Krooninen sairaus

tiivistelmä

Johdanto

Human antigeeni R (HUR) säätelee vakaus mRNA ja liittyy soluproliferaatioon, angiogeneesiin, ja imusuonten. Kuitenkin kliininen merkitys ja patologinen rooli Hur virtsarakon syöpä on edelleen epäselvä. Päätavoitteena Tämän tutkimuksen tarkoituksena oli selvittää välisiä suhteita HUR ilmaisun ja kliinistä merkitystä ja syöpäsolujen lisääntymistä, angiogeneesin, imusuonten ja ilmauksia cyclooxygenase (COX) -2 ja endoteelikasvutekijä (VEGF) -A, -C, ja -D.

Methods

Kaikki lausekkeet tutkittiin immunohistokemiallisella tekniikoiden 122 formaliinikiinnitetyt yksilöitä virtsarakon syöpäpotilailla. Hur ilmentyminen arvioitiin erikseen soluliman ja tumavärjäystä. Solujen lisääntyminen, angiogeneesiin ja imusuonten mitattiin prosenttiosuus Ki-67-positiivinen solu (lisääntymistä indeksi, PI), CD34-värjätty alusta (mikroverisuonitiheys, MVD), ja D2-40-värjätty alusta (lymph suonitiheys, LVD) . Väliset suhteet jokaisen HUR ilmaisun ja kliinis-, ennuste, ja ilmauksia COX-2 ja VEGFs analysoitiin usean variate analyysit. Hur ilmentyminen tutkittiin myös 10 hiirillä N-butyyli-N- [4-hydroxybutil] nitrosamiini (BBN) aiheuttama virtsarakon syöpään malli.

Tulokset

Ihmisen kudoksissa, korkea soluliman ilmentyminen oli nähdään 5% ja 25,4% normaalista ja syöpäsolujen, vastaavasti. Nuclear Hur ilme ei ollut mitään merkittävää suhdetta patologisia piirteitä. Kuitenkin sytoplasmisen Hur ilmaisu ilmestyi positiivisessa yhteydessä pT vaiheessa ja arvosana (

P

0,001). Hiiren kudoksissa, samanlaiset suuntaukset vahvistettiin. Sytoplasminen ilmentyminen korreloi PI, MVD, ja LVD, sekä VEGF: n ilmentymistä-A: n ja -C, mutta ei VEGF-D. Korkea sytoplasminen ilmentyminen Hur merkittävä ennustaja etäpesäkkeiden ja aiheuttaa erityisiä selviytymisen, ja tunnistettiin ennustetyövälineenä kiinnekohta tekijä etäpesäkkeiden (riskisuhde 4,75, P = 0,028) in Monimuuttuja-analyysissä malli, mukana patologisia piirteitä.

Johtopäätökset

Sytoplasmiset Hur näyttää tärkeitä rooleja solujen lisääntymisen, eteneminen, ja selviytyminen virtsarakon syöpäpotilailla. Sen ekspressio liittyy angiogeneesiin, imusuonten ja ilmauksia VEGF-A: n ja -C.

Citation: Miyata Y, Watanabe S-i, Sagara Y, Mitsunari K, Matsuo T, Ohba K, et ai. (2013) Korkea ilmentäminen Hur Solulima, mutta ei ytimiä, liittyy pahanlaatuiset Aggressiivisuus ja ennusteeseen virtsarakon syövän. PLoS ONE 8 (3): e59095. doi: 10,1371 /journal.pone.0059095

Editor: Kaustubh Datta, University of Nebraska Medical Center, Yhdysvallat

vastaanotettu: 11 heinäkuu 2012; Hyväksytty: 11 helmikuu 2013; Julkaistu: 13 maaliskuu 2013

Copyright: © 2013 Miyata et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tämä tutkimus tuettiin osittain Grant-in-Aid alkaen Japan Society for Promotion of Science (nro 22591771). Kuitenkin rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen. Ei ylimääräistä ulkoista rahoitusta saatiin tähän tutkimukseen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

asetus mRNA rappeutuminen on keskeinen mekanismi ohjaukseen geenien ilmentymisen. Ohjaus mRNA vakaus riippuu sekvenssit litteraattiin itselleen ja RNA: ta sitovia proteiineja, jotka dynaamisesti sitoutuvat näihin sekvensseihin. Ihmisen antigeeni R (HUR) on jäsenenä alkion-tappava, näköhäiriöt (ELAV) kaltainen proteiini perhe RNA sitovia proteiineja, ja on raportoitu olevan monitoiminen proteiini, joka on ollut mukana säätelyyn eri osa-RNA aineenvaihduntaa. Eli Hur on mukana transkription jälkeisen sääntelyn liikevaihdon ja vakautta RNA [1].

Hur raportoidaan myös säätelemään solujen lisääntymistä ja kasvaimeen liittyvän tulehduksen [2], [3]. Lisäksi, Hur on todettu olevan mukana angiogeneesin säätelyyn vuorovaikutuksessa selostukset lukuisia angiogeneesiä edistämällä tekijät, ja tunnetaan myös korreloivan imusuonten eri patologisiin tiloihin, mukaan lukien syöpä [3], [4 ]. Näiden seikkojen perusteella, on ehdotettu, että Hur pelaa tärkeä rooli syövän synnyn, kasvaimen kasvu, etäpesäke, ja ennusteen syöpäsairauksia. Oikeastaan ​​useat raportit ovat kuvanneet Hur ilmaus positiivisia mielleyhtymiä pahanlaatuinen aggressiivisuutta ja toimii ennustetekijä köyhien kliinistä tulosta erilaisten syöpien [5] – [7]. Toisaalta, selvästi eri havaintoja on raportoitu potilailla, joilla on rintasyöpä [8]. Patologinen roolit ja ennusteen arvioinnissa Hurin ilmaisun syöpäpotilailla pysyvät siten kiistanalaisia, ja kliininen merkitys ja ennustava arvo ennusteen virtsarakon syöpä on vielä selvennettävä.

Koska mekanismeja näiden patologinen toimintaan, verisuonten endoteelin kasvutekijöiden (VEGFs) ja syklo-oksygenaasi (COX) -2 ovat tunnettuja Hur liittyviä tekijöitä, [5], [7], [9] – [11]. Nämä proteiinit ovat myös raportoitu liittyvän pahanlaatuiseen aggressiivisuutta ja ennusteen virtsarakon syöpä [12], [13]. Kuitenkin vain vähän tietoa on kertynyt suhteesta Hur ilmaisu, VEGF-A, -C, ja -D, ja COX-2 ihmisen virtsarakon syöpä kudoksiin.

solunsisäinen sijainti Hur on raportoitu olevan pääasiassa ydinvoiman monissa syöpäsolujen [14], [15]. Kuitenkin Hur sukkulat tumasta sytoplasmaan vastauksena erilaisiin ärsykkeisiin, pidentäen mRNA puoliintumisaika ja helpottaa tehokasta käännös proteiinien [15]. Näiden tosiasioiden, tutkimustehtävissä kliinisiin, patologinen, sekä varoituksia roolit ydin- ja sytoplasmista ekspressiota Hur on perusteltua.

Tärkein Tämän tutkimuksen tarkoituksena oli selvittää patologinen merkitys ja ennusteen arvioinnissa ydin- ja sytoplasman HUR ilmentyminen virtsarakon syöpään. Vahvista patologinen merkitys Hurin ja tietyllä kudos mikroympäristön, kemiallisesti aiheuttama virtsarakon syövän hiirimallissa käytettiin ylimääräisiä kokeita. Lisäksi suhteita näiden Hur ilmaisuja, angiogeneesiä ja imusuonten, ja VEGF-A, -C, -D, ja COX-2 ilmaisuja tutkittiin myös potilailla, joilla on virtsarakon syöpä.

Materiaalit ja menetelmät

Ethics hyväksyminen

tutkimus tehtiin mukaan Helsingin II ilmoitus ja se on hyväksytty eettinen Review komitean Nagasakin yliopistollisen sairaalan, Nagasaki, Japani.

Kirjallinen suostumus oli saatu potilaiden mukana tutkimuksessamme ennen ilmoittautuminen. Eläimet Tässä tutkimuksessa käsiteltiin suuntaviivojen mukaan eläinkokeiden Nagasaki yliopiston ja asetusten Animal Care ja Käytä komitea hyväksyi tutkimussuunnitelman.

Potilaat

Kaikki kalvot 122 virtsarakon syöpä näytteet on saatu höyläysleikkaus (TUR) meidän sairaalassa vuosina 1993 ja 2004 tarkistettiin. Kaikki potilaat olivat kliinisesti diagnosoitu ei-lihas- invasiivisia virtsarakon syöpä (NMIBC) ilman etäpesäke. Me poissuljettu potilaat, jotka olivat saaneet neoadjuvant terapiaa. Lisäksi yksilöt että syöpäsolujen määrä oli alle 500 jätettiin pois tässä tutkimuksessa. Toisaalta, välillä 122 potilasta, adjuvanttihoito myös järjestelmällisiä kemoterapia, intravesikaalisen kemoterapian ja intravesikaalisen Bacillus-Calmette-Guerin suoritettiin 14 (11,5%), 67 (54,9%), ja 19 potilasta (15,6%), vastaavasti . Kaikki potilaat arvioitiin Rintakehän röntgenkuvaus, ultraääni, ja tietokonetomografia (CT) virtsarakon ja vatsan, ja cystoscopy. Lisäksi CT keuhkojen tai aivoissa, magneettikuvaus (MRI), tiputus-infuusio pyelography, ja luuston kuvauksissa tehtiin tarpeen mukaan. Kasvaimet lavastettu mukaan American sekakomitean Cancer ja porrastettu Maailman terveysjärjestön ja International Society for Urologisessa Pathology luokittelujärjestelmän. Esillä olevassa tutkimuksessa, kasvaimia ryhmiteltiin tilastollista analyysia seuraaviin ryhmiin: matala- (PTA + 1) ja korkea-vaiheen (≥T2); tai liian (asteet 1 ja 2) ja korkea-asteen (aste 3). Tutkimme myös 20 kudosnäytteitä normaalin virtsarakon saatu normaalisti alueita virtsarakon potilailla, joilla on siirtymävaiheen karsinooma ylemmän virtsateiden. Kaikki verrokeilla osoitti G1 ja ei-lihas- invasiivisia sairauksia, ja ne osoittivat toistumisen sisällä seurantajakson aikana 10-17 vuotta. Mediaani seuranta-aika oli 51 kuukautta (vaihteluväli 2-182 kuukautta).

Animal

Hur ilmentymistä tutkittiin 10 näytettä normaalista urothelial solujen (ilman BBN), 5 NMIBC (BBN ratkaisu 14 viikkoa), ja 5 lihaksen invasiivisen virtsarakon syöpä (MIBC) (24 viikkoa) kemikaalin aiheuttaman virtsarakon syöpä hiirimallissa. Tätä mallia käytettiin aiemmassa raportissa [16].

immunohistokemia

immunohistokemiallinen tutkimukset suoritettiin käyttämällä formaliinilla kiinnitetyt, parafiiniin upotetut leikkeet. Käytimme anti-Hur-aineella (Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA) ensisijaisena vasta-ainetta (kanin polyklonaalinen, reagoivat sekä ihmisen ja hiiren Hur). Viisi mikrometrin paksuisia leikkeitä parafiini ksyleeniin ja niihin lisätään arvostellaan ratkaisuihin etanolia. Antigeeni haku suoritettiin 100 ° C: ssa 15 minuutin ajan. 0,01 M natriumsitraatti (pH 6,0). Kaikki osat upotettiin sitten 3% vetyperoksidia 30 minuutin ajan endogeenisen peroksidaasi- aktiivisuuden peittämiseksi. Leikkeitä inkuboitiin yön yli primaarisen vasta-aineen kanssa 4 ° C: ssa, sitten pestiin 0,05% Tween 20 fosfaatilla puskuroidussa suolaliuoksessa (PBS). Seuraavaksi leikkeitä inkuboitiin peroksidaasilla käyttäen leimattua polymeeri menetelmällä Dako EnVision + ™ Peroxidase, (Dako, Carpinteria, CA) 60 min. Peroksidaasireaktio visualisoitiin nesteen kanssa 3,3′-diaminobentsidiinitetrahydrokloridilla (DAB) substraatti (Invitrogen Corporation, Carlsbad, CA). Osiot vastavärjättiin käyttäen hematoksyliinillä. Muut menetelmät suoritettiin, kuten aiemmin on kuvattu [13], [17], [18]. Lyhyesti, me arvioitiin myös VEGF-A, -C, ja -D ja COX-2-ilmaisujen vastaavien näytteiden avulla immunohistokemiallista tekniikoita. Lisäksi mikroverisuonitiheys (MVD) ja imusolmukkeiden suonitiheys (LVD) arvioitiin käyttäen CD34-positiivisia lumina ja D2-40-positiivisia lumina, vastaavasti. Tiedot menetelmistä, joilla määritetään MVD ja LVD olivat kuten aiemmin on kuvattu [13]. Suoritimme kaikki arviointi uudelleen tätä tutkimusta varten. Erilaisia ​​syöpä yksilöitä, jotka oli todettu alustavia tutkimuksia immunoreaktiivisia tutkituissa antigeenejä käytettiin positiivisina kontrolleina Hur (maksa), VEGFs (munuaissolukarsinooma), COX-2 (paksusuoli), D2-40 (nielurisojen), ja CD34 (munuainen). Erityispiirteet Näistä näytteistä positiivisina kontrolleina vahvistettiin edellisessä raporteissa [13], [17], [18]. Peräkkäisen osio kustakin näytteestä käsitellä ilman primaarista vasta-ainetta käytettiin negatiivisena kontrollina. Positiiviset ja negatiiviset kontrollit perustettiin jokaisen erän kokeita. Lisäksi spesifisyyden varmistamiseksi Hurin immunoreaktiivisuus, suoritimme samanlainen tutkimus käyttäen vuohen polyklonaalista vasta-ainetta (Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA) näytteissä ihmisen (n = 40) ja hiiren kudoksissa (n = 20), ja ne inkuboitiin myös estävän peptidin tähän anti-Hur-aineella (Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA).

Arviointi

Hur ilmentyminen arvioitiin immunoreaktiivisia pisteet niin raportoitu aiemmin [19]. Lyhyesti, sytoplasminen ja tumavärjäystä kuvioita pisteytettiin käyttäen seuraavia asteikot: 0, ei värjäystä; 1, heikko ja /tai paikallinen värjäytymistä ( 10% soluista); 2, kohtalainen tai voimakas värjäytyminen (10-50% soluista); ja 3, kohtalainen tai voimakas värjäytyminen ( 50% soluista). Tulospalvelu 0 ja 1 arvioitiin niin alhainen ilmaisun, ja tulokset 2 ja 3 arvioitiin jopa ilmaisua. Tämä arviointi menetelmää käytettiin hiiren kudoksissa. Mitä muita ilmaisuja, tuloksia pidettiin positiivisena, jos värjäytyminen intensiteetti oli vahva, ja prosenttiosuus positiivisesti värjättyä syöpäsolujen määritettiin käyttäen jatkuvalla asteikolla mukaan aiempien raporttien [13], [17]. Lyhyesti, ekspressiotasot arvioitiin semi-kvantitatiivisesti prosenttiosuus ilmentävien karsinoomasolut (peräisin ≥500 karsinoomasoluja). Nämä solut tutkittiin käyttäen E-400 mikroskoopilla (Nikon, Tokio, Japani) ja digitaalisten kuvien otettiin kiinni (DU100, Nikon). Lisäksi käytimme tietokoneavusteinen kuva-analyysi-järjestelmän (Win KATOLLA versio 5.0; Mitani, Fukui, Japani) laskea tilastollisia muuttujia. Kaksi tutkijaa (S.W. ja Y. M.), sokaissut kliiniset piirteet ja Eloonjääntitulokset, itsenäisesti suoritettava semikvantitatiivinen analyysit ja immunovärjäämällä tulkintoja. Erimielisyyden määrä analyysissä näiden kahden tutkijat olivat 10% ja keskimääräinen tiheys käytettiin tilastollisia analyysejä.

Tilastollinen analyysi

Data esitetään välineet (keskihajonta [SD] ). Studentin t-testiä käytettiin analyysiin jatkuvia muuttujia. Chi-neliö testi ja Fisherin testiä käytettiin vertailua kategorisen datan. Spearmanin korrelaatiokertoimen käytettiin määrittämään assosiaatioita kaksi jatkuvaa muuttujaa. Raakaöljyn ja säätää vaikutukset arvioitiin regressioanalyysimme ja kuvata kertoimet suhteet (OR), jossa 95%: n luottamusväli (95% CI) sekä

P

-arvot. Survival analyysi arvioitiin käyttämällä Kaplan-Meier-analyysi ja log-rank-testi, ja muuttujia, jotka tilastollisesti merkitsevästi (

P

0,050) in Yksiulotteisissa analyysit myöhemmin tuli Monimuuttuja-analyysissä käyttämällä Coxin suhteellisten riskien analyysi ( kuvata riskisuhde [HR] 95%: n luottamusväli, yhdessä

P

-arvot) (malli A). Lisäksi tutkia ennustearvo HUR ilmaisun yksityiskohtaisemmin analyysi sisältyi Monimuuttuja malli sisältää kaikki riskitekijät (malli B). Kaikki tilastolliset testit olivat kaksipuolisia ja merkitys määriteltiin

P

0,050. Kaikki tilastolliset analyysit suoritettiin henkilökohtaista tietokonetta, jossa StatView for Windows versio 5.0-ohjelmisto (Abacus Concepts, Berkeley, CA).

Tulokset

lokalisointi ja ilmentäminen Hur

normaali urothelial soluja, heikko tai kohtalainen ydin- Hur ilmentymistä havaittiin yhdessä poissa heikko sytoplasmista ilmentymistä (Fig. 1A). Lopuksi, 90% (18/20), pidettiin osoittavat ydinvoiman ilmentyminen normaaleissa urothelial soluissa. Sen sijaan, korkea sytoplasminen ilmentyminen havaittiin vain 5% (1/20) ja normaaleissa kudoksissa. Mitä ydinvoiman HUR ilmentymistä syöpäsoluissa, ilmentyminen oli korkea 88 yksilöt (72,1%; pisteet 2, n = 64; pisteet 3, n = 24) ja alhainen 34 (27,9%; pisteet 0, n = 1; pisteet 1, n = 33). Toisaalta, osalta sytoplasmista ilmentymistä syöpäsoluissa, ilmentyminen oli korkea 31 yksilöt (25,4%; pisteet 2, n = 24; pisteet 3, n = 7) ja alhainen 91 (74,6%; pisteet 0, n = 37, pisteet 1, n = 54). Edustavia esimerkkejä matalan ja korkean Hur ilmentyminen syöpäkudoksessa on esitetty kuvassa 1B ja C: nä.

Hur pääasiassa havaittiin ytimet sekä normaalien että syöpäsoluja virtsarakon kudoksissa. Kohtalainen tai voimakas soluliman ilmentyminen oli ilmeistä syöpäsoluissa (C), mutta oli harvinaista normaaleissa urothelial soluissa (A). Jotkin syöpäsolut ovat myös osoitti heikkoa sytoplasmista ekspressiota, vaikka ydin- ilmentymistä havaittiin (B). Lisäksi osoitimme edustaja luvut Hurin ilmaisun (C) liittyvät tekijät siihen; (D) syklo-oksigenaasi-2, (E) endoteelikasvutekijä-A, (F) endoteelikasvutekijä-C samalla alueella. (Kaikki suurennos, X400).

Eläinkokeissa ydinvoiman ekspressio havaittiin 80% (8/10) ja 70% (7/10) normaaliin urothelial ja syöpäsolujen, vastaavasti. Toisaalta, korkea sytoplasminen ilmentyminen normaaleissa soluissa havaittiin 10% (1/10). Syöpäsoluissa, voimakasta ilmentymistä NMIBC ja MIBC havaittiin 40% (2/5) ja 80% (4/5), vastaavasti. Edustavia esimerkkejä Hur hiirissä tapahtuvaa ekspressiota kudokset osoittivat kuviossa 2A ja B. Tärkeää on, samanlaisia ​​tuloksia saatiin käyttämällä toista anti-Hur vasta-aineen ja sen värjäys väheni kilpailu estävän peptidin.

(suurennus, X400) . Värjäytymistyyppi oli lähellä ihmisen kudoksiin.

kliiniset ja patologiset merkitys Hur Expression

väliset suhteet patologisia piirteitä ja Hur ilmaisun tumassa ja sytoplasmassa on esitetty taulukossa 1. Nuclear Hur ilmaisu ei ollut merkittävää suhdetta pT vaiheeseen tai luokka (

P

= 0,471 ja

P

= 0,773, tässä järjestyksessä). Kääntäen, sytoplasminen Hur ilmentyminen positiivisessa yhteydessä pT vaiheessa (

P

0,001) ja laatu (

P

0,001).

Kuten esitetään Taulukko 2, sytoplasmista Hur ilmentyminen positiivisessa yhteydessä ilmauksia COX-2 (

P

= 0,011), VEGF-A (

P

= 0,021) ja VEGF-C (

P

= 0,004), mutta ei VEGF-D lauseke (

P

= 0,134). Lisäksi sytoplasmista Hur ilmaisu näytetään myös positiivisia korrelaatioita MVD (

P

= 0.010) ja LVD (

P

= 0,023). Toisaalta, ydin- ilmaus Hur ei osoittanut mitään merkittävää korrelaatiota minkään näitä ilmaisuja tai muuttujat (taulukko 2). Täten tyypillisiä esimerkkejä näistä merkittäviä molekyylien näkyvät korkealla Hur lauseke näytteen (kuva 1D-F).

välistä suhdetta Hur liittyviä molekyylejä ja Angiogeneesi tai imusuonten

esitämme tutkimuksen populaatio, MVD oli tiiviisti VEGF-A (r = 0,40,

P

0,001), VEGF-C (r = 0,41,

P

0,001), ja COX -2 lauseke (r = 0,31,

P

0,001), mutta ei VEGF-D (r = 0,17, P = 0,652). Samoin LVD liittyi myös VEGF-A (r = 0,39,

P

0,001), VEGF-C (r = 0,58,

P

0,001), ja VEGF- D (r = 0,53, P 0,001), mutta ei COX-2: n ilmentymisen (r = 0,15,

P

= 0,103). Skeema Tällaisten korrelaatioista oli showen kuvassa 3.

MVD, mikroverisuonitiheys; LVD, lymphvessel tiheys; VEGF, verisuonen endoteelin kasvutekijä; COX, syklo-oksygenaasi.

selvennetään merkitystä ilmauksia VEGF-A, VEGF-C, ja COX-2 MVD ja LVD yksityiskohtaisemmin monimuuttujamenetelmin suoritettiin mallien mukaan lukien nämä tekijät, pT vaiheessa ja arvosana. Osalta MVD, vaikka VEGF-C: n ja COX-2: ta, jotka liittyvät MVD (OR = 1,05, 95% CI = 1,02-1,08,

P

= 0,002 ja OR = 1,05, 95% CI = 1.00- 1.11,

P

= 0,043, tässä järjestyksessä), VEGF-A ilmaisu voimakkaimmin yhdistys (OR = 1,05, 95% CI = 1,03-1,11,

P

0,001). Samanlaisia ​​analyysi osoitti, että VEGF-C läheisimmin LVD (OR = 1,05, 95% CI = 1,01-1,08,

P

= 0,001), kun taas VEGF-A ilmentyminen liittyi myös (OR = 1,05, 95% CI = 1,01-1,08,

P

= 0,011).

Survival Analyysit

Nuclear Hur ilmaisua ei tunnistettu merkittävä ennustaja uusiutumisen virtsateiden, etäpesäke, tai aiheuttaa erityisiä eloonjäämisen (log-rank

P

= 0,156,

P

= 0,058, ja

P

= 0,940, tässä järjestyksessä). Toisaalta korkea sytoplasmista Hur ilme oli merkittävä ennustaja kullekin näistä parametrien (Fig. 4 A-C). Jos haluat näyttää tarkempia arvoja ennustavaa tekijöiden kaltaiset analyysit suoritettiin myös patologisia piirteitä ja adjuvanttihoito. Lisäksi osoitimme monimuuttujamenetelmin mallien mukaan lukien kaikki nämä tekijät (malli A) ja sytoplasmista Hur ilmaisun ja patologiset ominaisuudet (malli B) osoittivat taulukossa 3. Molemmissa malleissa Hur ilmentyminen tunnistettiin ennustetekijä varten etäpesäkkeitä, mutta ei uusiutumisen osaksi virtsateiden (HR = 2,00, 95% CI = 0,98-4,11,

P

= 0,057 Model A ja HR = 1,82, 95% CI = 0,90-3,72,

P

= 0,094 Model B) ja aiheuttavat erityisiä eloonjäämisen (HR = 5,42, 95% CI = +0,29-+6,71,

P

= 0,688 Model A ja HR = 1,26, 95% CI = 0,42-3,75,

P

= 0,683 Model B).

keskustelu

Tämä tutkimus osoitti, että sytoplasmista Hur ilmentyminen tiiviisti pahanlaatuinen potentiaalia, syövän etenemiseen , ja lopputulos virtsarakon syöpäpotilailla. Käänteisesti tällaista merkitystä ei löytynyt ydin- ilmentymistä Hurin. Aiemmat tutkimukset ovat havainneet sytoplasman kertymistä useita syöpiä, jotka osoittavat, että nucleocytoplasmic translokaatio Hur välttämätöntä RNA vakauden [20], [21]. Tuloksemme samanlainen rooli ihmisen virtsarakon syöpä kudoksiin.

Tämä on ensimmäinen raportti suhteita HUR ilmaisun ja patologiset ominaisuudet, toistuminen, ja selviytymistä potilailla, joilla urothelial karsinooma virtsarakon syöpä. Mitä tulee patologinen merkitys sekä varoituksia rooleja Hurin useat aikaisemmat tutkimukset ovat raportoineet, että yli-ilmentyminen liittyy korkea-asteen maligniteetin pitkälle, ja huono selviytyminen potilailla, joilla on paksusuolen syöpä [6], rintasyövän [5], ja munuaissyöpä [7]. Kuitenkin Hur ilmaisu ei näytä liittyvän patologisen tilan potilailla, joilla on rintasyöpä, korkea ilmaus HUR ennustavat paremman ennusteen [8]. Tuloksemme entinen tilanne virtsarakon syöpään. Mekanismina taustalla tällainen patologinen toimintaa Hurin angiogeneesin säätelyyn on ehdotettu erilaisten syöpien [3], [4]. Erityistä huomiota kiinnitettiin suhteita Hur ilme, pahanlaatuinen potentiaalia ja patologisia piirteitä, koska stimulaatio Angiogeneesin on yhdistetty kasvaimen kasvua ja etenemistä potilailla, joilla on useita maligniteetteja, mukaan lukien virtsarakon syöpä [13], [22]. Lopuksi Tuloksemme osoittivat mahdollisuuden, että sytoplasmista ekspressiota Hur positiivisessa yhteydessä pahanlaatuiseen käyttäytymiseen ja tulos virtsarakon syöpäpotilailla. Lisäksi on mahdollista, että tällaiset pahanlaatuiset aggressiivisuus liittyy Hur liittyvää angiogeneesiä.

Yksi mielenkiintoisimmista havainnoista tässä tutkimuksessa oli, että sytoplasmista Hur ilmaisu korreloi positiivisesti lymfangiogeneesiä virtsarakon syövän kudoksissa. Parhaan tietomme mukaan tämä tutkimus on ensimmäinen ilmoittaa suhdetta Hur ilmaisun ja imusuonten virtsarakon syöpä, vaikka samankaltaisia ​​löydöksiä on havaittu keuhkosyövän aiemmissa raporteissa [4]. Lisäksi kiinnostavaa, sekä että raportti ja nykyinen tutkimus osoitti, että sytoplasmista Hur ilmaisu korreloi sekä angiogeneesiä ja imusuonten. Näiden tulosten saavuttamiseksi hypoteesi, että yhteistyön tekijöitä, jotka voivat vaikuttaa sekä angiogeneesin ja imusuonten voi liittyä todennut tällaista syövän kudoksissa.

yksityiskohtainen sääntelymekanismit angiogeneesin ja imusuonten mukaan Hur ihmisen syövässä kudokset eivät vieläkään täysin ymmärretä . Useat molekyylien on raportoitu Hur liittyviä, kuten VEGF-A [10], VEGF-C, ja COX-2 [7], [9]. Nämä tekijät tiedetään liittyvän MVD ja LVD virtsarakon syöpään. Kuitenkin väliset suhteet HUR ilmaisun ja nämä angiogenesis- ja imusuonten liittyviä molekyylejä ihmisen virtsarakon syövän kudokset ovat vielä epäselviä. Tuloksemme osoittivat, että sytoplasmista Hur ilmaisu korreloi positiivisesti ilmauksia VEGF-A: n ja -C, mutta ei VEGF-D. Olemme aiemmin raportoitu, että VEGF-A: n ja -C liittyi merkittävästi MVD ja LVD ihmisen virtsarakon syövän kudoksissa [13]. Lisäksi tällainen merkitseviä suhteita ei havaittu ydinvoiman Hur ilme. Näiden havaintojen me arveltu, että translokaatio välillä tumasta solulimaan on tärkeä prosessi kannustamisessa angiogeneesiä ja imusuonten. Lisäksi ylössäätöä VEGF-A: n ja -C ilmaisuja voi liittyä tällaista ilmiötä virtsarakon syöpään.

Toinen merkittävä tulos tässä tutkimuksessa oli se, että sytoplasmista Hur ilme oli hyödyllinen ennustaja ennuste virtsarakon syöpä potilailla, joille tehtiin TUR. Erityisesti ilmentyminen tiiviisti postoperatiivista etäpesäkkeitä. Monet tutkijat ovat havainneet lisääntynyt MVD ja LVD vahvoina ennustavia tulos virtsarakon syöpäpotilailla [13], [23], [24]. Näiden tulosten perusteella, ajattelimme, että tällainen ennustetekijöiden roolit MVD ja LVD olivat kohtuullisia. Toisaalta, sytoplasmista ekspressiota Hur tunnistettiin merkittävä ennustaja syy-erityisiä selviytymisen univariate analyysi, mutta ei itsenäisesti ennusta sisään monimuuttujamenetelmin. Emme ole varmoja, miksi tällaisia ​​eroja ei havaittu tässä tutkimuksessa. Kuitenkin leikkauksen jälkeinen eloonjäänti vaikuttavat monet tekijät. Olemme siis arveltu, että sytoplasminen Hur voi pelata erilaisia ​​rooleja elossaololuku, kun taas monet muut tekijät ja molekyylit voivat olla voimakkaampia vaikutuksia määritettäessä lopputulokset virtsarakon syöpään.

Tässä tutkimuksessa osoitimme, että sytoplasmista HUR lausekkeita virtsarakon syövän solut olivat korkeammat kuin normaaleissa epiteelisoluissa. Biologisia toimintoja Hurin ihmisen ja hiiren on raportoitu olevan samanlainen edellisessä raportissa [25]. Kuitenkin validointi spesifisyys Hurin tavoite ei ole vielä täysin selvä. Lisäksi äskettäin ja yksityiskohtainen patologinen toiminta Hurin syöpäsoluissa ovat yhä selvästi viime vuosina [26]. Siten lisätutkimukset koskevat molekyylimekanismin ja solubiologian kokeilut ovat tarpeen ymmärtää yksityiskohtaisemman patologinen roolit Hur virtsarakon syöpään.

Yhteenvetona tuloksemme osoittivat, että sytoplasmista Hur ilmentyminen merkitsevästi yhteydessä pahanlaatuisten aggressiivisuus ja virtsarakon syöpä hoitotuloksia, kun taas ydinvoiman HUR ilme ei ollut. Lisäksi, sytoplasmisen Hur ilmentyminen liittyy angiogeneesiin, imusuonten ja nämä liittyvät molekyylit, mukaan lukien VEGF-A, VEGF-C, ja COX-2. Tuloksemme viittaavat siihen, että sytoplasmista Hur ilmaisu oli hyödyllinen ennakoivaa merkkiaineena etäpesäke jälkeen TUR virtsarakon syöpään. Saada lisää mekanistinen käsitys, edelleen

in vivo

ja

in vitro

tutkimuksissa virtsarakon syöpä ovat tarpeen.

Kiitokset

Olemme kiitollisia Mr. Takumi Shimogama ja Mrs Miho M. Kuninaka erinomaisesta tuesta.