Krooninen sairaus

tiivistelmä

Useita linjoja todisteet viittaavat siihen, että suuri osa haimasyövän potilaat kärsivät joko hyperglykemiaan tai diabetes, jotka molemmat on tunnusomaista korkea verensokeri. Kuitenkin taustalla biologinen mekanismi tämä ilmiö on juuri tunneta. Esillä olevassa tutkimuksessa osoitimme, että proliferatiivinen kyky kahden ihmisen haimasyövän solulinjoissa, BxPC-3 ja Panc-1, oli voimistuvan runsaasti glukoosia pitoisuutena-riippuvaisella tavalla. Lisäksi edistävää vaikutusta korkea glukoosipitoisuus EGF transkription ja erityksen, mutta ei sen reseptorien nämä PC solulinjoissa havaittiin käyttämällä EGF-neutraloivat vasta-aineella ja RT-PCR. Lisäksi, EGFR-transaktivaatiota indusoi korkeita glukoositasoja pitoisuudesta ja ajasta riippuvia tavoin PC-soluissa, kun läsnä on EGF-neutraloiva vasta-aine. Nämä tulokset viittaavat siihen, että suuri glukoosipitoisuus edistää haimasyöpä solujen lisääntymistä vastaan ​​käynnistämällä EGR ilmaisun ja transaktivaatio EGFR. Meidän tulokset voivat antaa uutta tietoa välisiä yhteyksiä korkean glukoosin taso ja PC kannalta molekyylimekanismin ja paljastavat uusia terapeuttisia strategia PC potilaille, jotka samanaikaisesti kärsivät joko diabetes tai hyperglykemian.

Citation: Han L, Ma Q, Li J, Liu H, Li W, Ma G, et ai. (2011) Korkea glukoosi Edistää Haimasyöpä Cell Proliferation kautta induktio EGR Expression ja transaktivointi EGFR. PLoS ONE 6 (11): e27074. doi: 10,1371 /journal.pone.0027074

Editor: Xin-Yuan Guan, The University of Hong Kong, Kiina

vastaanotettu: 07 heinäkuu 2011; Hyväksytty: 09 lokakuu 2011; Julkaistu: 08 marraskuu 2011

Copyright: © 2011 Han et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tämä tutkimus tukivat avustusta National Natural Tiedesäätiö of China (No.81172360 (ja QM), No.30900705 (JL)), joka on 13115 suurhanke Shaanxin maakunnan 2010ZDKG-49 (ja QM), ND EPSCoR (EW ), ja Pilottihanke Grant (EW) Centers of Biomedical Research Excellence (COBRE) myöntää NIH P20 RR020151 National Center for Research Resources (NCRR). NCRR on osa National Institutes of Health (NIH). Sisältö Tämän raportin ovat yksinomaan vastuulla kirjoittajan omia eivätkä välttämättä edusta virallista kantaa NIH tai NCRR. Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Diabetes ja therioma tuntevat sairauksia, jotka valtavasti vaikuttaa ihmisten terveyteen kaikkialla maailmassa. Epidemiologiset todisteet osoittavat, että potilailla, joilla on diabetes ovat huomattavasti suurempi riski sairastua monenlaisia ​​syöpiä, erityisesti syövät haima, rinta, maksa, ruokatorven, ja kaksoispisteitä [1]. Haima on mukana sekä diabetes ja haimasyöpä. Diabetes on tyypillisesti jaettu kahteen alatyyppiin, tyypin 1 ja tyypin 2; Näiden, tyypin 2 diabeteksen monia samoja riskitekijöitä, joilla on syöpä. Tuore tutkimus on osoittanut, että noin 80% potilaista, joilla on haimasyöpä (PC) kärsivät joko hyperglykemiaan tai diabetes, jotka molemmat voidaan havaita presymptomaattisten vaiheessa PC [2]. Syöpäpotilaat diabetes ovat pääasiassa tyypin 2 luonnossa [3]. Tietääksemme harvoissa tutkimuksissa on tutkittu välinen yhteys syövän ja tyypin 1 diabetes. Lisäksi ei ole yksimielisyyttä toistaiseksi koskien kausaalista suhdetta diabetes ja PC koska luonne yhdistyksen uskotaan olevan monimutkainen. Kun otetaan huomioon diabeteksen ollessa liittyy lisääntynyt riski PC, on tosiasia, että suuri määrä PC potilaat kärsivät kohonneesta glukoosipitoisuutta. Kun verensokeri potilailla, joilla on PC on hyvin hallinnassa, potilaan elinaika voi pidentyä, mikä viittaa siihen, että suuri glukoosipitoisuus voi suoraan edistää PC etenemistä [4]. Meidän tuore tutkimus paljasti, että korkeat glukoosipitoisuus edistetään solujen lisääntymistä säätelemällä ilmentymisen glial cell line-hermokasvutekijä (GDNF) ja RET PC-soluissa [5]. Toisessa tutkimuksessa osoitimme, että hyperglykemia, yhteinen sekoittavia tekijä liittyy PC, voi edistää hermoa hyökkäys [6]. Kuitenkin mekanismia tämä prosessi ei ole vielä täysin ymmärretty.

epidermaalisen kasvutekijän (EGF) on alhaisen molekyylipainon (Mr = 6045), polypeptidiä, joka tuottaa hyperproliferaatio epidermaalinen kudosten, kun niitä annetaan eläimille [7]. PC, erilaisia ​​kasvutekijöitä ilmaistaan ​​korkealla tasolla. Yliekspressio EGF ja /tai TGF-α ja EGFR useimmissa PC-soluissa on keskeinen rooli PC solujen kasvuun [8]. Samanaikainen esiintyminen EGFR ja sen ligandin, EGF, liittyy parannettu kasvaimen aggressiivisuus ja lyhyempi elinaika [9]. Biologisten toimintojen syöpäsolujen ovat huomattavasti tukahdutetaan kun tiettyjä salpaajien estävät EGFR fosforylaatiota. EGR-EGFR-reitin on hiljattain löydetty keskeiseksi terapeuttinen tavoite keuhkosyöpä. Ei ole kuitenkaan mitään tutkimusta siitä, ovatko glukoosipitoisuuksien vaikuttaa ilmaus EGR ja EGFR PC.

Sen lisäksi tehtävä sitoa EGF, EGFR palvelee keskeinen rooli keskeisenä muuntimen heterologisia merkinantojärjestelmää kuin seurausta sen transaktivaation [10]. Transaktivaatiota EGFR monenlaiset ärsykkeet, kuten G-proteiini-reseptorien, sytokiinien tai solujen stressiä, tarjoaa mekanismin EGFR yhdistää nämä solunulkoisia signaaleja ja toimii rele asemalta transkription koneita. Suuri glukoosipitoisuus on äskettäin osoitettu transaktivoimaan EGFR munuaissairaus [11]. Kuitenkin onko transaktivaatiota EGFR tapahtuu PC ei ole selvä.

tutkimaan, kuinka suuri glukoosipitoisuus edistää proliferaatiota PC-solujen, tutkimme solujen lisääntymistä ja ilmentymistä sekä EGF ja EGFR vastauksena yhä glukoosipitoisuuksien PC-solut. Seulonnan avulla kaksi eri erilaistumisen PC solujen BxPC-3 (korkea eriyttäminen) ja Panc-1 (matala erilaistuminen) olivat valitsi tutkimuksessa. Lisäksi tutkimme mahdollisuutta EGFR transaktivaation PC, joka osallistuu leviämisen PC soluja.

Materiaalit ja menetelmät

Soluviljely

Ihmisen PC soluja BxPC-3 ja Pancin-1 hankittiin American Tissue Type Collection ([ATCC], USA). Molemmat solulinjat viljeltiin Dulbeccon modifioidussa Eaglen väliaineessa (DMEM) (Life Technologies, USA), johon oli lisätty 10% lämpöinaktivoitua naudan sikiön seerumia (FBS), ja inkuboitiin 37 ° C: ssa kostutetussa ilmakehässä, jossa 5% CO

2 ilmassa. Solut altistettiin elatusaineessa, jossa glukoosipitoisuus vaihtelee 5,5-50 mM: ssa 12 h, 24 h tai 48 h tutkimaan vaikutusta glukoosipitoisuuden.

Soluproliferaatiomääritys

BxPC-3 ja Panc-1-solut ympättiin 96-kuoppaisille kudosviljelylevyille tiheydellä 5,000-10,000 solua per kuoppa 24 h ennen seerumin nälkään. Sen jälkeen, kun seerumistarvaatio 24 tuntia, soluja viljeltiin DMEM: ssä, jossa glukoosin vaihtelevat 5,5-50 mM 37 ° C: ssa. 12 tunnin kuluttua, 24 h tai 48 h, väliaine poistettiin, ja MTT-reagenssia (3- (4, 5-dimetyylitiatsol-2-yyli) -2, 5-difenyylitetratsoliumbromidi) lisättiin jokaiseen kuoppaan. Kun oli inkuboitu 37 ° C: ssa 4 h, lisättiin 150 ui DMSO: ta lisättiin soluihin. Optiset tiheydet (OD) 490 nm: ssä mitattiin mikrolevynlukijaa käyttäen (BIO-TEC Inc, VA). Lisääntyminen korko määriteltiin OD (solua levy) /OD (tyhjä levy).

Immunofluoresenssikoe

Solut kiinnitettiin 4% paraformaldehydillä ja sitten altistettiin 3% H

2O

2 10 minuutin ajan endogeenisen peroksidaasin salpaamiseksi. Soluja inkuboitiin nonimmune esto seerumissa 15 min estää epäspesifisen immunoglobuliini-sitoutumiskohtiin, ja sitten niitä inkuboitiin kanin anti-EGF-polyklonaalista vasta-ainetta (Sigma-Aldrich Inc.) yön yli 4 ° C: ssa. PBS-pesun jälkeen 3 kertaa, soluja inkuboitiin fluoreseiini-isotiosyanaatti (FITC) -konjugoitu vuohen anti-Armenian hamsterin IgG: tä (Jackson Immuno Research) 1 h huoneen lämpötilassa pimiössä. Kun oli pesty PBS: llä 5 minuutin ajan ja seerumi-DMEM: ssä vielä 5 min, solut asennettu fluoromount-G (Southern Biotech). Negatiivisena kontrollina, ensisijainen vasta-aine, joka on substituoitu vasta-aineen laimennusainetta.

Transcription-polymeraasiketjureaktio (RT-PCR) B

Kokonais-RNA PC-solujen uutettiin käyttäen Fastgen200 Kit RNA: n eristys järjestelmä (Fastgen, Shanghai, Kiina) mukaan valmistajan protokollaa. Kokonais-RNA käänteiskopioitu cDNA käyttäen Fermentas RevertAid ™ Kit (MBI Fermentas, Kanada). EGF PCR suoritettiin käyttäen yksi sykli 94 ° C 3 min, jota seurasi 35 sykliä 94 ° C 30 s, 60 ° C: ssa 30 s, ja 72 ° C: ssa 35 s. EGFR ja β-aktiini monistettiin seuraavasti: denaturoinnin jälkeen 94 ° C: ssa 3 min, 35 sykliä 94 ° C 30 s, 58 ° C: ssa 30 s, ja 72 ° C: ssa 35 s käytettiin. Näytteet ajettiin kolmena kappaleena, ja koe toistettiin kolme kertaa. Geenien ilmentyminen kvantifioitiin normalisoinnin P-aktiini. Alukesekvenssit olivat seuraavat:

β-aktiini-F: 5′-ATCGTGCGTGACATTAAGGAGAAG-3 ’.

β-aktiini-R: 5′-AGGAAGAAGGCTGGAAGAGTG-3′.

EGFR-F: 5′-GGTGGCTGGTTATGTCCTCATTG-3 ’.

EGFR-R: 5′- AGTTTCTGGCAGTTCTCCTCTCC-3′.

EGF-F: 5′-TGTCTGCGTGGTGGTGCTTG-3 ’ .

EGF-R: 5′-CTGCGACTCCTCACATCTCTGC-3 ’.

Western blotting

proteiinit erotettiin 10% SDS-PAGE-geeleissä ja siirrettiin polyvinyli- dimembraaneille. Membraanit blokattiin 10% rasvatonta maitoa 2 tuntia huoneenlämpötilassa, ja sitten niitä inkuboitiin kanin anti-ihmis-vasta-aineita EGF: n tai EGFR (Sigma-Aldrich Inc.) tai p-EGFR (Cell Signaling), yön yli 4 ° C: ssa. Pesun jälkeen 3 kertaa, blotteja inkuboitiin vuohen anti-kani-peroksidaasi-konjugoidun sekundaarisen vasta-aineen kanssa 1 tunnin ajan huoneenlämpötilassa. Spesifinen sitoutuminen detektoitiin tehostetun kemiluminesenssin järjestelmän (Sigma-Aldrich Inc.).

Tilastollinen analyysi

Tilastollinen analyysi suoritettiin SPSS-ohjelmistolla (version16.0, SPSS Inc. Chicago, USA) . Kaikki tiedot esitetään keskiarvona ± keskihajonta (SD). Useita ryhmän vertailut saavutettiin yksisuuntaisella varianssianalyysillä (ANOVA), jota seurasi Bonferronin post hoc testi.

P

0,05 katsottiin tilastollisesti merkitsevä. Kaikki kokeet toistettiin toisistaan ​​riippumatta vähintään kolme kertaa.

Tulokset

korkea glukoosi edistää proliferaatiota PC-solujen

vaikutuksen tutkimiseksi glukoositasojen solujen kasvuun, soluja inkuboitiin sarjassa kasvaa vähitellen glukoosipitoisuuksien 12 h, 24 h, ja 48 h. In BxPC-3-soluissa ja Panc-1-solut, solujen proliferaatio nostettiin annoksesta riippuvalla tavalla, kun glukoosikonsentraatio on 5,5 mM (kontrollina), 25 mM ja 50 mM, 12 h, 24 h, 48 h , vastaavasti (

p

0,05) (Fig. 1A ja kuvio. 1 B).

Solut altistettiin elatusaineessa, jossa glukoosipitoisuus vaihtelee 5,5-50 mM 12, 24, tai 48 h. MTT-määritys analysoitiin leviämisen hinnat (5,5 mM kontrollina). (A, B) esittää leviämisen hinnat, jotka vastaavat eri glukoosin pitoisuudet BxPC-3 ja Panc-1-soluja. (C, D) esittää leviämisen hinnat, jotka vastaavat eri glukoosin pitoisuudet BxPC-3 ja Panc-1-soluja käsiteltiin EGF-neutraloivien vasta-aineiden (

* p

0,05 verrattuna ryhmään 5,5 mM glukoosia;

# p

0,05 verrattuna ryhmään 25 mM glukoosia; n = 8 ryhmää kohti). (E, F) esittää vertailun leviämisen hinnat ennen ja jälkeen käsittelemällä EGF-neutraloivan vasta-aineen kanssa eri glukoosipitoisuuksien BxPC-3 ja Panc-1-solut ajanhetkellä 24 h (

* p

0,05 verrattuna ryhmään ilman EGF neutraloiva vasta-aine).

Selvitimme soluproliferaation nopeus käsittelyn jälkeen EGF-neutraloiva vasta-aine [12]. Kuten on esitetty kuviossa 1C ja 1 D, lisääntynyt solujen kasvua BxPC-3 ja Panc-1-soluja käsiteltiin EGF-neutraloivien vasta-aineiden havaittiin vasteena glukoosin pitoisuuksina 5,5 mM 50 mM (

p

0,05). Muutokset välillä 5,5 ja 25 mM olivat erityisen merkittävät (Fig. 3A ja 3B). Ilmaisulla EGFR mRNA säilyy vakaana riippumatta glukoosipitoisuuden tai aikapisteen (

p

0,05) (tuloksia ei ole esitetty).

Ilmaisu taso EGF mRNA vähitellen vastauksena yhä glukoosi pitoisuuksia (5,5 ja 50 mM) viljelyväliaineessa (5,5 mM kontrollina) (

* p

0,05 verrattuna ryhmään 5,5 mM glukoosia;

# p

0,05 verrattuna ryhmään 25 mM glukoosia; n = 8 ryhmää kohti). Muutos oli erityisen merkittävää vuosien 5,5 ja 25 mM glukoosia. Ilmaisulla EGFR mRNA ylläpidetään tasaista pysyi ennallaan (

p

0,05). (A, B) esittää EGF-mRNA: n ekspressiota BxPC-3 ja Panc-1-solut; (C, D) esittää EGF-proteiinin ekspressiota BxPC-3 ja Panc-1-soluissa.

proteiinin ekspressiotasot EGF: n ja EGFR BxPC-3 ja Panc-1-solut määritettiin Western-blottauksella (Fig. 3), ja tulokset olivat yhdenmukaiset RT-PCR kokeita (

p

0,05) (Fig. 3C ja 3D). On tunnettua, että EGF, olennainen kasvutekijä, kiinnostavuus kriittinen mitogeenisestä vaikutus sekä ei-pahanlaatuisia ja pahanlaatuisia soluja [13]. Siksi perustuu havaintomme, me selvää, että vaikutusmekanismi, jolla korkea glukoosi kykenee sen vaikutukset PC soluissa voisi kautta voimistumista EGR ilmaisun.

Transaktivointimääritys EGFR aiheuttama korkea glukoosi

aktiivinen tila EGFR arvioitiin tason fosforylaation EGFR. Sen lisäksi, että EGF aktivoimalla EGFR, muut tekijät, kuten HB-EGF, Ang II, ja aldosteronin, tiedetään transaktivoimaan EGFR [14], [15], [16]. Tässä tutkimuksessa olemme päättäneet, että suuri glukoosipitoisuus on myös tekijöitä, jotka voivat aiheuttaa transaktivaatiota EGFR. Täysin poistaa EGF, soluja käsiteltiin 1 ug /ml EGF-neutraloivan vasta-aineen, ennen kuin glukoosin käsittelyä. Kun BxPC-3 ja Panc-1-soluja viljeltiin alustassa, joka sisälsi 25 mM glukoosia, fosforylaation taso EGFR vähitellen kasvanut, on aika riippuvaisella tavalla (10 min, 30 min, 60 min, 6 h, 12 h, 24 h ) (

p

0,05) (Fig. 4). Kontrollina, fosforylaatio tasot soluja havaittiin, kun läsnä oli 5,5 mM glukoosia. Taso EGFR fosforylaation 5,5 mM glukoosi oli matalampi kuin 25 mM glukoosia ehdon ajasta riippuvalla tavalla (10 min, 30 min, ja 60 min) (Fig. 4A ja 4B).

EGF- neutraloiva vasta-aine (1 ug /ml) lisättiin soluihin ennen korkean glukoosin käsittelyä. Datan p-EGFR% on peräisin suhde p-EGFR ja EGFR. Erot fosforylaatio tasot olivat erillisiä välillä 5,5 mM ja 25 mM glukoosia. Fosforylointireaktio taso vastauksena 25 mM glukoosia lisääntynyt nopeasti BxPC-3 ja Panc-1-solut (Fig. 4). Fosforylaation taso vastauksena 5,5 mM glukoosi-pitoisuus oli lähes mahdoton havaita (10 min, 30 min, ja 60 min); se nousi hitaasti, mutta se oli heikko, vuonna BxPC-3 ja Panc-1-soluissa (kuvio. 4A ja 4B).

Keskustelu

Tässä tutkimuksessa osoitimme, että leviämisen BxPC-3 ja Panc-1-soluissa vaikutti eri glukoosin konsentraatiosta riippuvaisella tavalla. Olemme myös osoittaneet vaikutuksen glukoosipitoisuutta EGR ja sen reseptoreihin ihmisen PC solulinjoissa. Lisäksi olemme havainneet, että suuria määriä glukoosin indusoi merkittävää kasvua EGF transkription ja eritystä, mutta ei muuttanut ilmaus EGFR. Lisäksi havaitsimme, että korkean glukoosin aiheuttama EGFR transaktivaatiota on pitoisuudesta ja ajasta riippuva tavalla BxPC-3 ja Panc-1-solujen läsnä ollessa EGF-neutraloivan vasta-aineen.

PC on kaikkein tuhoisimpia syövät; noin 75% potilaista kuolee 1 vuoden kuluessa diagnoosin, ja vain 5% tai vähemmän hengissä 5 vuotta [17]. Tästä johtuen huonoon ennusteeseen, tunnistaminen muunneltavissa riskitekijöitä PC on elintärkeää. Tällä hetkellä on olemassa näyttöä siitä, että diabetes ja hyperglykemia saattaa olla mukana etenemistä haimasyövän. Vaikka pitkäaikainen diabetes on hyväksytty riskitekijä PC, tuoreessa raportissa paljasti, että diabetes voi johtua tietokoneeseen ja että tietokone on diabetogeeninen tila [2]. Tällä hetkellä taustalla välinen syy diabetes ja PC ei ole saavuttanut yksimielisyyttä. Tutkimuksessamme glukoosipitoisuus voi olla tärkeä syy-yhteydessä diabetes ja PC hyperglykemiana esiintyy kasvaimen mikroympäristössä [1], [18], olemme tutkineet vaikutuksen suuri glukoosipitoisuus soluproliferaatioon ja tutkitaan mahdollisia mekanismi.

tulokset osoittavat, että korkea glukoosi (25, 50 mM) voisi lisätä merkittävästi leviämisen PC-solujen verrattuna alhainen glukoosin (5,5 mM). Stimuloiva vaikutus solujen lisääntymiseen PC voi tapahtua nopeuttaa solusyklin etenemisen, kuten tapahtuu rotan sileän lihaksen soluissa ja ihmisen rintasyövän solujen [19], [20]. Tämä korkea glukoosi indusoi EGF ilmaisu viittaa on koulutusjakson proliferaatiota glukoosin stimulaatiota. Kuitenkin, kun solut esikäsiteltiin EGF-neutraloivien vasta-aineiden, lisäys proliferaation vasteena glukoosille vielä tapahtunut (Fig. 1 C ja 1 D). Nämä tiedot osoittavat, että suuri glukoosipitoisuus saattaa edistää soluproliferaatiota kautta väyliä lukuun ottamatta EGR. Verrattaessa leviämisen hinnat solujen kanssa tai ilman EGF-neutraloivien vasta-aineiden käsittely, lievä lasku solujen lisääntymisen havaittiin, kun läsnä oli EGF-neutraloivien vasta-aineiden on 5,5 ja 25 mM glukoosia. Merkittävät erot olivat ilmeisiä 50 mM glukoosia (Fig. 1 E ja 1 F). Näin ollen EGF voi olla osittainen rooli, sen sijaan, että ainoa asema, että vaikutus on alhainen (5,5 mM) tai korkea glukoosi (25 mM) soluproliferaatioon. Lisäksi kun soluja viljeltiin runsaasti glukoosia (50 mM), EGF saattaa olla tärkeämpi rooli solujen lisääntymisen stimuloituminen kuin pienemmillä glukoosipitoisuuksien.

EGF indusoi liikakasvuun epidermaalinen kudosten ja parantaa kasvain edistämällä toimiin, kuten lisääntymistä ja etäpesäkkeiden etenemisen aikana syöpä. Siksi EGF ja EGFR ovat olleet eturintamassa signaloinnin tutkimus- ja ovat olleet tavoitteita kehitettäessä hoitomuotoja [9]. EGF ja EGFR ilmentyy laajasti pahanlaatuisten syöpien, kuten PC-solut. Tässä tutkimuksessa olemme päättäneet, että vaikutukset runsaasti glukoosia soluproliferaatioon kautta tapahtui säätelyyn EGR ja EGFR mRNA ja proteiini tasoilla PC. Havaitsimme, että yksi seuraus suuri glukoosipitoisuus oli voimistunutta ilmentymistä EGF (Fig. 3), joka on erittäin herkkä glukoosipitoisuuden. Toisin kuin sen ligandin, EGFR tuskin vaikutti suuri glukoosipitoisuus. Tuloksemme sekaantunut EGF mahdollisena tekijänä vaikutus korkean glukoosin soluproliferaatioon, mutta se tuskin on ollut ainoa rooli tässä tapauksessa, koska muut solun tekijöitä, kuten GDNF ja RET [5], ja jopa tuntemattomia olosuhteet /tekijät, voisi tuoda myönteisiä vaikutuksia vastauksena runsaasti glukoosia. Selkeä suhde diabetes ja PC sitten vielä lisätutkimuksia.

Warburg vaikutus, joka kuvaa, että syöpäsolut mieluummin Glykolyysivaiheen yli oksidatiivisen fosforylaation tuottaa ATP, että syöpäsolut ovat korkeammat aineenvaihduntaa sitoutumalla enemmän glukoosi verrattuna normaaleihin soluihin [21]. Muutokset glukoosin kulutusta ja biosynteettisen aktiivisuuden aminohappoja, lipidejä ja nukleotidit ovat metabolisia muutoksia yllä soluproliferaation syöpäsoluissa [22]. Oksidatiivisen stressin on tärkeä rooli in välisen yhteyden Warburg vaikutus ja syöpäsolujen [23]. Lisäksi jotkut tutkijat huomasivat, että irrotuksen aikana Warburg vaikutus syöpään saattaa vähentää syöpäsolujen lisääntymistä [21]. Joten Warburg vaikutus syöpäsoluissa ehkä tarjota osittain ymmärrettävää verkon välillä glukoosin ja PC.

EGFR transactivation kautta G-proteiiniin kytkeytynyt reseptori (GPCR) agonistit, kuten Ang II, aldosteronin [14], [15], p-reseptorien [16], ja trombiinin [24], on myös erityisen hyvin tutkittu. Korkea glukoosipitoisuus on äskettäin osoitettu transaktivoimaan EGFR hyvänlaatuisia sairauksia [11]. Transaktivaatio EGFR korkean glukoosin havaittiin PC soluissa tutkimuksessamme. Glukoosipitoisuus saattaa olla merkittävä syy-yhteydessä diabetes ja PC. Käytimme EGF-neutraloivien vasta-aineiden inhiboivan vaikutuksen EGR EGFR aktivointia. Tulokset osoittivat, että fosforylaatiota taso EGFR lisääntyi merkittävästi ja jopa aikaisemmin esiintynyt, kun solut altistettiin korkean glukoosin (Fig. 4). Esillä olevassa tutkimuksessa osoitimme, transaktivaatiota EGFR korkean glukoosin PC-soluissa, mutta ei tutkittu sisäinen mekanismi transaktivaation. Varhainen tutkimus osoitti, että GPCR: ien voisi lisätä metalloproteinaasien, joka indusoi pilkkominen EGF-kaltaisen ligandin esiasteista, mikä johtaa fosforylaatioon EGFR [25]. On myös ehdotettu, että EGFR signalointi soittaa keskeinen rooli syövän synnyssä ja etenemisessä [26]. Siksi kasvua ja selviytymistä syöpäsolujen näyttävät yllä verkosto reseptorien /ligandien EGF-perheen. Olemme selvää, että EGFR-transaktivaation voi olla tärkein tie indusoida soluproliferaatiota vasteena runsaasti glukoosia. Transaktivaatiota EGFR on tärkeä osa syövän etenemisen, vaikka prosessi on monimutkainen ja vielä ole täysin ymmärretty. On todennäköistä, että EGFR on keskeinen osa solusignaalitransduktion, ja se aiheuttaa aktivoitumisen ras /raf /MEK /MAPK-reitin [27], [28], [29] ja PI3K [30]. Kuinka suuri glukoosipitoisuus vaikuttaa suhteellisen signalointireitille EGFR ei vielä täysin ymmärretä, ja lisätutkimuksia tarvitaan.

Äskettäin Ke-Ping Xu et al. kertoi, että suuri glukoosipitoisuus heikentynyt EGFR-fosfatidyyli 3-kinaasi /AKT, johtaen viivästyneeseen sarveiskalvon epiteelin haavojen paranemista [31]. Opinnoissaan, suuri glukoosipitoisuus vähennetään fosforylaatio EGFR todennäköisesti läpi reaktiivisia happiradikaaleja (ROS). Tämä tulos näyttää olevan vastoin meidän. Suhde korkea glukoosi ja sairauksia on melko monimutkainen. Korkea glukoosi on eri toimien erilaisia ​​kohde-elimissä. Esimerkiksi korkea glukoosi indusoi solujen kasvua tai liikakasvun haimasyövän [5], rintasyövän [19] ja mesangiumsoluissa [11], [32], mutta vähentää solujen kasvua sarveiskalvon [31] ja eturauhassyövän [33]. Lisäksi mekanismi korkean glukoosin fosforylaatiota EGFR on epäselvä ja monimutkainen. Diabeettisen keratopatiaa, ROS on merkittävä ja merkittävä tekijä aikana runsaasti glukoosia heikentäen fosforylaatiota EGFR lisäksi antioksidantteja ja EGFR ligandit pulaa eivät ole huolimaton tekijöitä [31]. Samaan aikaan, hepariinia sitovat EGF: n kaltainen kasvutekijä (HB-EGF), josta puuttuu sarveiskalvon, voi olla tärkeä rooli fosforylaatiota EGFR korkean glukoosin [31], [32].

Johtopäätös

Tuloksemme viittaavat siihen uuden keinon tutkia kuinka korkeita glukoosin voi myötävaikuttaa PC etenemiseen. Tämä tutkimus voi edustaa paradigman muutos suhdetta diabetes ja PC. Meidän tutkimuksessa todettiin, että EGF voi olla osittainen rooli sijasta ainoana rooli, että vaikutus suuri glukoosipitoisuus soluproliferaatioon. Lisäksi osoitimme, että suuri glukoosipitoisuus transaktivoi EGFR PC soluissa. Tämä tulos kertoo PC potilasta merkityksen säilyttäminen vakaana veren glukoosin ja kehottaa tutkia taustalla olevien mekanismien heikkenevä vaikutuksista korkean glukoosin kaksi hankala sairaudet.

Kiitokset

Haluamme laajentaa kiitos tohtori Fengfei Wang (North Dakota State University) hänen harkittuja käsittelyyn käsikirjoituksen.