PLoS ONE: MiR-26a Edistää munasarjasyöpä leviämisen ja Tumorigenesis
tiivistelmä
MikroRNA (miRNA) tärkeitä posttranskriptionaalisella geeniekspression osallistuvat taudin alkamisen ja etenemisen ihmisen syövän. Tässä tutkimuksessa olemme kertoi, että
miR-26a
oli yli-ilmentynyt ihmisen EOC yksilöiden ja ekspressiotaso ekstrasellulaaristen
miR-26a
plasmaan voi erottaa potilaiden terveiden valvontaa EOC. Kohdunulkoinen ilmaus
miR-26a
munasarjasyövän (OC) solujen lisääntynyt solujen lisääntymistä ja klonaalinen muodostumista. Kasvu edistävää vaikutusta OC solujen kasvua välittämä
miR-26a
inhibition posttranscription ER-α. Lisäksi esto
miR-26a
tukahdutti kasvaimen muodostumisen saatu aikaan injektoimalla OC solut nude-hiirissä. Tuloksemme viittaavat siihen, että poikkeavasti ilmaistaan
miR-26a
voi myötävaikuttaa OC kehittämiseen.
Citation: Shen W, Song M, Liu J, Qiu G, Li T, Hu Y, et ai. (2014)
MiR-26a
Edistää munasarjasyöpä leviämisen ja kasvaimen kehittymisen. PLoS ONE 9 (1): e86871. doi: 10,1371 /journal.pone.0086871
Editor: Jin Q. Cheng, H. Lee Moffitt Cancer Center Research Institute, Yhdysvallat
vastaanotettu: 17 kesäkuu 2013; Hyväksytty: 16 joulukuu 2013; Julkaistu: 22 tammikuu 2014
Copyright: © 2014 Shen et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.
Rahoitus: Tämä työ sponsoroi avustusta Hanke nro 30571836 päässä NNSF (National Natural Science Foundation) Kiinassa. Lisäksi työ esitteli on osa projekteja Project No.L2010681 tukee taloudellisesti Science Foundation opetusviraston Liaoningin maakunnassa Kiinassa, ja Project No.201202259 taloudellista tukea Science Foundation of Science and Technology Bureau Liaoningin maakunnassa Kiinassa . Kirjoittaja Min Song osaltaan kokeellisen conceiving ja suunnittelu, ohjaus ja keskustelua hankkeen, joten hän on co-vastaavuus kirjoittaja tämän paperin. Kaikki muut rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.
Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.
Johdanto
OC on viidenneksi yleisin syöpä naisilla ja johtava syy syöpäkuolemista gynekologisista maligniteetti länsimaissa [1]. Vuonna 2012 on 22280 uutta tapausta ja 15500 kuolemantapaukset OC Yhdysvalloissa mukaan kansallisen syövän tilastoihin. EOC osuus 85% -90% munasarjasyöpä. Valitettavasti yleinen ennuste on huono ja molekyylitason tapahtumia, jotka johtavat tämän taudin kehitystä ovat vielä vähän tunnettu.
miRNA edustavat suurta perhettä endogeenisen Koodaamattomat RNA: iden ja posttranscriptionally säädellä geeniekspressiota [2]. Viimeaikaiset tutkimukset ovat paljastaneet kriittiset toiminnot miRNA välttämättömiä prosesseissa, kuten solujen lisääntymisen, erilaistumisen ja solukuoleman [3]. Muuttunut ilmentyminen tai mutaatio miRNA on raportoitu syöpää, kuten keuhkosyöpä, rintasyöpä, leukemia ja muut syövät [4]. Keuhkojen syöpäsoluja yli-ilmentyminen
let-7
inhiboi niiden kasvua kohdistamalla Ras [5], [6]. Lisäksi
miR-21
suoraan kohdistaa kasvain vaimennin PTEN hepatosellulaaristen syöpä [7]. Lisäksi useat tutkimukset osoittivat, että miRNA voivat toimia joko tuumorisuppressoreilla (kuten on asianlaita
miR-15a-miR-16-1
cluster [8]) tai onkogeenien (kuten on asianlaita
miR-21
[
9
]).
genominlaajuiset miRNA ilmentymisen profilointi osoitti
miR-26a
säätelyhäiriötä erilaisissa syövissä [10]. Tässä tutkimuksessa havaitsimme, että
miR-26a
yli-ilmentyy ihmisen EOC. Osoitamme, että esto
miR-26a
laski proliferaatiota ihmisen EOC solujen, ja kasvun estyminen EOC solujen nude-hiirissä. Lisäksi ERa oli alas-säädellä
miR-26a
in EOC soluissa. Lisäksi olemme havainneet, että solunulkoinen
miR-26a
plasmassa voi erottaa potilaiden terveiden valvontaa EOC. Tutkimuksemme osoittaa, että poikkeava ilmentyminen
miR-26a
on kriittinen inhimillisen EOC ja mittaamiseen verenkierrossa
miR-26a
voi olla hyvä tapa EOC diagnoosin.
Materiaalit ja menetelmät
potilaat
Clinical yksilön (myös kudos- ja plasmanäytteistä) kerättiin potilailta rekisteröity Ensimmäinen Affiliated sairaala China Medical University (Shenyang, Kiina). Potilaat tiedot on koottu taulukkoon 1, taulukko S1 ja Taulukko S2.
Materiaalit
Vasta vastaan ERa oli Santa Cruz (Santa Cruz, CA, USA), vasta-aine α tubuliinin Sigma (St Louis, MO, USA). Kaikki muut reagenssit olivat yhtiöltä Sigma. Anti-miR-26a ja hölynpölyä anti-miR olivat GenePharma (Shanghai, PR China). Cel-miR-39 jäljittelee olivat IBS (Shanghai, PR China).
Kvantitatiivinen RT-PCR
(qRT-PCR, kvantitatiivinen käänteiskopioijaentsyymin-polymeraasiketjureaktio) B
eristetty kokonais-RNA kliinisistä näytteistä tai soluista käyttämällä Trizol reagenssia (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) käänteistranskriptoituneet cDNA mukaan edellisen raportin [11]. RNA: n eristäminen plasmasta ja kvantifiointi miRNA suoritettiin, kuten on kuvattu [12]. Lyhyesti, 25 fmol Cel-miR-39 jäljittelee lisättiin 400 ul plasma. Reaaliaikainen PCR suoritettiin käyttäen SYBR green PCR master mix (TaKaRa, Otus, Shiga, Japani). Monistus ja havaitseminen suoritettiin käyttäen ABI Prism 7700-järjestelmä (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA) valmistajan ohjeiden mukaisesti. Cel-miR-39 otettiin viitteenä geenin plasmanäytteistä. Käytetyt alukkeet olivat lueteltu taulukossa S3.
Cell Culture
Ihmisen OC solulinjat, SKOV-3, ES2 (Cellbank, Shanghai, PR China) ylläpidettiin McCoyn 5a täydennetty 10% (v /v) vasikan sikiön seerumia (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA). Näitä soluja inkuboitiin 37 ° C: ssa, 5% CO
2.
Vector Hakemisto Rakentaminen
Täyspitkä ihmisen
miR-26a
monistettiin ihmisen genomisesta DNA: ja kloonattiin pcDNA3.1 klo KpnI ja Xhol mukaan edellisen raportin [13] ja [14]. Ihmisen villityypin ERa muodostettiin PCR: llä cDNA: sta, ja PCR-tuotteet insertoitiin pcDNA3.1, kuten on kuvattu [15].
Cell Growth määritys
Solun kasvua arvioitiin määrittämällä solun numeron ja pesäkkeiden muodostumista. Solut transfektoitiin
miR-26a
tai anti-luki-
26a
käyttämällä FuGene HD (Roche, Indianapolis, IN) mukaan valmistajan protokollaa. Viljelyn jälkeen 24 tunnin kuluttua solut ympättiin aluksi tiheys 1 x 10
5 per 35 mm lautasen. Solut kerättiin sitten ilmoitettuina aikoina ja numerot laskettiin käyttäen COULTERTM (Beckman, Fullerton, CA, USA).
transfektoidut solut
miR-26a
ympättiin 96-kuoppaiselle levyille pitoisuudella 2,5 x 10
3-soluja, ja mitattiin sen jälkeen 48 h käyttäen WST-1-määritys (Boster, Wuhan, PR Kiina), suoritettiin valmistajan protokollan.
yhteensä 500-solut, jotka on transfektoitu
miR-26a
tai tyhjän vektorin (Ctrl) siirrostettiin 35 mm: n annoksia erikseen kolmena kappaleena. Kolme viikkoa myöhemmin pesäkkeet kiinnitettiin 4% paraformaldehydillä, läpitunkema 20% metanolia ja värjättiin kristallivioletilla. Värjätyt solut eluoitiin 10% jääetikkaa ja OD595-arvot mitattiin spektrofotometrillä indikaattorina solujen määrä.
Luciferase Reporter Assay
1,5 x 10
5 SKOV3 vakaa solujen 35 mm: n maljaa transfektoitiin yhdessä pGL3-ERa-WT: llä (1 ug) tai pGL3-ERa-Mut (1 ug) ja PRL-TK (1 ug) käyttämällä.
Fugenea® HD Transfection Reagent (Roche, Diagnostics Corp., Indianapolis, IN) valmistajan protokollaa. Neljäkymmentäkahdeksan tuntia transfektion jälkeen, lusiferaasiaktiivisuus mitattiin käyttämällä Dual lusiferaasireportteri- määritystä (Promega) ja normalisoitiin Renilla lusiferaasiaktiivisuus.
Western-blottaus
Proteiinit erotettiin SDS-8% PAGE, siirrettiin PVDF-kalvoille (Amersham, Buckinghamshire, UK) ja tutkittiin primääristen vasta-aineiden ja sekundäärisiä vasta-aineita on konjugoitu piparjuuriperoksidaasiin. Proteiinivyöhykkeet visualisoitiin Amersham ECL-järjestelmää ja skannataan. Niiden tiheys määritettiin ImageQuant 5,2 ohjelmisto (Amersham).
In vivo kasvaimen kehittymisen
SKOV3- transfektoiduissa soluissa
miR-26a
tai anti-luki-
26a
erikseen. Kukin nude hiireen injektoidaan subkutaanisesti 2 x 10
6 transfektoitujen SKOV3- soluja. Kolmekymmentä tai kolmenkymmenen-viiden päivän kuluttua injektion jälkeen hiiret tapettiin ja kasvaimet otettiin. Pisin ja lyhin halkaisija kasvaimen pantiin merkille d1 ja d2. Kasvaimen tilavuus laskettiin käyttäen yhtälöä: V = d1 x d2 x d2 /2. Kasvaimen paino mitattiin sitten.
Tilastot
Monivertailuja arvioitiin SPSS tilasto-ohjelmalla tilastollista analyysiä. Wilcoxonin testi ja Krusikal Wallis H Test käytettiin tilastolliseen analyysiin potilaan näytteitä. Muita vertailuja ryhmien tilastollista merkittävyyttä suoritettiin Studentin t-testiä ja varianssianalyysi (ANOVA). Tulokset katsottiin merkittävää eroa * P 0,05; ** P 0,01.
Ethics lausunto
Tutkimus täyttää kaikki etiikka kokeen. Kliiniset näytteet kerättiin suostumuksella potilaiden ja terveiden vapaaehtoisten ja hyväksyminen Medical Research eettisen komitean ensimmäisen Affiliated sairaala China Medical University. Kaikki osallistujat ovat antaneet kirjallisen tietoon perustuvan suostumuksen osallistumaan tähän tutkimukseen. Kaikki toimenpiteet, joissa käytetään eläimiä hyväksyi Institutional Animal Care ja käyttö komitean Kiinan Medical University.
Tulokset
Lisääntynyt ilmentyminen miR-26a Näytteet ja Plasma Human EOC
on havaittu, että ilmaisu taso
miR-26a
oli vähentynyt tai lisääntynyt ihmisen maligniteettien, kuten rintasyöpä [16], nenänielun karsinooma [17], [18], ja glioblastooma [19] , mikä osoittaa monimutkainen rooli
miR-26a
in etenemistä syöpäsairauksia. Tutkia mahdollista roolia
miR-26a
in EOC kehittämiseen, ensin tutkinut ilmaus
miR-26a
yksilöiden ja plasman EOC by SYBR-Green varsi-silmukka qRT-PCR [20]. Tutkimme ilmaus
miR-26a
26 Tuumorinäytteissä ja 19 normaalia munasarjat. Kuten kuviossa 1A on esitetty, ilmentymisen tasot
miR-26a
kasvaimen näytteet olivat huomattavasti korkeammat kuin normaalissa munasarjassa näytteissä. Samoin pitoisuudet
miR-26a
olivat korkeammat plasmassa EOC potilaista (n = 17) kuin, että vuodesta terveillä verrokeilla (n = 13) (kuvio 1 B). Yhdessä nämä tulokset tarjoavat meille alustava näyttö siitä, että
miR-26a
voi olla rooli inhimillisen EOC.
(A) kvantitatiivinen analyysi ekspressiotasot
asennuspalveli- 26a
in EOC näytteiden normalisoida kuin 18S rRNA by qRT-PCR. Tiedot jokainen piste oli keskiarvo yhden näytteen toistettiin kolmessa riippumattomassa kokeessa (normaali, n = 19; kasvain, n = 26). ** P 0,01 vs Normaali. (B) kvantitatiivinen analyysi ilmentymisen plasman
miR-26a
by qRT-PCR: llä. Tiedot jokainen piste oli keskiarvo yhden näytteen toistettiin kolmessa riippumattomassa kokeessa (normaali, n = 13; kasvain, n = 17).
yli-ilmentävät miR-26a mainosvideosuositukset EOC Cell Growth ja Inhiboiva miR-26a Tukahdetut EOC Cell Proliferation
seuraava tutki
miR-26a
vaikuttaa EOC solujen kasvua käyttämällä SKOV3- ja ES2 soluja malleina. Kuten kuviossa 2A on esitetty, kasvun kyky SKOV3- ja ES2 soluja lisättiin yli-ilmentyminen
miR-26a
. Päinvastoin, leviämisen transfektoiduissa soluissa anti-miR-26a oli merkittävästi vähentynyt verrattuna, että transfektoitujen solujen nonsense (kuvio 2B). WST-1 määritys osoitti vastaavia tuloksia solujen lisääntymisen (kuvio 2C). Nämä tulokset viittaavat siihen, että
miR-26a
todellakin vaikuttavat EOC solujen kasvua.
kasvukäyrät SKOV3 (A) tai ES2 (B), jotka on transfektoitu
miR-26a
( vasen paneeli) tai anti-miR-26a (oikea paneeli). Solujen lukumäärät normalisoitiin kuin 0 tuntia. Data oli keskiarvo ± S.E. kolmen itsenäisen kokeen kolmena kappaleena. * P 0,05, ** p 0,01 vs tyhjän vektorin (Ctrl) tai negatiivinen kontrolli (NC). (C) Solujen proliferaatio transfektoitu
miR-26a
mitattiin WST-1-määritystä. Data oli keskiarvo ± S.E. kolmen itsenäisen kokeen kolmena kappaleena. ** P 0,01 vs tyhjän vektorin (Ctrl) (D) kvantifiointi pesäkkeiden muodostaman Ctrl tai
miR-26a
transfektoiduissa soluissa. Data oli keskiarvo ± S.E. Kolmen riippumattoman kokeen. ** P 0,01 vs Ctrl.
käsite testattiin vielä kloonista muodostumista määrityksessä. Lukumäärä ja koko muodostuneiden pesäkkeiden olivat merkittävästi lisääntynyt
miR-26a
transfektoiduissa soluissa (kuvio 2D). Yhdessä nämä tulokset viittaavat siihen, että
miR-26a
todellakin mukana säätelyssä EOC solujen kasvua.
ERa oli Target Gene Mir-26a EOC Solut
sitten tutkittiin mekanismeja, joilla
miR-26a
edistää EOC soluproliferaatiota. Potilailla, joilla on maksasyövän, ilmaus
miR-26a
oli suurempi naisilla kuin miehillä [21]. Lisäksi
miR-26a
säännelty maksan kasvainsolujen kasvua kohdistamalla ERa [22]. Kuten on esitetty kuviossa 3A, lusiferaasiaktiivisuus pGL3-ERa-WT SKOV3–stable1 soluja (S1) oli paljon pienempi kuin kontrollisoluissa. Lusiferaasiaktiivisuutta pGL3-ERa-Mut pelastettiin Stable1 soluissa. Me seuraavaksi tutkittava, onko
miR-26a
voi säädellä endogeenisen ERa ilmentymistä EOC soluissa. Verrattuna kontrolli, endogeenisen ERa mRNA-tasot (kuvio 3B) ja proteiinin tasot (kuvio 3C) olivat alassäädetty kun solut transfektoitiin
miR-26a
.
(A) Stable 1 -soluja (S1) transfektoitiin pGL3-ERa-WT (WT) toimittaja vektorin tai pGL3-ERa-Mut (MUT). Data oli keskiarvo ± S.E. Kolmen riippumattoman kokeen. ** P 0,01 vs. kontrolli soluja (Ctrl). (B) kvantitatiivinen analyysi ekspressiotasot ERa in Stable1 (S1), Stable2 (S2) ja ohjaus (Ctrl) solut määritettiin ja normalisoitiin GAPDH mRNA-tasoja. * P 0,05, ** P 0,01 vs Ctrl. (C) Western-blot-analyysi kokosoluliuotteista uutettu esitetty stabiili soluissa käyttäen mainituilla vasta-aineilla. Data edusti kolmen erillisen kokeen ja määrän normalisoitunut Ctrl. Tubulin toimi latauskontrollina. (D) kasvukäyrät S1, S2 ja Ctrl-soluja. Data oli keskiarvo ± S.E. kolmen itsenäisen kokeen kolmena kappaleena. * P 0,05, ** P 0,01 vs Ctrl. (E) yli-ilmentyminen ERa vähentynyt kasvun S1-solujen transfektion jälkeen. Solujen määrä normalisoitiin Ctrl soluihin. Data oli keskiarvo ± S.E. kolmen itsenäisen kokeen kolmena kappaleena.
MiR-26a kontrolloi leviämisen EOC Solut kautta ERa
Koska
miR-26a
oli mukana leviämisen of EOC solujen ja ERa oli tavoite
miR-26a
, me seuraavaksi testataan onko liiallinen ilmentyminen ERa voisi pelastaa edistäminen lisääntymisen
miR-26a
in EOC soluissa. Lisäksi stabiili ilmentyminen
miR-26a
kaksi SKOV3-solukloonien (S1 tai S2) lisäsi solujen kasvu noin 1,58 tai 1,37-kertaisesti, vastaavasti (kuvio 3D). QRT-PCR-analyysi osoitti, että
miR-26a
ilmentymisen taso oli suuresti lisääntynyt S1 ja S2-solut (kuva S1). Kuten kuviossa 3E, kun taas kasvu S1 transfektoitujen solujen ERa, ei ollut erilainen kuin kontrollisoluja. Nämä tulokset osoittavat, että
miR-26a
ohjattu leviämisen EOC solujen säätelemällä ERa ilmaisun.
MiR-26a edistänyt Kasvain nude-hiirissä
suoran todisteita siitä, että
miR-26a
vastasi EOC kehittämiseen, SKOV3- solut transfektoitiin joko
miR-26a
tai anti-miR-26a injisoitiin karvattomien hiirten kyljen, kuten on kuvattu. Viikko istutuksen jälkeen, ksenosiirrettyjä kasvaimia näkyi. Kolmenkymmenen tai kolmenkymmenen-viiden päivän kaikki nude-hiiret tapettiin ja kasvaimet otettiin pois ja punnittiin. Tällä makroskooppinen havainto, erot kasvaimen koon ja tilavuuden joukossa kaksi ryhmää olivat ilmoitettu. Kasvain tilavuus syntyvät tyhjän vektorin oli 0,435 ± 0,042 (cm
3, P 0,01), että
miR-26a
ryhmässä oli 0,829 ± 0,172 (cm
3, P 0,01) (kuvio 4A), joka negatiivisessa kontrolliryhmässä oli 0,941 ± 0,163 (cm
3, P 0,01), ja että anti-miR-26a oli 0,248 ± 0,05 (cm
3, P 0,01) ( kuvio 4B). Keskipaino kasvaimen tuotettu tyhjän vektorin oli 0,433 ± 0,07, kun taas keskimääräinen paino kasvain tuotetaan
miR-26a
oli 0,821 ± 0,02 (g, P 0,01). Keskipaino kasvaimen syntyy roskaa oli 1,062 ± 0,169, kun taas keskimääräinen paino kasvain tuotetaan anti-miR-26a oli 0,473 ± 0,05 (g, P 0,01), tässä järjestyksessä. Edellä mainittujen tulosten mukaan
miR-26a
oli kriittinen kehittämistä EOC
in vivo
.
Kasvaimen muodostuminen syntyy SKOV3- solut. (A), jotka on transfektoitu
miR-26a
tai anti-miR-26a (B) Nude-hiiriin ruiskutettiin ihonalaisesti 2 x 10
6 transfektoiduista soluista. Edustavat kuvat, mittaus lopullinen tilavuus ja paino kasvainten muodostunut. Kasvain koot mitattiin ja laskettiin Materiaalit ja menetelmät. Data oli keskiarvo ± S.D. 4-6 hiirillä. ** P 0,01 vs tyhjän vektorin tai nonsense.
Keskustelu
Tässä tutkimuksessa olemme osoittaneet, että ilmentymistaso
miR-26a
oli kasvanut huomattavasti ihmisen EOC näytteissä, ja veripohjaisten
miR-26a
taso voi erottaa potilaiden terveiden valvontaa EOC. Tuloksemme näytetään myös, että ilmentymistaso
miR-26a
vaikutti EOC solujen kasvua viljelmässä. Lisäksi ERa oli tavoite
miR-26a
in EOC soluissa. Lisäksi ilmentymistaso
miR-26a
vaikuttanut kasvainten muodostumista nude-hiirissä. Näin ollen meidän tuloksemme ovat sopusoinnussa ajatuksen, että
miR-26a
on kriittinen inhimillisen EOC.
MikroRNA ovat tiedetään säätelevän geenien ekspressiota mukana useissa biologisissa prosesseissa, kuten kehittäminen, leviämisen, apoptoosin ja stressin vastaus [23]. Viimeaikaiset tutkimukset osoittivat suoran yhteyden miRNA ja ihmisen syövissä [4], [24], [25], [26]. MiRNA voi olla onkogeeninen miRNA (oncomirs) tai tuumorisuppressoriproteiinia syöpään liittyvää. Kuten aiemmin on esitetty, menetys onkogeenisiä
miR-21
, joka toimii tukahduttamiseksi RHOB ilmaisua, liittyy korkeus on RHOB maksasolukarsinoomassa ja rintasyövän solujen [13]. Tärkeys muiden miRNA, kuten
let-7
,
miR-16
,
miR-126
ja
miR-125b
on ollut osoitettu [27]. Viimeaikaiset microarray profiilitiedot osoittaa
miR-26a
säätelyhäiriötä erilaisissa syöpä [4]. Vuonna maksasyövän,
miR-26a
suojaa normaali maksan kudoksen maksasolukarsinoomaan edistävää tulehdus [21], ja näyttää antagonisoida ihmisen rintasyövän [16] ja rabdomyosarkoomasolut [28]. Päinvastoin,
miR-26a
helpottaa glioblastoma muodostumisen onkogeenin [19]. Tuloksemme saatu voitto-of-function ja menettämisestä toiminnon lähestymistapojen osoitti, että
miR-26a
edistänyt leviämisen ja estäminen
miR-26a
tukahdutetaan EOC solujen lisääntymisen.
munasarjasyöpä, ERa ilmentyminen on tutkittu korreloivan chlinico-patologinen parametrit ja ennusteen [29], [30]. Edellinen tutkimus osoitti, että se ei paljastanut mitään korrelaatiota histologinen tyyppi kasvaimia ja munasarjasyövän luokittelu [30]. Univariate selviytyminen analyysi paljasti, että potilaalla on positiivinen-ERa asema oli merkittävä parempi ilman taudin etenemistä verrattuna potilailla, joilla ei ilme [31]. Meidän tulokset, ilmaus
miR-26a
yksilöiden ja plasman EOC olivat paljon korkeampia kuin normaaleissa munasarjassa näytteissä, ja
miR-26a
edistää EOC soluproliferaatiota kohdistamalla ERa. Se tarkoittaa, että
miR-26a
voisi olla tärkeä tekijä selviytymisen munasarjasyöpä.
Kiertävä biomarkkereiden käytetään diagnostic tauti, seurata terapeuttisen vaikutuksen ja ennustaa toistumisen kliinisissä sovelluksissa. Löytö kiertävän miRNA syöpäpotilailla osoittavat niiden mahdollisen soveltamisen niin voimakas biomarkkereita syöpädiagnostiikassa [32]. Viimeaikaiset tutkimukset paljastivat, että syöpään liittyvien miRNA voisi vakaasti havaittavissa plasmassa ja seerumissa, jotka ovat peräisin syöpää kudoksista [4], [33]. Tuloksemme tutkimaan mahdollisuutta
miR-26a
levitetään biomarkkerina in hoitopaikassa kautta tutkimalla ilmaus
miR-26a
plasmassa EOC potilaista.
Yhteenvetona esto
miR-26a
laski EOC solujen kasvua viljelmässä ja nude-hiirissä.
MiR-26a
vaikuttanut leviämisen EOC solujen suuntaamalla ERa. Tärkeä seuraus Nykyinen tutkimus on, että
miR-26a
voisi olla potentiaalinen kohde terapeuttiselle väliintulolle ihmisten EOC.
tukeminen Information
Kuva S1.
MiR-26a
ilmentymisen taso oli suuresti lisääntynyt S1 ja S2-soluissa. QRT-PCR määritettiin ekspressiotasot
miR-26a
S1 ja S2-soluissa. Data oli keskiarvo ± S.E. kolmen itsenäisen kokeen kolmena kappaleena. ** P 0,01 vs Ctrl.
Doi: 10,1371 /journal.pone.0086871.s001
(DOC) B Taulukko S1.
ennusteeseen viittaavia tietoja ja
miR-26a
ilmentymisen valvonta.
doi: 10,1371 /journal.pone.0086871.s002
(DOC) B Taulukko S2.
ennusteeseen viittaavia tietoja ja
miR-26a
ilmentymistason munasarjasyöpä potilaille.
doi: 10,1371 /journal.pone.0086871.s003
(DOC) B Taulukko S3.
käytettävät alukkeet Kvantitatiivinen RT-PCR.
doi: 10,1371 /journal.pone.0086871.s004
(DOC) B