Krooninen sairaus

Protein metylaatio on posttranslationaalinen modifikaatio, joka useimmiten esiintyy arginiini ja lysiini jäämiä. Kun metyylitransferaasit tippuu pois hiirillä, se voi johtaa sikiön kuolleisuutta tai ennenaikaiseen kuolemaan, joka osoittaa elintärkeä biologinen rooli tämän ryhmän entsyymejä. Ennätys Metyloitujen peptidin numero tunnistettu yhdessä kokeessa on 249 arginiini metylaatiokohtia.

Täällä olemme kehittäneet erittäin spesifisiä vasta-aineita arginiini ja lysiini metylaatio. Sen jälkeen immunoaffiniteetti- rikastamiseen ja massaspektrometria analyysi, tunnistimme yli 1000 arginiini metylaatiokohtia ihmisen solulinjassa ja hiiren kudoksissa, ja 160 lysiiniä metylaatiokohtia ihmisen solulinjassa HCT116.

Ensinnäkin, olemme kehittäneet vasta-aineita metyloitu lysiiniä, käyttäen peptidi kirjasto, joka oli yksi modifioitu lysiiniä peptidissä kirjasto, joka sisältää aminohappoja ympäröivän asemissa.

Seuraavaksi vetää alas metyloitu peptidin ja analyysi ne LC /MS /MS: llä. Sitten olemme luokitelleet arginiini metylaatiokuvion muodon hiiren aivoissa ja alkio.

Vihdoinkin olemme merkitty koko proteiini dimetyloimalla in vitro. Tämän keinotekoisen näyte tunnistimme yli tuhansia metyloitua peptidiä kuitenkin normaali näyte on vähemmän kuin 100 lysiiniä metylaatiokohtia, mikä viittaa siihen, että tämä muutos on rajoitettu pienessä määrässä proteiineja.

metylointi arginiinia ja lysiini valkuaisainejäämiä on ollut tiedossa jo vuosia, haasteena alalla puuttuu välineiden ja menetelmien tutkimiseen nämä muutokset. Tämä tutkimus antaa tehokkaita työkaluja saada käsityksen alan proteiinin metylaation.

MC4R on G-proteiiniin kytkeytynyt reseptori, joka sitoutuu? Melanosyyttejä stimuloiva hormoni (MSH). Hiirimalleissa MC4-reseptoreihin on havaittu olevan osallisena syömiskäyttäytymisen, metabolian säätelyssä, seksuaalinen käyttäytyminen, ja miehen erektiota. Sekä jyrsijöillä ja ihmisillä, melanokortiini-4-reseptorit (MC4Rs) tukahduttamaan ruokahalua ja estää liikalihavuutta. Aktivointi melanokortiini-4-reseptorit (MC4Rs) pidättää ruokinta ja ehkäisee lihavuutta.

poistetaan ja uudelleen ilmaisseet MC4Rs peräisin CRE ilmentävien neuronien ja havaittu fenotyyppi. Koska keskeiset MC4R ilmentävien neuronien ovat glutamatergisiä, on lähes varmaa, että ne vapauttavat glutamaattia ja kiihottaa niiden alavirran kohde neuronien.

Seuraavaksi, me osoitamme, että MC4Rs on gluta- neuronit ovat tarpeen estämään hyperphagia ja lihavuus. Sitten meillä on rakentaa MC4Rs vain SIM1 neuronien pelastettiin? 60% liikalihavuuden ja 100%: n ylensyöminen on MC4R-null hiiret. Tämä tulos osoittaa, että MC4Rs on SIM1 neuronien säännellään ruokinta. Koska transkriptiotekijä SIM1 tarvitaan PVH kehittämiseen.

Yhteenvetona osoitamme, että MC4R ilmentävien neuronien säätelevä ruokinta ovat SIM1 +, joka sijaitsee PVH, glutamatergiset eikä GABA, eivätkä ilmaise oksitosiini, kortikotropiinia -releasing hormoni ja vasopressiini. Tunnistamme alavirtaan ennusteet näistä glutamaterginen neuronien sivusuunnassa parabrachial ydin, joka voisi välittää ruokahalua tukahduttamaan vaikutuksia.