Krooninen sairaus

tiivistelmä

B-soluja aktivoivaa tekijää (BAFF) on sytokiini, joka kuuluu tuumorinekroositekijä (TNF) yliperheen. On raportoitu, että BAFF on kohonnut potilailla, joilla on autoimmuunipankreatiitti ja edistää pahanlaatuistumisriskin verisyöpä ja kiinteiden kasvainten. Tässä tutkimuksessa kliinistä näyttöä lisääntyneestä BAFF määrinä potilailla, joilla haiman adenokarsinooma (PDAC) saatiin, ja roolit ja mekanismit BAFF PDAC selkeytettiin ihmisen kudoksissa PDAC ja

in vitro

tiedot PDAC solulinjat. Seerumin BAFF potilailla, joilla PDAC olivat huomattavasti korkeammat kuin terveillä koehenkilöillä (p = 0,0121). Potilaat, joilla on UICC vaiheessa IV PDAC (T1-4, N0-1, M1) oli merkittävästi korkeampi seerumin BAFF verrattuna potilaisiin, joiden PDAC (p = 0,0182). BAFF oli huomattavan ilmaistu soluttautua B-lymfosyyttien ympäröivän haimasyövän ihmisen haiman kudoksissa, mikä viittaa siihen, että BAFF voi olla rooli etenemistä haimasyövän. PDAC solulinjoja viljeltiin ihmisen rekombinantin BAFF ja morfologia ja geenin ilmentyminen analysoitiin; haimasyöpäsoluissa muuttui fibroblastin kaltaisen morfologia, ja näytti muuttuneen geeniekspression E-kadheriinin, vimentiinistä ja Snail. Nämä BAFF aiheuttamiin muutoksiin heijastavat parannettu solun liikkuvuus ja invaasiota. BAFF-R-yliekspressoivassa solukloonien vahvisti yhdistyksen näiden BAFF aiheuttamiin muutoksiin ja epiteelin-mesenkymaalitransitioon (EMT) liittyvien geenien. BAFF kohosi metastasoituneen kehittynyt PDAC ja indusoidut muutokset PDAC soluissa säätelemällä EMT liittyviä geenejä. Selvittäminen täsmällistä asemaa ja valvontamekanismina BAFF voi johtaa uusiin hoitomenetelmiä, jonka tavoitteena on parantaa haimasyövän selviytymisen.

Citation: Koizumi M, Hiasa Y, Kumagi T, Yamanishi H, Azemoto N, Kobata T, et ai. (2013) Lisääntynyt B Cell-aktivoiva tekijä Edistää invaasion ja -metastaasin Human Haimasyöpä. PLoS ONE 8 (8): e71367. doi: 10,1371 /journal.pone.0071367

Editor: Srikumar P. Chellappan, H. Lee Moffitt Cancer Center Research Institute, Yhdysvallat

vastaanotettu: 14 tammikuu 2013; Hyväksytty: 28 Kesäkuu 2013; Julkaistu: 06 elokuu 2013

Copyright: © 2013 Koizumi et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tämä työ tuettiin osittain Grant-in-tuki Scientific Research (Japani Society for Promotion of Science, KAKENHI 24590980 YH) ja Program parannustoiminnot Systematic koulutus Graduate School (MK) alkaen opetus-, kulttuuri-, Sports, Science and Technology, Japani, ja jota Grant-in-Aid tieteellisen tutkimuksen ja kehityksen (YH) päässä Japanin terveysministeriö, työ- ja Welfare, Japani. Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Haimasyöpä on yksi syöpiä köyhimpien ennusteeseen ihmisillä. 5 vuoden pysyvyys haimasyövän on vain noin 6% johtuen vaikeudesta diagnoosin varhaisessa kliinisessä vaiheessa, sekä usein etäpesäkkeitä [1], [2]. Viime aikoina uusia terapeuttisia vaihtoehtoja on raportoitu; kuitenkin, hoitovaihtoehdot ovat rajalliset ja vastaus kemoterapiaa edelleen alhainen [3], [4]. Tunnistaminen uusia kohteita haimasyövän voitaisiin parantaa ennustetta.

Viime aikoina on raportoitu, että B-soluja aktivoivaa tekijää (BAFF), proinflammatorinen sytokiini, on kohonnut potilailla, joilla on autoimmuunipankreatiitti [5]. BAFF on sytokiini, joka kuuluu osajoukko tuumorinekroositekijän (TNF) yliperheen. Eräässä aikaisemmassa kokeessa, jossa seerumin BAFF tutkittiin potilailla, joilla oli haimasyöpä [5], potilailla, joilla on etäpesäkkeitä näytti olevan kohonnut BAFF.

BAFF on 285 aminohapon peptidi, glykoproteiini, joka ilmentyy kuten transmembraanisen proteiinin, ja erittyy liukoisessa muodossa eri solutyyppejä (monosyytit, dendriittisolut, T-lymfosyytit, ja B-lymfosyytit) [6] – [8]. On tunnettua liittyvän säilymisen ja kypsymisen B-lymfosyyttien. BAFF on ligandi kolmen reseptorin: BAFF-reseptori (BAFF-R) [9]; transmembraanisen aktivaattori, kalsium-modulaattori, ja syklofiliinin ligandin Interactor (TACI) [10]; ja B-solujen kypsymisen antigeeni (BCMA) [11]. Lisäksi kaltainen proteiini BAFF, nimetty proliferaatiota indusoiva ligandi (huhtikuu) [12], voi olla ligandi, TACI ja BCMA. Sitoutuminen BAFF tai APRIL nämä reseptorit voivat aktivoida erilaisia ​​signalointireittejä, kuten tumatekijä-KB (NF-KB) reitti [13] – [15]. On raportoitu, että BAFF APRIL edistää pahanlaatuistumisriskin verisyöpä ja kiinteiden kasvainten [16] – [18]. Kuitenkin roolit BAFF, huhtikuu, ja niiden reseptorit haimasyövän ei ole vielä selvitetty.

Tässä tutkimuksessa kliinistä näyttöä lisääntyneestä BAFF määrinä potilailla, joilla haiman adenokarsinooma (PDAC) saatiin, ja roolia ja mekanismi BAFF vuonna PDAC selkeytettiin kliinisiä todisteita ja

in vitro

tietoja PDAC solulinjoista.

Materiaalit ja menetelmät

Potilaille ja haima näytteet

Seeruminäytteitä tarkasteltiin 44: llä PDAC ja terve iän ja sukupuolen Hyväksytty aiheista. Diagnosointiin lavastus, kasvaimen etäpesäke järjestelmä Unionin International Cancer valvonta (UICC) käytettiin. Kaikki seeruminäytteet varastoitiin -80 ° C: ssa ennen käyttöä. Yksilöitä PDAC saatiin potilailta, joille tehtiin leikkaus. Kirjallinen suostumus saatiin kaikilta kirjoilla osallistujille. Tutkimuksen protokolla sopeutui eettiset ohjeet vuoden 1975 Helsingin julistuksen, ja hyväksyi Institutional Review Board of Ehime yliopistollisen sairaalan (Hyväksyntänumero: 1107003). Tutkimuksessa mukana ihmisen yksilöitä rekisteröitiin University Hospital Medical Information Network (Umin) Clinical Trials Registry (rekisterinumero 000008654).

Entsyymi-immunologinen määritys BAFF ja huhtikuu

Seerumin BAFF ja huhtikuu kaikissa aineissa analysoitiin käyttämällä entsyymi-immunologinen määritys kit (R BioVendor, Candler, NC, USA APRIL) noudattaen valmistajan suosituksia.

immunohistokemia of PDAC yksilöiden

Haiman kudokset fiksoitiin formaliiniin. Osiot (3 pm paksu) leikattiin kustakin lohkosta ja viereisiä alueita värjättiin standardin hematoksyliinillä ja eosiinilla (H Nichirei, Tokio, Japani) 1 tunnin ajan huoneenlämpötilassa, ja inkuboitiin yksinkertainen Stain DAB Solution (Nichirei). Mikrovalokuvista otettiin käyttäen Nikon Microphot FXA Nikon digitaalikamera DXM 1200 (Nikon, Tokio, Japani).

Immunofluoresenssivärjäystä asennettu ja formaliinilla kiinnitetyt osat käytettiin. Leikkeitä inkuboitiin asiaa primaarisen vasta-aineen (taulukko S1) 4 ° C: ssa yön yli. Kun oli pesty fosfaattipuskuroidulla suolaliuoksella, leikkeitä inkuboitiin kanssa DyLight488-konjugoidulla aasin anti-vuohi-vasta-ainetta BAFF tai BAFF-R, ja DyLight549-konjugoidulla aasin anti-hiiri-vasta-aineen CD20. Tumiin leikkeet värjättiin 4,6-diamino-2-fenyyli (Wako, Osaka, Japani). Objektilasit kuvattiin käyttäen Zeiss Axioskop 2 Plus fluoresenssimikroskooppiin ja vangiksi Zeiss AxioCam HRc digitaalikamera (Zeiss, Tokio, Japani) ja tallennetaan tietokoneelle. Valokuvia värjättiin BAFF, BAFF-R ja CD20 yhdistettiin arvioimaan niiden sijainnit soluissa.

Solut ja viljelyolosuhteet

neljä haimasyövän solulinjoissa (PANC-1, BxPC-3 , AsPC-1 ja MIA PaCa-2-solut), jotka oli alun perin tuotettu potilailla, joilla on PDAC, ja Ramos-solut saatiin American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, USA). PANC-1 ja MIA PaCa-2-soluja viljeltiin Dulbeccon modifioidussa Eaglen väliaineessa (DMEM, Life Technologies, Carlsbad, CA, USA), johon oli lisätty 10% naudan sikiön seerumia (Life Technologies) ja 1% penisilliiniä. BxPC-3, AsPC-1 ja Ramos-soluja viljeltiin RPMI-1640, johon oli lisätty 10% naudan sikiön seerumia ja 1% penisilliini. Mikrovalokuvia saatiin erilaisten käsittelyjen jälkeen käänteismikroskoopilla (Olympus IX70, Olympus, Tokio, Japani) varustettu Olympus DP12 digitaalikamera. Oltuaan seerumia 24 tuntia, soluja inkuboitiin rekombinantti-BAFF (Reliatech, Braunschweig, Saksa) ja yhdistelmä-TGF-β (R 0,05 perustuu kaksisuuntaista testiä. Korrelaatiot kahden muuttujan arvioitiin käyttämällä Pearsonin korrelaatiokerroin, ja p-arvot 0,05 katsottiin edustavan tilastollisen merkittävyyden.

Tulokset

Seerumin BAFF potilailla, joilla on edennyt PDAC

Seerumin BAFF ja huhtikuu tutkittiin potilailla, joilla oli PDAC ja terveillä samanikäisillä ja samaa sukupuolta yhteensopivat aineet (taulukko 1). Seerumin BAFF oli 1704 ± 1409 pg /ml (keskiarvo ± SD) potilailla, joilla PDAC, huomattavasti korkeampi kuin terveillä koehenkilöillä (1147 ± 315 pg /ml; p = 0,0121) (Fig. 1A). Toisaalta, seerumin huhtikuu potilailla, joilla PDAC eivät olleet merkittävästi korkeampia kuin terveillä henkilöillä (7,7 ± 2,4 vs. 7,3 ± 2,2 pg /ml, vastaavasti; p = 0,895) (Kuva. 1 B). Nousu seerumin BAFF arvioitiin UICC vaiheessa. Potilaat, joilla on UICC vaiheessa IV PDAC (T1-4, N0-1, M1) oli merkittävästi korkeampi seerumin BAFF kuin potilaiden UICC Ib-III (2063 ± 1736 vs. 1186 ± 328 pg /ml, vastaavasti; p = 0,0182) (Fig. 1 C). Kliininen tausta potilaiden kussakin vaiheessa on esitetty taulukossa 2. välisestä suhteesta seerumin BAFF: iin ja PDAC kasvaimen koko, oli merkittävä positiivinen korrelaatio, kuten on esitetty kuviossa. 1D (r = 0,348; p 0,001). Tämä viittasi siihen, että nousu seerumin BAFF oli kasvaimen kasvuun liittyvien ja etäpesäke PDAC.

(A) Seerumin BAFF määritettiin potilailla, joilla PDAC (n = 44) ja terveillä henkilöillä (n = 44). (B) pitoisuudet seerumissa huhtikuu määritettiin potilailla, joilla PDAC (n = 44) ja terveillä koehenkilöillä (n = 44). (C) Seerumin BAFF ja UICC vaihe PDAC osoitetaan. (D) Seerumin BAFF ja kasvainten koot ensisijainen PDAC merkittävästi korreloivat 44 potilaalla (p 0,001). Tiedot esitetään keskiarvoina ± SD (* p 0,05). N.S. .; ei merkittävää.

ekspressio BAFF ja BAFF-R-ihmisen PDAC kudoksen

Immunohistokemia suoritettiin kokeita sen määrittämiseksi, onko BAFF ilmaistaan ​​haimakudoksessa. Haimakudoksessa kirurginen lajeista saatu potilailta, joilla PDAC värjättiin BAFF ja BAFF-R (kuvio. 2 ja 3). Kasvainta infiltroivien immuunisolujen ympäröivän PDAC solujen havaittiin huomattavasti ilmaista BAFF ja BAFF-R (kuvio. 2). Muihin värjäyksen CD20 (merkki B-lymfosyyttien), CD3 (T-solureseptorin, merkkiaine T-lymfosyyttien) ja CD68 (merkki monosyyttien /makrofagien) suoritettiin tunnistaa niiden tyyppisiä infiltroivia soluja, jotka ilmentävät BAFF tai BAFF-R. Jakelu BAFF- ja BAFF-R-positiivisten solujen ilmestyi yhdenmukainen jakautuminen B-lymfosyyttien, pikemminkin kuin, että T-lymfosyyttien tai monosyytti /makrofageja (Fig. 2). Äskettäin on osoitettu, että B-lymfosyytit voivat erittää BAFF [7], [8], [16]. Double immunofluoresenssivärjäyksen BAFF ja CD20, CD3, CD68 (Fig. 3A), ja värjäys BAFF-R ja CD20, CD3, CD68 (Fig. 3B) suoritettiin. Jakauma BAFF (vihreä) ja CD20 (punainen) yhdistettiin ja ilmestyi keltainen (Fig. 3A). Lisäksi jakelu BAFF-R (vihreä) ja CD20 (punainen) oli myös yhdistettiin ja esiintyi keltainen (Fig. 3B). Kuitenkin jakelu BAFF ja BAFF-R ei co-paikallistaa CD3 tai CD68. Nämä tulokset osoittavat, että B-lymfosyytit, jotka ilmentävät korkeita BAFF ja BAFF-R, ovat infiltraatin ja lisääntyä ympäröivään kudokseen PDAC.

(A) Värjäys hematoksyliinillä ja eosiinilla (H kuitenkin, BAFF ja CD3 tai CD68 ei co-lokalisoitu. (B) immunofluoresenssi BAFF-R (vihreä) ja CD20, CD3, ja CD68 (punainen) on esitetty. BAFF-R: n ja CD20 oli co-lokalisoitu (keltainen); kuitenkin, BAFF-R ja CD3 tai CD68 ei co-lokalisoitu. Ensimmäinen Ab (-) osoittaa värjäys ohjaus ilman ensimmäistä vasta-ainetta.

BAFF reseptoreiden ihmisen PDAC kudoksissa ja ihmisen PDAC solulinjoissa

Tutkiakseen BAFF reseptorien in PDAC, immunohistokemia suoritettiin PDAC kudoksista saatiin potilailta sekä ihmisen PDAC solulinjoissa. BAFF-R-ilmentyi PDAC soluja, jotka oli positiivisia signaaleja MIB-1 ja CA19-9 (Fig. 4A, vasen sarake). Muitakin BAFF reseptorit (TACI ja BCMA) ei ilmaistu PDAC soluissa (kuvio. 4A, oikea palsta). Ihmisen PDAC solulinjat, PANC-1, BxPC-3, AsPC-1, ja MIA PaCa-2, käytettiin

in vitro

tutkimuksissa. Laadullisia RT-PCR geenin BAFF-R, TACI ja BCMA havaittiin vain BAFF-R (kuvio. 4B). Ramos-solut, tunnettu kudos, joka ekspressoi BAFF-R, TACI ja BCMA, käytettiin positiivisena kontrollina [21]. Lisäksi Western blottaus suoritettiin arvioimaan proteiinin ilmentymistä näiden BAFF reseptorien (Fig. 4C). BAFF-R vahvistettiin kaikissa PDAC solulinjat, mutta ilmaus TACI ja BCMA ei voitu havaita. Yhdessä nämä tulokset osoittivat, että kohonneet BAFF johtui tunkeutumisatmosfäärin ja lisääntyvissä B-lymfosyytit ympäröivän PDAC kudoksiin; nämä kohonnut BAFF voi stimuloida PDAC läpi BAFF-R-signalointia. Tunnistaa aseman BAFF PDAC, joka on

in vitro

määritys suoritettiin käyttäen PANC-1 PDAC solulinja, sen kloonattu transfektantti BAFF-R, ja rekombinantin ihmisen BAFF lisäanalyysiä.

(A) Värjäys hematoksyliinillä ja eosiinilla (H 0,05 vs. BAFF 0 ng /ml). (C) Western blotting-analyysi EMT markkereita osoittaa, että ilmentyminen kunkin proteiinin moduloidaan lisäämällä BAFF. β-aktiini on esitetty taloudenhoito proteiinia.

Hoito ihmisen rekombinantti BAFF ja liikkuvuus ja invaasion PDAC solujen

Yhdessä morfologisia muutoksia, ehdotettiin, että BAFF indusoi EMT in PDAC. Nämä tulokset pyydetään tutkimuksen muita vaikutuksia BAFF, kuten siittiöiden liikkuvuus ja hyökkäystä. PANC-1-soluja inkuboitiin ihmisen rekombinantti BAFF, ja muutokset liikkuvuudessa arvioitiin haavan paranemista /raaputuskokeen. Hoito BAFF lisääntynyt motiliteettia PANC-1-soluissa ja johti kiihtyi haavansulkemiseen (p 0,01) (Fig. 6A ja 6B). Lisäksi hoitoa ihmisen yhdistelmä-BAFF merkittävästi parantanut solujen kykyä hyökätä soluväliaineen

in vitro

(Fig. 6C).

(EN) haavan paranemista /raaputuskokeen osoitti, että motiliteettia PANC-1-soluissa tehostui 24 h inkubaation BAFF. (B) Prosentuaalinen haavoittunut alue täytetään haavan paranemisen /raaputuskokeen on esitetty kuvaaja (* p 0,01 vs. BAFF 0 ng /ml). (C) Invaasio määritys osoittaa parantaminen hyökkäyksen BAFF in PANC-1-solut (* p 0,05 vs. BAFF 0 ng /ml). (D) haavan paranemisen /raaputuskokeen neutraloivilla anti-BAFF-R-vasta-aine, osoitti, että motiliteettia PANC-1-solujen BAFF estyi vasta-aineeseen. (E) Prosentuaalinen haavoittunut alue täytetään haavan paranemisen /raaputuskokeen näkyy kuvaaja. Data esitetään keskiarvoina ± SE kuuden erillisen kokeen (* p 0,05, ** p 0,01).

Muita analyysit suoritettiin käyttäen anti-ihmisen BAFF-R-vasta-aine, joka voi estää sitoutuminen BAFF BAFF-R [23]. Lisäämällä ihmisen rekombinantti BAFF supernatanttiin viljeltyjen solujen prosentuaalinen haavoittuneen alue on täynnä kasvoi merkittävästi (15,1 ± 2,3 vs. 27,2 ± 2,3; p 0,01). Lisäämällä sekä ihmisen rekombinantti-BAFF: iin ja anti-ihmisen BAFF-R-vasta-aine, haavan väheni merkittävästi verrattuna lisäämällä vuohen kontrolli-vasta-aineen (27,2 ± 2,3 vs. 20,9 ± 2,4; p 0,05) (Fig. 6D ja 6E ). Nämä tiedot viittaavat siihen, että BAFF stimulointi aiheutti lisääntynyttä liikkuvuutta ja invaasio PANC-1-soluissa.

BAFF-R-yliekspressoivassa solukloonien ja ilmentyminen EMT liittyvien geenien

neljä solun klooneja, jotka voivat yli-ilmentävät BAFF -R kautta transfektio plasmidilla (pBCMGS-BAFF-R) [20], ja valinta viljelemällä G418: lla määritettiin. Yliekspressio BAFF-R vahvistettiin näiden solukloonien Western-blottauksella ja FACS-analyysillä (Kuva. 7A ja S2). Toiminnallinen signalointi Transdusoitujen BAFF-R näissä solussa kloonit varmistettiin inkuboimalla BAFF (Fig. S3). Lisääntynyt ilmentyminen NF-KB: n p52-proteiini havaittiin Western-blottauksella, mikä osoittaa, että NF-KB-reitin aktivoitiin yliekspressio BAFF-R; Tämä aktivointi NF-KB-reitin heijastui myös vähentynyt ilmentyminen E-kadheriinin ja lisääntyneen ilmentymisen vimentiinista ja Snail näissä klooneja. Näiden muutosten olivat samanlaisia ​​kuin määrityksen tulokset rekombinantti ihmisen BAFF.

neljä PDAC solukloonien, jotka voivat yli-ilmentävät BAFF-R läpi transfektio plasmidilla (pBCMGS-BAFF-R), luotiin. (A) Kun neljän kloonin, yliekspressio BAFF-R vahvistettiin, ja proteiinit liittyvät EMT todettiin moduloida BAFF-R tason riippuvaisesti. (B) mRNA: n tasot kunkin geenin arvioitiin reaaliaikainen RT-PCR: llä. Data esitetään keskiarvoina ± SE neljästä erillisestä kokeesta (* p 0,05, ** p 0,01 vs. PANC-1). (C) haavan paranemisen /alusta osoitti, että motiliteettia näiden solukloonien on parannettu verrattuna alkuperäiseen PANC-1. (D) Prosentuaalinen haavoittunut alue on täynnä jokaisen klooni haavan paranemisen /raaputuskokeen näkyy kuvaaja. Data esitetään keskiarvoina ± SE kuuden erillisen kokeen (* p 0,05, ** p 0,01 vs. PANC-1).

Lisäksi, ekspressiota mRNA: iden arvioitiin käyttäen reaaliaikaista RT -PCR (Fig. 7B). Väheneminen E-kadheriinin mRNA havaittiin kaikissa BAFF-R-yliekspressoivassa solukloonien, kun taas kasvu vimentiinista ja Snail-mRNA: t havaittiin useimmissa solukloonien. Motiliteettia solukloonien vahvistettiin olevan merkittävästi korkeampi kuin ei-BAFF-R-transfektoitujen PANC-1 solujen haavan paranemisen /raaputuskokeen (Fig. 7C ja D). Yhdessä tuloksiin solusta klooneista, vahvistettiin, että stimulointi BAFF indusoi geenin muutokset liittyvät EMT in PDAC soluissa.

Keskustelu

Tämä on ensimmäinen tutkimus raportoi, että seerumin BAFF ovat suurempia potilailla, joilla PDAC, ja ensimmäinen tutkimus tutkia roolia BAFF ihmisen PDAC. Tässä tutkimuksessa kävi ilmi, että: i) seerumin BAFF potilailla, joilla PDAC (erityisesti niillä, joilla etäpesäkkeitä) olivat koholla terveisiin henkilöihin verrattuna; ii) kasvaimeen tunkeutuva B-lymfosyyttien ilmaistu BAFF ja PDAC kudosten ilmaisi BAFF-R; ja iii) kasvoi BAFF aiheuttama geeni muutoksia liittyivät EMT on PDAC solulinjassa, ja tiiviimmän kasvain solun liikkuvuus ja invaasiota.

BAFF tiedetään ilmaistaan ​​monosyytit, dendriittisolut, T-lymfosyytit, B lymfosyyttien, epiteelisolujen [6] – [8], [24], [25]; kuitenkin, sen tarkka mentymisprofiili sairastavilla potilailla PDAC ei ole aikaisemmin määritelty. Äskettäin Nakajima et al. osoittivat kautta immunohistokemia että BAFF-ilmentävät B-lymfosyytit tunkeutua nivelkalvon kudoksia nivelreuman [26]. Suurin tunkeutuvien solujen ympäröivään kudokseen PDAC esillä olevassa tutkimuksessa olivat BAFF-ilmentävät B-lymfosyytit. Lisäksi monet näistä B-lymfosyyttien ilmaisi myös BAFF-R. Näistä tuloksista tunkeutumisatmosfäärin BAFF-ilmentävät B-lymfosyytit voidaan katsoa olevan tärkeä rooli ylösajon BAFF in PDAC potilailla. Lisääntynyt BAFF todennäköisesti on rooli etenemistä PDAC, koska seerumin BAFF oli huomattavasti voimistunut potilailla, joilla on edennyt PDAC. BAFF tuoteta B-lymfosyytit voivat myös olla tärkeä rooli selviytymisen, aktivointi, ja leviämisen soluttautua B-lymfosyyttien ympäröivän PDAC.

BAFF kuuluu TNF-superperheen, ja on läheistä sukua huhtikuu. Molemmilla on tärkeä rooli aktivointi ja lisääntymistä B-lymfosyyttejä. BAFF sitoutuu kaikkiin kolmeen BAFF reseptorit (BAFF-R, BCMA ja TACI), kun taas huhtikuu sitoutuu kaksi niistä (BCMA ja TACI). Esillä olevassa tutkimuksessa vain seerumin BAFF (ei APRIL) -yhtiöön merkittävästi voimistunut potilailla, joilla PDAC, ja ainoastaan ​​BAFF-R ei voitu havaita PDAC kudoksissa. Niinpä rooli BAFF ja BAFF-R PDAC tutkittiin edelleen. Yksi tärkeimmistä BAFF-indusoidun mekanismeja on NF-KB: n. On raportoitu, että BAFF-R aktivoi NF-KB: tä indusoiva kinaasi (NIK), ja että aktivointi NIK indusoi käsittely transkriptiotekijän NF-κB2 p100 NF-κB2 p52 [27], [28]. Korrelaatio NF-KB: n ja ilmentymisen Snail on aiemmin kuvattu [29]. NF-KB näyttää olevan tärkeä rooli induktioon EMT.

EMT on ilmiö, jossa epiteelisolujen muuntaa mesenkyymisolujen; se on olennaista alkion kehitykseen liittyy syvällisiä fenotyyppisiä muutoksia kuten menetys solu-soluadheesion ja solun polariteetti ja migraatio ja invasiivisia ominaisuuksia [30]. Aiemmissa raporteissa EMT on ollut ominaista hankinta karamaisen /fibroblastisia morfologia, säätelyä mesenkymaalisten markkereita kuten vimentiinista, ja downregulation epiteelin markkeri kuten E-kadheriinin [31], [32]. Snail on pitää liipaisimen EMT kautta downregulation ilmentymisen epiteelin markkerit ja ylössäätely ilmentymistä mesenkymaalisten merkkiaineiden [33]. Nämä molekyylit voimistuvan BAFF vuonna PDAC soluissa; downregulation E-kadheriinin ja säätelyä vimentiinista havaittiin myös näissä soluissa.

Nykyisestä tuloksia, ehdotetaan, että BAFF ja BAFF-R-signalointi aiheuttaa EMT in PDAC soluissa (Kuva. 8). PDAC solut moduloidaan lisäämällä BAFF osoittavat kara-muotoinen morfologia, menettää solu-solu- adheesiota ja solun polariteetti, ja hankkia kyky solun liikkuvuus ja invaasiota. On yleisesti hyväksytty, että E-kadheriinin on keskeisessä asemassa EMT, varhainen tapahtuma syöpäsoluinvaasiota ja etäpesäkkeiden [34]. EMT pidetään tärkeänä tapahtuma pahanlaatuinen kasvain etenemisen ja etäpesäkkeiden [35], [36].