Krooninen sairaus

tiivistelmä

Background

Tämän tutkimuksen tavoitteena oli selvittää esiintyvyys ja kliinis merkitys

c-MYC

geenin kopioluvun (GCN) voitto potilailla primaarista peräsuolen syöpä (CRC).

Methods

c-MYC

GCN tutkittiin 367 peräkkäisen CRC potilasta (kohortti 1) käyttäen dual-väri hopea

in situ

hybridisaatio. Lisäksi arvioida alueellisia heterogeenisuus, tutkimme CRC kudosta 3 kohteita kuten ensisijainen syöpä, etäinen etäpesäke, ja imusolmukkeiden etäpesäke 152 kehittynyt CRC potilasta (kohortti 2).

KRAS

eksonit 2 ja 3 tutkittiin mutaatioita.

Tulokset

kohortin 1,

c-MYC

geenin monistamisen määritelty

c-MYC

: sentromeeriantigeenin kromosomin 8 suhde ≥ 2,0, havaittiin 31 (8,4%) ja 367 potilasta.

c-MYC

GCN vahvistus, määritellään ≥ 4,0

c-MYC

kopiota /tuma, löydettiin 63 (17,2%) potilaista ja oli yhteydessä huonoon ennusteeseen (

P

= 0,015). Coxin monimuuttuja regressio analyysi osoitti, että riskisuhde

c-MYC

GCN voitto oli 2,35 (95% luottamusväli, 1,453-3,802;

P

0,001). Alaryhmässä vaiheen II-III CRC potilailla,

c-MYC

GCN voitto oli merkitsevästi yhteydessä huonoon ennusteeseen mukaan yhden muuttujan (

P

= 0,034) ja monimuuttuja (

P

= 0,040) analyysit.

c-MYC

proteiinin yli-ilmentymisen havaittiin 201 (54,8%) ulos 367 potilasta ja heikosti korreloivat

c-MYC

GCN vahvistus (ρ, 0,211). Vuonna kohortti 2,

c-MYC

perimäluokituksesta oli heterogeenista pitkälle CRC potilailla. Ristiriita välillä GCN voitto primaarikasvaimen ja joko kaukainen tai imusolmukkeiden etäpesäke oli 25,7% ja 30,4%, tässä järjestyksessä. Samanlainen taajuus

c-MYC

GCN vahvistuksen ja vahvistusta havaittiin CRC potilailla sekä villityypin että mutatoidun

KRAS

.

Johtopäätökset

c-MYC

GCN voitto oli itsenäinen tekijä huonon ennusteen peräkkäisen CRC potilailla ja vaiheen II-III alaryhmä. Meidän tulokset osoittavat, että tilan

c-MYC

voivat auttaa ennustamaan potilaan tulokseen ja hallintaan CRC potilaille.

Citation: Lee KS, Kwak Y, Nam KH, Kim DW Kang SB, Choe G, et ai. (2015)

c-MYC

kopioluvun Gain on itsenäinen ennustetekijä Potilaat, joilla on peräsuolen syövän. PLoS ONE 10 (10): e0139727. doi: 10,1371 /journal.pone.0139727

Editor: Andreas Krieg, Heinrich-Heine-University ja University Hospital Düsseldorf, Saksa

vastaanotettu: toukokuu 24, 2015; Hyväksytty: 15 syyskuu 2015; Julkaistu: 01 lokakuu 2015

Copyright: © 2015 Lee et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään

Data Saatavuus: kaikki asiaankuuluvat tiedot kuuluvat paperin ja sen tukeminen Information tiedostoja.

Rahoitus: Tämä tutkimus tukivat myöntämisestä Korea Health Technology R Welfare, Korean tasavalta (lupanumeroon: HI14C1813, https://www.khidi.or.kr/eps). Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

c-MYC

esikasvaintekijän koodaa transkriptiotekijä, jolla on keskeinen rooli solujen lisääntymistä, erilaistumista, apoptoosin, aineenvaihduntaa, ja selviytyminen [1, 2]. Se voi edistää tuumorigeneesiä erilaisissa ihmisen maligniteettien [3, 4].

c-MYC

muutos tapahtuu eri mekanismien kautta, kuten kromosomaalinen translokaatio, geenimonistuksen, ja häiriön alkupään signalointireittien [5, 6]. Gene copy-numero (GCN) voitto tai vahvistus on yleisin

c-MYC

muutos kiinteissä kasvaimissa [7].

Kuitenkin harvat tutkimukset ovat tutkineet kliinis vaikutukset

c-MYC

asema kolorektaalisyövässä (CRC). Aiemmat raportit ovat osoittaneet, että

c-MYC

GCN voitto CRC tavataan noin 10%: lla potilaista [8]. Tuore tutkimus kertoi, että useat merkittävät tiomonistukset keskittyneet kromosomissa 8, mukaan lukien 8q24 alueen, joka sisältää

c-MYC

, ja ehdotti, että

c-MYC

oli uusi merkkiaine aggressiivinen tautia CRC [9]. Kuitenkin viime aikoina, Christopher

et al

. raportoitu saatuja tietoja immunohistokemiallinen (IHC), mikä osoittaa, että c-MYC-proteiinia yli-ilmentymisen oli merkitsevästi yhteydessä parannetun ennusteen CRC potilailla [10]. Näin ollen ennustetekijöiden arvo

c-MYC

muutoksia CRC on kiistanalainen.

Äskettäin valikoiman vaihtoehtoja systeemistä kemoterapiaa on laajentunut ja täsmähoitoihin on käytetty kehittyneitä CRC potilailla, kasvaa elossaololuku [11]. Kuitenkin jotkut CRC potilaat reagoivat huonosti täsmähoitoihin huolimatta positiivisia tuloksia in täsmähoitoihin erityisiä mutaation tutkimuksia [12]. Kasvain heterogeenisuus on mahdollinen syy epäonnistumiseen täsmähoitoihin ja useat tutkimukset ovat raportoineet, että CRC hallussaan heterogeenisen genotyypin mukaan lukien

KRAS

,

p53

, ja

BRAF

[13- 15]. Siksi geneettinen vaihtelu primaarikasvaimen ja vastaavat metastaasien on selvennettävä hallinnon parantamiseksi CRC metastasoivaa tautia sairastavaa potilasta.

heterogeenisuus

c-MYC

ja sen prognostiset vaikutukset ovat ei ole systemaattisesti tutkittu ensisijainen CRC potilailla. Tutkimuksen tavoitteena oli arvioida

c-MYC

geenin asema ja sen kliinistä merkitystä CRC. Olemme myös analysoineet heterogeenisyys

c-MYC

in primaarikasvaimen ja etäinen etäpesäke.

Materiaalit ja menetelmät

Potilaat ja näytteet

Yhteensä 519 CRC saaneilla potilailla radikaaleja Seoul National University Bundang Hospital otettiin tässä retrospektiivinen tutkimus. Ensinnäkin, arvioida ennusteeseen viittaavia merkitystä

c-MYC

geenin asema, 367 peräkkäisen CRC hoidettujen potilaiden välillä tammikuussa 2005 ja joulukuu 2006 otettiin (kohortti 1). Toiseksi tutkimaan ristiriita välillä ensisijaisen ja etäpesäkkeitä, 152 kehittynyt CRC potilaalla on synkronoitu tai metachronous etäpesäkkeitä, joille oli tehty kirurginen resektio ensisijaisen CRC toukokuun 2003 ja joulukuussa 2009 otettiin (kohortti 2). Kaikki tapaukset tarkistettiin kahdella patologit (K. S. L. ja H. S. L.). Kliinis ominaisuudet saatiin potilasasiakirjamerkinnöistä ja patologian raportteja. Seurantatiedot lukien potilaiden hoitotuloksiin ja väli päivämäärä kirurgisen resektion ja kuoleman kerättiin. Tiedot potilaista menetti seuranta tai ne, jotka olivat kuolleet muista syistä kuin CRC sensuroitiin.

Eettinen

Kaikki näytteet saatiin kirurgisesti resektoitiin kasvaimista tarkasteltiin patologisesti patologian osaston , Seoul National University Bundang Hospital. Kaikki näytteet ja potilaskertomuksen tietoja anonymisoidaan ennen käyttöä tässä tutkimuksessa ja osallistujat eivät antaneet kirjallisen tietoon perustuvan suostumuksen. Käyttö potilaskertomuksen tietojen ja kudosnäytteiden Tutkimuksen hyväksyi Institutional Review Board of Seoul National University Bundang Hospital (viite: B-1210 /174-301).

Tissue array menetelmällä

Kirurgisesti resektoitiin ensisijainen CRC näytteet olivat formaliinilla kiinnitetyt ja parafinoidut (FFPE). Kullekin tapauksessa edustavalla luovuttajan lohkojen saatiin ja järjestetty uudelleen uusiksi vastaanottajalohkot (Superbiochips Laboratories, Seoul, Etelä-Korea) [16]. Yksittäinen ydin oli 2 mm ja jotka sisältävät 20% kasvainsoluja katsottiin voimassa ydintä.

Dual-väri hopea

in situ

-hybridisaatio

c-MYC

geeni tehtiin näkyväksi käyttämällä blue-värjäys järjestelmä (Ultraview hopea

in situ

-hybridisaatio [SISH] dinitrofenoli [DNP] havaitseminen pakki ja c-MYC DNP koetin, Ventana Medical Systems, Tucson, AZ, USA). Centromere kromosomin 8 (CEP8) tehtiin näkyväksi käyttämällä punaista-värjäys järjestelmä (Ultraview punainen ISH digoksigeniiniperoksidaasia [DIG] havaitseminen pakki ja kromosomin 8 DIG koetin, Ventana Medical Systems). Positiiviset signaalit visualisoitiin 60-kertaisena suurennoksena ja laskettiin 50 ei-päällekkäisiä tuumorisolun ytimiä kussakin tapauksessa (kuvio 1) [17]. Pienet ja suuret klustereita pisteytettiin 6 ja 12 signaalit, vastaavasti.

(A)

c-MYC

geenikopiomäärä vahvistuksen (60-kertainen suurennus); (B)

c-MYC

geenin disomia (60-kertainen suurennus).

immunohistokemia

IHC-analyysi c-MYC suoritettiin käyttäen kaupallisesti saatavilla olevaa kanin anti-c-myc-vasta-ainetta (klooni Y69, luettelo ab32072, Abcam, Burlingame, CA, USA). Värjäytyminen toimenpiteet suoritettiin käyttäen Ultraview Universal DAB Kit (Ventana Medical Systems) ja automatisoitua stainer (BenchMark®XT, Ventana Medical Systems), mukaan valmistajan ohjeiden. Nuclear immunovärjäystä c-MYC oli negatiivinen normaalissa limakalvolla. Tilastollista analyysia, c-MYC tumavärjäystä tahansa intensiteetin yli 10% kasvainsolujen pisteytettiin positiiviseksi (S2 kuvassa) [10].

mikrosatelliittien epävakaus

mikrosatelliittien epävakautta (MSI ) arvioitiin CRC tapauksissa käytettävissä kudosta. MSI tulokset saatiin aikaan vertaamalla alleelinen profiilit 5 mikrosatelliittimarkkerin (BAT-26, BAT-25, D5S346, D17S250, ja S2S123) kasvaimen ja vastaavassa normaalissa näytteitä. Polymeraasiketjureaktio (PCR) tuotteita FFPE kudosta analysoitiin käyttämällä automatisoitua DNA sekvensserin (ABI 3731 Genetic Analyser, Applied Bio järjestelmät, Foster City, CA, USA) protokollan mukaisesti kuvattu aiemmin [18].

KRAS

mutaatio analyysi

KRAS

mutaation havaitsemista saavutettiin sulamiskäyräanalyysillä käyttäen Cobas 4800 System (Roche, Branchburg, NJ, USA) automatisoidulla tulosten tulkinnan ohjelmisto . Tämä on TaqMelt-pohjainen reaaliaikainen PCR-määritys on suunniteltu havaitsemaan 21

KRAS

mutaatiot kodoneissa 12, 13, ja 61. työnkulun ja testausprosessin on kuvattu aikaisemmin [19].

Tilastolliset analyysit

assosiaatio kliinis ja

c-MYC

tila analysoitiin käyttäen chi-neliö tai Fisherin testiä tarvittaessa. Korrelaatio osoitusmenetelmiä tutkittiin käyttämällä Pearsonin korrelaatiokerroin. Potilaiden eloonjääminen analysoitiin käyttämällä Kaplan-Meier menetelmällä ja log-rank-testiä käytettiin määrittämään onko mitään merkittäviä eroja eloonjäämiskäyrien. Yhden ja usean regressioanalyysi suoritettiin käyttämällä Coxin suhteellisten riskien mallia määrittää riskisuhde ja 95%: n luottamusväli kunkin tekijän.

P

arvo 0.05 hyväksyttiin tilastollisesti merkitsevä. Kaikki tilastolliset analyysit suoritettiin SPSS-tilasto-21 ohjelmisto (IBM, Armonk, NY, USA).

Tulokset

c-MYC

geenin asema ja kliiniset vaikutukset peräkkäisen ensisijainen CRC potilaat

peräkkäisten ensisijainen CRC tapauksissa (kohortti 1), mediaani

c-MYC

: CEP8 suhde oli 1,29 (vaihteluväli 0,58-5,17).

c-MYC

geenin monistamisen määritelty

c-MYC

: CEP8 suhde ≥ 2,0 ja samanlainen kuin vahvistettu

HER2

[20], havaittiin 31 (8,4%) ja 367 potilasta. Keskimääräinen

c-MYC

GCN oli 2,88 (vaihteluväli 1,22-13,12). Esillä olevassa tutkimuksessa olemme määritelleet GCN voitto ≥ 4,0

c-MYC

kopiota /tuma [21], ja tämä havaittiin 63 (17,2%) 367 CRC potilaista. Kaikki

c-MYC

monistaminen sisällytetty

c-MYC

GCN voitto.

c-MYC

GCN saada ≥ 4 oli pienin

P

-arvo (

P

= 0,015), ja näin, havaittiin olevan kaikkein ennustavan cut-off piste potilaan ennustetta (kuvio 2); ≥ 5,0

c-MYC

kopiota /tuma vaikuttivat myös potilaan ennustetta (

P

= 0,026). Ei ollut merkittävää yhdistyksen välillä potilaan ennustetta ja joko

c-MYC

vahvistusta (

P

= 0,149) tai 2, ≥ 3 ja ≥ 6

c-MYC

kopiota /nucleus (

P

= 0,752,

P

= 0,175, ja

P

= 0,122, tässä järjestyksessä).

(A)

c-MYC

geenikopiomäärä (GCN) saavat; (B)

c-MYC

GCN voitto vaiheessa II-III alaryhmä; (C)

c-MYC

vahvistusta.

Taulukko 1 esittää suhteita

c-MYC

asemasta ja kliinis parametrit peräkkäisen ensisijainen CRC (kohortti 1 ). Monistaminen

c-MYC

korreloi Taudin alkuvaiheessa (

P

= 0,039).

c-MYC

GCN voitto oli usein havaittu sigmoid paksusuolen ja peräsuolen kasvaimet (

P

= 0,034), pienet kasvaimet (

P

= 0,041), ja ne luokitellaan mikrosatelliittimarkkereita vakaa tai MSI-matala (

P

= 0,029).

Prognostic merkitys

c-MYC

geeni tilaansa CRC potilailla

kaikki CRC potilaita menestyksellisesti seurattiin sisällytettäväksi selviytyminen analyysi (kuvio 2). Vuonna kohortti 1, keskimääräinen seuranta-aika oli 55 kuukautta (vaihteluväli 1-85 kuukautta) ja 101 (27,5%) potilaista kuoli seuranta-aikana. Kaplan-Meier-analyysi osoitti, että

c-MYC

GCN voitto oli merkitsevästi yhteydessä huonoon selviytymiseen CRC potilailla (

P

= 0,015), mutta

c-MYC

vahvistus oli ei (

P

= 0,149). Vuonna vaiheen II-III alaryhmä,

c-MYC

-GCN voitto myös ennustettu huono ennuste (

P

= 0,034). Monimuuttuja-analyysi

c-MYC

asema on yhteenveto taulukossa 2, ja osoitti, että

c-MYC

-GCN saada itsenäisesti ennustivat huonon ennusteen peräkkäisten kohortin (

P

0,001) ja potilaiden alaryhmässä vaiheen II-III CRC (

P

= 0,040).

Korrelaatio

c-MYC

GCN voitto ja proteiinin yli-ilmentymisen

yli-ilmentyminen c-MYC-proteiinia ei havaittu 201 (54,8%) 367 CRC potilaista (kohortti 1) ja siihen liittyi varhainen pT vaiheessa (

P

0,001 ), huono laatu on histologisen erilaistumisen (

P

= 0,007), puuttuminen hermoa invaasio (

P

= 0,025) ja pienempiä (

P

0,001) ( Pöytä 1). Yliekspressio c-MYC-proteiinia liittyi GCN voitto (ρ, 0,211;

P

0,001), joka luokiteltiin heikosti korrelaatio mukaan Dancey ja Reidy n luokittelun (2004) [22]. Lisäksi vain 46 (22,9%) ja 201 potilasta c-MYC yliekspressio osoitti GCN voitto.

c-MYC

tila ja heterogeenisuus mukaan kasvaimen sijainti kehittyneissä CRC potilailla

arvioimiseksi alueellinen heterogeenisuus

c-MYC

tila, tutkimme kudosta 3 kohteita kuten ensisijainen syöpä, etäinen etäpesäke, ja imusolmukkeiden etäpesäke kullekin potilaalle kehittyneitä CRC (kohortti 2). Ensisijainen kasvaimia kohortin 2, mediaani

c-MYC

: CEP8-suhde oli 1,14 (vaihteluväli, +0,57-+2,97).

c-MYC

geenin monistaminen havaittiin 8 (5,3%) ja 152 potilasta. Keskimääräinen

c-MYC

GCN oli 2,97 (vaihteluväli 1,40-9,94).

c-MYC

GCN voitto havaittiin 48 (31,6%) ja 152 CRC potilaista. Lisäksi

c-MYC

GCN voitto löydettiin 33 (21,7%) potilaista kaukaisiin etäpesäkkeitä. Imusolmukkeiden etäpesäke havaittiin 79 152 kehittyneitä CRC potilaiden ja

c-MYC

GCN voitto havaittiin 18 (22,8%) näistä tapauksista. Heterogeenisuus

c-MYC

GCN vahvistuksen mukaan kasvaimen sijainti on esitetty taulukossa 3. Of 152 tapausta, ristiriita välillä

c-MYC

GCN voitto primaarikasvaimen ja etäinen etäpesäke Todettiin 39 (25,7%) tapauksista. Ristiriita välillä

c-MYC

GCN voitto primaarikasvaimen ja imusolmukkeiden etäpesäke havaittiin 24/79 (30,4%) tapauksista. Täten alueellinen heterogeenisuus

c-MYC

GCN voitto oli varsin yleistä kehittyneiden CRC.

c-MYC

GCN heterogeenisyys ei korreloi kliinis tekijöiden ja ennusteen (

P

0,05; tuloksia ei ole esitetty).

ei ollut tilastollisesti merkitsevä korrelaatio kliinis tekijöiden ja

c-MYC

GCN voitto ensisijainen, etäinen metastaattinen, ja imusolmukkeiden etäpesäkkeitä päässä kohortin 2 CRC potilaalla (

P

0,05; tuloksia ei ole esitetty) . Keskimääräinen seuranta-aika oli 42 kuukautta (vaihteluväli, 1-105kuukausi) ja 67 potilasta (44,1%) kuoli syöpään aikana seurantajakson aikana. Kaplan-Meier-analyysi osoitti, että potilailla, joilla on

c-MYC

GCN voitto primaarikasvaimen oli huono tulos kuin ilman, mutta tämä tulos ei ollut tilastollisesti merkitsevä (

P

= 0,499). Kuitenkin ≥ 3,0

c-MYC

kopiota /ydintä primaarikasvaimen oli merkitsevästi yhteydessä huonoon ennusteeseen (

P

= 0,044; S1 Kuva). Ei ollut mitään merkittävää korrelaatiota potilaiden ennustetta ja

c-MYC

GCN voitto kaukaisilla tai imusolmukkeiden etäpesäkkeet (

P

= 0,981 ja

P

= 0,417, vastaavasti; tuloksia ei ole esitetty).

KRAS

mutaatioita kehittynyt CRC

Cobas

KRAS

koe suoritettiin 152 primaarikasvainten kehittyneistä CRC tapausten (kohortti 2).

KRAS

geenimutaatioita havaittiin 84 (55,3%) tapauksista ja liittyi kasvaimia sijaitsee oikeassa paksusuolessa (

P

= 0,019), mutta ei korreloi muiden kliinis tekijöiden (

P

0,05; tuloksia ei ole esitetty). Lisäksi ei ollut tilastollista eroa selviytymisen CRC potilailla, joilla on mutatoitunut tai villityypin

KRAS

(

P

= 0,688; tuloksia ei ole esitetty). 68 tapauksia villiin

KRAS

,

c-MYC

vahvistus todettiin 4 (5,9%) ja

c-MYC

GCN vahvistus 28 (41,2 %). 84 tapauksissa mutatoitunut

KRAS

, 4 osoitti

c-MYC

vahvistusta (4,8%) ja 20 (23,8%) paljasti

c-MYC

GCN voitto.

c-MYC

GCN muutoksia esiintyi potilailla sekä villin tyypin ja mutatoitunut KRAS. Siksi

c-MYC

GCN muutoksia ja

KRAS

mutaatiot eivät ole toisiaan poissulkevia.

Keskustelu

Vaikka on ollut useita raportteja

c-MYC

asema ihmisen syövissä, ei ole vahvistettu perusteita GCN vahvistuksen. Syövät, joilla on

c-MYC

GCN vahvistusta usein liittyy huonoon ennusteeseen. Aikaisempi tutkimus mucinous mahakarsinooman osoitti, että

c-MYC

vahvistus, joka määritellään

c-MYC

: CEP8 suhde 2.0, oli korreloivat voimakkaasti pitkälle edennyt syöpä [23]. Toinen raportti löysi yhdistyksen välillä

c-MYC

vahvistusta ( 4 kopiota /solu vähintään 10% kasvainsolujen) ja pitkälle edennyt munasarjasyöpä [21]. Tutkimuksessa, eturauhassyövän,

c-MYC

GCN vahvistus sisältyi kriteeriä

c-MYC /

CEP8 suhde 1.5, ja huono ennuste havaittiin potilailla tähän luokkaan [24]. Viime tutkimusta adenokarsinooma keuhkojen, potilailla, joilla on 2

c-MYC

kopiota /tuman luokiteltu, jolla on lisääntynyt

c-MYC

GCN, jonka todettiin olevan riippumaton huono ennustetekijä [25]. CRC potilailla, on raportoitu, että

c-MYC

vahvistus, joka määritellään

c-MYC /

CEP8 suhde 2, oli usein havaittiin käyttämällä fluoresoivia

in situ

-hybridisaatio (9,0-14,2%), mutta oli liity kliiniseen tulokseen ja patologisten tietojen [26]. Siksi olemme käyttäneet erilaisia ​​kriteerejä määrittämään

c-MYC

vahvistus tai GCN vahvistusta tässä tutkimuksessa, ja ovat määritelleet

c-MYC

GCN voitto ≥ 4 kopiota /ydin, koska se oli alhaisin

P

-arvo tautien ennusteen (kuvio 2). Vuonna kohortti 1 iso peräkkäisen kohortin CRC potilailla, joiden

c-MYC

GCN voitto oli huono selviytyminen kuin ilman (

P

= 0,015). Lisäksi Monimuuttuja-analyysissä,

c-MYC

GCN voitto oli merkittävä CRC ennustetekijä, sekä peräkkäisten kohortti ja niille, joilla on vaiheen II-III sairaus. Ennustearvo

c-MYC

GCN havaittiin olevan riippumaton tiedossa ennustavia tekijöitä.

c-MYC

GCN vahvistuksen kriteerejä käytetään esillä olevassa tutkimuksessa, yhdessä SISH menetelmällä, voi olla hyödyllistä arvioitaessa CRC potilaille, koska se selvästi potilaiden odotetaan huono selviytyminen riippumatta

c Myc

: CEP8 suhde.

kohortissa 2, osoitimme, että oli

c-MYC

GCN alueellinen heterogeenisuus välillä ensisijainen sivuston ja siihen liittyvien etäpesäkkeitä.

c-MYC

GCN vahvistus (c-MYC GCN ≥ 4,0) ensisijaisessa syöpä ei ollut merkitsevästi yhteydessä huonoon säilymiseen (

P

= 0,499; S1 kuvassa), mikä saattaa johtua kaikki kohortti 2 koostui kehittyneiden CRC potilaalla on synkronoitu ja metachronous etäpesäke ja kohortin 2 oli suurelta osin vaiheen IV CRC (98 tapausta; 64,5%). He saivat erilaisia ​​yksilöllisten vastaavasti ja ne saattavat heijastaa tilastollista merkityksettömäksi. Mielenkiintoista, sovelsimme hieman ei-rajoittavat kriteerit GCN vahvistuksen (

c-MYC

GCN ≥ 3,0) ja sen ennuste muutettiin tilastollisesti merkitsevä (

P

= 0,044; S1 Kuva). Laajassa merkityksessä, c-

MYC

GCN voitto ensisijainen syöpä taipumus korreloivan huonon säilymisen pitkälle CRC. Toisaalta,

c-MYC

asema kaukaisilla ja imusolmukkeiden metastaattinen vaurio ei ollut riippuvainen potilaan ennustetta, vaikka yritimme kaikkia mahdollisia GCN kriteerit. Vaikka

c-MYC

heterogeenisuus havaittiin usein kehittyneitä CRC,

c-MYC

GCN voitto ensisijainen syöpä usein yhteydessä huonoon säilymiseen. Näin ollen

c-MYC

GCN ei-metastaattinen vaurio tulee käyttää arvioitaessa ennustetta.

Aiemmassa tutkimuksessa, yliekspressio

c-MYC

mRNA CRC todettiin liittyvän parempaan ennusteeseen [27], mutta tämä tulos oli ristiriidassa toisessa tutkimuksessa [28]. Christopher

et al

. viime aikoina osoittaneet, että c-MYC yliekspressio määräytyy IHC yksin, oli merkitsevästi yhteydessä parempaan selviytymisen CRC potilaille, kun arvioidaan yhden muuttujan analyysin, mutta ei monimuuttujamenetelmin [10]. Mielenkiintoista, löydettiin ristiriitaisia ​​tuloksia edellisessä c-MYC yliekspressio tutkimus; oletettavasti, koska c-MYC ilmentymistä ohjaa monimutkainen sääntely reitti, johon liittyy useita vuorovaikutus muiden molekyylien, eikä vain yksinkertainen GCN voitto [29]. Lisäksi löysimme heikko korrelaatio c-MYC proteiinin yli-ilmentymisen ja GCN vahvistusta CRC potilailla.

c-MYC

GCN voitto ei havaittu useimmissa c-MYC-proteiinin yli-ilmentymisen tapauksissa. Toisin kuin

c-MYC

GCN vahvistus, yliekspressio c-MYC-proteiinia korreloi vähemmän aggressiivisia ominaisuuksia (taulukko 1). Nämä tulokset viittaavat siihen, että

c-MYC

GCN voitto on todennäköisesti vain osittain vastuussa proteiinin yli-ilmentymisen. Koska yli-ilmentymisen c-MYC ei ole sama kuin

c-MYC

GCN vahvistus, tarvitaan lisätutkimuksia selittämään eron c-MYC yli-ilmentymisen ja GCN vahvistusta CRC kasvaimien syntyyn.

mutaatiot

KRAS

ovat ilmeisiä 30-40% Kolorektaalituumorien [30-32]. Todellakin, aiemmat tutkimukset raportoitu, että

KRAS

mutaatio liittyy vastustuskykyä epidermaalisen kasvutekijän reseptorin (EGFR) monoklonaalinen hoito ja huono selviytymisen [33-35]. Tutkimuksessamme

KRAS

mutaatiot olivat läsnä 55,3% kehittyneiden CRC potilaista (kohortti 2) ja ei liittynyt ennustetta. Se voi olla, koska olemme tutkineet

KRAS

mutaatiostatusta kehittynyt CRC potilailla. Phipps et ai. kertoi myös, että

KRAS

-mutation tila ei liittynyt huono tautikohtaisten selviytymistä tapauksissa, joilla oli kaukainen-vaiheen CRC [33].

c-MYC

vahvistus havaittiin 5,9% villin tyypin

KRAS

ja 4,8% mutatoitunut

KRAS

CRC.

c-MYC

GCN voitto havaittiin 41,2% villin tyypin

KRAS

ja 23,8% mutatoitujen

KRAS

CRC. On huomionarvoista, että nämä 2 geneettiset tapahtumat eivät olleet toisensa poissulkevia. Lisätutkimuksia tarvitaan selvittämään mahdollisuutta käyttää

c-MYC

geneettisiä muutoksia terapeuttisina tavoitteina vaativissa CRC potilailla, joilla on ensisijainen ja toissijainen vastustuskykyä EGFR hoitoja.

Yhteenvetona kattavasti analysoi

c-MYC

geenin asema CRC potilaista käyttämällä SISH.

c-MYC

GCN vahvistuksen ja vahvistusta havaittiin 17,2% ja 8,4% peräkkäisten CRC potilaista.

c-MYC

GCN voitto oli itsenäinen huono ennustetekijä, sekä peräkkäisten kohortti ja potilaiden alaryhmässä vaiheen II-III sairaus. Nämä havainnot osoittavat, että

c-MYC

tila voidaan käyttää ennustamaan ennusteen CRC potilaiden, ja voi ilmoittaa tulevia tutkimuksia synnyssä ja mekanismeista etenemistä CRC.

tukeminen Information

S1 kuvio. Kaplan-Meier eloonjäämiskäyristä havainnollistaa ennustetekijöiden vaikutus

c-MYC

aseman ensisijainen vaurioita paksusuolen syövän (kohortti 2).

(A)

c-MYC

geenikopiomäärä ( GCN) ≥ 3,0; (B)

c-MYC

GCN ≥ 4,0.

Doi: 10,1371 /journal.pone.0139727.s001

(TIF)

S2 Kuva. Edustavia lukuja c-MYC yliekspressio immunohistokemiallisesti (A ja B) peräsuolen syöpäpotilailla.

(A) c-MYC yliekspressio (40-kertainen suurennus); (B) Ei c-MYC lauseke (40-kertainen suurennus),

doi: 10,1371 /journal.pone.0139727.s002

(TIF) B

Kiitokset

Tekijät Kiitokset Superbiochips Laboratoriot erinomaisen teknistä tukea.