Krooninen sairaus

tiivistelmä

Background

infektio korkean riskin ihmisen papilloomaviruksen (HPV) tyyppien on tunnustettu syynä kehittämistä kohdunkaulan syövän ja useiden muiden pahanlaatuisten kasvainten. Nykyisin rokotteita HPV, erittäin tehokas ehkäisyssä pysyvän infektion ja syövän esiasteita, ovat käytettävissä rutiininomaisessa kliinisessä käytännössä.

Tavoitteet

Tiedot esiintyvyydestä ja tyyppikohtaisia ​​HPV jakelu väestön kunkin maan ovat ratkaisevia valvonnan HPV tyypille erityisiä esiintyvyys on rokotusten HPV.

Methods

Naiset osallistuvat ehkäisevänä gynekologinen tutkimus, jolla ei ollut ollut epänormaalia sytologinen päätös ja /tai leikkauksen kohdunkaulan solumuutoksia otettiin. Kaikki näytteet testattiin läsnäolo HPV High-Risk Hybrid Capture 2 (HR HC2) ja modifioitua PCR-reverse line täpläkoe laajakirjoisten alukkeilla (BS-RLB).

Tulokset

Kohdunkaulan sivelynäytteistä 1393 naisten analysoitiin. 6,5% naisista, epätyypillinen Sytologisten löydöksiä havaittu. Kaikkiaan 28,3% (394/1393) naisten oli positiivinen hyvänsä HPV-tyypin BS-RLB, 18,2% (254/1393) HR HC2, ja 22,3% (310/1393) BS-RLB HR HPV-tyypeille. Naisilla, joilla epätyypillinen havaintojen esiintyvyys HR ja kaikki HPV-tyypit olivat merkittävästi korkeammat kuin naisilla, joilla oli normaali sytologinen havainnoista. Kaiken 36 eri HPV-tyyppien on havaittu, HPV 16 on yleisin (4,8%). HPV positiivisuus väheni iän; korkein esiintyvyys oli 31,5% ikäryhmässä 21-25 vuotta.

Johtopäätökset

Tutkimuksemme aiheita ovat todellinen seulonta väestöstä. HPV esiintyvyys tässä potilasryhmässä Tšekissä on korkeampi kuin muissa Itä-Euroopan maissa. Myös spektri yleisin HPV-tyypit eroavat jotka muut ovat raportoineet, mutta HPV 16 on, yhtäpitävästi, yleisin tyyppi. Maakohtaiset HPV tyyppikohtaista esiintyvyyden antaa perustiedot, joiden avulla voidaan mitata vaikutusta HPV rokotuksen tulevaisuudessa.

Citation: Tachezy R, Smahelova J, Kaspirkova J, Salakova M (2013) ihmisen papilloomaviruksen tyypin erityisiä esiintyvyys kohdunkaulan syövän seulonnan populaatio Tsekin naiset. PLoS ONE 8 (11): e79156. doi: 10,1371 /journal.pone.0079156

Editor: Daniela Flavia Hozbor, Universidad Nacional de La Plata., Argentiina

vastaanotettu: 21 kesäkuu 2013 Hyväksytty: 26 syyskuu 2013; Julkaistu: 12 marraskuu 2013

Copyright: © 2013 Tachezy et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tämä työ tukivat avustuksen NS 10 /656-3 /2009 ja avustuksen NT 12372 alkaen terveysministeriön Tsekin. Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Biopticka laboratorio on yksityinen yritys, joka tarjoaa rutiini patologinen, Sytologisten ja molekyyligeneettiset diagnostiikka ihmisen kliinisistä näytteistä. Mukana kirjoittamassa, Jana Kaspirkova, on molekyyli geneetikko, joka vastaa asianmukaista näytteiden keräämistä ja jotka osaltaan tietojen analysointi. Ei ole mahdollinen eturistiriita koskee tutkimustulokset ja hän vahvistaa, että tämä ei muuta noudattamista kaikki PLoS ONE politiikan tietojen jakamista ja materiaaleja.

Johdanto

Human papillomaviruksien (HPV ) ovat pieniä DNA-viruksia, jotka tartuttavat limakalvojen ja ihon epiteelin. Tällä hetkellä yli 170 HPV-tyypit ovat tiedossa, 13 luokiteltu korkean riskin ja 7 kuten luultavasti korkean riskin HPV-tyypit. Alhainen riski (LR) HPV-tyypit aiheuttavat hyvänlaatuisia vaurioita taas korkean riskin (HR) HPV-tyypit ovat perustettu etiologisena aineina kohdunkaulan syövän (CC) [1,2]. Sitä paitsi kohdunkaulan syöpä, HR HPV on syöpää aiheuttavia vaikutuksia useissa muissa anatominen sivustoja miesten ja naisten [3]. HPV hetkellä yleisin virus sukupuolitautitartunta maailmanlaajuinen mutta jakautuminen eri genotyyppiä vaihtelee väestön ja maantieteellisillä alueilla [4]. Meta-analyysi 1 miljoona naista, joilla oli normaali Sytologisten havaintojen arvioitu maailmanlaajuinen HPV esiintyvyys oli 11,7% ja oli huomattavia eroja eri mantereella. Kuitenkin viiden HPV-tyypit olivat johdonmukaisesti yleisin: HPV 16, 18, 52, 31, ja 58, riippumatta siitä maantieteellisestä sijainnista. Euroopassa korkein esiintyvyys havaittiin Itä-Euroopan maissa [5]. Tiedot Tsekistä julkaistu ennen [6] ei ollut mukana meta-analyysissä, sillä tutkimuksessa ei täytä mukaanottokriteerinä takia sopimaton valikoima naisten normaali Sytologisten havaintojen koska ne rekrytoitiin sairaalassa tapahtuva toiminta. Esiintyvyys HPV tässä ryhmässä oli korkea (23%), mutta samanlainen kuin muut Itä-Euroopan maissa. Korkea HPV esiintyvyys oli raportoitu korreloivan esiintyy paljon CC kahta poikkeusta lukuun ottamatta, Etelä-Aasiassa ja Itä-Euroopassa [5]. Kuitenkin Tšekissä esiintyvyys CC on jatkuvasti erittäin korkea, 16,1 /100 000 naista (eurooppalainen standardi) vuonna 2010, huolimatta siitä, että huomattavat taloudelliset resurssit suunnataan kohti kohdunkaulan syövän ehkäisyyn. Syyt ovat pääasiassa koordinaation puute ja valvontaa, joka johtaa yli-seulonta vähemmistö naisia, kun taas suurin osa kohderyhmä ovat alle-seulontaan tai seulotaan lainkaan [7]. Iästä suosittelema Tsekin naistentautien ja obstetrinen Society ensimmäistä tutkimista naisten alkamisen jälkeen sukupuolielämää on 15 vuotta ja ei ole rajoitettu suhteen seulonnan iän määritelty ohjelmassa kohdunkaulan syövän ehkäisyyn Tšekissä. Kuitenkin vuotiailla naisilla 25-60, joka ei osallistunut tutkimusta viimeisen kahden vuoden aikana olisi kutsunut sairausvakuutusyhtiö [8].

HPV havaitseminen on esitetty vankka, toistettavissa, ja herkkä testi varten triage naisten epänormaali sytologisten havaintojen ja seurannan saaneille naisille kohdunkaulan solumuutoksia. Lisäksi HPV havaitseminen on myös äskettäin osoitettu olevan herkkä ja kustannustehokas testi tunnistamista riskisynnyttäjälle ensisijaisen kohdunkaulan ohjelmat [9,10]. Kaksi ennalta ehkäisevää papilloomaviruksen rokotteita, kaksivalenssinen ja nelivalenttista, ovat saatavilla primaaripreventiossa HPV-liittyvien sairauksien [11]. Arviointi HPV tyypille ominaisia ​​esiintyvyys populaatiossa ennen puhkeamista rokottamiseen ja valvonnan mahdollisten muutosten tyyppi jakelu on tärkeää sekä valittaessa diagnostisten testien sekä arvio mahdollisten paikallisia vaikutuksia HPV-rokotteiden on estäminen HPV-liittyvien sairauksien naisilla ja miehillä.

Materiaalit ja menetelmät

Tutkimuskanta

Tšekissä seulonta aikaväli on yksi vuosi. Naiset, joilla on epätyypillinen Sytologisten ja /tai colposcopical havainnot ajoittuvat seurata tarkastelua 3-6 kuukaudessa välein. HPV tunnistus ja tyypitys suoritettiin naisilla, joilla oli edellisen gynekologinen tutkimus yli vuosi sitten, ja joilla ei ollut epätyypillinen tai patologisia havaintoja kohdunkaulan ja ole aikaisempaa hoitoa kohdunkaulan solumuutoksia.

Kaikkiaan näytteitä 1393 naista (keski-ikä 33,5 vuotta, ikäjakauma 14-79 vuotta) valittiin pankista näytteitä biopsia Laboratory Pilsen, Tšekki. Nämä toimittivat näytteet gynekologit joka hoitaa potilaita 5 14 eri alueella Tsekin tasavallassa välisenä aikana tammikuussa 2010 ja joulukuun 2011 Näihin alueisiin kuuluu sekä suurkaupunkien ja maaseudulla. Näytteet Näyte Transport Medium (STM) (Qiagen, Hilden, Saksa) lähetettiin National Reference Laboratory for Papillomavirukset (NRL PV) alle laboratorion tunnusnumero (lab ID) estävän henkilötunnus tutkimuksen aiheista NRL PV. Tutkimus oli kaksoissokkotutkimus. Ihmiset suorittavat HPV-DNA tunnistus ja tyypitys eivät tietoisia sytologian tulokset ja cytologists sokaisi HPV-DNA tuloksia. Sytologista tulokset olivat saatavilla laboratoriossa tunnus kädessä.

Sytologinen luokitus.

Sytologisten luokitus tehtiin mukaan Bethesda 2001 tarkistetun [12]. Jotta Tämän tutkimuksen, sytologista löydöksiä jakaa neljään ryhmään: normaali, vähäinen (jos epätyypillisten squamous soluja tuntematon merkitys /ASC-US /ja /tai epätyypillinen rauhas soluja, joita ei muuten eritellä /AGC-NOS /havaittiin) , lievä (jos huonolaatuista levyepiteelikarsinooma intraepiteliaalisia vaurioita /LSIL /havaittiin), tai vaikea (jos epätyypillinen okasolujen, voi sulkea pois korkealaatuisesta levyepiteelikarsinooma intraepiteliaalisia vaurio /ASC-H /ja /tai epätyypillinen rauhas soluissa, suosimaan neoplasia /AGC- NEO /ja /tai korkea-asteen levyepiteelikarsinooma intraepiteliaalisia vaurioita /HSIL /) havaittiin).

Ethic selvitys.

Tutkimus hyväksynyt etiikkaa komitea instituutin Hematologia ja Veripalvelun. Tarve suostumuslomakkeesta oli luopunut eettinen komitea koska näytteet valittiin anonyymisti pankista näytteitä biopsia Laboratory Pilsen, Czech Republic (https://www.biopticka.cz/).

tietojen saatavuus.

Tutkimus lähdetiedot annetaan pyynnöstä mukaisesti vahvistamien periaatteiden Yhdysvaltain National Research Council of National akatemioiden (tiedeakatemian Press, 2003).

HPV havaitseminen ja genotyypityksen

Hybrid Capture 2 määritys (HC2).

200 xl: n näyte kustakin Sample Transport Medium (STM) (Qiagen, Hilden, Saksa) näyte säilytettiin -20 ° C, kunnes myöhemmin käsitellään (katso alla). Kaikki näytteet testattiin käyttämällä Hybrid Capture® 2 korkean riskin HPV-DNA-testi (HR HC2) (Digene Corporation, Gaithersburg, MD). Tämä testi mahdollistaa havaitsemiseen 13 HR HPV-tyyppien (HPV 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, ja 68). Testaus suoritettiin valmistajan ohjeiden. Kynnys positiivinen HPV nimitys oli suhteellisen kevyt yksikköä /sulku (RLU /CO) suhde ≥1.0.

PCR ja hybridisaatio.

Soluja 200 ul: aan kutakin STM näytteen pelletoitiin sentrifugoimalla ja DNA uutettiin käyttämällä QIAamp DNA Mini Kit (Qiagen, Hilden, Saksa) mukaan valmistajan protokollaa. Lopullinen eluointi DNA: sta tehtiin 100 ui eluointipuskuria.

läsnäolo ja eheys ihmisen DNA vahvistettiin PCR: llä alukkeilla MS3 /MS10bio spesifinen beta-globiinigeenin [13].

monistaminen tehtiin PCR-thermocycler (PTC 200, MJ Research Inc., Waltham, MA, USA) seosta, jossa oli laaja kirjo BSGP5 + alukkeita ja 5′-pään biotiinileimattua BSGP6 + alukkeita, jotka vahvistavat 150 bp fragmentti L1-geenin [13]. Viisikymmentä mikrolitraa PCR-seos sisälsi 4 ui eristetyn DNA: n, 50 mM KCI, 10 mM Tris-HCl, pH 8,3 (Roche Applied Biosystems, Mannheim, Saksa), 200 uM kutakin deoksinukleosiditrifosfaattia, 3,5 mM MgCl2: a, 1 U DNA- AmpliTaq Gold-polymeraasi (Roche Applied Biosystems, Mannheim, Saksa), 10 pmol kutakin yhdeksän BSGP5 + alukkeita, ja 20 pmol kutakin kolmesta 5′-biotinyloidun BSGP6 + alukkeita (MWG-Biotech AG, Ebersberg, Saksa). Alkuvaiheen denaturointi 94 ° C: ssa 4 minuutin ajan, kukin 40 sykliä koostuivat denaturoinnista 94 ° C: ssa 20 sekuntia, alukkeen 38 ° C: ssa 30 sekunnin ajan, ja ketjunpidennys 71 ° C: ssa 80 sekunnin ajan. Lopussa, inkubointi 71 ° C: ssa 4 minuuttia suoritettiin. Monistuksen jälkeen, 10 ui PCR-tuotetta analysoitiin vaakasuora 3% agaroosigeelissä (NuSieve 3: 1 agaroosi, FMC Bioproducts, Rockland, ME).

genotyypitys, päinvastainen linja täplähybridisaatio (RLB) käytettiin [14]. RLB menetelmä pystyy tunnistamaan 37 eri HPV-tyyppien yhdessä määrityksessä. Sekvenssit kaikki antureista, lukuun ottamatta niitä uudelleen mukaan Schmitt [15] (HPV-tyypit 16, 39, 59, ja 82, ja yleinen koettimet U1 ja U2), kuvattiin ennen [14]. Kaikki koettimet kovalenttisesti 5′-terminaalisen amino- ryhmän aktivoitu negatiivisesti varautuneita Biodyne C-kalvo ja hybridisoitiin biotinyloidun PCR-tuotteen. Pesun jälkeen kaivoa inkuboitiin peroksidi-leimatulla streptavidiinilla konjugaattia 42 ° C: ssa 60 min. Kemiluminesoivan havaitsemiseksi hybridisoitumaan DNA, kalvo inkuboitiin ECL havaitsemiseksi nestettä (Amersham Biosciences, Uppsala, Ruotsi) ja altistettiin Lumifilm (Roche, Indianapolis, IN) 5 min.

Näytteet positiivinen HR HC2, mutta negatiivisia BS-RLB testattiin PCR: llä konsensusalukkeilla MY09 /MY11 ja HMB01 määritelty ennen [16]. Positiiviset näytteet kirjoitetaan sekvensoimalla kuten alla.

HPV sekvensointi.

Näytteitä, jotka eivät olleet hybridisoitunut annetun RLB mutta oli paljastanut selkeän vyöhykkeen agaroosigeelillä alistettiin DNA nukleotidisekvensointiin jotta tarkasti määrittää HPV-genotyyppi. Neljäkymmentä mikrolitraa PCR-tuote leikattiin 2% agaroosigeelissä (NuSieve GTG agaroosi, FMC Bioproducts, Rockland, ME, USA), puhdistettiin käyttämällä MinElute Gel Extraction Kit (Qiagene, Hilden, Saksa), ja sekvensoitiin ” BigDye Terminator Primer Cycle Sequencing kit ”(Applied Biosystems, Foster City, CA, USA). Analyysi suoritettiin automaattisella ABI PRISM 3500 sekvensointijärjestelmällä (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA) ja sekvenssit analysoitiin täyteläisyyden ohjelmiston ja arvioidaan BLAST-ohjelmistoa (http: //www.ncbi.nlm.nih gov /BLAST /).

Linear Array HPV genotyyppitestiä (LA).

Näytteitä, joissa poikkeavien havaintojen HR HC2 ja PCR-menetelmillä (katso edellä) testattiin LA (Roche). Tämä testi mahdollistaa havaitsemiseen 37 HR ja LR HPV-tyyppien (HPV 6, 11, 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 40, 42, 45, 51, 52, 53, 54, 55, 56 , 58, 59, 61, 62, 64, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73 (MM9), 81, 82 (MM4), 83 (MM7), 84 (MM8), IS39, ja CP6108). Testaus suoritettiin valmistajan ohjeiden. Uutetusta DNA, saman verran kuin BS-RLB menetelmällä (4 ui) käytettiin.

Tilastolliset analyysit

Kerrotaan tartunnan näytteet olivat sellaisia, joissa kaksi tai useampi HPV-tyypit oli havaittu. Tällaiset näytteet laskettiin positiivisiksi yhden tyypin HPV ja myös joukkoon positiivisia muita varten. Tyypille ominaisia ​​HPV esiintyvyyden ilmaistaan ​​prosentteina kaikista aiheista testattiin HPV, ja siten edustavat HPV esiintyvyys joko yhden tai useita infektioita. Ilmaista edustus kunkin yhden ja useita infektioita, kukin näyte osoitettu verrannollinen jakeet erityisten genotyyppien vaan lasketaan vain kerran [17]. Ero HPV esiintyvyys ryhmä naisia, joilla oli normaali Sytologisten havaintoja verrattiin naisiin epätyypillisiä havainnot (ASC-US /AGC-NOS, AGC-NEO /LSIL, ASC-H /HSIL) 95%: n luottamusväli ( CI) käyttämällä GraphPad InStat (versio 3.00) (GraphPad Software, San Diego, CA). Sillä virhematriiseja, standardi chi-neliö testi ja Fisherin tarkkaa testiä käytettiin. Kaikki testit olivat kaksipuolinen ja merkitsevyystaso oli = 0,05. Jotta voidaan sulkea pois eroja ikärakenteessa populaatioiden välillä käytimme suoria standardointi (WHO Maailman standardi). Kappa tilastoa käytettiin mittaamaan sopimuksen HPV-positiivisuuden tila kahden testin välillä käytetty.

havaittu HPV-tyypit luokiteltiin matalan riskin (LR) (HPV 6, 11, 32, 40, 42, 43, 44, 54, 61, 62, 72, 74, 81, 90, ja 114), korkean riskin (HR) (HPV 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, ja 68), ja luultavasti korkean riskin (pHR) (HPV 26 , 53, 66, 67, 70, 73, ja 82) eri suvun Alpha, joka sisältää limakalvon HPV [18-20]. Meidän analyysit, määrittelimme (perustuen fylogeneettisen sukulaisuuden) HPV 31, kuten läheistä sukua HPV 16 ja HPV 45, kuten läheistä sukua HPV 18 HPV 33, 52, ja 58 enemmän kaukaista sukua HPV 16:

laboratorion on akkreditoitu CSN EN ISO 15 189 ja osallistuu säännöllisesti ulkoiseen laadunvalvontaohjelmansa järjestämien Instand (Saksa) ja Mendel Center for Biomedical Sciences (Kypros). Lisäksi laboratorio osallistui kahdesti WHO HPV Labnet pätevyystutkimukseksi HPV-DNA Typing järjestämä WHO HPV Global Reference Laboratory [21,22].

Tulokset

Out of 1393 naisten Tutkimuksessamme 25,6% (357/1393) olivat nuorempia kuin 25 vuotta ja 2,2% olivat vanhempia (32/1393) yli 60 vuotta, eli 72% oli suositellulla ikähaarukka seulontaan. Suurin osa naisista – 93,5% (1302/1393) – oli normaali sytologinen havaintoja. Kaikkiaan 6,5% (91/1393) naisista oli epänormaali Sytologisten havainnoista 4,4% (61/1393) oli ASC-US tai AGC-NOS, 2,0% (28/1393) oli AGC-NEO tai LSIL ja 0,1% ( 2/1393) oli ASC-H tai HSIL. Vähemmän naisia ​​- 18,2% (254/1393) – oli positiivinen HR HPV jonka HR HC2 menetelmä verrattuna BS-RLB joka havaittiin 22,3% (310/1393) HR HPV tai HR ja LR HPV positiivisia naisia ​​ja 28,3% (394 /1393) olivat positiiviset BS-RLB tahansa HPV-tyypille. Vastaava esiintyvyyden, ikään standardoitu maailman väestöstä, olivat 14,7%, 19,5%, ja 24,6%, tässä järjestyksessä. BS-RLB, 70,6% (278/394) potilaista oli HPV-positiivinen yhdelle HPV-tyypille taas 29,4% oli positiivisia useita tyyppejä (18,3% kahdelle, 6,9% kolmelle, 2,8% neljän, 1,3% viiden , ja 0,3% kuuden HPV-tyypit). LR HPV-tyypit, yhtenä infektio, oli läsnä 6,0% (84/1396) naisten (taulukko 1).

Sytologinen TULOKSET

Kaikki

normaali

ASC-US /AGC-NOS

AGC-NEO /LSIL

ASC-H /HSIL

p-arvo

N [%] N [%] N [%] N [%] N [%] HR HC2254 (18,2) 203 (15,6) 23 (37,7) 27 ( 96,4) 1 (50,0) 0.0001PCR, HR HPV * 310 (22,3) 256 (19,7) 27 (44,3) 26 (92,9) 1 (50,0) 0.0001PCR tahansa HPV394 (28,3) 333 (25,6) 33 ( 54,1) 27 (96,4) 1 (50,0) 0.0001PCR, LR HPV ** 84 (6,0) 77 (5,9) 6 (9,8) 1 (3,6) 0 (0.0) 0.4912HPV 6/11

*** 20 (1,4) 19 (1,5) 0 (0,0) 1 (3,6) 0 (0.0) 0.7503HPV 16/18

# 104 (7,5) 86 (6,6) 9 (14,8) 9 (32,1) 0 (0,0) 0.0001HPV 31/45

*** 43 (3,1) 37 (2,8) 3 (4,9) 3 (10,7) 0 (0.0) 0.0565HPV 33/52/58

48 (3,4) 38 (2,9) 6 (9,8) 3 (10,7) 1 (50,0) 0.0007Table 1. HPV levinneisyys sytologisten havainnot ja HPV-DNA havaitsemismenetelmä.

p-arvo vertailun HPV esiintyvyys potilaan normaali ja epätyypillisten (ASC-US /AGC-NOS, AGC-NEO /LSIL, ASC-H /HSIL) Sytologisten havainnot, HR HC2 = Hybrid Capture HR testi, PCR = polymeraasiketjureaktio reaktio, ASC-US = epätyypillinen squamous solujen tuntematon merkitys, AGC-NOS = epätyypillinen rauhas soluja ei ole tarkemmin määritelty, AGC-NEO = epätyypillinen rauhas soluissa, suosivat neoplasia, LSIL = matala-asteista levyepiteelikarsinooma intraepiteliaalisten vaurio, ASC-H = epätyypillinen okasolujen, voi sulkea pois korkealaatuisesta levyepiteelikarsinooma intraepiteliaalisia leesio (HSIL), HSIL = laadukkaat levyepiteelikarsinooma intraepiteliaalisia vaurion * läsnäolo HR HPV ja myös HR HPV useita tartunnan LR HPV-tyypit, ** läsnä LR HPV-tyyppien vasta, vuonna yksi tai useampia infektioita muiden LR tyyppejä *** näytteet, jotka eivät sisällä HPV 16 ja /tai 18,

# näytteitä HPV 16 ja /tai 18 positiivinen,

näytteet, jotka eivät sisällä HPV 16 ja /tai 18 ja /tai 31 ja /tai 45 CSV Lataa CSV

sytologisesti normaali naiset olivat positiivisia HR HPV-tyyppien 15,6% (203/1302), jonka HC2 testi. Käyttäen BS-RLB, 19,7% (256/1302) on sytologisesti normaalin naiset olivat positiivisia HR HPV-tyypit, ja 25,6% (333/1302) minkä tahansa HPV-tyypille (taulukko 1). Vastaavat esiintyvyyden, ikään standardoitu maailman väestöstä, olivat 12,5%, 16,3%, ja 21,4%. Tutkimuksen naisia, 5,9% (77/1393) infektoitiin LR HPV-tyypit.

yleisyys useita infektio lisääntyi vakavuuden Sytologisten havainnot (P muutossuunnat = 0,0003) (taulukko 2). Useita infektio oli yleisempää nuorempien ja oli poissa naisilla yli 55 vuotta (kuvio 1).

HPV-DNA LEVINNEISYYS (%) B Ikäryhmä

N

HR HC2

PCR HR HPV

PCR tahansa HPV

PCR LR HPV

HPV 6/11

HPV 16/18

≤2015334 (22,2) 43 (28,1) 54 (35,3) 11 (7,2) 4 (1,3) 13 (9,2) 21-2521367 (31,5) 73 (34,3) 87 (40,8) 14 (6,6) 7 (3,3) 26 (12,2) 26-3020229 (14,4) 43 (21,3) 56 (27,7) 13 (6,4) 4 (2,0) 18 (8,9) 31-3521634 (15,7) 42 (19,4 ) 54 (25,0) 12 (5,6) 3 (1,4) 12 (5,6) 36-4019218 (9,4) 24 (12,5) 36 (18,8) 12 (6,3) 2 (1,0) 6 (3,1) 41-4511410 (8,8) 13 (11,4) 17 (14,9) 4 (3.5) 0 (0.0) 3 (2,6) 46-50905 (5,6) 9 (10,0) 17 (18,9) 8 (8,9) 0 (0.0) 7 (7,8) 51-55555 (9.1 ) 4 (7,3) 5 (9,1) 1 (1,8) 0 (0,0) 3 (3,6) 56-60371 (2,7) 3 (8,1) 4 (10,8) 1 (2,7) 0 (0,0) 0 (0,0) 61-65210 (0.0) 2 (9,5), 3 (14,3) 1 (4,8) 1 (4,8) 0 (0,0) 6590 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) Taulukko 2. Ikä HPV esiintyvyys menetelmällä HPV-DNA-tunnistus naisilla, joilla oli normaali sytologisten havaintojen.

CSV Lataa CSV

Riippumatta käytetystä menetelmästä HPV havaitsemiseen, esiintyvyys HR HPV kasvoi vakavuus sytologinen havainnot esiintyvyys taas LR HPV-tyyppien yhtenä tai useana infektio jää enemmän tai vähemmän vakaa (taulukko 1). Tutkimuksessamme vain kaksi naista ei havaittu vakavia Sytologisten havaintoja, joista HSIL oli positiivinen sekä HR HC2 ja BS-RLB (HPV 33) ja yksi potilas, jolla ASC-H oli negatiivinen molempia menetelmiä.

esiintyvyys HR HPV oli ikä riippuvainen. Korkeimmat esiintyvyys HR HPV havaittiin ikäryhmässä 21-25 vuotta, sekä HR HC2 ja BS-RLB, 34,2% (78/228) ja 36,8% (84/228), vastaavasti, ja laski nopeasti vanhemmilla naisilla . Vuonna ikäryhmä 61-65 vuotta, BS-RLB havaittu 9,1% (2/22) HR HPV positiivisia ja HR HC2 tulokset olivat negatiivisia (kuva 2).

Naisilla, joilla normaali Sytologisten havaintojen esiintyvyys HR HPV oli hieman pienempi verrattuna koko kohortin saavuttaa enintään 31,5% (67/213) ja 34,3% (73/213) iässä 21-25 vuotta, arvioimana HR HC2 ja BS-RLB, vastaavasti (taulukko 2).

havaitseminen HR HPV-DNA HR HC2 ja BS-RLB tuotti yhtäpitäviä tuloksia 91,4% (1273/1393) näytteitä. Korrelaatio oli huomattava (Kappa-arvo = 0,7339).

Out of 120 poikkeavien näytteiden 88 oli BS-RLB positiivinen mutta HR HC2 negatiivisia HR HPV. Näistä 76,1% (67/88) sisälsi HR HPV-tyypit, jotka on kohdistettu HR HC2 asetettu. In 32,8% (22/67) näistä näytteistä useiden HPV-infektio havaittiin. Rokote-HR HPV-tyypit 16 ja /tai 18 havaittiin 31,8% (28/88) näistä näytteistä: in 60,7% (17/28) yhtenä infektio ja 39,3% (11/28) osana usean infektio. Kolme näistä 28 potilasta (10,7%), jossa on useita infektio oli epäilyttävä Sytologisten havainnot (ASC-US) ja loput 89,3%: lla potilaista oli normaali sytologia.

Oli 32 näytteet positiivisia HR HC2 mutta negatiivisia HR HPV BS-RLB. 56,3% (18/32) näistä näytteistä, BS-RLB havaittu LR HPV-tyypit vain (HPV 6, 32, 42, 43, 44, 54, 61, 62, 74, ja 81); loput 43,8% (14/32) näytteistä oli BS-RLB negatiivinen tahansa HPV-tyypille. Keskiarvo RLU /CO näissä 14 näytteissä oli melko alhainen (12,3 RLU /CO), mikä vastaa rajatapaus heikko positiivisuus näyte HR HC2. Vuonna 10/18 näytteet, positiivinen BS-RLB LR HPV-tyypeille vain, LA myös havaita HR HPV-tyypit, useimmiten osana useita infektio. Vuonna 6/14 näytteet negatiivinen BS-RLB tahansa, LA myös havaita HR HPV-tyypit (taulukko 3).

HPV-tyypille

SAMPLE

Sytologinen TULOKSET

HR HC2 [RLU /CO]

BS-RLB

LA

1Normal8.144242,662Normal1.2342423ASC-US14.334242,514Normal3.2005Normal1.742426LSIL35.944,81*31,62,81,52**7Normal1.2008Normal14.34435*9Normal132.70010Normal1.60011Normal1.10012ASC-US2.5424213Normal11.960014Normal6.2740**15Normal1.984242,66,8416Normal2.27616117Normal4.70018Normal1.8035,5919Normal5.9003120Normal1.4344,54*0**21Normal6.1754*31,5422Normal1.470*54,6223Normal1.46425924***Normal5.22623125Normal1.213283,84**26Normal1.8703527Normal10.126161,8128Normal1.1405229Normal5.244359**30Normal3.9005231Normal1.50059,8132Normal23.7766,31Table 3. Tulokset HPV tyyppi pystyy tunnistamaan avulla Linear Array (LA) näytteissä negatiivisia HR HPV BS-RLB mutta positiivinen HR HC2.

* BS-RLB ei havaitse HPV 62, ** LA tekee ei HPV 32, 43, 44, 74; *** HPV 66 avulla ilmaistaan ​​MY09 /11 PCR ja sekvensointi CSV Lataa CSV

Kaikkiaan 35 eri HPV-tyyppien havaittiin: 20 HR ja pHR HPV-tyypit ja 15 LR HPV-tyypit. Esiintyvyys HPV tyyppi ja sytologiset havainto on esitetty taulukossa 4. yleisin HR-tyyppiä HPV 16 (5,4%), minkä jälkeen HPV 56, 39, 53, ja 18, kun taas LR tyyppejä, HPV 42, 54, 44 , 6, ja 61 useimmin havaittu. Esiintyvyyden rokoteainelajien, tarkasti ja kaukaista sukua HPV-tyypit kaikilla naisilla sekä naisilla, joilla oli normaali sytologia olivat lähes identtiset ja on esitetty yhteenvetona taulukossa 1. HPV 6 ja /tai 11 löydetty vain 1,4% (20/1393) ja näytteet, kun taas HPV 16 ja /tai 18 7,5% (104/1393) näytteitä. Läheistä sukua tyypit HPV 31 ja /tai 45 oli läsnä 3,1% (42/1393) ja kaukaista sukua tyypit HPV 33 ja /tai 52 ja /tai 58 3,4% (48/1393) näytteitä.

Sytologinen TULOKSET

-TYYPPIEN

ALL

NORMAALI

ASC-US /AGC-NOS

AGC-NEO /LSIL

ASC-H /HSIL

N

%

N

%

N

%

N

%

N

%

1393100.0130293.5614.4282.020.1N+%N+%N+%N+%N+%HPV ALL39428.333325.63354.12796.4150.0HR HPV31022.325619.72744.32692.9150.0HPV single27870.624774.21751.51348.11100.0HPV multiple11629.48625.81648.51451.900.06201.4191.500.013.600.01120.120.200.000.000.016755.4634.8711.5517.900.018322.3241.846.6414.300.02610.110.100.000.000.031221.6161.234.9310.700.03210.110.100.000.000.033191.4171.311.600.0150.03550.450.400.000.000.039332.4262.023.3517.900.04050.450.400.000.000.042433.1362.846.6310.700.04330.220.211.600.000.044191.4161.211.627.100.045292.1262.034.900.000.051312.2211.646.6621.400.052241.7171.334.9414.300.053332.4251.9711.513.600.054271.9201.569.813.600.056392.8312.446.6414.300.058141.0110.834.900.000.059130.990.734.913.600.06190.690.700.000.000.06220.120.200.000.000.06670.560.500.013.600.06730.230.200.000.000.068201.4161.211.6310.700.070130.9120.900.013.600.07210.100.000.013.600.07370.570.500.000.000.07450.440.311.600.000.08160.440.311.613.600.082120.990.711.627.100.09020.120.200.000.000.011410.110.100.000.000.0Table 4. esiintyvyys HPV-tyyppien seulonta väestöstä Czech naisten Sytologisten havainnot paljastui BS-RLB.

CSV Lataa CSV

Keskustelu

Tutkimus tarjoaa perustiedot HPV tyypille erityisiä esiintyvyys Tšekissä ennen puhkeamista rokottamiseen ja mahdollistaa edelleen valvontaa muutosten esiintyvyyden useiden HPV genotyyppien. Esiintyvyys on tutkittu seulonta väestöstä Czech women. Kaksi tapaa HPV havaitsemiseen käytettiin. Voidakseen tarjota kansainvälisesti vertailukelpoisia tietoja, yleisimmin käytetty kaupallisesti saatavilla joukko HR HC2 valittiin. Toinen menetelmä, toisaalta, sallii hyvin herkkä havaita monenlaisia ​​HPV-tyypit ja myös useita infektioita. Nämä kaksi menetelmää tuotti yhdenmukaisia ​​tuloksia 91% näytteistä. HPV ja HR HPV ovat erittäin yleisiä Tšekin väestöstä. Korkein levinneisyys havaittiin ikäryhmässä 21-25 vuotta. Naisilla yli 55 vuotta, ei useita infektio ja lähes LR tyyppejä havaittu. Suurin osa naisista oli normaali Sytologisten havainnot, vain 6,5% naisista oli epänormaali sytologinen havaintoja. Tämä on yhtä mieltä vuosittaiset tiedot Tsekin suurin sytologinen laboratorio, joka suorittaa noin 600 000 Sytologisiin seulonta sytologia vuodessa. Noin 7,5% naisia ​​seulonnasta populaatiosta sairastui kanssa rokote HR tyypit ja 6,5%: iin tiiviisti ja kaukaista sukua HR tyypit taas LR rokote tyyppejä olivat paljon harvinaisempia (1,4%). Samoin muihin maihin, yleisin HR tyyppi oli HPV 16, mutta muut HR HPV-tyypeille (HPV 56, 39/45, 18, ja 51), jotka olivat yleisimmin havaitut Tsekin populaatiosta eroavat raportoitu Euroopan maiden Bruni et ai. (HPV 16, 31, 18, 39, 33, ja 66) [5].

Meta-analyysit sekä hoitotutkimuksiin HPV tyypille ominaisia ​​esiintyvyys naisilla, joilla oli normaali Sytologisten työn tuloksista on tehty [4,5,23] mutta aiemmin julkaistu tietoja Tsekin [6] ei mukana, koska soveltumattomuus. Tiedot HPV tyypille ominaisia ​​esiintyvyys seulonta väestöstä itäeurooppalaisia ​​ovat edelleen vähäisiä. Yksikään Itä-Euroopan maissa on sisällytetty ensimmäiseen yhdistetyssä analyysit [23]. Meta-analyysi de SanJose et al. vain tietoja Venäjältä analysoitiin samalla Bruni et al. sisältyvät myös tiedot Puolasta, Unkarista, Valko-Venäjä ja Latvia [4,4,5]. Kuitenkin joissakin maissa, esim. Unkari, vain kokonaismäärä esiintyvyys HR ja LR tyyppejä arvioitiin, muiden maiden, rajoitetun määrän HPV-tyyppien analysoitiin vai vain osa HPV positiiviset näytteet kirjoitetaan. Äskettäin tietoja Slovenia on myös julkaistu [24].

maailmanlaajuinen HPV esiintyvyys naisilla, joilla oli normaali sytologia yhdistetyssä analyysissä oli 10,4%, HPV esiintyvyys Euroopassa oli 8,1%, ja jakautuminen vaihteli huomattavasti välillä mantereella. Itä-Euroopassa edusti ainoastaan ​​yhden tutkimuksen Venäjän kanssa 309 naisia ​​ilmoittautunut. HPV esiintyvyys tässä tutkimuksessa oli paljon suurempi kuin muilla Euroopan alueilla (29,1%). HPV 16 oli yleisin tyyppi maailmassa (2,5%) sekä Itä-Euroopassa (7,4%), mutta tämä tulos on tarkasteltava varoen, koska vain 100 HPV positiiviset näytteet kirjoitetaan Venäjän tutkimuksessa. Esiintyvyys HPV 16 muilla Euroopan alueilla oli paljon pienempi (1,6%: sta 3,0%) [4].

Meta-analyysi miljoona naista, joilla oli normaali Sytologisten havaintojen [5] löysi levinneisyys HPV 11,7%, vertailukelpoisesti maailmanlaajuisesti. Tämä meta-analyysi sisältyy tietoja viidestä Itä-Euroopan maissa ja vahvisti huomattavasti suurempaan esiintyvyys HPV näissä viidessä maassa verrattuna muihin Euroopan alueisiin (21,4% vs. 8,8% -10%). Tutkimuksessamme esiintyvyys tahansa HPV-tyypin naisilla, joilla oli normaali Sytologisten havaintojen oli 25,6% ja oli suurempi kuin Puolassa (16,6%). Esiintyvyyden HR HPV-tyyppien naisilla, joilla oli normaali Sytologisten tulokset olivat alhaisemmat Puolassa ja Sloveniassa (9,6% ja 10,7%, tässä järjestyksessä) kuin Tšekissä (19,7% ja. 15,6% BS-RLB ja HR HC2, vastaavasti). Seulonnassa väestöä Venäjältä, Valko-Venäjällä ja Latviassa, esiintyvyys HR HPV-tyyppien oli 27,2%. Koska neljän tutkimuksissa naiset seulonta väestöstä otettiin, erot esiintyvyys voi heijastaa todellista erot populaatioiden neljän Itä-Euroopan maissa tai voidaan katsoa johtuvan siitä, että eri menetelmiä käytettiin HPV havaitsemiseen esitetyllä ennen [5]. Puolan tutkimuksessa käytettiin GP5 + /6 + PCR, joka on vähemmän herkkä kuin muutettua järjestelmää käytettiin tutkimuksessamme. Samanlaisia ​​järjestelmä meidän levitettiin Schmitt et al. [25] seulontaan väestö Belgian women ja yleisyyden saatu tutkimuksessaan olivat verrattavissa tietomme. Slovenian tutkimuksessa, järjestelmä joka kohdistuu vähemmän HPV-tyyppien hyödynnettiin. Kuitenkin tutkimus Kulmala et al. [26], järjestelmää, joka havaitsee ainoastaan ​​yhdeksän HR HPV-tyypit käytettiin ja raportoitu esiintyvyys oli verrattain suuri kuin Tšekin väestöstä. Toinen lähde vaihtelua on ero HR ja LR HPV-tyypit. Analyyseissä, olemme sisällyttäneet sekä HR ja pHR HPV-tyypit kuten HR tyypit (katso materiaalit ja menetelmät). Jos käytettiin samaa määritelmää HR tyyppejä kuin Puolan tutkimuksen [27], HR HPV esiintyvyyden Tsekin väestöstä olisi vielä paljon suurempi, 20,4% koko kohortin ja 17,9% naisilla, joilla oli normaali sytologinen havainnoista. Tuloksemme vahvistavat poikkeuksellisen suuri esiintyvyys HPV seulontaan väestöstä Itä-Euroopan maissa, ja ne ovat myös verrattavissa havaintoja lukuisia muita tutkimuksia ympäri maailmaa yleisimmin käytetty setti HC2 (katso katsaus 5).

seulonta väestöstä Czech women, korkein esiintyvyys HPV havaittiin ikäryhmässä 21-25 vuotta. Korkein levinneisyys saman ikäryhmän löydettiin sekä vähemmän ja enemmän kehittyneiden maiden. Itä-Euroopan maissa, huippu havaittiin ikäryhmässä 25-34 vuotta [5].