Krooninen sairaus

tiivistelmä

tavoite

IL-17A on tärkeä rooli monissa tulehdussairauksien ja syöpiä. Meidän tavoitteena oli tutkia vaikutusta IL-17A on hyökkäys kohdunkaulan syövän solujen ja tutkia siihen liittyvät mekanismit.

Methods

Haavojen paraneminen ja matrigeeliä siirtokuoppaan määrityksiä käytettiin tutkimaan vaikutusta IL -17A kohdunkaulan syöpäsolujen muuttoliikettä ja invaasiota paneeli kohdunkaulan syövän solulinjoista. Tasot matriksin metalloproteinaasien (MMP) ja kudosten estäjä metalloproteinaasien (TIMP) tutkittiin käyttäen western blotting. Aktiivisuus p38 ja tumatekijä-kappa B (NF-KB) signaalireitin havaittiin myös.

Tulokset

Täällä osoitti, että IL-17A voi edistää muuttoliikettä ja hyökkäys kohdunkaulan syöpäsoluja. Edelleen molekyylitason analyysi osoitti, että IL-17A voi säätää ylös ilmaisuja ja toimintaa MMP2 ja MMP-9, ja alas-säädellä ilmaisuja TIMP-1 ja TIMP-2. Lisäksi IL-17A aktivoi myös p38 signaalireitin ja lisääntynyt p50 ja p65 ydin- ilme. Lisäksi hoito kohdunkaulan syövän solujen farmakologisen p38 /NF-KB signaalireitin inhibiittorit, SB203580 ja PDTC, voimakkaasti palautti roolit hyökkäyksen ja säätelyä MMP aiheuttama IL-17A.

Johtopäätös

IL-17A voi edistää muuttoliikettä ja hyökkäys kohdunkaulan syöpäsolu kautta ylös säätelevää MMP2 ja MMP-9 ilmaisun ja alaspäin säätäminen TIMP-1 ja TIMP-2: n ilmentymisen kautta p38 /NF-KB-signaalin kautta. IL-17A voi olla potentiaalinen kohde parantaa ennustetta potilaille, joilla on kohdunkaulan syöpä.

Citation: Feng M, Wang Y, Chen K, Bian Z, Jinfang Wu, Gao Q (2014) IL-17A Edistää Migration ja invasiivisuus kohdunkaulan syöpäsolujen coordinately aktivointi MMP Expression kautta p38 /NF-KB Signal Pathway. PLoS ONE 9 (9): e108502. doi: 10,1371 /journal.pone.0108502

Editor: Masaru Katoh, National Cancer Center, Japani

vastaanotettu: 23 heinäkuu 2014; Hyväksytty: 31 elokuu 2014; Julkaistu: 24 syyskuu 2014

Copyright: © 2014 Feng et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Data Saatavuus: Tällä kirjoittajat vahvistavat, että kaikki tiedot taustalla olevat havainnot ovat täysin saatavilla rajoituksetta. Kaikki asiaankuuluvat tiedot ovat paperin.

Rahoitus: Hanke tukivat National Natural Science Foundation of China (nro 81070536) ja National Natural Science Foundation Shaanxin maakunnassa (nro 2014JM4143). Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Kohdunkaulan syöpä on toiseksi yleisin syy syöpään liittyvien kuolleisuus naisilla maailmanlaajuisesti [1] ja on yksi ainoa tunnettu syövät viruksen aiheuttama, joka voidaan sukupuoliteitse. Viimeaikaiset tutkimukset huomaavat immuunisolujen ja niiden erittämät sytokiinit voivat paitsi osaltaan poistaa syöpäsolujen, mutta myös oikea mikroympäristön kasvainten kehitystä sekä edistää syövän etenemistä [2], jonka aikana paikallinen kasvain mikroympäristö ja toiminnon tila immuunisolujen tärkeä rooli [3].

interleukiini 17A (IL-17A) on pro-inflammatoristen sytokiinien, ja on todettu osaltaan monien kroonisten sairauksien. Äskettäin IL-17A on myös usein monissa syövissä, kuten munasarjasyövän, [4], rintasyövän [5], mahasyöpä, [6] ja hepatosellulaarista karsinoomaa [3]. Rooli IL-17A kehittämiseen ja näiden syöpien eteneminen on edelleen kiistanalainen. Käyttämällä eläinmallissa, jotkut tutkimusten mukaan IL-17A esti kasvaimen kasvua ja etäpesäkkeiden kautta IFN-c tuottavien NK ja T-solujen [6], [7]. Muut tutkimukset osoittavat, että IL-17A edistää kasvaimen kasvua ja etäpesäkkeiden [8], [9]. Vaikutus voi korreloida induktion kasvaimen edistämisen mikroympäristön on kasvainkohdassa [10].

Kasvaimen etäpesäkkeiden on johtava kuolinsyy liittyy syöpään [11]. Syöpäsolut täytyy hajota ECM ja hyökätä otetaan lymfaattinen ja verisuoni järjestelmiä levittämistä kaukaisiin kohtiin [12]. Tässä prosessissa, proteaasit kuten matriksimetalloproteinaasi (MMP), tärkeitä rooleja [12]. Tuotanto ja aktivointi MMP riippuu erilaisten sytokiinien, mukaan lukien TNF-α: n ja IL-1 kasvainsolujen erittämiä [13], [14], fibroblastit [15], [16] ja makrofagit [16]. Aiemmat tutkimukset osoittivat, että IL-17A voi säädellä MMP, IL-1 ja TNF periodontitis [17], ja totesi, että IL-17-reseptorin puutos johtaa heikentyneeseen IL-1 ja MMP3 /MMP-9 /MMP-13 nivelreumassa [18] , mikä osoittaa, että IL-17A on myös tärkeä rooli sääntelyn MMP. MAPK signaalireitin ja NF-KB: n tärkeä rooli säätelyssä tuotannon ja toiminnan MMP [10], [19]. Ja monet vaikutukset IL-17A korreloivat MAPK signaalireitin ja NF-KB [10], [20], [21].

Tutkimuksessamme havaitsimme, että IL-17A voisi lisätä soluliikkuvuus ja hyökkäystä säätely ylöspäin MMP2 ja MMP-9 kautta aktivoimalla p38-NF-KB signaalireitin.

Materiaalit ja menetelmät

Ethics selvitys

tutkimus hyväksyttiin Ethics komitea toisen Affiliated sairaala, School of Medicine, Xi’an Jiaotong yliopisto. Kaikki kohdunkaulan syövän potilaan osallistujille kudoksen säädetyn tutkimuksen kirjallinen suostumus osallistua tähän tutkimukseen.

Kohdunkaulan syöpä näytteitä

Kohdunkaulan syöpä yksilöille mRNA saatiin 50 kohdunkaulan syövän potilaiden osastolla Obstetrics and Gynecology, toinen Affiliated sairaala, School of Medicine, Xi’an Jiaotong yliopisto. Kaikki potilaat olivat suostunut kudoksen keräys aikaan leikkauksen. Ja kaikki yksilöt diagnosoitiin kohdunkaulan squamous syöpää patologian osaston. Niistä 11 oli kohdunkaulan koepala ja eivät olleet mukana tilastolliseen analyysiin invaasion syvyyteen ja imusuonten etäpesäke. Kukaan potilaista oli saanut kemoterapiaa, immunoterapiaa tai sädehoidon ennen näytteen keräämistä. Kliininen vaihe ja histologisia luokituksia perustuivat kansainvälisen liiton Gynecology and Obstetrics (FIGO) luokitusjärjestelmä. Kudosnäytteet jaetaan kahteen osaan: yksi osa jäädytettiin -80 ° C: ssa RNA: n eristys ja vasen käytettiin patologinen diagnoosi.

Solulinjat ja kokeellinen reagenssit

HeLa-, C33A ja CaSki-solulinjat saatiin American Type Culture Collection (ATCC) ja niitä ylläpidettiin Dulbeccon modifioidussa Eaglen väliaineessa (DMEM), jota oli täydennetty 10% naudan sikiön seerumia, 37 ° C: ssa, 5% CO

2. Anti-MMP2, MMP9, TIMP-1, TIMP-2, β-aktiini, p38 ja p-p38 saatiin Cell Signaling Technology (Beverly, MA). Anti-NF-KB-p50, p65 /Rel A ja histoni H1 vasta-aineet hankittiin Santa Cruz Biotechnology (Santa Cruz, CA, USA). 3- (4, 5-dimetyylitiatsol-2-yyli) -2, 5-difenyylitetratsoliumbromidi (MTT) ja kaikki muut kemikaalit saatiin yhtiöltä Sigma (St. Louis, MO), ellei toisin ole mainittu.

solumigraation ja invaasiomääritys

Solun maahanmuutto- ja invaasion kyvyt testattiin haavan paranemista ja invaasio määrityksissä. Solumigraation arvioitiin haavan paranemista määritystä. Soluja viljeltiin 6-kuoppaisella levyllä, kunnes konfluentteja korko saavuttaa 70-80% ja sitten käsiteltiin tai ilman IL-17A (50 ng /ml). Solu kerros haavoittui steriilin kärjen avulla ja leviämistä haavan havaittiin ja valokuvattiin. Invaasiomääritys suoritettiin 24-kuoppaisilla BioCoat matrigeeliin Invasion Chambers (Becton Dicknson, Bedford, MA) mukaisesti valmistajan ohjeiden mukaisesti. Sen jälkeen, kun oli viljelty kanssa tai ilman IL-17A (50 ng /ml), solut ympättiin sisemmän hyvin ja solujen määrä, joka tunkeutuu läpi Matrigel laskettiin.

RNA: n eristys ja reaaliaikainen PCR-analyysi

Kokonais-RNA uutettiin viljellyistä soluista, joissa TRIzol reagenssia (Invitrogen), ja mRNA: n ekspressiotasot mitattiin qRT-PCR: llä käyttämällä iQ5 monivärinen reaaliaikainen PCR-Detection System (Bio-Rad), jossa SYBR Esiseos EX. Käänteinen transkriptio suoritettiin PrimeScript RT reagenssipakkausta (Perfect Real Time; TaKaRa) mukaan valmistajan ohjeiden. MRNA: n analyysi, GAPDH mRNA-tasot käytettiin sisäisen normalisoinnin valvontaa. Kertamuutoksia laskettiin ja normalisoitu käyttämällä CT menetelmällä. Käytetyt alukkeet olivat seuraavat: GAPDH (GCACCGTCAAGGCTGAGAAC ja TGGTGAAGACGCCAGTGGA); MMP-1 (ACTCTGGAGTAATGTCACACCT ja GTTGGTCCACCTTTCATCTTCA); MMP2 (CCGTCGCCCATCATCAAGTT ja CTGTCTGGGGCAGTCCAAAG); MMP3 (AGTCTTCCAATCCTACTGTTGCT ja TCCCCGTCACCTCCAATCC); MMP-9 (GGGACGCAGACATCGTCATC ja TCGTCATCGTCGAAATGGGC); MMP10 (CCCACTCTACAACTCATTCACAG ja TCAGATCCCGAAGGAACAGAT); MMP13 (TGCCAGTGCCCTTAAATTCCA ja CAACAGGGTCTCAAACCCCA); IL-17A (CAATCCCACGAAATCCAGGATG ja GTGGAGATTCCAAGGTGAGG).

Zymografia

Soluja käsiteltiin IL-17A 37 ° C: ssa 24 h, ja näytteitä elatusainetta kerättiin. Asianmukaista tilavuutta unboiled näytteet erotettiin 0,1% gelatiinia, 8% SDS-PAGE-elektroforeesilla. Elektroforeesin jälkeen geelit pestiin kahdesti 2,5% Triton X-100 huoneenlämpötilassa 30 minuutin ajan ja sitten inkuboitiin reaktiopuskurissa (10 mM CaCl2, 40 mM Tris-HCI: a ja 0,01% NaN3, pH 8,0) 37 ° C: ssa 12 h. Coomassie brilliant blue R-250 geeli tahra käytettiin sitten värjää geelin. Intensiteetit bändejä geelit laskettiin käyttäen kuva-analyysiä järjestelmä (Bio-Rad Laboratories, Richmond, CA).

kvantifiointi MMP-2 ja MMP-9-proteiinien

Solut ympättiin tiheydellä 1 x 10

5 solua /ml kohdalla 6-kuoppaisille levyille päivää ennen koetta. Soluja viljeltiin tuoreessa DMEM täydennetty 1% FBS: ää ja vanhempien soluja viljeltiin tuoreessa DMEM täydennetty 1% FBS: ää tai ilman IL-17A (50 ng /ml). 48 tunnin kuluttua inkuboinnin solujen supernatantit kerättiin, ja sitten MMP2 ja MMP-9 pitoisuudet kvantitoitiin käyttämällä ELISA sarjat (Shanghai Westang Bio-Tech Co., Ltd., Shanghai, Kiina).

Western blotting-analyysi

1 x 10

6 kohdunkaulan syövän solut suspendoitiin 250 ul: aan lyysipuskuria (40 mmol /l Tris-HCI: ää, 1 mmol /l EDTA: a, 150 mmol /l KCI: a, 100 mmol /l NaVO3, 1 % Triton X-100, 1 mmol /l PMSF: ää, pH 7,5). Ydin- lysaatit kerättiin NucBuster Protein extration Kit (Novagen, Saksa) valmistajan ohjeiden mukaisesti. Proteiinit (50 ug) erotettiin 10% SDS-polyakryyliamidigeelielektroforeesilla ja siirrettiin PVDF-membraaneille. Kalvot jälkeen estetty rasvattoman maidon (5% Tris-puskuroitu suolaliuos, jossa TWEEN-20, TBST) puskurissa 37 ° C: ssa 1 h estää ei-spesifinen sitoutuminen, ja sitten inkuboitiin yön yli vasta-aineita p38, p -p38, MMP2, MMP9, TIMP-1, TIMP-2, NF-KB: n p50, p65 /RelA, histoni H1 tai β-aktiini TBST, joka sisälsi 5% maidon rasvatonta 4 ° C: ssa. Sitten toinen vasta inkuboitiin. Bändit tunnistettiin tehostetun kemiluminesenssin (Amersham, ECL Plus, Freiburg, Saksa) ja altistuvat autoradiografialla. Densitometrian analyysi suoritettiin käyttäen Image J ohjelmisto (GE Healthcare, Buckinghamshire, UK).

Tilastollinen

Kaikki tiedot esitetään keskiarvona ± keskihajonta ja analysoitiin SPSS 13.0 ohjelmistolla (SPSS Inc., IL). Tilastollinen merkitsevyys analysoitiin käyttäen opiskelijan t-testiä.

P

0,05 katsottiin tilastollisesti merkitsevä.

Tulokset

IL-17A on positiivisesti liittyy etäpesäkkeitä kohdunkaulasyövän

IL-17A mRNA-ekspressio mitattiin 50 kohdunkaulan syövän kudoksissa reaaliaikaisella PCR: llä. Association tutkimus lisäksi sovellettu tutkimaan kliinistä merkitystä IL-17A ilmentymistä 50 kohdunkaulan syövän yksilöitä. Tulos osoitti, että IL-17A ilmentyminen ei ollut sidoksissa potilaiden ikä, FIGO vaiheessa ja kasvaimen koko, kun taas IL-17A ilmentyminen korreloi merkittävästi potilaiden hyökkäystä syvyyttä ja imusuonten etäpesäkkeiden tila (

P

0,01, opiskelijat t-testiä, taulukko 1). Nämä tulokset osoittivat, että IL-17A voi olla tärkeä rooli kohdunkaulan syövän etäpesäkkeiden.

IL-17A kasvoi motiliteetti kohdunkaulan syöpäsolujen

Haavojen paraneminen ja matrigeeliä invaasio määritykset suoritettiin edelleen testata roolia IL-17A kohdunkaulan solun liikkuvuus. Tulokset haavan paranemista osoittavat, että vaellukset HeLa, C33A ja CaSki solut tehostaa IL-17A (Fig. 1A ja B). Lisäksi transwell-määritys osoitti, että hoito IL-17A edistää solujen invaasion välityksellä Matrigel (Fig. 1 C ja D).

(A, B), verrattuna kontrolliryhmään soluja, IL-17A käsitellyn kohdunkaulan syövän soluja ( HeLa, C33 A, ja CaSki) osoitti korkeampia potevilla haavan paranemista määrityksessä. (C) Kun solun invasiivisia määrityksessä, vaikutus IL-17A solujen invaasio havaittiin (suurennus 100 x). (D) kokonaismäärä invasiivisia solujen määrä kussakin kammiossa oli tiivistää. Arvot esitetään keskiarvoina ± SD kolmesta riippumattomasta kokeesta suoritettiin kolmena kappaleena. *

p

0,05 ja **

p

0,01 verrattuna kontrolliryhmään vastaavasti.

IL-17A sääteli MMP2 ja MMP-9 ilmaisun ja alassäädetty TIMP-1 ja TIMP-2: n ilmentymisen kohdunkaulan syöpäsolut

yli-ilmentyminen MMP tärkeä rooli syövän etäpesäkkeiden [22], rooli IL-17A on MMP ilmaisun kohdunkaulan syövän solulinjoissa (C33A ja CaSki) tutkittiin. Ilmauksia MMP-1, MMP2, MMP3, MMP-9, MMP10, ja MMP13 havaittiin reaaliaikaista PCR-analyysiä välillä IL-17A käsiteltyjen ja käsittelemättömien solujen. Kuten on esitetty kuviossa. 2A, IL-17A lisäsi ekspressiota sekä MMP2 ja MMP9, mikä osoittaa, että liikkuvuuden edistämiseksi rooli IL-17A saattaa olla mukana soluväliaineen (ECM) remodeling.

(A) MMP-ekspressiota havaittiin todellisen -aika PCR analyysi kohdunkaulan syövän solut käsiteltiin ja ilman IL-17A. (B) käsittelyn jälkeen IL-17A: ssa 24 tuntia, ilmaus MMP2, MMP9, TIMP-1 ja TIMP-2 havaittiin Western blot -analyysillä kohdunkaulan syövän soluissa. (C) kvantifiointi proteiinin MMP-2, MMP-9, TIMP-1 ja TIMP-2. MMP2 (D) ja MMP-9 (E) pitoisuudet supernatanteissa muodossa soluissa, joita käsiteltiin tai ilman IL-17A analysoitiin ELISA: lla. (F) vaikutukset IL-17A toiminnasta MMP2 ja MMP-9 analysoitiin zymografian määrityksessä. (G) kvantifiointi toiminnan MMP-2 ja MMP-9. Arvot esitetään keskiarvoina ± SD kolmesta riippumattomasta kokeesta suoritettiin kolmena kappaleena. *

p

0,05 ja **

p

0,01 verrattuna kontrolliryhmään vastaavasti.

MMP2 ja MMP-9 tärkeä rooli syövän etäpesäkkeiden [12 ], ja IL-17A voi vaikuttaa ilmaus MMP2 ja MMP9 [10]. TIMP endogeeninen luonnollinen inhibiittorit MMP, voi säädellä toimintaa ja ilmaisun MMP [23]. Käsittelyn jälkeen IL-17A, ilmaus MMP2 ja MMP9 proteiinien kohdunkaulan syövän solulinjoissa (C33A ja CaSki) lisättiin puolestaan ​​ekspressio TIMP-1 ja TIMP-2-proteiinien on vähentynyt (Fig. 2B ja C).

IL-17A lisäsi eritystä ja toimintaa MMP2 ja MMP-9

MMP on rooli ECM hajoamisen, ja ovat vahvasti sekaantuneet invaasiota ja etäpesäkkeiden pahanlaatuisten syöpäsolujen [22]. Tässä valossa, ilmaus MMP2 ja MMP9 solujen supernatanteista analysoitiin ELISA: lla. Kuten on esitetty kuviossa. 2D ja E C33A sekretoivat 425,55 ± 49,35 pg /ml /10

5 solua MMP2 ja 75.01 ± 9,80 pg /ml /10

5 solujen MMP-9. IL-17A käsittely lisäsi merkittävästi MMP2 tasoilla 773,12 ± 60,12 pg /ml /10

5-solut (

P

0,05) ja MMP-9 tasoilla 148,89 ± 11,18 pg /ml /10

5 solut (

P

0,05). Samanlaisia ​​tuloksia havaittiin CaSki-soluissa. On selvää, hoito IL-17A huomattavasti edistänyt ilmentymistä sekä MMP2 ja MMP9.

Lisäksi aktiivisuus MMP2 ja MMP9 erittävät kohdunkaulan syövän soluja tutkittiin tsymografialla määrityksessä. Tulokset osoittivat, että IL-17A voisi merkittävästi lisätä hajoamista aktiivisuutta MMP2 ja MMP-9 in C33A ja CaSki solulinjoissa (kuvio. 2F ja G).

IL-17A säädellään MMP ilmaisun ja invaasion kohdunkaulan syöpäsolujen kautta aktivoimalla p38 /NF-KB signaalireitin

p38 signaalireitin näyttelee tärkeä rooli hyökkäys kohdunkaulan syöpäsoluja. Käsittelyn jälkeen IL-17A, fosforylaatiota taso p38 nostettiin (Fig. 3A-B, E-F). Ilmaisulla koko p38 ei ollut vaikutusta. Koska NF-KB signalointireitin raportoitiin olevan alavirran kohde p38 signalointi, ja pystyi upregulaatioon MMP2 andMMP9 ilmaisu, NF-KB /p50 ja p65 /RelA ilmaisu myös havaittu. Havaitsimme, että hoito IL-17A huomattavasti ydin- ilmentymistä sekä NF-KB: n /p50 ja p65 /RelA (Fig. 3 C-D, G-H). Määritellä tarkemmin kohtaan p38 /NF-KB signaalireitin, jossa IL-17A säätelee hyökkäys kohdunkaulan syövän solujen, käsittelimme kohdunkaulan syöpäsolut SB203580 (p38-estäjän) ja PDTC (NF-KB-estäjä), ja analysoi invasiivisen kyvyn. Sekä SB203580 ja PDTC voi kääntää hyökkäystä kasvoi IL-17A (Fig. 4A-B, E-F). Lisäksi western blot-analyysi osoitti, että esikäsittelyssä SB203580 ja PDTC kumosi säätelyä MMP2 ja MMP-9 indusoi IL-17A (Fig. 4C-D, G-H), mikä myös osoittaa, että IL-17A säädellään MMP ilmaisun ja invaasio kohdunkaulan syövän soluihin aktivoimalla p38 /NF-KB: n signaalireitin.

Expression of p38 ja p-p38 havaittiin western blot analyysi C33A (A) ja CaSki (E) käsiteltyjä soluja tai ilman IL -17A 24 tuntia. Kvantifiointi proteiinin tasoja p38 ja p-p38 C33A (B) ja CaSki (F). Arvot esitetään keskiarvoina ± SD kolmesta riippumattomasta kokeesta suoritettiin kolmena kappaleena. * P 0,05 ** p 0,01 verrattuna kontrolliryhmään, vastaavasti. Western blot-analyysiä käytettiin havaitsemaan ydin- p50 ja p65 ilmentymistä C33A (C) ja CaSki (G) soluja käsiteltiin IL-17A (50 ng /ml) ilmoitettuina ajankohtina. Kvantifiointi tumaproteiinin tasot p50 ja p65 in C33A (D) ja CaSki (H) soluja. Arvot esitetään keskiarvoina ± SD kolmesta riippumattomasta kokeesta suoritettiin kolmena kappaleena. *

p

0,05 ja **

p

0,01 verrattuna kontrolliryhmään vastaavasti.

C33A (A) ja CaSki (E) soluja esikäsiteltiin SB (20 uM) ja PDTC 30 minuuttia, sitten inkuboitiin läsnä ollessa tai ilman IL-17A (50 ng /ml) 24 tuntia. Solu invasiivisia kykyjä suoritettiin Boyden kammion invaasiomääritys. Prosenttiosuus invasiivisia määrä C33A (B) ja CaSki (F-solut) ilmaistiin prosentteina kontrollista. C33A (C, D) ja CaSki (G, H) solut käsiteltiin ja altistettiin sitten western blot analysoida proteiinin tasot MMP2, MMP 9. Arvot esitetään keskiarvoina ± SD kolmesta riippumattomasta kokeesta suoritettiin kolmena kappaleena. *

p

0,05 ja **

p

0,01 verrattuna kontrolliryhmään vastaavasti.

Keskustelu

Huomattava näyttö osoittaa, että tietyt syövän potilailla on yleistynyt immunosuppressiivista asema, mutta tulehduksellinen reaktio kasvain sivusto voi edistää kasvaimen kasvua ja etenemistä [24], [25]. Pysyvät infektio ihmisen papilloomaviruksen (HPV) on välttämätön syy kohdunkaulan syövän [26]. HPV-infektiot ovat yleisiä, ja kohdunkaulan syöpä voidaan pitää harvinainen komplikaatio tämän yhteisen infektio [27]. IL-17A on tärkeä inflammatoristen sytokiinien kehittämisessä monien tulehdussairauksien, ja se on myös usein havaittu kasvaimen mikroympäristössä [8], [28], [29]. Mutta tähän asti, tiedetään vain vähän vaikutusta IL-17A kohdunkaulan syövän etenemiseen. Souza ja hänen työtoverinsa ovat tutkineet korrelaatio pitoisuuden IL-17 seerumin potilailta ja eri laatuja squamous intraepiteliaalisten vaurioiden ja invasiivisen kohdunkaulan karsinooman [30], puhumattakaan pro-metastasoitunut ja invasiivisia IL-17A kohdunkaulan syövän sekä sen kätyri mekanismi. Täällä paljasti, että IL-17A merkittävästi edistänyt invasiivisen ja metastaattisen kyvyn kohdunkaulan syövän solujen säätelemällä MMP /TIMP tasapainossa kautta aktivoimalla p38 /NF-KB signaalireitin.

Tässä tutkimuksessa olemme huomanneet, että IL-17A voisi lisätä maahanmuuttoa ja hyökkäys kyvyt kohdunkaulan syöpäsoluja. Edellinen tutkimus havaitsi, että IL-17A voi edistää muuttoliikettä ja hyökkäys kyvyt ihmisen rintasyövän ja maksasyövän solut [8], [10]. Nämä tulokset viittaavat siihen, että IL-17A korreloi läheisesti hyökkäys kohdunkaulan syövän soluja. Sen selventämiseksi liittyvien mekanismien, tutkimme onko edistävää vaikutusta IL-17A solujen invaasio kautta säännellä ilmaus MMP ja TIMP.

Prosessin aikana etäpesäkkeiden, syöpäsolujen täytyy hajota ECM ja hyökätä vereen tai imusuonten ja päästä muihin kudoksiin ja elimiin, sitten tuottaa uusi kasvain. MMP ja TIMP tärkeitä rooleja halventavalla ECM [31]. MMP2 ja MMP9 on usein havaittu olevan yli-ilmentynyt kiinteitä kasvaimia, jotka liittyvät kasvaimen invaasion ja metastaasin [22], [32]. Niinpä tutkimme vaikutus IL-17A ilmentymistä koskevat MMP2 ja MMP-9. Tulokset osoittavat, että IL-17A voi ajan säätelemään MMP2 ja MMP-9. TIMP toimivat muodostamalla tiukka ja ei-kovalenttisen kompleksin sukulaisamideillaan entsyymien ja pystyvät vaikuttamaan biologiseen toimintaan MMP [33], [34]. Nykyisessä tutkimuksessa olemme huomanneet, IL-17A voi alas-regualte ilmentymisen TIMP-1 ja TIMP-2. Nämä tulokset osoittavat, että edistävää vaikutusta IL-17A korreloi MMPdden ja niiden estäjiä.

p38 signaalireitin soittaa myös tärkeä rooli säätelyssä ilmentymisen ja aktiivisuuden MMP ja TIMP [35], [ ,,,0],36]. Aktiivisuutta p38 signaalireitin voi ajan säätelemään MMP2 ja MMP-9 [10]. Edellinen tutkimus osoitti, että IL-17A voi aktivoida p38 signaalireitin [37], [38]. Selventää mahdollinen mekanismi (t) IL-17A edistämisessä kohdunkaulan syöpäsolujen invaasiota, tutkimme vaikutus IL-17A on fosforylaatiota p38. Tulokset osoittivat, että IL-17A voi säätää ylös fosforylaation taso p38. Tulokset osoittivat myös, että hoito estäjä p38 vähensi soluinvaasiota merkittävästi, mukana lisääntynyt MMP2 ja MMP-9-proteiinin ekspressiota, ja laski TIMP-1 ja TIMP-2-proteiinin ilmentymisen, mikä viittaa siihen, että ylössäätöä roolia IL-17A MMP2 ja MMP-9 lauseke voisi olla aktivoitumisen kautta p38 signaalireitin. NF-KB: n on todettu olevan keskeinen transkriptiotekijän säätelyssä MMP2 ja MMP-9 ilmaisun [10], [39] ja IL-17A on raportoitu pystyä aktivoimaan NF-KB signaalireitin [40], [41 ], me seuraavaksi tutkitaan, IL-17A voi aktivoida NF-KB-signaalin kautta. Tulokset osoittivat, että IL-17A voi aktivoida NF-KB: tä, mikä viittaa siihen, että ylössäätöä roolia IL-17A MMP2 ja MMP-9 ilmaisun voisi olla kautta NF-KB: n signaalireitin.

Yhteenvetona vaikutusta IL-17A kohdunkaulan syöpäsolujen invaasiota ja etäpesäkkeiden voivat johtaa tunnistamiseen diagnostisia markkereita ja terapeuttisia tavoitteita.

Kiitokset

hanketta tukivat National Natural Science Foundation of China (No.81070536) ja National Natural Science Foundation Shaanxin provinssin (No.2014JM4143).