Krooninen sairaus

tiivistelmä

Background

pyritty parantamaan diagnoosi, ennuste ja valvonta eturauhassyövän (PCA) ovat merkityksellisiä. Gleason (GSC) yliarviointi voi soveltaa yksilöiden tarpeetonta aggressiivinen hoito. Meidän tavoitteena oli käyttää stereology PCA arvioinneissa ja tutkimaan, tarkoittaa ydin- tilavuus (MNV) korreloi Gleason ensisijaisen kuvio (Gpp) ja parantaa subjektiivista GSC saada objektiivista ja luotettava menetelmä ilman välistä tarkkailija erimielisyyttä.

menetelmät

tunnistettu 74 eturauhasen yksilöt jaettiin kuuteen ryhmään sen perusteella Gpp, 3.-5 Controls (C) suunniteltiin pariksi kuin kasvain alueilla saman yksilöitä. MNV arvioitiin käyttäen ”piste-näytteet kuunteluja” menetelmä. Erot MNV joukossa C ryhmien ja Gpp ryhmät testattiin Kruskall-Wallisin testiä ja Dunn jälkikäteen testi. Erot kunkin Gpp ryhmän ja sen valvontaa vastine testattiin Wilcoxonin testi. Korrelaatiot arvioitiin kanssa Spearmanin (R

[spearman]).

Tulokset

väliset korrelaatiot eturauhasen antigeenin (PSA) ja GSC (R

[Spearman ] 0,76) sekä PSA ja MNV (R

[Spearman] 0,78) oli kohtalaisen voimakas ja erittäin merkittävä, ja korrelaatio MNV ja Gpp (R

[Spearman] 0,53) oli kohtalainen ja erittäin merkitsevä . MNV oli merkittävästi suurempi syöpä- alueilla kuin pariksi-ohjaus alueilla. Rajoitukset mukana otoskoko.

Johtopäätökset

Asianmukainen suunnittelu tutkimuksen sekä saatavuus laitteita ja ohjelmistoja morfologisia kvantifiointiin, voi tarjota kannustimen nopeasti ja tarkasti arvioida MNV lisänä parametri arvioinnissa PCa. Nykyiset tiedot ovat hyväksi käytön MNV liittyy GSC ja PSA arvioinnissa PCa.

Citation: Leze E, Maciel-Osorio CFE, Mandarim-de-Lacerda CA (2014) Edut arvioiminen Mean Nuclear Volume lisänä parametri eturauhassyövässä. PLoS ONE 9 (7): e102156. doi: 10,1371 /journal.pone.0102156

Editor: Zoran Culig, Innsbruck Medical University, Itävalta

vastaanotettu: 18 huhtikuu 2014; Hyväksytty: 11 Kesäkuu 2014; Julkaistu: 09 heinäkuu 2014

Copyright: © 2014 Leze et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Data Saatavuus: Tällä kirjoittajat vahvistavat, että kaikki tiedot taustalla olevat havainnot ovat täysin saatavilla rajoituksetta. Merkitykselliset tiedot sisällytetään tukeminen Information tiedostoja.

Rahoitus: Kirjoittajat eivät tuki ja rahoitus raportoida.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä olemassa.

Johdanto

Eturauhassyöpä (PCA), joka on tärkeä kansanterveysongelma länsimaissa ja syntymässä maligniteetin kehitysmaissa, on useimmin diagnosoitu syöpä Amerikan miehillä ja toiseksi yleisin syy syövän kuolemista Yhdysvalloissa [1]. Siten pyrkimyksiä parantaa diagnoosin, ennustetta ja valvonta Eturauhassyövän ovat merkityksellisiä.

On huomattava, että lähes 25 vuoden kuluttua sen hyväksymisestä, Gleason pisteet (GSC) järjestelmä edelleen ajankohtainen tapa arvioida korrelaatio histologiset asteen ja ennusteen potilailla PCA [2]. Tämä järjestelmä perustuu arkkitehtuuriin syöpäsoluja, jotka luokitellaan johonkin viidestä histologinen malleja alenevassa erilaistumista. Vuodesta 2005, se on suositeltavaa, että patologit määrittää GSC arvosana laskemalla yhteen yleisin ja korkein Gleason kuviot koepala, toisin kuin alkuperäisessä GSC menetelmä, joka lisätään yleisin ja toiseksi yleisin kuviot [3]. Nämä muutokset tehdään International Society of Urologisessa patologia (ISUP) vuonna 2005 oli yrittää parantaa korrelaatiota koepala ja eturauhasen, mutta on myös tarpeen muutoksen raportointi heijastaisivat paremmin kasvain käytös [4].

Tutkimukset ovat osoittaneet, että koska huono välinen tarkkailija toistettavuus GSC, on vaikea saavuttaa keskinäinen vastaavuustaulukkoa [5] – [7]. Lisäksi, lähes 20%: eturauhasen tapaukset osoittavat, tertiäärinen kuvioita, mikä tarkoittaa, että neula biopsia näytteestä korkeampi tertiäärisen Gleason kuvio, mikä ilmenee overgrading neulan biopsia [8]. Tämä puute sopimus on ensisijaisesti tärkeää potilailla PCA sekä henkilöitä, jotka ovat ehdolla tai alle aktiivinen valvonta [9].

Epäilemättä edistystä tunnistamiseen syöpä molekyylimarkkereiden on hyötynyt PCa diagnoosi, ennusteen ja hoidon [10], [11]. Kuitenkin ydinvoiman rakenne kasvain kuuluu edelleen kiinnostava. Muutokset ydin- koko ja muoto, määrän ja koon nucleoli ja chromatin voi liittyä muuttunut toiminnallisia ominaisuuksia syöpäsolujen tai kudoksen uudelleen [12]. Niinpä stereologiamenetelmää arvio keskimääräisen ydinaseiden määrän (MNV), joka on puolueeton arvio kolmiulotteinen muuttujien saatu kaksiulotteinen joukko kuvia, muodosta objektiivista ja toistettavissa luokitusmenetelmä PCA [13].

tavoitteena tämän tutkimuksen tarkoituksena on uudelleen käyttöä stereology PCA arvioinnin ja tutkimaan, MNV korreloi Gleason ensisijaisen kuvio (Gpp) korvata tai parantaa subjektiivista GSC niin, että siitä tulee entistä tavoite ja luotettava menetelmä ilman muun -observer eripuraisuutta.

Materiaalit ja menetelmät

Tämä tutkimus noudattaa esitettyjä periaatteita Helsingin julistuksen ja hyväksyi paikallinen eettinen komitea tieteelliseen tutkimukseen (eettinen komitea Research ihmiseen kohdistuvan at State University of Rio de Janeiro, CEP, Process Number 618329), joka liittyy kansallisen komitean etiikkaa Research (CONEP) ja suoraan National Health neuvoston Brasilia.

toimitti tutkimusta

Platform Brasilia

, kansalliset ja yhtenäinen muistiinpanojen perusteella tutkimuksia, joihin liittyy ihmisten mistään CEP /CONEP järjestelmä (https://conselho.saude.gov.br/). Aineisto kerättiin vuosien varrella ja jätetty institutionaalinen kokoelma. Siten tällä hetkellä tutkimuksen meillä ei ollut enää kosketuksiin potilaiden tai heidän perheensä. Olemme keskustelleet rehellisesti jäsenten kanssa CEP vaikeudesta hakemisesta allekirjoitusten käytettäessä kirjallinen suostumus potilaiden tässä tapauksessa. Jäsenet CEP ovat pitäneet tässä vaiheessa esille meille. Päätöstä tehdessään, ne korostivat tarvetta kirjallisen tietoisen suostumuksen potilaiden, mutta he eivät ymmärtäneet olevassa tapauksessa poikkeuksellisena ja sen vuoksi tutkimus oli vapautettu tietoisella suostumuksella potilaista.

Tämä tutkimus suoritettiin näytteistä saatu 74 potilasta, joille tehtiin eturauhasen ensimmäisenä valittavat hoitoa lokalisoitu ja paikallisesti edennyt PCa. GPP perustettiin vain yksi koulutettu patologi (CM-O). Potilaat jaettiin kuuteen ryhmään, joka perustuu Gpp, ja prostataspesifisen antigeenin (PSA) arvo kunkin näytteen todettiin ennen leikkausta. Kolmeen ryhmällä, jota ensisijainen kuvio laadut (kasvain alueet, T) Gpp 3 (G3, n = 20), Gpp 4 (G4, n = 28), ja Gpp 5 (G5, n = 26). Kontrollit suunniteltiin pariksi ei ollut kasvainta (NT) alueet saman näytteet ja ne kutsutaan C3 (NT alueille Gleason 3 yksilöt), C4 (NT alueille Gleason 4 yksilöt), ja C5 (NT alueille Gleason 5 yksilöt).

materiaalia nopeasti vahvistettu 48 h juuri valmistettu formaldehydiä (4% paino /tilavuus 0,1 M fosfaattipuskurissa, pH 7,2), upotettiin parafiiniin, leikattiin, jonka nimellinen paksuus 5 um, ja värjätään hematoksyliinillä ja eosiinilla. Leikkeet analysoitiin käyttämällä öljyssä suunnitelma akromaattinen tavoite (x 100), jossa on Olympus BX51 mikroskoopin (Olympus America, Miami, USA) ja Infinity 1-5C digitaalikamera (Lumenera, Ottawa, ON, Kanada). Digitaaliset kuvat otettiin kvantifiointiin T ja NT alueiden määrittelemien asiantuntija patologi.

Stereology

MNV arvioitiin käyttäen ”piste-näytteet kuuntelevansa” menetelmä viidellä eri mikroskooppikentäs- potilasta kohden yhteensä vähintään 50 ytimet per yksilö [14]. Testi, joka koostuu rinnakkaislinjojen liittyvä testi pistettä oli päällekkäin päällekkäin mikroskooppisia kentän osoitettu kuviossa 1. suunta viivoja näytteestä määritettiin arpajaiset, ja kunkin kohdan sisällä puolueeton laskenta runko, joka osui ydin, ydinvoiman siepata kautta pisteen mitattiin. Mittaus leikkauspituusmenetelmää suoritettiin käyttäen 32 mm: n logaritminen hallitsija koostuu sarjasta 15 luokkia, jossa leveys tahansa luokka on noin 17% suurempi kuin edellisen luokan. Kukin yksittäinen leikkauspiste on kuutioitu, ja keskimääräinen kaikkien näiden arvojen kerrottiin π /3, jolloin saatiin MNV. Numeerinen Säteilymittalaitteen tasossa, eli tumaprofiilien lukumäärä alaa kohden (N

A), määritettiin käyttämällä runko 5675 pm

2.

testijärjestelmä, pisteillä , on päällekkäin eturauhasen kuva ja linjassa raja numerot määritellyn arpomalla (nuolenpäitä). Pituus otokseen ytimet (nuolet) mitataan logaritminen hallitsija (katso jäljempänä).

Tilastollinen

Spearmanin (R

[Spearman]) arvioitiin kunkin näytteen määrittämiseksi väliset korrelaatiot: a) GSC ja PSA, b) MNV ja PSA, ja c) Gpp ja MNV (taulukot S1 ja S2). Erot MNV ryhmien välillä ja sisällä C ja G-ryhmää arvioitiin Kruskall-Wallis varianssianalyysi seuraa Dunn post-hoc-testi. Erot, jotka johtivat verrattaessa kunkin Gpp sen ohjaus vastine arvioitiin Wilcoxonin testi. Data näytetään mediaani ja 95%: n luottamusväli (CI).

P-arvo

on ≤0.05 pidettiin tilastollisesti merkitsevä. GraphPad Prism-ohjelma (versio 6.03 Windowsille, GraphPad Software, La Jolla, CA, USA) käytettiin suorittamaan tilastollisia analyysejä ja tuottaa grafiikkaa.

Tulokset

Spearmanin korrelaatiota

PSA vs. Gleason tulokset. Korrelaatio PSA ja GSC oli kohtalaisen vahva, mikä osoittaa R

[Spearman] arvo 0,76 95%: n luottamusväli 0,62-0,85, mikä oli erittäin merkitsevä (

P

0,0001) (kuvio . 2).

PSA vs. MNV. Korrelaatio PSA ja MNV oli kohtalaisen vahva, mikä osoittaa R

[Spearman] arvo 0,78 95%: n luottamusväli ,65-,86, mikä oli erittäin merkitsevä (

P

0,0001) (kuvio . 2).

MNV vs. Gleason ensisijainen malli. Korrelaatio MNV ja Gpp oli maltillista, mikä osoittaa R

[Spearman] arvo 0,53 95%: n luottamusväli ,30-+0,69, mikä oli erittäin merkitsevä (

P

0,0001) (Fig. 3).

Spearmanin korrelaatiokertoimet olivat kohtalaisen vahva ja merkittävä.

Spearmanin korrelaatiokerroin oli kohtalainen ja merkittävä otokseen.

Mean ydin- volyymi

vaihtelu MNV ryhmille on yksityiskohtainen kuvion. 4 ja Taulukko 1. Erot olivat merkittäviä verrattaessa MNV on Gpp sen ohjaus kollegansa. MNV oli merkittävästi suurempi syöpä- alueilla kuin pariksi-kontrollialueella 22% Gpp 3, 135% vuonna Gpp 4, ja 140% vuonna Gpp 5. Oli jatkuva kasvu MNV syöpäsoluissa alueita Gpp 3 Gpp 5. Nämä erot olivat merkittäviä, ja MNV G5 ryhmässä oli 64% suurempi kuin G3 ja 22% suurempi kuin G4. Vaikka MNV osoittanut sitä korkeampi G4 verrattuna G3, tämä ero ei ollut merkittävä, ja se voisi perustua otoskoko.

Tilastollinen merkitys on osoitettu.

Keskustelu

Tässä tutkimuksessa oli merkittäviä ja kohtalaisen vahva korrelaatioita PSA ja GSC välillä PSA ja MNV. Korrelaatio Gpp ja MNV oli myös merkittävä, mutta maltillinen. Nämä havainnot osoittavat, että sekä Gpp ja MNV ovat lisänä parametreja diagnosointiin ja /tai valvonnan PCa. Tämä on erittäin merkittävä, koska, kuten edellä, GSC on vertailu, joka on riippuvainen koulutusta patologi, kun MNV perustuu laskee saatu suunnittelu-pohjainen stereology.

Gpp sijaan GSC verrattiin jossa MNV saamiseksi luotettavimmat tulokset mahdollista, koska olimme valittu yleisin malli jokaiselle histologista näytettä välttää harhat tutkimalla ympäröivät pellot, kun korkein Gleason mallia käytettiin (useissa näytteissä näillä aloilla olivat pieniä). Tämän strategian, ei ollut eroa verrattaessa entisen GSC ja ISUP muutokset soveltaa 2005. Kuitenkin kun PSA korreloi GSC ja MNV, 2005 ISUP muutokset tehnyt eroa.

MNV oli aina merkittävästi eri verrattaessa säätelyalueita (ei-kasvain) alueiden kanssa, jotka sisältävät kasvaimen, joka osoittaa, että MNV on tehokas vaihtoehto arvioida PCa tapauksissa, joissa immunohistokemia ei ole käytettävissä tai lisätä luotettavuutta diagnoosin. Lisäksi MNV arvo nousi Gpp 3 Gpp 5 ja oli erilainen välillä Gpp 3 ja Gpp 5 ja välillä Gpp 4 ja Gpp 5. Korostamme, että havainto ei ollut eroa MNV välillä Gpp 3 ja Gpp 4 johtuu mahdollisesti näyte koko. Lisätutkimukset voisi selventää tätä vaiheessa tulevaisuudessa.

Perinteiset ja muutettu Gleason luokittelu molemmat korreloivat iän, seerumin PSA ja syövän osallistuminen neulabiopsiat [15]. Lisäksi oli vahva korrelaatio GSC ja kasvaimen tilavuus hyvin /väli eriytetty PCa, ja ottaen huomioon, että suhteellisen suuri määrä PSA tilavuusyksikköä kohti syövän tuotetaan, korkea PSA tiheys oli vahvin yksittäinen ennustaja kasvain undergrading. Koska korkeamman asteen kasvaimet tuottavat vähemmän PSA tilavuusyksikköä kohti, PSA tiheys menettää ennakoivaa kyky, ja muut kliinisiä havaintoja kasvaimen tilavuuden kuten kouraantuntuva tauti ja positiivisten ytimien entistä ennakoivaa [16], [17], kuten MNV voi edistää merkittävästi ennustamiseen biokemiallinen ohjaus (PSA) [18].

Tutkimukset ovat osoittaneet, että inter-tarkkailija toistettavuus Gleason pisteytysjärjestelmä on kohtuullinen [6], [7], [19]. Vaikka suuruus erimielisyyttä oli melko vaatimaton, huomattava osa koepala ja eturauhasen näytteet oli eri GSC arvotaan diagnoosi (63% varten koepala ja 72% varten eturauhasen), verrattuna määrittämä asiantuntijan arvio [20]. Meidän pitäisi huomauttaa, että esillä olevassa tutkimuksessa, materiaali tutkittu tuli radikaali prostatectomies ensimmäisenä valittavat hoitoa lokalisoitu ja paikallisesti edennyt PCa, ja GSC määrättiin vain yksi asiantuntija patologi, joka varmasti pyrkii minimoimaan harha GSC toimeksianto .

luotettavan tunnistamisen hyvin erilaistunut eturauhasen adenokarsinooma biopsianäytteistä edelleen haastava [21]. Mitata luotettavuus, yksimielisiä patologeja testattiin, ja GSC määrittämä 15 asiantuntija uropathologists viisitoista PCa biopsianäytteissä verrattiin GSC määrittämä 337 jäsentä eurooppalaisen verkoston Uropathology. Välinen sopimus asiantuntija ja jäsen oli huono (keskiarvo 71,4% vuonna GSC 6, ja keskimääräinen 56,4% vuonna GSC 7 (

P

= 0,009) [22]. Luokitus korkealaatuisesta PCa kuin GSC 4 + 3 ja GSC 8-10 johti korkeampi välisen koepala ja eturauhasen.

lisäksi on olemassa runsaasti kirjallisuutta raportoinnin eripuraisuus välillä GSC osoitettu potilailla, joilla on neulabiopsian diagnoosin jälkeen eturauhasen [9], [23]. Näin ollen on yleinen taipumus undergrade biopsianäytteissä, ja tämä aste vastaavuustaulukkoa on mahdollisesti tuettu useissa koepalan saadut ytimet (kymmenen tai useamman neulabiopsiaan sydämiä kasvattanut tarkan vastaavuuden 72%) [ ,,,0],23] tai se, että yli kolmasosa potilaista todettiin olleen undergraded perustuu niiden alkuperäiseen eturauhasen koepalan [9]. Toisaalta, yliarviointi pääsihteeristön laajennettu eturauhasen koepaloja tai tertiäärisen korkeamman Gleason kuvio tuotettuina neulabiopsian näyte, joka löytyy lähes 20% radikaalin prostatectomies, voi soveltaa yksilöiden tarpeetonta aggressiivinen hoito [8], [24]. Siksi homogeenisuus näytteiden ja raportin GSC nykyisessä tutkimuksessa on pidettävä voimassa panos luokittelua ja diagnoosi Eturauhassyövän.

On huomattava, että tässä tutkimuksessa suoritettiin näytteestä saatujen radikaali prostatectomies, ja GSC otti huomioon tekemät muutokset ISUP vuonna 2005, joka pyrki parantamaan korrelaatiota koepala ja eturauhasen. Nämä muutokset voivat olla syy joitakin eroja koskevat korrelaatio MNV ja GSC verrattaessa havainnot raportoitu aikaisemmin (ennen vuotta 2005) [13], kun histologiset näytteet otettiin neulabiopsiat, ja nykyinen havainnot.

tutkimus patofysiologisia muutoksia, jotka liittyvät ihmisen sairauksiin, joihin liittyy mutaatioita ydin- rakenne on selvitetty monia fysiologisia toimintoja ydin- rakenne ja organisaatio. Muutokset ydin- muotoja voi olla seurausta voimat soluväliaineen tai solunsisäisiä prosesseja, joiden uskotaan toimitetaan ytimen kautta solun tukirangan [25]. Koska pahanlaatuiset kasvaimet voivat muuttaa ydin- muoto ja kasvattaa sen kokoa, arvio ydinvoiman laajentumisen määrällisesti on kolmiulotteinen menetelmä on tarpeen [26].

Päivitetyt tiedot Brasilian Institute maantieteen ja tilastot ilmoittaa, että Rio de Janeiro on noin 6,32 miljoonaa ihmistä, ja sen jälkeen voimme hyväksyä, että 3160000 on miehiä. ”Pyramidi iän” Brasilian osoittaa 9,5% väestöstä miesten on yli 50-vuotiaita. Sitten, Rio de Janeiro, voimme hyväksyä, että 300200 miehet ovat yli 50-vuotiaita (joka on ikäryhmässä verrattavissa tässä tutkimuksessa eturauhassyövän).

Eturauhassyöpä Brasilian kaakkoisosassa (jos sijaitsee kaupungin Rio de Janeiro) on esiintyvyys 80,06 tapausta 100000 yksilöitä vuodessa (2014 tietojen National Cancer Institute of Brasilia). Siksi voimme arvioida 210 uutta tapausta vuodessa eturauhassyövän kaupungin Rio de Janeirossa.

Otoskoko tutkittu olevassa käsikirjoitus on rajoitus kyselyn. Kuitenkin on syytä todeta, että tutkituista tapauksista osuus noin 35% odotettua uutta tapausta yksi vuosi kaupungin Rio de Janeirossa.

Vuodesta 1985 patologeja ja tutkijat ovat tutkineet mahdollisuutta arvioida tarkoittaa tilavuus hiukkasten mielivaltaisen muotoisia [14]. Aikaisempi tutkimus osoitti yhdistyksen välillä MNV ja PSA kaksinkertaistui aika, joka korreloi positiivisesti MNV PCA käytös ja ennusteen [27], mikä viittaa MNV ennustajana PSA vajaatoimintaa potilailla, joilla on kliinisesti elimeen rajoittunut tauti hoidettu eturauhasen [28]. Havainnot Nykyisen tutkimuksen ovat tästä samaa mieltä korrelaatio MNV ja PSA-tasot sekä MNV ja Gpp. Lisäksi tutkimustulokset yhdistetään PSA ja arvioitu kasvaimen kanssa arvioihin MNV ovat merkittävästi ennustamiseen patologisen vaiheessa PCA viittaa käyttää näitä kolmea tekijää ennustaa patologinen vaiheessa PCa ennen leikkausta [29], [30].

Johtopäätökset

Tämänhetkiset tiedot kannattavat käytön MNV liittyy GSC ja PSA arvioinnissa PCa. Arvio MNV edellyttää suunnittelun lähestymistapa joidenkin panos, matematiikan ja tilastotieteen. Itse asiassa tämä voidaan pitää epäkäytännöllistä laaja käyttö rutiininomaista arviointia Eturauhassyövän jonka klassinen patologi. Kuitenkin asianmukainen tutkimus suunnitteluun, sekä nykyisin käytössä on laitteita ja ohjelmistoja morfologisia kvantifiointiin, voidaan sallia nopea ja tarkka arvio MNV lisänä parametri arvioimiseksi PCa.

tukeminen Information

Taulukko S1.

Data järjestetty laskemaan korrelaatiokerroin of Spearman: Gleason pisteet vs. eturauhasen antigeenin (PSA, ng /ml), ja keskimääräinen ydin- tilavuus (MNV, um

3) vs. PSA.

doi : 10,1371 /journal.pone.0102156.s001

(PDF) B Taulukko S2.

Data järjestetty laskemaan de korrelaatiokerroin of Spearman: keskimääräinen ydin- tilavuus (MNV, um

3) kussakin Gleason ensisijainen malli (G3, G4 tai G5) vs. eturauhasen antigeenin (PSA, ng /ml) .

doi: 10,1371 /journal.pone.0102156.s002

(PDF) B