Krooninen sairaus

tiivistelmä

Background

Olemme hiljattain osoitti, että IGFBP2 yli-ilmentyy perus keuhkosyövän kudoksia. Tutkimuksen tavoitteena on selvittää IGFBP2 on kohonnut verinäytteistä keuhkosyöpäpotilaiden ja onko sen taso liittyy kliinisiä tuloksia.

Menetelmät /Principal Havainnot

Plasman IGFBP2 tasot määritettiin sokeasti entsyymi -sidoksellinen immunosorbenttimääritys 80 keuhkosyöpäpotilaita ja 80 tapauskohtaisesti terveisiin vertailuun. Analysoimme verinäytteitä IGFBP2 tasoilla ylimääräinen 84 potilaalla on keuhkosyöpä ja testattiin sitten assosiaatioita veren IGFBP2 tasoa ja kliinisten parametrien kaikissa 164 keuhkosyöpäpotilaita. Kaikki tilastolliset testit olivat kaksipuolisia ja erot p 0,05 pidettiin merkittävinä. Keskimääräinen plasmakonsentraatio IGFBP2 keuhkosyöpäpotilaiden oli merkitsevästi korkeampi kuin terveillä verrokeilla (388,12 ± 261,00 ng /ml vs. 219,30 ± 172,84 ng /ml, p 0,001). IGFBP2 nostettiin kaikentyyppisissä keuhkosyöpä, mukaan lukien adenokarsinooma, okasolusyöpä, ja pienisoluinen syöpä, riippumatta potilaan iästä, sukupuolesta tai tupakoinnista. IGFBP2 tasot olivat lievästi mutta merkitsevästi yhteydessä kasvaimen koon ja olivat merkittävästi korkeammat IV vaiheessa kuin vaiheen I tai III sairaus. Monimuuttuja-analyysissä ilmeni, että keuhkosyöpään potilailla, joiden veren IGFBP2 oli yli 160,9 ng /ml oli huono selviytymisen tulos, jossa riskisuhde 8,76 (95% luottamusväli 1,12-68,34, p = 0,038 oikaistu kasvaimen kokoa, patologia, ja vaihe). Keskimääräinen elinaika potilailla, joilla veren IGFBP2 160,9 ng /ml on 15,1 kuukautta; kun taas Keskimääräinen elinaika oli 128,2 kuukautta potilaille, joiden veren IGFBP2 oli ≤160.9 ng /ml (p = 0,0002).

Johtopäätökset /merkitys

Veri IGFBP2 lisääntyy merkittävästi keuhkosyöpäpotilaita. Korkea veressä kiertävän IGFBP2 merkittävästi liittyy huono selviytymisen, mikä viittaa siihen, että veri IGFBP2 tasoja voisi olla ennustetyövälineenä biomarkkeri keuhkosyöpään.

Citation: Guo C, Lu H, Gao W, Wang L, Lu K, Wu S, et ai. (2013) Insuliini-kasvutekijää sitovan proteiini-2 nostetaan in Blood keuhkosyöpäpotilaiden ja yhteydessä huonoon Survival. PLoS ONE 8 (9): e74973. doi: 10,1371 /journal.pone.0074973

Editor: Arun Rishi, Wayne State University, Yhdysvallat

vastaanotettu: 19 maaliskuu 2013; Hyväksytty: 12 elokuu 2013; Julkaistu: 17 syyskuu 2013

Copyright: © 2013 Guo et ai. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tämä työ tuettiin osittain National Institutes of Health kautta R01 CA092481 ja R01 CA124951 B. Fang, erikoistunut tutkimus- Excellence (SPORE) Grant CA070907, The University of Texas MD Anderson Cancer Center, Support Grant CA-016672, Lung Program, DNA-analyysi ja virtaussytometria, ja Cellular Imaging Core Facility, ja Homer Flower geeniterapiayritys Research Fund, Charles Rogers Gene Therapy Fund, Flora Stuart Mason Lung Cancer Research Fund, Charles B. Swank Memorial Fund for ruokatorven Cancer Research, George O. Sweeney rahaston ruokatorven syöpä tutkimusministeriö, Phalan rintakehä Gene Therapy Fund, ja MW Elkins Endaumentin rahastolle Thoracic Surgical Oncology, ja Chapman Foundation. Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

huolimatta kynnyksellä uuden syöpälääkkeiden, keuhkosyöpä edelleen johtava syy syövän kuolleisuus Yhdysvalloissa ja kaikkialla maailmassa [1]. Tuore tutkimus osoitti, että varhainen diagnoosi pienian- kierteisen tietokonetomografia (CT) seulonta voisi merkittävästi vähentää kuolleisuutta 6,7% keuhkosyöpään potilailla [2], mikä osoittaa, että varhainen diagnoosi on avain parantaa potilaiden selviytymistä. Kuitenkin varhainen diagnoosi keuhkosyövän on haastavaa, koska pieniannoksisen TT seulonta on erittäin kallista ja ei todennäköisesti ole varaa väestössä [3]. Lisäksi ennustava biomarkkereita hoitovasteen ja ennusteen tarvitaan klinikoilla ohjaamaan terapeuttisia päätöstä eri vaihtoehtojen [4,5]. Biomarkkerit että tunnistaa potilasalaryhmissä merkittäviä eri prognoosi voivat antaa hyödyllistä tietoa hoitostrategioiden niille alaryhmiä, kuten onko aggressiivinen adjuvanttihoito tarvitaan potilaiden huonon ennusteen. Valitettavasti hyvin harvoja serologisia biomarkkereita, joita voidaan käyttää varhaisen diagnoosin tai ennusteen keuhkosyöpään on kliinisesti saatavilla; siksi, tunnistaminen tällaisen biomarkkereiden on erittäin toivottavaa.

Insuliinin kaltainen kasvutekijä (IGF) sitovia proteiineja (IGFBP) ovat perheen proteiineja (kuusi ihmisillä), jotka sitovat ja toimivat kantajina IGF, pitkittää IGF puoliintumisaika verenkierrossa ja moduloiva paikallisia IGF pitoisuuksien ja toimintaa [6]. Nämä proteiinit jakavat konservoituneen kolmen domain rakenne, joka koostuu kaksi konservoitunutta kysteiiniä rikas verkkotunnuksia N- ja C-terminaalit, joita tarvitaan IGF sitovia ja ei-säilyneitä keskusdomeenin joka erottaa ne [7]. Ihmisillä IGFBP3 on yleisin ja IGFBP2 on toiseksi yleisin IGFBP verenkierrossa. Toisin IGFBP3, joka indusoi tuumoria vastaan ​​suunnattua vaikutusta eri syöpien [8,9], IGFBP2 on osoitettu edistävän kasvaimien syntyyn [10], syöpäsolujen invaasiota [11], etäpesäke [12], syövän kantasoluja laajennus [13], ja tuumoriangiogeneesissa [12,14] eri syöpiä. Todellakin, IGFBP2 yliekspressoituu kasvainkudoksessa gliooman [15], rintasyöpä [16,17], munasarjasyöpä [18], eturauhassyöpä [19], paksusuolen ja peräsuolen syövän [20], mahasyöpä [21], keuhkosyöpä [ ,,,0],22], leukemia [23], ja astrosytooma [24]. Lisäksi seerumin tai plasman IGFBP2 laskua on havaittu potilailla, joilla on gliooman [25], eturauhassyöpä [26,27], munasarjasyöpä [28], ja paksusuolensyöpä [29,30]. Lisääntynyt ilmentyminen IGFBP2 on sekaantunut joko lyhyemmässä yleinen elinaika [28,29,31] tai resistenssi kemoterapiaa [23,32]. Yhdessä nämä tulokset viittaavat siihen, että IGFBP2 voisi olla yhteinen kasvaimia synnyttävän proteiinin eritasoisten syöpiä.

tunnistamaan mahdollisia biomarkkereita keuhkosyöpä, olemme hiljattain määritettiin ero ilmaus proteiinien ensisijainen keuhkojen kasvain kudosten ja normaali keuhkojen kudoksia samasta potilaista käyttämällä käänteisfaasi-proteiinin array määrityksessä. IGFBP2 on yksi proteiineista havaittiin merkittävästi lisääntynyt primaarikasvaimen kudoksissa ei-pienisoluinen keuhkosyövässä, mukaan lukien adenokarsinooma ja okasolusyöpä [22]. Koska IGFBP2 on erittävä proteiini, sen lisääntynyt ilmentyminen kasvainkudoksissa voivat heijastua sen pitoisuuksia veressä. Sen määrittämiseksi onko se totta, olemme analysoineet IGFBP2 plasmassa keuhkosyöpäpotilaiden ja terve asia verrokit. Tuloksemme osoittivat, että pitoisuus veressä IGFBP2 lisääntyi merkitsevästi keuhkosyöpäpotilaita ja että suuri IGFBP2 pitoisuus potilaiden veressä oli yhteydessä lyhyt eloonjäämiseen.

Tulokset

Kliinisten tekijöiden keuhkosyöpäpotilaita

Clinical tietoja 164 keuhkosyöpäpotilaita tutkimuksessamme on yhteenveto taulukossa 1. potilaat (71 miestä ja 93 naista) olivat 42-86 vuotta vanhoja, joiden keski-ikä 52. Adenokarsinooma ja okasolusyöpä oli 54% ja 21% histologisten diagnoosi, tässä järjestyksessä. Oli 33 potilasta, joilla on vaiheen I tautia, 13 potilaalla vaiheen II tauti, 40 potilailla, joilla on vaiheen III tauti, ja 67 potilaalla vaiheen IV tauti. Oli 138 potilasta (84%), jotka olivat aiemmin tupakoinnin /tupakointi. Potilailla, jotka saivat leikkauksen, kemoterapian, sädehoidon, tai multimodaalisuudesta terapia oli 61 (37,2%), 105 (64,02%), 46 (28,05%), ja 78 (46.34%), tässä järjestyksessä. Kuusi potilasta (0,37%) ei saanut mitään hoitoa. Siellä oli 62 potilasta (37,8%) oli etäpesäkkeitä diagnoosin, ja 37 potilasta (22,56%) oli paikallisen uusiutumisen aikana seurannan. Keskimääräinen seuranta-aika oli 37,5 kuukautta. Eloonjääntitulokset olivat käytettävissä 152 potilasta, joiden joukossa 83 (54.61%) oli elossa mennessä data-analyysi. Terveillä verrokeilla Näytteet sovitettu iän, sukupuolen, rodun ja tupakointi ensimmäisen 80 keuhkosyöpää.

Variable

Patient (N) B IGFBP2 ng /ml

P Arvo

SexMale71382 0,4 ± 248.8Female93303.6 ± 209.70.024Age 52 years77300.3 ± 183.3≥52 years87370.8 ± 261.40.129Smoking statusNever26306.3 ± 216.0Current Ever138343.6 ± 233.00.349Tumor HistologyAdenocarcinoma87334.8 ± 227.4Squamous-cell carcinoma34313.5 ± 251.7Non-pienisoluinen carcinoma16310.7 ± 143.1Small-cell carcinoma24389.7 ± 222.3≥0.099

** Tuntematon /puuttuvat data3Disease StageStage I

* 33259,4 ± 187.40.001

* Stage II13402.3 ± 282.6Stage III # 40324,3 ± 245.30.029 # Vaihe IV

* # 67383,6 ± 226.4≥0.07

** Tuntematon /puuttuvat data11MetastasisNo92305 0,7 ± 229.8Yes62381.1 ± 227.00.047Unknown /puuttuu Data10Table 1. Potilaan ominaisuuksista ja plasman IGFBP2 tasolla (keskiarvo ± SD).

* P-arvo vaiheen I vs. vaihe IV; # Vaiheessa III vs. vaihe IV;

** muille ryhmille samaan luokkaan CSV Lataa CSV

Plasma IGFBP2 tasot keuhkosyöpäpotilaita ja verrokkia

Voit testata, onko eroa kiertävän IGFBP2 tasojen keuhkosyöpäpotilaita ja terveillä verrokeilla, saimme plasmanäytteet 80 keuhkosyöpäpotilaita ja 80 tapauskohtaisesti terveisiin näytteitä veripankille ylläpidetään meidän laitoksen osasto epidemiologian. Plasman IGFBP2 tasot määritettiin sokeasti ELISA ilman tutkijan tietämättä mitään kliinisiä tietoja. IGFBP2 arvot kullekin koodatun näytteen analysoitiin sitten tilastollisesti assosiaatiota ja korrelaatio kliinisten tietojen. Tulokset osoittivat, että plasman keskimääräistä IGFBP2 keuhkosyöpäpotilaiden (388,12 ± 261,00 ng /ml), oli merkitsevästi korkeampi kuin terveillä verrokeilla (219,30 ± 172,84 ng /ml,

P

= 2,4 x 10

-7) (kuvio 1A). Kun analysoitiin perusteella sukupuolen, iän, ja tupakointi asema, IGFBP2 arvot pysyivät merkitsevästi suurempi keuhkosyöpäpotilaita kuin verrokeilla kunkin alaryhmän (kuvio 1 B). Sisällä terveillä verrokeilla, veren IGFBP2 taso oli merkittävästi korkeampi niissä iässä 52 tai vanhempi kuin nuorempi kuin 52 (keskiarvo 255,2 ng /ml vs. 183,4 ng /ml,

P

= 0,036). Tämä tulos osoitti, että kiertävä IGFBP2 arvot olivat merkitsevästi korkeammat keuhkosyöpäpotilaita, iästä, sukupuolesta, ja tupakointi.

EN) rasiakuvaajien osoittaa keskimääräistä (viiva laatikossa) ± 1 SD (laatikko ) ja ± 2 SD (virheen bar). Ero keskiarvot kahden ryhmän on merkittävä (

P

= 2,4 x 10

-7). B) vertailu keuhkosyöpäpotilaita ja terveillä verrokeilla perusteella sukupuolen, iän, ja tupakoinnista. Kussakin ryhmässä keskimääräinen IGFBP2 arvot keuhkosyöpäpotilaita olivat merkittävästi korkeammat kuin terveillä verrokeilla (

P

0,01). C) Vastaanotin toimii ominaiskäyrä (ROC) diagnosointiin keuhkosyöpään jossa plasma IGFBP2 arvoihin.

spesifisyys ja herkkyys käyttämällä verta IGFBP2 keuhkosyövän diagnosointiin

sitten määritti spesifisyys ja herkkyys käyttämällä plasman IGFBP2 tasot keuhkosyöpää diagnoosia. Tulokset osoittivat, että vastaanotin toimii (ROC) tontin pinta-ala oli alle käyrän noin 0,70 (kuvio 1 C). Tällä raja-arvo 160,9 ng /ml, spesifisyys ja herkkyys käyttämällä IGFBP2 pelkästään erottamaan syövän ja terve ryhmät olivat 76,92% ja 75,61%, tässä järjestyksessä. Fisherin eksakti analyysi osoitti, että ero näiden kahden ryhmän välillä oli merkitsevä (

P

= 6,01 x 10

-8). Ero ryhmien välillä säilyi merkittävästi, kun spesifisyys nousi 90%: iin raja-arvo 437ng /ml, minkä jälkeen herkkyys oli noin 30%. Kun spesifisyyden kasvoi 95% (cutoff 450ng /ml), mutta herkkyys oli vain noin 13,8%, ja ero kahden ryhmän välillä ei ollut enää merkittävää (

P

= 0,058). Tämä tulos viittaa siihen, että veri IGFBP2 arvot yksin ehkä riitä diagnoosin keuhkosyöpään koska optimaalinen yleinen herkkyys ja arvot olivat noin 70%. Kuitenkin IGFBP2 voidaan merkittävästi lisääntynyt osajoukko keuhkosyöpäpotilaiden.

Kiertävä IGFBP2 alaryhmissä keuhkosyöpäpotilaita

Sen määrittämiseksi mikä alaryhmään keuhkojen potilaat saattavat on lisääntynyt veren IGFBP2 tasot , päätimme IGFBP2 tasoa toisessa 84 keuhkosyöpäpotilaita ja sitten analysoitiin eroja veren IGFBP2 keskuudessa keuhkosyöpäpotilaita perusteella histologinen diagnoosin, kliiniseen vaiheeseen, ja kasvaimen koko. Tulokset osoittivat, että keskimääräinen IGFBP2 tasoja miehillä (382,38 ± 248.81ng /ml) olivat merkittävästi korkeammat kuin naispotilaiden (303,58 ± 209.73ng /ml,

P

= 0,024). Oli suuntaus IGFBP2 kasvavan taudin vaiheessa edenneet vaiheeseen I vaiheeseen IV. Ero IGFBP2 arvojen välillä potilailla, joiden vaihe I ja vaihe IV tauti oli merkitsevä (vaihe I: 259,42 ± 187,38 ng /ml, vaihe IV: 383,6 ± 226.36ng /ml;

P

= 0,001; taulukko 1), mikä viittaa siihen, että IGFBP2 lisääntyy, kun tauti on edennyt pitkälle. Veri IGFBP2 arvo oli lievästi mutta myös korreloi merkitsevästi kasvaimen kokoa (R = 0,21,

P

= 0,023) (kuvio 2A). Sen määrittämiseksi, onko veressä IGFBP2 tasot heijastavat IGFBP2 ilmaisuja potilaiden ensisijainen kasvaimia, analysoimme IGFBP2 ilmaisuja kahdella primaarikasvaimen kudoksia potilailta, joilla on joko korkea tai matala IGFBP2 niiden verinäytteistä. Immunohistokemiallinen analyysi osoitti, että IGFBP2 ilmaisua ei ollut havaittavissa primaarikasvaimen sairastavan potilaan veren IGFBP2 tasolla, mutta oli merkittävästi koholla kasvaimen potilaan korkea veren IGFBP2 (kuvio 2B), mikä viittaa siihen, että veri IGFBP2 tasot voivat heijastaa IGFBP2 ilme kasvaimissa. Kuitenkin tutkii suuremmassa joukko potilaan näytteitä pariksi veren ja kudosnäytteet vaaditaan määrittämään korrelaatioita veri ja kasvain IGFBP2 tasolla.

) välinen korrelaatio veren IGFBP2 arvojen ja kasvaimen kokoa (R = 0,21

P

= 0,023). B) IGFBP2 ilmentyminen primaarikasvainten potilaita, joilla on alhainen tai korkea plasman IGFBP2. Tasot IGFBP2 plasmassa näytettiin paneelin yläreunasta.

Kuitenkin, ero alaryhmien määritelty kasvainhistologiaa ei ollut merkittävä, vaikka keskiarvo tapauksissa pienisoluinen syöpä oli suhteellisesti korkeampi kuin muissa histologialtaan (pienisoluinen keuhkosyöpä: 389,7 ± 222,28 ng /ml, ei-pienisoluinen keuhkosyöpä: 310,69 ± 143.09ng /ml, adenokarsinooma: 334,82 ± 227.39ng /ml, okasolusyöpä: 315,47 ± 251,71 ng /ml,

P

= 0,099). Ei ollut merkittävää eroa plasman IGFBP2 kun potilaat ryhmiteltiin mukaan mediaani-ikä potilasryhmässä (ikä 52 vuotta: 300,29 ± 183,29 ng /ml, ≥52 vuotta: 370,8 ± 261.35ng /ml,

P

= 0,12), tai tupakointi (ei tupakointi: 306,33 ± 215,95 ng /ml, koskaan tupakointi: 370,8 ± 261.35ng /ml,

P

= 0,34).

Association of kiertävän IGFBP2 kliinisiä tuloksia

sitten määritetään, onko veren IGFBP2 liittyi potilaan selviytymistä. Univariate analyysi osoitti, että eloonjääminen korreloi merkitsevästi histopathologies, taudin vaiheissa, kasvaimen koossa, ja veren IGFBP2 tasot (cutoff-arvo on 160,9 ng /ml, mikä on suurin pinta-ala ROC-käyrän) (taulukko 2). Monimuuttuja-analyysissä ilmeni, että keuhkosyöpää sairastavien potilaiden veren IGFBP2 160.9 ng /ml oli huono selviytyminen tulos (riskisuhde = 8,76, 95% luottamusväli 1,12-68,34, p = 0,038 oikaistu kasvaimen kokoa, patologian, ja vaihe) (taulukko 2). Keskimääräinen elinaika potilailla, joiden IGFBP2 tasoilla 160,9 ng /ml oli merkitsevästi lyhyempi kuin potilailla, joilla on IGFBP2 tasolla ≤160.9ng /ml (mediaani elinaika 15,1 kuukautta vs +128,16kuukausi,

P

= 0,0002, kuvio 3A). Olemme myös päättäneet, oliko selviytymisen ero, kun potilaat jaettiin 4 ryhmään sen perusteella, heidän verensä IGFBP2 tasoja. Riskisuhde köyhien selviytymisen kasvoi, kun IGFBP2 taso nousi neljänneksessä 1 kvartiiliin 4 (kuvio 3B). Jokaisessa neljänneksessä on 38 potilasta. Keskimääräinen elinaika varten 1

st, 2

nd, 3

rd ja 4

th kvartiilien olivat 128,16, 21,81, 11,11, ja 10,92 kuukausi, vastaavasti (

P

= 0,033). Nämä tulokset osoittavat, että veri IGFBP2 tasoja voisi olla hyödyllinen parametri ennustamiseen potilaiden tuloksia.

Variable

Alive, N (%) B Dead, N (%) B riskisuhde

95% CI

P-arvo

SexMale35 (52.24) 32 (47,76) 1Female48 (56,47) 37 (43.53) 0.790.49-1.270.325Age1.000.98-1.030.944Smoking tila Never14 (56,00) 11 (44,00) 1Former19 (50.00 ) 19 (50,00) 1.050.50-2.230.891Current50 (56,18) 39 (43.82) 1.150.59-2.260.681Tumor histologia Adenocarcinoma50 (60,02) 33 (39,75) 1Squamous-cell carcinoma22 (68,75) 10 (31,25) 0.580.28- 1.180.132Non-pienisoluinen carcinoma7 (46,67) 8 (53.33) 1.090.50-2.370.835Small-cell carcinoma4 (18,18) 18 (81,82) 2.671.45-4.900.002Disease Stage Stage I29 (87,8) 4 (12.12) 1Stage II10 (76.92) 3 (23,08) 3.070.62-15.260.169Stage III22 (56,41) 17 (63,59) 7.012.03-24.230.002Stage IV 22 (32,84) 45 (67.16) 12.443.81-40.650.000Tumor Size1.191.05- 1.350.005Metastasis No61 (66,30) 31 (33,70) 1 Yes22 (36,67) 38 (63,33) 1.560.88-2.770.130IGFBP2 ≤160.929 (87.88) 4 (12,2) 1 160,954 (45,38) 65 (54,62) 5.582.03 -15,34 0.001Multivariate (IGFBP2)

* ≤160.929 (87.88) 4 (12,2) 1 160,954 (45.38) 65 (54.62) 8.761.12-68.340.038Table 2. yhden ja usean analyysit eloonjäämiseen hazard ratio.

* Korjattu histologia, vaihe ja kasvaimen koko CSV Lataa CSV

A) Kaplan-Meier eloonjäämiskäyriä keuhkosyöpäpotilaita ryhmiteltynä veren IGFBP2 raja-arvo 160.9ng /ml. Keskimääräinen elinaika potilailla, joilla on korkeampi IGFBP2 tasolla (N = 120) oli huomattavasti lyhyempi kuin potilailla, joilla on alempi IGFBP2 tason (N = 32,

P

= 0,0002). B) Kaplan-Meier eloonjäämiskäyriä keuhkosyöpäpotilaita jakaantuu neljään ryhmään sen perusteella, heidän verensä IGFBP2 tasoja. Jokainen quartitle on 38 potilasta. Keskimääräinen elinaika varten 1

st, 2

nd, 3

rd ja 4

th kvartiilien olivat 128,16, 21,81, 11,11, ja 10,92 kuukausi, vastaavasti (

P

= 0,033).

keskustelu

Tuloksemme osoittivat, että veren IGFBP2 tasot olivat merkitsevästi korkeammat keuhkosyöpäpotilaita kuin terveillä verrokeilla, jotka ovat yhdenmukaisia ​​tuoreessa tutkimuksessa seerumin IGFBP2 tasot 98 keuhkosyöpäpotilaita, 17 hyvänlaatuinen keuhkosairaus ja 23 normaalia valvontaa Kiinassa, jossa seerumin IGFBP2 tasot ja sen autovasta merkittävästi koholla keuhkosyöpäpotilaita [33]. Kuitenkin toinen viimeaikainen tutkimus 163 potilasta, joilla on erilaisia ​​syöpiä, mukaan lukien 34 keuhkosyöpäpotilaita, ja 13 tervettä verrokkia Saksassa osoitti, että seerumin IGFBP2 tasot olivat vain merkitsevästi koholla pään ja kaulan kasvaimia, mutta ei muiden syöpien, kuten keuhko- syöpä [34]. Ei ole selvää, onko ristiriita Saksan tutkimus johtuu otoskoko tai potilasryhmissä. Kuitenkin meidän tutkimus osoitti, että lisäys veren IGFBP2 liittyi taudin etenemiseen ja huono tulos säätämisen jälkeen muiden kliinisten parametrien, mikä viittaa siihen, että veri IGFPB2 taso voisi olla hyödyllinen parametri ennustamiseen kliinisiä tuloksia.

Tutkimuksemme osoittaa, että veri IGFBP2 taso yksin ei välttämättä ole erityisiä tai tarpeeksi herkkä keuhkosyövän diagnosointiin, koska sekä spesifisyys ja herkkyys oli noin 75%. On epäselvää, onko yhdistämällä IGFBP2 tasolla muiden biomarkkerit tai seulonnan lähestymistavat lisäisi sen spesifisyys ja herkkyys. Todellakin, vaikka useat veren biomarkkereiden on tunnistettu ja arvioitu keuhkosyöpäpotilaita, kenelläkään ei ole itse osoittanut yleinen spesifisyys ja herkkyys riittää keuhkosyövän diagnosointiin [35-37]. Koska keuhkosyöpä on heterogeeninen sairaus, se ei välttämättä ole realistista odottaa mitään yksi molekyyli on tasaisesti kohonnut kaikissa keuhkosyöpäpotilaita. Me spekuloida, että nämä merkkiaineet voidaan käyttää yhdessä lisäämiseksi spesifisyyden ja herkkyyden seulontatutkimuksia tai käyttää yhdessä muiden seulontamenetelmiä lisäämään spesifisyyden. Esimerkiksi pieniannoksinen TT skannaus on havaittu olevan käyttökelpoinen varhaisen diagnoosin keuhkosyöpään, vaikka vääriä positiivisia korko on noin 96% [2]. Veri markkereita voi tarjota noninvasive tapa tunnistaa oikeilla positiivisilla potilailla, joilla epäillään keuhkosyöpään CT.

Olemme löytäneet noin 10% terveiden verrokkien ollut verisuonitukos IGFBP2 taso 437ng /ml tai suurempi. Ei ole selvää, ovatko nämä henkilöt olivat tavanomaisia ​​muunnoksia tai ollut diagnosoimatta sairaus. Rajoituksena tämä työ on, että seurannan kliinisiä tietoja ei ollut saatavilla ratkaista tämän kysymyksen. Koska veri IGFPB2 oli kuitenkin käänteisesti yhteydessä painoindeksi terveillä ihmisillä [38], epäilemme, että veri IGFBP2 voisi olla korkea joissakin terveillä ihmisillä, joilla on hyvin alhainen painoindeksi. Vaikka plasman IGFBP2 pitoisuudet terveille aikuisille oli minimaalinen vaihteluista 48 tunnin näytteenottoaikaa ja ei muuttunut merkittävästi aterian jälkeen tai sen jälkeen glukoosi-infuusio, plasma IGFBP2 lisääntyi noin 1,7-kertaiseksi potilailla, joilla äärimmäisen insuliinin puutos tai 9 päivän kuluttua paasto [39].

viime proteomic tutkimuksen ensisijainen NSCLC tuumorikudoksista osoitti, että alaryhmä keuhkosyöpäpotilaita oli dramaattinen kasvu IGFBP2 niiden ensisijainen kasvainkudoksessa [22]. Koska näytteet olivat peräisin eri sarjoista potilaiden, ei ollut selvää, oliko veren IGFBP2 liittyi lisääntynyt IGFBP2 ilme kasvaimen kudoksissa, vaikka tällainen korrelaatio havaittiin kaksi pariksi näytteistä. Kuitenkin sopusoinnussa havainto primaarikasvaimen kudoksissa, veressä IGFBP2 lisääntyi myös osajoukko Tutkimuksemme n keuhkosyöpäpotilaita. On kiinnostavaa tutkia, lisääntynyt IGFBP2 veressä tai primaarikasvaimen edustaa erityisiä muutoksia signaalin siirtoon, aineenvaihduntaan tai biologisia toimintoja keuhkosyöpä, kuten ilmoitettiin gliooman; että syöpä, lisääntynyt IGFBP2 voisi toimia biomarkkerina PTEN tila ja PI3K /AKT aktivointi [40] tai INK4a-Arf asema [41].

yhdistys veren IGFBP2 lyhyemmillä eloonjäämiseen raportoitu täällä keuhkosyöpäpotilaita ja muiden munasarjasyöpä, peräsuolen syöpä, ja eturauhassyövän [28,29,31] viittaa siihen, että IGFBP2 voi edistää pahanlaatuinen evoluution ja etenemiseen. Todellakin, IGFBP2 /integriini /ILK /NF-kB verkko äskettäin raportoitu olevan avainasemassa gliooman etenemiseen ja huono tulokset [42]. Lisääntynyt ilmentyminen IGFBP2 aiheuttama menetys miR-126 todettiin edistää rintasyövän syöpäsolumetastaasi rekrytoimalla endoteelisolujen syövän sivuston kautta ajan säätelemällä insuliinin kasvutekijän 1 reseptorin (IGF1 R) signalointireitin [12]. Koska molekyyli, joka kykenee sitoutumaan IGF, integriinit, ja soluväliaineen [6], IGFBP2 todennäköisesti on merkittäviä rooleja signaalitransduktiossa ja metabolisen homeostaasin kasvaimissa, mukaan lukien kohdistamaan autokriininen vaikutus syöpäsolujen ja parakriinisiä vaikutuksia endoteelisoluihin ja muut mesenkymaaliset solut . Karakterisointi IGFBP2 välittämää reittejä keuhkosyövän soluja voidaan antaa molekyylitason oivalluksia keuhkosyöpää etenemistä ja mahdollisia terapeuttisia kohteita keuhkosyöpäpotilaita lisääntynyt IGFBP2.

Materiaalit ja menetelmät

Potilasnäytteet

Hyväksytty verinäytteet 80 keuhkosyöpäpotilaita ja 80 terveen kontrollin ikä, sukupuoli, rotu, ja tupakointi historia. Saimme nämä näytteet verinäytteestä pankki säilyy Department of Epidemiology meidän laitokselle. Verinäytteet toisen 84 keuhkosyöpään potilasta joko tuotettiin samalla tavalla tai kerätään potilailta, joilla oli leikkaus The University of Texas MD Anderson Cancer Center vuodesta 2007 ja 2011. kerättiin verinäytteitä joko hepariinia tai etyleenidiamiinitetraetikkahappoa (EDTA) kuin antikoagulaatiovaikutus aineina . Plasma eristettiin sentrifugoimalla näytteet 1500g 5 min huoneen lämpötilassa. Pilottitutkimus kolme tervettä kontrolleilla ei ollut merkittävää eroa IGFBP2 seerumissa tai plasmat on saatu joko hepariinia tai EDTA samalta henkilöltä. Kaikki keuhkosyöpäpotilaita ja terveillä vapaaehtoisilla olivat allekirjoittaneet tietoisen suostumuksen lomakkeet näytteiden keräämistä. Tutkimus hyväksyi eettisen komitean University of Texas M D Anderson Cancer Center. Plasmanäytteet jäädytettiin ja pidettiin -80 ° C: ssa, kunnes määritykset tehtiin.

Entsyymi-immunosorbenttimääritys (ELISA) B

Plasma IGFBP2 mitattiin entsyymi-immunosorbenttimääritys (ELISA ) kit (Cell Sciences, Canton, MA, USA), seuraten valmistajan ohjeita. Lyhyesti, plasma laimennettiin 1: 200 laimennus puskurilla. Sata mikrolitraa laimennettua näytettä ja sarjalaimennettiin IGFBP2 standardeja lisättiin kahtena kuhunkin kuoppaan 96-kuoppalevylle esipäällystetty IGFBP2 sieppaava vasta-aine. Kun oli inkuboitu 4 ° C: ssa yön yli, levyt pestiin fosfaattipuskuroidulla suolaliuoksella, joka sisälsi 0,05% Tween 20: tä, ja niitä inkuboitiin biotinyloidun anti-ihmis-IGFBP2 toteamisvasta-ainetta ja piparjuuren peroksidaasi-konjugoitua streptavidiinia. Entsyymiaktiivisuus piparjuuriperoksidaasi määritettiin sen substraatin 3,3 ’, 5,5’-tetrametyylibentsidiiniä mittaamalla absorbanssi 450 nm: ssä käyttäen 96-kuoppaisen levyn lukijaa (Dynatech International, Chantilly, VA, USA). IGFBP2 pitoisuus laskettiin standardikäyrästä.

immunohistokemiallinen värjäys

immunohistokemiallinen värjäys suoritettiin klo histologia Core Laboratory toimielimestämme Lab Vision Autostaineriin 360 (Thermo Scientific). Formaliinifiksoidusta ja parafinoidut kudosleikkeiden (5-pm paksu) poistettiin parafiini, sammutettua, ja kuumennettiin höyrystimen antigeenin haku. Levyjä inkuboitiin sitten kanin anti-humaani IGFBP2-vasta-ainetta (Cell Signaling Technology). Kanin anti-ihmis-IgG käytettiin negatiivisena kontrollina primäärisen vasta-aineen. Piparjuuri peroksidaasiin konjugoidulla sekundaarisella vasta-aineella tarjosi histologia Core Laboratory.

Tilastollinen

Käytimme tilasto-ohjelmalla Stata 10,1 for Windows (StataCorp LP, College Station, TX, USA) suorittaa kaikki tilastolliset analyysit. Arvot IGFBP2 ilmaistaan ​​keskiarvona ± keskihajonta (SD). Analysoimme väestötietoja kanssa chi-neliö testi ja verrataan jatkuvan datan riippumaton-näyte Studentin t-testi. Vertasimme erot plasman IGFBP2 tapausten ja kontrollien välillä käyttäen epäparametrisia U-testi ja arvioida suhdetta IGFBP2 tasojen ja kliiniset parametrit yhden muuttujan lineaarista regressioanalyysiä. Rakensimme eloonjäämiskäyristä mukaan pitoisuuksia plasmassa IGFBP2 käyttäen Kaplan-Meier menetelmällä ja verrattiin eloonjäämismediaani kertaa log-rank-testi. Hazard suhde ja 95%: n luottamusväli selviytymisen arvioitiin Coxin monimuuttuja verrannollinen vaara regressioanalyysi korjattuna kasvaimen koon, sairauden vaiheessa, ja kasvainhistologiaa. Kaikki

P

arvot kaksitahoiset 0,05 määritetty kynnys tilastollista merkittävyyttä.

Kiitokset

Haluamme kiittää Luanne Jorewicz hänen toimituksellista tämän käsikirjoituksen .