Krooninen sairaus

tiivistelmä

Tässä tutkimuksessa arvioitiin immunomodulaarisia vaikutuksia aiemmin hoidetuilla

KRAS

-mutant metastasoitunut kolorektaalisyöpä potilaat osallistuvat faasin II monikeskustutkimus, avoimessa kliinisessä tutkimuksessa sai lenalidomidia yksin tai lenalidomidin setuksimabi. Tärkeimmät havainnot osoittavat T-solun immunostimuloiva ominaisuudet lenalidomidilla kuin lääkkeen aiheuttama lasku prosentteina CD45RA

+ naiiveja T-soluja 3-kertaiseksi, kun taas lisäämällä prosenttiosuus HLA-DR

+ aktivoidut T-auttajasolujen ja prosenttiosuus kokonais-CD45RO

+ CD8

+ muisti-T sytotoksiset solut, 2.6- ja 2.1-kertaiseksi (p 0,0001). Lisäksi lenalidomidi laski prosenttiosuus kiertävän CD19

+ B-solujen 2,6-kertainen (p 0,0001). Lenalidomidi kasvanut vaatimaton, mutta merkittävää, 1,4-kertainen muutos prosentteina verenkierrossa luonnollisten tappajasolujen. Tuloksemme osoittavat, että lenalidomidi merkittävästi aktivoi T-soluja, viittaavia immunoterapeuttisen roolin tämän lääkkeen asetuksista ylläpitohoito ja kasvain immuniteetin. Lisäksi raportoidaan ensimmäisen kerran on vaikutusta lenalidomidin yhdessä setuksimabin T-solujen toiminta, mukaan lukien lisäykset kiertävien naiivi ja keskusmuistia T-solut. Yhteenvetona lenalidomidi ja setuksimabi olla merkittäviä vaikutuksia verenkierrossa immuunisolujen potilailla, joilla peräsuolen syöpä.

Trial Rekisteröinti

ClinicalTrials.gov NCT01032291

Citation: Gandhi AK, Shi T Li M, Jungnelius U, Romano A, Tabernero J, et al. (2013) Immunomodulatorisia Effects vaiheen II tutkimus Lenalidomidi Yhdistettynä Setuksimabin Tulenkestävät

KRAS

-Mutant metastasoituneen kolorektaalisyövän Potilaat. PLoS ONE 8 (11): e80437. doi: 10,1371 /journal.pone.0080437

Editor: Evren Alici, Karolinska Institutet, Ruotsi

vastaanotettu: 29 tammikuu 2013; Hyväksytty: 07 lokakuu 2013; Julkaistu: 11 marraskuu 2013

Copyright: © 2013 Gandhi et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Kirjoittajat kiittää Robert Beck koordinoinnista tiedonsiirron ja analysointi. Lääketieteelliset tekstintoimituspalvelut toimittivat Kim Grootscholten, MSc, on Excerpta Medica BV rahoittama Celgene Corporation. Salvatore Siena tukee Oncologia Ca ’Granda Onlus (OCGO) Fondazione. Kirjoittajat ovat täysin vastuussa sisällöstä ja toimitukselliset päätökset tämän käsikirjoituksen. Celgene Corporation rahoittama tutkimuksessa ja oli täysin vastuussa tutkimuksen suunnittelu, tietojen keruun ja analysoinnin sekä päätös julkaista.

Kilpailevat edut: Anita Gandhi, Tao Shi, Mingyu Li, Ulf Jungnelius, Alfredo Romano, Peter Schafer, ja Rajesh Chopra ovat työntekijöitä Celgenen Oyj, jonka yhtiö rahoitetaan tässä tutkimuksessa. Salvatore Siena on jäsenenä neuvottelukuntien Sanofi-Aventis, AstraZeneca, Roche, Genentech, Celgene genomista Health, Bayer, ja Amgen. Josep Tabernero on osallistunut neuvottelukunnissa varten Amgen, Celgeneen, Genentech, Merck-Serono, Novartis, Roche, Sanofi Aventis, ja Symphogen. Lenalidomidi (Revlimid®) on kaupan Celgene tuote. Tämä ei muuta tekijöiden noudattaminen kaikki PLoS ONE politiikan tietojen jakamista ja materiaaleja.

Johdanto

immunomodulaarisia lääke Lenalidomidin on suun kautta aktiivinen aine merkittävää toimintaa eri hematologisen sairaudet kuten myelodysplastista oireyhtymää (MDS), multippeli myelooma (MM), ja non-Hodgkinin lymfooma (NHL).

Lenalidomidia on saanut Yhdysvaltain Food and Drug Administration hyväksynnän hoitoon MM potilailla, jotka ovat saaneet vähintään yksi aikaisempi hoito, ja hoitoon verensiirron riippuvaisten anemia potilailla, joilla on kansainvälisen Prognostiset Tulospalvelin määrittämä Matala- tai Intermediate-1-riskin MDS kanssa del (5q) sytogeneettisen poikkeavuus, tai ilman ylimääräisiä sytogeneettiset poikkeavuuksia. Molekyylikohteena Lenalidomidin on proteiini cereblon (CRBN). CRBN on läsnä kaikissa proteiinia ja jäsen Cullin renkaan ligaasia 4 (CRL4) E3 ubikitiinipromoottori ligaasilla monimutkainen, ja todettiin ensisijaiseksi teratogeeninen tavoite talidomidin [1]. CRBN välittää sekä antiproliferatiiviset lenalidomidilla Myelomasoluista ja T-solujen aktivaation [2], [3]. Immunomodulatorinen vaikutukset Lenalidomidin alue useilla solutyyppejä lukien sekä imukudoksen ja myelooisesta suvusta. Erityisesti

in vitro

tiedot osoittavat lenalidomidilla on aktiivisuutta T-soluja, säätelijä-T-solut (Tregs), B-solut, monosyytit, luonnollisten tappajasolujen (NK) T-soluja, ja NK-solut.

anti-CD3-stimuloitujen T-solujen, lenalidomidihoitoa stimuloi T-solujen proliferaatiota, ja interleukiini (IL) -2, IL-12, ja gamma-interferoni [4], [5]. Lisäksi, lenalidomidi on osoitettu estävän Tregs proliferaatiota ja vaimennin toiminto

in vitro

[6]. Kehittyneissä kiinteä kasvain hoidetuilla potilailla lenalidomidin, naiivit CD4

+ auttaja ja CD8

+ sytotoksisten T-solujen vähentynyt, kun taas muisti CD4

+ auttaja muisti-T-solujen ja CD8

+ sytotoksisten muisti-solujen määrä nousi [7 ]. Aiemmat tutkimukset immunosäätelyaktiivisuutta lenalidomidin on tehty hematologisissa maligniteettien jossa immunologisten parametrien voidaan sekoitti tauti. On kuitenkin olemassa rajoitetusti tietoa kuvaavat immunomodulaarisia toiminto lenalidomidin kiinteissä kasvaimissa.

Kliinisessä tutkimuksessa pyrittiin arvioimaan tehoa ja turvallisuutta yhdistettynä lenalidomidihoidon ja setuksimabin

KRAS

(v -ki-ras2 Kirsten rat sarkooma viruksen onkogeenin homologi) -mutant metastasoitunut kolorektaalisyöpä potilaille, arvioimme 25 eri alaryhmien CD45

+ immuunisolujen (T-solut, B-solut, ja NK-solut). Tämä oli faasi II monikeskustutkimus, avoin tutkimus, joka käsittää turvallisuuteen edeltävässä vaiheessa (vaihe II) määrittää suurin siedetty annos, ja satunnaistettu proof of concept (vaihe Ilb) määrittämiseksi vastausprosentti lenalidomidin plus setuksimabi yhdistelmä terapiassa. Vaihe II hoito koostui suun lenalidomidin (aloitusannos 25 mg /vrk) ja laskimoon setuksimabi (400 mg /m

2 seurasi viikoittain 250 mg /m

2) 28 vuorokauden jaksoissa. Vaiheessa IIb potilasta satunnaistettiin joko vaiheen II hoitoaikataulussa lenalidomidia plus setuksimabin yhdistelmähoitoa tai lenalidomidia 25 mg /vrk monoterapiana. Yhdistelmä Lenalidomidin ja setuksimabin näytti olevan hyvin siedetty, mutta ei ollut kliinisesti merkittävää aktiivisuutta

KRAS

-mutant metastasoituneen kolorektaalisyövän potilaalla (12).

Materiaalit ja menetelmät

Potilaat, materiaaleja ja menetelmiä

Tämä vaihe II monikeskustutkimus, avoin tutkimus suoritettiin noudattaen eettisiä periaatteita Helsingin julistuksen ja Good Clinical Practice, ja mukaan International Conference on yhdenmukaistaminen Tekniset vaatimukset rekisteröimistä ihmisten käyttöön tarkoitettuja lääkkeitä. Tutkimuksessa protokolla, ehdotetussa tietoisen suostumuksen muoto, ja muita tietoja aiheita, hyväksyttiin Comitato Etico-Scientifico, Ospedale Niguarda Ca ’Granda, Milano, Italia ja perustettua Institutional Review Boards /itsenäiset eettisten toimikuntien kaikkien osallistuvien laitosten (Medical etiikka komissio UZ KULeuven, Leuven, Belgia, kliinisen tutkimuksen toimikunta yliopiston sairaalan Vall d’Hebron, Barcelona, ​​Espanja, tieteellinen eettinen komitea Ospedale Niguarda Ca ’Granda, Milano, Italia; eettinen komitea Azienda Ospedaliero-Universitaria San Martino, Genova, Italia; eettinen komitea Azienda Ospedaliero-Universitaria Ospedali Riuniti Umberto I – GM Lancisi – G. Salesi di Anconan, Torretten, Italia; Regional Ethics Review Board Tukholma, Karolinska Institute, Ruotsi, ja Flinders Clinical Research eettiselle toimikunnalle, Southern Australia, Australia). Tutkimus rekisteröitiin Clinicaltrials.gov kanssa tunniste NCT01032291. Protokolla tälle kokeelle ja tukevat CONSORT tarkistuslista ovat saatavilla olevat tiedot; katso tarkistuslista S1 ja pöytäkirjan S1.

Kirjallinen suostumus saatiin kaikki osallistujat mukana tutkimuksessa. Tutkimus koostui turvallisuuden edeltävässä vaiheessa (vaihe II), jossa ensisijaisena tavoitteena oli määrittää suurin siedetty annos lenalidomidia yhdistelmänä setuksimabin henkilöillä, joilla on

KRAS

-mutant metastasoituneen kolorektaalisyövän, ja todiste käsite (POC) (vaihe Ilb), joissa ensisijaisena tavoitteena oli määrittää vaste näissä aineissa kohti Response arviointiperusteet kiinteitä kasvaimia (RECIST) versio 1.1. Kaikkiaan 48 50 potilailla, jotka saivat lääkettä arvioitiin immuuni virtaussytometrianalyysin.

Näytteiden kerääminen

Verta kerättiin lähtötilanteessa (sykli 1 päivä 1 [C1D1]), sykli 2 päivää 1 (C2D1) ja jakson 3 päivää 1 (C3D1) joko 5 ml Lavender /Black Cyto-Chex® BCT lasiputki (Streck Innovations, Omaha, NE, USA) tai 2,6 ml keltainen alkuun happositraattidekstroosiin putkia riippuen missä näyte vastaanotettiin ja pidettiin ympäristön lämpötilassa, kunnes virtaussytometrialla suoritettiin ICON Central Laboratories (Farmingdale, NY, USA) 72 tunnin kuluessa näytteen keräämistä. Vakaus analyysit tehtiin aikana määrityksen validointi ja tukee jopa 72 tuntia käsittelyn ajan näytteiden keräämistä ja analysointia. Vasta-aineet (anti-CD3, CD4, CD8, CD16, CD19, CD25, CD45, CD45RA, CD45RO, CD62L, CD107a, CD127, grantsyymi B, ja HLA-DR, BD Biosciences, San Jose, CA, USA) ja 100 ui potilaan kokoverta siirrettiin 12 x 75 mm koeputkeen (BD Falcon ™, BD Biosciences), jota seuraa kevyesti vorteksoimalla ja 15 min huoneenlämpötilassa inkuboinnin jälkeen. Tämän BD Pharm Lyse ™ lyysiliuosta (BD Biosciences) lisättiin 10 min. Putkea sentrifugoitiin, pestiin PBA (Dulbeccon PBS /0,2%), ja pelletti suspendoitiin uudelleen PBA ennen analysointia B, T, ja NK-solujen osajoukkoja on FACSCanto ™ II virtaussytometrillä (BD Biosciences). Solunsisäisen proteiinin värjäys, ylimääräinen läpäiseväksi vaiheessa lisättiin sen jälkeen, kun ensimmäinen lisäys PBA kanssa kiinnitys-läpäiseväksi työliuoksen (eBioscience, Inc., San Diego, CA, USA), jota seurasi kaksi pesua permeabilisointipuskuriin (eBioscience, Inc.) , inkubointi solunsisäisen vasta-aineita ja toinen permeabilisointipuskuriin pestä. Asianmukainen korvaus kontrollia sisällytettiin aikana jokaista analyysia. Jokainen solualaryhmäksi väestö raportoitu itseisarvona per 1 mm

3 verta tai prosentteina CD45

+ solut.

Tilastolliset analyysit

arvioimiseksi muutokset eri immuunijärjestelmän solujen populaatioiden C2D1 ja C3D1 lähtötasoon verrattuna, jokaisessa 50 virtaussytometrialla mittaukset (eli yksi absoluuttinen solujen määrän ja yhden prosenttiyksikön mittaus kullekin 25 alapopulaatioille CD45 + immuunijärjestelmän soluja) ensimmäisen log2 transformoitiin ja lineaarinen malli asennettiin sitten polkupyöräfaneihin numero (eli C1D1, C2D1, ja C3D1) kuin 3-tason riippumaton muuttuja ja potilaalle estää muuttuja käyttäen R ohjelmistopaketti Limma [8]. Valvottu t-tilastot ja vastaava p-arvot kahdelle kontrastit kiinnostunut: C2D1 vs. C1D1 ja C3D1 vs. C1D1 laskettiin käyttäen empiiristä Bayes menetelmä toteutetaan Limma. Tämä empiirinen Bayes vaihe toteutettiin erikseen absoluuttisen solumäärät ja prosenttiosuus mittaukset johtuu niiden hyvin eri mittakaavoissa ja muunnelmia. Kunkin kahden kontrastit, p-arvot myöhemmin yhdistettiin absoluuttiseen solujen määrä ja prosenttiosuus mittauksia ja säädettiin useiden vertailujen mukaan Benjamini-Hochberg menetelmä [9]. Oikaistu p-arvot ≤ 0,05 pidettiin tilastollisesti merkitsevä, mikä vastaa ohjaamalla väärien löytö korko 5%. Suoritimme edellä mainittuja analyysejä erikseen kolmessa eri potilasryhmissä, eli 20 potilasta lenalidomidin varsi, 28 potilasta lenalidomidin ja setuksimabi käsivarteen, tai 48 potilasta kaksi vartta yhdistettynä (main analyysit). Teimme myös analyysien kolmen populaation mutta 19 potilaalla, jotka saivat samanaikaista lääkitystä, joka koodattu anatominen terapeuttinen kemiallista kategoria ilmaiseva systeeminen tai paikallista kortikosteroidihoitoa poistettu (Herkkyysanalyysien tuloksia ei ole esitetty). Kaikki tilastolliset analyysit toteutettiin käyttämällä R ohjelmistojen [10].

Tulokset

Yhteensä 48 50 koehenkilöillä, jotka saivat tutkimuslääkettä tietoja voitiin ääreisverenkierron immuunijärjestelmän solujen analyysi. Tutkimus skeema on esitetty kuvassa 1 ja potilas lähtötilanteen ominaisuudet on koottu taulukkoon 1. Oli 20 aiheita lenalidomidin varsi ja 28 lenalidomidia plus setuksimabi käsivarteen. Biomarkkerin ja kiinnekohta analyysien ja useita aiheita sisältyy kuhunkin analyysiin on esitetty taulukossa S1. Absoluuttinen määrä ja prosenttiosuus 25 eri osa T, B, ja NK-solut analysoitiin näillä 48 potilaalla ja solun fenotyyppejä on lueteltu taulukossa 2. Solupopulaatiot vähintään yhdellä p-arvo ≤ 0,05 vertailujen C2D1 ja C3D1 vs. C1D1 lenalidomidia monoterapiana varsi, lenalidomidin plus setuksimabi käsivarsi, ja kaikilla potilailla on esitetty taulukoissa 3, 4, ja 5, vastaavasti.

tutkimus lopetettiin ennen laajennusosan vaiheen IIb. * Yksi potilas satunnaistettiin lenalidomidin monoterapiaryhmässä mutta lopetettiin ennen minkään tutkimuslääkeryhmään ja jätettiin siis analyysien. AE, haittavaikutus; ITT, intention to treat; PD, etenevä sairaus.

Päälöydökset kuuluu neljä immuuni solupopulaatioiden erittäin merkitsevä (p ≤ 0,0001) muuttuu C1D1 (lähtötilanteesta ) ja C2D1 ja C3D1 sekä absoluuttinen määrä ja prosenttiosuus soluista mitattuna molemmissa hoitoryhmissä. Muutokset näissä populaatioissa on esitetty kuviossa 2 ja myös suurempi kokonais- muisti-T-sytotoksisten solujen ja aktivoitujen auttaja-T-soluja, ja lasku B-solujen ja yhteensä naiiveja T-auttajasolujen. Muutokset jäljellä solualaryhmiä kaikilla henkilöillä on esitetty kuvassa S1.

merkitsevä (p ≤ 0,0001) muutokset prosentteina ja lukumääräisesti neljä immuuni solualaryhmiä syklin 1 päivä 1 (C1D1) syklin 2 päivä 1 (C2D1) tai sykli 3 päivää 1 (C3D1) kaikissa aineissa. Ylempi rangaistusalueelle tarkoittaa 75. prosenttipiste taas alareuna tarkoittaa 25. prosenttipiste. Linjan sisällä jokainen laatikko on mediaani. Viivat ulottuvat suurin ja pienin arvo ilman poikkeavia havaintoja. Harmaa viivat tarkoittavat yksittäisten aihe tiedot. Abs, absoluuttinen.

Immunomodulatorisia vaikutuksia saaneilla koehenkilöillä lenalidomidia vain

lenalidomidin ainoa varsi (n = 20), 12 T-solujen populaatioita, yhteensä NK-soluissa, yhteensä B-solut, ja koko lymfosyytti solupopulaatioiden (joko prosentteina tai absoluuttinen määrä) olivat muuttuneet merkittävästi (p≤0.05) joko C2D1 tai C3D1 vs. C1D1, tai molempia. Näiden T-solujen populaatioita, jotka alkavat merkittävin, ovat yhteensä naiiveja T-auttajasolujen, aktivoidut T-auttajasolujen, aktivoidut T-sytotoksisia soluja, säätelijä-T-solut, yhteensä naiiveja T sytotoksiset solut efektori-T-auttajasolujen, efektori-T-sytotoksiset solut, muistin kokonaismäärä sytotoksisten T-solujen, effektori sytotoksisten T-solujen, auttaja-T-solujen, sytotoksisten T-solujen, ja yhteensä T-soluja. Absoluuttinen ja prosentuaalinen B-solujen vähentynyt 1.78- ja 3.41-kertaiseksi. Prosenttiosuus NK-solujen merkittävästi kasvanut C2D1 1,4-kertaisesti yli aiheista Lenalidomidia vain. Absoluuttinen lymfosyytit merkittävästi vähentynyt 1,36-kertainen poikki aiheita Lenalidomidia vain (taulukko 3). Huomattavaa on, että toisin kuin

in vitro

tiedot osoittavat Lenalidomidi estää Tregs laajentaminen [11], lenalidomidi huomattavasti prosenttiosuutta Tregs 4- 12-kertaiseksi.

Immunomodulatorisia vaikutuksia saaneilla koehenkilöillä lenalidomidia plus setuksimabi

lenalidomidin ja setuksimabi varsi (n = 28), 15 T-solujen populaatioita, 1 NK solupopulaatio, yhteensä B-solut, ja koko lymfosyytti solupopulaatioiden (joko prosentteina tai absoluuttinen määrä) on muuttunut merkittävästi ( p ≤ 0,05) joko C2D1 tai C3D1 vs. C1D1, tai molemmat. Näiden T-solujen populaatioita, jotka alkavat merkittävin, ovat aktivoituneet T-auttajasolujen, muistin kokonaismäärä sytotoksisten T-solujen, yhteensä naiiveja T-auttajasolujen, yhteensä naiiveja T-sytotoksisten solujen effektori sytotoksisten T-soluja, aktivoituneita T-sytotoksiset solut efektori-T-sytotoksiset solut , keskusmuistia T sytotoksiset solut efektori-T-auttajasolujen, effektori T-auttajasolujen, yhteensä muisti-T-auttajasolujen, keskusmuistia T-auttajasolujen, naiiveja T sytotoksiset solut, T-sytotoksiset solut, ja naiiveja T-auttajasolujen. Absoluuttinen ja prosentuaalinen B-solujen vähentynyt 2.01- 3,6-kertaiseksi. Prosenttiosuus grantsyymi B

+ NK-solut lisääntyivät merkitsevästi C2D1 1,15-kertaiseksi ja C3D1 1,25-kertaiseksi henkilöillä Lenalidomidia plus setuksimabi. Lymfosyyttien prosenttiosuuden huomattavasti 1.11- 1,45-kertaiseksi henkilöillä, Lenalidomidia plus setuksimabi (taulukko 4). Näistä seuraavat seitsemän osapopulaatioiden merkittävästi moduloitu lenalidomidin plus setuksimabi käsi, mutta ei lenalidomidin varsi vain: keskusmuistia T sytotoksiset solut efektori muisti-T-auttajasolujen, yhteensä muisti-T-auttajasolujen, keskusmuistia Thsoluista, naiivi T sytotoksiset solut, naiiveja T-auttajasolujen, ja grantsyymi B

+ NK-soluissa. Huomattavaa on, että lisäys setuksimabin lenalidomidille ei johtanut kasvuun Tregs kuin havaittiin lenalidomidia yksin.

Immunomodulatorisia vaikutuksia kaikissa aineissa

Kun otetaan huomioon kaikki 48 koehenkilöillä, 16 T solupopulaatioiden, 1 NK-solujen populaatioita, yhteensä B-soluja, ja yhteensä lymfosyytit (joko prosentteina tai absoluuttinen määrä) olivat merkittävästi moduloitu (p ≤ 0,05) joko C2D1 tai C3D1 vs. C1D1, tai molemmat. Näiden T-solujen populaatioita, jotka alkavat merkittävin, ovat aktivoituneet T-auttajasolujen, yhteensä naiiveja T-auttajasolujen, muistin kokonaismäärä sytotoksisten T-solujen, yhteensä naiiveja T-sytotoksisten-soluja, aktivoituneita T-sytotoksiset solut, effektori sytotoksisten T-solujen, efektori-T-auttajasolujen , efektori-T sytotoksiset solut, keskusmuistia T sytotoksiset solut efektori muisti-T-auttajasolujen, säätelijä-T-solujen, keskusmuistia T-auttajasolujen, naiiveja T sytotoksiset solut, yhteensä muisti-T-auttajasolujen, T sytotoksiset solut, ja naiiveja T-auttajasolujen. Absoluuttinen ja prosentuaalinen B-solujen vähentynyt välillä 2.35- ja 3.05-kertainen. Prosenttiosuus grantsyymi B

+ NK-soluissa lisäsi merkittävästi 1,21-kertainen C3D1, kun taas osuus lymfosyyttien lisääntynyt 1,33-kertainen C3D1 kaikissa aiheista (taulukko 5).

Effects of samanaikainen immunosuppressiivisia aineita

Kaiken 19 48 potilasta, joiden osalta on joko päivittäin tai katkonainen, samanaikaista systeemistä tai paikallisten kortikosteroidien. Näistä 19 potilasta hoidetaan samanaikaisesti kortikosteroideja eri aikoja, 5 sai deksametasonia (vaihtelee 8 mg vuorokaudessa 10 mg kerran viikossa), 10 sai prednisonia (vaihtelee 25 mg kahdesti vuorokaudessa 4 mg päivässä), 5 sai beetametasoni (vaihdellen 4 mg vuorokaudessa 4 mg tarvittaessa), ja 5 saivat ultrapotent paikallisten kortikosteroidien. Sulkea pois kaikki mahdolliset vaikutukset näiden immunosuppressiivisten kortikosteroidihoitoja ilmenemistä jonkin solupopulaatioiden, herkkyysanalyysi tehtiin ilman potilaiden immunosuppressiivisten lääkkeiden samanaikainen ja analyysi toimittaa uudelleen. Herkkyysanalyyseissä, samat neljä solupopulaatioiden osoittivat johdonmukaisesti merkitsevä (p ≤ 0,0001) muuttuu C1D1 (lähtötilanne) ja C2D1 tai C3D1 molemmissa mittauksissa arvioitiin (absoluuttinen määrä ja prosenttiosuus) merkitsee nämä vaikutukset eivät johdu steroidikäytöstä. Itse asiassa potilaat immunosuppressiivista samanaikaisen lääkityksen oli samaa suuruusluokkaa immuunijärjestelmän vaikutuksia (T-solujen aktivaation ja B-solujen esto), ja suurempi määrä immuunijärjestelmän solualaryhmiä moduloitu verrattuna potilaisiin ei samanaikaiset hoidot. Lisäksi analyysi immuuni muutosten samanaikainen steroidien käyttäjät versus nonusers tehtiin ja tulokset olivat vertailukelpoisia (tuloksia ei ole esitetty).

korrelaatiot immunomodulaarisia vaikutuksia kliinisen vasteen

Ilmoittama Siena et ai. [12], 8 potilasta otettiin mukaan faasin II suurin siedetty annos osan tutkimuksen ja 43 potilasta otettiin mukaan vaiheeseen IIb POC osaan. Paras vastaus oli stabiili tauti (SD) 9 potilaalla ja tutkimus ilmoittautuminen lopetettiin ennenaikaisesti tehon puutteen tahansa hoitoryhmissä ja epäonnistuminen saavuttaa suunnitellun vaste tavoite. Ei ollut merkittäviä (p ≤ 0,05) väliset korrelaatiot muutokset lähtötasosta (C1D1) ja C2D1 tai C3D1 tahansa immuunisolujen väestön yleistä (OS) riippumatta hoitoryhmään (tuloksia ei ole esitetty).

Keskustelu

Lenalidomidi on hyväksytty käytettäväksi sekä MM ja MDS, ja on raportoitu kliinisestä tehosta kroonisen lymfaattisen leukemian (KLL) ja NHL [13], [14]. Suuri osa toiminnan lenalidomidin näissä hematologisissa maligniteettien syyksi on solun autonominen tappaminen vaikutuksia. Kliinisessä tutkimuksessa raportoineet Siena et al (12), jonka tarkoituksena arvioida tehoa ja turvallisuutta yhdistettynä lenalidomidihoidon ja setuksimabin

KRAS

(v-Ki-ras2 Kirsten rat sarkooma viruksen onkogeenin homologi) -mutant metastaattinen peräsuolen syövän potilaille, arvioimme 25 eri alaryhmien CD45

+ immuunisolujen (T-solut, B-solut, ja NK-solujen) tässä potilasryhmässä, jossa ei ole sekoittava hematological poikkeavuuksia. Tärkeimmät havainnot ovat merkittäviä (p ≤ 0,0001) muutokset lähtötasosta C2D1 ja C3D1 seuraavissa neljässä lymfosyyttipopulaatioissa: B-solut (vähentynyt), aktivoidut T-auttajasolujen (lisääntynyt), yhteensä muisti-T sytotoksiset solut (lisääntynyt), ja kokonaismäärä naiivi T-auttajasolujen (vähentynyt). Yksi mahdollinen kliininen merkitys Pääteltiin lenalidomidihoitoa on aktivaattori, T-solujen, jotka voivat olla rooli sen anti-kasvain aktiivisuutta. Lisäksi downregulation B-solumäärät voidaan liittyvät sen toimintaan B-solujen maligniteetteja. Nämä vaikutukset havaittiin molemmissa hoitoryhmissä. Kuten kaikki aiheet saivat lenalidomidin, nämä muutokset voidaan katsoa johtuvan farmakodynaamisia vaikutuksia lenalidomidia. Vastaavaa analyysit osoittivat, että muutokset solupopulaatioiden (absoluuttinen määrä tai prosenttiosuus) testattiin ei korreloinut hoitoryhmään, vastaus per RECIST version 1.1 kriteerit, tai OS. Kliiniset vasteet tutkimuksessa raportoidaan yksityiskohtaisesti Siena et al. [12].

Lisäksi lenalidomidin ja setuksimabi oli merkittävä vaikutus (jopa 60-kertainen nousu) Keski- muistiin ja naiiveja T-soluja rohkeita Setuksimabihoitoa itse voi olla rooli T-solujen aktivaation ja toiminta. Samanlaisia ​​vaikutuksia raportoineet Botta ym. [15] on setuksimabin perustuva polychemotherapy hoito potilailla, joilla on pitkälle edennyt metastasoituneen kolorektaalisyövän. Tämä on ensimmäinen tutkimus, tietojemme mukaan ilmoittaa kattavan profiilin kiertävästä immuunijärjestelmän solualaryhmiä saaneilla lenalidomidia ja merkkejä T-solujen aktivointi funktio lenalidomidin ja setuksimabin.

Potilaat, joilla metastasoituneen kolorektaalisyövän annettiin B-solun heikentävien aine rituksimabi ovat osoittaneet molemmat regressio etäpesäkkeiden ja saavuttamista SD [16]. Tutkimuksessamme vaikka suurin osa hoidetuista potilaista Lenalidomidin osoittivat merkittävää laskua B-soluissa, tämä farmakodynaaminen vaikutus ei korreloinut OS. Samoin liittyvä analoginen Pomalidomide, on raportoitu vähentävän CD19

+ perifeerisen veren B-solujen potilailla, joilla on MM vastaanottaa toinen päivä tapahtuvaa annostusta 1-10 mg [17].

Prekliiniset ja kliiniset tiedot osoittavat, että lenalidomidin aktivoi T-soluja. Bartlett et ai. [7] osoitti, että potilailla, joilla on pitkälle edenneitä kiinteitä kasvaimia, lenalidomidihoidon varten 4-5 viikkoa laski prosenttiosuudet naiivi auttaja ja sytotoksisten T-solujen, ja lisääntynyt prosenttiosuudet muistin auttaja ja sytotoksisten solujen-molemmat havainnot vahvistettiin Tämä tutkimus. Pomalidomide on myös raportoitu lisätä ääreisverenkierron CD3

+ ja CD8

+ T-solut potilailla, joilla on MM [17].

In vitro

Lenalidomidi estää Tregs; kuitenkin, tässä tutkimuksessa noususuunnassa (p 0,05) sekä absoluuttinen määrä ja prosenttiosuus kiertävän Tregs ääreisveressä havaittiin sekä C2D1 ja C3D1 potilailla Lenalidomidia yksin. Vastaavasti pitoisuudet verenkierrossa Tregs oli suurempi potilailla, joilla MM 2 viikon kuluessa vastaanottamisesta lenalidomidin [18]. Nämä potilaat MM kasvoi huomattavasti HLA-DR

+ T-solut (sekä CD4

+ ja CD8

+ subsets). Kasvu CD4

+ FOX-P3

+ säätelijä-T-solujen havaittiin jälkeen 9 jaksoa (9 kk) lenalidomidia ylläpitohoito. Siksi kasvu säätelijä-T-solut voivat olla myöhässä vastauksena lisääntyneeseen efektori-T solujen määrä ja aktiivisuus.

aktivoituminen NK solujen lenalidomidilla on osoitettu

in vitro

sekä lisääntynyt NK solun sytokiinin tuotanto sekä toiminnallisia tutkimuksissa. Perifeeristen veren mononukleaaristen solujen /kasvainsolujen co-kulttuuri malli, T-solujen kostimulaatio johtaa parantaa NK-solujen lyysin erilaisten kasvainsolujen, mukaan lukien eturauhas- ja munasarjasyöpä soluihin [19]. Lenalidomidi tehostaa NK-solujen ja monosyyttien välittämä vasta-aineista riippuvainen soluvälitteinen sytotoksisuus (ADCC) rituksimabiannoksesta vastaan ​​erilaisia ​​hematological solulinjojen

in vitro

, kuten NHL ja B-CLL [20], sekä parantaa NK-solun välittämä lyysin setuksimabin ja trastutsumabi päällystetty peräsuolen ja rintasyöpä soluja, vastaavasti [21]. Esillä olevassa tutkimuksessa, vaikka mitään merkittäviä vaikutuksia havaittu muutoksia perifeeristen NK-solujen, ei-merkitsevä kasvava suuntaus oli nähtävissä sekä absoluuttinen määrä ja prosenttiosuus koko NK-solujen ja aktivoitujen NK-solujen (grantsyymi B

+ ja NKD

+) jälkeen 28-päivän annostelun lähtötasoon verrattuna. Nämä tiedot eivät sulje pois mahdollisuutta, että lenalidomidi lisääntynyt NK-solujen ja ADCC paikalla kasvain. Tuloksemme aiemmin ilmoittanut, että deksametasoni antagonisoi stimulointikyvyn lenalidomidin molemmilla NK ja T-solujen

in vitro

[22]. Vaikutusta deksametasonin lenalidomidille NK-solujen aktivaation potilailla, joilla on MM osoittaa, että vaikka määrää verenkierrossa NK-solujen kasvaa sen jälkeen, kun lenalidomidilla ja deksametasonin hoitoa, sytotoksinen kapasiteetti NK-solujen alentuu vuoksi deksametasoni-indusoitu tukahduttaminen IL-2 tuotanto CD4

+ T-solujen [23]. Voit hallita mahdollisia farmakodynaamisia vaikutuksia samanaikaisen steroidien käyttöä koskevat muutokset lähtötasosta väestöön CD45

+ solut analysoitiin tässä tutkimuksessa, herkkyys analyysit suoritettiin jättää tiedot henkilöillä, jotka olivat käyttäneet systeemistä kortikosteroidihoitoa tai voimakas ajankohtainen kortikosteroidia tutkimuksen aikana. Tulokset herkkyysanalyyseistä olivat yhtäpitäviä pääanalyysi, mikä osoittaa, että esto B-solujen on todellinen farmakodynaaminen vaikutus Lenalidomidin ja tätä vaikutusta ei sekoitti ajoittainen samanaikaisesti immunosuppressiivisia hoitoja. Annokset ja tiheys deksametasonin otettu tässä tutkimuksessa eivät riittäneet antagonisoida T-solujen vaikutuksia lenalidomidia, yhdenmukaisia ​​aiempien havaintojen että pieniannoksista deksametasoni mahdollistaa suuremman T-solujen aktivaation lenalidomidia.

Näin ollen, vaikka prekliinisen todisteita, esillä kliiniset tiedot Siena et al (12) ehdottaa moduloiva vaikutus lenalidomidin ei pysty voittamaan ensisijainen vastus

KRAS

-mutant metastasoitunutta kolorektaalisyöpää EGFR kohdennettuja inhibitiolle setuksimabi. Mikä tärkeintä, nämä tiedot kuvaavat immunomodulaarisia vaikutuksia lenalidomidin joka auttaa ymmärtämään huumeiden mekanismia ja mahdollisesta käyttökelpoisuudesta muissa elimissä.

tukeminen Information

Kuva S1.

Muutokset prosenttiosuus tai absoluuttinen määrä jäljellä 21 immuunijärjestelmän solualaryhmiä syklin 1 päivä 1 (C1D1) syklin 2 päivä 1 (C2D1) tai sykli 3 päivää 1 (C3D1) kaikissa aineissa. Ylempi rangaistusalueelle tarkoittaa 75

persentiili taas alareuna tarkoittaa 25

persentiili. Linjan sisällä jokainen laatikko on mediaani. Viivat ulottuvat suurin ja pienin arvo ilman poikkeavia havaintoja. Harmaa viivat tarkoittavat yksittäisten aihe tiedot. Lyhenne: Abs: absoluuttinen.

Doi: 10,1371 /journal.pone.0080437.s001

(DOC) B Taulukko S1.

biomarkkereiden ja kiinnekohta analyyseissä ja useita aiheita Jokaisessa analyysissä.

a1 potilas oli kirjoilla, mutta ei saanut tutkimuslääkettä. Lyhenne: Len: lenalidomidia.

Doi: 10,1371 /journal.pone.0080437.s002

(DOC)

tarkistuslista S1.

CONSORT tarkistuslista.

doi: 10,1371 /journal.pone.0080437.s003

(DOC)

Protocol S1. Trial pöytäkirja.

doi: 10,1371 /journal.pone.0080437.s004

(PDF) B