Krooninen sairaus

tiivistelmä

Background

Kaksi polymorfismien, -260C /T ja -651C /T,

CD14

geeni on osallisena syöpäalttiuteen. Kuitenkin tulokset ovat edelleen epäselviä. Tämä meta-analyysi, jonka tarkoituksena tutkia yhdistyksen kahden polymorfismien ja syöpäriskiä.

Methods

Kaikki kelvolliset tapausverrokkitutkimukset julkaistu jopa maaliskuu 2014 tunnistettiin etsimällä PubMed, Web of Science, CNKI ja Wanfang tietokantaan. Yhdistettiin kerroinsuhde (OR), jossa 95%: n luottamusväli (CI) käytettiin käsiksi vahvuutena yhdistyksen kiinteä- tai random-vaikutusten mallia.

Tulokset

17 tapausverrokkitutkimukset neljästätoista artikkelia mukana. Niistä oli 17 tutkimusta (4198 tapausta ja 4194 tarkastukset) ja -260C /T-polymorfismi ja kolmessa tutkimuksessa (832 tapausta ja 1190 tarkastukset) ja -651C /T-polymorfismi. Kaiken kaikkiaan ei ole merkittävää yhdistysten välillä polymorfismit

CD14

geeni ja syöpäriskiä löytynyt. Kun stratifioitu etnisyys, syövän tyyppi ja lähde ohjaus, samanlaiset tulokset havaittiin joukossa. Lisäksi edelleen alaryhmiin analyysi

Helicobacter pylori

(

H. Pylori

) infektiotilanteesta ja kasvaimen sijainnista mahasyövässä alaryhmässä, huomasimme, että

CD14

-260C /T-polymorfismi voi lisätä riskiä mahasyöpä

H. pylori

infektoiduista yksilöitä.

Johtopäätökset

Tämä meta-analyysin mukaan

CD14

-260C /T-polymorfismi voi lisätä riskiä mahasyöpä

H. pylori

infektoiduista yksilöitä. Kuitenkin suuri ja hyvin suunniteltu tutkimuksia perusteltua vahvistaa havaintomme.

Citation: Wang J, Guo X, Yu S, Song J, Zhang J, Cao Z, et al. (2014) välisestä assosiaatiosta

CD14

geenipolymorfismien ja syöpäriski: meta-analyysi. PLoS ONE 9 (6): e100122. doi: 10,1371 /journal.pone.0100122

Editor: Balraj Mittal, Sanjay Gandhi Medical Institute, Intia

vastaanotettu: 11 maaliskuu 2014; Hyväksytty: 21 toukokuu 2014; Julkaistu: 30 kesäkuu 2014

Copyright: © 2014 Wang et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Data Saatavuus: Tällä kirjoittajat vahvistavat, että kaikki tiedot taustalla olevat havainnot ovat täysin saatavilla rajoituksetta. Data laskeuma.

Rahoitus: Kirjoittajat eivät tuki ja rahoitus raportoida.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

syöpä on merkittävä kansanterveydellinen ongelma maailmanlaajuisesti ja noin 12,7 miljoonaa syöpätapausta ja 7,6 miljoonaa syöpäkuolemaan raportoitu perustuvat GLOBOCAN 2008 [1]. On hyvin tunnettua, että syöpä on monivaiheinen prosessi, joka johtuu monimutkainen geneettisten ja ympäristötekijöiden [2], [3]. Vaikka viimeksi mainittu on tärkeä rooli syövän kehittymisessä. Isäntä geneettiset tekijät liittyvät läheisesti patofysiologian monien ihmisen syöpien [4]. Vaihtoehdot useissa luontaisen immuniteetin geenejä on tunnistettu biologisesti uskottavia ehdokkaita vaikutuksia syövän, kuten

CD14

.

CD14

geeni kromosomissa 5q31.1 , joka koodaa reseptoria proteiinia, joka sitoutuu (LPS), sen ensisijainen ligandi, ja vuorovaikutuksessa koreseptorit toll-like-reseptori 4 (

TLR4

) ja lymfosyyttiantigeenitoiminnon 96 (LY96) [5], [ ,,,0],6]. CD14 ilmentyy pinnalla monosyytit, makrofagit, ja neutrofiilit kalvo CD14 (mCD14), ja seerumin liukoista CD14 (sCD14), ja sen ilmentymistä voidaan osittain säädellä geneettisellä tasolla [7], [8]. On olemassa useita polymorfismi sivustoja

CD14

geeni, ja kaksi hyvin tutkittu yhteinen SNP promoottorialueen

CD14

, -260C /T (rs2569190; myös raportoitu

CD14

-159) ja -561C /T (rs5744455), tutkitaan laajasti alttiutta syöpään [9] – [27]. Kuitenkin tulokset ovat edelleen kiistanalaisia. Tässä tutkimuksessa, käymme meta-analyysi arvioida yhdistyksen kahden polymorfismien ja syöpäriskiä.

Materiaalit ja menetelmät

Haku strategia

Haimme PubMed, Web of Science, CNKI ja Wanfang tietokanta 1. päivään maaliskuuta, 2014 käyttämällä avainaiheista ”syöpä”, ”karsinooma”, ”geneettinen polymorfismi”, ”polymorfismi”, ”variantti” yhdistelmänä ”klusterin eriyttäminen 14″, ” CD14 ”. Lisätutkimukset tunnistettiin käsin viittauksia alkuperäisen tai tarkastelun artikkeleita tästä aiheesta. Hakutulokset rajattiin väestölle ja artikkelit oli kirjoitettu Englanti tai Kiinan. Jos useampi kuin yksi maantieteellinen tai syöpätyypin ilmoitettiin yksi raportti, kukin uutettiin erikseen. Jos tietoja tai osajoukkoja julkaistu yli yhden artikkelin, vain julkaisun kanssa suurin näytekoko oli mukana.

Mukaanottokriteerit ja poissulkemisperusteet

Tutkimukset sisällytettiin mukaan seuraavat kriteerit: (1) tutkimukset, jotka arvioitiin assosiaatiota

CD14

polymorfismien ja syöpä, (2) suunniteltu tapauskontrollitutkimuksessa, ja (3) yksityiskohtaiset genotyypin tiheys tapausten ja kontrollien toimitettiin suoraan tai voitiin laskea artikkelin tekstissä. Tutkimukset suljettiin pois, kun he olivat: (1) tapauksessa vain tutkia, tapausselostukset ja katsaukset, (2) tutkimukset ilman raakatietoja -260C /T genotyyppi

CD14

, (3) toistuvia julkaisut, ja (4) tutkimukset poikkesi Hardy-Weinberg tasapaino (HWE), (5) eläinkokeissa.

data louhinta

jokaisessa tutkimuksessa seuraavat tiedot poimittiin itsenäisesti kahdella tutkijat: ensimmäinen tekijän nimi, julkaisuvuosi, alkuperämaan, etnistä tutkimusväestöstä, syöpä tyyppi, lähde ohjaus, genotyyppi menetelmä, tapausten määrä ja valvonnan ja HWE valvontaan (

P

arvo). Tuloksia verrattiin, ja erimielisyydet keskusteltiin kaikkien tekijöiden ja ratkaista yksimielisyyteen.

Tilastollinen

syöpäriskiä liittyvä

CD14

polymorfismien arvioitiin kullekin tutkimuksessa kerroinsuhde (OR) ja 95%: n luottamusväli (CI). Neljä eri syrjäisimmillä alueilla laskettiin: hallitseva malli (CT + TT vs. CC), resessiivinen malli (TT vs. CT + CC), heterotsygoottinen vertailu (CT vs. CC), ja homotsygoottinen vertailu (TT vs. CC). Χ

2-testi-pohjainen Q tilastoa suoritettiin arvioimiseksi Tutkimusten välisten heterogeenisuus [28]. Kun merkittävä Q testi (

P

0,1) osoitti tasalaatuisuus eri tutkimuksissa, kiinteät vaikutukset mallia käytettiin [29], muuten satunnainen vaikutukset mallia sovellettiin [30]. Olemme myös määrällisesti vaikutusta heterogeenisyys mukaan

I

2 testi (

I

2 25%: no heterogeenisuus;

I

2 = 25-50%: kohtalainen heterogeenisuus;

I

2 = 50-75%: suuri heterogeenisuus,

I

2 75%: äärimmäinen heterogeenisuus) [31] . HWE kontrollien joukossa tutkimusta varten tutkittiin χ

2 testiä. Suoritimme kerrostuminen analyysejä etnisyys, kasvaimen tyyppi ja lähde ohjaus. Jos jokin syöpätyypin alle kolmessa tutkimuksessa yhdistettiin osaksi ”muut” syöpiä. Lisäksi meillä on myös suoritettu alaryhmäanalyysi

H. pylori

infektiotilanteesta ja kasvaimen sijainnista mahasyövässä ryhmässä. Herkkyysanalyysi suoritettiin arvioimiseksi tulosten pysyvyyden, nimittäin Yhdessä tutkimuksessa meta-analyysi poistetaan joka kerta pohtia vaikutuksesta yksittäisten tietojen asetettu yhdistettiin OR. Lopuksi mahdollisia julkaisu bias tutkittiin käyttäen Begg ”suppilo juoni ja Egger n testausalusta [32], [33].

P

0,05 pidettiin tilastollisesti merkitsevä.

Kaikki tilastolliset analyysit suoritettiin käyttäen Cochrane Collaboration RevMan 5.2 ja STATA paketin versio 12.0 (Stata Corporation, College Station, Texas).

tulokset

tutkimus ominaisuudet

jälkeen etsinnän strategian 85 mahdollisesti merkitystä tutkimukset haettiin. Mukaan mukaanottokriteerinä, 19 julkaisut [9] – [27], jossa koko teksti valittiin ja tehtiin lisätutkimuksia. Koska tutkimukset [14], [19] sisältyy kaksi kasvaintyypeissä vastaavasti ja tutkimuksesta Hold et al [14] sisältyy kahden populaation, käsittelimme niitä erikseen tässä meta-analyysi. Me jätetty yhdessä tutkimuksessa, koska he eivät esittää yksityiskohtaisia ​​genotyypityksen tietoja [23]. Olemme myös jätetty yksi tutkimus [24], koska se sisältyi päällekkäinen data kanssa mukana analyysissä [12]. Lisäksi poistimme 3 tutkimuksissa, koska niiden genotyyppi jakaumat keskuudessa valvontaa poikkesivat HWE [25] – [27]. Vuokaaviossa tutkimuksen valinnan yhteenvetona kuviossa 1. Kuten taulukossa 1 on esitetty, siis yhteensä 17 tutkimusta 14 julkaisuja mukana. Niistä oli 17 tutkimusta, joissa 4198 tapauksia ja 4194 koskevien tarkastusten -260C /T-polymorfismi ja kolme tutkimuksissa 832 tapausta ja 1190 koskevien tarkastusten -651C /T-polymorfismi. Niistä 17 tapausverrokkitutkimukset kymmenen tutkimukset tehtiin aasialaisilla ja seitsemän valkoihoisilla. Kaksi syöpätyyppeihin oli osoitettu: yhdeksän tutkimukset mahalaukun ja kahdeksan muiden syöpien (2 peräsuolen, akuutti lymfaattinen leukemia (ALL), lymfoomat ja yksi ruokatorven, eturauhanen, erikseen).

Quantitative data synteesi

260C /T-polymorfismi, yleinen, ei merkittäviä assosiaatioita

CD14

-260C /T-polymorfismi ja syöpäriskin havaittiin (hallitseva malli: OR = 0,89, 95% CI : 0,73-1,07; väistyvä malli: OR = 1,08, 95% CI: 0,93-1,25; CT vs. CC: OR = 0,85, 95% CI: 0,70-1,03; TT vs. CC: OR = 0,95, 95% CI: ,76-+1,19) (taulukko 2, kuvio 2A).

V: -260C /T; B: -651C /T.

Alaryhmäanalyysissä etnisyyteen, samanlaiset tulokset havaittiin sekä Aasian ja valkoihoinen väestö kaikissa geneettisten mallien; kun stratifioitu syöpätyypin, me myös ei havainnut mitään yhteyttä välillä -260C /T-polymorfismi sekä maha- ja muiden syöpien (taulukko 2).

Jaottelu perustuu lähde valvonnan osoittivat merkittäviä assosiaatioita -260C /T-polymorfismi ja riski syövän väestöpohjainen alaryhmä alle väistyvä malli (OR = 1,18, 95% CI: 1,04-1,33). Ei kuitenkaan ole merkittäviä yhdistys löytyi kolme muuta mallia ja väestöpohjainen alaryhmä (taulukko 2).

Lisäksi siinä mahasyövän alaryhmä, vielä kerrostunut analyysi perustuu

H. pylori

infektiotilanteesta ja kasvaimen sijainti suoritettiin. Kun analyysi stratifioitiin

H. pylori

infektiotilanteesta kolme tutkimusta [10], [13], [22] ilmoitetaan käytettävissä olevia tietoja ja yhdistettyjen tulokset osoittivat, että -260C /T-polymorfismi voi olla riskitekijä mahasyövän

H. pylori

infektoiduista yksilöitä (CT vs. CC: OR = 2,04, 95% CI: 1,21-3,46, TT vs. CC: OR = 2,32, 95% CI: 1,36-3,94) (kuva 3). Kuitenkin ositettu analyysi kasvaimen sijainti, kolme tutkimusta [11], [14], [18] ilmoitetaan käytettävissä olevia tietoja ja huomasimme, että mitään merkittävää yhdistyksen välillä -260C /T-polymorfismi ja riski cardia ja ei-cardia syöpiä (taulukko 3).

V: CT vs CC; B: TT vs CC.

-651C /T-polymorfismi, kolme tutkimusta mukana. Emme löytäneet tilastollinen assosiaatio -651 polymorfismin ja yleisen syöpäriskin kaikki geneettiset malleissa (taulukko 2, kuva 2B).

heterogeenisuus ja herkkyysanalyysit

Huomattava erilaisuuteen havaittu joukossa tutkimuksia varten assosiaatio

CD14

-260C /T-polymorfismi ja syöpäriskiä kaikissa geneettinen mallit (hallitseva malli: I

2 = 64%,

P

= 0,0002; väistyvä malli: I

2 = 44%,

P

= 0,003; CT vs. CC: I

2 = 62%,

P

= 0,0004; TT vs. CC: I

2 = 61%,

P

= 0,0005). Sitten arvioimme lähde heterogeenisyys kaikkien geneettistä mallia vertailussa etnisyys, syövän tyyppi ja lähde ohjaus. Heterogeenisuus osittain laski valkoihoisilla ja sairaalan johdolla väestön joissakin malleissa. Oli kuitenkin vielä huomattavia heterogeenisuus aasialaiset, mahalaukun, väestöpohjainen ja muita syöpiä. Sitten herkkyys analyysi suoritettiin jättämällä kunkin tutkimuksen erikseen arvioida vakautta tuloksia. Tilastollinen merkitsevyys ei muuttunut, kun mikään yksittäinen tutkimus jätettiin pois, vahvistaa vakautta tuloksia.

Julkaisu bias

Begg n suppilo juoni ja Egger testi tehtiin arvioida mahdolliset julkaisu puolueellisuudesta kirjallisuutta. Muoto suppilo tontteja ei ilmennyt näyttöä suppilon juoni epäsymmetrian (kuva 4). Egger testi osoitti myös, että ei ollut tilastollista merkitystä arvioinnissa julkaisun bias (hallitseva malli:

P

= 0,144, CT vs. CC:

P

= 0,117, TT vs. CC:

P

= 0,141, väistyvä malli:

P

= 0,123).

keskustelu

Genetic polymorfismien geenejä, joiden tuotteet säätelevät immuunijärjestelmää ja antitumor vasteet pahanlaatuisia kasvaimia ovat hyviä ehdokkaita tutkimuksessa. Monet kandidaattigeenit raportoitu olevan yhteydessä syöpäriski, kuten

TLR

,

CD14

. TLR: t ovat hahmontunnistus reseptorit (PRR) on luonnollinen immuniteetti, jotka tunnistavat erilaisia ​​molekyylejä. Osalta CD14, se on malli tunnustamatta reseptorin, jolla on keskeinen rooli luontaisen immuniteetin ja ohjaa adaptiivista immuunivastetta [34]. Koska co-reseptorin TLR: ien, CD14 toimii ensisijaisesti siirtämällä LPS: n ja muiden bakteeri-ligandeja kiertävän LPS-sitovan proteiinin TLR4 /MD-2 signalointi monimutkainen. Kaksi yleistä promoottori polymorfismien on tunnistettu

CD14

geeni asemissa -260 ja -651 alkaen elokuu aloituskodonin, jotka vastaavat -159 ja -550 nimetty mukaan transkription aloituskohdasta, vastaavasti [35] , [36]. Mitä -260C /T-polymorfismi, Levan et al. [37] osoitti, että T-alleelin on vähentynyt affiniteetti DNA /proteiini- vuorovaikutusten klo GC laatikko, jossa on sitoutumiskohta SP1, SP2, ja SP3 transkriptiotekijöiden ja johtaa lisääntyneeseen transkription toimintaa. Johdonmukaisesti, Hartel et al. [38] kertoi, että sen jälkeen kun in vitro stimulaation johto veriviljelyistä LPS, kantajia -159T alleelin on korkeampi sCD14 verrattuna kantajia -159C alleelin. Äskettäin -260C /T-polymorfismi

CD14

geeni on tutkinut yhdessä monia sairauksia, kuten tulehduksellinen suolistosairaus [39], alkoholin aiheuttama maksasairaus [40], tuberkuloosi [41], sepsis [42 ], sepelvaltimotauti [43], astma [44] ja allerginen nuha [45]. Kuten syövän, aiemman meta-analyysin Zhou et al. [46], arvioitiin yhdistyksen välillä

CD14

-260C /T-polymorfismi ja syöpäriskin perustuu 12 Tutkimuksiin 2498 tapauksissa ja 2696 valvonta ja raportoitu, että

CD14

-159C /T-geenin polymorfismi ei geneettinen riskitekijä syöpään.

tässä tutkimuksessa, teimme laajan kirjallisuuden haun eri tietokannoista ja mukana useita muita tutkimuksia, jotka mahdollistivat suuremman useita aiheita (17 tutkimuksiin 4198 tapaukset ja 4194 tarkastukset) ja tarkempaa riskin arviointia. Lisäksi teimme edelleen kerrostunut analyysi perustuu

H. pylori

infektiotilanteesta ja kasvaimen sijainnista mahasyövässä ryhmässä. Lisäksi olemme myös tutkia yhdistyksen välillä

CD14

-651C /T-polymorfismi ja syöpäriskin perustuu kolmeen tutkimuksiin, joissa 832 tapausta ja 1190 tarkastuksia. Yhdistetty data osoitti, että merkittävää yhdistysten välillä polymorfismit

CD14

geeni ja syövän riskiä löydettiin kokonaisvertailun. Sitä paitsi, että alaryhmäanalyysi etnisyys ja syövän tyyppi, me myös ei havainnut mitään yhteyttä välillä -260C /T-polymorfismi ja riski aasialaiset, valkoihoiset, maha- ja muita syöpiä. Kuitenkin, kun stratifioituna lähde ohjaus, merkittävä assosiaatio -260C /T-polymorfismi ja riski syövän väestöpohjainen alaryhmä havaittiin alle väistyvä malli. Tulokset näyttävät olevan ristiriidassa havaintojen toiminnan tutkimuksessa CD14, joka oli ehdottanut, että CD14 oli tärkeä rooli syövän kehittymiseen. Koska syövän synnyn on monivaiheinen prosessi, johon monitekijäinen vuorovaikutus geneettisten ja ympäristötekijöiden, johon erilaiset geneettiset muutokset ja useita biologisia reittejä. Näin ollen on epätodennäköistä, että riskitekijät syövän työn erillään toisistaan. Mitä enemmän, eri kytkentäepätasapaino- kuvioita yleensä esiintyy liittyvien geenien ja vaikutuksen geneettinen muunnos voidaan peittää muut tunnistamattomat syy osallistuvien geenien syövän synnyn. Lisäksi vain muutamia tutkimuksia -651C /T-polymorfismi sisällytettiin, mikä voi myös myötävaikuttaa tuloksen ja sitä pitäisi tulkita varoen.

H. pylori

tartuntaa tiedetään olevan tärkein riskitekijä mahasyövän [47], tutkimme mahdollisia vuorovaikutus

H. pylori

infektion ja CD14 -260C /T polymorfismin mahasyövän. Yhdistetty Tulokset osoittivat, että -260C /T-polymorfismi voi olla riskitekijä mahasyövän

H. pylori

infektoiduista yksilöitä. Koska mCD14 on useimmiten ilmaistu monosyyteissä /makrofageissa, joita kertyy

H. pylori

tartunnan limakalvon [48]. Eli yksilö CT /TT-genotyyppi oli korkeammat sCD14 tasoja verrattuna kantaja-C-alleeli. Tulokset osoittavat, että -260C /T-polymorfismi voi olla merkitystä lopputulokseen

H. pylori

infektio, erityisesti mahasyövän. Lisäksi olemme myös tutkineet -260C /T-polymorfismi yhdessä molempien anatominen lokalisoinneissa mahasyövän ja ei ollut merkittävää yhdistyksen välillä -260C /T-polymorfismi ja riski cardia ja ei-cardia syöpiä. Kuitenkin koska vain harvat tutkimukset sisältyvät edellä analyysin tulos on tulkittava varoen, ja lisää tutkimuksia tarvitaan.

heterogeenisyys on mahdollinen ongelma tuloksia tulkittaessa kaikkien meta-analyysin [49] . Tässä meta-analyysissä, heterogeenisuus havaittiin kokonaisvertailun kolmessa geneettisten mallien, kun stratifioituna etnisyys, syövän tyyppi ja lähde ohjaus, heterogeenisyyden osittain laski valkoihoisilla ja sairaalan johdolla populaatioissa. Kuitenkin heterogeenisyys edelleen olemassa keskuudessa aasialaiset, väestöpohjainen, maha- ja muita syöpiä. Sitten herkkyys analyysit tehtiin peräkkäin ilman Yhdessä tutkimuksessa arvioitiin yhdistettiin pariton suhde muuttui melko vähän, vahvistamalla tuloksia tästä meta-analyysi. Edellä esitetyt tulokset viittaavat siihen, että eri etnisten ryhmien, syövän tyypistä ja väestön valinta saattaa edistää heterogeenisuus havaittiin meta-analyysi. Sitä paitsi, elämäntapa, ympäristön tausta ja muita tuntemattomia tekijöitä voivat olla myös lähde heterogeenisyys. Julkaisua ei bias joutui viittaa tämän mahdolliseksi totta tulokseen.

tulkitsee tuloksia nykyisen meta-analyysi, joitakin rajoituksia olisi tunnustettava. Ensinnäkin tarkastuksia ei yhdenmukaisesti määritelty. Joissakin tutkimuksissa käytettiin terveen väestön kontrolliryhmässä, kun taas toiset valikoiduilla potilailla ilman syöpiä sairaalassa kuin vertailuryhmän. Siksi komennot eivät välttämättä aina olla aidosti edustava taustalla lähdepopulaatioiden, varsinkin kun polymorfismi odotetaan myös vaikuttavan riskiä muita sairauksia. Toiseksi julkaissut useita tutkimuksia ei ollut riittävän suuri kattava analyysi, erityisesti alaryhmäanalyysi syöpätyypin. Siten voimme epäonnistua tutkia todellista assosiaatiota polymorfismin ja erityisten syövän tyyppi (esim peräsuolen, ALL). Kolmanneksi, koska ei ole alkuperäisen datan, tuloksemme perustuivat yhden estimaatteja ilman säätö iän, sukupuolen ja muiden riskitekijöiden (esim tupakointi, juominen asema), joka voi aiheuttaa vakavia sekoittavia bias.

Kaiken kaikkiaan tämä meta-analyysin mukaan

CD14

-260C /T-polymorfismi voi lisätä riskiä mahasyöpä

H. pylori

infektoiduista yksilöitä. Kuitenkin suuri ja hyvin suunniteltu tutkimuksia perusteltua vahvistaa havaintomme. Lisäksi lisää geeni-geeni ja geeni-ympäristön vuorovaikutukset olisi myös harkittava tulevaisuudessa analyysi, jonka tulisi johtaa parempaan, kokonaisvaltainen käsitys assosiaation

CD14

polymorfismien ja syöpäriskiä.

tukeminen Information

tarkistuslista S1.

PRISMA tarkistuslista.

doi: 10,1371 /journal.pone.0100122.s001

(DOC)

tarkistuslista S2.

MOOSE tarkistuslista.

doi: 10,1371 /journal.pone.0100122.s002

(DOC) B