Krooninen sairaus

tiivistelmä

Background

Cancer Associated fibroblastit (valuuttalisiin) oletetaan säätelevän kasvaimen kasvua ja etäpesäkkeiden. Fibroblasti aktivoiva proteiini 1 (FAP-1) on merkkiaine fibroblastien aktivoitumista ja monet tunnustettu tärkein merkkiaine valuuttalisien. Alfa Smooth Muscle Actin (α-SMA) on yleinen myofibroblastin merkki, ja sitä voidaan käyttää tunnistamaan valuuttalisiin. Tässä työssä tarkastellaan ennustetekijöiden vaikutus FAP-1 ja α-SMA ei-pienisoluinen keuhkosyöpä (NSCLC) potilasta ja korreloi niiden ilmaisun 105 proteiineja tutkitaan samalla kohortin.

Methods

Kasvain näytteitä 536 pienisoluista keuhkosyöpää saatiin ja kudosten mikroriveissä rakennettiin. Immunohistokemiaa käytettiin arvioimaan ilmentymistä FAP-1 ja α-SMA ja tutkia niiden vaikutusta eloonjäämiseen ja yhdessä muiden kasvain molekyylimarkkereina NSCLC potilailla.

Tulokset

Korkea ilmaus FAP- 1, mutta ei α-SMA, in okasolusyöpä (SCC, P = 0,043, HR = 0,63 95% CI 0,40-0,99) oli merkitsevästi yhteydessä lisääntyneeseen tautikohtaisia ​​selviytymistä. FAP-1 ja α-SMA eivät korreloi merkittävästi toisistaan. Analyysit FAP-1 ja α-SMA liittyy muiden kasvaimeen liittyvien proteiinien paljasti histotype erityisiä korrelointimalleista.

Johtopäätös

Läsnäolo FAP-1 ilmentävien valuuttalisiin on osoitus myönteinen tulos for NSCLC-SCC potilaille. Lisäksi korrelaatio analyysit viittaavat siihen, FAP-1 ja α-SMA merkitä eri osa fibroblastien ja niiden yhteenliittymien muiden kasvaimeen liittyvien proteiinien ovat hyvin erilaisia ​​mukaan histologinen alatyyppi.

Citation: Kilvaer TK, Khanehkenari MR, Hellevik T Al-Saad S, Paulsen EE, Bremnes RM, et ai. (2015) Cancer Associated Sidekudosmuodostussolujen vaiheen I-IIIA NSCLC: Prognostiset Impact ja niiden korrelaatiot Kasvain Molecular merkkiaineet. PLoS ONE 10 (8): e0134965. doi: 10,1371 /journal.pone.0134965

Editor: Donald Gullberg, University of Bergen, Norja

vastaanotettu: 27 huhtikuu 2015; Hyväksytty: 15 heinäkuu 2015; Julkaistu: 07 elokuu 2015

Copyright: © 2015 Kilvaer et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään

Data Saatavuus: täydellinen data -Set ei julkaista niin monet potilaat ovat yhä elossa ja Pohjois-Norjassa on riittävän pieni yhden potilaat tunnistetaan tietonsa-parametrit ja mikä rikkoi potilaan luottamuksellisuuden. Jotkin tiedot ovat saatavilla paperi- ja tukeminen tiedot tiedostoja.

Rahoittajat: Nämä kirjoittajat eivät tuki ja rahoitus raportoida.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä olemassa.

Johdanto

ei-pienisoluinen keuhkosyöpä (NSCLC) on yksi johtavista syistä syövän liittyvän kuoleman maailmanlaajuisesti, sekä korkea ilmaantuvuus ja kuolleisuus [1]. Nykyinen hoito strategiat koostuvat laaja kasvaimen resektion kanssa täydentää radio- ja /tai kemoterapia potilasalaryhmissä huonon ennusteen [2]. NSCLC on heterogeeninen sairaus, mukaan lukien okasolusyöpä (SCC) ja adenokarsinooma (ADC) kuin hallitseva histologinen alaryhmiin joiden hoito-viisasta käyttää pidettävä yhtenä kokonaisuutena. Kuitenkin syntymässä todisteita molekyyli- merkkianalyysit osoittavat molekyyli tausta NSCLC alatyyppejä eroavan [3]. Mittavi geneettisiä muutoksia ovat osoittaneet selvästi NSCLC alatyyppejä, joihin voidaan kohdistaa modernit hoitomenetelmät. Nämä uudet ja jännittävä strategioita vielä pannaan täytäntöön adjuvanttihoidossa parantaa yleistä eloonjäämistä NSCLC potilaiden [3].

Viimeisten kahden vuosikymmenen aikana, tietoisuuden lisääminen syövän monimutkainen ja heterogeeninen tauti on noussut. Tämä seikka on siirtänyt painopistettä syövän tutkimusta yksinkertaistaville näkymä lukien ainoastaan ​​pahanlaatuisia soluja kattamaan myös tukevat strooman ympäröivään kudokseen kasvain. Peräsuolen, rinta- ja keuhkosyöpä ennustetekijöiden vaikutus immuunisolujen soluttautua kasvaimensisäisenä strooman ajatellaan täydentää ja jopa ylittää asetetut TNM lavastus algoritmit [4-6]. Toinen tärkeä toimija strooman osastossa on syöpä liittyy fibroblastien (valuuttalisien). Fibroblastit käsittävät hyvin heterogeeninen ja monikäyttöinen solupopulaation, joka näyttelee tärkeää sääntelyn rooli haavan paranemiseen, sikiön kehityksen syövän ja levittämisen [7]. Syövän, lukuisat tutkimukset ovat dokumentoineet tärkeyttä vastavuoroinen välisten vuorovaikutusten pahanlaatuisten solujen ja valuuttalisiin [7]. Lisäksi valuuttalisiin säännellä tärkeitä tekijöitä kasvaimeen liittyvä strooman kuten ECM, angiogeneesi, rekrytointi ja aktivaatio immuunisolujen ja rekrytointi reuna-esisolujen [7,8]. Yleisnimi ”CAF” käsittää monipuolisen joukon soluja, jotka voivat olla eri alkuperää ja toimintoja. Siten termi ”valuuttalisiin” voidaan viitaten kasvain asukas fibroblastien, aktivoitu fibroblasti, peritumoraalista fibroblastit, myofibroblasteissa perisyyteissä ja muut mesenkymaaliset solut ovat peräisin kiertävä esiasteita tai sen jälkeen epiteelin tai endoteelin trans-eriyttäminen. Perinteisesti valuuttalisiin on tunnistettu niiden laajaa ilmentymistä alfa-sileän lihaksen aktiini (α-SMA), mutta koska huomattavan solujen heterogeenisyys; a-SMA ilmaisua ei yksin tunnistaa kaikki valuuttalisiin [7,8]. Siksi muut CAF markkereita käytössä ovat vimentiinista, fibronektiini, fibroblasti-erityinen proteiini 1 (FSP-1), fibroblastien aktivoitumisen proteiini 1 (FAP-1) ja PDGFR-α /β [8,9]. FAP-1 on kalvoon ankkuroitunut seriiniproteaasi, joka ilmentyy selektiivisesti stroomasolut ja mesenkymaalisten solujen haavan paranemisen aikana, fibroottisia reaktioita, tulehdustilat ja kasvainten kehittymiseen [8]. Koska ilmentää väliaikaisesti tämän merkin aktivoinnin aikana, FAP-1 on käytetty monissa tutkimuksissa tunnistaa aktivoitu kasvaimen fibroblastien [8].

Useat tutkimukset ovat liittäneet esiintyy erilaisia ​​toiminnallisia osajoukkoja valuuttalisiin perusterveydenhuollossa NSCLC haitallisiin ennuste mm CAF

α-SMA ja CAF

TGF-β kohortin sekoittaa NSCLC [10] ja CAF

Podoplanin keuhkojen ADC [11-13] ja SCC [14]. Lisäksi läsnäolo CAF

Podoplanin vuonna imusolmukemetastaaseja imusolmukestatuksesta vaiheen 2 keuhko SCC potilaalla on liittynyt korkeampaa välikarsinan toistumisen [15,16]. Vain yksi pieni tutkimus (n = 59) on tutkinut läsnäolo CAF

FAP NSCLC ja löysi yhdessä huonompi ennuste [17].

Olemme aiemmin arvioitu 105 molekyylitason kasvaimeen liittyvien proteiinien kohortti Valikoitumattomien resektoitiin vaiheen I-IIIA pienisoluista keuhkosyöpää. Tutkimuksen tavoitteena oli tutkia ennustetekijöiden vaikutusta CAF

FAP ja CAF

α-SMA NSCLC, ja korreloida niiden läsnäolo ilmentymisen kanssa muiden kasvain molekyylimarkkereiden.

Materiaali ja menetelmät

1. Potilaat ja kliiniset näytteet

Ensisijainen kasvainkudoksen 536 potilasta diagnosoitu, ja kirurgisesti resektoitiin Vaiheen I IIIA NSCLC yliopistollisessa sairaalassa Pohjois-Norjan ja Nordland keskussairaalan vuodesta 1990 kautta 2010 on mukana tässä tutkimuksessa. Tämä merkitsee laajentamista ja päivittää aikaisemmin olemassa olevan kohortin mukaan lukien potilaat, joilla on sama kriteerit 1990 kautta 2004 [18]. Mukana potilaat lavastettu mukaan seitsemäs painos UICC TNM luokituksen ja luokiteltu uuteen patologinen luokittelu keuhkosyöpään [19]. Yhteensä 633 potilasta rekisteröitiin sairaalasta tietokannoista. Näistä 97 jätettiin pois tutkimuksesta johtuvat: sädehoitoa tai kemoterapiaa ennen leikkausta (n = 15), muu maligniteetti viiden vuoden kuluessa ennen NSCLC diagnoosin (n = 39), riittämätön parafinoidut kiinteä kudosblokeista (n = 25) ja adenokarsinooma

in situ

(AIS), ennen 2011 luokiteltu bronkoalveolaarinen karsinooma

in situ

(BAC) 3 cm tarkistaminen (n = 18). Täten 536 täysin potilastiedot ja käytettävissä formaliinilla kiinnitetyt, parafiiniin upotetut (FFPE) kudosblokeista olivat oikeutettuja.

Tämä raportti sisältää seurantatietoja vuodesta 1. lokakuuta

st 2013 seuranta-ajan mediaani eloonjääneitä oli 73 kuukautta (vaihteluväli 0-267).

2. Micro-array Hakemisto Rakentaminen

Kaikki potilaan näytteet tarkistetaan itsenäisesti kaksi patologia. Kaikkein edustavalla, jotka sisältävät sekä kasvain ja kasvaimeen strooman, oli merkitty hematoksyliinillä ja eosiinilla (H /E) dioja ja näyte kudoksen mikro-array (TMA) lohkot. TMA koottiin käyttäen kudosta ryhmittelyn väline (Beecher Instruments, Silver Springs, MD, USA). Yksityiskohtaiset menetelmät on raportoitu aiemmin [20]. Lyhyesti, käytimme 0,6 mm stylet näyte neljään rinnakkaisia ​​ydintä kustakin tutkimuksesta yksilöitä.

sisältävät kaikki kairausnäytteitä, 12 TMA lohkot rakennettiin. Useita 4-um: n leikkeitä leikattiin Micron mikrotomin (HM355S) ja värjättiin spesifisiä vasta-aineita immunohistokemiallinen (IHC) analyysi.

3. Immunohistokemia

immunohistokemia (IHC) määritykset FAP-1were suoritettiin Ventana Discovery-Ultra automatisoitu immunostainer (Ventana Medical Systems, Tucson, AZ). Deparaffinization ja junassa antigeenin haku tehtiin 24 minuuttia noin 100 ° C: CC1 reagenssilla, joka on EDTA-pohjainen proprietary Ventana (pH 8,0-8,5). FAP-1anti-kanin polyklonaalista vasta-ainetta (Ab53066, Abcam, laimennus 1/50) levitettiin ja inkuboitiin 32 minuuttia. Lasit kehitettiin käyttäen Ultramap anti-kani HRP (Cat # 760-4315, Ventana) ja todettiin käyttäen ChromoMap DAB (Cat # 760-159, Ventana).

IHC määritykset α-SMA värjättiin on Ventana benchmark-ultra (Ventana Medical Systems Inc.). Epitooppi haku saatiin aikaan CC1 ratkaisun 8 minuuttia. Α-SMA hiiren monoklonaalinen vasta-aine (cat # 760-2833, Ventana, klooni 1A4) inkuboitiin 37 ° C: ssa 32 minuuttia ja detektoitiin käyttämällä Ultraview DAB Detection Kit. Lopuksi, visualisoida tumat, objektilasit vastavärjättiin Ventana hematoksyliinillä II reagenssia 8 minuuttia, jota seurasi sinistämisaineita reagenssin 4 minuuttia.

kaksi erilaisia ​​tarkastuksia meidän värjäysmenetelmää sovellettiin. Ensinnäkin, ohjaus värjäys leikkeiden isotyyppiyhteensopivan kontrollivasta-ainetta ilman primaarista vasta-ainetta. Toiseksi, useiden elinten kudos mikro-array kuin positiiviset ja negatiiviset kudosten valvonta käytettiin tarkistaa spesifisyys värjäytymisen jokaisen värjäyksen menettelyn. Positiiviset kudos hallintalaitteet olivat normaaleja maksan ja rintasyöpä FAP-1 ja liite ja suonen seinämän alfa-SMA; Negatiiviset kudos kontrollit olivat näytteitä normaalista haima-, keuhko-, rinta-, nielurisojen ja munuaisten sekä Fap ja α-SMA.

4. Vasta-aine validointi

Hiiren monoklonaalista ihmisen α-SMA-vasta-aine hankittiin Ventana (cat # 760-2833, Ventana, klooni 1A4). Tämä vasta-aine on tehty laajoja laadunvalvontaan ja validointimenettelyjä valmistajan joka takaa asianmukaisen ja erityisiä värjäytymistä antigeenin parafinoidut kudosta. Polyklonaalisia kaniinin anti-ihmisen FAP-1-vasta-aine hankittiin Abcam (Cat. #: Ab53066). Spesifisyys testi Tämän vasta-aineen hoitanut Western blot. Vasta-aine testattiin kokosoluekstraktien useiden CAF solulinjoista ja keuhkojen kasvain A549. Western blotit osoittivat yhden ainoan vyöhykkeen noin 70 kDa: n proteiinia otteita valuuttalisiin (kuvio 1 D). Tämä vasta-aine on aiemmin testattu yksittäisiä valuuttalisiin IHC [21].

A) IHC analyysi TMA ytimien pienisoluista keuhkosyöpää edustavat eri stroomasolulinja tulokset ilmentämiseksi FAP-1 ja α-SMA. I) Low strooman FAP-1; II) Korkea strooman FAP-1; III) Low strooman α-SMA; IV) Korkea strooman α-SMA. B) TMA ohjaus terveen keuhkokudoksen vahvassa FAP-1 positiivisuus normaalissa keuhkojen makrofagien, C) TMA ohjaus terveen keuhkokudoksen osoittaa joitakin heikkoja väli α-SMA värjäys, D) Western blot FAP-1, joka esittää yhtä selkeää 70 kDa band. Lyhenteet: FAP-1, Fibroblast aktivoiva proteiini; a-SMA, alfa-sileän lihaksen aktiini.

5. Pisteytys immunohistokemia

edustaja ja elinkelpoinen kudosleikkeiden tarkistettiin käyttäen (Leica DM 2500 ”Leica Microsystems Ltd., CH9435 Heerbrugg, Sveitsi). Perustuen alkutilanteeseen, kirjailija Al-Saad perustanut semikvantitatiivinen pisteet jokainen merkki. Laseja pisteytettiin FAP-1 kokonais- materiaali ja α-SMA päivitetyssä materiaali (2005 tapausta kautta 2010) kirjailijoiden Rakaee Khanehkenari ja Martinez. a-SMA aiemmin teki tapauksista vuodesta 1990 kautta 2004 . hallitseva värjäytymisen intensiteetti prosentteina positiivisten solujen intraepiteliaalisten strooman osasto teki seuraavasti: 0 = ei värjäystä, 1 = 1-10%, 2 = 11-50% ja 3 = 50%. arvioitaessa tietyn ydin, tarkkailijat olivat sokaissut tulokset muiden muuttujien ja lopputulokseen. Emme havainneet mitään värjäytymistä kasvaimen epiteelisolujen joko α-SMA eikä FAP-1. Tämä on on samanlainen kuin raportit muista tutkimuksista [22].

korkea ilme määriteltiin optimaalinen rajakohta erotteleva korkea /matala ryhmään selviytymiseen. Korkea ilme määriteltiin pisteet 0.5 (FAP-1) ja 2 (α-SMA).

6. Tilastolliset menetelmät

Kaikki tilastolliset analyysit suoritettiin käyttäen RStudio 0.98.1091 R versio 3.1.1.1 [23] ja kirjastojen ”survival” [24], ”auto” [25], ”ggplot2” [26], ”gridExtra” [27], ”Hmisc” [28] ja ”IRR” [29].

IHC pisteiden jokaisen tarkkailijan verrattiin interobserver luotettavuusteknisillä kaksisuuntainen satunnaisvaikutusten malli absoluuttisella sopimuksen määritelmän ja Cohens kappa-tilastot yhtä painoja. Intraclass korrelaatiokerroin (luotettavuus kerroin) ja Cohenin kappa saatiin näistä tuloksista.

Chi-square ja Fischerin Exact testejä käytettiin tutkimaan yhdistyksen välillä molekulaarinen merkkiaine ilmaisun ja clinipathological muuttujia ja tarkistaa, oliko erot merkki ilmaisun alkuperäisessä ja päivitetään potilaan kohortin. Spearman`s rank-korrelaatio käytettiin tutkimaan assosiaatioita merkki ilmaisuja. Koska suuri määrä korrelaatiota analyysit, Bonferronin korjausten P-arvot tehtiin nämä analyysit.

Univariate selviytymisen analyysit tehtiin käyttämällä Kaplan-Meier-menetelmää. Tilastolliset erot eloonjäämiskäyrien arvioitiin log-rank-testi. Tautikohtaiset eloonjäämisen (DSS) määriteltiin aika leikkauksesta keuhkosyöpään liittyvä kuolema. Monimuuttuja-analyysissä käyttäen Coxin suhteellisen vaarat malli, tehtiin arvioida itsenäisen arvon esikäsittelyn muuttujien läsnäollessa muiden muuttujien. Vain muuttujat P 0.25 alkaen yhden muuttujan analyyseissä tai muuten ajatellaan olevan tärkeä selvitettiin Coxin regressioanalyysiä.

merkitsevyystasolla käytetty selviytymisen analyysejä oli P 0.05

7. Eettinen Maavara

Tutkimus hyväksyttiin alueneuvoston Lääketieteen ja Health Research Ethics (Pohjois-Norja, UNN: protokolla ID: 2011/2503) ja tarve suostumus luovuttiin tarpeettomana. Kokoelma ja tallennus kliinisen tietokannan hyväksyttiin National tietosuojaviranomaiselle. Raportointia kliinis muuttujia, Eloonjääntitulokset ja biologisten merkkiaineiden ilmentyminen suoritettiin mukaisesti REMARK ohjeita.

Tulokset

1. Kliinis muuttujat

kliinis muuttujat on koottu taulukkoon 1. Mediaani ikä diagnoosin aikana oli 67,2 vuotta, ja 32% potilaista oli naisia. Histologinen jakautuminen 536 tapauksista oli 289 okasolusyöpää (SCC), 201 adenokarsinoomat (ADC) ja 46 erilaistumaton karsinoomat (NOS). Lisäksi kirurginen resektio, 64, 89 ja 12 potilasta sai adjuvanttia sädehoitoa, kemoterapiaa ja radiochemotherapy, vastaavasti.

2. Interobserver Luotettavuus ja testit Erot Expression

intraclass Korrelaatiokertoimet ja Cohenin kappa olivat 0,759 (P 0,001) ja 0,598 (P 0,001) FAP-1 ja 0,790 (P 0,001) ja 0,657 (P 0,001) ja α-SMA. Eroa lauseke FAP-1 (P = 0,284) tai α-SMA (P = 1,000) havaittiin määrättyinä aikoina (alkuperäinen vs päivitetty kohortti).

3. Survival Analyysit

Taulukossa 1 esitetään yhteenveto vaikutusten kliinis muuttujien ja tutkittu merkkiaineiden koko ryhmän ja kerrostuu histologisia alaryhmiin. Kuvio 2 kentät A-F esittää eloonjäämiskäyrien FAP-1 ja α-SMA alhainen

vs

voimakasta ilmentymistä koko kohortin ja ositettu osaksi SCC ja ADC alaryhmiä. Korkea ilmentyminen FAP-1 oli merkittävä positiivinen markkeri hengissä SCC alaryhmässä (P = 0,043). Kumpikaan FAP-1, eikä α-SMA ilmentyminen kasvaimen strooman olivat merkittäviä riippumattomia muuttujia monimuuttuja analyysit.

Lyhenteet: SCC, squamous-cell carcinoma; ADC, adenokarsinooma; FAP-1, Fibroblast aktivoiva proteiini; a-SMA, alfa-sileän lihaksen aktiini.

4. Expression of FAP-1 ja α-SMA ja niiden korrelaatiot

FAP-1 ja α-SMA ekspressio paikallistettiin sytoplasmassa strooman soluja (kuvio 1A). Huomattavaa on, että FAP-1 ilmentyminen ei rajoitu fibroblastien kaltaisten solujen kasvaimensisäisenä ja terveen keuhkokudoksen makrofaagit voimakkaasti värjättiin vasta-(kuvio 1 B). Kuitenkin arvioitaessa ytimet, makrofagi ilmentyminen FAP-1 ei ole otettu huomioon. S1 Taulukossa yhteenveto yhdistysten FAP-1 ja α-SMA kanssa kliinis markkereita. Korjausten jälkeen useita testejä ei merkitseviä havaittu.

Taulukossa 2 esitetään yhteenveto merkittävä korrelaatiot FAP-1 ja α-SMA kanssa kasvaimeen liittyvien proteiinien aiemmin analysoitu tämän potilasryhmän kohortissa. S2 Taulukko nimet kaikki merkit sisältyvät korrelaatio analyysit (n = 105). Korjausten jälkeen useita testejä, merkittäviä korrelaatioita havaittiin välillä FAP-1 ja seuraavat markkerit: strooman ilmaus HIF2 (r = 0,26), LDH5 (r = 0,25), FOXP3 (r = 0,23), CSF1R (r = 0,26) ja miR21 (r = 0,27) ja kasvainsolun ilmentymistä p21 (r = 0,30) osuus kohortin; strooman ilmaus CSF1R (r = 0,29) ja mir21 (r = 0,31) että SCC alaryhmä; strooman ilmaus HIF2 (r = 0,42) ja kasvainsolun ilmaus MCT3 (r = -0,42) ADC alaryhmä. α-SMA ei todettu merkitsevää korrelaatioita, ei koko materiaali, eikä alaryhmiä, korjausten jälkeen useita testejä tehtiin.

Keskustelu

Tässä tutkimuksessa käynnistettiin tutkia mahdollisia prognostisia vaikutus valuuttalisiin NSCLC, ja nykyiset korrelaatiot näiden solujen muiden asianomaisten kasvain biologisia merkkiaineita. Tuoreessa tarkastelun Cortez et al. korostettiin neljää toiminnallista CAF alaryhmiä mukaan ilmaus efektorimolekyyleille ja reseptorit; CAF

FAP, CAF

FSP1, CAF

PDGFR-α ja CAF

PDGFR-β [8]. Merkittäviä ponnistuksia on omistettu tutkia roolia CAF alatyyppien NSCLC. Eniten tutkittu alatyyppi, CAF

Podoplanin, on liittynyt lyhyempi eloonjäämiseen sekä ADC ja SCC keuhkosyöpäpotilaita [11-14] ja niiden läsnäolo välikarsinan imusolmukkeiden etäpesäkkeet riskiä välikarsinan toistumisen [15,16 ]. Johtuen CAF heterogeenisuus ja puute yhden universaali merkki, päätimme tunnistaa valuuttalisiin kaksi yleisimmin käytetty merkkiaineiden sulkea lepotilassa fibroblasteista valuuttalisiin eli FAP-1 ja α-SMA. Toisin kuin aikaisemmat selvitykset valuuttalisiin ja NSCLC, huomaamme, että CAF

FAP ennustavat suotuisan ennusteen SCC alaryhmä. Kiehtovan, tutkimuksessamme FAP-1 ja α-SMA ilmaisua eivät korreloi keskenään, mikä osoittaa, että nämä merkit tunnistaa eri valuuttalisien alatyyppejä. Lopuksi Tutkimuksemme paljastaa mielenkiintoisia korrelaatioita CAF

FAP ja muissa elimissä molekyylimarkkereina että tuki ymmärtämään mekanismeja havaittua vaikutusta ennusteeseen. Tietääksemme tämä tutkimus on suurin arvioinnin CAF

FAP ja CAF

α-SMA NSCLC.

1. CAF

FAP NSCLC

Liao et ai. tutkitaan rooli CAF

FAP pienessä sarjassa 59 NSCLC potilaiden ja todettu korkeampia FAP ilmentävien stroomasolujen olevan itsenäistä indikaattori huonosta kokonaiselinaika [17]. Sen sijaan löysimme suuremmassa potilaan kohortin läsnäolo CAF

FAP ennustaa lisääntynyt tautikohtaista selviytymisen SCC, mutta ei ADC potilailla. Määritelty rooli CAF

FAP ymmärretään huonosti ja niiden läsnäolo on tutkittu muissa kasvain ryhmissä erilaisia ​​tuloksia. Invasiivisen ductal rintasyöpä, CAF

FAP liittyy elonjäämisetua, kun ADC haiman ja peräsuolen ne liittyvät vähentynyt selviytymisen [30-32]. Nämä tulokset, linjassa tutkimuksen mukaan CAF

FAP vuorovaikutuksessa kasvainsolujen ja muiden toimijoiden kasvain mikro-ympäristön ero tavoilla mukaan yhteydessä, kasvain vaiheessa ja kudosten alkuperän. Ero tutkimuksessamme ja Liao tutkimus voidaan selittää niiden huonompi määrä mukana potilaita, käyttö koko-slide tutkimukset

vs

TMA kairausnäytteitä, tai erot potilasaineistoihin muuten kateissa.

on selvää, meidän TMA tutkimuksella voi suoraan selittää mekanismeja näiden havaituista vaikutuksista. Kuitenkin laaja korrelaatio analyysit (taulukko 2) meidän potilaan kohortin paljastaa vahva positiivinen yhteys CAF

FAP ja strooman ilmentyminen pesäkkeitä stimuloiva tekijä reseptori 1 (CSF1R) ja mikro-RNA 21 (miR21) SCC ja strooman ilmaus hypoksian indusoiman tekijän 2 (HIF2) ADC ja voimakas negatiivinen yhdessä kasvainsolun ilmaus monokarboksylaatti kuljettimen 3 (MCT3) ADC. Stroomakasvaimet CSF1R voidaan ilmaista sekä makrofageissa ja myelooisissa dendriittisoluissa (DC) [33]. Läsnäolo tyyppiä M1 sytotoksisten makrofagit selittäisi eloonjäämishyötyä vietämme CAF

FAP SCC potilaita, makrofagit välittömänä päämääränä syöpäsoluja. CSF1R positiivinen DC pystyvät ottamaan antigeenin ja niiden esiintyminen voi osoittaa paikallisen im- [33]. miR21 on kuvataan yleisesti onkopsykologista miR ja ilmaistaan ​​useimmissa kiinteiden syöpien [34]. Tuore tutkimus on muodostanut yhteyden miR21 ilmaisun ja CAF muodostumat ja voisi selittää positiivinen korrelaatio näkyy meidän kohortissa SCC potilaista [35]. Olemme aikaisemmin tunnistettu high strooman miR21 ilmaus ennustaa huono selviytymisen alaryhmä NSCLC potilaiden [36]. Tässä tutkimuksessa matalan miR21 ilmentävät ryhmä koostui vain 21 potilasta, jotka mahdollisesti selittää havaitun elonjäämisetua että SCC alaryhmä, vaikka kohtalaisen vahva korrelaatio miR21 havaitaan.

Edelliset tulokset ovat osoittaneet korkea strooman ilmaus HIF2 olla suotuisa indikaattori ennusteeseen SCC, mutta ei ADC, kun kasvainsolun ekspressio MCT3 on riippumaton ennustetta riippumatta histologista alaryhmien [37,38].

strategioita on kehitetty hyödyntämään läsnä FAP ilmentävillä strooman solujen syövän hoidossa. Ne voidaan jakaa kahteen ryhmään i) jotka tavoitteet ja neutraloi CAF

FAP suoraan ja ii) ne, jotka hyödyntävät FAP ilmentyminen kasvainten stroomasoluissa toimittaa lääkkeen tuumoripaikkaan [39-43]. Tuloksemme osoittavat, että NSCLC potilaiden, ja erityisesti SCC alaryhmä, ensimmäinen lähestymistapa voisi olla haitallisia.

2. CAF

α-SMA NSCLC

α-SMA on yleisesti hyväksytty myofibroblastin merkki, vaikka merkinnät ovat epäspesifisiä ja muita solutyyppejä, kuten perisyyteissä voidaan myös värjätä [8]. Chen et ai. tutkitaan roolit CAF

α-SMA ja CAF

TGF-β pienessä kohortin 78 NSCLC potilaiden kaikissa vaiheissa ja histologialtaan käyttäen koko kasvainkudoksen dioja. He löysivät CAF

α-SMA olevan itsenäistä indikaattori vahingollisia [10]. Tutkimuksessamme läsnäolo CAF

α-SMA ei ilmennyt mitään varoituksia syntymässä olevista, ei yleisessä väestöstä, eikä alapopulaatioiden mukaan histologia. Ero tulos voidaan selittää erilaisia ​​lähestymistapoja käytetään (koko dia vs TMA) tai eri määrä potilaista ikäryhmät. Lisäksi etiologia keuhkosyöpää voisi olla myös erilainen. Olettaen, että Chen et al. pääasiassa mukana potilaita Suzhoun alueella, joka on tiheään asuttuja ja teollisuusmaiden alue, on mahdollista, että tutkimuksessa oli mukana suurempaa määrää potilaan kanssa tupakointiin jotka eivät liity keuhkosyöpä. Valitettavasti Chen tutkimuksessa ei ollut tietoa tupakoinnista. Sen sijaan meidän Tutkimukseen otetuista potilasta Pohjois-Norjasta, harvaan asutulla alueella juuri mitään saastuttavia teollisuuden, ja vain 18 pois 536 mukana olevista potilaista ei ollut koskaan tupakoinut. Olisi mielenkiintoista tutkia, miten CAF

α-SMA reagoi erilaisiin ärsykkeisiin (esim. Tupakointi

vs

teollisuuden saasteet).

Mielenkiintoista, ei merkittävää korrelaatioita (korjauksen jälkeen useille testaus) välillä ei havaittu läsnäolo CAF

α-SMA ja muiden kasvaimeen liittyvien proteiinien aiemmin tutkittu potilaamme kohortissa.

Johtopäätös

NSCLC, tuloksemme osoittavat, että läsnäolo sekä varoituksia merkitys CAF alatyyppejä eroavat histologisia alaryhmiä ja että läsnäolo CAF

FAP voi hyödyttää selviytymisen NSCLC SCC potilaista. Nämä tulokset ovat ristiriidassa jonkin muun Pienessä tutkimuksessa CAF

FAP NSCLC. Tämä ristiriita on tärkeää, koska CAF

FAPtargeting strategioita kehitetään. Hyödyntäminen tällaisia ​​strategioita pienisoluista keuhkosyöpää, etenkin SCC alaryhmä, tulisi suhtautua huolellisesti kunnes nämä tulokset edelleen validoitu ja tutkitaan

in vitro

ja

in vivo

kasvain malleja sekä SCC ja ADC NSCLC.

tukeminen Information

S1 arkisto. Pakattu versio S1 ja S2 taulukot.

Doi: 10,1371 /journal.pone.0134965.s001

(ZIP) B S1 Taulukko. Korrelaatioita FAP-1 ja α-SMA ja kliinis muuttujia.

Doi: 10,1371 /journal.pone.0134965.s002

(DOCX)

S2 Taulukko. Luettelo merkkiaineiden tutkittu meidän kohortissa.

Doi: 10,1371 /journal.pone.0134965.s003

(ODS) B