Krooninen sairaus

tiivistelmä

kliinistä merkitystä ihmisen papilloomaviruksen (HPV) niska etäpesäke syövän tuntemattomasta ensisijainen (CUP) ei ole vakiintunut. Meidän tarkoituksena oli korjata suhdetta HPV tila välillä etäpesäke ja primaarikasvaimen, ja myös merkitystä HPV aseman suhteen radiologisesti havaittu kystinen etäpesäke pään ja kaulan levyepiteelisyöpä (HNSCC) ja CUP. HPV-DNA tutkittiin 68 Hyväksytty paria etäpesäke ja primäärikasvain ja etäpesäke 27 kupit. Kirurgisesti käsitelty kupit, p16 tutkittiin immunohistokemiallisesti. Kun nielurisojen poisto osoittautui okkultismin nielurisojen syövän CUP, HPV-DNA ja p16 tutkittiin myös okkultismin ensisijainen. Kystinen etäpesäke on varjoainetehosteisiin tietokonetomografiakuvauksilla korreloi ensisijainen päällä ja HPV asema toisessa sarjassa 255 HNSCCs ja kupit tunnettujen HPV- statuksesta. Etäpesäke oli HPV-positiivinen 19/37 (51%) suunielun SCC (OPSCCs) ja 10/27 (37%) kupit, mutta ei ei-OPSCCs. Neste kerättiin kystinen etäpesäke käyttäen ohut neula toive kahdessa OPSCCs ja yksi CUP, ja kaikki nestekertymiä olivat HPV-positiivisia. HPV-tilan, mukaan lukien HPV-DNA, genotyyppi, ja fyysinen tila, kuten myös ekspressiokuviota p16 olivat yhdenmukaisia ​​etäpesäke ja primäärisen tai piilevän primaarikasvaimen. Occult nielurisojen syöpä todettiin useammin p16-positiivisia CUP kuin p16-negatiivinen CUP (riskisuhde (OR), 39,0; 95%: n luottamusväli (CI), +1,4-+377,8; P = 0,02). Radiograafisesti kystinen etäpesäke oli nimenomaan OPSCC ja CUP, ja oli HPV positiivisuus suhteessa nekroottista tai kiinteitä etäpesäke (OR, 6,2; 95% CI, 1,2-45,7; P = 0,03). Lopuksi HPV tila pysyy muuttumattomana jälkeen etäpesäke. Okkulttisen ensisijainen HPV-positiivisten CUP on todennäköisesti lokalisoitu suunieluun. HPV tila määritetään ohutneula-aspiraatteja helpottaa diagnoosin kystisen etäpesäke.

Citation: Yasui T, Morii E, Yamamoto Y, Yoshii T, Takenaka Y, Nakahara S, et ai. (2014) ihmisen papilloomaviruksen ja Kystinen etäpesäke vuonna nielusta Syöpä ja syöpä Tuntematon Primary alkuperä. PLoS ONE 9 (4): e95364. doi: 10,1371 /journal.pone.0095364

Editor: Craig Meyers, Penn State University School of Medicine, Yhdysvallat

vastaanotettu 11 joulukuuta 2013 mennessä; Hyväksytty 25 maaliskuuta 2014; Julkaistu: 21 huhtikuu 2014

Copyright: © 2014 Yasui et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Kirjoittajat ei ole tukea tai rahoitusta raportoida.

kilpailevat edut: kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Kohdunkaulan imusolmuke etäpesäke syövän tuntemattomasta ensisijaisen ( CUP) on harvinainen kliininen kokonaisuus ja nykyisin enintään 3% pään ja kaulan levyepiteelisyöpä (HNSCC) [1]. Monissa tapauksissa sen jälkeen Alkajaisesitelmän CUP, ensisijainen sivusto paljastetaan pääasiassa nielu, erityisesti nielurisa ja pohjan kielen [2]. Suunielun okasolusyöpä (OPSCC) etiologisesti luokitellaan kahteen eri alatyyppiä; yksi on tupakan liittyviä, kun taas toinen on aiheuttanut ihmisen papilloomaviruksen (HPV) infektio [3], [4]. Yli-ilmentyminen p16 toimii korvikemarkkerilta HPV-infektio, vaikka osajoukko p16-positiivisia kasvaimia ovat HPV-negatiiviset [4]. HPV-positiivisten ja /tai p16-positiivisia OPSCC ensisijaisesti syntyy nielurisa ja pohjan kielen [4], mikä viittaa merkitystä HPV CUP.

HPV esiintyvyys etäpesäke peräisin HNSCC on ollut hyvin tutkittu; on osoitettu, että HPV-positiiviset etäpesäke on spesifinen OPSCC [5], [6], kun taas suhde HPV tilan välillä primaarikasvaimen ja sen vastaava etäpesäke ei ole vakiintunut. Vaikka joukko tutkimukset ovat osoittaneet hyvää yksimielisiksi HPV aseman välillä primaarikasvaimen ja etäpesäke, otoksen koko kunkin tutkimus oli pieni, ja HPV fyysinen tila ei ollut osoitettu [7] – [9]. HPV esiintyvyys etäpesäke peräisin CUP on raportoitu vaihtelevan 28-92%, riippuen määrittelystä CUP [8] – [11], kun taas suhde HPV tila välillä etäpesäke ja sen vastaava okkultismin primaarikasvaimen ei ole vahvistettu.

yhdistys OPSCC histologisesti todettu kystinen etäpesäke on tunnettu [12], kun taas suurin osa okkultismin esivaaleissa vuonna CUP on histologisesti todettu kystinen etäpesäke on lokalisoitu nielurisa tai pohjan kielen [13]; tämä viittaa siihen, osallistuminen HPV-infektion muodostumiseen kystisen etäpesäke. Goldenberg et ai. analysoitu HPV asema leikeltiin kudokset kaulat OPSCC ja CUP potilaita, ja havaitsi, että 87% (13/15) kystisen metastaattisen solmujen olivat HPV-positiivisia [14]. Toisessa tutkimuksessa, on raportoitu, että Lateraalinen halkeama kysta osoittautuu usein kystinen etäpesäke jälkeen kirurgisia toimenpiteitä seurasi histopatologinen tutkimus [15]. Syynä tähän on se, että sekä kystinen etäpesäke ja Lateraalinen halkeama kysta esillä radiologisesti sivusuunnassa kohdunkaulan kystat, ja että herkkyyttä koskevat havaitseminen SCC solujen kystistä nestettä avulla cytopathological tutkimus on huono. Niinpä nonsurgical erotusdiagnoosi näiden kahden yksikön suhteen HPV tila on kliinistä merkitystä. Erotusdiagnostisesti edellyttää paitsi välisestä assosiaatiosta HPV- statuksesta ja radiologisesti todettu kystinen etäpesäke, mutta myös kehitystä HPV analyysi kystinen nesteen talteen hieno neula toive (STT).

Olemme suunnitelleet nykyisen tutkimuksen paremmin ymmärtää kliinistä merkitystä HPV aseman suhteen etäpesäke peräisin CUP. Tätä varten tutkimme HPV tilan, mukaan lukien HPV-DNA, genotyyppi, ja fyysinen tila, pareittain ensisijaisen kasvaimen ja etäpesäke suuri joukko HNSCC, ja arvioidaan suhde primaarikasvaimen ja etäpesäke koskien HPV tila. Tutkimme lisäksi paitsi HPV esiintyvyys etäpesäke peräisin CUP, mutta myös suhde etäpesäke ja sen vastaava okkultismin nielurisojen syöpä (osoittautunut jälkeen nielurisojen poisto) osalta HPV- statuksesta ja p16 ilme kuvio. Lisäksi olemme tutkineet suhdetta radiologisesti havaittu kystinen etäpesäke ja tärkein ja HPV asema, jossa painotetaan HPV havaitsemiseen kystinen nestettä.

Materiaalit ja menetelmät

Ethics Statement

protokolla tämän tutkimuksen hyväksyi Institutional Review Board of Osakan yliopisto joulukuussa 2004. Kaikki potilaat jos kirjallinen lupa.

potilaat

HPV tilan ensisijaisen kasvain ja sen vastaava etäpesäke, sekä HPV asema etäpesäke peräisin CUP, käsiteltiin sekä takautuva ja mahdollisille asetukset. Vuonna retrospektiivinen asetus formaliinikiinnitetyt parafinoidut (FFPE) yksilöt 28 pareina pää- ja etäpesäke ja 17 CUPS otettiin. Kaikki kasvaimet olivat kirurgisesti leikattiin tammi 2005 ja maaliskuussa 2010 puolelle ilman mitään edeltävää käsittelyä, ja oli histopatologisesti diagnosoitiin okasolusyöpä. Vuonna mahdollinen asetus, yhteensä 53 epäilyttäviä imusolmukkeisiin HNSCCs ja kupit otettiin. Kudosnäytteistä epäilyttäviä primaarikasvainten ja FNA yksilöitä epäilyttäviä etäpesäke saatiin avohoidossa välillä huhtikuussa 2010 ja syyskuu 2012 Biopsianäytteet ja FNA näytteet säilytettiin RNAlater RNA vakauttaminen reagenssia (QIAGEN Inc., Valencia, CA, USA) ja puskuri ATL (QIAamp Mini Kit: QIAGEN Inc.), tässä järjestyksessä. Kun nesteen keräys tehtiin käyttämällä FNA, sen sentrifugaatti varastoitiin edellä kuvatulla. Vain yksi sykli FNA toteutettiin HPV analyysiä, kun taas FNA toistettiin tarpeen cytopathological analyysiä. Kun nielurisojen poisto paljasti piilevän ensisijainen kasvain CUP potilailla FFPE näyte okkultismin ensisijainen analysoitiin HPV-DNA ja p16. Expression of p16 tutkittiin myös kirurgisesti leikattiin etäpesäke peräisin CUP riippumatta asetuksista. Radiografia- analyysi, yhteensä 255 HNSCC ja CUP potilasta, joille oli tehty esikäsittely varjoainetehosteisiin CT ja olivat osoittautuneet patologisesti olevan imusolmukkeisiin, otettiin. Tämä Potilaspopulaatiosta retrospektiivien sarjaa 45 HNSCCs /kupit, mahdollisen sarjassa 50 HNSCCs /kupit, ja lisäksi sarjan 160 HNSCCs. HPV-tila lisää sarjan oli arvioitiin käyttäen FFPE biopsianäytteistä primaarikasvaimen [16]. Diagnoosi CUP tehtiin jälkeen perusteellisen workup ei havaita primaarikasvaimen huolimatta patologisesti todistettu etäpesäke. Jatkokäsittely sisälsi seuraavat: sairaushistoria; lääkärintarkastus; niska CT ja /tai MRI; nielussa tähystys; ruoansulatuskanavan yläosan tähystykseen; limakalvon koepala Oropharynksin ja nenänielun; ja

18F-fluorideoksiglukoosi positroniemissiotomografia (FDG-PET) tai FDG-PET /TT. Nielurisojen poisto ei sisälly edellytyksiä, koska periaatteessa nielurisojen poisto suoritettiin samanaikaisesti kauladissektio kun kasvain oli kokoisen.

Detection ja kirjoittamisesta korkean riskin HPV-DNA ja arviointi HPV16 fyysistä tilaa

DNA uutettiin FFPE näytteitä käyttäen DNeasy kudoksen (QIAGEN Inc.), ja tuoreista näytteistä käyttäen QIAamp Mini Kit (QIAGEN Inc.). Läsnäolo HPV-DNA seulottiin avulla sisäkkäisiä polymeraasiketjureaktion (PCR) käyttäen PGMY09 /11 alukesettiä (perus PCR) ja GP5 + /6 + pohjamaali setti (toissijaisia ​​PCR), kuten aiemmin on raportoitu [17] . Toissijainen PCR-tuotteet puhdistettiin ja sekvensoitiin suoraan käyttäen 3100 Genetic Analyzer (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA). Kirjoittamalla saavutettiin vertaamalla sekvenssi kanssa tunnettujen HPV-tyypit käyttäen NCBI BLAST-ohjelma (https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi). Fyysinen tila HPV16 osoitettiin mukaan suhde

E2

osoitteeseen

E6

kopioida numeroita, joka määritettiin avulla reaaliaikaisen PCR-monistus

E2

ja

E6

avointa lukukehystä kuten aiemmin raportoitu [18]. Kohdunkaulan syövän solulinja CaSki käytettiin positiivisena kontrollina. [19]

immunohistokemia p16

immunohistokemiallinen analyysi p16 suoritettiin käyttäen 4-um FFPE kudosleikkeiden sopivan positiivisen kontrollin . Seuraavat antigeenin haku käyttäen Pascal paineistettua kuumennuskammion (DAKO, Glostrup, Tanska), leikkeitä inkuboitiin anti-p16-vasta-ainetta laimennoksena 1:500 (klooni LC8: Santa Cruz Biotechnology, Inc., Dallas, TA, USA) . Inkuboinnin jälkeen, anti-p16-vasta-aine havaittiin käyttäen ChemMate EnVision Kit (DAKO) ja visualisoidaan diaminobentsidiiniä kromogeenia. Negatiivinen kontrolli värjäys suoritettiin ilman primaarista vasta-ainetta. Tapaukset luokiteltiin positiivisiksi p16 kun 50% tai enemmän soluista osoitti ydin- ja sytoplasmista värjäytymistä.

Määritelmä kystinen solmun varjoainetehosteisiin CT

määritelmä kystinen solmujen contrast- tehostettu TT oli perusteiden mukaisesti ilmoittamien Goldenberg et al. [14]. Solmut, joilla on pyöreä tai soikeissa ohut (alle 2 mm) parantaa kapseli, homogeeninen vesi vaimennus eikä sisäistä monimutkainen, jotka olivat heterogeenisiä, tai oli hyvä alue luokiteltiin kystinen (Fig. 1a). Solmut paksummat seinien ja /tai heterogeeninen, kompleksi keskeinen pieni vaimennus luokiteltiin nekroottisen (Fig. 1b); kun taas solmut homogeeninen kiintoainepitoisuus luokiteltiin kiinteitä (Fig. 1 c).

Huomaa kontrasti lisäävä ohutseinäiset ja homogeeninen pienitiheyksistä pitoisuus kystistä etäpesäke.

tilastollinen analyysi

symmetria HPV aseman ja /tai p16-ilmentymisen välillä primaarikasvaimen ja sen vastaava etäpesäke tutkittiin käyttäen kappa testiä. Ero fenotyyppi HPV /p16 välillä etäpesäke peräisin CUP (ja ilman okkultistisen nielurisojen syöpä) tutkittiin käyttäen Fisher-Freeman-Halton tarkka testi. Väliset suhteet okkultismin Nielurisoista syövän ja HPV aseman välillä okkultismin Nielurisoista syövän ja p16 ilmaisun tutkittiin avulla yhden muuttujan analyysin käyttäen logistista regressiomallia ja Clopper-Pearson tarkka testi, vastaavasti. Erot esiintyvyys kystisen etäpesäke mukaan ensisijaisen sivuston arvioitiin avulla yhden muuttujan analyysin avulla logistisen regressiomallin tai Clopper-Pearson tarkka testi tarvittaessa. Suhde HPV- statuksesta ja kystisen etäpesäke arvioitiin avulla yhden muuttujan analyysin avulla logistisen regressiomallin. Kaikki tilastolliset testit olivat kaksisuuntaisia. P-arvot 0,05 katsottiin olevan tilastollisesti merkitsevä. Kaikki tulokset analysoitiin käyttämällä JMP Version 10,02 ohjelmisto (SAS Institute, Cary, NC, USA).

Tulokset

suhde HPV aseman välillä ensisijainen ja etäpesäke vuonna OPSCC

vuonna retrospektiivinen ympäristössä, 40% (6/15) ja OPSCCs oli HPV-positiivisia, ja 60% (9/15) oli HPV-negatiivinen, jotka koskevat sekä primaarikasvaimen ja sen vastaava etäpesäke (taulukko 1). Läsnäolon tai puuttumisen HPV-infektion oli yhdenmukainen välillä primaarikasvaimen ja sen vastaava etäpesäke, osoittaa samankaltaisuuden HPV tilan välillä (P 0,0001). Huomata, on se, että 17% (1/6) ja HPV-positiiviset OPSCCs oli useita metastasoitunut solmut, jotka kaikki olivat HPV-positiivisia. Toisaalta, 33% (3/9) HPV-negatiivisten OPSCCs oli useita metastasoitunut solmut, jotka kaikki olivat HPV-negatiivinen. Mikään 13 ei-OPSCCs (5 hypopharyngeal, 4 kurkunpään, ja 4 suusyöpä) olivat HPV-positiivisia.

Mitä mahdollisille asetusta, PCR-analyysi ei onnistunut 6% (3/53 ) tapauksista huonon DNA valmistaminen FNAs. Kuitenkin toistuva FNAs osoituksena maligniteetti kaikissa kolmessa näistä tapauksista. Näin ollen ennakoiva analyysi rajoittui 50 tapausta, jotka lopulta diagnosoitiin perusteellinen kliininen workup olla seuraavat syövät: 22 suunielun; 2 nenänielun; 7 hypopharyngeal; 7 kurkunpään; 2 suun; ja 10 kuppia. Sekä primaarikasvaimen ja etäpesäke, 59% (13/22) ja OPSCCs oli HPV-positiivisia, kun taas 41% (9/22) ja OPSCCs ja 100% (18/18) ei-OPSCCs olivat HPV negatiivinen sekä primaarikasvaimen ja sen etäpesäke; jälleen, tämä osoitti samankaltaisuus HPV tilan välillä primaarikasvaimen ja etäpesäke (P 0,0001; taulukko 1). Yhdessä 51% (19/37) ja OPSCCs olivat HPV-positiivisia, jotka kaikki ovat peräisin joko nielurisa tai kielen tyveen. Kuten taulukoissa 2 ja 3, sekä HPV-genotyypin ja fyysinen tila olivat yhdenmukaisia ​​primaarikasvaimen ja etäpesäke (P 0,0001). HPV16 osuus oli 95% (18/19) HPV-positiivisten tapausten ja HPV33 havaittiin jäljellä yhdessä tapauksessa. Täydellinen virus integraatio todettiin 56% (10/18) HPV16-positiivisia tapauksia, kun taas loput 44% (8/18) HPV16-positiivisia tapauksia osoitti sekoitus episomaalisen ja integroidun virus muotoja.

HPV esiintyvyys CUP ja suhde HPV tila välillä okkultismin ensisijainen ja etäpesäke

takautuvan ja mahdollisille asetukset, 35% (6/17) ja 40% (4/10 ) kuppeja oli HPV-positiivinen, vastaavasti, mikä osoittaa, että yhteensä 37% (10/27) kuppeja olivat HPV-positiivisia (taulukko 1). Yksityiskohtaiset ominaisuudet kupit suhteen HPV esitetään taulukossa S1 taannehtivaa asetus ja taulukossa S2 mahdolliselle asetusta. HPV16 ja HPV18 osuus oli 80% (8/10) ja 20% (2/10) ja 10 HPV-positiivisten tapausten, vastaavasti. Täydellinen virus integraatio todettiin 63% (5/8) HPV16-positiivisia tapauksia, kun taas loput 38% (3/8) HPV16-positiivisia tapauksia osoitti sekoitettu virus muotoja. On huomattava, että neste kerättiin FNA kolmessa tapauksessa (2 OPSCCs ja 1 CUP) on mahdollinen asetus. Kaikki kolme nestekertymiä todettiin HPV-positiivinen, vaikka toistuva FNA sytologia ei havainnut pahanlaatuisia soluja yhdessä niistä.

27 potilasta, joilla CUP, 19 koki nielurisojen yhdessä kauladissektio, joka paljasti okkultistisen nielurisojen syöpään 32% (6/19). Suhde etäpesäke ja sen vastaava piilevän nielurisojen syövän suhteen HPV asema ja p16-ilmentymisen on esitetty yhteenvetona taulukossa 4. fenotyyppi HPV aseman ja p16: n ilmentyminen oli yhdenmukaista välillä etäpesäke ja sen vastaava piilevän nielurisojen syöpä (P = 0,01). Lisäksi, kuten on esitetty taulukoissa 2 ja 3, HPV-genotyypin ja fyysinen tila olivat yhdenmukaisia ​​etäpesäke ja sen vastaava okkultismin nielurisojen syöpä. Kuva. 2 kuvaa hematoksyliinillä ja eosiinilla värjäys ja p16 immunohistokemian piilevän tonsillar syövän kystistä etäpesäke. Pinnallisen limakalvon kerros nielurisojen todettiin olevan ehjä, vaikka syöpäsolut ilmentävät p16 olivat näkyvästi crypt kerros invaasion limakalvon alaista kerrokseen (Fig. 2a ja 2b). Syöpäkudoksen että rajattu ohut kystinen seinä hajanaisesti ilmaistaan ​​p16 (Fig. 2c ja 2d).

Mittakaavapalkki vastaa 1 mm.

Huomattavaa on, että 100% (6/6) ja kupit paljastettiin okkulttisten nielurisojen syöpä ilmaistu p16, kun taas 50% (3/6) oli HPV-positiivisia. Jyrkästi, vain 23% (3/13) ja 15% (2/13) kuppien ilman paljastettiin okkultismin nielurisojen syöpä oli p16-positiivisia ja HPV-positiivisia, tässä järjestyksessä. Ero jakeluun HPV /p16 fenotyypit oli tilastollisesti merkitsevä välillä kupit, ja ilman paljastettiin okkultismin nielurisojen syöpä (P = 0,004); Tämä havainto sai meidät tutkimaan suhdetta okkultismin Nielurisoista syövän ja HPV tila tai p16 ilmentymistä etäpesäke peräisin CUP. Kuten taulukossa 5 esitetään, se mahdollisuus, että piilevä nielurisojen syöpää voitaisiin löytää jälkeen nielurisojen poisto oli huomattavasti suurempi, kun etäpesäke päässä CUP oli p16-positiivinen, kuin silloin, kun se oli p16-negatiivinen (odds ratio (OR), 39,0; 95%: n luottamusväli (CI), +1,4-+377,8; P = 0,02). Vaikka okkultistisen nielurisojen syövän todistettiin useammin HPV-positiivisten CUP kuin HPV-negatiivinen CUP, ero ei ollut tilastollisesti merkitsevä (p = 0,17)

Association of radiologisesti todettu kystinen etäpesäke primaarista kasvaimen kohdalle ja HPV- statuksesta

Varjoainetehostettu TT kokonaismäärästä 255 potilasta, joilla imusolmukkeisiin HNSCC tai CUP tarkistettiin (taulukko 6). Mikään 146 ei-OPSCCs (18 nenänielun, 91 hypopharyngeal, 25 kurkunpään, ja 12 suusyöpä) osoitti radiologisesti havaittiin kystinen etäpesäke, kun taas 6% (5/82) ja OPSCCs ja 11% (3/27) kupit teki. Kaikki viisi OPSCCs kanssa radiologisesti havaittu kystistä etäpesäke peräisin joko nielurisa tai pohjan kielen. Ilmaantuvuus kystisen etäpesäke oli merkitsevästi pienempi kuin OPSCC kuin OPSCC (OR 0,05; 95% CI, 0,004-0,8; P = 0,03). Tapauksissa kystinen etäpesäke, 38% (3/8) osoitti useiden solmukohtien etäpesäkkeitä, jotka kaikki osallistuvat nekroottisen etäpesäke. Kaikki loput viisi tapausta osoitti yksinäinen solmukohtien etäpesäkkeitä, joka oli kystinen. Koska sekä HPV-infektio ja kystinen etäpesäke olivat ominaisia ​​OPSCC ja CUP, tutkimme yhdistys HPV aseman röntgenkuvissa toteaminen etäpesäke vuonna OPSCC ja CUP (taulukko 7). Verrattuna nekroottisen ja /tai kiinteitä etäpesäke, kystinen etäpesäke oli todennäköisesti HPV-positiivisia (33 vs. 75%, OR, 6,2; 95% CI, 1,2-45,7; p = 0,03). Puolestaan ​​taajuus radiologisesti tunnistettavissa kystisen etäpesäke oli suurempi HPV-positiivisten kasvain kuin HPV-negatiivinen kasvain (15 vs. 3%, OR, 6,2; 95% CI, 1,3-43,8; P = 0,02).

keskustelu

Tässä tutkimuksessa olemme osoittaneet, että HPV-positiiviset etäpesäke on spesifinen OPSCC, erityisesti silloin, kun OPSCC syntyy nielurisa ja kielen tyveen. Olemme myös osoittaneet, että HPV-tilan, mukaan lukien HPV-DNA, genotyyppi, ja fyysinen tila, oli yhdenmukainen välillä primaarikasvaimen ja sen vastaava etäpesäke. Nämä tulokset viittaavat siihen, että okkulttisen primaarikasvaimen of CUP HPV-positiivisten etäpesäke on todennäköisesti lokalisoitu nielu, erityisesti nielurisa tai kielen tyveen. Havainnot koskien sarjan Kupit mukaisesti tämän ehdotuksen. Nielurisojen poisto paljasti okkultistisen nielurisojen syöpään 60% (3/5) ja kupit HPV-positiivisten etäpesäke ja 67% (6/9) ja kupit p16-positiivisia etäpesäke, mutta yksikään 10 kupit HPV-negatiivinen /p16-negatiivinen etäpesäke. Lisäksi olemme osoittaneet ensimmäistä kertaa, että HPV-tilan, mukaan lukien HPV-DNA, genotyyppi, ja fyysinen tila, kuten myös ekspressiokuviota p16 ovat yhdenmukaisia ​​etäpesäke ja sen vastaava piilevän nielurisojen syöpä. Yhdessä olemme luoneet paitsi että HPV tilan kasvain pysyy muuttumattomana jälkeen etäpesäke, mutta myös, että okkultismin ensisijainen sivusto CUP HPV liittyviä etäpesäke esiintyy suunieluun.

Näiden havaintojen perusteella on todennäköisesti tapauksessa CUP HPV liittyviä etäpesäke että okkulttinen primaarikasvaimen on lokalisoitu juuressa kielen, ellei okkulttisen nielurisojen syöpä on osoittautunut jälkeen nielurisojen poisto. Weiss, et ai. raportoitu, että nielurisojen poisto ja sokea biopsia kielen tyven paljastettiin okkultismin primaarikasvaimen kaikissa 12 kupit HPV-positiivisten etäpesäke, ja kaikissa 11 kupit p16-positiivisia etäpesäke [8]. Meidän sarja, nielurisojen poisto ei voitu todeta, okkultismin nielurisojen syöpään 40% (2/5) ja kupit HPV-positiivisten etäpesäke, ja 33% (3/9) ja kupit p16-positiivisia etäpesäke, jossa okkultismin primaarikasvaimen oli tarkoitus paikallistaa kielen tyveen. Lisäksi huomasimme, että nielurisojen poisto ei onnistunut havaitsemaan okkultismin primaarikasvaimen kaikissa 10 kupit HPV-negatiivinen /P16-negatiivinen etäpesäke. Samoin, Park et ai. raportoitu, että nielurisojen poisto ja limakalvon koepala onnistuivat tunnistamaan okkultismin OPSCC vain 7% (2/27) ja kupit HPV-negatiivisten etäpesäke ja 14% (4/29) ja kupit p16-negatiivinen etäpesäke [10 ]. Näyttää siltä, ​​että on vaikea tunnistaa okkultismin primaarikasvaimen käyttäen nielurisojen kun etäpesäke peräisin CUP on HPV-negatiivinen /p16-negatiivinen.

mukaan systemaattinen tarkastelu HPV-tyyppien HNSCC, esiintyvyys HPV18 vuonna OPSCC oli alhainen; HPV18 oli vain 9 909 (1,0%) HPV-positiivisten OPSCC tapauksissa [20]. Lisäksi, suurin osa ( 95%) HPV18-positiivisia HNSCCs ei OPSCCs. Sen sijaan, HPV18 osuus 2 10 (20%) HPV-positiiviset CUPS meidän sarja; Valitettavasti molemmat potilailla, joilla on HPV18-positiivisia kupit ei suoriteta nielurisojen (taulukko S1 ja S2). On edelleen epäselvää, onko vai ei okkultismin ensisijainen sivuston näissä kahdessa kuppia oli nielurisojen. Kun otetaan huomioon edellä mainittu havainto, että ei-suunielun SCC muodostavat valtaosa HPV18-positiivisia HNSCC tapauksissa on todennäköistä, että piilevän ensisijainen HPV18-positiivisia CUP olemassa muualla kuin nielu. Tämä on mielenkiintoinen kysymys, joka on ratkaistava tulevaisuudessa.

OPSCC ja CUP muodostavat usein histologisesti tunnistettavissa kystinen etäpesäke [12], [13]. Kääntäen, kystinen etäpesäke on usein diagnosoidaan väärin kuin on Lateraalinen halkeama kysta [15]. Puolestaan ​​se ei ole ennen kirurgisia toimenpiteitä seurasi histopatologisen tutkimuksen että Lateraalinen halkeama kysta voidaan osoittautunut kystinen etäpesäke. Tämä johtuu siitä, että kystinen etäpesäke ja Lateraalinen halkeama kysta läsnä röntgenkuvin sivusuunnassa kohdunkaulan kystat, ja koska herkkyys cytopathological tutkimus on huono havaitsemiseen pahanlaatuisten solujen kystistä nestettä. Kystinen etäpesäke, herkkyys cytopathological diagnoosi on raportoitu olevan välillä 33-50% [15], [21]. Löytää ratkaisu koskien erotusdiagnoosissa näiden kahden yksikön, ensin käsitelty suhdetta ensisijaisen sivuston ja radiologisesti tunnistettavissa kystinen etäpesäke on varjoainetehosteisiin CT kuvantaminen. Huomasimme, että radiologisesti tunnistettavissa kystinen etäpesäke oli nimenomaan OPSCC ja CUP, ja että alisivustoa on OPSCC kanssa radiologisesti tunnistettavissa kystistä etäpesäke oli joko nielurisa tai kielen tyveen. Koska ensisijainen sivuston erityisiä kystinen etäpesäke oli identtinen ensisijaisen sivuston spesifisiä HPV-infektio, tutkimme seuraavaksi suhde HPV-aseman ja kystinen etäpesäke. Huomasimme, että radiologisesti tunnistettavissa kystinen etäpesäke on todennäköisemmin HPV-positiivisia verrattuna kiinteitä tai nekroottisen etäpesäke vuonna OPSCC ja CUP. Nämä havainnot osoittavat, että HPV-positiivisuuden kystisen neste kerätään FNA auttavat tekemään lopullisen diagnoosin, nimittäin että kysta kiinnostava on pahanlaatuinen. In situ -hybridisaatio, joita voidaan käyttää HPV-DNA: ta solun lohkot on valmistettu kystistä nestettä kokoelma, näyttää riittämätön tähän tarkoitukseen, koska alhaisen soluihin. PCR, joka on parempi kuin in situ -hybridisaatiota herkkyyden, todennäköisesti palvelemaan tehokkaammin havaitsemiseksi HPV-DNA kystinen nesteen keräys. Tässä tutkimuksessa olemme osoittaneet ensimmäistä kertaa mahdollisuutta havaita HPV-DNA käyttäen sisäkkäisiä PCR nestekertymiä imetään kystistä etäpesäkkeitä. Yhdessä olemme osoittaneet, että radiologisesti tunnistettavissa kystinen etäpesäke on todennäköisesti HPV-positiivisia, ja että PCR mahdollistaa HPV-DNA: n nesteen keräämistä käyttämällä FNA. Nämä havainnot osoittavat, että sivuttainen kohdunkaulan kysta jonka STT neste on HPV-positiivinen on kystinen etäpesäke, mutta ei Lateraalinen halkeama kysta.

varjoainetehosteisiin CT kuvantaminen, 6% ja imusolmukkeisiin OPSCC ja 11% of imusolmukkeisiin CUP osoitti kystinen etäpesäke. Tämä esiintyvyys radiologisesti tunnistettavissa kystinen etäpesäke vuonna OPSCC ja CUP on suhteellisen alhainen, kun verrataan histologisesti todettu kystinen etäpesäke. Niin paljon kuin 56 ja 73% imusolmukkeisiin syöpää nielurisa ja pohjan kielen, vastaavasti, on raportoitu muodostavan histologisesti tunnistettavissa kystinen etäpesäke [12]. Tämä ero luultavasti heijastaa vajavaisen varjoainetehosteisiin CT kuvantaminen visualisoida kystinen vaurion. On vaikea erottaa kystinen vaurio päässä nekroottisen vaurio, erityisesti silloin, kun vaurio kiinnostava on pieni. Lisäksi jopa silloin, kun suuri etäpesäke näkyy necrotic on varjoainetehosteisiin CT kuvantaminen, FNA joskus tuottaa nesteen kertyminen, mikä osoittaa, että radiologisesti solmu näyttää olevan necrotic mutta histologisesti se näyttää olevan kystinen.

Yhteenvetona olemme todenneet, että HPV-asema kasvain pysyy muuttumattomana jälkeen etäpesäke. HPV-positiivisten CUP, okkultismin primaarikasvaimen on todennäköisesti lokalisoitu nielu, erityisesti joko nielurisa tai kielen tyveen. HPV-positiiviset OPSCC ja CUP taipumus muodostaa kystinen etäpesäke. PCR analyysi FNA nesteen mahdollistaa nonsurgical havaitseminen HPV-DNA, joka voi helpottaa erotusdiagnoosiin kystisen etäpesäke ja olkavarren halkeama kysta.

tukeminen Information

Taulukko S1.

Ominaisuudet syövän tuntemattomien ensisijainen retrospektiivisessa ympäristössä.

doi: 10,1371 /journal.pone.0095364.s001

(xlsx) B Taulukko S2.

ominaisuudet Syöpä tuntematon ensisijainen in Prospective asettaminen.

doi: 10,1371 /journal.pone.0095364.s002

(XLSX) B