrattuna kontrolleihin (Fig. 1 B). Yhdessä tulokset osoittavat käänteinen suhde miR-21 ja PTEN. Tämä havainto on samanlainen kuin mitä edellä todettiin ja PTEN-proteiinin tasot miR-21 hyperexpressing paksusuolen syövän HCT-116-solut (12).

Quantitative reaaliaikaisen RT-PCR suoritettiin RNA eristettiin formaliiniin parafiiniin upotettu ksenografteissa.

PTEN-Akt-reitin aktivoidaan colonosphere

Colonospheres, pidetään korvike kasvaimia, ovat erittäin rikastettu CSCS /CSLCs [22]. Sen määrittämiseksi, onko miR-21 ja sen kohdeproteiinin PTEN osallistuvat säännellään funktionaalisia ominaisuuksia colonospheres, ilmauksia miR-21, PTEN ja Akt, loppupään efektoreja PTENin analysoitiin colonospheres syntyvät HCT116 ja HT29. Sekä HCT116 ja HT29 solulinjoissa muodostunut monipuolinen pallosia (kuviot. 2A B; yläpaneeli). Expression of miR-21, määritettynä qRT-PCR: llä, havaittiin olevan 4-5-kertainen colonospheres, on muodostettu molemmissa solulinjoissa, verrattuna niiden vastaavat emosoluista (kuviot. 2A 2B, keskimmäinen ruutu). Toisaalta, Western-blot-analyysi osoitti vähentynyttä ilmentymistä PTEN on colonospheres, verrattuna vastaavaan emosoluista (kuviot. 2A 2B, alempi paneeli). Kuten odotettua, vähennys PTEN in colonospheres liittyi lisääntynyt aktivointi Akt, kuten on osoitettu lisääntyi tuntuvasti suhteelliset pitoisuudet p-Akt verrattuna vastaavaan vanhempien solut (kuviot. 2A 2B pienempi. Paneeli). Yhdessä tulokset viittaavat siihen, että kasvu miR-21 colonospheres joka johtaa vähenemiseen PTEN aktivoi Akt signalointireitin, joka voi olla rooli säätelyssä kasvaimia ominaisuudet colonospheres jotka rikastettu CSCS /CSLCs.

CDF palauttaa PTEN ilmentymisen paksusuolen syöpäsoluissa

Aiemmin olemme osoittaneet, että CR paksusuolen syövän soluja ei ainoastaan ​​rikastettu CSCS /CSLCs mutta myös ilmaista huomattavasti korkeampi miR-21 kuin vanhemman kollegansa [12]. Koska CDF on aiemmin osoitettu estävän kasvua CR paksusuolensyöpä HCT116 ja HT29-soluja, sai meidät onko CDF aiheuttama kasvun esto CR koolonkarsinoomasoluissa voitaisiin katsoa palauttaminen miR-21-PTEN-Akt-akselilla. Itse asiassa, ilmaus miR-21 CR HCT116 ja HT29 oli merkittävästi vähentynyt, kun niitä inkuboitiin 100 nM CDF, verrattuna vastaavaan DMSO kontrolleihin (kuviot. 3A ja 3B, ylempi paneeli). Tähän liittyi lisääntynyt ilmentyminen PTEN ja vähentäminen Pakt (aktivoitu muoto) CR HCT116 ja HT29 (kuviot. 3A havaittavaa muutosta ei-fosforyloitua (yhteensä) muoto Akt joko CR HCT116 tai CR HT29 havaittiin vastauksena CDF (kuviot. 3A ja 3B, alempi paneeli). Vaikutus CDF Mir-21 aiheuttama PTEN ilmentyminen vahvistivat lusiferaasianalyysissä. CR-HCT116-solut transfektoitiin lusiferaasireportteri- konstruktilla, joka sisältää PTEN 3’UTR miR-21 siementen sekvenssi ja sen jälkeen inkuboitiin 100 nM CDF 24 tuntia. CDF huomattavasti lusiferaasiaktiivisuuden, kontrolliin nähden (Fig. 3C). Vertailun vuoksi, CR-HCT116-solut transfektoitiin antisense–miR-21, joka paljasti kasvu PTEN-lusiferaasiaktiivisuuden (Fig. 3C). Yhdessä tiedot paljastavat, että CR koolonkarsinoomasoluissa, CDF down-regulation miR-21 tuloksena ylösajon PTEN, joka johtaa vähentyneeseen aktivaatioon Akt. Nämä havainnot viittaavat siihen, että CDF palauttaa miR-21-PTEN ja Akt akselin kemiallis-resistenttejä (CR) koolonkarsinoomasoluissa.

Controls inkuboitiin DMSO. Western-blot (alempi paneeli) osoittivat muutoksia suhteelliset pitoisuudet PTEN, Pakt ja yhteensä Akt in kemiallis-resistenttien HCT116 ja HT29 vastauksena CDF tai DMSO. (C) CDF hoitoon tai anti-miR-21 transfektio lisää lusiferaasiaktiivisuuden kemiallis-resistenttien HCT116 transfektoitujen solujen pGL3-luc-konstrukti ottaa PTEN-miR21 siemen järjestyksessä. NC = negatiivinen kontrolli.

edelleen tutkia CDF vaikuttaisi ilmaus miR-21- PTEN – Akt akseli metastaattisessa paksusuolen syöpä, teimme saman kokeen SW620 solulinja, joka syntyi metastaasia paksusuolisyöpäkudoksessa. Kuten on havaittu CR-HCT116 ja HT29, CDF aiheutti selvä vähentäminen miR-21 ilmentyminen SW620-soluissa (kuvio. 4). Tähän liittyi lisääntynyt PTEN tasoilla ja vähentäminen fosforyloituu muodossa Akt, verrattuna vastaavaan säätimet (Fig. 4).

Länsi-blotteja (oikea paneeli), joka osoittaa muutoksia suhteellisessa ilmentymä PTEN, Pakt ja yhteensä Akt in SW620-soluissa 72 tunnin inkubaation CDF tai DMSO (valvonta). Ihmisen β-aktiini toimi latauskontrollina.

Keskustelu

Huolimatta viimeaikaisista edistysaskel lääketieteessä, lähes 50%: lla CRC osoittavat kasvaimen uusiutumisen. Vaikka syitä tähän ei täysin tunneta, se voi osittain johtua kyvyttömyys kohdistaa CSCS /CSLCs ilmentävien syöpä kantasolujen markkereita, säilyttävät rajattomat mahdollisuudet uudistua ja kestävät perinteisiin hoitoihin [24] tuloksena kemoterapiaa tulenkestävä kasvaimia. Tämä selittää, miksi se on vaikeaa täysin poistaa syöpä ja miksi uusiutuminen on aina läsnä uhka.

Vaikka uskotaan laajasti, että syöpä kantasolut syntyvät normaalista kantasolut tai esi mutatoitumisen [24], joka on parempi ymmärtäminen molekyyli- ja biokemiallisia muutoksia, jotka liittyvät syövän kantasoluja on tärkeää kehitystä kohdennettujen hoitoja. Olemme raportoineet, että CR paksusuolen syöpäsoluja, jotka on rikastettu CSCS /CSLCs, helposti pallosten muodostamiseksi ja osoittavat lisääntyneen ekspression miR-21, joka on osoitettu voimistuvan monissa maligniteettien, mukaan lukien paksusuolen syöpä [12], [25] . Expression of miR-21 paksunsuolen limakalvolla on myös todettu lisäävän aikana ikääntyminen, kun peräsuolisyövän ilmaantuvuus nousee jyrkästi [26]. Vaikka tarkka asema miR-21 etenemisen paksusuolen syövän synnyn ei ole täysin ymmärretty, raportoimme miR-21 aiheuttaa stemness paksusuolen syöpäsoluissa vähen- tämisessä TGFli-reseptorin [26].

Tulokset nykyiseen tutkimus osoittaa, että colonospheres, jotka ovat erittäin rikastettu CSCS /CSLCs lisääntynyt ilmentyminen miR-21 [12], [22], näyttelytila ​​vähentynyt ilmentyminen tuumorisuppressoriproteiinia PTEN, tavoite miR-21. Nykyinen tiedot osoittavat myös käänteinen suhde miR-21 ja PTEN ja tukee väitettä, jonka miR-21 säätelee ilmaisua PTEN. Menetys PTEN, havaittiin miR-21-ilmentäviä paksusuolen syöpäsoluissa voisi osittain olla vastuussa aktivointi Akt, mistä on osoituksena kohonneet Pakt in colonospheres. Aktivoitunut Akt signalointireitin voisi olla keskeinen rooli kasvun nopeutuminen on ksenograftin Mir-21-yliekspressoivassa koolonsyöpäsoluihin SCID-hiirissä, jotka raportoimme aikaisemmin [12] ja se voisi antaa lääkeresistenssin eri syöpäsairauksia lukien peräsuolen syöpä [5 ], [6], [7], [8].

miR-21 mahdollisen ”oncomir” vetoaa meidät etsimään aineen (aineiden), joka voi käyttää tehokkaasti säätelevät vaimentaen miR-21 paksusuolensyöpä soluja ja siten vähentää niiden Tuumorigeenisuustutkimuksissa. Perustelut jatkaa tätä linjaa tutkimuksen tulee meidän viime havainto, että downregulation miR-21 kemiallis-resistenttien koolonsyöpäsoluihin aiheuttaa erilaistumista ja tekevät niistä alttiita syöpälääkkeet, erityisesti difluorinated curcumin (CDF), analogi ruokavalion ainesosan curcumin suuremmalla biosaatavuus kuin kanta-aineella [13], [14], [27]. Viimeaikaiset tutkimukset tämän laboratorion ovat myös osoittaneet, että CDF estää niiden kasvun CR paksusuolen syövän soluja ja myös ylössäätelee ilmentymistä miR-34, joka on vaimentua paksusuolen kasvaimissa [20]. Lisäksi, aikaisemmat tutkimukset ovat osoittaneet, että CDF ilmentymisen moduloimiseksi miR-21 ja PTEN haimasyövän [18]. Siksi CDF voidaan pitää mahdollisena terapeuttisena aineena sekä haiman ja peräsuolen syöpiä. Lisäksi meidän havainto, että CDF moduloi miR-21-PTEN-Akt akseli sekä p53-positiivisia ja p53-negatiivinen koolonsyöpäsoluihin viittaa siihen, että CDF voisivat olla terapeuttisesti tehokkaita p53-positiivisia ja negatiivisia koolontuumoreissa. Kiinnostavaa CDF on myös todettu olevan tehokas palauttamaan PTEN tasojen metastaattinen paksusuolisyöpä SW620. Yhdessä tulokset viittaavat siihen, että CDF voi olla tehokas terapeuttinen aine eri vaiheissa paksusuolensyöpä. Addtionally, että CDF modulaatio miR-21-PTEN-Akt akselin voitu havaita kemiallis-resistenttejä paksusuolen syövän soluja, jotka ovat hyvin rikastettuja CSCS /CSLCs viittaa siihen, että tämä uusi analogi, kurkuma voi olla myös terapeuttisesti tehokas toistuvia syöpä, jonka tiedetään olevan vastustuskykyisiä tavanomaisen kemoterapian [14].

Yhteenvetona nykyiseen tiedot osoittavat, että miR-21 ja PTEN ovat kääntäen verrannollisia, että lisääntynyt ilmentyminen miR-21 johtaa vähenemiseen PTEN että johdoissa aktivaatioon Akt signalointia. Nämä tapahtumat voivat pelata keskeinen rooli syövän etenemiseen. Lisäksi meidän havainto, että miR-21-välitteisen PTEN-Akt signalointia voitaisiin normalisoida CDF kemiallis-resistenttejä paksusuolen syövän soluja, viittaa siihen, että CDF voisi olla potentiaalinen terapeuttinen aine toistuvat paksusuolen syöpä.

Tiedoksi

pGL3-luc-konstrukti oli ystävällinen lahjoitus prof Tushar Patel, Ohio State university ja professori Goutam Ghosh Choudhuryn, UTHSCSA.