Krooninen sairaus

tiivistelmä

Tarkoitus

Transforming kasvutekijä (TGF) -β1 signalointi on osallisena syövän solujen etäpesäke. Me tutkimme, yhden emäksen monimuotoisuus (SNP) osoitteessa

TGFp 1

liittyi yleiseen eloonjäämiseen (OS) ja kaukainen etäpesäke-elinaika (DMFS) potilailla, joilla ei-pienisoluinen keuhkosyöpä (NSCLC) käsiteltiin lopullista sädehoidon kanssa tai ilman kemoterapiaa.

Methods

genotyyppi

TGFp 1

SNP at rs1800469 (C-509T), rs1800471 (G915C), ja rs1982073 (T + 29C) mukaan polymeraasiketjureaktio-restriktiofragmenttipituuspolymorfismin verinäytteistä 205 NSCLC potilaalla, joilla oli ollut lopullinen sädehoitoa yhdellä laitoksen marraskuussa 1998-tammikuussa 2005. testasimme myös, onko

TGF-β1

rs1982073 (T + 29C) SNP vaikutti muuttoliikkeen ja hyökkäys A549 ja PC9 keuhkosyövän soluja.

tulokset

mediaani seuranta-ajan kaikille potilaille oli 17 kuukautta (vaihteluväli, 1-97 kuukautta, 39 kuukautta potilaiden elossa aikaan analyysi). Monimuuttuja-analyysi osoitti, että

TGFp 1

rs1800469 CT /CC-genotyyppi liittyy huono OS (riskisuhde [HR] = 1,463 [95%: n luottamusväli {CI} = 1,012-2,114],

P

= 0,043) ja lyhyempi DMFS (HR = 1,601 [95% CI = 1,042-2,459],

P =

0,032), ja että

TGFp 1

rs1982073 CT /CC-genotyyppi ennusti kehno DMFS ( HR = 1,589 [95% CI = 1,009-2,502],

P

= 0,046) ja heikko aivot MFS (HR = 2,567 [95% CI = 1,155-5,702],

P

= 0.021 ) säädön jälkeen iän, sukupuolen, rodun, suorituskyky tila, tupakointi, kasvainhistologiaa ja tilavuus, vaiheessa saatuaan samanaikainen radiochemotherapy, määrä kemoterapian syklien, ja säteilyannos. Transfektio

TGFp 1

+ 29C (vs. + 29T) stimuloi migraation ja invaasion A549 ja PC9 soluja, mikä viittaa siihen, että TGFp 1 + 29C voidaan yhdistää lisääntynyt metastaattinen potentiaali.

Johtopäätökset

TGFp 1

genotyyppien rs1800469 ja rs1982073 voisivat olla hyödyllisiä ennustettaessa DMFS potilailla NSCLC hoidettiin lopullisen sädehoitoa. Nämä havainnot edellyttävät validointi suuremmissa mahdollisille tutkimuksissa ja perusteellinen mekaaniset tutkimukset.

Citation: Yuan X, Wei Q, Komaki R, Liu Z, Yang J, Tucker SL, et al. (2013)

TGFp 1

polymorfismit Veikkaa etäpesäkkeiden vapaa elinaika leikkaushoitoon Non-Small-Cell Lung Cancer jälkeen Lopulliset Sädehoito. PLoS ONE 8 (6): e65659. doi: 10,1371 /journal.pone.0065659

Editor: Natasha Kyprianou, University of Kentucky College of Medicine, Yhdysvallat

vastaanotettu: 08 marraskuu 2012; Hyväksytty: 25 huhtikuu 2013; Julkaistu: 19 kesäkuu 2013

Copyright: © 2013 Yuan et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tuettu osittain Cancer Center Support (Core) Grant CA016672 MD Anderson Cancer Center. Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen. Ei ylimääräistä ulkoista rahoitusta saanut tätä tutkimusta.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Keuhkosyöpä edelleen johtava syy syövän kuolema , arviolta 160340 kuolemista Yhdysvalloissa vuonna 2012 [1]. Nykyinen hoidon taso leikkaushoitoon kuin pienisoluinen keuhkosyöpä (NSCLC), ylivoimaisesti yleisin esitys diagnoosi, on sädehoidon yhdistettynä kemoterapia. Kuitenkin eloonjäämisluvut jälkeen sellainen hoito edelleen huonot, koska korkeat hinnat uusiutumisen, sekä paikallisia ja etäinen. Yleisesti käytetty radio (chemo) terapiaohjelmlssa liittyy myös merkittäviä normaalia kudosta myrkyllisyys, mukaan lukien sädepneumoniitista, joka voi olla hengenvaarallinen. Parempi hoito strategiat suunniteltu mukaan kunkin yksittäisen potilaan luontainen herkkyys ja toksisuuden riski, kasvain ainutlaatuinen ilmentymä molekyylitasolla (s), ja riskit Paikallista tai kaukaisia ​​tauti uusiutuu kiireellisesti.

Yksi mahdollinen molekyyli biomarkkereiden ennustamiseksi hoitotuloksia jälkeen radiochemotherapy varten NSCLC, kannalta sekä kasvaimen vasteen ja normaalin kudoksen vaurioita, on muuttamassa kasvutekijä β1 (TGFp 1). Jäsenet TGFp sytokiinien superperheen saada monipuolista soluvasteita, kuten solujen lisääntymisen, migraation, fibroosia, apoptoosin, kudoksen tulehdus, haavan paranemisen, ja angiogeneesi [2] – [4]. Muutokset TGFli signalointi on raportoitu useita erilaisia ​​syöpää, mukaan lukien NSCLC [5], [6]. Vaikka TGF toimii tyypillisesti tuumorisuppressorina [7], [8], kuten kasvaimen kehityksen edetessä, kasvainsolujen hankkia vastustuskyky TGF-indusoidun kasvun pysähtymistä. Kolmesta tiedossa TGFli isoformia, TGFp 1 näyttää olevan suoraan mukana välittämässä metastaattisen aktiivisuuden syöpäsolujen [9]. Prekliiniset tutkimukset osoittavat, että inhibitio TGFp 1 signaloinnin downregulates kulkeutumista kasvainsolujen ja estää etäpesäkkeiden kehittymisessä [10], [11]. Siten TGFp 1 voi olla kaksoisrooli syövän kehittymisessä, tukahduttamaan kasvaimen kasvua alkuvaiheessa syövän vaan edistää kasvaimen etenemisen ja etäpesäkkeiden edenneessä vaiheessa [12], [13]. Todellakin, yhä näyttöä siitä, että TGFli signalointi on rooli kehityksen keuhkosyövän [14], [15]. TGFp 1 on myös osoitettu indusoivan epiteelisolujen-to-mesenkymaalitransitioon, jolla on keskeinen rooli ja metastaasit tietyntyyppisten syöpäsolujen [16]. TGF Edelleen on osallisena kasvainsolun herkkyyttä säteilylle ja kemoterapeuttisten [17] – [19].

Lisäksi sen vaikutuksia kasvainsoluihin, TGFp 1 on mukana myös vaste normaalien kudosten säteilylle tai radiochemotherapy. Kaksi ryhmää ovat osoittaneet alustavia todisteita siitä, että muutokset plasman TGFp 1 sädehoidon aikana voi ennustaa riskiä sairastua säteilystä aiheuttaman keuhkotulehduksen myrkyllisyys [20], [21]. Vahva yhdistyksiä on myös raportoitu välillä yhden nukleotidin polymorfismien (SNP) in

TGFp 1

ja säteilyn aiheuttamista fibroosia potilailla, joilla on rintasyöpä tai gynekologisia syöpiä [22], [23] ja SNP: iden välillä ja sädepneumoniitista potilailla, joilla on keuhkosyöpä käsitelty sädehoitoa tai radiochemotherapy [24]. Selvittämään prognostisia arvo

TGFp 1

SNP eri syöpätyyppien [25], [26] viittaavat siihen, että jotkut

TGFp 1

genotyyppien ennustaa aggressiivisempia kasvaimen fenotyyppien ja haitallisia ennustetta.

aiemmin arvioitu suhde kolmeen eri SNP

TGFp 1

[rs1800469 (C-509T), rs1800471 (G915C), ja rs1982073 (T + 29C)] ja kehittäminen sädepneumoniitista sairastavilla potilailla NSCLC käsitelty radiochemotherapy ja havaittiin, että CT /CC genotyypin

TGFp 1

rs1982073 (T + 29C) liittyi merkitsevästi pienempi sädepneumoniitista [24]. Lisäksi rs1982073 (T + 29C) ja rs1800469 (C-509T) on yhdistetty kohonneeseen seerumin TGFp 1 [26] sekä esiintyvyys invasiivisen rintasyövän [27]; rs1800469 (C-509T) on myös yhdistetty myöhäisvaiheen eturauhassyövän [26] ja paksusuolen syöpä [28]. Pohjalta julkaistut havainnot, tutkimme, ovatko nämä geneettisiä variantteja

TGFp 1

myös vaikuttaa kasvaimen vasteen ja tulos leikkaushoitoon NSCLC käsitelty lopullisia säteilyä tai radiochemotherapy suhteen arvioitu kokonaiselinaika (OS) ja kaukainen etäpesäke-elinaika (DMFS).

Methods

Oppiaineet tähän retrospektiivinen analyysi valittiin suuri tietokanta 740 potilasta NSCLC, joita oli hoidettu The University of Texas MD Anderson Cancer Centerin marraskuussa 1998 2009. kaikkiaan 261 potilasta, joiden on todettu oli kokonaisuutena-verinäytteitä analysoitaviksi; kaikkia näitä potilaita oli hoidettu marraskuussa 1998 tammikuussa 2005. Näistä 261 potilasta, 56 jätettiin pois: 25 kuolleen muita sairauksia tai joiden elintärkeä asema oli tuntematon; 16, jotka olivat kuolleet NSCLC ilman tietoa kaukainen etäpesäke tai Paikallista sairaus, 2 joka oli leikattu, 1 joilla oli ollut pienisoluinen keuhkosyöpä, ja 12 joilla oli ollut vaiheessa IV sairaus, jättäen yhteensä 205 potilasta, joilla täydelliset tiedot nykyinen analyysi.

Genotyypin

Genominen DNA uutettiin leukosyyttien kokoverinäytteistä DNA veri Mini Kit (Qiagen, Valencia, CA) valmistajan ohjeiden mukaisesti. DNA puhtaus ja pitoisuus määritettiin spektrofotometrisesti absorbanssin mittaus 260 ja 280 nm: ssä. SNP TGFp 1 valittiin jotka täyttivät vähintään kaksi seuraavista kolmesta kriteeristä: (1) ilmoitetaan assosiaatioita keuhko- tai muiden syöpien; (2) vähäinen alleelin taajuus 5% yksilöiden valkoihoisia laskeutuminen; ja (3) sijainti-promoottorin tai koodaavan alueen geenin. Olemme genotyyppi kolme tällaista SNP-kohdista: rs1800469 (C-509T, että promoottorialueen), rs1800471 (G915C, eksonissa 1), ja rs1982073 (T + 29C, myös eksonissa 1) polymeraasiketjureaktiolla (PCR) -restriction fragment length polymorfismi kuten muualla on kuvattu [24].

In vitro arviointi rs1982073

TGFp 1 + 29C

tai

TGFp 1 + 29T

Vakaa Transfektantit

Testasimme myös, jos

TGFp 1

rs1982073 (T + 29C) C variantti genotyyppien vaikuttanut metastaattisen potentiaalin keuhkosyövän solujen in vitro seuraavasti. Näitä kokeita varten, A549 ja PC9 soluja, jotka molemmat ovat peräisin ihmisen keuhkojen adenokarsinooma, viljeltiin Hamin F12 (A549) tai RPMI 1640 (PC9), joka sisälsi 10% naudan sikiön seerumia ja antibiootteja (100 yksikköä /ml penisilliiniä ja 100 yksikköä /ml streptomysiiniä ) 37 ° C: ssa 5% CO

2, andmedium oli päivittyy joka 2-3 päivää. Kun soluviljelmät saavutti noin 50% konfluenssiin tuoretta seerumia, ne transfektoitiin kontrolli viruksen kanssa tai TGFp 1 (+ 29C tai + 29T) -overexpressing lentiviruksesta (konstruoitu, kuten on kuvattu jäljempänä) infektiokertoimella 100 , inkuboitiin 48 tunnin ajan, ja viljeltiin edelleen Hamin F12 (A549) tai RPMI 1640 (PC9). Transfektiotehokkuus, mitattuna solun ilmentymisen vihreän fluoresoivan proteiinin fluoresenssimikroskopialla (Leica DMI4000B), havaittiin olevan 99%. Transfektoidut solut testattiin sitten niiden invasiivisuus ja liikkuvuutta, kuten alla on kuvattu.

TGFp 1-cDNA: t monistettiin PCR: llä, jossa on cDNA-kirjasto keuhkoputkien sileän lihaksen soluja käytettiin DNA-templaattina. Alukkeet olivat 5′-CCAAGCTTATGCCGCCCTCCGGGCTG-3 ’ja 5′-CGGAATTCTCAGCTGCACTTGCAGGAG-3’ (alleviivattu sekvenssit osoittavat Hindlll ja EcoRI-restriktiokohdat). TGFp 1 cDNA: t, joissa + 29C ja + 29T lähetettiin Genechem Company (Shanghai, Kiina) rakentaa asiaankuuluvat lentivirus järjestelmiä.

jälkeen transfektion, A549 ja PC9 soluja uutettiin kylmällä lyysipuskuria [50 mM Tris HCl: lla (pH 7,5), 150 mM NaCl, 1 mM EDTA, 1 mM MgCl2: a, 0,5% Triton X-100, ja proteaasi-inhibiittorin yhdistelmää (1 mM PMSF, 2 ug /ml aprotiniinia, 1 ug /ml leupeptiiniä ja 1 ug /ml pepstatiinia A)]. Solulysaatit jälkeen kirkastettiin sentrifugoimalla 10000 x

g

20 min ajan, supernatantit otettiin talteen ja proteiinipitoisuus kunkin lysaattia määritettiin BCA Protein Assay Kit. Yhtä suuri määrä proteiinien lysaatit erotettiin 12% natriumdodekyylisulfaattia ja polyakryyliamidigeelielektroforeesilla ja siirrettiin polyvinylideenidifluoridi kalvoja (Bio-Rad). TGFp 1 havaittiin spesifistä vasta-ainetta # 3709 Cell Signaling Technology.

Solun muuttoliikettä arvioitiin naarmuuntumista määritys ja solujen invasiivisuus kanssa siirtokuoppaan määritystä seuraavasti. Jotta alusta määritystä, A549 ja PC9 solut ympättiin 24-kuoppaisille viljelylevyille 2 x 10

5 solua /kuoppa ja inkuboitiin 24 tuntia, jonka jälkeen yksikerroksinen oli naarmuuntunut steriilillä 200 ui pipetin kärki, The levyt pestiin kahdesti fosfaattipuskuroidulla suolaliuoksella, ja soluja inkuboitiin seerumittomalla Hamin F12 (A549) tai seerumitonta RPMI (PC9) 24 tuntia, jonka jälkeen kuvat otettiin kiinni mikroskoopilla 100-kertaisena suurennoksena ja ”parantava ”alueet mitattiin faasikontrastimikroskooppia (Leica DMI4000B). Kunkin solun tyyppi, kolme riippumatonta transfektio suoritettiin kokeita, ja kaikki kokeet suoritettiin kolmena rinnakkaisena.

transwell määrityksiä, A549 ja PC9 solut suspendoitiin seerumittomaan Hamin F12 tai seerumittomassa RPMI 1640 tiheydellä 3 x 10

5 per ml, ja 100 ul: n eriä lisättiin ylempään osastoissa 24-kuoppaisen transwell kammioon, joka sisältää polykarbonaattia suodattimet 8 um huokosia ja päällystetty 60 ul: Matrigel (1: 9 laimennus; Sigma Aldrich). Viisisataa mikrolitran alikvootit Hamin F12 tai RPMI 1640, jossa oli 10% FBS: ää lisättiin alakammioissa, ja kammiot inkuboitiin 24 tunnin ajan. Tuolloin solut ylempään osastoon poistettiin vanupuikolla, huuhdeltiin PBS: lla, ja kiinnitettiin 100% metanolia. Solut, jotka olivat tunkeutuneet läpi Matrigel alapintaan värjättiin 4 ’, 6-diamino-2-fenyyli ja kvantifioidaan laskemalla fluoresoivien solujen 5 random mikroskooppikentäs- suodatinta kohden 400-kertaisella suurennuksella. Kolme riippumatonta koetta suoritettiin.

Tilastollinen analyysi

kliinisestä näytteestä korrelaatio tutkimuksissa OS aika laskettiin ensimmäisenä päivänä sädehoidon kuolemaan saakka tai viimeksi tunnettu seurannan. DMFS ajat laskettiin ensimmäisenä päivänä sädehoitoa ensimmäiseen havaittuun päivänä etäinen etäpesäke tai viimeinen tunnettu seurannan. Assosiaatioita jakelu

TGFp 1

genotyypit ja kliinisiä tekijöitä arvioitiin Fisherin testejä tai Pearsonin χ

2 testiä. Coxin suhteellisten riskien analyysiä käytettiin arvioimaan vaikutuksen eri

TGFp 1

genotyypit OS ja DMFS laskettuna hazard ratio (t) vastaaviin 95%: n luottamusväli (CI). Kaikki HRS oikaistiin ikä, sukupuoli, rotu, Karnofsky: n suorituskyvyn, tupakoinnista, kasvainhistologiaa, brutto kasvaimen tilavuus, sairauden vaihe, saatuaan kemoterapiaa tai samanaikainen radiochemotherapy, määrä solunsalpaajajakson, ja säteilyannos. Kaplan-Meier-analyysi käytettiin vaikutuksen arvioimiseksi

TGFp 1

genotyypin kumulatiivinen todennäköisyys DMFS. Kaikki raportoidut

P

arvot olivat kaksipuolisia, ja

P

0,05 katsottiin osoittavan tilastollista merkittävyyttä. Tilastolliset analyysit tehtiin SPSS 16.0 (SPSS Inc. Chicago, IL).

In vitro ilmaistiin keskiarvoina ± SD kolmesta itsenäisestä kokeesta (joista kukin oli tehty kolmena kappaleena) ja verrattiin opiskelijan

t

testejä.

P

arvoja 0,05 katsottiin osoittavan tilastollisesti merkitseviä eroja.

Tulokset

Kliiniset Näytteet Korrelaatio tutkimukset

kliininen ominaisuudet 205 analysoitu potilaita on koottu taulukkoon 1. potilaaseen, tauteja ja hoitoon liittyviä ominaisuuksia mukaan

TGFp 1

polymorfismien olivat hyvin tasapainossa iän, rodun, sukupuolen, Karnofsky: n suorituskyvyn, tupakointi, kasvainhistologiaa, brutto kasvaimen tilavuus, sairauden vaihe, määrä solunsalpaajajakson, saatuaan kemoterapiaa vs. säteilyä vain, ja säteilyannos (ei kuvassa).

mediaani seuranta kertaa oli 17 kuukautta koko ryhmä ja 39 kuukautta potilailla, jotka olivat elossa ajankohtana analyysi (alue, 1-97 kuukautta). Mediaani OS aika oli 21 kuukautta. Kaikkiaan 103 potilasta (50%) kehittyi DM 134 sivustoja; 27 potilaalla oli DM yli 1 sivustosta (23 2 sivustoja ja 4 3 sivustoja). Sivustoja etäpesäkkeiden mukana aivojen (n = 39), luun (n = 26), keuhko (n = 26), lisämunuaiset (n = 13), maksassa (n = 14), ja muut määrittelemätön sivustoja (n = 16).

Kuvio 1 esittää Kaplan-Meier-analyysi vaikutus

TGFp 1

genotyypin ja kumulatiivinen todennäköisyys DMFS.

TGFp 1

rs1800469 (C-509T) CT + TT genotyypit liittyy huomattavasti lyhyempi mediaani DMFS (11 kk vs. 31 kuukautta CC genotyyppi,

P

= 0.010; Fig. 1A ).

TGFp 1

rs1982073 (T + 29C) CT + CC genotyypit liittyy myös huomattavasti lyhyempi mediaani DMFS (verrattuna TT genotyyppi) (

P

= 0,013; Kuva. 1 C). Ei kuitenkaan esiintynyt eroja tahansa genotyypin (GG, CG, CC, tai CG + CC) on

TGFp 1

rs1800471 (G915C) SNP ja DMFS (Fig. 1 B).

P

arvot laskettiin log-rank testejä.

havainnot monimuuttuja analyysit

TGFp 1

polymorfismien ja kliinisiin tuloksiin oikaistu potilaaseen, tauteja, ja hoito -aiheiset tekijät on esitetty taulukossa 2.

TGFp 1

rs1800469 (C-509T) CT + TT genotyypit liittyy lisääntynyt tuntiin OS ja DMFS verrattuna CC-genotyyppi (HR OS = 1,463, 95% CI = 1,012-2,114,

P

= 0,043; HR DMFS = 1,601, 95% CI = 1,042-2,459,

P

= 0,032).

TGFp 1

rs1982073 (T + 29C) CT + CC genotyypit myös liittyy lisääntynyt HR DMFS verrattuna CC-genotyyppi (HR = 1,589, 95% CI = 1,009-2,502,

P

= 0,046). Ei esiintynyt eroja mitään genotyyppien (GG, CG, CC, tai CG + CC) on

TGFp 1

rs1800471 (G915C) SNP ja OS tai DMFS.

analysoitiin edelleen yhdistys

TGFp 1

rs1800469 (C-509T), rs1800471 (G915C), ja rs1982073 (T + 29C) genotyypit kanssa elinkohdissa jonka etäpesäkkeitä kehitetty käyttäen Coxin suhteellisen vaaran malleja. CT tai TT-genotyypin rs1800469 (vs. CC) ja CT tai CC genotyyppejä laituri rs1982073 (vs. TT), molemmat liittyy kaksinkertaistamiseksi tuntiin aivojen, luuston ja keuhkojen etäpesäkkeiden univariate analyyseissä. Kuitenkin monimuuttuja analyysit, ainoa merkittävä yhteys oli välillä rs1982073 CT tai CC (vs. TT) ja aivojen etäpesäkkeitä (HR = 2,567 [CI = 1,155-5,702],

P

= 0,021) (taulukko 3) .

In vitro arviointi

transfektio tehokkuutta sekä A549 ja PC9 keuhkosyövän solulinjat oli noin 99% (kuviot. 2A, B). Transfektio A549 ja PC9 solut

TGF-β1

+ 29C tai + 29T indusoi odotettavissa oleva ilmaus sekä edeltäjän ja aktiivisten muotojen TGFp 1 (kuviot. 2C, D). Molemmat solulinjat, kun transfektio TGFp 1 + 29C-konstrukti, havaittu olevan liikkuvuutta (kuviot. 3A, B, C, E) ja lisääntynyt invaasion (kuviot. 3D, F) suhteessa + 29T transfektantit. Nämä tulokset viittaavat siihen, että TGFp 1 + 29C genotyypin molemmissa keuhkosyövän solulinjoja aiheuttama ilmiasuun lisääntyneet etäpesäkkeitä.

(A, B) Fluoresenssi merkintöjä osoitti transfektion tehokkuus oli 99% sekä solulinjat. (C, D) Western blot analyysi vahvisti, että transfektio joko + 27C tai + 29T johti yliekspressio TGFp 1 sekä edeltäjän ja aktiivisissa muodoissa. Con, ohjaus lentivirus- konstruktio; glyseraldehydi-3-fosfaattidehydrogenaasi (GADPH) käytettiin latauskontrollina.

(A, B) Fluoresenssi faasi-kontrasti mikroskooppinen kuvat osoittavat, että 24 tuntia, enemmän + 29C transfektantit muuttivat ”parantava” alue on naarmu määrityksessä kuin teki + 29T transfektanteissa. Nämä havainnot on kuvattu kvantitatiivisesti etäisyytenä siirtynyt aikana naarmu määrityksen paneeleissa C ja E. (D, f) + 29C transfektanteista osoitti suurempaa invasiivisuus, osoitettuna solumääristä läpäisemään kalvon on transwell määrityksessä. Tulokset on esitetty keskiarvoina 3 itsenäisestä kokeesta; Virhepalkit edustavat keskihajonta.

Keskustelu

Etäpesäke edelleen merkittävä syy hoidon epäonnistumisen potilaiden NSCLC hoidettiin sädehoidon kanssa tai ilman kemoterapiaa [29], [30]. Tekijöitä, jotka ennustavat biologinen käyttäytyminen ja metastaattisen potentiaalin NSCLC ovat aktiivisesti pyrkineet viimeiset 3 vuosikymmentä. Merkittävin havainto nykyisestä tutkimus on yhdistyksen välinen muunnos

TGFp 1

genotyyppien rs1800469 ja rs1982073 ja huonommin DMFS potilailla NSCLC annetaan sädehoitoa; Tämä havainto viittaa siihen, että SNP

TGFp 1

geenejä voitaisiin käyttää biomarkkereina määrätä yksilöllisiä radiochemotherapy mukaan odotetaan jakautuvan toistuminen ennen hoidon aloittamista. Olemme edelleen validoitu yhdistys

TGF-β1

SNP rs1982073 T + 29C kanssa lisätä maastamuuttoa ja invasiivisuus kahden keuhkosyövän solulinjat, A549 ja PC9, in vitro.

lisäanalyysit meidän tulokset osoittivat tilastollisesti suurempi riski aivometastaasi potilailla, joilla

TGFp 1

rs1982073 (T + 29C) C variantti genotyypit. Aivometastaasi on yleinen komplikaatio paikallisesti edennyt NSCLC, jossa 21%: sta 54%: lla potilaista kehittää aivometastaasi aikana sairauden [31], [32]. OS ajan potilailla, joilla on aivojen etäpesäke vaihtelee yleensä välillä noin 3-6 kuukautta [33] – [35], ja 30% -50%: lla potilaista, joilla aivometastaasien kuolee neurologiset syistä [36], [37]. Profylaktinen kraniaalisäteytyksestä (PCI) on osoitettu kahdessa satunnaistetussa tutkimuksessa ilmaantuvuuden pienentämiseksi tai viivästyttää aivometastaasi potilailla, joilla on paikallisesti edennyt NSCLC jälkeen ensisijaisen hoidon ja käytön PCI voi pidentää OS näillä potilailla [38], [39 ]. Säteilyturvakeskus Therapy Oncology Group (RTOG), joka yrittää jatkaa näitä tuloksia, avasi suuren tutkimuksessa (RTOG 0214) PCI versus havainto potilaille, joilla on paikallisesti edennyt NSCLC. Potilailla, joilla on vaiheen III tauti ilman sairauden etenemisen jälkeen hoidon, PCI hidasti aivometastaasi mutta ei parantanut OS tai tautivapaan elinajan [40]. Ihannetapauksessa voisi määrätä PCI vain potilaille joilla on suuri riski sairastua aivojen etäpesäkkeitä. Kuitenkin toistaiseksi ole luotettavaa on löydetty keino tunnistaa, mitkä potilaat kehittävät aivometastaasi ja mitkä eivät, joten kovaa etsiä biomarkkereita. Siksi meidän havainto, että

TGFp 1

rs1982073 (T + 29C) C variantti genotyypit liittyy aivometastaasi on erityisen tärkeää hallinnan NSCLC, koska tämä SNP voisi toimia biomarkkerina tunnistaa potilaat, jotka hyötyisivät PCI.

mahdollisuus käyttää

TGFp 1

SNP ennustaviksi biomarkkereita muissa syöpätyypit on tutkittu muiden. Yhdessä tällaisessa tutkimuksessa

TGFp 1

rs1800469 C-509T homotsygoottinen TT genotyyppi havaittiin olevan liittyy lisääntynyt riski saada aggressiivista muotoa eturauhasen syöpä, mutta rs1982073 T + 29C (T + 29C) C variantti genotyyppien eivät olleet [26]. Sen sijaan toinen ryhmä osoitti, että potilailla, joilla on rintasyöpä, joka kantoi T + 29C C-alleeli oli alhaisemmat 5 vuoden tautivapaan elinajan hinnat kuin ei ne TT genotyyppi [25]. Muita todisteita on syntymässä, että SNP muulla geenit voivat ennustaa lopputulosta NSCLC. Esimerkiksi geneettinen poikkeavuuksia geenit matriisimetalloproteinaasi (MMP) -3 ja MMP-9: n tai x-ray korjaus proteiinin XRCC1 on raportoitu vaikuttavan kliinisen käyttäytymiseen ja etäpesäkkeiden riski sairastua keuhkosyöpään [41] – [43]. Nämä biomarkkerit ovat vielä laajalti kääntää kliinisen hoidon. Meidän havainnot ovat sopusoinnussa näiden raporttien: DM oli merkittävä malli epäonnistumisen tutkimuksessamme (DMFS korko, 50,2%), ja variantti genotyyppien

TGFp 1

rs1800469 (C-509T) ja

TGFp 1

rs1982073 (T + 29C) näyttivät liittyvän lyhyempiä DMFS kertaa. Jos validoitu suuremmissa tutkimuksissa, meidän havainnot voisivat toimia perustana näiden genotyyppien ennustetyövälineenä merkkiaine kliinisistä tuloksista, erityisesti taipumus aivometastaasi, potilailla, joilla on NSCLC.

mekanistinen perusta havainnoista nykyinen tutkimus tarvitsee lisätutkimuksia. Jotkut tutkijat ovat ehdottaneet, että TGβ1 proteiini pitoisuus saattaa itsenäisesti ennustaa selviytymisen potilailla, joilla adenokarsinooma keuhkojen [18], [44] – [46]. Näissä tutkimuksissa TGFp 1 ilmentyminen ensisijainen keuhkosyöpä kudoksia oli suurempi potilailla, joilla keuhkometastaasien kuin potilailla ilman tällaista etäpesäkkeitä. Aiemmin raportit ehdotti, että polymorfismit signaalisekvenssi +915 [47], C-509T [48], ja T + 29C (koodaa Leu10Pro)

TGFp 1

geenin liittyvän kohonneeseen TGFp 1 tuotantoa. Nämä tutkimukset voivat valaista meidän löytää muunnos genotyyppien

TGFp 1

rs1800469 (C-509T) ja

TGFp 1

rs1982073 (T + 29C) liittyi lyhyemmät DMFS kertaa potilailla NSCLC hoidettu lopullisina sädehoitoa.

tutkimuksessamme ottaa

TGFp 1

rs1800469 (C-509T) CT tai TT genotyyppejä näytti sisään yhden muuttujan analyysiin, liittyvän lyhyempi OS, eikä yhdistysten löytynyt välillä OS ja

TGFp 1

rs1982073 (T + 29C) genotyypit. Tämä havainto on ristiriidassa raportin Mu et al. [49] osoittaa, että potilailla, joilla alkuvaiheen rintasyöpä ja T /T genotyyppi tai korkea kasvaimensisäisenä TGFp 1 tasot olivat lyhyempiä OS kertaa kuin teki ne ilman T /T tai alhainen intratumorial TGFp 1 tasolle. Kuitenkin tämä yhdistys oli erilainen potilailla, joilla on loppuvaiheen tauti: niille potilaille, joilla on T /T-genotyyppi liittyi pienempi riski taudin uusiutumisen. Nämä havainnot osoittavat, että

TGFB1

on monimutkainen rooleja rintasyövän etenemisessä, joka tukee havaintoja muista tutkimuksista, että

TGFp 1

on ristiriitaisia ​​vaikutuksia kasvaimen kasvuun ja etäpesäkkeiden.

tutkimuksessa oli useita rajoituksia; sen yhden toimielimen ja retrospektiivinen luonne edellyttää, että sen tulokset validoidaan suurempi, mieluiten usean instituution mahdollisille tutkimuksissa. Toinen rajoitus oli, että emme mitata TGFp 1 proteiini plasmassa ennen, sen aikana tai sen jälkeen sädehoidon, joten emme voineet selvittää, jolla on

TGFp 1

rs1982073 (T + 29C) CT genotyyppi vaikutti ilmaus TGFp 1 proteiinin tasot in vivo, eikä voisimmeko onko riski DEM korreloi muutoksiin tämän muuttujan ennen tai jälkeen hoidon. Näin selvennystä tarvitaan edelleen suhteen väliset suhteet polymorfismien

TGFp 1

ja TGFp 1 proteiini plasmassa ja ennusteeseen potilailla, joilla on NSCLC. Tutkimuksemme rajoittui potilaisiin, jotka saivat lopullisen sädehoitoa. Olipa

TGFp 1

rs1982073 variantti genotyypit myös ennustaa lopputulosta potilailla, joille tehdään leikkaus tai muita säteilyn perustuvia hoitoja on edelleen epäselvä.

aikaisemman työn [24] osoitti, että ottaa CT tai CC variantit

TGFp 1

rs1982073 liittyi pienempi riski vakavan (luokka ≥3) sädepneumoniitista, havainto viittaa siihen, että säteilyannos tehostuminen kasvattaa Paikallista kasvain potilaat, joilla on tämän genotyypin olisi mahdollista. Kuitenkin tulokset raportoimme täällä osoitti, että potilailla, joilla nämä genotyypit olivat kohonnut DM, erityisesti aivojen etäpesäkkeitä, havainto viittaa siihen, että systeemistä hoitoa ja PCI on merkitty. Tulokset Tutkimuksemme osoittavat, ensimmäistä kertaa, että

TGFp 1

rs1982073 variantti genotyypit voivat olla käyttökelpoisia geneettinen biomarkkerina auttaa lääkäreitä räätälöimään hoitoa mukaan potilaan riski sädepneumoniitista ja DM. Sinänsä lisätutkimuksia tarvitaan vahvistaa tämän toteamuksen ja tutkia mekanismeja, joilla

TGFp 1

polymorfismit vaikuttavat kurssin keuhkosyövän kehittymisen ja etenemisen. Tällaiset tutkimukset auttavat ymmärtämään paremmin syövän microenvironment ja etäpesäke ja ne voivat olla avuksi räätälöintiä hoito NSCLC.