Krooninen sairaus

tiivistelmä

Johdanto

peräsuolen syöpä (CRC) on yksi maailman kolmesta yleisimmistä syövistä, ja sen esiintyvyys on kasvussa. Tunnistaa potilaat, jotka hyötyvät adjuvanttihoito vaatii uusien biomarkkereiden. Regeneraattorien luoto johdettu geenistä (REG) 4 kuuluu joukko pieniä erittyviä proteiineja osallisena solujen lisääntymisen ja uudistumista. Sen sääteli ilmaisu esiintyy tulehduksellinen suolistosairaus myös ruoansulatuskanavan syöpiin. Raportit yhdistys REG4 ilmaisun kanssa CRC ennusteeseen on sekoitettu. Tavoitteena oli selvittää kasvaimen REG4 ilmentymistä CRC potilaille, ja sen -parin muiden suoliston merkkiaineita.

Methods

Kasvain ilmentymistä REG4 arvioitiin immunohistokemia 840 peräkkäisen hoidetuista CRC potilaista Helsingin yliopiston keskussairaalassa. Expression of MUC1, MUC2, MUC5AC, synapthophysin, ja kromograniinilla arvioitiin alaryhmässä 220 peräkkäin toiminut CRC potilaille. REG4 ilmaisutapoja kliinis parametreja, muut suoliston markkereita, ja vaikutus REG4 ilmaisun eloonjäämiseen arvioitiin.

Tulokset

REG4 ilmaisu liittyy suotuisa kliinis parametrien ja korkeamman kokonaiselossaoloaika ei-mucinous CRC (p = 0,019). Tällaisille potilaille alle 65, sen ilme oli itsenäinen markkeri pienempi kuoleman- 5 vuoden kuluessa, että syöpä; univariable riskisuhde (HR) = 0,57; 95%: n luottamusväli (CI) (0,34-,94); monimuuttujasäätöjen HR = 0,55; 95% CI (0,33-0,92). Ei-mucinous CRC, REG4 liittyy positiivinen MUC2, MUC4, ja MUC5AC ilme.

Johtopäätös

Me osoitamme, että tietomme ensimmäistä kertaa, että REG4 IHC ilmaisu voi olla itsenäinen merkkiaine suotuisan ennusteen kuin mucinous CRC. Tuloksemme ristiriidassa ne tutkimuksista perustuvat määrällisesti REG4 mRNA, ristiriita oikeuttavat lisätutkimuksia.

Citation: Kaprio T, Hagström J, Mustonen H, Koskensalo S, Andersson LC, Haglund C (2014) REG4 Itsenäisesti ennustaa Parempi ennuste Non-mucinous peräsuolen syövän. PLoS ONE 9 (10): e109600. doi: 10,1371 /journal.pone.0109600

Editor: Anthony WI. Lo, Queen Mary Hospital, Hong Kong

vastaanotettu: 21 heinäkuu 2014; Hyväksytty: 11 syyskuu 2014; Julkaistu: 08 lokakuu 2014

Copyright: © 2014 Kaprio et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Data Saatavuus: Tällä kirjoittajat vahvistavat, että kaikki tiedot taustalla olevat havainnot ovat täysin saatavilla rajoituksetta. Kaikki asiaankuuluvat tiedot ovat paperi- ja sen tukeminen Information tiedostoja.

Rahoitus: Tämä tutkimus tukivat avustuksia Finska Läkaresällskapet, Kurt och Doris Palander Säätiö, Sigrid Juseliuksen säätiö, ja Medicinska understödsföreningen Liv och Hälsa, K. Albin Johansson Foundation, ja erityinen valtiollisten tukien tutkimusta ja koulutusta. Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

maailman kolmanneksi yleisin syöpä, joiden vuotuinen esiintyvyys yli miljoona uutta tapausta, on peräsuolen syöpä (CRC) [1]. Sen hoito perustuu varhaiseen diagnosointiin, radikaaleja, ja mahdolliset adjuvanttihoito. Tällainen hoito on rutiinia vaiheen III potilaille. Vaiheessa II, etu adjuvanttihoito on kuitenkin epäselvä, sillä noin 80% hoidetuista vaiheen II potilaista elää ilman kemoterapiaa. Vaikka me tiedämme monia korkean riskitekijöitä; T4-vaiheessa alhainen eriyttäminen, verisuonten invaasio, kasvaimen tukkeuma, suolen perforaatio ja riittämätön imusolmuke resektio, emme voi aina tunnistaa potilaat, jotka hyötyvät adjuvanttihoito. Olisi hyödyllistä löytää uusia biomarkkereita tukiin hoitopäätöksiä.

Uudistava luoto johdettu geenistä (REG) proteiinit muodostavat joukko pieniä erittyviä proteiineja osallisena solujen lisääntymisen ja uudistumista, että myös osallistuvat muodostumiseen immuunijärjestelmän [2], [3]. Ne kuuluvat kalsiumista riippuvan lektiini (C-lektiini) superperheen ja on jaettu neljään ryhmään, REG I-IV, joka perustuu niiden kantavan rakenteen. Ristiriidassa muiden REG proteiinit, REG4 sitoo polysakkarideja riippumatta kalsiumin [4]. Koodaavat geenit REG I-III geenit sijaitsevat kromosomissa 2p12, kun taas REG4 on 1p12-13. REG4 kloonattiin ensin ja tunnistaa Hartupee et al [5] sekä Kämäräinen ym [6]. Joka sisältää 158 aminohappoa ja jonka molekyyli- paino on 18 kDa, se on fysiologisesti ilmaistaan ​​paksusuolen ja ohutsuolen, joilla on korkea ekspressio enteroendokriinisessä soluissa. [6], [7]. Maha-epiteeli, REG4 aktivoidaan yksittäisten vaiheiden erilaistumisen ja kypsymisen, sen ilmentyminen on tilallisesti erityisiä, ja on ehdotettu tukemaan mucinous ja neuroendokriininen erilaistumista tai [8], [9]. Sääteli REG4 ilmentyminen tapahtuu tulehduksellinen suolistosairaus (IBD) [6] ja myös esiintyy monissa maligniteettien: peräsuolen, mahalaukun ja haiman syövät [10] – [12]. REG4 ehdotetaan osallistua syövän synnyn ja kudosten uudistumista, toimimaan antiapoptoottisten tekijä, ja edistämään proliferaatiota ja hyökkäys [13]. Lopullisena fysiologiset ja patologiset roolit REG4 edelleen vaikeasti pelin. Expression of REG4 GI-suolikanavan syöpien on useissa tutkimuksissa näytti olevan ennustava ja ennusteen arvioinnissa [10], [11], [14], [15]. Löydökset CRC ovat kuitenkin olleet ristiriitaisia: lisääntynyt ilmentyminen on merkki huonosta ennusteesta mukaan Numata et al [16], mutta ei yhdessä ennusteen on syntynyt muissa tutkimuksissa [17], [18].

Tämän tutkimuksen tavoitteena oli arvioida CRC rooli REG4 ennustetyövälineenä merkki ja sen yhdessä kliinis parametrien kohortin 840 potilailla. Lisäksi alaryhmässä 220 potilasta, olemme keskittyneet assosiaatiosta REG4 ilmaisun muiden merkkiaineiden: merkkiaineiden mucinous erilaistumisen MUC1, MUC2, MUC4, ja MUC5AC sekä markkereita neuroendokriinistä fenotyyppiä: synaptofysiinin ja kromograniinilla.

menetelmät

potilaat

Tutkimusaineisto koostui 840 peräkkäisen peräsuolen syövän leikkauspotilaiden vuonna 1983-2001 laitoksella kirurgian, HYKS. Alaryhmä 240 kuului peräkkäin liikennöi potilaiden välillä 1998-2001. REG4 tutkittiin koko potilaan sarja, ja toinen merkkiaineiden tutkittu alaryhmä. Suomen Väestörekisterikeskus edellyttäen seurannan elintärkeitä-tilatietoja laskemiseen tarvitaan selviytymisen tilastojen ja tilastot Suomen edellyttäen kuolinsyy kaikille kuolleen. Mediaani-ikä diagnoosin ajankohtana oli 66, joiden seuranta-ajan mediaani oli 5,1 vuotta (vaihteluväli 0-25,8). 5 vuoden tautikohtaisia ​​eloonjäämisaste oli 58,9% (95% CI 55,0-62,8%). Alakonsernista, mediaani ikä diagnoosin oli 67 mediaani seurannan 6,0 vuotta (vaihteluväli 0-13,2). 5 vuoden tautikohtaisia ​​eloonjäämisaste oli 64,8% (95% CI 58,1-71,5%). Kliinis piirteitä sekä ryhmät ovat S1.

Tämä tutkimus noudattaa Helsingin julistuksen ja hyväksyi Surgical eettisen komitean HYKS (Dnro HUS 226 /E6 /06, laajennus TMK02 66 § 17.4 0,2013) ja kansallisen valvontaviranomaisen hyvinvoinnin ja terveyden antoi luvan käyttää kudosnäytteiden ilman yksittäisiä suostumus tässä retrospektiivinen tutkimus (Valvira Dnro 10041 /06.01.03.01 /2012).

Tissue microarray

Formaliinifiksoidusta ja parafinoidut kasvain näytteet olivat arkistoista patologian osaston, HYKS. Edustavalla kasvaimen näytteitä hematoxylin- ja eosiini-värjättyä Levyt merkitty kokenut patologi. Kolme 1,0 mm: n läpimittaiset lyöntejä kustakin näytteestä asennettiin kullekin vastaanottajalle parafiiniblokkiin kanssa puoliautomaattinen kudoksen microarray väline (TMA) (Beecher Instruments, Silver Spring, MD) kuvatulla [19].

Immunohistokemia

TMA- ja kudos-lohkot olivat äskettäin leikattiin 4 um osissa. Sen jälkeen deparaffinization ksyleenissä ja nesteytys kautta asteittain vähentynyt pitoisuus etanolia tislattua vettä, diat käsiteltiin esikäsittely- moduuli (Lab Vision Corp., Fremont, CA) esikäsittelyssä puskurissa 20 minuutin ajan 98 ° C: ssa antigeenin haku . Värjäystoimenpide jonka Dako REAL EnVision Detection järjestelmä, Peroxidase /DAB +, Kani /hiiri (Dako, Glostrup, Tanska) käytti Autostaineriin 480 (Lab Vision). Kudoksia inkuboitiin primaarisilla vasta-aineilla yhden tunnin ajan huoneenlämpötilassa. REG4 vasta-aine, kuten on kuvattu [20], toiset olivat kaupallisista lähteistä. Vasta-aineet ja niiden laimennosta ovat taulukossa 1.

pisteytys näytteiden

REG4 sytoplasmista ilmentymistä pisteytettiin kasvainsoluissa joko negatiivisia positiivisia. MUC1 ja MUC2 ilmaisut olivat sytoplasman kasvainsoluissa ja pisteytettiin negatiivisiksi-low-kohtalaisen korkea mukaan intensiteettiä. Tarkempia tilastollinen analyysi ne ryhmiteltiin: alhainen (negatiivinen pienimpään) ja korkea (kohtalainen tai suuri). MUC4 ja MUC5AC sytoplasman ilmaisuja pisteytettiin joko negatiivisia tai positiivisia. Neuroendocrinic eriyttäminen (negatiivinen vs positiivinen) arvioitiin sytoplasman synapthophysin ja kromograniinilla positiivisuutta. Värjäykset pisteytettiin itsenäisesti T.K. ja J. H., jotka olivat sokaissut kliinisiä tietoja ja tuloksia. Erot pisteytys keskusteltiin asti yksimielisyyttä. Edustavat kuvat ilmaisun ovat kuviossa 1. REG4 ilmentymistä verrattiin leviämisen indeksi Ki-67 värjäys, jota aiemmin julkaistuista [21].

edustavat kuvat vasta-värjäykset kolorektaalisyövässä; REG4-negatiivisia ja positiivisia (A B), MUC1- negatiivisia ja positiivisia (C MUC2-negatiivisten ja positiivisten (E F), MUC4-negatiivisten ja positiivisten (G H), MUC5AC-negatiivisten ja positiivisten (I L ), kromograniinilla-negatiivisia ja positiivisia (M N) Alkuperäinen suurennus oli x 20.

Tilastolliset analyysit

Evaluation of yhdistyksen välillä REG4 ilmaisun ja kliinis parametrejä tai MUC ilmauksia tehtiin tarkka Pearson chi-neliö testi tai tarkka lineaarinen-by-lineaarinen yhdistys testi olevat parametrit. Tautikohtaiset eloonjäämiseen laskettiin päiväyksestä leikkaus kuolinpäivä peräisin kolorektaalisyövän, tai kunnes loppuun seurannan. Survival analyysi Kaplan-Meierin menetelmällä vertailtiin log rank-testi. Coxin regressio suhteellinen riskin malliin tarjoillaan yksi- ja monimuuttuja eloonjääminen analyysi, oikaistu sukupuolen, iän, Dukes luokitus, ja erilaistumista. Testaus Cox mallin oletus vaaratekijä suhdeluvut ajan mukana sisällyttämistä ajasta riippuva kovariaattina erikseen kunkin testattavissa muuttujan. Riskisuhde eriyttämisen analysoitiin kahdessa jaksossa (0-1,25 ja 1,25 5 vuotta), jotta voidaan vastata oletukset Coxin malli, jossa ajasta riippuva Cox malli. Vuorovaikutus ehdot tutkittiin ja vuorovaikutusta REG4 ilmaisun ja ikä syntyi. Siksi laskettiin ennustetekijöiden roolia REG4 erikseen potilaille alle ja yli 65 Kaikki testit olivat kaksipuolisia. P-arvo 0,05 pidettiin merkittävänä. Kaikki tilastolliset analyysit tehtiin SPSS versio 20,0 (IBM SPSS Statistics, versio 20,0 Mac, SPSS, Inc., Chicago, IL).

Tulokset

immunohistokemia

REG4 ilmentyminen kasvainsoluissa oli sytoplasmista ja hieman rakeinen. Kun läsnä, ilmentyminen oli ilmeistä valtaosa kasvainsolujen, mutta ei ydin- ilme. Kokonaan kudosleikkeiden, ei selvä ero ilmaus näyttäisi väliin invasiivisia etu- ja loput kasvain. Lisäksi kokonaiset, REG4 ilmaisu ilmestyi joissakin tapauksissa normaaliepiteelissä, mutta alassäädetty kasvainsoluissa. Expression of musiineja, synapthopysin, ja kromograniinilla oli sytoplasman, ilman ydin- ilme.

Niistä 840 kasvaimia edustettuina TMA, REG4 värjäystä voitiin arvioida 793; 580 (73,1%) pisteytettiin negatiivisiksi ja 213 (28,9%) sai positiivisena. Alaryhmässä 220 kasvainten, MUC 1 ilmentyminen arvioitiin 206 (alhainen 83,5% ja korkea 17,5%), MUC2 ilmaisua 210 (alhainen 17,1% ja korkea 82,9%), MUC4 ilmaisua 208 (negatiiviset 51,0% ja positiivinen 49,0% ), ja MUC5AC ilmaisun 205 (negatiiviset 93,2% ja positiivinen 6,8%). Neuroendocrinic positiivisuus (joko /sekä synaptohysin- ja kromograniinilla-positiivinen) voitiin arvioida 212 (negatiiviset 92,9% ja positiivinen 7,1%).

REG4 in imusolmukkeiden etäpesäke

Perustuen TMA tulosten valitsimme 10 potilaalla on Dukes C tautia, 5 REG4-positiivisia kasvaimia ja 5 kanssa syöpäkasvain. Kukaan potilaista ”REG4 syöpäkasvain osoittivat positiivisuutta niiden imusolmukkeiden etäpesäke, kun taas niistä 5 potilaalla on REG4-positiivinen kasvain, 2 osoittivat positiivisuutta myös niiden imusolmuke etäpesäke (kuva 2).

REG4- negatiivinen ilmaus kasvaimen ja positiivisten viereisissä epiteelin (A). Positiivinen REG4 ilmentymisen primaarikasvaimen (B) ja negatiivinen sen vastaava imusolmuke etäpesäke (C) .Positive REG4 ilmentymisen primaarikasvaimen (D) ja positiivinen sen vastaava imusolmuke etäpesäke (E). Alkuperäinen suurennus x 4 kuvassa A ja x 20 in B-E.

REG4 ja kliinis parametrit

Sytoplasmiset REG4 ilmaisu liittyy vähemmän pitkälle (p = 0,014), sijainti oikeaan hemicolon (p = 0,035), ja mucinous histologia (p 0,0001). Näimme ole yhteyttä ikään, sukupuoleen, erilaistumista tai sijainti (paksusuolen vs. peräsuoli) (taulukko 2). Kuten REG4 liittyy voimakkaasti kasvainhistologiaa, analysoimme mucinous ja ei-mucinous CRC erikseen. Ei-mucinous CRC, REG4 ilmaisu liittyi vähemmän pitkälle (p = 0,005) ja suurempi differentiaton (p = 0,023). Yhteyttä ei ole esiintynyt iän, sukupuolen, kasvaimen sijainti, eikä kasvain puolella. (Taulukko 3) mucinous CRC, REG4 ilmaisu ei liittynyt mitään clinocopathological parametri (tuloksia ei ole esitetty). Ei assosiaatio REG4 ja Ki-67 nähtiin CRC eikä missään alaryhmien analysoitu (tuloksia ei ole esitetty).

REG4 ja muut suoliston merkkiaineiden

alaryhmä 220 kasvaimia, huomasimme, että REG4 ilmentyminen merkitsevästi yhteydessä korkeampaan ekspressioon MUC2, MUC4, ja MUC5AC, mutta ei MUC1 ilme. Myöskään REG4 ilmaisu yhdistyä markkereita neuroendocrine erilaistumista. Sama päti, kun ei-mucinous CRC analysoitiin yksin (taulukko 4). Vuonna mucinous CRC, REG4 ilmentyminen liittyy ei ole muita markkereita tutkittu (tuloksia ei ole esitetty).

Survival analyysi

ei-mucinous, CRC REG4 positiivisuus oli merkki suotuisan ennusteen ( p = 0,019, log-rank-testi); 5 vuoden DSS potilailla, joilla on positiivinen sytoplasmisen REG4 kasvaimen ilmentyminen oli 67,9% (95% CI 60,5-75,3) verrattuna 57,8% (95% CI 53,5-62,1), niille, joilla ei ole sytoplasmista ekspressiota (kuvio 3). Vuonna mucinous CRC, mitään eroa ilmestyi (tuloksia ei ole esitetty). Kun stratifioitu kuin mucinous CRC potilaille alle tai yli 65, REG4 ilme oli merkki suotuisan ennusteen potilailla alle 65 (p = 0,049, log-rank testi.), Joilla ei ole eroa näiden vanhojen (p = 0,195, log -rank-testi). (S2 S3).

tautikohtaisia ​​selviytymisen analyysin mukaan Kaplan-Meierin menetelmän REG4 ilmentymistä ei-mucinous peräsuolen syöpää log-rank-testi.

Coxin regressio univariable analyysit vahvistivat nämä tulokset, joissa REG4 ilme on merkki alennetun kuolemanriski 5 vuotta kuin mucinous CRC. Merkittävä ero syntyi myös potilaille alle 65 (HR 0,57, 95% CI +0,34-+0,94, p = 0,029), mutta ei niille vanhemmille (HR 0,83, 95% luottamusväli 0,57-1,22, p = 0,34). Coxin monimuuttuja-analyysi ei-mucinous CRC potilaat alle 65, oikaistu sukupuolen, vaiheessa ja erilaistuminen, osoittivat, että REG4 oli riippumaton tekijä myönteisen ennusteen (HR 0,55, 95% CI ,33-+0,92, p = 0,022) (taulukko 5 ).

keskustelu

Täällä näytämme immunohistokemiallisesti että REG4 ilmentymistä ei-mucinous kolorektaalisyöpä kumppaniaan suotuisa kliinis parametreja ja että REG4 on riippumaton markkeri suotuisan ennusteen käytöstä alle 65. REG4 ilmentyminen assosioituu ilmaus muiden suoliston merkkiaineiden: MUC1, MUC2, ja MUC5AC.

REG4 ilmentyminen oli suurempi matalan vaiheessa kasvaimia ja ne, joilla on mucinous histologia. Jossa mucinous kasvaimet ulkopuolelle, REG4 ilmaisu liittyy merkittävästi suurempi erilaistumista ja alhainen vaihe. REG4 ilmaisu liittyy myös MUC1, MUC2, ja MUC5AC, joka tukee havainto, että REG4-positiiviset kasvaimet ovat hyvin eriytetty kuin niitä, jotka ovat REG4 negatiivisia. Nämä tulokset ovat sopusoinnussa havaintojen Li et al [17], joka osoitti, että REG4 immunohistokemiallinen (IHC) ilmentyminen CRC osakkuusyrityksissä huomattavasti suuremmilla erilaistumista ja ilman laskimoiden hyökkäystä. Lisäksi REG4 ilme osoitti suuntaus kuin yhdessä matalan T-vaiheessa puuttuminen imusolmuke etäpesäke, ja paikallinen tauti (Dukes A-B vs C-D). Samanlaisia ​​tuloksia näy sappirakon syöpä, jossa positiivinen REG4 IHC ilmaisun kumppaniaan korkeampi kasvaimen erilaistumiseen [22]. Kiistelty tulokset CRC Numata et al. osoittavat, että korkeammat REG4 mRNA ilmaisu kumppaniaan suurempi eriyttäminen, syvempi invaasio (T-vaihe), lymfaattinen invaasio, läsnäolo maksan etäpesäke, ja pitemmälle [16]. He kuitenkin mitattuna mRNA-tasoja PCR, ei kuten teimme todellisen proteiinin ilmentymisen.

välisestä assosiaatiosta REG4 tasojen ja syöpä on ollut tutkimuksen sekä seerumin ja kudosten. Seerumin pitoisuus REG4 vuonna kohdunkaulan potilaista verrattuna terveisiin valvonta on ollut löydös haimasyövän [12], mahasyöpä [11] ja sappirakon syöpä [22], mikä osoittaa, että seerumin REG4 voisi olla diagnostista biomarkkereiden. Lisääntynyt REG4 IHC ilmentyminen on ehdotettu markkerina huonon ennusteen mahasyövän [23], ja kohonneet tasot kudoksissa REG4 mRNA voi olla markkeri huonon ennusteen CRC [16]. REG4 IHC ilme on kuitenkin osoittanut, ei ole vaikutusta ennusteeseen CRC [17], [18]. Yksi syy tähän voi olla se, että mucinous ja ei-mucinous syöpiä ei analysoitu erikseen. Myös erot vasta, värjäysmenetelmistä ja analysointi värjäykset saattanut poikkesivat Tutkimuksemme. Sappirakon syöpä, REG4 IHC ilme on liittynyt paremmin ennusteeseen [22].

Tuloksemme osoittavat, että REG4 IHC ilmaisu on merkkiaine suotuisan ennusteen kuin mucinous CRC, eroa ei ilmennyt mucinous CRC. REG4 ilme on konstitutiivisesti korkea mucinous kasvaimissa (ts Pseudomyxoma peritonei, ja mucinous cystadenomas ja mucocellular mahasyövän) Tämä saattaa selittää, miksi ei ole selkeää vaihtelua REG4 ilmentyminen löysi IHC ryhmässä mucinous CRC kasvaimia. Erot REG4 ilme oli toisaalta ilmenee ei-mucinous CRC. Meidän potilaat alle 65, kohonnut REG4 oli itsenäinen tekijä paremman ennusteen kuin mucinous CRC. Näin ollen vaikuttaa uskottavalta, että REG4 mRNA-tasot saattavat kohota CRC potilailla, joilla on huono ennuste, mutta tämä ei ole käännetty proteiinia. Lisätutkimukset ovat perusteltavissa verrata REG4 mRNA tasoilla REG4 IHC tapauskohtaisesti.

tulokset koskevat viisi paria REG4-positiivisten ensisijainen kasvaimia ja niiden vastaavat imusolmukkeiden etäpesäkkeet osoitti, että viisi imusolmukkeiden vain kaksi osoittivat REG4 ilmaisu; tämä voi merkitä, että REG4-negatiivinen alipopulaatio kasvainsolujen todennäköisemmin etäispesäkkeitä kuin REG4-positiivisia soluja.

REG4, ilmaistaan ​​tulehduksellisten suolistosairauksien ja myös marginaalissa mahahaava, pidetään markkeri tulehduksen [6]. Joissakin meidän koko-kudosleikkeiden kasvainkudoksen värjättiin negatiivisesti REG4, mutta viereisen hyvänlaatuinen epiteelin ilmaistuna REG4 voimakkaasti, mikä ilmeisesti vastaa tulehdusreaktion kasvainta vastaan.

On huomattava, että REG4 ilmaisu annetaan edullisempia ennuste vain CRC ilman mucinous erilaistumista. Itse asiassa korkea ilmentyminen REG4 on esiintynyt aggressiivisen muotoja ruoansulatuskanavan syöpä, joka näyttää mucinous fenotyyppi kaltainen mucocellular (sinettisormus cell) syöpä mahan [9]. Toisaalta, REG4 on myös täysin läsnä limaa rikas cystadenomas lisäyksen ja sen pahanlaatuinen, levitetään muodossa, pseudomyxoma peritonei, joka on tunnetusti resistenttejä näille hoidoille.

Suurin osa suolistossa endokriinisten solujen normaalissa suolen limakalvon näyttää korkea fysiologinen ilmaus REG4 kanssa koekspressio synaptofysiinin ja kromograniinilla. Suoliston neuroendokriinisiksi kasvaimet sekä matalan ja korkean asteen osoittavat myös REG4 positiivisuus, usein erikoinen anatominen jakauma vahvin ilmentyminen yhteen kerrokseen solujen kehän kasvain, jotka ovat läheisessä kosketuksessa ympäröivään strooman [6] Koska tämä, se oli hieman kiehtova että synaptophysin- ja kromograniinilla-positiivisia CRC kasvaimia tässä tutkimuksessa jäi negatiivinen REG4.

Useat raportit viittaavat siihen, kasvaimia synnyttävän roolia REG4 kehittämisessä syövän ruoansulatuskanavassa. Lopullisena molekyylitason mekanismit ovat kuitenkin jääneet vaikeasti. Bishnupari et ai [24] on raportoitu, että hoito viljeltyjen paksusuolen adenokarsinooma solut yhdistelmä REG4 proteiinin fosforylaation EGF-reseptorin ja Akt. He ehdottivat, että REG4 on transaktivaattori EGFR /Akt-signaloinnin kautta. Lisäksi selvittäminen rooli eksogeenisen REG4 säätelijänä solun kasvupotentiaali on kuitenkin odottavat tunnistaminen oletetun REG4 reseptoria. Ei näyttöä siitä, että voimistunutta ilmentymistä REG4 itse indusoi syöpäkasvain kuitenkin. Havaintomme hiirillä siirtogeenisiä ihmisen REG4 cDNA alla villiiniä promoottori, joka johtaa maailmanlaajuiseen yliekspressio REG4 suoliston limakalvolla ei aiheuttanut lisääntynyt kasvainten muodostumista tai limakalvon liikakasvun (julkaisemattomia tuloksia).

asetukseen REG4 ilme on edelleen huonosti. Olemme alun perin raportoitu voimakkaasti sääteli ilmentyminen REG4 myös tulehtunut IBD limakalvossa IBD kaltaisia ​​pesäkkeitä gastriitti aiheuttama suoliston metaplasiaa mahassa [6]. Tämä viittaa siihen, että tulehdussytokiinejä voivat vaikuttaa REG4 ilme. Neuroendokriini eriyttäminen, toisaalta, kuten nähdään enteroendokriinisessä soluissa, näyttää antavan konstitutiivista ilmentymistä REG4. Olemme äskettäin raportoitu koekspressio REG4 kanssa hermosolujen transkriptiotekijä Hath-1 (atonaalinen, Math-1) neuroumpieritteisissä kasvaimissa [9]. Mikä vielä selvitettävä, onko yksi säätelijä REG4 ilmaisu on kaiketi-1.

Verrattuna koko kudosleikkeiden, TMA tekniikka mahdollistaa analyysin suurempien potilasaineistoihin, mutta pienempi osa kasvainten arvioidaan. Tämä ei aiheuttanut ongelmia täällä, mutta koska REG4 värjäyskuvion meidän koko jakson värjäytyminen oli homogeeninen. Teknisistä syistä enintään 5% näytteistä menetettiin TMA-tuotannon ja -staining prosessi. Vahvuus Tutkimuksen on suuri, hyvin tunnettu CRC-potilaan kohortin kanssa pitkän seuranta-ajan.

Tässä osoitamme, että tietomme ensimmäistä kertaa, että REG4 IHC ilme on riippumaton markkeri suotuisan ennusteen kuin mucinous peräsuolen syövän potilaiden alle 65 Nämä tulokset ovat eri mieltä, jotka saatiin arvioimalla mRNA-tasoja; meidän ristiriitaisuuksia muiden havaintojen takaa lisätutkimuksia.

tukeminen Information

Kuva S1.

ennusteeseen viittaavia ominaisuuksia tutkimusväestöstä ja alaryhmä väestöstä.

doi: 10,1371 /journal.pone.0109600.s001

(DOCX) B Kuva S2.

REG4 ilmaisu osoittaa parempaa ennustetta kuin mucinous peräsuolen syöpään nuoremmille potilaille. Tautikohtaiset selviytymisen analyysin mukaan Kaplan-Meierin menetelmän REG4 ilmentymistä ei-mucinous peräsuolen syövän potilaiden alle 65, jonka log-rank-testi.

Doi: 10,1371 /journal.pone.0109600.s002

( TIFF)

Kuva S3.

REG4 ilmaisu osoittaa eroa eloonjäämisen kuin mucinous kolorektaalisyövän vanhemmille potilaille. Tautikohtaiset selviytymisen analyysin mukaan Kaplan-Meierin menetelmän REG4 ilmentymistä ei-mucinous peräsuolen syövän potilailla 65 ja vanhemmat että log-rank-testi.

Doi: 10,1371 /journal.pone.0109600.s003

(TIFF) B

Kiitokset

Kiitämme Päivi Peltokangas, Gynel Arifdshan, ja Elina Aspiala erinomaisesta teknisestä avusta.