Krooninen sairaus

tiivistelmä

tavoite

tutkia geenien tappaja-solujen immunoglobuliinin kaltaisia reseptori (KIR) ja HLA ligandin ja niiden suhteesta tulokseen metastasoituneen kolorektaalisyövän (metastasoitunutta kolorektaalisyöpää) hoidetuilla potilailla ensilinjan 5-fluorourasiilin, leukovoriinin, ja irinotekaanin (FOLFIRI).

Methods

kaikkiaan 224 metastasoitunutta kolorektaalisyöpää potilasta seulottiin KIR /HLA. Määritys KIR /HLA-yhdistelmä perustui geenin sisältöä ja variantteja. Geneettinen yhdistysten täydellinen vaste (CR), aika taudin etenemiseen (TTP) ja kokonaiseloonjääminen (OS) arvioitiin laskemalla kertoimet ja riskisuhteita. Monimuuttuja mallintaminen ennustetekijöiden covariates suoritettiin myös.

Tulokset

CR, läsnäolo KIR2DL5A, 2DS5, 2DS1, 3DS1, ja KIR3DS1 /HLA-BW4-I80 liittyi lisääntynyt CR hinnat , jossa mediaani syrjäisimpien alueiden vaihtelevat 2,1-4,3, kun taas puuttuminen KIR2DS4 ja 3DL1 liittyi lisääntynyt CR hinnat (OR 3.1). Sen jälkeen univariate analyysi, potilaat, jotka tehtiin vastaavien haltijoiden leikkaus kasvaimen puuttuminen KIR2DS5, ja läsnäolo KIR3DL1 /HLA-BW4-I80 osoittivat merkittävää parempi OS (HR 1,5-2,8). Monimuuttujamenetelmin tunnistettu parametrejä itsenäisesti liittyvät OS hoitomuoto (leikkaus, HR 2,0) ja KIR3DL1 /HLA-BW4-I80 genotyyppi (HR T-I80 2.7 ja ilman toiminnallisia KIR /HLA vuorovaikutus 1,8). Sillä TTP, ei yhdessä KIR /HLA-geenien havaittiin.

Johtopäätös

Tämä tutkimus, ensimmäistä kertaa, todisteet että genotyypityksen varten KIR-HLA pareja löytyy ennustava merkkiaineita, jotka liittyvät täydelliset vaste ja parantaa yleistä eloonjäämistä ennustaminen FOLFIRI hoitovaste metastaattisessa kolorektaalisyövässä. Nämä tulokset viittaavat rooli KIR /HLA-järjestelmä potilaiden hoitotuloksiin, ja ohjata uusia tutkimusta immunogenetiikka metastasoitunutta kolorektaalisyöpää kautta mekaaniset tutkimukset ja kliininen validointi.

Citation: De Re V, Caggiari L, De Zorzi M, Talamini R, Racanelli V, Andrea MD, et al. (2014) geneettinen monimuotoisuus KIR /HLA-järjestelmä ja tulos metastasoituneen peräsuolen syövän kemoterapiaa. PLoS ONE 9 (1): e84940. doi: 10,1371 /journal.pone.0084940

Editor: Amanda Ewart Toland, Ohio State University Medical Center, Yhdysvallat

vastaanotettu: 02 elokuu 2013; Hyväksytty: 28 marraskuu 2013; Julkaistu: 31 tammikuu 2014

Copyright: © 2014 De Re et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Työ tukivat Italian Association for Cancer Research (AIRC n.10266 ja n. 12214 Special Program Molecular Clinical Oncology, 5 x 1000). Ei rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Co-kirjailija Valli De Re on toimitusneuvosto jäsen PLoS ONE lehdessä . FI saa rojalteja käytöstä UGT1A1- geenitesti. Kirjoittajat vahvistavat, että ei ole olemassa patentteja, tuotteiden kehittämiseen tai kaupan tuotteiden julistaa merkitystä tässä artikkelissa. Ei ole muita patentteja, tuotteiden kehittämiseen tai kaupan tuotteiden julistaa. Tämä ei muuta tekijöiden noudattaminen kaikki PLoS ONE politiikan tietojen jakamista ja materiaaleja.

Johdanto

Synnynnäinen immuunijärjestelmä on ensimmäinen puolustuslinja vastauksena kasvainsolun. Natural Killer (NK) solujen suorittaa tärkeä rooli tässä vastauksena niiden kyky tappaa kasvainsoluja, tuottavat sytokiineja, ja cross-talk kanssa mukautuva järjestelmä. Vuorovaikutukset killer-solujen immunoglobuliinin kaltainen reseptorit (KIR) -reseptoreihin ja HLA (HLA) -ligandina säätelevät vasteen NK-solujen, johtaen lukuisia KIR /HLA-yhdistelmä ja erilaisia ​​NK vaikutuksia. Muuttaminen kasvainsolulyysiksestä johtuen kemoterapeuttisen-hoito voi myös osaltaan eroa NK-vaste.

Kuten muillakin yhdistelmähoitoa metastaattisessa kolorektaalisyövässä (metastasoitunutta kolorektaalisyöpää), hoidot perustuvat FOLFIRI (5-fluorourasiili, leukovoriini ja irinotekaani), jota käytetään noin 60% ensilinjan hoitoon Euroopassa [1], ovat edelleen tehottomia merkittävä osa potilaista [2]. Immunoterapia, joilla pyritään parantamaan luonnon kasvainten vastainen T-solu immuniteetin potilailla vaikuttaa pitkälle edennyt syöpä toteutetaan parhaillaan klinikalla lupaavin tuloksin, usein osoittaa synergistisen vaikutuksen kemoterapiaa [3]. Jotta voidaan optimoida terapeuttisia protokollia ja valvoa tehokkaasti tällaisten hoitojen, tunnustus tarkkaa mekanismia, jotka muuttavat toimintaa isännän immuniteetin tuloksena vaikutusta potilaiden hoitotuloksiin eivät ole täysin selvillä, voi liittyä erilaisia ​​T-solujen reseptoreihin ja immuunijärjestelmän soluja. Lisätyötä tarvitaan täyttämään jäljellä olevat puutteet tietomme.

Patologiset lavastus on ainoa ennustetekijöiden luokitusta kliinisessä käytössä valita potilaita kemoterapiaa. Geeniekspressioprofilointi, joka kuitenkin edellyttää primäärikasvain näytteitä, saattaa edistää luokitukseen ja ennusteen arvioinnissa ennustaminen paksusuolisyövän [4]. Muita tekijöitä, mieluiten helposti saatavilla, tunnistaa potilaat korkeimmalla riski uusiutumisen (ennustetekijöitä) sekä ennustamaan eniten hyötyvät todennäköisesti kemoterapiaa (ennustava tekijät) ovat hyödyllisiä parantamaan valittaessa potilaita adjuvanttihoitoa. Lisäksi uusi Response arviointiperusteet kiinteä kasvain (WHO: n kriteerien), joiden immuunijärjestelmän liittyviä vasteen kriteerit (IRRC) arvioida tuumorin vastainen vastauksia kemoterapia-aineiden, yhä johtaa arvioida paremmin syöpälääkkeitä [5] käyttäisi useammin immunoterapia ja immuuni-kemoterapiaa syöpäpotilailla [6]; [7].

Erilaisia ​​infiltroivien immuunisolujen on erilaisia ​​vaikutuksia kasvaimen etenemiseen [8]. NK-solut voivat vaikuttaa syövän etenemiseen ja voisi edustaa korvikemarkkerilta vaste isännän immuniteetin syöpäsoluja, mukaan lukien CRC [9]; [10]. NK-solujen infiltraatiota in situ havaittiin olevan vähäinen sisällä kirurgisesti resektoitiin CRC näytteitä, toisin kuin suurempia määriä NK-solujen viereisen normaalin limakalvon [11]. Kertyvät todisteet osoittavat, että yli-ilmentyminen HLA-E CRC-soluissa johtaa inhibitioon NK-solun välittämää anti-kasvain vasteen sitoutumalla CD8-T-solujen ja NK-solujen osajoukot [12].

NK-soluissa, perinteisesti pidetty osa luonnollinen immuniteetti, on myös osoitettu jakaa monia toimintoja immuniteetin [13]; [14]. Osuus on KIR /HLA vuorovaikutus signalointi NK-soluissa ei täysin tunneta [15], mutta niiden merkitys on korostetusti useat viimeaikaiset geneettiset tutkimukset, jotka ovat sidoksissa KIR /HLA-yhdistelmät lopputulokseen erilaisten sairauksien, ja jonkin verran kliinistä vastetta hoitoon, mukaan lukien yksi tässä tutkimuksessa. NK-solut edullisesti tappamaan kohdesoluja, jotka ekspressoivat vain vähän tai ei HLA-luokan I molekyylejä pinnallaan. Aktiivisuus NK-solujen säätelee tasapaino anturin signaalien kautta aktivoimalla ja estävä reseptorit [16].

Useimmat NK reseptorit näyttävät kuuluvat perheeseen tunnetaan Kirs. Ne ilmaistaan ​​NK-solujen ja pienessä määrässä T-lymfosyyttien. KIR reseptorit ovat joko estävä (pitkät (L) hännät, ts KIR2DL1) tai aktivoimalla (lyhyillä (S) hännät, ts KIR2DS1). Selvä KIR tyypillisesti vuorovaikutuksessa tietyn allotyypillä HLA-luokan I molekyyli [15]; [17]. Kukin NK-solujen voidaan ilmaista useita erilaisia ​​estävä ja /tai aktivoivat reseptoreita, jotka toimivat toisistaan ​​riippumatta. Näin ollen, on olemassa suhteellisen korkea pleiotropia ja heterogeenisuus Kirs ihmisillä. Riippumaton ilmentyminen Monimuotoinen KIR geenien ja erittäin polymorfinen HLA-ligandien ratkaisee lopullisen NK solujen toimintaa [15]; [18].

Sytostaatit voi aktivoida erilaisia ​​reittejä solukuoleman, asiakkuutta erillistä peptidi malleja HLA ristiin esittely kasvaimeen julkaissut antigeenejä sytotoksisille T-solujen, myös NK-solujen [19]. Suurempi määrä kasvaimeen liittyvän antigeenin sisäänottoa HLA-välitteisen antigeenejä esitteleviä soluja, on raportoitu antamisen jälkeen 5-FU: n [20]. Anti-kasvain vaikutuksia kemoterapian voitaisiin edelleen tehostaa NK-solun toimintojen [21] – [25].

Koska syntymässä rooli immuunijärjestelmän kiinteässä tuumoribiologiassa [26], mahdollista roolia immuuni efektorit välittämisessä hoidon tehoa [3]; [25] ja puute kliinistä tietoa roolista KIR /HLA-järjestelmä metastasoituneen kolorektaalisyövän, me pyritään: 1) luonnehtivat geneettinen profiili KIR /HLA-järjestelmä käytettäessä homogeeninen ryhmä metastasoitunutta kolorektaalisyöpää hoidetuilla potilailla FOLFIRI, ja 2 ) vaikutuksen määrittämiseksi potilaan geneettinen makeup KIR /HLA-järjestelmä hoitovaste ja selviytymistä. Tätä tarkoitusta varten olemme kehittäneet KIR /HLA pari genotyypin karakterisoimiseksi spektri NK liittyvien immuuni geenien CRC vasteena FOLFIRI hoitoa yhden ja usean analyysi. Käsittelemme täällä liittyvien tutkimusten erittäin polymorfisia KIR /HLA vuorovaikutusta painottaen miten nämä geenit voivat säädellä NK-toiminto kohti tuumorivaste ja selviytymistä käsiteltyjen-potilaista.

Methods

Potilaat ja hoito

Käytimme tulos kerättyjä tietoja aikaisemmassa tutkimuksessa, ja kelpoisuusvaatimukset ja FOLFIRI hoitoja on kuvattu aikaisemmin yksityiskohtaisesti [27] tätä tutkimusta varten valitsimme potilaita, joilla oli vaiheen IV ja toistuva CRC. Potilaita hoidettiin ensilinjan kanssa FOLFIRI vain, ja ei ole biologista hoitoja sallittiin. Potilaat arvioitavissa objektiivisista vastaus, aika taudin etenemiseen (TTP) ja kokonaiseloonjääminen (OS) oli 224.

mediaani seuranta-aika oli 21,73 kuukausi (vaihteluväli: 1,07-91,8). Hoitovasteet olivat seuraavat: täydellinen hoitovaste (CR, n = 15), osittainen vaste (PR, n = 80), vakaa tauti (SD, n = 62), ja etenevä sairaus (PD, n = 67). Tuumorivaste arvioitiin käyttäen WHO: n kriteerien kuin aiemmin raportoitu [28]. OS määriteltiin aika ensimmäisestä lääkkeen annon kuolin- tai Viimeisimmässä seurannassa. Potilaat elossa viimeisessä seurannassa sensuroitiin. TTP määriteltiin aika alkaen ensimmäisestä hoidosta sitä varhaisinta ajankohtaa syövän etenemisen tai Viimeisimmässä seurannassa. Mediaani OS 21,7 kuukautta (vaihteluväli: 1,07-91,8). TTP: n mediaani oli 8,5 kuukautta (vaihteluväli: 0,7-41,6). Potilaan ominaisuudet on esitetty taulukossa 1.

KIR ja HLA-genotyypin

DNA uutettiin verestä käyttämällä EZ1 Qiagen Italia kit kuten aikaisemmin on kuvattu [29]. Potilaat genotyypitettiin läsnäolo KIR geenien (2DL1-4, 2DL5A ja 2DL5B, 3DL1-3, 2DP1, 2DS1-3, 2DS4, 2DS5, 3DP1, ja 3DS1) käyttäen multiplex polymeraasiketjureaktiolla-sekvenssin spesifinen aluke reaktio, optimoitu laboratoriossamme [30].

korkean resoluution HLA-luokan I analyysi tehtiin PCR sekvenssi-pohjainen kirjoittamalla alukkeilla spesifisiä loci A, B ja C ja käyttö Määritä SBT (versio 3.27 b) [30]. KIR ja HLA-geenin taajuudet edustivat kuin valkoihoinen väestö [31] ja olivat verrattavissa löytyy meidän sarjassa kuin syöpä verenluovuttajien (tuloksia ei ole esitetty).

analyysi KIR-HLA Genes

KIR geeni sisältö osoittaa suurta vaihtelua, mitattuna määrä ja tyyppi geenien läsnä. Kaksi KIR haplotyypin ryhmiä on kuvattu, perustuu geenin sisällön, ja ne on nimetty A ja B [32]; [33]. A-ryhmän haplotypes on yksinkertainen ja vakio geeni sisältöä, jota edustaa geenejä, jotka koodaavat estävän reseptoreita Kirs 2DL1, 2DL3, 2DL4, 2DS4, 3DL1, 3DL2 ja 3DL3. Sen sijaan B-ryhmän haplotyyppien on enemmän vaihteleva ja suurempia geeni sisältöä, joihin geenit koodaavat erottuva estävä reseptoreita ja erilaisia ​​aktivoivia reseptoreja.

yhteenliittymät Kirs sukulaisamideillaan HLA ligandit perusteella ennustetun KIR /HLA-yhdistelmä, mukaan vakioluokitusta [34]. HLA-A, -B ja -C molekyylit pantiin 3 ryhmään (HLA-C1, C2, ja BW4), joka perustuu aminohapposekvenssien määrittämiseksi KIR-sitova epitooppi. HLA-C allotyyppeihin kanssa asparagiini asemassa 80 (HLA-C1) ovat ligandeja Kirs 2DL2, 2DL3, ja 2DS2; HLA-C allotyyppeihin kanssa lysiini asemassa 80 (HLA-C2) ovat ligandeja Kirs 2DL1 ja 2DS1. Kolmannen ryhmän, HLA-A ja -B allotyyppien kanssa BW4 epitoopin ovat ligandeja Kirs 3DL1 ja 3DS1 ja erottuvat substituutioita asemassa 77, 80, 81, 82 ja 83 C-päähän HLA luokka I a1-domeenin ; HLA-A * 03 ja * 11 ovat ligandeja KIR3DL2 ja HLA-C * 04 on ligandi KIR2DS4 [35].

Tilastollinen analyysi

kertoimet suhde (OR) ja 95%: n luottamusväli (IC) käytettiin tutkimaan yhdistyksen välillä KIR /HLA-geenien ja kasvaimen vasteen (CR, PR, SD ja PD). TTP ja OS laskettiin käyttämällä Kaplan-Meier menetelmällä, ja log-rank-testiä käytettiin testaamaan eroja alaryhmien. Coxin suhteellinen vaara regressiomalleja käytettiin laskettaessa hazard ratio (HR) ja 95% CI. Fisherin testiä ja khiin neliö analyysi suuntaus käytettiin myös testata vaikutusta Kirs ja Tapaturmien CR. Riippumattomuus geneettisen yhdistysten kasvain ja kliinisiä tekijöitä testattiin monimuuttuja mallintaminen covariates, kuten sukupuoli, ikä, kasvaimen sijainti (peräsuoli, oikea paksusuoli, vasen-paksusuoli), TNM diagnoosin, radikaaleja (resektioleikkaukselle paikallisesti uusiutunut syöpä). Tulokset katsottiin olevan tilastollisesti merkitsevä, kun p 0,05 (kaksipuolinen). Kaikki analyysit tehtiin käyttäen SAS 9.2 tilasto-ohjelmalla (SAS Institute, Inc., Cary, NC).

eettisen komitean hyväksyntä

Tutkimuksen koordinoi ja sponsoroi Centro di Riferimento Oncologico , National Cancer Institute, Aviano, Italia, accordantly julistuksen periaate. Käyttö Verinäyte keräys hyväksyttiin CRO, institutionaalisten Board: RC linea 4. Kaikki potilaat edellyttäen kirjallinen lupa geneettistä analyysiä ennen tutkimusta, tämä suostumus katsottiin riittäviksi ja hyväksynyt Institutional Review Board.

tulokset

Yhdistykset HLA /KIR kanssa täydellinen vaste hinnat

läsnäolo KIR2DL5A, 2DS5, 2DS1, 3DS1 ja KIR3DS1 /HLA-BW4-I80 liittyi parantunut CR hinnat (CR vs. PR + SD + PD) kanssa syrjäisimmille alueille vaihtelevat 2,1-4,3 (p 0,05, taulukko 2). Toisaalta, ei ole KIR2DS4 ja 3DL1 liittyi parantunut CR (OR 3,1, 95% CI ,0-,5, p 0,001, taulukko 2). KIR haplotyypin analyysi osoitti, että B /B haplotyyppi, kuten KIR2DL5A, 2DS1, 2DS5, ja 3DS1, mutta ei KIR2DS4, oli yleisempää potilailla, joilla on CR (33,3%) kuin muilla potilailla (4,8%) (OR 5,45, 1,5- 19.1, p 0,013). A /A ja A /B haplotypes sisältää ainoastaan ​​KIR2DS4 ainoana aktivoiva KIR geenin kanssa käsitteen että aktivoimiseksi KIR (Akir) geenit liittyvät yleensä vain B-ryhmän haplotyyppi, yhä useammat Akir geenejä (sukulaisamideillaan HLA carrier) liittyi parantunut CR (p 0,001, Fig. 1). Kukaan potilaista ja kasvainten ominaisuuksiin taulukossa 1 liittyi CR hinnat (p 0,05, tuloksia ei ole esitetty).

KIR geeni analyysi osoittaa suuntaus (chi potenssiin testi trendi, p 0,001) välinen kasvava määrä Akir geenejä (KIR2DS3 ja KIR2DS5; ligandin tuntematon) tai Akir /HLA-ligandi (KIR2DS1 /HLA-C2, KIR2DS2 /HLA-C1, KIR2DS4full /HLA-Cw * 04, KIR3DS1 /HLA-BW4) ja nopeudella CR.

analyysi KIR ja HLA ligandeja genotyypityksen, osoitti suurempaa CR nopeudella, kun yhdistetään KIR3DS1 HLA-BW4-I80 kuin yhdistettynä joko HLA-BW4-T80 tai HLA-BW6 (ei tunnista KIR3Ds) tai jos ilman KIR3DS1 geenin suhteen muille potilaille (PR + SD + PD) (taulukko 2). Joukossa eri KIR geenejä, aktivoivaa KIR3DS1 ja estävä KIR3DL1 eristää kuin alleelia samasta KIR3DL1 /S1 lokuksen ja KIR3DL1 ja oletetusti KIR3DS1 ovat reseptoreita samaa osajoukon HLA-B alleelit. Sisällä HLA-BW4-I80 ligandi, 3 eri yhdistelmiä KIR3DS1 ja KIR3DL1 (eli läsnäolo /poissaolo, läsnäolo /läsnäolo, poissaolo /läsnäolo, vastaavasti) olivat viittaavia suuntaus lisätä CR korko läsnäollessa KIR3DS1 (p 0,016 , Fig. 2).

NK efektoritoimintoja määritetään kumulatiivinen signaali syntyy kautta ligaatio aktivoimiseksi ja estävän NK-solujen reseptoreihin ja niiden oletetun HLA ligandin kohdesoluihin. Aktivointi (KIR3DS1) ja estävä (KIR3DL1) reseptorit ovat geenien saman lokuksen ja on samanlainen HLA-B ligandispesifisyys kanssa siten mahdollinen tasapainottava rooli NK vastausta. KIR3D reseptori voidaan tunnistaa HLA-B-molekyylit kuljettavat BW4 epitooppia (BW4-I80 ja BW4-T80-variantit), mutta ei BW6 motiivi. Kuviossa on esitetty yleisyys potilailla, joilla CR potilailla kuljettavat KIR3Ds kanssa BW4-I80 ligandia (10%) kuin potilailla, joilla on BW4-T80 (0%), tai BW6 /6 (4%). Niistä HLA-BW4-I80 ligandin läsnäolo KIR3DS1 geeni liittyy suuntauksena parantunut CR korko (Chi square testi trendi, s 0,016). + Ja – osoittaa läsnäolo tai puuttuminen geeni, vastaavasti.

Yhdistykset HLA /KIR Overall Survival ja aika taudin etenemiseen

joukossa potilasryhmät, vain resektioleikkaukselle paikallisesti uusiutunut syöpä paransi OS hinnat verrattuna potilaisiin, jotka eivät ole kirurginen resektio (mediaani 25,1 vs. 14,4 kuukautta, HR 2,1, p 0,001, kuvio 3A, taulukko 3 ja taulukko S1).

B) Kaplan-Meier käyrät yhdistyksen välillä KIR2DS5 ja käyttöjärjestelmä. OS käyrät sairastavien potilaiden KIR2DS5 (kiinteä musta viiva), tai ilman geeni (-, punainen katkoviivalla). Seuraus tämä tulos ei voitu tutkia tarkemmin, koska ligandi KIR2DS5 ei ole vielä tunnistettu. C) Kaplan-Meier käyrät yhdistyksen välillä KIR3DL1 /HLA-B ja OS. OS käyrät potilaalla on KIR3DL1 /HLA-BW4-I80 (kiinteä musta viiva), KIR3DL1 /HLA-BW4-T80 (punaisena katkoviivana), tai ilman joko yksi (- /-, vihreä katkoviiva). D) Kaplan-Meier käyrät yhdistyksen solmia kahden leikkauksen, KIR2DS5 ja KIR3DL1 /HLA ja käyttöjärjestelmä. Kyllä ja ei viitata läsnä ollessa tai ilman radikaaleja, vastaavasti. – Viittaa puuttuessa geenin. Kaplan-Meier menetelmällä, ja log-rank käytettiin testaamaan eroja alaryhmien. 0,95 LCL ja 0,95 UCL; alempi ja ylempi 95. prosenttipiste, vastaavasti; CI (95%); 95%: n luottamusväli.

joukossa genotyyppien (taulukko S1), kun läsnä on KIR2DS5 geenin (kuvio 3B) ja KIR3DL1 /HLA-BW4-I80 (kuvio 3C) liittyi parantunut OS , kun taas KIR3DL1 /HLA-BW4-T80 (HR 2,8, p 0,001) tai ei vuorovaikutuksessa KIR3DL1 reseptori (- /-) (HR 1,8, p 0,007) liittyi huonompi OS. Mediaani oli 25,1 kuukautta vuonna KIR2DS5 potilailla, 29,4 kuukautta (22,7-43,0) in KIR3DL1 /HLA-BW4-I80 potilailla, 14,7 kuukautta (11,7-22,3) in KIR3DL1 /HLA-BW4-T80 potilaista ja 21,6 kuukautta (18,6-26,7 ) potilailla, joilla ei KIR3DL1 /HLA-BW4 (joko I80 tai T80 tai puuttuminen KIR3DL1).

monimuuttuja-analyysissä myös ainoa kliininen ominaisuus liittyy OS (radikaaleja) ja KIR /HLA genotyyppiä, kirurgian ja KIR3DL1 /HLA-BW4-I80 säilytti itsenäisen vaikutus OS (HR 2,0, p 0,001 ja HR 2,7-1,8, p ,001-,006, vastaavasti) (taulukko 3). Vaikutus yhdisteen potilailla, joilla oli (tai ei) radikaaleja, jotka olivat (tai ei) KIR2DS5 geeni, joka on osittain kanssa kytkentäepätasapainossa KIR3DL1 (https://www.allelefrequencies.net/kir6010a.asp. Vierailtu 2012 ctober 17) ja KIR3DL1 /HLA-B pareittain OS on esitetty kuvassa 3D. Mediaani oli 43,0 kuukautta saaneilla potilailla leikkaus, ilman KIR2DS5 mutta KIR3DL1 /BW4-I80 + genotyypin ja 13,7 kuukautta potilailla ilman leikkausta hoitoa ja joiden genotyyppi lukien KIR2DS5 mutta ei KIR3DL1 /HLA-BW4-I80 pari geenejä.

analysoimiseksi TTP, eikä yksittäisiä KIR geenejä eikä yhdistelmiä KIR /HLA-geenien liittyivät merkittävästi TTP (p 0,05, tuloksia ei ole esitetty).

keskustelu

tutkimus ensimmäistä kertaa, on tutkinut kliinistä merkitystä KIR /HLA-geenin yhdistelmien metastasoitunutta kolorektaalisyöpää potilaiden ja FOLFIRI hoitoa. Riippuen KIR /HLA yhdistelmä, tuumorivaste ja OS erosivat potilailla, joilla oli samanlaisia ​​kliinisiä ja kasvainten ominaisuuksiin. Vain kaksi tutkimukset ovat tutkineet jakelua KIR ja HLA-geenien CRC yksilöt [36]; [37], mutta näissä tutkimuksissa analysoitiin vain KIR /HLA taajuudet syöpäpotilailla verrattuna normaaleihin verrokkeihin, joiden tarkoituksena testata vaikutusta KIR /HLA tila yksilön alttiuteen CRC.

on edistytty vuonna viime vuosina metastaattisessa kolorektaalisyövässä hoitoja, ottamalla käyttöön uusia molekyyli- kohdennettujen aineita kuten vasta-aineita VEGF tai EGFR tavoitteet; kuitenkin nopeudella pitkän eloonjääneet ovat alhaiset. NK-solut tarjoavat ensilinjan puolustuslinja pahanlaatuisiksi transformoituneiden solujen [38]; [39] ja viime aikoina todisteita vasta-aineiden käyttö estää immunosuppressiivisen reseptorin ohjelmoidun solukuoleman 1 (PD-1) reitin korostettiin keskeistä roolia reinduction isännän immuunijärjestelmän ja voimistamaan NK-soluvälitteistä sytotoksisuutta useita kasvain ennustetta [40 ]; [41] mukaan lukien CRC [3]. Lisäksi jotkut kliinisesti hyväksyttyjä terapeuttisia vasta-aineita syövän hoitoon, kuten setuksimabi ja rituksimabi, katsotaan toimivan osittain läpi liipaisu NK-solujen välittämää ADCC-aktiivisuus [42]. Kaiken kaikkiaan, vaikka keskeinen rooli NK-solujen isännän immuunivasteet ja se, että KIR /HLA-geeni-järjestelmä on tärkein reseptori järjestelmä kykenee moduloimaan NK-solujen toiminta, KIR /HLA genotyyppien kliiniseen tulokseen vuonna metastasoitunutta kolorektaalisyöpää on pääosin tutkimaton .

analyysi KIR /HLA geneettinen meikkiä metastasoitunutta kolorektaalisyöpää potilaiden ehdottaa, että läsnäolo Kirs 2DL5A, 2DS5, 2DS1 ja 3DS1 /HLA-BW4 ligandiparin ja poissaollessa KIR2DS4 ja 3DL1 (taulukko 2, Kuviot 1-2) saattavat vaikuttaa todennäköisyys saavuttaa radiologisten vastaus kemoterapian jälkeen. Näin ollen meidän sarjassa potilaat, joilla on enemmän aktivaattori haplotyyppi (esim haplotyyppi B /B), ja erityisesti KIR3DS1 /HLA-BW4-positiiviset NK-solujen puuttuessa niiden neutraloi- inhibiittorin KIR3DL1 reseptorin geeni, pitäisi olla alttiimpia sytolyyttisen aktiivisuuden ja CR kuin muut potilaat.

State of the art for KIR /HLA genotyyppejä mukaan KIR /HLA yhdistelmät estävät NK-solujen eriasteisesti [43]; [44] ja että NK-solut aktivoituvat, kun esto poistetaan, joten aktivointi on osallistuttava stimuloiva reseptorit [45]. Lisäksi laskua suuntaus NK cytolitic aktiivisuuden havaittiin vastaan ​​vastaanottajan kohdesoluja, joilla on HLA-C2 (voimakas), HLA-C1 (vaatimaton), HLA-BW4 (heikko cytolitic aktiivisuus), ja sitten ottaa puuttuvia-itse ligandin [ ,,,0],46]; [47]. Näin ollen NK-soluja, joilla on estävä KIR reseptorit, joilla on alempi aviditeetin HLA-ligandin (siten, jolla on vähentynyt inhibitorinen toiminta suhteessa muihin Kirs) ja ottaa monia aktivaattori KIR reseptorit saattaa nostaa NK-välitteisen sytolyysin kohdesoluihin. Esimerkiksi läsnäolo vahvan aktivoivan reseptorin KIR2DS1 sen sukulais HLA-C2 ligandi olivat alttiimpia tappaa HLA-C2 + solujen [48], ja tämä liittyi lisääntynyt ilman taudin etenemistä (PFS) kroonisen lymfaattisen leukemian potilailla [49 ]. Lisäksi lohkon estävän KIR /HLA vuorovaikutus on näytti vähenevän leukemiasolujen etenemisen käytettäessä

in vivo

eläinmallissa [50]. Potilailla, jotka saivat autologisia Luuytimensiirto korkean riskin neuroblastooma, ettei toiminnallisten estävän KIR /HLA yhdistelmä liittyi pienempi kuoleman- ja etenemisen [51]. Lisääntynyt NK-soluvälitteistä sytotoksista aktiivisuutta, joka on saatu estämällä estävän reseptorin PD-1 upexpressed NK-solut potilailla, joilla on useita kiinteitä kasvaimia, mukaan lukien CRC-[52] liittyi myös pysyvä syövän regressio [3]. Tuloksemme ovat siten sopusoinnussa hypoteesin, että läsnäolo aktivaattorin Kirs (eli suuri määrä aKIRs ja läsnäolo KIR3DS1 /HLA-BW4-I80, Fig. 1 ja 2) on suotuisa vaikutus kasvaimen vasteen. On tunnettua, että kemoterapia voi aiheuttaa erillisiä malleja HLA rajat esittely kasvaimeen vapautuu antigeenejä sytotoksisille T-soluihin [20]; [53], ja että kasvaimen vastainen vaikutus kemoterapian voitaisiin muuttaa NK-solujen [21]; [22]; [25]. Alassäätöä antigeenin esittelyn HLA koneet ja määrän vähenemiseen T-solujen tunkeutuminen kasvain sivusto on liittynyt huonompi ennuste [54]; [55]. Lisäksi NK solumäärää kasvain sängyt [11]; [12]; [53]; [56], on osoitettu olevan suotuisa prognosticators, myös CRC. Tuloksemme näyttävät täydentää näitä havaintoja, mikä viittaa siihen, että riippuen Joustavampi NK-solujen fenotyyppiä (lukumäärä aKIRs) ja erityiset activatory /estävää KIR /HLA parit (esim KIR3D /HLA-BW4), kasvaimen vaste voisi olla enemmän tai vähemmän tehokkaita , mikä johtaa eri määrin koon pienentäminen primaarikasvainten. Solutasolla, nämä vaikutukset voivat välittyä lisääntynyt kertyminen aktivaattori KIR reseptorien NK-solujen ja tehokkaan HLA-ligandien tuumorisoluissa parantaa NK-välitteisen kasvainimmuniteetin. Analogisesti havaintojen muissa tilanteissa, tuloksena sytolyysin voivat olla tehokkaampia, kun matalan annoksen kohdesolujen on läsnä, mutta ei ole riittävän tehokasta, kun kyseessä korkean annoksen kohdesoluja, joille synnynnäisen immuunivasteen on todennäköistä hukkua [57]. Vuoteen samoin on todennäköistä, että jotkut peptidit (uusi tai vain runsaammin) voivat esittää HLA Kiiriin aikana syövän kasvua tai jopa muokata takia metastasoituneen kolorektaalisyövän hoitoon, ja siten, että peptidit /HLA-kompleksit voivat vaikuttaa NK solun toiminto kasvaimeen [58]; [59] – [64].

Niistä ominaisuudet potilaista, vain leikkaus ups OS. Tiedot KIR ja KIR /HLA perimä yhden muuttujan analyysin tunnistettu kaksi Kirs liittyy selviytymisen aiemmin yhteydessä esiintyvistä CR; KIR2DS5 ja KIR3DL1. Jälkeen monimuuttuja verrattuna leikkauksen, vain KIR3DL1 /HLA-BW4-I80 pysyvät tilastollisesti merkittäviä, mikä osoittaa, että KIR3DL1 /HLA-BW4-I80 genotyyppi oli vahvasti ennustavan selviytymisen riippumatta leikkauksen (taulukko 3). Koska i) nykyään ligandin KIR2DS5 on tuntematon, ii). KIR2DS5 on positiivinen kytkentäepätasapainossa kanssa KIR3DL1 geenin (LD 30), iii) KIR3DL1 ja 3DS1 ovat geenien saman lokuksen, iv) KIR3D genotyypin ja kirurgia ovat riippumattomia tekijöitä (taulukko 3), arvioimme niiden vaikutuksia komposiitti KIR geenien OS Kaplan Meier käyrät aikaisemmin hoidettu yhdistetty kirurgian ja kemoterapia tai käsiteltiin vain kemoterapiaa koska leikkaus ei ilmoitettu. Tulokset osoittivat potilaalla on parempi käyttöjärjestelmä kuin toisilla (mediaani +79,4-+22,9kuukausi); paras lisääntynyt OS havaittiin, kun sekä KIR3DL1 ja 3DS1 geenejä saman lokuksen olivat läsnä HLA vastine BW4-I80 (mediaani 79,4 kuukautta); potilaat, jotka saivat kirurginen hoito tai ollut HLA-BW4-T80-geenin (2 itsenäistä tekijät) oli kaikki pahimman OS (mediaani OS 14,4 kuukautta, kuva 4). Pitäen mielessä, että CR havaittiin liittyvän entistä activatory NK-solun fenotyyppejä ja että CR liittyi lisääntynyt OS, meidän Työhypoteesina on, että inhiboiva KIR3DL1 /HLA-BW4-I80 ja puuttuminen KIR2DS5 genotyyppien löytyi liittyy lisääntynyt OS olivat tekijöitä NK-solujen osajoukko, joka on toiminnallinen potentiaalia estävää fenotyyppi, joka on tarpeen ylläpitää tautien torjunnan ja pitkittää selviytymistä. Tämä havainto on samanlaisia ​​kuin akuutin virusinfektio; todellakin, aikana, esimerkiksi akuutin ihmisen immuunikatoviruksen tyypin 1 infektiota, NK-solun laajentamiseen voidaan ensin liittyy ei erityinen laajennus aktivoimiseksi KIR ilmentävien NK-solut, joita ei kuitenkaan seuraa esiintyminen suojaavan KIR3DL1 + ilmentävät NK-solut , mutta vain, kun läsnä on niiden oletetun, HLA-BW4-I80 ligandin [65]. Silti estävä KIR HLA paria osoitettiin kriittinen rooli moduloimisessa NK-solujen toiminta aikana NK kehitys, todellakin ilmaisua ja sitoutuminen estävä reseptorien sen ligandi on välttämätöntä siirtymistä CD56

kirkas NK solut terminaalivaiheessa erilaistunut ja enemmän voimakas sytotoksinen CD56

dimNK soluihin [16]; [66] ja lisäksi estävä KIR ilmaisutapoja näkyvä rooli KIR3DL1 /BW4, edellyttää tunnustaa itse HLA aikana kypsymisen täysin toimivaa solujen sytotoksisen osaamista aineista riippuvainen solun sytotoksisuus (ADCC) [66]. Viime aikoina tulokset KIR /HLA genotyypityksen kuin lopputulos ennustajia hepatiitti C liittyvää maksasyövän tukea keskeinen rooli sytotoksisten NK-solujen, joilla on estävä KIR2DL2 /2DL3-HLA-C1 + fenotyyppiä potilailla osoittavat myönteisen tuloksen [67] sekä niillä, joilla on spontaanisti ratkaisemiseksi akuutti HCV-infektio [68]. Oletamme, että meidän tapauksissa HLA-BW4-I80 voi toimittaa kriittisiä signaaleja KIR3DL1 + NK-solujen avulla ne voivat kehittyä erittäin toimiva tappajia, jotka pystyvät vastaamaan aggressiivisesti kohdesoluihin, mikä johtaa voimakkaampi NK-solujen populaatioita [65]; [69]; [70]. Meidän data lisääntyneen CR potilailla, joilla on KIR3DS1 ja sitten OS, potilailla, joilla on KIR3DS1 ja /tai KIR3DS1 plus KIR3DL1 geenejä, jotka ovat vuorovaikutuksessa niiden HLA-BW4-I80 ligandi tukee tätä hypoteesia (kuvio 4).

OS Kaplan-Meierin eloonjäämiskäyrien (katkaistu 80 kuukautta) potilaista kerrostunut potilailla tunnistettuihin parempi (A tekijät) ja huonompi (B tekijät) prognostisten geeniyhdistelmän ja leikkaushoitoa.

Lisäksi todisteita geneettisistä assosiaatiotutkimuksiin tukee biologista merkitystä paitsi vuorovaikutuksen KIR3DL1 HLA-BW4 mutta myös toiminnallinen vaihtelu nähdään eri KIR3DL1 ja KIR3DS1 ja HLA allotyyppeihin (tarkistetaan [71]). Tässä kilpailussa aktivoiva (KIR3DS1) ja estävä (KIR3DL1) reseptorit voivat tunnistaa eri joukko HLA-molekyylien (HLA-BW4-I80, HLA-BW4-T80) ja /tai eri HLA-peptidi-kompleksin sitoutuneena [36]; [59]. Jyrkän vähenemisen HLA-T80-molekyylin, jonka tiedetään olevan pienempi affiniteetti KIR3D reseptoreihin, potilaiden tuloksista meidän sarjassa, on osoitti kuvissa 3C.

Lopuksi, mikä väheneminen määrä kohdesoluja, sopusoinnussa aikaisempia havaintoja, KIR reseptoreihin ja HLA-ligandit voivat olla tehokkaampia, kun luontainen immuunivaste ei todennäköisesti hukkua [57], kirurgian näyttää itsenäinen vaikutus KIR /HLA-genotyyppi OS potilaista. KIR3DL1 /BW4-I80 genotyyppi johtaa lisääntyneeseen OS potilaan kun radikaaleja oli tehty, kun läsnä on suuri massa kasvainsolujen ei käsitellä kirurgian litistää edullinen vaikutus KIR /HLA-genotyyppi OS.

Tämä on tietääksemme ensimmäinen tutkimus käsitellään merkitystä KIR genotyypin ennuste metastasoitunutta kolorektaalisyöpää käsitelty FOLFIRI rykmentti.