Krooninen sairaus

tiivistelmä

Eturauhassyöpä esiintyy valtava vaihtelu kliinisissä käyttäytymistä, jotka vaihtelevat veltto tappavia tauti. Parempi ennustetekijöitä markkereita tarvitaan ositusta potilaita asianmukaisesti aggressiivista hoitoa. Ilmentyminen profilointi, voimme tunnistaa lisääntyminen allekirjoitus vaihtelevasti ilmaistu eturauhasen syöpiä. Täällä, kysyimme, onko yksi tai useampi kudosta biomarkkereita saattaa kaapata nämä tiedot, ja antaa ennustetekijöitä hyödyllisyys. Me analysoitiin kolme leviämisen allekirjoitus geeneistä:

MKI67

(Ki-67, myös klassinen leviämisen biomarkkereiden),

TOP2A

(DNA topoisomeraasi II, alfa), ja

E2F1

( E2F transkriptiotekijä 1). Immunohistokemiallinen värjäys oli arvioitavissa 139 eturauhasen tapauksissa (kudokseen microarray-muodossa), joiden mediaani kliinistä seurantaa kahdeksan vuotta. Kukin kolmesta leviämisen markkereita oli itse ennustetekijöiden. Erityisesti yhdistämällä kolme merkkiä yhdessä kuin ”leviämisen indeksi” (0 tai 1,

vs.

2 tai 3 positiivinen markkereita) edellyttäen ylivoimainen ennustetekijöitä suorituskyky (riskisuhde = 2,6 (95% CI: 1,4-4,9)

P

= 0,001). Monimuuttuja-analyysissä, johon kuului ennen leikkausta seerumin prostataspesifisen antigeenin (PSA) tasot, Gleason laatu ja patologisten kasvain vaiheessa komposiitti leviämisen indeksi pysyi merkittävän ennustajan (

P

= 0,005). Analyysi vastaanotin toimineiden (ROC) käyrät vahvistivat parantunut ennustus tarjoamia sisällyttämällä leviämisen indeksin (verrattuna ennusteeseen viittaavia tiedoilla). Meidän havainnot korostavat mahdollinen arvo usean geenin allekirjoituspohjaiset diagnostinen, ja määrittää tri-merkki leviämisen indeksi mahdollinen hyödyllisyys parantaa ennustettavuutta sekä hoidon kerrostumista eturauhassyövän.

Citation: Malhotra S, Lapointe J , Salari K, Higgins JP, Ferrari M, Montgomery K, et al. (2011) tri-Marker leviämisen indeksi ennustaa Biochemical uusiutuminen leikkauksen jälkeen eturauhassyöpä. PLoS ONE 6 (5): e20293. doi: 10,1371 /journal.pone.0020293

Editor: Tšad Creighton, Baylor College of Medicine, Yhdysvallat

vastaanotettu: 20 tammikuu 2011; Hyväksytty: 28 huhtikuu 2011; Julkaistu: toukokuu 23, 2011

Copyright: © 2011 Malhotra et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tämä työ tukivat avustuksia National Institutes of Health: CA111782 (JDB), CA122246 (JRP), CTSA myöntää UL1 RR025744 (Stanford Spectrum); ja Burroughs Wellcome Fund: # 1007519 (JRP, JDB). Rahoittajat had ei roolia tutkimuksen suunnittelu, tietojen keruun ja analysoinnin, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Eturauhassyöpä on johtava syy syövän kuolemaan Yhdysvalloissa [1]. Siitä huolimatta, eturauhasen syöpä esiintyy huomattavaa vaihtelua kliinisessä käyttäytymistä. Monet (ellei suurin) eturauhasen syöpiä ovat kliinisesti veltto, kun taas toiset ovat kliinisesti aggressiivisia, tulossa metastaattisen ja tappava. Sillä paikallinen eturauhassyöpä, hoitovaihtoehdot vaihtelevat aktiivisen valvonnan ( ”valpas odottaa”) on ratkaisevaa kirurginen (eturauhasen) tai sädehoitoa [2], [3]. Doketakseli kemoterapia myös arvioidaan adjuvanttia ja neoadjuvant asetus [4]. Yhä on tarvetta ennustetekijöiden biomarkkerit tarkasti kerrostuvat potilaille asianmukaiset riskiin mukautettu terapia.

Nykyinen ennustetekijöiden kuuluvat Gleason luokalla, kasvain vaiheessa ja ennen leikkausta seerumin PSA [5] – [8], ja nomogrammit jotka yhdistävät näiden tietojen [9], [10]. Paljon on kuitenkin epäselväksi jää, ja siten monet miehet valitsevat tarpeettomasti aggressiivista hoitoa. Muut toimenpiteet, esim. kasvainhistologiaa, DNA ploidia, leviämisen markkereita, ja valittu syöpä geenit ovat myös arvioitavana [11] – [15]. Näiden markkereita kasvainsoluproliferaation, esim. S–faasifraktiolla tai Ki-67 Immuunivärjäystä jo kliinisessä käytössä muita syöpätyyppejä, mukaan lukien esimerkiksi rintasyövän [16], gastroentero-haiman neuroendokriinisten kasvainten [17], ja Manttelisolulymfooman [18].

Aikaisemmissa tutkimuksissa käytimme DNA mikrosiruja profiloitua geenien ilmentyminen eturauhassyövässä [19]. Valvomaton klusterointi ekspressioprofiileja paljasti erillisiä kasvain klustereita (määritellään molekyyli- alalajit), sekä erillisiä klustereita (tai ”ominaisuudet”) yhteistyön ilmaisi geenien tunnistaminen taustalla biologisia polkuja ja prosesseja. Näistä yksi näkyvä geeni-ilmentymisen piirre näennäisesti heijastuu kasvainsoluproliferaation tasoilla, ja sen ilmentyminen vaihteli huomattavasti eri eturauhasen syöpiä. Täällä, ryhdyimme luonnehtia leviämisen allekirjoituksiin geenejä kudosten biomarkkereita, ja arvioida niiden ennustetekijöitä hyödyllisyys.

Methods

Molecular allekirjoituksia

arvioida solujen lisääntymistä allekirjoituksen eturauhassyöpä, analysoimme aiemmin julkaistu [19] cDNA microarray geenien ilmentymisen profiilit 71 eturauhassyöpä ja 41 normaalissa eturauhasessa (sivullisten kudosta vastakkaisesta lohko) yksilöitä. Microarray tiedot ovat MIAME yhteensopiva ja raakadataa ovat saatavilla GEO (liittymistä GSE3933). Hierarkkinen klusterointi [20] sovellettiin 7957 geenejä (cDNA), jotka molemmat hyvin mitattiin (signaali /tausta 1,5 ainakin 50% yksilöt) ja vaihtelevasti ilmaistuna (≥2-kertainen ekspression muutos mediaani vähintään 2 näytteiden). Geeni klusteri, joka sisälsi useita geenejä, joiden tiedetään rooleja solujen lisääntymisen (oletetun ”leviämisen allekirjoitus” cluster) arvioitiin edelleen. Päällekkäisyyksiä oletetun leviämisen allekirjoituksiin klusteri (joka sisältää 94 ainutlaatuinen geenejä) ja 639 kanoninen polku (BioCarta ja Kegg) geenin sarjaa arvioitiin käyttäen Molecular allekirjoitukset Database (MSigDB) [21] ”laskea päällekkäisyys” -toiminnon, joka perustuu Hypergeometrinen jakeluun. Ki-67, TOP2A ja E2F1 joukosta valittiin leviämisen allekirjoitus geenit perustuvat saatavuuteen vasta sopivia immunohistokemia formaliinilla kiinnitetyt, parafiiniin upotetut kudosta.

Tissue mikrosirujen kohortti

kudos microarray mukana 139 täysin arvioitavissa formaliinilla kiinnitetyt, parafiiniin upotetut ensisijainen eturauhasen kasvaimia valittu diagnostinen eturauhasen tapauksissa suoritettu Stanfordin yliopiston sairaalan välillä 1986 ja 1996, jolloin Institutional Review Board hyväksyntä ja kirjallinen potilaan suostumus (protokolla ID 11612) [19]. Jokainen tapaus edusti kahtena 0,6 mm kasvain ydintä. Kliinis ominaisuudet tapauksista on koottu taulukkoon 1. Potilaita hoidettiin eturauhasen yksin, ja kliinistä seurantaa 6 kuukauden välein mukana PSA testaus ja fyysinen tarkastus; mediaani kliininen seuranta-aika oli 8 vuotta.

immunohistokemia

Serial kohdat 4 um leikattiin kudoksesta microarray lohko, de-paraffinized in Citrisolv (Fisher Scientific, Pittsburgh, PA), ja hydratoidaan luokiteltujen sarjojen alkoholin ratkaisuja. Lämmön aiheuttama antigeeni haku suoritettiin mikroaalloilla esikäsittelyn sitraatti (1 mM, pH 6,0) 15 minuuttia ennen värjäystä. Endogeeninen peroksidaasi estettiin esi-inkuboimalla 1% vetyperoksidia fosfaattipuskuroidussa suolaliuoksessa. Ki-67 hiiren monoklonaalinen vasta-aine (MIB-1, Dako, Pohjois-Amerikassa, Carpinteria, CA) käytettiin 1:100 laimennus, TOP2A hiiren monoklonaalinen vasta-aine (SWT3D1; Research Diagnostics, Flanders, NJ) 1:10 laimennus, ja E2F1 hiiren monoklonaalinen vasta-aine (18E10, GeneTex, Irvine, CA) on 1:200 laimentamista kukin 30 min. Kromogeeninen havaitseminen suoritettiin käyttäen peroksidaasi-konjugoitua sekundaarista vasta-ainetta ja DAB reagenssit varustettu Envision detektioreagenssipakkaus (Dako). Immunostains pisteytettiin patologi (J.P.H) sokaissut kliinisiä tietoja, ja kriteerit positiivisuus asetettu tarjota dynaaminen alue. Ki-67 ja TOP2A, vahva värjäytyminen ≥5% kasvain ytimien pisteytettiin positiiviseksi. Sillä E2F1, joka värjätään suurempi osuus ytimien, voimakas värjäytyminen ≥50% kasvain ytimien pisteytettiin positiiviseksi. Jos jompikumpi kahtena ydin sijoitettiin positiivinen, kyseessä katsottiin positiiviseksi.

Tilastollinen

väliset korrelaatiot leviämisen biomarkkereita arvioitiin Pearsonin korrelaatiota. Associations välillä leviämisen biomarkkereita ja ennusteeseen viittaavia muuttujia arvioitiin Fisherin testiä. Kaplan-Meier tonttien ja log-rank-testiä käytettiin testaamaan tasa jälkeen jääneen toimintoja kaikkialla eturauhassyöpää ryhmissä. Monimuuttuja Coxin suhteellisen vaarat regressioanalyysi, jossa siteet hoitaa Efron appoximation, käytettiin tunnistamaan merkittäviä ennustajia PSA toistumisen. Vastaanotin toimineiden (ROC) käyrät arvioitiin merkittäviä ennustajia PSA toistumisen. Kaikki analyysit suoritettiin käyttäen R tilastollista ohjelmistopaketti ja WinStat ohjelmistot (R. Fitch Software, Chicago, IL).

Tulokset

Meidän ennen tutkimuksissa ilmentymisen profilointi prostatasyövistä paljasti erillisiä molekyyli- alaryhmät sekä geenien ilmentymisen piirteitä kuvastaa taustalla olevat biologiset prosessit [19]. In uutta analyysia näiden tietojen yksi näkyvä geeni-ilmentymisen ominaisuus (Fig. 1A) sisältyvät geenit säätelevät solusyklin (esim

CCNE1

,

CDK1

,

CDC25A

), ja mukana DNA-replikaatioon (esim

POLE2

,

MCM4

,

TK1

) ja kromosomi dynamiikka (esim

SMC4

,

CENPE

), näennäisesti heijastaa kasvainsoluproliferaation tasoilla. Tämä ominaisuus vaihtelevasti ilmaistiin poikki eturauhasen syöpiä, ja erityisen merkittävä keskuudessa imusolmukemetastaaseja, ja osajoukko ensisijainen kasvaimia molekyyli alatyyppeihin 2 ja 3, alaryhmien aiemmin havaittu olevan kliinisesti-aggressiivinen [19]. Arvioidaan päällekkäisyyksiä tämän klusterin geenien ja kanonisen polku geeni sarjoihin Molecular Signature Database [21] vahvisti yhteyden solujen lisääntymistä; viisi merkittävästi (

P

0,01) päällekkäisiä geeni asettaa kaikki liittyvät solusyklin /leviämisen reitit (Fig. 1 B).

(A) valvomaton klusterianalyysillä eturauhasen syöpiä ( tietue ref. [19]) paljastaa molekyyli- alatyyppiä eturauhassyövän (1, 2 ja 3, leimattu), ja geenien ilmentyminen features heijastaa taustalla olevat biologiset prosessit.

Vasen

, pientä heatmap Analyysisarjan.

Oikea

, suurennos ”leviämisen klusterin”, jossa valitut geenit esitetään (

MKI67

,

TOP2A

ja

E2F1

punainen teksti, merkitty nuolella). Punainen ja vihreä ekspressiotasot heijastaa korkeita ja matalia arvoja, vastaavasti (katso näppäin). Red täytetyt ympyrät (

alla

) tunnistaa imusolmukemetastaaseja. (B) päällekkäisyys matriisi leviämisen klusterin geenien (N = 94), jossa kanoninen reittiin (CP) geenin sarjaa tunnistaa top geeniperimä tulitikut (kaikki merkittävät,

P

0,001) kaikki liittyvät solusyklin /leviämisen . Solid blue fill osoittaa päällekkäistä jäsenyys välillä leviämisen klusterin ja kysellä geenin sarjaa.

Korkea lisääntymistä hintojamme syöpiin liittyy yleensä huonompi kliiniseen tulokseen. Siksi pyrittiin arvioimaan ennusteen arvioinnissa leviämisen allekirjoituksen geenien, erikseen ja yhdessä, eturauhassyövässä. Perustuen saatavuudesta vasta sopivia immunohistokemia formaliinilla kiinnitetyt, parafiiniin upotetut kudosta, päätimme keskittyä kolmeen leviämisen allekirjoitus geenejä,

MKI67

(koodaa klassinen solujen lisääntymistä markkeri, Ki-67) [22 ],

TOP2A

(DNA topoisomeraasi II, alfa), ja

E2F1

(E2F-transkriptiotekijä 1) (Fig. 1A).

Immunohistokemia tehtiin kudoksen microarray jotka sisälsivät eturauhasen syöpä tapauksia eturauhasen (taulukko 1), joka liittyy mediaani kliinistä seurantaa kahdeksan vuotta. Kaikki kolme leviämisen markkereita osoitti odotetun tumavärjäystä (Fig. 2A). Kiinnostavaa kyllä, kun taas Ki-67 ja TOP2A tyypillisesti värjättiin vain pieni murto-osa kasvaimen ytimet, E2F1 usein värjättiin useimmissa kasvainsoluissa (Fig. 2A). Ki-67 ja TOP2A immunovärjäyksellä poikki tapauksissa korreloi merkitsevästi (R = 0,38,

P

0,001) (Kuva. 2B). Ki-67 ja E2F1 olivat vähemmän korreloivat (vain puuttuu tilastollista merkitystä) (R = 0,13,

P

= 0,06), ja hieman yllättäen, TOP2A ja E2F1 eivät näyttäneet korreloi (R = 0,00,

P

= 0,50) (Fig. 2B).

(A) immunoväriäys leviämisen merkkiaineiden Ki-67, TOP2A ja E2F1; edustava positiiviset ja negatiiviset tapaukset on esitetty. (B) Parittainen vertailu on immunostain tulokset kaikkialla tapauksissa. Pearsonin korrelaatio (R) esitetyt arvot. (C) Kaplan-Meier-analyysi Ki-67 ( 5%

vs.

≥5% kasvaimen ytimet), TOP2A (alle 5%

vs.

≥5% kasvaimen ytimet ) ja E2F1 ( 50%

vs.

≥50% kasvain ytimet) immunovärjäyksellä.

P

-arvot (log-rank-testi) on esitetty. (D) Kaplan-Meier-analyysi yhdistettyjen merkki värjäyksen (katso avaimet).

P

-arvot (log-rank-testi) on esitetty.

arvioida ja vertailla ennusteen arvioinnissa, suoritimme Kaplan-Meier analyysejä joukko 139, joista olisi arvioitavissa kaikille kolme leviämisen markkereita. Ki-67 positiivisuus (≥5% ytimet värjäys) osoitti vahva trendi kohti aiemmin biokemiallinen-uusiutumista prostatektomia (

P

= 0,107) (Kuva. 2C) (analyysi täyttä 156 tapausta arvioitavissa Ki -67 oli tilastollisesti merkitsevä; tuloksia ei ole esitetty). TOP2A positiivisuus (≥5% ytimet värjäytyminen) ja E2F1 positiivisuutta (≥50% ytimet värjäys) liittyivät merkittävästi aiemmin toistumisen (

P

= 0,028 ja

P

= 0,043, vastaavasti) (kuvio . 2C). Yksikään kolmesta leviämisen biomarkkerit oli merkitsevästi yhteydessä muiden viittaavia tekijöitä, kuten ennen leikkausta PSA, Gleason laatu ja patologinen vaiheessa (taulukko 2).

Meillä on myös selvitettävä, onko yhdistämällä markkereita saattaisi vahvistaa ennusteen arvioinnissa. Vertailu tapauksissa, joissa ei ole, yksi, kaksi tai kolme positiivista proliferaation markkerit osoittivat merkittäviä eroja (

P

= 0,009), yleensä kasvavilla positiivisten merkkiaineita, jotka liittyvät aiemmin toistumisen (Fig. 2D). Ositella tapauksissa lainkaan tai yksi positiivinen merkki,

vs.

Tapauksissa kaksi tai kolme positiivista markkereita, jäljempänä kutsutaan tri-merkki ”leviämisen indeksi”, mikäli suurin ennustetekijöiden merkitys (

P

= 0,001), jossa riskisuhde 2,6 (95%: n luottamusväli 1,4-4,9). Tämä tulos oli myös ilmeistä analyysin ROC käyrät (taulukko 3, huomaa sitä suurempi AUC varten tri-merkki leviämisen indeksi).

Etenkin vuonna Monimuuttuja-analyysissä, joka sisältyy tunnettuja ennustetekijöitä markkereita – preoperative seerumin PSA, Gleason laatu ja patologisten vaiheessa – komposiitti leviämisen indeksi pysyi merkittävän ennustajan (

P

= 0,005) (taulukko 4). Parantunut ennustus tarjoamaa sisällyttämällä leviämisen indeksin (verrattuna ennusteeseen viittaavia tiedoilla) vahvistettiin vertaamalla Kaplan-Meier tonttien (Fig. 3A, huomaa sitä merkittävämpi log-rank testi P-arvo) ja ROC käyrät (taulukko 3 ja Fig. 3B, huomaa sitä suurempi AUC).

(A) Kaplan-Meier-analyysi vertaamalla multivariate mallit perustuvat ennusteeseen viittaavia tietoja (

jäljellä

) ja ennusteeseen viittaavia tietoja sekä tri- merkki leviämisen indeksi (

oikea

). Tapaukset on ryhmitelty tertile. Log-rank-testi

P

-arvot on merkitty. (B) ROC-käyrä analyysi vertaamalla multivariate mallit perustuvat ennusteeseen viittaavia tietoja (

jäljellä

) ja ennusteeseen viittaavia tietoja sekä tri-merkki leviämisen indeksi (

oikea

). Analyysi tehdään 8 vuoden seurannassa (mediaani seuranta aika kohortin). Alueet käyrän alla (AUC) on osoitettu.

Keskustelu

Tässä tutkimuksessa arvioimme eturauhassyövän ennustetekijöiden hyödyllisyys kudosten biomarkkerit solujen lisääntymisen, tunnistettu ilmaisun profilointi kuvioita. Kaksi biomarkkereita, TOP2A ja E2F1, tekee immunohistokemiallisesti, oli kukin ennustetekijöitä (ja klassinen merkki Ki-67 lähes niin). Erityisesti yhdistyvät markkereita edelleen parantaa ennusteen arvioinnissa. Yhdistetty leviämisen indeksi (0,1

vs.

2,3 positiivinen markkereita) edellyttäen suurin ennustetekijöiden merkitys, ja säilytti arvo yhdistettynä nykyisin käytettävien ennustavia tekijöitä.

Merkit arvioimme oli valitaan eturauhassyövän leviämisen klusteri geenejä. ”Leviämisen allekirjoitus” (tarkistetaan ref. [23]) on yleisesti kohdataan kuvio microarray tutkimuksissa. Ensimmäinen raportoitu rintasyövän solulinjoissa ja kasvaimia [24], leviämisen allekirjoitus on merkittävä monissa eri syöpätyyppien (verrattuna normaaliin kudokseen) [25]. Sen jäsenyys merkittävästi limittyy solusyklin säännelty geenejä [26], ja sen läsnäolo korreloi solujen kaksinkertaistaa kertaa kulttuuri [27], ja Ki-67 värjäyksen kasvaimissa [24], [25]. Lisääntyminen allekirjoitus on löydetty myös ennustetekijöiden rintasyövässä [28], [29] ja Manttelisolulymfoomapotilailla [30].

Gene allekirjoitusta todennäköisesti kaapata enemmän tietoa kuin määrittämällä yksittäisten geenien ja todellakin monen geenin allekirjoitus analyysit ovat saavuttaneet kliinisen käytön [31] – [33]. Erityisesti kaksi tällaista rintasyöpä ennustetekijöiden /ennustava allekirjoitukset ovat geenit raportointi soluproliferaatioon [31], [32]. Kuitenkin mikrosirujen testausta ei helppo toteuttaa kliinisessä laboratoriossa. Siksi kysytään pieni määrä geenejä voisi tehokkaasti kaapata tarvittavat tiedot leviämisen allekirjoitus, jonka suoraviivainen immunohistokemia.

arvioidaan kolmen leviämisen geenejä. Ki-67 (leviämisen liittyvä Ki-67-antigeeni), jota koodaa

MKI67

geenin ja yleisesti tunnistetaan MIB-1-vasta-aine, on tuma-antigeeni on ilmaistu lisääntyvissä, mutta ei lepotilassa olevat solut [34], vaikka erityistehtävänsä edelleen epävarma. Ennen tutkimukset ovat osoittaneet, Ki-67 olevan itsenäistä ennustaja tulos eturauhassyövän hoidetuista potilaista eturauhasen [35] – [39] tai sädehoidon [40]. Yhdenmukaisesti näiden tutkimusten myös havaittu Ki-67 on prognoosi-, vaikka se jäi merkitys tapausten alaryhmää arvioitavissa kaikkien kolmen leviämisen markkereita.

TOP2A on tyypin II DNA: ta topoisomeraasi, ohjaamiseksi topologinen tila DNA (kataly- ohimenevä kaksijuosteinen tauot) aikana DNA transkriptio, rekombinaatio, replikointi, ja kromosomi osiointi at solunjakautumisen [41]. TOP2A on myös tavoite useiden antineoplastisten lääkkeiden, esim. doksorubisiini ja etoposidi. TOP2A ekspressio immunohistokemiallisesti on osoitettu olevan prognostinen rintasyövän [42] ja munasarjojen [43] syöpiä. Viime aikoina, TOP2A transkriptio [44] ja proteiini [45] tasot on liitetty systeemisiä etenemisen eturauhasen syöpä. Meidän omat tiedot tukevat tätä -alueella.

E2F1 on keskeinen transkriptionaalinen säätelijä DNA: n replikaation ja solusyklin etenemisen, ja on negatiivisesti säätelee RB1 tuumorisuppressori [46]. Rb /E2F reitin on keskeytyksiä useimmat syövät [47]. Erityisesti merkittävää rikastumista E2F1 sitoutumiskohdat on havaittu joukossa promoottorialueet leviämisen allekirjoituksen geenien [48], ja tunnettuja kohteita ovat esimerkiksi

CCNE1

,

CDC25A

,

MCM4

,

TK1

, ja

CENPE

[49]. Näin ollen, E2F1 ei ole vain leviämisen allekirjoitus geenin, mutta itse transkription säätelijä muiden leviämisen allekirjoituksen geenejä.

E2F1 immunovärjäys on havaittu olevan prognostinen rintasyövän [50] ja keuhkojen [51] syöpiä, ja nyt laajentaa tätä eturauhassyöpää. Erityisesti, kun taas E2F1, Ki-67 ja TOP2A transkriptin tasot ovat kaikki solusyklin säädellään [26], me yleensä havaittu E2F1 immunovärjääminen suurempi osa kasvainsolujen, toisin kuin Ki-67 ja TOP2A, joka värjätään ainoastaan ​​pieni murto-osa soluja. Sinänsä pisteytys E2F1 positiivisuus olisi yksinkertaisempaa ja toistettavissa, ja edelleen arviointiin E2F1 kuin leviämisen ja prognostinen markkeri eturauhasen ja muiden syöpätyyppeihin on perusteltua.

Mikä tärkeintä, olemme huomanneet, että pisteytys kolme leviämisen markkereita tarjoaa erinomaisen prognostista tietoa kuin teki mitään yksi. Miksi tämä on niin? Tällä transkriptio tasolla, E2F1, TOP2A ja Ki-67 huipussaan eri vaiheissa solusyklin, G

1 /S, G

2 ja G

2 /M, vastaavasti [26]. Näin ollen on mahdollista, että kolme merkkiä muodostavat yhdessä täydellisemmän tilannekuvan lisääntyvien solujen. Vaihtoehtoisesti kolmella markkereita saattaisi ”tasoittaa” epätarkkuus patologi pisteytys. Olipa lukien yli kolme leviämisen markkereita voisi edelleen parantaa suorituskykyä on tuntematon, vaikka toteamme, että kolme merkkiä on alueella, mikä on käytännöllistä histologiaa labs (jossa vasta-paneelit ovat rutiininomaisesti tilannut), ja helpommin, nopeammin ja halvempi kuin mikrosirun.

Yhteenvetona olemme osoittaneet, että tri-merkki leviämisen indeksi antaa parannetun ennustetekijöiden suorituskykyä eturauhassyöpä, lisäarvoa edellä nykyisin käytössä ennustavat tekijät. Vaikka validointi ylimääräisiä ikäluokat, ja koko kudosleikkeiden, on perusteltua, meidän havaintojen mukaan leviämisen indeksin voisi auttaa riski kerrostuminen, valitsemiseksi sopivasti aggressiivista hoitoa (esim. Käyttö adjuvanttihoito) ja lopulta parantaa hoitotuloksia. Cleary, kliiniset kokeet olisi arvioitava hyöty suhteessa eturauhasen syöpään liittyvään sairastuvuuteen ja kuolleisuuteen. Lopuksi on syytä huomata, että monet antineoplastisten lääkkeiden kohdistaa soluproliferaatiota [23], mukaan lukien taksaanit joka lupaavia adjuvanttia /neoadjuvant asetus [4]. Siten on mahdollista (ja kannattaa tutkia edelleen), että leviämisen indeksi voi osoittaa hyödyllisyys ennustamisessa vastauksena tiettyyn kemoterapiaa.

Kiitokset

Haluamme kiittää jäseniä Pollack laboratorioon hyödyllistä keskustelua.