Krooninen sairaus

tiivistelmä

Background

Patient johdettu ksenografteja (PDXs) pään ja kaulan alueen syöpä (HNC) ja muiden syöpien edustavat voimakas tutkimus alustoilla. Useimmat ryhmät implantti potilaan kudoksen immuunivajaisiin hiiriin välittömästi vaikka merkitystä tämä aikaväli on empiirisiä. Testasimme hypoteesia, että aika kasvaimen poisto istutusta on ratkaisevan tärkeää PDX johtamisella ja perustaminen.

Methods

tutki aikaa tai tallennusväline vaikuttaa PDX elinkelpoisuuden viemällä kaksi perustettu HNC PDXs ( UW-SCC34, UW-SCC52). Kasvaimet kerättiin, tallennettu jääkylmää media tai suolaliuosta varten 0-48 tuntia, ja istutetaan uusia hiiriin. Kasvaimen kasvu verrattuna kaksisuuntaisella ANOVA ajan suhteen ja varastointiolosuhteissa. Kolme uutta HNC PDXs (UW-SCC63-65) tuotettiin istuttamalla potilaskudos hiiriin välittömästi (aika 0) ja 24 tunnin saatuaan kudosta leikkaussaliin.

Tulokset

Samanlaisia ​​määriä kasvaimen istutettiin kunkin hiiren. Lopussa kokeen, ei todettu merkitsevää eroa keskimääräisessä kasvaimen paino median ja suolaliuoksella varastointiolosuhteet UW-SCC34 tai UW-SCC52 (p = 0,650 ja p = 0,177, tässä järjestyksessä). Eroa kasvainmuodostusta esiintyvyys nähtiin pohjalta aika sadonkorjuun istutusta (≥13 16 kasvaimia kasvoi aina piste). Histologinen analyysi osoitti vahvaa samankaltaisuutta alkuperäiseen kasvaimen kaikissa ryhmissä. Kasvaimet kehitetty sekä Time 0 ja 24 tuntia UW-SCC63 ja UW-SCC64.

Johtopäätökset

osoittivat, ettei tallennusväline eikä aika kasvaimen poisto istutusta (jopa 48 tuntia) vaikuttaa elinkelpoisuuden tai histologisia erilaistumista myöhemmässä passage kahdelle HNC PDXs. Lisäksi olemme paljasti, että tuore potilaskudos on toteuttamiskelpoinen jopa 24 tunnin kuluttua resektio. Tämä tieto on tärkeä, koska se koskee kehittämistä ja jakamista PDXs.

Citation: Stein AP, Saha S, Liu CZ, Hartig GK, Lambert PF, Kimple RJ (2014) vaikutus käsittelyolosuhteissa perustamisesta ja eteneminen pään ja kaulan syöpäpotilaan Johdettu ksenoqraftit. PLoS ONE 9 (6): e100995. doi: 10,1371 /journal.pone.0100995

Editor: Jay F. Dorsey, University of Pennsylvania, Yhdysvallat

vastaanotettu: 24 maaliskuu 2014; Hyväksytty: 2 kesäkuu 2014; Julkaistu: 26 kesäkuu 2014

Copyright: © 2014 Stein et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Data Saatavuus: Tällä kirjoittajat vahvistavat, että kaikki tiedot taustalla olevat havainnot ovat täysin saatavilla rajoituksetta. Kaikki asiaankuuluvat tiedot ovat paperi- ja sen tukeminen Information tiedostoja.

Rahoitus: Tätä työtä tukivat R00 CA160639 (RK), UWCCC ja UWCCC /MIR /WID institutionaalisten apurahat (PL), ja UW ICTR- Shapiro apurahan (AS). Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

hyvin vakiintunut, mutta nyt uudelleen syntymässä malli ihmisen syöpä on potilaan johdettu ksenograftin (PDX) järjestelmä. PDXs kehitetään hankkimalla kasvainnäytteestä suoraan potilaiden ja myöhemmin juurruttamista ja viemällä nämä kasvaimet immuunivajaissa hiirillä [1]. Prosessi kuvattiin ensimmäisen kerran vuonna 1969, jolloin Rygaard ja Povlsen pistetään kasvainsolususpensiota potilaalta, jolla paksusuolensyöpä ihonalaisesti kateenkorvattomiin nude-hiiriin ja valvonta hiiret [2]. He osoittivat suurempaa kasvaimen kasvua kateenkorvattomissa hiirissä kontrolliin verrattuna, mikä käyttö immuunivajaisiin hiirissä tullut yleinen käytäntö PDX kehittämiseen [3]. Äskettäin PDXs on luotu useita syöpiä, kuten haiman [4] – [6], rintojen [7], keuhkosyöpä [8], [9], munuaisten [10] ja pään ja kaulan [1], [11] . Nämä tutkimukset osoittivat, että PDXs säilyttävät ominaisuudet primaarikasvaimen koko sarjanumero kohtia molempia histologiset [7], [8] ja molekyylitason [1], [7], [11] tasoilla. Daniel et ai. osoittivat myös, että niiden ensisijainen pienisoluinen keuhkosyöpä PDX (vain siirrostettiin hiirillä) säilytetään suurempi samankaltaisuus potilaan kasvaimen verrattuna solulinja syntyy samasta PDX [9]. Lisäksi ryhmämme [1] ja muut [12] on onnistuneesti kylmäsäilytetyt ja reanimated PDXs myöhemmin, lisäämällä hyödyllisyys tämän mallin järjestelmään. Siten PDXs edustavat validoitu ja luotettava malli tutkimiseen ihmisen erilaisten syöpien.

Tehokas käyttö PDXs on testaaminen standardin ja uusia hoitoja käytettäessä

in vivo

järjestelmässä suurempi heterogeenisuus kuin geneettisesti hiiri malleja ja merkityksellisempää kasvain mikroympäristölle kuin solulinjat [1], [4], [11]. Perustamisensa jälkeen PDXs monistetaan

in vivo

, ruiskutetaan lukuisia hiiriin, ja hiiret myöhemmin ositettu eri hoitoryhmissä. Kapasiteetti tietyn hoito hidastaa tai pysäyttää kasvaimen kasvua voidaan arvioida vertaamalla keskimääräinen kasvaimen kasvua ajan kullekin ryhmälle verrattuna kontrolliin (käsittelemätön) hiirillä. Tällä tavoin tutkijat voivat arvioida vaikutuksia monien vuorottelevat hoitojen Tietyllä kasvaintyyppi peräisin yhdestä potilaasta. Lisäksi molekyyli- muutoksia aiheuttama eri hoitoja voidaan analysoida keräämällä jälkikäsittelyn kasvainnäytteestä joko flash jäädyttäminen kasvain paloina nestetyppeen genomin laaja tutkimuksiin tai vahvistamisesta kasvaimia formaliiniin seurasi parafiiniupotusta varten biomarkkereiden analyysiin. On myös väitetty, että tämä malli järjestelmää voitaisiin käyttää henkilökohtainen syövän hoidossa tuottamalla PDXs peräisin potilaan syöpä, testaamalla erilaisia ​​kemoterapeuttisten on hiirillä niiden kasvain ja valitsemalla uusi hoito potilaalle perustuvat näihin

in vivo

tuloksiin [13].

on olemassa lukuisia vaihteluita käytetyt menettelyt PDXs. Esimerkiksi jotkut ryhmät kuvaavat kirurgista istutusta pieniä (2-3 mm) kasvain paloina kylkiin [14], kun taas toiset hienontaa kasvaimet luoda solususpensio ja pistä jousitus ihonalaisesti läpi paksun neulan [15]. Lisäksi tiettyjä ryhmiä vain käyttää kateenkorvattomia nude-hiirten [3], toiset käyttää ei-lihavilla diabeetikko sekamuotoinen immuunipuutos (NOD-SCID) hiiriä [7] ja jotkut työllistävät molemmat kannat [1]. Merkittävää on, että nämä eri tekniikat ovat kaikki johtaneet menestyksekkääseen kasvaimen kasvua. Toinen toistuva teema ilmaantuu PDX kehitys on, että kasvaimia tehdään mahdollisimman pian (enintään 3 tunnin kuluessa) alkaen, kun koepala ja ruiskutettiin sitten immuunivajaisiin hiiriin [1], [2], [8], [10 ], [16]. Ryhmämme ym edetä tällä tavoin johtuu uskoa siihen, että aika kasvaimen poisto ja ksenografti istutusta on tärkeää. Kuitenkin, ei ole tietoa kirjallisuudessa viittaa siihen, että kasvaimen paloina on pistää /implantoida niin pian kuin mahdollista hiiriin [17]. Lisäksi vaikka hiiri-to-hiiri passage suoritetaan tyypillisesti mahdollisimman nopeasti, on jälleen vähän tietoa tukemaan tarpeellisuus tätä käytäntöä.

Koska epävarmuus optimaalinen korjuun ja implantaatiotekniikkaa, me sitoutui tässä tutkimuksessa selvittää oliko suhde on kasvupotentiaalia PDX perustuen viiveen alkuperäisestä kasvaimen poisto sen perimmäinen istutettavien hiirillä. Lisäksi olemme pyrkineet onko tallennusväline käytetty käsittelyn aikana viive vaikuttaa PDX elinkelpoisuutta. Tämä työ on tärkeää, koska on olemassa useita tekijöitä ulkopuolella tutkijan ohjaus, joka voi vaikuttaa kykyyn saada kasvain koepaloja suostunut potilaiden ajoissa. Lisäksi kun PDXs on perustettu, uudelleen istutusta edellyttää, että käytössä saajahiiret ja niiden levittämistä muihin laboratorioihin voi vaatia siirtoa. Molemmat näistä kysymyksistä voidaan viivästyttää uudelleen istutusta. Tuloksemme osoittavat, kasvain on edelleen elinkelpoinen ja kykenee kasvamaan seuraavan sukupolven hiirillä jopa vähintään 48 tunnin kuluttua ensimmäisen kasvaimen poiston ja luonne varastointi ratkaisu, on se kudosviljelmäelatusaineeseen tai suolaliuosta, ei ole vaikutusta kasvaimen kasvua. Lisäksi olemme paljasti, että tuore potilas kudosta leikkaussalissa (OR) on toteuttamiskelpoinen ja voidaan perustaa uusi PDX jopa vähintään 24 tunnin kuluttua ensimmäisestä poiston potilaasta. Kyky hidastaa kasvaimen istutuksen on merkittäviä vaikutuksia osalta jakamista näitä resursseja sekä logistiikan alkuperäisen PDX luomista ja ylläpitoa.

Materiaalit ja menetelmät

Hiiret

Kuudesta kahdeksaan viikkoa vanhat miehet ja naiset NOD-SCID gamma (NSG, NOD.Cg-

Prkdc

scid Il2rg

tm1Wjl Twitter /SzJ) hiiriä (hankittiin Jackson Laboratories) käytettiin PDX kehittäminen ja vahvistusta. Kaikki hiiret pidettiin Association for arviointi ja akkreditointi Laboratory Animal Care-hyväksytty Wisconsin Institute for Medical Research (WIMR) Animal Care Facility. Eläimiä pidettiin erityinen taudinaiheuttajista vapaata huonetta, ja he asuivat autoklavoitiin aseptisissa ja mikroisolaattorihäkkeihin häkit enintään neljä eläintä häkkiä kohti. Ruoka ja vesi tarjottiin ad libitum. Kaikki tutkimukset, joissa hiirille tehtiin mukaisesti eläimen protokollan hyväksymä University of Wisconsin (Protocol Number: M02518). Kokeiden aikana kunkin hiiren painon ja kliinisen terveys- arvioitiin viikoittain.

Aiemmin perustettu Patient Johdetut ksenoqraftit

PDXs olivat peräisin, joilla on vasta diagnosoitu tai toistuva pään ja kaulan alueen syöpä ( HNC), jotka ovat suorittaneet kirjallisen suostumuksen mukaisesti IRB hyväksyntää University of Wisconsin. Olemme aikaisemmin kuvattu perustamista meidän PDX mallin yksityiskohtaisemmin [1]. Kuten kasvain näytteitä OR tarjoavat usein vain tarpeeksi kudosta istutettavaksi kahdesta neljään hiiriä, päätutkimukset kuvattu tässä käsikirjoitus hyödyntää perustettu PDXs varhaisessa kulkua. Siirrostamalla ja istuttaminen PDXs suoritettiin ensimmäisen sadonkorjuun kasvainten NSG hiirille, joilla on kasvain edun, siirtämällä kasvaimen steriilissä tavalla 2,0 ml: n Eppendorf-putkeen, jossa on 01:01 seos, media (Dulbeccon Modified Eagle Medium, jossa oli 10% naudan sikiön naudan seerumia, 1% penisilliini /streptomysiiniä ja 2,5 ug /ml amfoterisiini B: tä) ja matrigeeliä (luettelo # 354230, BD Biosciences, Inc.) ja jauhamiseen kasvain tulee alle 1 mm

3 kappaletta. Lopuksi kasvain suspensio vedetään 1 ml ruiskuun 18 neulan ja ihon alle kahteen kylkiin NSG hiirillä.

Experimental Suunnittelu

Kaksi PDXs että osoitti kestävää kasvua alkuvuonna kohtia (UW-SCC34 ja UW-SCC52) valittiin tässä kokeessa. Prosessi suoritettiin erikseen UW-SCC34 ja UW-SCC52 ryhmiä, mutta samanlainen protokollaa molemmilla kerroilla. Ensin neljä NSG hiirillä kaksi kasvaimia kunkin PDX kiinnostavaan tapettiin, ja ajastin käynnistettiin, kun kuolema vahvistettiin. Kaikki kasvaimet kerättiin neljä hiirtä samanaikaisesti. Yhdistettiin kasvaimen paloina punnittiin ja jaettiin tasaisesti neljäntoista 2,0 ml: n Eppendorf putket vakautettava jäällä: seitsemän sisältävän median ja seitsemän suolaliuoksella. Lisäksi yksi kasvain murikka (kutsutaan preimplantaatioal- näyte) kiinnitettiin 10% neutraaliin puskuroituun formaliiniin 48 tuntia ja parafiiniin myöhempää histologista analyysiä. Seuraavaksi yksi media + kasvain putkeen ja yksi suolaliuos + kasvain putki poistettiin jäätä. Jokainen kasvain murikka siirtyi omaan, uusi putki 01:01 seoksella tuoretta väliainetta ja Matrigel, hakattu 1 mm

3 kappaletta, ja ruiskutetaan neljä kylkiin kaksi NSG hiiriä (n = 8). Aika tallennettiin kun kaikki neljä hiiriin ruiskutettiin (Time 0, 40 minuuttia). Tällä tavoin päädyimme kahteen ryhmään tänä ajankohtana: ”Aika 0 Media” ja ”Time 0 Saline”. Molemmat ryhmät koostuivat kahdesta NSG hiiriä kussakin neljä pistoskohtaan. Näin ollen kukin ryhmä oli potentiaalia kehittyä kahdeksan kasvaimia (kuvio 1). Tämä prosessi toistettiin 1, 2, 4, 8, 24, ja 48 tuntia sen jälkeen, kun ajastin käynnistettiin. Tällä välin, kasvaimet media tai suolaliuosta pidettiin 4 ° C: ssa.

Flow kaavio, joka kuvaa koejärjestely.

Kasvainten annettiin kasvaa 3 viikkoa varten UW- SCC34 ja 6 viikkoa UW-SCC52. Keston kasvaimen kasvua sanelee kasvaimen kasvun kinetiikka ja terveyden hiirillä. Lopussa kunkin kokeen, kasvaimet jokaisesta hiiren kerättiin, punnittiin, ja valokuvattiin (korjattu kasvainten 1 ja 2 päivää myöhemmin, että 24 tunnin ja 48 tunnin ryhmään). Jokainen kasvain kiinnitettiin 10% neutraaliin puskuroituun formaliiniin 48 tuntia ja sitten parafiiniin. Yksi tuumori valittiin satunnaisesti kustakin neljätoista ryhmien edelleen histologista analyysiä.

Histologia

Kasvaimen lohkot leikattiin (5 um) ja hematoksyliinillä ja eosiinilla (H 5% -15%) ja kuolion /kystinen muutos (alue 5% -15%). Edustaja kuvia värjättyjä laseja on esitetty kuviossa 4. Seuraavaksi UW-SCC52 ennen implantaatiota kasvaimen arvioitiin ja oli kohtalainen erilaistumista, ei sarveistumisen, 20% nekroosi /kystinen muutos ja infiltratiivinen kuvio (taulukko 3). Jälleen kerran histologia kasvainten seuraavasta kulkua (kaikkina ajankohtina ja molemmat tallennusmuotoihin) oli melko samanlainen jokainen näyttää kohtalainen erilaistuminen, ei keratinisaatio-, jotkut nekroosi /kystinen muutos (alue 5% -25%) ja infiltratiivinen fenotyyppi . Niinpä histologisesti olemme osoittaneet, että sama kasvain kehittyi riippumatta ajasta tai tallennusväline sekä UW-SCC34 ja UW-SCC52.

edustaja kuvia H & E värjättyä dioja kunkin ryhmän sisällä UW- SCC34 ja UW-SCC52 kokeita.

ajan vaikutuksen uusien PDX perustamisesta

Selvitetään 24 tunnin viive kiinnittymisestä ajan (kasvaimen tallennettu media 4 ° C viiveen aikana) ollut vaikutusta PDX laitoksessa kolme uutta HNC PDXs (UW-SCC63, UW-SCC64, UW-SCC65). Suunnilleen sama kuin kasvainten tilavuudet injisoitiin kaksi hiirtä ajan hetkellä 0 ja 24 tuntia kunkin kolmen PDXs. Saat UW-SCC63 ennalta istutusta kasvaimen painot olivat 0,0694 g ja 0,0723 g, kun taas preimplantaatioal- painot olivat paljon alhaisemmat UW-SCC64 (0,0115 g ja 0,0117 g) ja UW-SCC65 (0,0085 g ja 0,0093 g).

Yhdeksän viikon kuluttua alkuperäisen istutuksen, hiirillä, joilla oli jokaisen uuden PDX arvioitiin kasvaimen kasvua. Vain hiirten UW-SCC64 PDX oli riittävä kasvaimen tilavuus Siirtämistä varten. Näin ollen, nämä hiiret tapettiin, ja kaikki kasvaimet erikseen valokuvattiin ja punnittiin (kuviot 5A ja 5B). Keskimääräinen paino Time 0 kasvainten oli 0,104 g (SD 0,156 g) ja 24 tunnin keskiarvo oli 0,060 g (SD 0,137 g). Ei ollut tilastollisesti merkitsevää eroa kasvaimen keskimääräinen paino näiden kahden ryhmän (p = 0,564). Lisäksi oli samanlainen kasvainten määrä, joka syntyi kussakin kaksi ryhmää. Neljä kahdeksasta kasvaimia kasvoi Time 0 ja kolme kahdeksan kehitettiin 24 tunnin ryhmässä. Saat UW-SCC63 oli kolme palpoitavissa kasvaimia Time 0 ryhmä ja kaksi 24 tunnin kohortissa. Toisaalta, UW-SCC65 ei osoittanut mitään tunnettavissa kasvaimia kummassakaan ryhmässä. Kaiken kaikkiaan näyttää siltä, ​​että PDXs jotka pystyivät sijoittautua, 24 tunnin viive ei vaikuttanut PDX elinkelpoisuutta. Mielenkiintoista, preimplantaatioal- kasvaimen paino ei näytä olevan merkittävä vaikutus myöhempien kasvaimen kasvua, koska UW-SCC64 kasvaimet (joka osoitti suurinta kasvua) oli noin kuusi kertaa vähemmän kasvain istutettiin alunperin verrattuna UW-SCC63.

(A) Valokuvia kaikista kasvaimista korjattu lopussa kokeen varten UW-SCC64. (B) Pylväsdiagrammit kuvaa keskimääräistä kasvaimen painot Time 0 ja 24 tunnin ryhmien UW-SCC64 kokeilu.

Keskustelu

PDXs ovat tärkeä ja validoitu malli tutkimus lukuisia eri syövän alatyyppejä, etenkin tutkimuksessa uusien ja standardin kemoterapeuttisia. Koska potilas kudos on arvokas ja usein vaikea saada, tutkijat on otettava huolellisesti optimoida tätä mallia järjestelmää. Tästä syystä halusimme edelleen tutkia mahdollisuuksia rajat PDX siirrostamalla testaamalla hypoteeseja 1) aika kasvaimen poisto todellisesta istutusta uusiin NSG hiirillä on tärkeä ja 2) tallennusväline vaikuttaa PDX elinkelpoisuuden ja kasvun. Yllättäen huomasimme, että kumpikaan tallennusväline (media tai suolaliuosta) eikä aika tallennustilaa (jopa 48 tuntia 4 ° C: ssa) vaikuttaa PDX kasvu ja toimipaikka myöhemmin passage. Lisäksi olemme paljasti, että viivyttää kiinnittymisestä tuoreen potilaskudos jopa 24 tuntia (kasvain tallennettu jääkylmässä media aikana viive) ei vaikuttanut alkuperäiseen PDX perustamista.

täysin ymmärrä merkitystä ja tarpeellisuutta PDXs vuonna alalla syöpätutkimuksessa, se on arvokasta arvioitaessa muita saatavana malleja sekä niiden vahvuudet ja sudenkuoppia. Ensinnäkin, solulinjoja on ollut tärkeä rooli historiassa syöpäsairaus tutkimuksen ja lääkekehityksen. HeLa-solut edustavat ensimmäistä ihmisen syöpäsoluja kasvatetaan laboratoriossa, ja analyysien näiden solujen ja muut solulinjat, jotka seurasivat antaneet paljon nykyiseen molekyylitason ymmärtäminen syöpä [19]. Lisäksi standardi prekliinisen prosessi tutkii uusia syövän kemoterapeuttiset National Cancer Institute (NCI) alkaa arviointi

in vitro

aktiivisuus 60 perustettu syöpäsolulinjoissa (NCI-60) ja sen jälkeen

in vivo

arvion näistä solulinjoista hiirillä kautta sekä onttokuituanalyysi ja ksenografteissa [20], [21]. Äskettäin pätevyyttä hyödyntäen solulinjoja korvikkeita primaarikasvaimen on asetettu kyseenalaiseksi [22]. Gillet et ai. osoitettava geneettisiä analyysejä että mitään korrelaatiota välillä ollut potilaan kasvaimissa ja perustettu syöpäsolun linjat, ja itse asiassa solulinjoissa synnytti suurempi yhdennäköisyys toisilleen kuin kliiniset näytteet [23]. Muita ryhmiä ovat myös paljastaneet keskeisiä eroja ensisijaisen kasvaimia ja solulinjat [24]. Kuitenkin tutkijat huomauttavat myös, että merkittäviä koulutusjakson muutokset edelleen olemassa näissä kasvainsoluissa [25]. Siten huolimatta eroista suhteessa primaarikasvaimen, geneettiset ekspressioprofiileja voidaan käyttää valitsemaan solulinjoja tiettyyn analyysiin [26] – [28].

Koska kasvava huoli edustavuus solulinjojen ensisijainen syöpä, on tarvetta lisätä malleja täydentää tätä työtä. Siirtogeenisen hiiren mallia edustavat toisen, erillisen, joka on käytetty syöpätutkimuksessa. Nämä mallit ovat useimmiten käytetään arvioimaan asiaankuuluvien onkogeenisten mutaatioiden kasvaimien syntyyn ja terapeuttisen vasteen ihmisen erilaisten syöpien kuten haiman adenokarsinooma [29], [30], pehmytkudoksen sarkooma [31], keuhkon adenokarsinooma [32] , HNC [33], ja monet muut. Laajuus kysymyksiä, voidaan tutkia siirtogeenisiä hiiriä on varsin laaja esimerkkinä ennen tutkimuksia siirtogeenisiä hiiriä, jotka ekspressoivat ihmisen papilloomaviruksen (HPV) onkogeenien jossa välisiä vuorovaikutuksia näitä erityisiä onkogeenien kanssa Fanconin anemia puute geenejä [34], estrogeeni ja kohdunkaulan syövän etenemisen [35], ja onkoproteiinia ilmaisun suhteessa lymfosyyttikuljetusta [36] on selvitetty. Kaiken kaikkiaan siirtogeenisen hiiren tutkimus voi tarjota ainutlaatuista tietoa mekanismeista karsinogeenisia mutaatioiden ja mahdollisten hoitotoimenpiteiden. Nämä mallit ovat yleensä tehokkaita ajo onkogeenimutaatiot ja muut hyvin erityinen geneettisiä muutoksia, jotka voivat rajoittaa niiden soveltuvuus kliinisiin onkologian.

PDX mallissa kunkin potilaan syöpä on ainutlaatuinen ja edustaa lukemattomia geneettisiä muutoksia että jaksotetaan ajan syöpä kehittyi. Nämä solut eivät ole tarkoituksellisesti muutetaan tai pakotetaan yli-ilmentää tiettyjen proteiinien, kuten solulinjojen ja siirtogeenisen hiiren mallia, vastaavasti. Ihannetapauksessa tämä tarkoittaa PDXs tulisi lähemmin muistuttavissa primaarikasvaimen. Kuten on kuvattu johdannossa, monet ryhmät ovat vahvistaneet hyödyllisyyttä tämän järjestelmän, mukaan lukien kyky PDXs kerrata metastaattista potentiaalia primaarikasvaimen [7], [37]. Tärkeää on, Tentler et ai. äskettäin tutkinut translationaalisen track record PDXs syöpätautien lääkkeiden kehittäminen monenlaisia ​​syöpiä, ja tulevaisuudessa PDXs kehittämiseen ennakoivan biomarkkereiden kliinisten kokeiden näyttää lupaavia [17].

PDXs voidaan ruiskuttaa hiiret joko potilaalle tehdä tai heterotooppi- tavalla [17]. PDXs että olemme luoneet, käyttää ja kuvattu koko tämän paperin istutettiin heterotooppinen muoti koska HNCs kasvatettiin ihon alle hiiriin. Muut ryhmät opiskelevat haiman [4], [6], keuhko [9], [10], ja munuaisten [10] syöpiä ovat myös hyödynnetty ihonalainen kasvaimen istutuksen työstään. Ihonalainen kasvaimet jotta helpottaa pääsyä koon mitat harpilla aikana terapeuttinen tutkimuksissa. Lisäksi kasvaimet voidaan kasvattaa huomattavasti suurempaa ihon alle verrattuna potilaalle tehdä sivustoja kuin haittaa aiheutuisi hiiret. Tällä tavalla ihonalainen kasvaimet mahdollistavat suuremman vahvistusta tämän arvokkaan kudos, joka voidaan sitten ottaa talteen histologista sekä molekyylitason analyysit ja siirrostamalla uusia hiiriä. Orthotopic istutusta, jolloin kasvaimen solut ruiskutetaan alkuperäisistä tiloista, edustaa toista kannattavalla tavalla levittämään ja tutkia PDXs. Tätä tekniikkaa on kuvattu rintojen [7], aivojen [38], ja HNCs [37], [39]. Arvellaan, että tämä malli mahdollistaa kasvainten kehittää entistä edustavan mikroympäristön [39]. Todellakin tämä järjestelmä on erityisen hyödyllinen opiskeluun etäpesäke [7], [37]. Kuitenkin erityisesti pään ja kaulan alue, vain pieni kasvain määriä voidaan generoida kuin haittaa aiheutuisi hiiret. Qiu et ai. dokumentoitu, että kahden viikon kuluttua hiirille suun kautta PDXs vaadita muunnettu ruokavalio johtuu vaikeus syöminen [37]. Koska nämä pienet kasvaimen kokoa, on vaikea levittää HNC PDXs kasvanut ortotooppisesti.