Krooninen sairaus

tiivistelmä

EphB2

geeni on mukana niin tuumorisuppressorigeeniä somaattisesti muuttunut molemmissa eturauhassyöpä (PC) ja peräsuolen syöpä. Olemme aiemmin osoittaneet yhteyden välillä

EphB2

ituradan roskaa variantti ja riski familiaalinen eturauhassyövän keskuudessa Afrikkalainen Amerikan Men (AAM). Täällä esitetyt testaamaan hypoteesia, jonka mukaan yhteinen vaihtelu sisällä

EphB2

lokuksen liittyy lisääntynyt riski satunnaista PC AAM. Me genotyyppi joukko 341 yhden nukleotidin polymorfismien (SNP), joka sisältää

EphB2

locus, kuten tunnettuja ja uusia koodaus ja koodaamattomalle variantit, vuonna 490 AA satunnaisia ​​PC tapauksissa ja 567 verrokkiin. Single merkki perustuva logistinen regressio analyysit paljastivat seitsemän

EphB2

SNP osoittaa tilastollisesti merkittävää yhteyttä eturauhassyövän riskiä väestöstä. Merkittävin yhdistyksen saavutettiin romaani synonyymi koodittavan SNP-kohdan, TGen-624, (Odds Ratio (OR) = 0,22; 95%: n luottamusväli (CI) +0,08-+0,66, p = 1 x 10

-5). Kaksi muuta SNP: t osoittavat myös merkitseviä kohti suojaava vaikutus rs10465543 ja rs12090415 (p = 1 x 10

-4), OR = 0,49 ja 0,7, vastaavasti. Kaksi muuta SNP paljasti suuntauksesta kasvu eturauhassyövän riskiä, ​​rs4612601 ja rs4263970 (p = 0,001), OR = 1,35 ja 1,31, tässä järjestyksessä. Lisäksi haplotyyppianalyysissä paljasti alhainen kytkentäepätasapaino- alueella, jossa on kahden korttelin liittyessä eturauhassyövän riskiä keskuudessa väestöstä. Nämä tiedot viittaavat siihen, että geneettinen vaihtelu on

EphB2

lokuksen saattaa lisätä riskiä satunnaista PC keskuudessa AAM.

Citation: Robbins CM, Hooker S, Kittles RA, Carpten JD (2011)

EphB2

SNP ja satunnaista Eturauhassyöpä Risk in Afrikkalainen amerikkalainen Men. PLoS ONE 6 (5): e19494. doi: 10,1371 /journal.pone.0019494

Editor: Jen-Tsan Ashley Chi, Duke University, Yhdysvallat

vastaanotettu: 02 marraskuu 2010; Hyväksytty: 08 huhtikuu 2011; Julkaistu: toukokuu 16, 2011

Copyright: © 2011 Robbins, et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tämä työ tukivat National Institutes of Health, National Cancer Institute, Center vähentää syövän Health erot Grant (R01CA122009) ja puolustusministeriön (DAMD W81XWH-07-1-0203). Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

eturauhassyöpä (PC) on edelleen miesten yleisin erityinen maligniteetti diagnosoitiin Yhdysvalloissa pelkästään vuonna 2010 noin 217730 uutta tapausta eturauhassyövän osuus 28% diagnooseista kymmenen johtava syöpätyyppeihin. Lisäksi arviolta 32050 kuolemantapausta johtuu tämän taudin vuosittain [1]. Monet riskitekijät kuten ruokavalion, elintapojen, hormonit, iän, ja rotu ovat sekaantuneet edistävän eturauhassyövän riskiä; kuitenkin, suvussa on merkittävin yksittäinen ja toistettavissa riskitekijä tiedossa, missä miehet kaksi tai kolme ensimmäisen asteen sukulaiset eturauhassyöpään oli viisi ja 11-kertainen riski sairastua eturauhassyöpään, vastaavasti [2], [3].

on yleisesti tiedossa, että esiintyvyys eturauhassyövän vaihtelee paljon syntyperää kanssa Afrikkalainen Amerikan Men (AAM), jolla suurimpia eturauhassyöpä hinnat maailmassa. Vuosien 2002-2006 esiintyvyys eturauhassyövän Yhdysvalloissa kohden 100000 miehiä oli 231,9 vuonna AAM verrattuna 146,3 Euroopan Amerikan Men (EAM) [1]. Ero näkyy vieläkin voimakkaammin, kun tarkastellaan kuolleisuus joukossa nämä kaksi ryhmää, joissa AAM, jolla on suurempi kuin kaksi kertaa suurempi (56,3 100000) eturauhassyöpä kuolleisuus verrattuna EAM (23,6 per 100000) tänä samaan aikataululla [1]. Vaikka onkin yleisesti hyväksytty, että sosioekonomiset tekijät ovat tärkeitä moottoreita erot eturauhassyövän ilmaantuvuus ja kuolleisuus, biologiset tekijät voivat myös olla merkitystä. Viimeaikaiset todisteet tukevat geneettinen komponentti osaltaan ainakin osittain tämän rotuun erot ja vaikuttamalla taudin etenemiseen [4]. Vakuuttava näyttö osoittaa vahvaa geneettisestä yhteydestä eturauhassyövän riskiä ja geneettisiä merkkejä klo 8q24, jossa useat riskin alleelien on vähäinen alleelifrekvenssit jotka ovat korkeampia populaatioissa viime Länsi-Afrikkalainen kunnollinen, viitaten rooliin lisääntyneestä eturauhassyövän AAM [ ,,,0],5], [6], [7], [8], [9], [10].

Lisäksi useat geenit kuten perinnöllistä eturauhassyöpää tuumorisuppressorigeeneille kuten

HPC /ELAC2 ja RNASEL

on liitetty suurentunut eturauhassyövän Afrikkalainen amerikkalaiset [11], [12], [13], [14]. Tätä varten meidän ryhmä on tutkinut suhdetta somaattisesti muuttuneita tuumorisuppressorigeeneille eturauhassyövässä ja riski familiaalinen eturauhassyövän keskuudessa Afrikkalainen American men. EPHB2 tyrosiinikinaasi oli ensimmäinen raportoitu eturauhasen syöpä kasvainsuppressorigeenin, kätkeminen somaattisista mutaatioista eturauhastuumoreissa [15]. Lisäksi somaattiset muutokset on

EphB2

lokus on raportoitu peräsuolen syövän sekä [16], [17], mikä edelleen tukee rooli

EphB2

tärkeänä syövän geeni. Lisäksi ituradan

EphB2

nonsense variantti (3055A T; K1019X) positiivisesti liittyy riski familiaalinen eturauhassyövän Afrikkalainen American men korkean riskin perheille [18].

Vaikka edellinen yhdistys tutkimus

EphB2

geeni on keskittynyt koodaavan alueen varianttien perinnöllistä eturauhassyöpää tapauksissa olemme asettaneet onko geneettinen vaihtelu on

EphB2

lokuksen liittyy riski satunnaista eturauhassyöpää Afrikkalainen amerikkalaiset. Kirjoittajat raportoivat genotyypin 341 yhden nukleotidin polymorfismien (SNP) koskee koko

EphB2

locus populaatiossa AAM lukien 490 satunnaisia ​​tapauksia ja 567 verrokkia etsiä yhteydestä

EphB2

genotyypit tai haplotypes ja eturauhassyövän riskiä tutkimuksessamme väestöstä.

tulokset

testaamiseksi yhteydestä geneettistä vaihtelua on

EphB2

lokuksen ja riski satunnaista eturauhassyövän keskuudessa AAM teimme yksityiskohtainen tapaus /kontrolli kandidaattigeenifragmenttikloonien assosiaatiotutkimuksessa. Ollakseen kattava, pikemminkin kuin käyttämällä tagged SNP lähestyi päätimme genotyypin kaikkien tunnettujen SNP kattaa

EphB2

geenin sisällä väestöstä. Valitsimme 355 SNP joka oli valittu genotyypitys Kansainvälisen HapMap Project kehittämiseksi omia haplotyypin kartta

EphB2

geeni tässä nimenomaisessa väestöstä. Nämä SNP täydennettiin joukko 14

EphB2

koodaus SNP aiemmin havaitsemien ja ilmoittamien ryhmämme [18]. Sen jälkeen määritys kehitys päädyimme yhteensä 341 SNP analysoitavaksi, mikä genotyypattiin meidän näyte 1057 AAM lukien 490 satunnaisia ​​tapauksia ja 567 verrokkiin. Tiedot näytteen väestöstä löytyy taulukosta 1. minimoidaan virheet mahdollisesti aiheuttamat väestön substructuring, kaikki yksilöitä meidän näyte on genotyyppi kanssa riippumaton sarja 100 sekoittumisen informatiivinen markkereita (tavoitteet). Alustava analyysi suoritettiin tunnistamiseksi SNP jotka olivat pois Hardy-Weinberg tasapaino (HWE). Kaikkiaan 26 SNP poikkesi HWE (taulukko S1). Lopuista 315 SNP, 19 niistä oli mono-alleelinen meidän väestöstä.

yksityiskohtaiset tulokset yhdistyksen analyysi kaikille informatiivinen SNP on esitetty taulukossa S2. Nämä tulokset ovat edelleen esitetty kuviossa 1. Sen jälkeen korjauksia geeniperimästä ja useita testaus, löysimme tilastollisesti merkitseviä seitsemän SNP sisällä

EphB2

geeni, joka pysyi merkittävän toistuvassa testaus (taulukko 2). Merkittävin yhdistyksen saavutettiin romaani synonyymi koodittavan SNP-kohdan, TGen-624, (Odds Ratio (OR) = 0,22; 95%: n luottamusväli (CI) +0,08-+0,66, p = 1 x 10

-5), joka näyttää tarjoavan suojaava vaikutus. Kaksi muuta SNP: t osoittavat merkittävää yhdistysten kohti suojaava vaikutus, mukaan lukien rs10465543 ja rs12090415 (p = 1 x 10

-4), OR = 0,49 ja 0,7, vastaavasti. Kaksi muuta SNP osoittivat suuntauksia kohti kasvua eturauhassyövän riskiä, ​​mukaan lukien rs4612601 ja rs4263970 (p = 0,001), OR = 1,35 ja 1,31 vastaavasti.

Plot sisältää näyttö kytkentäepätasapainossa (r

2), joka perustuu HapMap Yoruba (YOR) tiedot ja sijainnit SNP pitkin kromosomi 1. SNP näytetään harmaana eivät olleet HapMap. Rekombinaatio hinnat kuvattu sininen viiva sisällä juoni. Association analyysi P-arvot ikä- ja globaalin länteen Afrikkalainen syntyperä ja visualisoitiin LocusZoom (https://csg.sph.umich.edu/locuszoom/).

Testasimme myös mahdollisuus ovatko nämä seitsemän SNP olivat kunkin itsenäisen riskitekijöitä vai yhdistykset olivat riippuvaisia ​​toisistaan. Suoritimme vaiheittain regressiolla käyttämällä kunkin SNP erikseen syy samalla hallita muita varten. Mikään muu SNP vaikuttaneet yhdistyksen kun joko rsTGEN-624 tai rs12090415 katsottiin ennustavat riskejä.

Hyvin vähän pitkäksi sidos disequlibrium (LD) havaittiin poikki

EphB2

geenin (kuvio 1). Sen sijaan havaitsimme 38 pieniä haplotyyppi lohkot (suurin käsittävän noin 20 kb). Tämä on sopusoinnussa havaintojen että populaatiot viimeaikaiset Länsi-Afrikkalainen jälkeläisillä on vähemmän LD ja pienempiä lohko rakenteet (32). Haplotyypin yhdistys analyysit olivat yhtäpitäviä meidän yhden SNP-analyysit. Vain kolme SNP testatuissa määrätyissä haplotyyppi lohkot (rs1318720, rs4612601, ja rs10465531). Haplotyypin lohko 6, merkittiin mukaan SNP rs138720 ja rs4612601, ja haplotyyppi lohko 18, koodattu mukaan SNP rs12074138 ja rs10465531, liittyivät merkittävästi eturauhassyövän (taulukko 3).

Keskustelu

EphB2

geeni koodaa EPHB2 reseptorityrosiinikinaasia ja aiemmin tunnistettiin ryhmämme kasvainsuppressorigeenin eturauhassyövässä [15]. Riippumattoman tutkimuksen katsomalla 72 probands päässä Afrikkalainen amerikkalainen perinnöllisen eturauhassyövän perheiden tunnistettu 10 sekvenssivariantit

EphB2

geeni [18]. Tähän sisältyi yhteinen nonsense-mutaation K1019X tällöin todettiin yhdessä PC AA miehillä että oli suvussa PC jopa oikaisun jälkeen sekoittumisen. Kuitenkin tämä yhdistys ei havaittu AA satunnaisia ​​tapauksia, joissa PC [18].

Täällä on teettänyt onko geneettinen vaihtelu on

EphB2

lokuksen liittyy riski satunnaista eturauhasen syöpä Afrikkalainen American men. Ei kanssa seisoo, meidän kattava analyysi

EphB2

lokus edelleen tukee merkitystä

EphB2

geenin otaksutun tuumorisuppressorigeeniä osallisena sairauden etiologiassa eturauhassyövän ja että sekä yhteisiä ja harvinainen

EphB2

variantteja todennäköisesti merkittävä rooli lisääntyneeseen sairauden riskin satunnaista eturauhassyövän AAM. Aiemmin tunnistettu uusi synonyymi koodittavan SNP TGen-624 ei osoittanut mitään yhdistyksen kohonnut AA miesten suvussa PC, mutta täällä osoitamme, että AA miesten satunnaista tauti on tilastollisesti merkittävää yhteyttä riski. Tämä tukee edelleen merkitystä

EphB2

geeni paitsi AAM familiaalinen PC mutta myös AAM kanssa satunnaista PC, vaikka lisävalidointia muissa aineistoja tarvitaan täysin tukemaan -alueella.

samalla kun kannustetaan johdonmukaisuuden nykyisten ja aikaisempien tulosten, emme huomaa, että meidän tutkimus on rajallinen. Ensinnäkin, teho laskelmia käytetään määrittämään koko meidän tutkimusväestöstä, ja meidän vaatimaton otoskoko on riittävä havaitsemaan kohtalainen tai suuri vaikutukset (OR 1,5). Emme kuitenkaan rajoittuisi havaita loci pienempiä vaikutuksia (1,2-1,4). Lisäksi, vaikka me genotyyppi suhteellisen tiheä joukko tunnettuja SNP (~ 1 SNP per 700 emäsparia), on mahdollista, että ylimääräinen uusi ”yksityinen” SNP tärkeitä vaikutuksia olisi luultavasti ollut sisällä

EphB2

lokuksen, tukemalla mahdollisesti liittyä tutkimusten luonne perustuvat koko genomin tai ehdokkaan alueen sekvensointi kaapata kokonaisuudessaan geneettistä vaihtelua tietyllä tutkimuspopulaatioon.

kiinni paljon vaihtelua pitkin

EphB2

geenin ja havaittujen monet pienet haplotyypin lohkojen poikki geeniä, mikä viittaa siihen, että löytö geneettisen yhdistysten populaatioissa viime länteen Afrikkalainen laskeutuminen pitäisi luottaa korkearesoluutioisia haplotyyppien kartat perustuvat Afrikkalainen populaatiot. Siksi genomin laajuinen yhdistys tutkimukset käyttäen array tekniikoita, jotka perustuvat Euroopan haplotyyppi-koodaus SNP tai jopa niitä miljoona tasaisin välein SNP (yksi SNP kohden 3 kiloemästä) ei saa vangita määrää geneettistä tietoa tarvitaan havaita yhdistysten geenejä, kuten

EphB2

populaatioissa viime länteen Afrikkalainen laskeutuminen kuten meidän. Mielestämme tämä tutkimus asetetaan vaiheessa uuden aikakauden genomin laajuinen yhdistys tutkimukset populaatioissa viime länteen Afrikkalainen laskeutuminen, jossa yhdistykset saattavat vain havaita erittäin korkean resoluution geneettinen karttoja.

Materiaalit ja menetelmät

Ethics lausunto

Kaikki näytteet perin kerätty tutkimuskäyttöön alle Howard University IRB-hyväksytty protokolla. Kirjallinen suostumus saatiin kaikissa aineissa tälle Howard yliopiston tutkimuksessa. Sitten nämä näytteet analysoitiin Translational Genomics Research Institute alle protokolla hyväksymä Western Institutional Review Board (WIRB). Koska näytteet oli jo kerätty Howard yliopiston tutkimuksessa, luopuminen suostumuksen myönnettiin WIRB käytettäväksi näytteiden tämän pöytäkirjan ilman ylimääräisiä lupaa TET.

Afrikkalainen amerikkalainen satunnaisia ​​eturauhassyövän tapausten ja kontrollien

Etuyhteydetön miesten (N = 1057) itse kuvata Afrikkalainen amerikkalainen rekrytoitiin vuosina 2001 ja 2005 Division of Urology Howard yliopistollisen sairaalan (HUH) Washington DC: ssä. Incident eturauhassyöpä tapauksia (N = 490) tunnistettiin urologien sisällä jako tai tutkimuksen koordinaattori ja vahvistanut tarkastelu potilastiedot. Verrokeilla (N = 567), jotka eivät liity tapauksiin ja sovittaa iän (± 5 vuotta) oli myös kysynyt PC seulonta väestöstä Division of Urology klo HUH. Yksilöt, jotka olivat joskus diagnosoitu eturauhasen hyvänlaatuinen liikakasvu (BPH) ja /tai oli kohonnut prostataspesifisen antigeenin testi ( 2,5 ng /ml), tai on ollut epänormaali eturauhasen (DRE) ei otettu mukaan kontrolleina. Vastausprosentti keskuudessa Afrikkalainen amerikkalainen tapauksia oli 90%, ja vaste Afrikkalainen Amerikan valvonta oli 85%. Väestörakenteen ominaisuudet osallistujien seulontaohjelma olivat samanlaisia ​​kuin potilasryhmässä nähty Division urologian klinikoilla (taulukko 1). Rekrytointi eturauhassyövän tapausten ja kontrollien esiintyi samanaikaisesti ja olivat valitsematta suhteen suvussa. Kaikki osallistujat olivat 40 85-vuotiaita. Kliiniset ominaisuudet kuten Gleason luokalla, PSA, ikä diagnoosin ja suvussa saatiin kaikissa tapauksissa peräisin potilastiedot. Tauti aggressiivisuus määriteltiin ”Low” (Gleason luokka 8) tai ”High” (Gleason grade ≥8).

Yhden nukleotidin polymorfismi (SNP) genotyypityksen

Tässä tutkimuksessa valitsimme kaikki SNP (n = 355), joka sisältää koko

EphB2

genomista lokuksen välillä Build 36, hg18 asennot chr1: 22904000 – 23119000 jotka genotyypattiin kansainvälisen HapMap (versio 2) [19]. Ylimääräinen 14 SNP sisältyivät jotka raportoitiin aiemmin ryhmämme [18]. Tämä joukko 369 SNP jätettiin Illumina GoldenGate oligo määritys allas (OPA) suunnittelu, jossa kahtena SNP ja ne, jotka mahdollisesti vaikuttavat haitallisesti määrityksen suorituskykyyn poistettiin. Joukko 28 SNP epäonnistui määrityksen suunnittelu, jättäen meille 341 SNP Genotyyppausanalyysiin tutkimuksessamme (taulukko S1). Genomi-DNA: ta saatiin eristetty lymfosyytit käyttämällä solujen hajoamista, proteinaasi K-käsittelyn proteiinin saostumista ja DNA saostumista. DNA varastot laimennettiin 10 ng /ul, ja genotyypitys suoritettiin käyttäen Illumina GoldenGate genotyypitysmääritys kohti valmistajan suositusten (Illumina Inc., San Diego, CA). Genotyyppi puhelut tehtiin käyttämällä BeadStudio 3 ohjelmistoa (Illumina Inc., San Diego, CA). SNP suljettiin pois analyysistä, jos GenTrain Score oli 0,4 ja puhelu oli 0,95. Käytimme Hardy-Weinberg tasapaino katkeaminen p 0,0001 lisääntyneen sekoittumisen epätasapainoa AA väestön ja ottamaan huomioon useita testejä. Kaksikymmentäkuusi (26) SNP merkittävästi poikennut HWE meidän Afrikkalainen Amerikan näytteitä.

arvioiminen geeniperimästä

genomit sekoitettu kaltaisille Afrikkalainen amerikkalaiset muodostuvat erilaisten geneettisten segmenttien johtuvat eri ”vanhempien” populaatioiden (esim länsiafrikkalaiset ja eurooppalaiset). Geneettiset yhdistys tutkimukset seokseen sekoitettiin populaatioissa voidaan sekoitti väestön kerrostuneisuus, jossa väärät positiiviset tauti yhdistysten johtuvat syntyperä eroista tapauksissa ja valvontaa. Voidakseen valvoa tällaisia ​​sekoittavia, Länsi-Afrikkalainen syntyperä arvioitiin tapauksissa ja käyttäviin geneettisiä variantteja kutsutaan syntyperä informatiivinen markkereita (tavoitteet). Tavoitteet ovat markkereita valitaan niiden esiintymistiheys erot populaatioiden eri maantieteellisillä alueilla. Esillä olevassa tutkimuksessa, ”globaali” yksilö syntyperä määritettiin kunkin yksittäisen käyttäen 100 tavoitteena on valittu alueita koko perimän arvioida Euroopan ja Länsi-Afrikkalainen syntyperä [20]. Käyttämällä näitä tavoitteita, globaali yksittäiset syntyperä (% Länsi-Afrikkalainen ja% Euroopan) laskettiin genotyyppitietoja käyttämällä Bayes Markovin ketju Monte Carlo (MCMC) -menetelmää toteutetaan ohjelman rakenne 2.1 [21]. RAKENNE 2.1 ajettiin alla sekoittumisen malliin käyttäen ennen väestötietojärjestelmään ja itsenäinen alleeli taajuuksilla. MCMC mallia ajettiin käyttäen K = 2 väestö (58 eurooppalaiset ja 62 Länsiafrikkalaiset) ja burn-pituus on 30000 toistojen seurasi 70000 Toistoja. Nämä syntyperä arvioita käytettiin covariates regressiossa malleissa.

Strukturoidut Association Analyysit

Testasimme 315

EphB2

SNP yhdistettäväksi PC meidän väestöstä Afrikkalainen amerikkalaiset. Laskimme kertoimet suhdeluvut ja 95%: n luottamusväli suorittamalla ehdollinen logistinen regressio olettaen additiivinen vaikutus (log asteikko) on alleelin annoksen. Me ohjattu yksittäisten sekoittumisen sisällyttämällä Länsi-Afrikkalainen syntyperä arvioiden kovarianssina logistisessa regressiomallin. Lisäksi geneettisiä vaikutuksia ikä- (klo diagnoosin tapauksen aiheita ja klo toteaminen valvonnasta). Associations palkkaluokittain (Gleason pisteet ≤7 versus ≥8) tutkittiin myös logistinen regressio asiassa vain analyysejä.

empiirinen p-arvot, jotka on korjattu useita testejä kertyi 100000 permutaatiot ominaisuuden arvojen näytteestä käyttäen Max (T) menettely. Kaikki analyysit tehtiin käyttäen ohjelmia SNPGWA versio 4.0 (https://www.phs.wfubmc.edu/public/bios/gene/downloads.cfm) ja Plink [22]. Haplotyypin yhdistys analyysit suoritettiin käyttäen Haploview [23]. Kliiniset ominaisuudet verrattiin tapausten ja kontrollien välillä rotu. Kaksipuolinen t-testejä käytettiin vertailla jatkuvia muuttujia kuten ikä ja syntyperä arvioihin. Pearson chi-neliö kokeet itsenäisyyden käytettiin vertaamaan kategorisen muuttujia.

tukeminen Information

Taulukko S1.

Hardy-Weinberg Equilibrium P-arvot 341

EphB2

SNP.

doi: 10,1371 /journal.pone.0019494.s001

(XLS) B Taulukko S2.

tulokset Yhden Variant Eturauhassyöpä Association Analyysi 315

EphB2

SNP.

doi: 10,1371 /journal.pone.0019494.s002

(XLS) B

Kiitokset

kirjoittajat kiittää tutkimukseen osallistujia osallistumisesta tähän tutkimukseen.