Krooninen sairaus

tiivistelmä

Kaksisuuntainen syöpää edistäviä ja syövän vastaisen arseenin syöpäsoluja ovat paljastuneet aikaisemmissa tutkimuksissa. Kuitenkin jokainen näistä vaikutuksista (syöpä edistäviä tai anti-syöpä) havaittiin eri soluissa eri käsiteltiin-arseenin. Tässä tutkimuksessa olemme ensimmäistä kertaa osoitti, että arseeni pitoisuutena 3 uM, joka vastaa keskimääräistä pitoisuutta juomaveden syöpää alttiilla alueilla Bangladeshissa, samanaikaisesti ilmaissut kaksisuuntaisen vaikutuksia ihmisten okasolusyöpä HSC5 solujen erillisiä polkuja. Hoito 3 uM arseenin edistetään soluinvaasiota kautta voimistumista ilmentymisen MT1-MMP ja downregulation ilmentymisen p14ARF ja samanaikaisesti indusoi solujen apoptoosia estämällä ilmentymisen N-kadheriinin ja kasvu ilmaisun p21 (WAF1 /CIP1) sekä transkripti ja proteiini tasoilla HSC5 soluissa. Osoitimme myös, että inhibitio MT1-MMP ilmentyminen NSC405020 johti laskuun arsenikkia välittämää invaasion HSC5 solujen mukana lasku fosforyloidun ekstrasellulaarisen signaalin säädelty kinaasien (Perk). Yhdessä meidän biologiset ja biokemialliset havainnot ehdotti, että arseeni ilmaistuna kaksisuuntaista vaikutuksia syöpää aiheuttavaksi aineeksi ja syövän vastaisen aineena ihmisen okasolusyöpä HSC5 solujen erillisiä polkuja. Tuloksemme saattaa olla tärkeä tieteellinen ilmeinen jatkotutkimuksiin selvittää parempi tapa hoidossa arseenin aiheuttamien syöpien, erityisesti levyepiteelisyöpä.

Citation: Thang ND, Yajima I Kumasaka MY, Kato M (2014) Kaksisuuntainen tehtävät Arseeni karsinogeeniksi ja solunsalpaajaksi Human Okasolusyöpä. PLoS ONE 9 (5): e96945. doi: 10,1371 /journal.pone.0096945

Editor: Shrikant Anant, University of Kansas School of Medicine, Yhdysvallat

vastaanotettu: 10 helmikuu 2014; Hyväksytty: 13 huhtikuu 2014; Julkaistu: 09 toukokuu 2014

Copyright: © 2014 Thang et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tämä tutkimus rahoittaa Vietnamin kansallinen Foundation for Science and Technology Development (NAFOSTED) alle lupanumeroon 106-NN.02-2013.07. Rahoittaja ei ollut roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Arseeni saastuminen juominen hyvin vettä on vakava kansanterveydellinen ongelma maailmassa [1], [2]. Arseeni on hyvin dokumentoitu ihmiselle syöpää aiheuttavaksi aineeksi. Krooninen pieniannoksisen altistuminen arseeni aiheuttaman ihon värin, krooninen ruoansulatushäiriöt, kohonnut verenpaine, ääreisverenkierron sairaus, iskeeminen sydänsairaus, ja monenlaisia ​​syöpiä, kuten iho-, keuhko-, virtsarakko-, maksa-, ja munuaisten syövät [3]. Arseenin asiamiehenä syövän synnyn tai kasvaimen etenemisen tai anti-kasvain huumeiden riippuu sen pitoisuus [4] – [6], altistuksen kesto [6], [7] ja syöpäsolutyyppien [3] – [7] . Edellinen auto radiologisesti eläinkokeissa osoitti, että ihon levyepiteelisyöpä (SCC) on yksi edustaja arseenin välittämää syöpiä [8]. Vaikka arseeni on laajalti tunnustettu syöpää aiheuttavaksi, se myös on kliinisesti käytetty tehokas kemoterapeuttisen aineen leukemian hoidossa ihmisillä [9]. Arseeni ilmaisi myös syöpälääkkeen vaikutuksia erilaisten kiinteiden syöpien, mukaan lukien ihon karsinooma, edistämällä apoptoottista solukuolemaa [10], [11]. Kaksisuuntainen syöpää edistäviä ja syövän vastaisen arseenin syöpäsoluihin ovat johtaneet vaikeaan tilanteeseen selventää mekanismia arseenin välittämän syövän. Vaikka oli monia tutkimuksia keskittyen paljastaa mekanismi arseenin syöpäsoluihin, on edelleen epäselvä.

pidätys solusyklin ja apoptoosin liittyvät solukuolemaan ja pidetään tärkeitä keinoja syövän hoito [12] – [15]. Aiemmat tutkimukset osoittivat, että arseeni indusoi apoptoosia syöpäsoluissa aktivoimalla ilmentymisen tuumorisuppressoreilla p21 (WAF1 /CIP1) ja p14ARF (p19ARF hiiren) [12] – [15]. p21 (WAF1 /CIP1) ja p14ARF tärkeä rooli valvoa solusyklin pysähtymiseen säätelemällä Sykliinien ja sykliiniriippuvaisten kinaasien (CDK) [16] – [19]. p21 (WAF1 /CIP1) ja p14ARF pystyvät estämään solujen kasvua solusyklin pysähtymisen ihon syöpäsoluja, mukaan lukien melanooma, okasolusyöpä ja tyvisolusyöpä [20] – [24]. Muut kertomukset osoittivat, että altistuminen arseeni aiheuttaa solun muuntaminen läpi estämällä sekä proteiini- että geenin ilmentyminen tuumorisuppressoreilla p19ARF [22] – [24].

Invasion on sali merkki maligniteettiriski luokan syöpäsoluja. On todettu, että arseeni vähentää invasiivisen ja metastaattisen ominaisuudet gliooma kasvainsolujen eston kautta aktivoinnin matriksimetalloproteinaasi-14 (MT1-MMP) [7], [25], joka pystyy ajamaan hyökkäystä syöpäsolujen suurelta osin hajottamalla ECM rajat. MT1-MMP on myös pidettävä ylävirtaan ERK. ERK on keskeinen molekyyli suuria signaloinnin kasettia mitogeeniaktivoidun proteiinikinaasin reitti [26],. ERK on tärkeä rooli syövän kehittymisessä, [26], [27]. Näin MT1-MMP ehkä säännellä fosforyloidun tasoa ERK [26], [27]. Kuitenkin muissa tutkimuksissa, runsaasti arseenia parantaa MT1-MMP ilmentymisen fibroblastisoluissa [28] – [30]. Aikaisemmat tutkimukset myös raportoitu, että arseeni vähentää ilmentymistä E-kadheriinien [31], [32]. Downregulation E-kadheriinin korreloi ylössäätely N-kadheriinin, invaasio promoottori-molekyylin [33] -. N-kadheriinin-riippuvainen adheesio heikentää säätelyä sykliiniriippuvaisen kinaasi-inhibiittorin p21: [37], [38]. Kohdunulkoinen ilmentyminen N-kadheriinin kasvattaa kasvain solun liikkuvuus [35], [39].

Aikaisemmat raportti osoitti, että on olemassa noin 3 uM (210,7 ug /L) arseeni-saastunut juo hyvin vettä (n = 72) syövän-alttiille alueille Bangladesh [40]. On olemassa monia syöpiä kuten okasolusyöpää (SCC) esiintyy näillä aloilla [40]. Tässä tutkimuksessa olemme ensimmäistä kertaa osoitti, että arseeni, pitoisuus 3 gM samanaikaisesti toimi syöpään promoottori ja syöpälääkettä ihmisen okasolusyöpä HSC5 solujen erillisiä polkuja.

Materiaalit ja menetelmät

reagenssit

Natrium arsenide (arseeni) hankittiin Sigma. NSC405020 hankittiin Millipore. Arseeni liuotettiin veteen käyttöä varten. NSC405020 liuotettiin DMSO käytettäväksi.

Soluviljely

Human transformoituja keratinosyyttejä HSC5 soluihin [40] (Health Science Research Resources Bank, Japani) viljeltiin RPMI-1640, johon oli lisätty 10% naudan sikiön seerumia (FBS) ja 1% penisilliiniä /streptomysiiniä 37 ° C: ssa 5% CO2: ta.

Kristalliviolettiliuos määrityksessä

Kristalliviolettiliuos määritys suoritettiin käyttäen edellä kuvatun menetelmän [40]. Lyhyesti, soluja (3 x 10

4-solut) maljattiin kuuden kuoppalevyille ja viljeltiin 24 tuntia. Soluja käsiteltiin sitten arseenia ja viljeltiin vielä 3 päivää. Elinkelpoiset tarttuneet solut kiinnitettiin 10% formaliinilla ja värjättiin 0,1% kristallivioletilla. Absorbanssi 595 nm: ssä värjättyjen solujen liuotetaan 0,1% SDS mitattiin käyttämällä mikrolevyjen lukijaa.

Invasion määrityksessä

Cell invaasio kykyä arvioitiin invaasiomääritys menetelmän mukaisesti aiemmin raportoitu [41 ]. Lyhyesti, 2 x 10

5 solua 300 ml viljelyalustaa 0,5% FBS levitettiin Matrigel päällystettyjä ylempi kamari 8 mm halkaisijaltaan (8 mm: n huokoskoko). Sitten ylempi kammiot pantiin 24-kuoppaisille viljelylevyille, jotka sisältävät 600 ml väliainetta, jossa oli 0,5% FBS: ää käynnistää hyökkäyksen aktiivisuus ja inkuboitiin 12 tunnin ajan. Tunkeutuvat solut värjättiin hematoksiliinilla-siinilla tai kristalliviolettia ja laskettiin mikroskoopilla.

Reaaliaikainen PCR-analyysi

Yhteensä RNA valmistettiin solulinjasta näytteitä High Pure RNA Kit (Roche Diagnostics) menetelmän mukaisesti aikaisemmin kuvatulla tavalla [41]. cDNA syntetisoitiin sitten käänteiskopioimalla kokonais-RNA: sta käyttäen Super-criptTMIII käänteistranskriptaasin sisältyvät RT-entsyymi sekoitetaan ja RT-reaktioseosta protokollan mukaisesti aikaisemmin kuvatulla tavalla [41]. Reaaliaikainen kvantitatiivinen RT-PCR SYBR vihreä suoritettiin käyttäen teho SYBR1 Green PCR Master Mix (Applied Biosystems) ABI Prism7500 sekvenssi tunnistusjärjestelmä (Applied Biosystems). Ilmentymistasojen p14ARF, p21 (WAF1 /CIP1), MT1-MMP ja N-kadheriinin transkriptien mitattuna kvantitatiivisella RT-PCR: llä (real-time PCR) sopeutettiin transkriptio ekspressiotaso TATA-box-sitovan proteiinin (TBP) . PCR suoritettiin käyttäen 10 ml: n tehon SYBR1 Green PCR master mix (Applied Biosystems), joka sisälsi 900 nM eteenpäin suuntautuvaa aluketta ja 900 nM käänteisaluketta: n lopullisessa tilavuudessa 20 ml. Sekvenssit alukkeiden esitetään alla:

Forward: GTGGTCTCGGACCATGTC

ja Reverse: GTAGCCATATTGCTGTAGCC for MT1-MMP.

Forward: ATTGCTGTTTTGGACCGAGA

ja Reverse: CACTTGAGGGGCATTGTCAT N-kadheriinin.

Forward: AAGTCAGTTCCTTGTGGAGC

ja Reverse: ATTAGCGCATCACAGTCGCG p21 (WAF1 /CIP1).

Forward: ATGGTGCGCAGGTTCTTGGT

ja Käänteinen : TGCCCATCATCATGACCTGG varten p14ARF.

Forward: CACGAACCACGGCACTGATT

ja Reverse: TTTTCTTGCTGCCAGTCTGGAC varten TBP.

immunoblot-analyysi

immunoblot-analyysi suoritettiin menetelmän mukaisesti, on kuvattu aiemmin [42]. Kanin polyklonaaliset ensimmäinen vasta-aineita fosforyloidun treoniini 202 ERK1 ja fosforyloidun tyrosiinin 204 ERK2 (Cell Signaling), anti-matriksimetalloproteinaasi-14 (MT1-MMP) sarana-alueesta vasta-aine (Millipore), ERK1 /2 (Cell Signaling), vuohen polyklonaalisia vasta-aineita vastaan ​​p14ARF ja p21 (WAF1 /CIP1) (Santa Cruz), hiiren monoklonaalinen vasta-aine N-kadheriinin (

BD

Biosciences) ja hiiren monoklonaalinen vasta-aine-alfa-tubuliinin (SIGMA).

Statistical analyysi

tilastollinen analyysi tässä tutkimuksessa suoritettiin menetelmän mukaisesti aikaisemmin kuvatulla tavalla [40]. Tulokset kolmesta riippumattomasta kokeesta kussakin ryhmässä analysoitiin tilastollisesti Studentin t-testiä. SPSS (versio 18) ohjelmistopaketti (SPSS Japan Inc.) käytettiin näiden tilastollisten analyysien ja merkitys asetettiin arvoon p 0,05.

Tulokset

Arseeni indusoi apoptoosin HSC5 solut

aikaisemmat kenttätyötä osoittivat, että ilmassa olevan arseenin arseenia saastunutta juomavettä syövän-alttiille alueille Bangladeshissa on noin 3 uM (210,7 ug /L) [40]. Kuitenkin, on se, että on vaikea tunnistaa vaikutus arseenin syövän kehitykseen [3] – [11] Tämän vuoksi päätimme tutkia vaikutuksia arseenin on apoptoosiin HSC5 soluja. HSC5 soluja käsiteltiin arseenin 0, 1,0, 3,0, 5,0 ja 10,0 uM 24 tuntia. Se osoitti, että suurempi arseenin aiheuttama vahvempi apoptoosin soluissa. Pitoisuutena 1 uM, arseeni ei ollut vaikutusta solujen kuollut (kuvio 1A). Kuitenkin, 3 uM ja 5 uM, arseenin aiheuttama väheneminen solujen elinkelpoisuuden lähes 2 ja 5 taittuu, vastaavasti (kuvio 1A). 10 uM arseenin johti lähes kaikki solut kuolleista (tuloksia ei ole esitetty). Sitten tutkittiin vaikutusta 3 uM arseenin on kuollut HSC5 solut ajan myötä. Hoidon arseenia 24 tuntia, 48 tuntia ja 72 tuntia merkittävästi vähentynyt elinkelpoisuuden HSC5 soluja 1,4, 1,8 ja 1,7 kertaa, vastaavasti (kuvio 1 B). Nämä tulokset osoittivat, että apoptoosin HSC5 soluja suoraan aiheuttamia arseenia.

elinkelpoisuus HSC5 käsiteltyjen solujen 0, 1,0, 3,0 ja 5,0 uM arseenin arvioitiin kristalliviolettivärjäys- (CV). Solut esitetty valokuvien (A) ja suhteet arseenia käsiteltyjen elävien solujen ja ohjaus elävien solujen esitettiin kuvaajan (B). **, Merkittävästi erilainen (p 0,01) päässä valvonta Studentin t-testiä.

Arseeni edistänyt invaasion HSC5 solujen

seuraava tutkittiin arseenin on invaasion HSC5 soluja. Soluja esikäsitellään arseenin eri pitoisuuksina (0, 1,0, 3,0, 5,0 ja 10,0 uM) 24 tunnin ajan ennen sadonkorjuuta varten invaasiomääritys. Hoito 1 uM arsenikkia ei ollut vaikutusta, mutta 3 5 pm edistänyt hyökkäys HSC5 noin 1,8 ja 3,7 taittuu, tässä järjestyksessä (kuvio 2A). Klo 10 uM, arseenin aiheuttama kuollut lähes kaikkien solujen, siis ei ollut mahdollista tutkia vaikutusta arseenin annetun hyökkäystä solun tässä pitoisuudessa. Sitten tutkittiin vaikutusta 3 uM arseeni on invaasion HSC5 solut ajan kuluessa 0, 24, 48 ja 72 tuntia. Esikäsitelty arseenin 24, 48 ja 72 tunnin lisääntynyt invaasion HSC5 solujen 2,14, 2,27 ja 1,75 taittuu, tässä järjestyksessä (kuvio 2B). Siellä tulokset ehdottivat, että arseeni johti edistämisessä hyökkäystä HSC5 soluja. Hoidon 3 uM tai 5 uM arseenin lisääntynyttä apoptoosia (kuvio 1) ja samanaikaisesti edistää invaasion HSC5 soluja (kuvio 2). Nämä tulokset ovat tieteellisiä evidents varten bifunctions arsenikkia karsinogeeniksi ja syövän vastaisen aineen syövän levyepiteelikarsinooma HSC5 soluja. Perustamalla nämä tulokset ja data kenttätyön päätimme käyttää 3 uM arseenin lisäkokeita varten.

invasiivinen kyky on HSC5 käsiteltyjen solujen 0, 1,0, 3,0 ja 5,0 uM arseenin arvioitiin invaasio määritys. Määrä hyökkääviä HSC5 käsiteltyjen solujen arseenin invaasiomääritys esiteltiin valokuvia (A) ja kuvaaja (B). **, Merkittävästi erilainen (p 0,01) päässä valvonta Studentin t-testiä.

Arseeni edistänyt invaasio HSC5 solujen ylössäätely MT1-MMP ja downregulation p14RAF sekä transkriptio ja ilme tasot

vieressä tutkinut molekyylitason mekanismi arseenin välittämää solujen invaasiota in HSC5 soluissa. Hoidon 3 uM arseenin indusoidun transkriptin ja ekspressiotasot MT1-MMP (kuvio 3A-B), ja se esti otteen ja ekspressiotasot p14ARF (kuvio 3C-D). Aiemmat tutkimukset [20] – [24], [27] osoitti, että MT1-MMP ja p14ARF ehkä tärkeitä rooleja modulointiin kasvun ja invaasion okasolusyöpä soluja. Niiden mukaisesti aikaisempien raporttien [20] – [24], [27], tuloksemme ehdotti, että arseeni voitaisiin edistää invaasion HSC5 solujen kautta ylössäätely MT1-MMP ja downregulation p14ARF.

A ja C) transkriptio ekspressiotasot MT1-MMP ja P14 mitattiin reaaliaikaisella PCR: llä. **, Merkittävästi erilainen (p 0,01) ohjauspaneelista Studentin t-testiä. B ja D) Proteiinin ekspressiotasoja MT1-MMP ja p14 mitattiin immunoblottauksella. Tubuliinia käytettiin positiivisena kontrollina. Kolme itsenäistä koetta suoritettiin, ja saatiin samat tulokset.

Arseeni indusoi apoptoosia HSC5 solujen downregulation N-kadheriinin ja ja säätelyä p21 (WAF1 /CIP1) sekä transkripti ja ekspressiotasot

sitten tutkittiin molekyylimekanismin arseenin välittämää apoptoosia HSC5 soluissa. Hoidon 3 uM arseenin voimakkaasti alentunut transkriptio ja ekspressiotasot N-kadheriinin (kuvio 4A-B), ja edistettävä otteen ja ekspressiotasot p21 (WAF1 /CIP1) (kuvio 4C-D). Aiemmat tutkimukset [20] – [24], [29] – [36] osoittivat, että N-kadheriinin ja p21 (WAF1 /CIP1) voisi olla tärkeä rooli moduloivan apoptoosin ihmisen okasolusyöpä soluja. Tuloksemme tässä tutkimuksessa todettiin, että arseeni voivat aiheuttaa apoptoosin HSC5 soluihin downregulation N-kadheriinin ja /tai säätelyä p21 (WAF1 /CIP1).

A ja C) transkriptin ekspressiotasojen N-kadheriinin ja p21 mitattiin reaaliaikaisella PCR: llä. ***, Merkittävästi erilainen (p 0,001) ohjauspaneelista Studentin t-testiä. B ja D) Proteiinin ekspressiotasoja N-kadheriinin ja p21 mitattiin immunoblottauksella. Tubuliinia käytettiin positiivisena kontrollina. Kolme itsenäistä koetta suoritettiin, ja saatiin samat tulokset.

inhibitio arseenia-välitteisen edistäminen invaasion HSC5 soluissa MT1-MMP-estäjä

vieressä tutkittiin, mikä vaikutus NSC405020 , joka on MT1-MMP-estäjä, arseenia välittämän invaasion HSC5 soluja (kuva 5). Koska MT1-MMP on raportoitu olevan potentiaalisia sijoitettava ylävirtaan ERK [41], [42], ja se voi liittyä arseenia-välitteisen invaasiota (kuvio 2). Hoito 3 uM arseenia lisääntyi jälleen invaasiota (kuvio 5A), jossa kasvua ilmentymistaso MT1-MMP (kuvio 5B). Kuitenkaan ollut mitään muutosta fosforyloidun tason ERK (Perk). Nämä tulokset osoittivat, että kaksisuuntainen arseenin tässä keskittyminen Perk olivat tasapainossa. Arseeni-välitteisen invaasio estettiin käsittelemällä 1 uM NSC405020 (kuvio 5A). NSC405020 (1 uM) aiheutti pienentää ilmentymisen tasoa MT1-MMP sekä vähentää fosforyloidun ERK vuonna HSC5 soluissa (kuvio 5B).

A), Invasive aktiivisuus HSC5 käsiteltiin 3 uM arseenin arvioitiin invaasiomääritys. Taso invasiivisen kyvyn esitetään useita hyökkääviä solujen kuvaajan (vasemmalla) ja valokuvat (oikealla). **, Merkittävästi erilainen (p 0,01) päässä valvonta Studentin t-testiä. Fosforyloitua tasot ERK (P-ERK) ja proteiinin ekspressiotasot MT1-MMP ja ERK in HSC5 soluissa käsiteltiin 3 uM arseenia 24 tuntia on esitetty. Tubuliinia proteiinin ekspressiotasot esitetään sisäisenä kontrollina.

Keskustelu

Arseeni on pidetty aineena syövän synnyn ja syövän etenemistä kauan sitten [1], [2 ]. Perustuvat analyysiin 52202 käsin putki-kaivoveden näytteet aikana viimeiset 14 vuotta Bangladeshissa osoitti, että noin 36 miljoonaa ja 22 miljoonaa ihmistä voidaan juominen As-saastuneen veden yli 10 ja 50 ug /l [43]. Tämä voi olla tärkein syy vakava ongelma syövän kehityksen, erityisesti ihosyöpä Bangladesh [3]. Vuonna sijaan tavalla, arseeni on myös käytetty lääkkeenä hoidettaessa monenlaisia ​​syöpiä [8] – [11]. Perustamalla meidän edelliseen tulokseen [40], tutkimme vaikutuksia 3 uM arseenin cellular invaasio, tunnusmerkki maligniteetti luokan syöpäsolujen ja apoptoosia, markkeri solun kuollut syövän hoidossa. Tuloksemme osoittivat, että arseeni samanaikaisesti voimakkaasti aiheuttamaa apoptoosia (kuvio 1) ja edistettävä invaasiota (kuvio 2) on HSC5 soluja. Nämä tulokset viittaavat siihen, tässä pitoisuudessa, arseenin ilmaisi kaksisuuntaisen toimintoja levyepiteelikarsinooma HSC5 soluja. Sitten tutkittiin molekyylitason mekanismit liittyvät näihin tapahtumiin HSC5 soluissa. Tuloksemme osoittivat, että 3 uM arseeni parannettu soluinvaasion kautta säätelyä kalvon tyypin 1 matriksimetalloproteinaasi (MT1-MMP) (kuvio 3A), joka on ratkaiseva rooli tuumorigeneesissä [7], ja vaimennussäätely p14ARF (kuvio 3B), joka on inhibiittoria soluproliferaatiota [20] – [24] sekä transkriptio ja ekspressiotasoja. Tämä on ensimmäinen kerta, kun kävi ilmi, että on olemassa mahdollisuus yhteistyössä MT1-MMP ja p14ARF syövän kehityksen HSC5 soluissa. Toisessa kädessä, tuloksemme osoittivat, että 3 uM arseeni indusoi apoptoosia HSC5 soluihin downregulation N-kadheriinin (kuvio 4A), joka toistaa rooli solujen erilaistumista, transformaatio, sekä invaasiota [33] – [36] ja säätelyä p21 (WAF1 /CIP1) (kuvio 4B), tuumorisuppressori [20] – [24] sekä transkriptio ja ekspressiotasot. Tuloksemme mukaisesti aikaisempien tutkimusten [37], [38] viittasi siihen, että N-kadheriinin voisivat osallistua siihen liittyvään-solusyklin pysähtymisen läpi tumakertymään sykliini-riippuvaisen kinaasin estäjät p21. Vaikka sekä p14ARF ja p21 (WAF1 /CIP1) on raportoitu kuin molekyylit, jotka tärkeä rooli valvoa solusyklin pysähtymiseen säätelemällä toiminnan Sykliinien ja sykliiniriippuvaisten kinaasien (CDK) [16] – [19], tässä tutkimuksessa, nämä molekyylit ilmaisivat erillisiä vaikutuksia hyökkäystä ja apoptoosiin HSC5 soluja. Lisäksi osoitimme, että NSC405020, joka on MT1-MMP-estäjä, esti arseeni-välitteisen edistäminen invaasion HSC5 soluja (kuvio 5). Se voidaan selittää, että käsittely NSC405020 johti alenevassa ilmaisun taso MT1-MMP. Puolestaan ​​MT1-MMP säännelty fosforyloidun taso ekstrasellulaarisen signaalin säännelty kinaasien (lisäansiot) [26], [27], jolla on tärkeä rooli solujen invaasio, proliferaatio ja kasvainten kehittymiseen [26], [27]. Lopuksi downregulation MT1-MMP ja Perk mukaan NSC405020 johti vähentää hyökkäys HSC5 soluja (kuva 5). Kaksisuuntainen syöpää edistäviä ja syövän vastaisen arseenin syöpäsoluja solut on paljastettu. Kuitenkin, arseeni kuten syöpää edistävää ainetta tai anti-cancer drug havaittiin eri soluissa eri käsiteltiin-pitoisuus tietyn raportin [1] – [3], [8] – [11]. Tämä on ensimmäinen kerta, kun samanaikaisesti osoitti kaksisuuntaisen tehtävät arseenin ihmisen okasolusyöpä HSC5 solujen erillisten molekyylien polkuja. Tämä tutkimus auttoi selittämään miksi vaikka monet ihmiset ovat altistuneet arseenin, eivät ne kaikki ovat arsenicosis sairauksia kuten syöpää. Tuloksemme tarjosi tärkeitä tietoja muihin tutkimuksiin tulevaisuudessa selvittää parempi tapa hoidossa arseenin aiheuttamien syöpien, erityisesti okasolusyöpä.