Krooninen sairaus

tiivistelmä

Tarkoitus

Sirtuin geeniperheen on yhdistetty tuumorigeneesiä, sekä kasvaimen promoottori ja vaimennin kapasiteettia. Tiedot toiminta sirtuins haimasyövän on harvaa ja moniselitteinen. Lupasimme uusi tutkimuksessa, SIRT1-7 proteiinin ilmentymistä kohortin haiman kasvaimia. Tarkoituksena oli selvittää perustaa proteiinin ilmentyminen profiilin SIRT1-7 vuonna haimatiehyen adenokarsinoomat (PDAC) ja määrittää oliko assosiaatioita SIRT1-7 ilmaisu, kliinis-patologinen parametrit ja potilaiden hoitotuloksiin.

materiaali ja menetelmät

immunohistokemiallinen analyysi SIRT1-7 proteiinin tasot tehtiin kudoksessa mikro-array, joka sisältää 77 resekoitu PDACs. Tilastolliset analyysit määritettiin jos SIRT1-7 proteiinin ilmentyminen liittyi kliiniset oireet tai tuloksesta.

Tulokset

Kaksi Sirtuin perheenjäsenet osoittivat merkittäviä assosiaatioita kliinis-patologinen parametrit ja potilaiden hoitotuloksiin. Alhainen SIRT3 ilmentymistä kasvaimeen sytoplasmassa korreloi aggressiivisempia kasvaimia, ja lyhyempi aika taudin uusiutumiseen ja kuolema, ilman kemoterapeuttisen väliintuloa. Alhainen ydin- SIRT7 ilmaisun myös liittynyt aggressiivinen kasvain fenotyyppi ja huonompi tulos, mitattuna taudista vapaan ja tautikohtaista elinaika 12 kuukautta post-diagnoosi.

Johtopäätökset

Tuloksemme viittaavat siihen, että SIRT3 ja SIRT7 niillä tuumorisuppressoriproteiinia ominaisuuksia yhteydessä haimasyövän. SIRT3 voi myös edustaa uutta ennakoivaa biomerkkiaine mitkä potilaat voivat tai eivät voi vastata kemoterapiaa. Tämä tutkimus avaa mielenkiintoisia katu tutkimuksen mahdollisesti tunnistaa ennustavan biomarkkereita ja uusia terapeuttisia tavoitteita haimasyövän, sairaus, joka on nähnyt mitään merkittävää parannusta selviytyminen 40 viime vuoden aikana.

Citation: McGlynn LM, McCluney S, Jamieson NB, Thomson J, MacDonald aI, Øien K, et al. (2015) SIRT3 SIRT7: Mahdolliset uusien biomarkkereiden määrittelemiseen tulos Haimasyöpä Potilaat. PLoS ONE 10 (6): e0131344. doi: 10,1371 /journal.pone.0131344

Editor: Wei-Guo Zhu, Pekingin yliopiston Health Science Center, Kiina

vastaanotettu: 12 helmikuu 2015; Hyväksytty: 1 kesäkuu 2015; Julkaistu: 29 kesäkuu 2015

Copyright: © 2015 McGlynn et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään

Data Saatavuus: kaikki asiaankuuluvat tiedot sisällytetään paperiin.

rahoitus: kirjoittajat saanut mitään erityistä rahoitusta tähän työhön.

kilpailevat edut: kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Haimasyöpä on viides yleisin syy syövän kuolleisuus Britanniassa; se on nähnyt mitään merkittävää parannusta selviytyminen 40 viime vuoden aikana [1] ja on edelleen yksi aggressiivinen kiinteä syöpäsairauksia. Valtaosa (~ 90%) diagnosoitiin syövät ovat haimatiehyen adenokarsinoomat (PDAC), jotka kehittävät läpi ei-invasiivisia esiasteleesioita, haiman intraepiteliaalisten neoplasiat (Panin) [2]. Yleinen tulos on huono, johtuen tyypillisesti myöhään esitys, varhainen etäpesäke ja nopean hyökkäyksen, jossa vain noin 4%: lla potilaista elävät 5 vuotta diagnoosin jälkeen [2, 3].

Vaikka kronologinen ikä on vahvin determinantti kehittäminen useimmat ihmisen maligniteettien [4], biologinen vanheneminen (ikääntyminen tasolla solun, kudoksen ja elimen), voi olla kliinisesti merkittävää, koska se vaikuttaa geneettinen, epigeneettiset, ympäristö-, metabolinen ja psykososiaaliset tekijät [5]. Sinänsä yksilöiden välisiä eroja syöpäalttiutta ja sairauden eteneminen voidaan tarkoituksenmukaisempaa heijastuu vaikuttavat tekijät biologisen vanhenemisen. Olemme aikaisemmin käytetty tekijöitä biologisissa ikääntyminen tutkimaan tuumorigeeninen prosessi ja toimittaa uusia prognostista ja terapeuttisia tietoja [6-9]. Nämä biologiset ikääntymiseen liittyviä tekijöitä ovat Sirtuin geeniperheen, jotka osallistuvat säännellään solujen vanhenemista, stressi ja metabolisia prosesseja [10-14]. On nopeasti kasvava tietopohja osallistumisestaan ​​tuumorigeneesiä.

jäsenet Sirtuin perheen, SIRT1-7, ovat nisäkkäiden ortologeja hiivan proteiinin, hiljainen tieto säännöllinen 2 (SIR2), jotka oletetaan säätelevän elinikä eri eliöiden

. Sirtuins säädellä useita soluprosesseja, mukaan lukien DNA: n korjautumiseen, insuliinin eritystä, solusyklin kontrolli, telomeerisesti huolto- ja solujen aineenvaihduntaan [12, 13, 15]. Heidän subsellulaarinen sijainti ja alustoille erilaisia ​​riippuen niiden yksittäisten toimintojen. On ehdotettu, että sirtuins voi toiminnallisesti yhdistää mitokondrioissa ja Telomeeri nukleoproteiinikompleksien kanssa Ribosomi välittämän proteiinibiosynteesin (kutsutaan MTR) [16]. Tämä viittaa siihen, että sirtuins auttaa säätelemään taso kulutetun polttoaineen solu vastauksena stressiä ja että taso liittyvä energiankulutus kuvastaa vaatimusta korjaamiseen liittyvät DNA-vaurioita. Siksi sirtuins osallistuvat solujen päätöksiin vastauksena vahinkoa, joka huipentui joko korjata tai kuolema. Dysregulation yksittäisten Sirtuin toiminnot saattavat siten haitata solujen kykyä määritellä tarkasti asianmukaisen vastauksen, mahdollisesti edistää syöpää aiheuttava prosessi.

Tätä hypoteesia tukee monenlaisia ​​todisteita yhdistää Sirtuin ilmaus ihmisen maligniteetti. SIRT1 yli-ilmentyminen on todettu useissa syövissä, mukaan lukien eturauhas-, AML ja peräsuolen syöpä [17-19], kun taas SIRT3 ja SIRT7 tasojen on osoitettu yliekspressoituvan imusolmukkeisiin rintasyövän [9]. Sen vuoksi on ehdotettu, että sirtuins toimivat kasvaimen promoottorit. On kuitenkin yhä selvemmin, että sirtuins eivät kaikki toimivat samalla karsinogeneesissä. On kuvaavat raportit laskivat SIRT1 ilmentymistä eri syöpiä, kuten munasarjan ja virtsarakon maligniteettien [20, 21]. Tämä todiste viittaa siihen, että sirtuins myös olla potentiaalia toimia tuumorisuppressorien, ja Oletetaankin että molemmat SIRT2 ja SIRT6 teko siten [6, 7, 22]. Dual toiminnallisuutta, riippuen ensisijainen lähde kasvain ja luokan kasvain on myös raportoitu joka lisää monimutkaisuutta tahansa johtuvan toiminnallista roolia yksittäisten sirtuins [7].

On ollut vähän tutkimuksia tutkivat sirtuins haimasyövän, joista suurin osa on keskittynyt SIRT1. Zhao et al osoittivat alentunut lisääntymistä, invaasiota ja lisääntynyt apoptoosin haimasyövän solulinjoissa seuraavat SIRT1 RNAi Knockdown ja he oletettu että SIRT1 alassäätöä voisivat edustaa uutta terapeuttista hoitoa haimasyövän [23]. Tätä päätelmää tukevat havainnot, että SIRT1 esto voi estää acinar-to-duktaalisia metaplasiaa ja vähentää haiman adenokarsinooma (PDAC) kasvainten solujen elinkelpoisuus [24]. Toisaalta, toinen tutkimus on ehdottanut, että aktivointi SIRT1 inhiboivat haimasyövän soluja, jotka ilmaisivat onkogeenin haiman adenokarsinooma säädelty tekijä (PAUF), ja että SIRT1 aktivointi voisi olla uusi terapeuttinen strategia [25]. Vähän tiedetään muiden sirtuins, lukuun ottamatta SIRT 6, joka on esitetty edistävän sytokiinin tuotannon ja muuttoliike haiman syöpäsoluissa, vastaavasti ehdotettiin, että SIRT6 estäjät voivat toimia uutena hoitoon haimasyövän [26].

huolimatta viimeaikaisesta kiinnostusta Sirtuin perheen tutkimuksen yhteydessä haimasyövän ei ole vain harva, mutta tuloksettomia. Siksi ovat sitoutuneet uusi tutkimus tutkii rooli SIRT1-7 proteiinin ilmentymisen kohortin haiman kasvaimia. Tarkoituksena oli selvittää perustaa proteiinin ilmentymisen profiilia SIRT1-7 vuonna PDAC kasvaimia ja selvittää, onko mitään assosiaatioita SIRT1-7 ilmaisu, kliinis-patologinen parametrit ja potilaiden hoitotuloksiin.

Methods

Patient kohortti

näytteet on saatu 77 potilaalla, joille pankreatikoduodenektomia Glasgow Royal Infirmary vuosien 1993 ja 2006 haiman adenokarsinooma käytettiin tässä tutkimuksessa. Kaikki resektiota suoritettiin parantava tarkoitus. 83,1% potilaista oli toistumisen ensisijaisen kasvaimen (keskimääräinen paluuaika (tautivapaan elinajan) = 17,1 kuukautta), kun taas 84,4% potilaista kuoli seurauksena niiden syövän (keskimääräinen elinaika (tautikohtaisia ​​selviytyminen) = 21,4 kuukaudet). Keskimääräinen potilaan ikä klo resektio oli 62 vuotta. Kliinis-patologinen potilaan ominaisuuksista kohortin esitetään taulukossa 1. Kaarileikkaus marginaali osallistuminen (R1) tila määriteltiin läsnäolo tuumorin tai ≤ 1 mm liikkumavaraa, kun sitä arvioidaan mikroskoopilla on hematoxylin- ja-eosiini värjätään slide [27]. Eettinen hyväksynnän käyttää arkistomateriaalia haiman kudosta microarray muodostumista ja biologisten merkkiaineiden tutkimus myönsi NHS Research Scotland GGC Biorepository eettisen komitean (Southern General Hospital). Johto suostumus prosessi järjestää Glasgow Biorepository. Generic kirjallinen suostumus varastointia ja käyttöä kudoksen tutkimuksessa saavutettiin ennen resektiota. Arkistointia kerätyt näytteet ennen toteuttamista mahdollisille suostumus prosessi, hyväksyntä kudosten käyttöön oli saatu NHS Research Scotland GGC Biorepository.

immunohistokemia

TMA rakennettiin varten haimatiehyen adenokarsinomia [28]. IHC for SIRT1-7 suoritettiin TMA. Kaikki vasta-spesifisyys varmistettiin western blottauksella, solupelletti tai estävän peptidin kokeiluja. TMA poistettiin vaha ja rehydratoitiin läpi sarjan ksyleenin ja alkoholin pesee. Antigeeni haku suoritettiin kuumentamalla liukuu paineen alaisena joko TE Buffer (SIRT1-2 SIRT5-7) tai sitraattipuskurilla (SIRT3 4) viideksi minuutiksi mikroaaltouunissa, jossa 20 minuutin jäähtyä aikana. Endogeeninen peroksidaasi estettiin inkuboimalla 3% vetyperoksidia (VWR) 10 minuutin ajan. Esto suoritettiin käyttäen 1,5% normaalia hevosen seerumia (Vector Laboratories) yhden tunnin ajan 25 ° C: ssa. Levyjä inkuboitiin vastaavien vasta-aineella 1 tunnin ajan 25

° C (1: 1000 SIRT2, Kanin anti-ihmisen polyklonaalisen, elinikä Biosciences (LS-B1565)), 2 tunnin ajan 25

° C (1 : 500 SIRT5, Kanin anti-ihmisen polyklonaalisen, Abcam (ab49173) 1: 500 SIRT6, kanin anti-humaani, käyttöikä Biosciences (LS-B900)), tai yön yli 4

° C (1: 500 SIRT1, Rabbit anti-ihmisen monoklonaalinen, Abcam (ab32441), 01:50 SIRT3, kanin anti-humaani monoklonaalinen, Cell Signalling Technology (# 2627), 1: 400 SIRT4, vuohen anti-ihmisen polyklonaalisen, Abcam (ab10140) 1: 500 SIRT7 , Kanin anti-ihmisen polyklonaalisen Abcam (ab78977)). Kussakin ajaa negatiivisen ja positiivisen kontrolli oli mukana. Rinta- ja paksusuolen kudokset, jotka olivat tiedetään ilmentävän suuria määriä kiinnostuksen kohteena olevaa proteiinia käytettiin verrokkeina. Positiivinen kontrolli kysymys käsiteltiin vasta-aineen ja negatiivinen kontrolli kudoksen vasta-laimentimen (DAKO). Signaalin kaikki vasta-aineet, bar SIRT4, visualisoitiin inkubaation jälkeen EnVision (DAKO, UK) 25 ° C: ssa 30 minuutin ajan, ja 3,3′-diaminobentsidiini (DAB, Vector Laboratories, UK). SIRT4 vasta-aine nostettiin vuohen ja siksi LSAB + järjestelmä (DAKO) käytettiin, koska kohti valmistajan ohjeiden. Kuvio 1 esittää värjäytymistä havaittu ja spesifisyys validointi kunkin Sirtuin vasta-aineen.

Kunkin Sirtuin vasta-aineen negatiivinen kontrolli (vasta laimennin vain) on havainnollistettu, sekä kudoksen ydin värjättiin vasta-aineen kanssa. Vasta-aineen spesifisyyden validoitiin kautta käyttämällä estävän peptidin kilpailla kudosvärjäyksellä tai IHC on formaliinikiinnitetyt parafiiniin upotettuja solupelletteihin käsitelty resveratrol.

Histoscore Menetelmä

Kaksi itsenäistä tarkkailijaa teki kasvaimen ytimet käyttäen painotettua histoscore menetelmä [29]. Värjäytymisvoimakkuus luokiteltiin prosenttiosuus solujen negatiivinen (0), heikko (1), kohtalaista (2) ja voimakas (3) värjäys. Lopullinen histoscore laskettiin seuraavan kaavan mukaan:

Histoscore = (0 x% negatiivinen kasvainsoluja) + (1 x% heikko kasvainsoluja) + (2 x% kohtalaisen kasvainsoluja) + (3 x % vahvan kasvainsoluja) B

histoscore vaihtelivat 0 300. välisen kaksi tarkkailijaa seurattiin laskemalla intraclass korrelaatiokerroin. Tulokset arvioitiin uudelleen, jos tulokset poikkesivat 50.

Tilastollinen analyysi

Tilastollinen analyysi suoritettiin SPSS tilastollista pakettia (versio 19 Windows). Basic kuvailevia tilastoja tehtiin kullekin vasta-aineelle. Pearsonin korrelaatiokertoimet laskettiin määrittää korrelaatio-proteiinin ilmentymisen ja tunnetaan prognostisia markkereita, kun taas Mann-Whitneyn testiä käytettiin vertaamaan ilmentymisen tasolle luokitellaan muuttujat, kuten kasvaimen ja imusolmukkeiden tila. Khiin neliö suoritettiin vertaamaan binary histoscores eri prognostisia indikaattoreita.

chi-square testejä ja selviytymisen analyysit, potilaat jaettiin kahteen ryhmään: ne, jotka ilmensivät runsaita tasoja proteiinia ja ne, jotka ilmaistaan ​​alhainen niiden kasvain. Kaikkien sirtuins, korkeat ekspressiotasot määriteltiin IHC tulokset yhtä suuri tai suurempi mediaanin, kun taas alhainen määriteltiin tulokset alle mediaanin.

Kaplan Meierin eloonjääminen analyysi tehtiin arvioida eroja tauti vapaa eloonjääminen ja tautikohtaista selviytyminen kertaa käyttäen haimasyövän toistuminen ja haimasyövän erityisiä kuolemia kuin kulloisetkin päätepisteissä. Cox useita regressio suoritettiin monimuuttujamenetelmin verrataan proteiinin ilmentymisen muuttujia, kuten kasvaimen kokoa, laatu ja imusolmuke tila. Riskisuhde analyysi tehtiin perustaa suhteellinen riski potilaan aaltomaisesti tai kuolee suhteessa proteiinin ekspressiotasoja. Arvoa p 0,05 katsottiin tilastollisesti merkitsevä.

Tulokset

Sirtuin proteiinin ilmentymistä haimasyövän

mediaani arvo ja alue histoscores saadaan jokaista Sirtuin esitetään taulukossa 2. sijainti solun ja ilmentymistaso yksittäisten sirtuins osoitettiin vaihdella PDAC kudoksessa. Esimerkkejä tuumorikudoksen, joilla oli matala ja korkea SIRT1-7, jotka korostavat näitä eroja on esitetty kuviossa 2.

esimerkkejä haiman ilmentävien kasvainten sekä matala ja korkea SIRT1-7 on esitetty.

SIRT5 liittyy kasvaimen patologisia parametreja, mutta ei potilaan lopputulokseen.

tilastollinen analyysi osoitti, että SIRT1, 2, 4 6 ilmentymistason haiman kasvainkudoksessa ei liittynyt tiedossa ennustetekijöiden tai potilaiden hoitotuloksiin. Kuitenkin korkeampi ydin- SIRT5 osoitettiin liittyvän kasvaimia 30mm kooltaan (p = 0,038) ja läsnäolo verisuonten ja imusuonten invaasiota (p = 0,042 p = 0,033, vastaavasti) (taulukko 3). Huolimatta näistä järjestöistä ei ollut yhteys SIRT5 ilmaisun ja potilaiden hoitotuloksiin, mitattuna joko taudista vapaan tai taudin aiheuttaman säilymiseen.

Low SIRT3 ilmentyminen liittyy markkereita huono tulos.

Potilaat, joilla on alhainen ydin- SIRT3 niiden kasvain olivat todennäköisemmin esiintyä korkealuokkaisesta, huonosti eriytetty haiman kasvaimet (p = 0,015 ja p = 0,05 vastaavasti). Samoin alhainen sytoplasman SIRT3 liittyivät korkealuokkaisesta kasvaimet (p = 0,035) (taulukko 3).

SIRT 3 voi kohdistua tehoa kemoterapiaa haimasyövän

Ei merkittävää suhteet välillä ei havaittu SIRT3 kasvaimen ekspressiotasot ja potilaan selviytymistä ja /tai sairauden uusiutumisen koko potilaan kohortin (n = 77). Koska SIRT3 on suora rooli säätelyssä solujen aineenvaihduntaan, katsottiin aiheelliseksi ositusta potilaat mukaan niiden kemoterapia asema, kuten aineenvaihdunta ja kemoterapian tehoa voidaan yhdistää. Todettiin, että 43,1% (22/51) potilaista, jotka ilmaisivat alhainen SIRT3 ja 56,8% (29/51) potilaista, jotka ilmensivät runsaita tasoja SIRT3 ei saanut kemoterapian. Tämä kerrostunut analyysi paljasti merkittävän selviytymisen ero matalan ja korkean SIRT3 sytoplasmista ilmentymistä potilailla, jotka eivät saaneet kemoterapiaa (kuvio 3). Potilailla, joilla on alhainen sytoplasman SIRT3 niiden kasvain oli huomattavasti lyhyempi aika uusiutumiseen kuin ne, joilla on korkea sytoplasman SIRT3 (p = 0,05, keskimääräinen paluuaika 11,8 vs 30,7 kuukautta, kuvio 3A). Alhainen sytoplasman SIRT3 siihen liittyi 1,95 kertaa suurempi riski aiemmin uusiutumisen (HR = 1,95 (0,98-3,84) p = 0,054). Monimuuttuja-analyysi paljasti, että sytoplasminen SIRT3 (p = 0,062), imusolmukkeesta tila (p = 0,008) ja kasvaimen erilaistumiseen (p = 0,041) olivat riippumattomia kasvaimen vaiheen ja laatu, vaikuttamisessa tautivapaan elinajan. Lisäksi sytoplasminen SIRT3 oli myös merkittävä vaikutus tautikohtaista eloonjäämisen potilailla ei saavat kemoterapiaa; alhainen SIRT3 liittyivät lyhyemmän aikaa kuolemaan (p = 0,014, keskimääräinen eloonjääminen 14,6 vs 34,7 kuukautta, kuvio 3B). Potilaat, joilla on alhainen SIRT3 oli 2,23 kertaa suurempi todennäköisyys kuolla aikaisemmin kuin ne, joilla on korkea SIRT3 (HR = 2,23 (1,15-4,29), p = 0,016). Coxin monimuuttuja-regressioanalyysiä paljasti, että sytoplasminen SIRT3 (p = 0,02), imusolmukkeesta tila (p = 0,006) ja kasvaimen erilaistumiseen (p = 0,006) olivat riippumattomia kasvaimen ja koon, vaikuttamisessa tautikohtaisia ​​selviytymistä. Ei ole merkittävää eroa tulos (taudista vapaa tai tautikohtaista) suhteen SIRT3 ilmaisun havaittiin potilailla, jotka saavat kemoterapiaa (kuvio 3C ja 3D).

Kaplan-Meier selviytymisen analyysit, stratifioituna kemoterapiaa tila, suoritettiin. Potilaat, jotka eivät saaneet kemoterapiaa ja ilmaisi alhainen sytoplasman SIRT3 niiden kasvaimet olivat todennäköisemmin (a) uusiutumisen nopeammin (p = 0,05 11,8 vs 30,7 kuukautta) ja (b) die aikaisemmin (p = 0,014, 14,6 vs 34,7 kuukautta) kuin potilailla, jotka ilmaisivat korkea SIRT3. Toisaalta ei ollut merkittävää eroa tulos mitattuna (c) aika uusiutumiseen tai (d) aika kuolemaan suhteen SIRT3 ilmentymisen potilailla, jotka saivat kemoterapiaa.

Lisäksi potilailla, joilla on alhainen SIRT3 ilmaisu, jotka saivat kemoterapiaa ollut pidemmän aikaa uusiutumiseen (20 vs. 11,8 kuukautta, p = 0,057) ja kuoleman (279. vs 14,6 kuukautta, p = 0,032) kuin ne, jotka eivät saaneet kemoterapiaa (kuvio 4A ja 4B). Kääntäen, potilaat, jotka ilmaisivat korkeita SIRT3 ja käsiteltiin kemoterapia oli lyhyempi aika taudin uusiutumiseen (14.3vs 30,7 kuukautta, p = 0,159) ja kuoleman (18,3 vs. 34,7 kuukautta, p = 0,148) kuin ne, jotka eivät saaneet kemoterapiaa, vaikka tämä ei ollut tilastollisesti merkitsevä (kuvio 4C ja 4D).

Potilaat, joilla on alhainen SIRT3 ilme, jotka saivat kemoterapiaa oli (a) pidempi aika uusiutumiseen (20 vs. 11,8 kuukautta, p = 0,057) ja (b ) pidempi aika kuolemaan (27,9 vs. 14,6 kuukautta, p = 0,032) kuin ne, jotka eivät saaneet kemoterapiaa. Kääntäen, potilaat, jotka ilmaisivat korkeita SIRT3 ja käsiteltiin kemoterapia oli (a) lyhyempi aika relapsiin (14.3vs 30,7 kuukautta, p = 0,159) ja (b) lyhyempi aika kuolemaan (18,3 vs. 34,7 kuukautta, p = 0,148) kuin ne, jotka eivät saaneet kemoterapiaa, vaikka tämä ei ollut tilastollisesti merkitsevä.

SIRT7 voi toimia ennustetyövälineenä indikaattori potilaiden haimasyöpä

Alhainen sekä soluliman ja ydin- SIRT7 olivat yhteydessä kasvaimia, jotka olivat R1 asemointia ( 1 mm) (p = 0,039 p = 0,017 vastaavasti). Lisäksi alhainen sytoplasman SIRT7 liittyivät korkealuokkaisesta kasvaimet (p = 0,032) (taulukko 3).

Survival analyysissä ei havaittu merkittäviä eroja taudista vapaa tai taudin aiheuttaman elinaika välillä potilaille, joiden kasvaimia oli matala tai korkea SIRT7 ydinvoiman ilme. Kuitenkin ilmeni selviytymisen tontteja oli jako pieni /suuri SIRT7 ilmaisun linjat noin 12-14 kuukausi (kuvio 5A ja 5B). Analyysi siis suoritettiin potilasryhmässä jotka elivät pidempään kuin 12 kuukautta (n = 44). Potilaat, joilla on alhainen SIRT7 ydin- ilmaisu näytteillä lyhyempi tautivapaan elinajan ajan (p = 0,028, keskimääräinen taudista vapaa aika 20,1 vs 38 kuukautta, HR = 2,05 (1,07-3,92) p = 0,031, Kuvio 5C). Coxin monimuuttuja-regressioanalyysiä paljasti, että ydinaseiden SIRT7 lauseke (p = 0,023) ja imusolmukkeesta tila (p = 0,004) olivat riippumattomia kasvaimen erilaistumiseen, vaihe ja laatu, vaikuttamisessa tautivapaan elinajan.

Survival analyysi koko kohortti ei havaittu merkittäviä eroja (a) taudista vapaan eloonjäämisen tai (b) taudin aiheuttaman elinaika välillä potilaille, joiden kasvaimet olivat matalia tai korkeita SIRT7 ydinvoiman ilme. Kuitenkin ilmeni selviytymisen tontteja oli jako pieni /suuri SIRT7 ilmaisun linjat noin 12-14 kuukausi. Analyysi siis suoritettiin potilasryhmässä jotka elivät pidempään kuin 12 kuukautta (n = 44). Potilaat, joilla on alhainen SIRT7 ydin- ilmaisu näytteillä (c) lyhyempi tautivapaa elinaika (p = 0,028, 20,1 vs 38 kuukautta) ja (d) väheneminen taudin aiheuttaman ajan (p = 0,026, 26,9 vs 43,1 kuukautta) kuin potilailla joiden kasvain ilmensivät runsaita SIRT7 tasoja.

Lisäksi potilailla, joilla on alhainen kasvaimen SIRT7 ydin- ilme osoitti laskua taudin aiheuttaman ajan (p = 0,026, keskimääräinen tautikohtaisia ​​ajan 26,9 vs 43,1 kuukautta) (kuvio 5D). Nämä potilaat olivat 2,09 (1,08-4,03) kertaa suurempi todennäköisyys kuolla nopeammin kuin yksilöiden korkea ydinvoiman SIRT7 (p = 0,029). Coxin monimuuttuja-regressioanalyysiä paljasti, että ydinaseiden SIRT7 (p = 0,020) ja imusolmukkeesta tila (p = 0,007) olivat riippumattomia kasvaimen erilaistumiseen, laatu ja koko, vaikuttamassa aika kuolemaan.

Keskustelu

Tämä tutkimus pyrki selvittämään SIRT1-7 proteiinin ilmentyminen liittyi kliinis-patologisia piirteitä haimasyövän, ja määrittää niiden mahdollinen käyttö ennustetekijöitä /ennustava markkereita. Tähän mennessä hyvin vähän on tutkittu vuorovaikutusta sirtuins ja haiman tuumorigeneesiä. Nämä tutkimukset ovat keskittyneet pelkästään SIRT1 ja SIRT6 ja ovat tuottaneet ristiriitaisia ​​tuloksia [23-26]. Mielenkiintoista, Tutkimuksessamme hyödyntäen ihmisen resektoitiin haimakasvain TMA, tutki kaikki seitsemän sirtuins ja on sekaantunut SIRT3 ja SIRT7 koska ne liittyvät kehittyneempien haimasyöpä. Mikään jäljellä sirtuins osoitettiin liittyvän potilaiden hoitotuloksiin, mitattuna taudista vapaan ja tautikohtaista selviytymistä. Sekä SIRT3 ja SIRT7 näyttävät toimivan tuumorisuppressoreilla yhteydessä haimasyövän; alhainen molemmat proteiinit liittyivät aggressiivisempia kasvaimen fenotyyppien ja köyhien potilaiden hoitotuloksiin.

On ollut jatkuvaa keskustelua siitä SIRT3 toimii kasvaimen promoottori tai vaimennin [30]. Tämä johtuu sen ristiriitaisia ​​rooleja säätelyssä solujen lisääntymisen ja eloonjäämisen [31, 32]. Tuloksemme kuitenkin tukevat hypoteesia, jonka mukaan SIRT3 vaikuttaa ensisijaisesti tuumorisuppressorina, mahdollisesti edistämällä apoptoosin, toiminto joka saattaa kadota aggressiivisemman syöpäsairauksia. Tämä on sopusoinnussa havaintojen kolorektaalisyövässä, jossa SIRT3 on liittynyt kasvun pysähtymisen ja proapoptoottiset toimintojen kautta vuorovaikutus sekä p53 /Bcl-2 ja JNK2 /JNK1 reitit [33] ja säätelemällä HF1A ja ROS [34]. On raportoitu, että menetys SIRT3 laukaisee hapettumista kanssa reaktiivisia happiradikaaleja (ROS) signalointi luoda suotuisa ympäristö tuumorigeneesiä.

SIRT3 on mitokondrion proteiini ja säätelee useita metabolisia prosesseja kuten rasvahappojen hapettumista , oksidatiivisen fosforylaation ja TCA sykli [35, 36]. Ratkaiseva vaihe tuumorigeneesiä prosessissa on aineenvaihdunnan uudelleenohjelmointi. Syöpäsolut, verrattuna normaaleihin soluihin, luottaa korotettuun aerobinen Glykolyysivaiheen (jopa hapen läsnäollessa), jotta lisääntyä. Siksi on biologisesti uskottava, että menetys, tai väheneminen SIRT3 ilmaisun, voisi olla haitallinen vaikutus solujen aineenvaihduntaan, mikä johtaa lopulta tuumorigeneesiä. On ehdotettu, että aktivointi SIRT3 aiheuttaa siirtyminen glykolyysistä oksidatiivisen fosforylaation ja aktivaation trikarboksyylihappoa (TCA-kierto), sitten hidastaa kasvainsolujen kasvua [35]. Tämä hypoteesi on yhdenmukainen havaittu suhteen SIRT6 sääntelyä Warburg vaikutus, jos menetys SIRT6 kasvaimen ehkäisevästä toiminto ohjaa tätä kytkintä glukoosiaineenvaihdunnan [6]. Erityisesti on osoitettu, että vähentäminen ilmentymisen SIRT3 hiiren MEF ja

in vivo

malleissa lisännyt hapettumista, säätely ylöspäin ROS välittämän signaloinnin aktivointi HIF-1α ja metabolisen uudelleenohjelmointi jotka kaikki osaltaan tehostaa lisääntymistä ja tuumorigeneesiä [37].

tulokset tukevat tällaista hypoteesia, jonka mukaan alhainen SIRT3 edistää lisääntymistä, ja niihin liittyy enemmän aggressiivinen kasvaimia, jotka hyötyvät kemoterapiaa, joka kohdentuu nopeasti lisääntyviä soluja. Pitäen mielessä, meidän tiedot osoittavat, että potilailla, joiden kasvain ilmentää alhainen SIRT3 olivat todennäköisesti taudin uusiutumiseen ja kuolevat aikaisemmin, jos he eivät ole saaneet kemoterapiaa. Tämä ei ollut ilmeinen potilailla, joiden kasvaimet ilmaisivat korkeita SIRT3. Analyysi potilaista, jotka saivat kemoterapiaa havaittu mitään selviytymisen eroa, joiden kasvaimet ilmaisivat matala tai korkea SIRT3 proteiinia tasolla, mikä viittaa siihen, että kemoterapeuttiset voivat lievittävän kielteisiä vaikutuksia vähennetään SIRT3 ilmaisua. Tämä on merkittävä, koska se tarjoaa mahdollisuuden terapeuttiseen interventioon. SIRT3 voi näin ollen edustaa uutta ennustavan biomarkkeri, joita voitaisiin käyttää ositusta potilaille mukaan niiden todennäköisyys vastata kemoterapiaa.

Tämä SIRT3 voi olla osallisena välittäjänä vaste kemoterapialle on mielenkiintoinen, koska viimeaikainen kehitys korostaa, että paasto voi suojata normaali /terveitä soluja kemoterapiaa, kun taas herkistävät syöpäsolut sen vaikutuksiin [38, 39]. SIRT3 kyky säädellä metabolinen stressi on paitsi piirre tuumorigeneesiä, vaan myös kalorien rajoittamista ja paasto. SIRT3 on havaittu suojaavan soluja hapettumista seuraavasti kalorien rajoittaminen [40]. SIRT3 joka sääntelee proteiineja, kuten IDH2, alayksiköiden kompleksin 1-2, sukkinaattidehydrogenaasi aktiivisuus ja pitkäketjuiset asyyli koentsyymi A: dehydrogenaasi (LCAD) [40, 41], jotka ovat mukana oksidatiivinen fosforylaatio, TCA sykli ja rasvahappojen hapettumista. On mahdollista, että paaston jälkeen ja säätelyä SIRT3, solujen siirtyä takaisin on korkea glykolyysistä oksidatiivisen fosforylaation ja TCA sykli, joka johtaa lopulta vähenemiseen solujen lisääntymistä. Todisteet hiiren malleissa viittaa siihen, että paasto yhdessä kemoterapian pienentää kasvaimen kokoa lähes puolet koko kasvaimia käsiteltyjen hiirien vain kemoterapiaa [39]. Tämä sama tutkimus osoitti myös, ero stressiä herkistymistä, jolloin paasto suojaa normaaleja soluja, mutta erityisesti herkistää kasvainsoluja myrkyllisiä vaikutuksia kemoterapeuttisten aineiden. Yksi hypoteesi Tämä selektiivisyys vastauksena liittyy SIRT3, on mahdollista, että paaston jälkeen, tasot SIRT3 kasvaa normaaleissa soluissa, glykolyysiin on kytketty pois päältä, ja tasot oksidatiivisen stressin ja leviämisen vähenevät, jotka kaikki palvelevat suojata normaaliin soluja vaikutuksia kemoterapiaa huumeita. Käänteisesti säädeltyyn kasvainsolut ehkä pysty lisäämään aktivointi SIRT3, jolloin jatkuva aerobinen Glykolyysivaiheen, parantaa proliferaatiota ja herkkyys kemoterapia. Lisäksi paasto /kalori rajoitus, liikunta on myös todettu lisäävän SIRT3 tasoa ja laskuri ikään liittyvä lasku [32, 42]. Tämä paasto voisi tehostaa nykyisten hoitomuotojen on jännittävä mahdollisuus ja korostaa, että elintapojen muutoksia eli ruokavalio ja liikunta voitaisiin hyödyntää yrittää parantaa potilaan hyvinvointia ja tulokseen.

Toisin SIRT3, tiedetään suhteellisen vähän toiminnon käyttämiseen liittyviä ja substraatteja SIRT7 ja sen toimintaa tuumorigeneesiä. Kuitenkin samalla tavalla kuin kaikki muut Sirts, data, joka on saatavilla on ristiriitaisia. SIRT7 on nucleolar proteiini ja on mukana ribosomien biogeneesissä ja rRNA transkriptio, koholla ilme mikä lisää transkriptio [43]. On myös ajateltu olla merkittävä rooli leviämisen, jossa näyttöä siitä, se on enemmän erittäin ilmaistaan ​​nopeasti lisääntyviin kudoksiin; mutta jotkut raporttia, se voi olla myös antiproliferatiivisia vaikutuksia [44, 45]. Uskotaan deasetyloida p53, vähentää sen toimintakyvyn ja vaikutusvalta solusyklikontrollin [46]. Tämä yhdistettynä sen ajokykyyn lisääntymistä, tarjoaa SIRT7 joiden mahdollinen rooli helpottaa tuumorigeneesiä. Niinpä todisteet osoittavat ristiriitaisia ​​toimintoja varten roolia, SIRT7 pelaa pahanlaatuinen sairaus. Selitys tähän saattaa olla kautta sen yhdessä p53. Greenblatt ym ehdotetaan 45-50% kaikista kasvaimista aineilla p53, ja tämä voi vaikuttaa kasvaimia synnyttävän roolia SIRT7, joten sen yhdessä kasvaimen tukahduttava ominaisuuksia [47]. Kuitenkin nyt on jonkin verran keskustelua siitä, onko p53 on todella deasetylaasi- kohde SIRT7. Viimeaikaiset havainnot ovat tunnistaneet SIRT7 niin toimii hyvin valikoiva deasetylaasi- lysiinin 18 histoni H3 (H3K18ac) [48-50]. Aikaisemmin on osoitettu, että alhainen H3K18Ac ovat yhteydessä aggressiivisempia kasvaimia ja huonompi potilaan lopputulosta [51, 52]. Todisteet viittaavat siihen, että deasetyloimalla H3K18, SIRT7 välittää transkription tukahduttaminen valitse ryhmä geenejä. Mielenkiintoista on, että suurin osa näiden geenien läsnä tuumorisuppressorigeenin ominaisuudet ja ovat mukana RNA käsittelyyn, proteiinin translaation ja solujen aineenvaihduntaan. SIRT7 voidaan tarvita ylläpitämään tuumorigeeninen fenotyyppi sijaan aloittaa solutransformaatioon sillä sen ilme oli tarpeen ankkurista riippumaton kasvu, leviämisen matalan seerumin olosuhteissa, kontakti-inhibition menetys ja kasvun tuumoriksenograftien [48]. Useat tutkimukset ovat osoittaneet, että SIRT7 on säädelty kasvaimissa mukaan lukien rinta-, kilpirauhasen ja maksasyövän [9, 53, 54].