Krooninen sairaus

tiivistelmä

rooli mikrobeille on epäilty eturauhassyöpä mutta vaikea vahvistaa ihmisen potilailla. Osoitamme tässä, että maha-suolikanavan (GI) bakteeri-infektio on riittävä parantamaan eturauhasen intraepiteliaalinen neoplasia (PIN) ja microinvasive karsinooma hiirimallissa. Huomasimme, että eläimiä, joilla on geneettinen mieltymys häiriöstä

Wnt

signalointi,

APC

Min /+

mutanttihiirien, olivat huomattavasti alttiita eturauhassyövän tulehdus riippuvaisella tavalla infektion jälkeen

Helicobacter hepaticus

. Edelleen, varhainen kasvainten havaittiin tartunnan

APC

Min /+

hiirillä oli tarttuvien terveille hiirten vatsaonteloon suoliliepeen imusolmukkeesta (MLN) pelkät solut peräisin

H. hepaticus

infektoiduista mutanttihiirissä. Tarttuvuuteen kasvain oli estettävissä etukäteen neutralointia tulehduksen käyttäen anti-TNF-α-vasta infektoituneissa MLN luovuttajan hiirillä. Yhdessä nämä tiedot vahvistavat, että systeemisen tulehduksen laukaisee ruoansulatuskanavasta bakteerit on keskeinen rooli kasvainten synnyssä eturauhasen.

Citation: Poutahidis T, Cappelle K, Levkovich T, Lee CW, Doulberis M, Ge Z , et ai. (2013) patogeenisten suolistobakteerien löytämiseksi Paranna Eturauhassyöpä Development kautta systeeminen aktivointi immuunisolujen hiirissä. PLoS ONE 8 (8): e73933. doi: 10,1371 /journal.pone.0073933

Editor: Deyu Fang, Northwestern University Feinberg School of Medicine, Yhdysvallat

vastaanotettu: 15 huhtikuu 2013; Hyväksytty: 24 heinäkuu 2013; Julkaistu: 26 elokuu 2013

Copyright: © 2013 Poutahidis et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tämä työ tukivat RO1CA108854 (SEE) ja CEHS pilottihanke palkinto P30-ES002109 (KS). CEHS (Center for Environmental Health Sciences) on keskus myönnetty avustus MIT NIH-NIEHS (National Institute of Environmental Health Sciences). Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Vain pieni osa dysplastisia ja varhaisen uudisvaurioiden syntyvät epiteeli koko kehon todella edetä syöväksi [1-3]. Syöpä tapahtuu, kun solut pahanlaatuinen potentiaalia saavuttaa ärsykkeet tarvitaan heidän geneettiset ja epigeneettiset evoluution maligniteetti [4]. Nyt hyvin dokumentoitu, että monien syöpien merkittävä tekijä on solujen ja tekijöiden immuunijärjestelmän [4-6]. Eturauhanen, useat tekijät osoittavat, että krooninen tulehdus ohjaa eturauhassyövän prosessi [5,7,8], mutta sen lähde on edelleen heikko. Tarttuvia aineita, kemiallista tai fyysistä epiteelisolujen vamma, hormonaalinen epätasapaino ja ruokavaliotekijät on ehdotettu todennäköisimmät syyt krooninen tulehdus eturauhasen [8-10].

määritetään, eturauhasen pahanlaatuisen voi olla estettävissä kohdistamalla taustalla tulehdus on erityisen tärkeä, koska se on suurin syy syöpään liittyvien työkyvyttömyyden ja kuoleman miehillä. Maha (GI), infektioita patogeenisten mikrobien, kuten esimerkiksi

Helicobacter pylori

, johtaa krooniseen tulehdukseen (gastriitti) ja syöpä (mahalaukun adenokarsinooman) ihmisillä ja hiiren malleissa [4]. Samoin immuunipuutteisilla hiiren malleissa siihen liittyvät alhaisemmat suoliston bakteeri

Helicobacter hepaticus

(

H. Hepaticus

) laukaisee tulehduksellinen suolistosairaus (IBD) ja peräsuolen karsinooma (CRC) [11-13]. Vuonna eturauhanen on kuitenkin muutama eläinmalleissa olemassa testata mahdollisia suoria tai edes epäsuoraa rooleja patogeenisten mikrobien eturauhasen maligniteetti [8,10,14].

Ihmisillä adenomatoo- polyposis coli (APC) -geenin on kriittinen tuumorisuppressorigeenin, joka estää pahanlaatuisten kasvainten eturauhasen ja muiden kudosten [15]. Täällä käytämme mutanttihiiriä, joilta puuttuu yksi kopio

Apc

geeni (

APC

Min /+

hiiret) ja näyttelytila ​​häiriöstä β-kateniinin ja Wnt-signalointireitin ja muutoin laajasti käytetty mallina suoliston adenoomien [16].

APC

Min /+

hiiret kehittävät spontaanisti eturauhasen intraepiteliaalisten neoplasia (PIN) ja microinvasive karsinooma (microinvasive CA) iän myötä, matkien alkuvaiheessa eturauhassyövän ihmisissä havaittua heidän viides tai kuudes elinvuosikymmenen [15,17]. Osoitamme, että orogastric annostelun

H. hepaticus

, ei-colitigenic tämän hiirimallissa bakteeri suolen colonizer [17], lisää merkittävästi eturauhasen syöpä. Tärkeää on, kehittäminen eturauhasen syöpä oli tarttuvien terveille eläimille ainoastaan ​​siirron suoliliepeen imusolmuke soluja

H. hepaticus

infektoiduista

APC

Min /+

luovuttajan hiirillä.

Tulokset

Orogastric infektio

Helicobacter hepaticus

lisää riskiä eturauhassyövän miespuolisilla

APC

Min /+

hiirillä

Voit selvittää vaikutukset suoliston infektio, käytimme

APC

Min /+

hiirten syöpä-vapaa (nuoret hiiret ikäisenä 12 viikon ollut eturauhassyöpä tai suoliston polyypit) [17]. Hiirille annosteltiin oraalisesti

H. hepaticus

tai koki sham annostelun median kuuden viikon iässä. 12 viikon iässä,

APC

Min /+

infektoidut hiiret

H. hepaticus

näkyy piirteitä eturauhassyövän samankaltaiset kuin ihmisen miehillä (kuvio 1A, 1B, taulukko S1).

H. hepaticus

infektoiduista

APC

Min /+

hiirillä ilmeni kohonneita PIN (p 0,01) ja microadenoCA (p 0,01) verrattuna kontrollina annosteltu sovitettu infektoimattomien ohjaus

APC

Min /+

hiirissä (kuvio 1 C ja S1). Kumpikaan

H. hepaticus

infektoiduista eikä infektoimattomia 12 viikon ikäiset

paino-

hiiret osoittivat merkittävästi eturauhasen patologia. Yhdessä nämä tulokset osoittavat, että infektio ruoansulatuskanavasta kanssa

H. hepaticus

nopeasti parantaa eturauhasen syövän syntymistä geneettisesti alttiissa hiirissä.

A) mennessä 12 viikon ikäisinä,

APC

Min /+

hiiret kehittävät spontaanisti polttoväli matala ja korkea laatu eturauhasen intraepiteliaalinen neoplasia (LGPIN, valkoinen nuoli-pää, HGPIN, musta nuoli-pää), mutta vain harvoissa microinvasive karsinooma (a). Ikäinen-Hyväksytty

APC

Min /+

hiirten

H

.

hepaticus

, kehittää huomattavasti PIN ja microinvasiveCA vaurioita (tähti) ominaista erittäin epätyypilliset eturauhanen epiteelisolujen joka murtaa tyvikalvon ja tunkeutua viereisen strooman (b). Kun suoliliepeen imusolmuke soluja

H

.

hepaticus

infektoiduista

APC

Min /+

hiiret siirretään vatsaonteloon

H

.

hepaticus

vapaata

APC

Min /+

hiirillä vastaanottajan hiiret kehittävät esineoplastiset ja varhaisen uudisvaurioiden (microinvasiveCA-tähti) verrattavissa löytyy luovuttajan hiirillä (c). Depleting TNF α iältään

H

.

hepaticus

infektoiduista

APC

Min /+

hiirillä tuo eturauhasen uudisvaurioiden (LGPIN, valkoinen nuoli-head) esiintyminen tasolle

H

.

hepaticus

vapaata hiiriä (d). Hematoksyliinillä ja eosiini. Bars = 50 pm. B) Poikkeava β-kateniinin ja laminiini immunovärjäämällä malli microinvasiveCA vaurioita eturauhassyövässä. DLP alkaen

WT H

.

hepaticus-

positiivinen hiiriä (a ja c),

H

.

hepaticus

infektoiduista

APC

Min /+

hiiri (b) ja

H

.

hepaticus

vapaata

APC

Min /+

hiiri siirtyy suoliliepeen imusolmuke soluja

H

.

hepaticus

infektoiduista

APC

Min /+

luovuttaja (d). Normaali DLP rauhaset oli normaali β-kateniinin sivusuunnassa epiteelisolujen kalvon värjäytymistä kuvio (a) ja ehjän tyvikalvon (c). Sen sijaan microinvasiveCA leesiot leimasi soluliman ja ydin- (nuoli-päät) vakauttaminen β-kateniinin (b) ja puuttuminen laminiinin (tähdellä) viittaavia tyvikalvon hajoamisen pahanlaatuinen epiteelisolujen pesäkkeitä alkavaan hyökkäystä. Hematoksiliini vastavärinä, DAB kromogeenilla. Bars = 25 pm. C) Pylväsdiagrammi osoittaa taajuus PIN ja microinvasiveCA in hoitoryhmissä. Kaikkein merkittävästi kohonnut eturauhassyövän esiintyminen merkitään tähdellä. Standardivirhepalkkien vastaavat microinvasiveCA tilastolliseen vertailuun. D) DLP on

H

.

hepaticus

vapaata

APC

Min /+

hiiri siirtyy MLN soluja

H

.

hepaticus

infektoiduista

APC

Min /+

luovuttajan, HGPIN. Useimmat myelooinen esiastesolujen kanssa renkaan muotoiset ytimet asuvat stroomaan on tyypillinen granulosyyttistä sukuperää fenotyypin (musta nuoli-pää), kun taas vähemmän näyttävät olevan myelo /monosyyttistä tyypin (valkoinen nuoli-head). Bar = 16 pm.

kohonneita tulehdussytokiinejä tapahtuu ilman avointa tulehdustauti,

H. hepaticus

infektoiduista

APC

Min /+

hiirillä

Seuraavaksi testasimme ovatko

H. hepaticus

infektio johtaa lisääntyneeseen tulehdusvasteita, kuten aikaisemmin on esitetty [13]. Huomasimme, että

H. hepaticus

infektoiduista

APC

Min /+

hiirillä ilmeni kohonneita systeemisiä pro-inflammatoristen sytokiinien, mukaan lukien tuumorinekroositekijä (TNF) -α (p = 0,013), IL- 1α (p = 0,024), IL-3 (p = 0,0009) ja eotaksiinin (p = 0,003) (kuvio 2A vasemmalla). Mielenkiintoista, eturauhanen alkaen

H hepaticus

infektoiduista

APC

Min /+

hiirillä puuttui avoin tulehdustauti mutta näytteillä satunnaisesti syöttösolut, neutrofiilit, ja myös myelooinen esiaste soluihin, joissa rengasmainen ytimet [18] (kuvio 1 D).

A) Seerumin proinflammatoristen sytokiinien korotettiin

APC

Min /+

hiirillä

H

.

hepaticus

infektio. Eotaksiini, IL-3, TNF-α ja IL-1α olivat merkittävästi koholla verrattuna samanikäisiin infektoitumattomien

APC

Min /+

valvontaa. Kun verrataan

H

.

hepaticus

tartunnan

paino

hiiriä, tartunnan

APC

Min /+

hiirillä oli merkitsevästi suurempi IL-17, IL-1α, IL -3, eotaksiini ja IL-9 pitoisuus veressä seerumissa. Bio-Plex -sytokiinianalyysin käyttää seerumeista

n

= 5 hiirtä ryhmää kohti. *** P 0,001; * P 0,05. B) parakortikaali- alueet suoliliepeen imusolmukkeiden.

H

.

hepaticus

tartunnan

APC

Min /+

hiirillä suuri riski eturauhassyövän oli suuria määriä soluliman ja ekstrasellulaarisen IL-17, joka merkittävästi vähentynyt jälkeen ehtyminen TNF-α. IL-17-spesifisiä immunohistokemia; Hematoksiliini vastavärinä, DAB kromogeenilla. Bars = 25 pm. C) morfometrinen arviointi IL-17 immunohistokemiallisesti värjätään osissa suoliliepeen imusolmukkeet. Molemmat

APC

Min /+

perimäluokituksesta ja suoliston infektion

H

.

hepaticus

merkittävästi korreloivat TNF-α-välitteisen lisäystä IL-17 ilmentyminen suoliliepeen imusolmukkeiden. *** P 0,001; ** P 0,01; * P 0,05.

neutralointi tulehduksen inhiboi

H. hepaticus

indusoimaan eturauhassyöpä miesten

APC

Min /+

hiirillä

Pro-tulehduksellinen sytokiini TNF-α: n havaittiin olevan koholla (p = 0,013), seerumista jälkeen

H. hepaticus

infektio kuudeksi viikoksi kolmen kuukauden ikäinen uros

APC

Min /+

hiirillä (kuvio 2A). TNF-α on kärkeen kaskadin syöpää tulehdusta tapahtumat [5]. Sen testaamiseksi, tulehdusta tarvitaan maha-suolikanavan bakteerien laukaisema eturauhasen patologian, teimme systeeminen neutralointi TNF-α käyttäen intraperitoneaalisen injektion anti-TNF-α-vasta-aineen 3 viikkoa ajan alkaen 3 viikkoa infektion jälkeen (PI). Huomasimme, että anti-TNF-α hoito johti merkitsevästi vähemmän (p 0,01) eturauhasen patologian

H. hepaticus

infektoiduista

APC

Min /+

hiirissä (kuvio 1A, 1C ja S1, taulukko S1). Yhdessä aiempiin tietoihin, tämä osoitti, että

H. hepaticus

-triggered isännöidä tulehdusreaktioita parannettu neoplastisten vaikutuksia eturauhasen kudosta.

tulehduksellisten sytokiinien kohosivat

H. hepaticus

infektoiduista

APC

Min /+

hiirillä mutta ei

H. hepaticus

infektoiduista

paino-

poikueesta hiiret

piirre tässä hiiri malli on

H. hepaticus

infektoiduista

APC

Min /+

hiirillä näkyy huomattavasti korkealaatuista PIN (HGPIN) ja eturauhasen karsinooma; kuitenkin, Hyväksytty

H. hepaticus

infektoiduista

paino-

poikueesta hiiret jäävät kehittämään merkittäviä PIN tai karsinooma vaurioita (kuvio 1 B, 1 C ja S1, taulukko S1). Analyysin jälkeen seerumin sytokiinin tasojen, havaitsimme merkittävät erot proteiinien tasoja IL-1α (p = 0,02) ja IL-17 (p = 0,0005) välillä

APC

Min /+

ja

paino-

poikueesta hiirillä (kuvio 2A oikealla). Samoin

in situ

merkintöjä IL-17 oli kohonnut IL-17 + ekspressiotasot MLN in

H. hepaticus

infektoiduista

APC

Min /+

hiirillä mutta ei

H. hepaticus

infektoiduista

paino

ohjaimet (kuvio 2B ja 2C). Hoito

H. hepaticus

infektoiduista

APC

Min /+

hiirten anti-TNF-a-vasta merkittävästi vähentynyt mRNA geenin ilmentymistä (p 0,01) ja proteiini (p 0,001) tasoja IL-17A MLN (kuvio 2B ja 2C). Yhdessä nämä kertyneet tiedot nosti esiin mahdollisuuden, että systeemistä erot peräisin bakteereista laukaisema tulehdus maha-suolikanavan alkuperää voi myötävaikuttaa karsinogeenisia prosesseja kaukaisilla kudoksissa kuten eturauhasen.

Eturauhassyöpä riski on tarttuvien terveille vastaanottajille käyttäen suoliliepeen imusolmuke- (MLN) solujen

H. hepaticus

infektoiduista

APC

Min /+

hiirillä

Tietäen, että maha-suolikanavan alkuperä tulehdusreaktio on tarpeen eturauhassyöpä mallissamme, me arveltu, että solut suoleen liittyviä imusolmukkeiden (MLN) voi olla keskeinen eturauhassyövässä tässä mallissa. Jotta testata tätä hypoteesia, käytimme solujen siirto MLN kerätään

H. hepaticus

infektoiduista tai sham-annos luovuttajan

APC

Min /+

tai

paino-

poikueesta hiirillä (kuva 3). Tässä kokeilussa, kaikki vastaanottajan eläimet olivat

Helicobacter

sp

vapaa miespuolinen

APC

Min /+

tai

p

littermates. Uroshiirillä iässä 6-8 viikkoa koki ip-injektion 5×10

6 yksisolususpensioon HBSS hiirtä kohti soluja kerätty suoliliepeen imusolmukkeista

H. hepaticus

infektoiduista tai sham-annos

APC

Min /+

tai

paino-

hiirillä.

Kaaviokuva MLN solujen siirto suunniteltiin testaamaan hypoteesia, jonka mukaan paikallinen ruoansulatuskanavasta immuuni verkon tapahtumia aiheuttaa järjestelmällisiä immuunijärjestelmän epätasapaino päättää kohtalosta esineoplastiset vaurioiden topografialtaan kaukaisessa epiteeli kaltaisissa eturauhanen. Trials käytetään 6 hiirtä ryhmää kohti. Kokeet tehtiin kahtena kappaleena.

Niinpä löysimme huomattavasti alhainen (p 0,05) ja korkea laatu (p 0,01) PIN terveillä

APC

Min /+

hiirillä että se oli ainoastaan ​​vastaanottanut MLN soluja

H. hepaticus

infektoiduista

APC

Min /+

hiirissä (kuvio 1A, B, C ja S1) on 6 viikkoa sen jälkeen, kun IP-injektion verrattuna MLN luovuttajan soluja sham-annos

APC

Min /+

hiirillä. Nämä Infektoimattomat

APC

Min /+

jotka saivat soluja

H. hepaticus

infektoiduista

APC

Min /+

näkyvät piirteet preneoplasian ja syövän yhdenmukaisia ​​havaittavissa

H. hepaticus

infektoiduista

APC

Min /+

hiirissä (kuvio 1A), ja jotka muistuttavat nähdään ihmisen miehillä. Lisäksi infektoimattomat

paino-

vastaanottaja hiirillä, jotka saivat imusolmukesoluista

H. hepaticus

infektoiduista

APC

Min /+

luovuttajan hiirillä oli myös lisääntynyt LGPIN (p 0,001), HGPIN (p 0,001) ja adenokarsinooman (p 0,001) (kuvio 1C ja S1 Taulukko S1) verrattuna infektoimattomiin paino- hiirillä, jotka saivat imusolmukesoluista

H. hepaticus

vapaa

APC

Min /+

luovuttajan hiirillä osoittavat, että geneettinen alttius eturauhasen epiteeli ei erityisesti vaadita syöpää aiheuttavat vaikutukset

H. hepaticus

infektio. Mukaan siirtoa ominaisuus osoitti, että

H. hepaticus

aktivoitujen solujen riittivät neoplastisten prosessien extra-suolikanavan rauhaset kuten eturauhasen.

neutralointi tulehdus estää MLN solujen tarttuvuuteen eturauhassyövän riskiä terveille hiirille

Lopuksi testattiin, neutraloivat tulehdus oli riittävä estämään MLN-soluvälitteistä tarttuvuuteen eturauhassyövän tässä hiirimallissa. Hyödynsimme solujen siirto MLN kerätään

H. hepaticus

infektoiduista

APC

Min /+

hiirillä, jotka oli käsitelty anti-TNF-a-vasta-aineen 3 viikkoa (kuvio 3). Tässä kokeilussa, kaikki vastaanottajan eläimet olivat

Helicobacter

sp

vapaa miespuolinen

APC

Min /+

tai

p

pesuetoverissa eläimiä. Uroshiirillä iässä 6-8 viikkoa koki ip-injektion 5×10

6 yksisolususpensioon HBSS hiirtä kohti soluja kerätty suoliliepeen imusolmukkeista

H. hepaticus

infektoiduista

APC

Min /+

hiirillä. Kuten ennustettu, huomasimme merkittäviä eroja infektoimattomat

APC

Min /+

hiirillä vs infektoimattomat

APC

Min /+

hiiriä, jotka olivat saaneet MLN anti-TNF-α-käsiteltyihin hiiriin (p 0,05). Samoin oli merkitsevästi vähemmän LGPIN (p 0,01) ja HGPIN (p 0,05) terveillä

APC

Min /+

vastaanottajien MLN anti-TNF-käsitelty

H. hepaticus

infektoiduista hiiristä verrattuna

APC

Min /+

vastaanottaja hiiriä MLN alkaen

H. hepaticus

infektoiduista

APC

Min /+

hiirissä (kuvio 1 C ja S1, taulukko S1). Nämä tulokset osoittavat, että proinflammatoristen rooli MLN solujen on syynä havaittuun eturauhassyövän riskiä tarttuvuuden.

Keskustelu

Tässä tutkimuksessa, testaamme nuori mies

APC

Min /+

hiiret C57BL /6J tausta kokeellisena mallina koetin yhdistyksille tulehduksen kanssa syövän syntymistä eturauhasen. Kuten ihmisillä, jossa eturauhassyövän riski on vahva geneettinen komponentti,

APC

Min /+

mutanttihiirien geneettisesti alttiita epiteelin neoplasia [13,16,17]. Me ja muut ovat aiemmin osoittaneet, että

APC

Min /+

hiirillä myös vähitellen kehittää eturauhassyöpä pohjalta nousi PIN vaurioita Matching joka nähdään ihmisen miehillä [15, 17]. Meidän tutkimuksissa

APC

Min /+

hiiret kehittävät varhaisen uudisvaurioiden dorsolateral eturauhasen jo 3 kuukauden iässä edeltävien ilmeinen suoliston polyypit. Iässä = 6 kuukautta, 40%

APC

Min /+

hiiret kehittävät microinvasive adenokarsinooma taas 10-20% on myös enemmän edenneen eturauhassyövän vaurioita [15]. Tämä näkökohta antaa

APC

Min /+

hiiri apuohjelma mallina tutkia etenemistä preneoplastisen ja varhainen uudisvaurioiden ihmisen eturauhasen [1-3].

tärkeä löydös on, että infektio

H. hepaticus

, bakteeri colonizes pääasiassa paksusuolen C57BL /6

ApcMin

/

+

hiirillä ilman avointa typhlocolitis [13,19- 21], lisäsi merkittävästi ilmaantuvuus PIN ja microinvasive adenokarsinooma vaurioita eturauhasen. Kuten odotettua, 3-kuukautta vanha

APC

Min /+

infektoidut hiiret

H. hepaticus

ei ollut ilmeistä IBD eikä suuria adenomatoottisten polyyppeja ole muodostunut heidän suoliston (tuloksia ei ole esitetty). Kuitenkin, jopa tässä nuorena, näillä hiirillä ei näytteille lisääntynyt systeeminen pro-inflammatoristen sytokiinien, kuten TNF-α, IL-1α, IL-3, eotaksiini ja IL-9, verrattuna niiden infektoimattomien ohjaus vastineet, joka ilmaisee immuunijärjestelmän aktivointi. Nämä tiedot yhdessä aiemmin esitetyn näytön että

H. hepaticus

infektio pystyy moduloimaan kasvaimien syntyyn at extra-suolikanavan sivustoja [21,22], viittaavat siihen, että kliinisesti hiljainen ruoansulatuskanavasta immuuni verkon tapahtumia laukaisi suoliston mikrobiston saattaa aiheuttaa järjestelmällisiä immuunijärjestelmän epätasapaino. Tämä puolestaan ​​epätasapaino voi vaikuttaa kohtalon esineoplastiset vaurioiden topografialtaan kaukaisessa epiteeli kaltaisissa eturauhanen.

toisiinsa roolit kohonnut tulehdusta edistäviä sytokiini miljöö ja tulehduksellinen solukomponentti löytyy eturauhassyövän altis

H. hepaticus

infektoiduista

APC

Min /+

hiiret ovat mielenkiintoisia. Eturauhanen, PIN ja microinvasive adenokarsinooma esillä syöttösolut, neutrofiilit, ja myelooinen esiastesolujen laakerin renkaan muotoinen ytimiä. TNF-α oli aiemmin osoittautunut olennaista syöttösolujen rekrytointi ja tuumorigeneesiä

APC

Min /+

hiirillä [13,17,23]. Vapautuminen tekijöistä, kuten TNF-α ja erilaiset proteaasit syöttösoluista asuvat eturauhasen strooman voi olla tärkeä rooli kasvainten synnyssä [10].

TNF-α ja IL-1α on yhdessä osallisena NF -κB välittämä signaali cascade jotka estivät apoptoosin ja lisäsi leviämisen epiteelisolujen ihmisen eturauhasen preneoplasian ja syöpä [24]. Lisäksi IL-1α edistää epänormaalia proliferaatiota ihmisen eturauhasen epiteelisolujen kautta insuliinia kasvutekijän ja fibroblastikasvutekijä-7 liittyvät kasvun signaaleja [25,26]. Eotaksiini ja IL-3 säädellä luuytimen kypsymisen, annostelemiseksi ja uusien kudosten kaupan myelooisen esiastesolujen [27], kuten nähdään eturauhasen rauhasten

H. hepaticus

infektoiduista

APC

Min /+

hiirillä. Mahdolliset roolit eotaksiinin, IL-3 ja liittyy myelooinen esiastesolujen epiteelin syövän synnyn optio lisätutkimuksia. Voimakas tulehdusta rooli IL-9 on yhä enenevässä määrin. Th9 solut muodostavat uusin laajentaa T-auttaja alatyyppiä array. IL-9 stimuloi hematopoieettisten solujen, erityisesti syöttösolut ja eritystä useiden kemokiinien, että rekrytoida muita soluja tulehtuneiden kudosten [28]. Tärkeän roolin IL-9 autoimmuniteetin ja allergia [28] voi tarjota tärkeitä vihjeitä, varsinkin kun otetaan huomioon viimeaikaiset oletuksiin yhdistää eturauhasen tulehdus syöpään. Eturauhasen epiteelisolujen vamma voidaan sitten kadota toleranssin normaalin eturauhasen antigeenejä ja siten johtaa itseään toistavia autoimmuunireaktio [10]. Esillä olevassa tutkimuksessa, meidän havainto, että neutralointi TNF-α riitti estämään eturauhassyövän riskiä lisälaite hiirimallissa viittaavat siihen, että tämä sytokiini on keskeinen rooli luotaessa pro-tuumorigeenistä systemaattinen tulehduksellinen makroympäristöön joka mahdollistaa etenemistä syöpä eturauhanen.

Toinen tulehdusta edistävä sytokiini löysimme merkittävästi kohonnut vertaamalla

H. hepaticus

infektoiduista

APC

Min /+

hiirten

H. hepaticus

infektoiduista

paino-

poikueesta hiirillä oli Il-17A. Merkittäviä eroja Il-17 oli erityisen kiinnostava, koska olemme aiemmin osoittaneet IL-17 + solujen suoliliepeen imusolmuke (MLN) hiirten infektion jälkeen

H. hepaticus

[20]. Samoin IL-17 on liitetty infektio-laukaisi suoliston syövän kehityksen

APC

Min /+

hiirillä [29,30]. Korrelaatio on

APC

Min /+

hiiri genotyypin järjestelmällisesti ja MLN kohonneet Il-17 ilmentyminen voi olla geneettinen perusta, koska Il-17-liittyvän vajeet immuunijärjestelmän solujen toimintaa tämän hiirimallissa on raportoitu [30]. Tärkeää on, viimeaikaiset todisteet sekä prekliinisen hiiren [31] ja kliinisiä ihmisen tutkimukset tukevat merkittävä rooli Il-17 eturauhasessa karsinogeneesissä [32,33].

Tuottaa kokeilevan todisteen tämän hypoteesin ja säilyttää monimutkainen immunologinen vuorovaikutus erilaisten solupopulaatioiden päätimme siirtää yhteensä MLN solupopulaatioiden hiiriin. Immunologiset toimintaa systeeminen imusolmukekudoksesta [20] voi olla yhteys yhdistää GI mikrobikasvuston yleismaailmallisesti pro-tuumorigeenisen systemaattinen korjauksilla immuunijärjestelmää. Yllättäen huomasimme, että lisääntynyt eturauhassyövän riski on tarttuvien terveille

APC

Min /+

vastaanottajat MLN solujen vasta otettu

H. hepaticus

infektoiduista

APC

Min /+

luovuttajia. Ei ollut näyttöä

H. hepaticus

organismien eturauhasen kudosta siirrännäisen saajan hiiriin käyttäen PCR tai

in situ

tutkimus käyttämällä hopeavärjäystä (tuloksia ei ole esitetty), mutta translokaation

H. hepaticus

organismien tai niiden antigeenejä suolet imusolmukkeisiin edelleen mahdollinen tekijä. Meidän havainto, että MLN otetaan soluja anti-TNFa-käsitelty

H. hepaticus

infektoiduista

APC

Min /+

hävisi eturauhassyövän edistämään niiden on todistettava, että tulehdus tehostettu tätä karsinogeeninen prosessia.

voidaan todeta, että mahdollinen rooli mikrobien eturauhasen maligniteetti on epäilty [9] mutta pysyi todistettu asti. Tässä olemme osoittaneet, että nauttiminen

H. hepaticus

yksin parannettu eturauhasen syövän syntymistä

APC

Min /+

hiirillä. Meidän havainto, että tulehdus tehostettu tämä syöpä muokkaamiseen lisää mekanistinen tukea hyvin dokumentoitu hyödyt steroideihin kuulumattomien tulehduskipulääkkeiden (NSAID) ihmispotilaille. Merkillistä, infektoimattomat hiirillä, jotka saivat vain imusolmukesoluissa tuli erittäin alttiita eturauhassyöpää. Tämä havainto, että eturauhasen syöpä on indusoitavissa tislattu soluja toisesta elin voi auttaa selittämään, miksi etiopatologioissa eturauhassyövän ihmisillä on ollut vaikea valaista. Vielä on ehdottomasti selvitettävä, muut maha-suolikanavan mikrobeja ihmisissä, kuten

H pylori

, voi olla samanlaisia ​​vaikutuksia eturauhasen ja muiden ruoansulatuskanavan syöpien ihmisten.

Materiaalit ja menetelmät

Koe-eläimet

Kaikki eläimet asutettiin ja käsitellään ry arviointi ja akkreditointi Laboratory Animal Care (AAALAC) -accredited tilat ruokavalion, kokeellisia menetelmiä, ja asuntojen erityistä hyväksyntää Institutional animal Care ja käyttö komitea. MIT CAC (IACUC) nimenomaisesti hyväksytty tutkimukset sekä asunto- ja käsittelystä näiden eläinten.

APC

Min /+

hiiret C57BL /6J tausta alun perin saatu Jackson labs ja kasvatettu talon tarjota

APC

Min /+

hiirillä ja

villityyppisen

(

paino-

) littermates kokeellisiin vastaanottajien ja luovuttajien.

Helicobacter

vapaa tila hiirillä varmistettiin PCR: llä käyttämällä

Helicobacter

suvun-spesifisiä alukkeita, kuten on aiemmin kuvattu [20].

Kokeellinen

Helicobacter hepaticus

infektio

yhteensä 44 kokeellisen hiirille annosteltiin 6 viikon iässä

H. hepaticus

(kanta 3B1, ATCC # 51449) ja sitten sijoitettu erikseen bio-suoja-alueelta saman eläimen laitokseen.

H. hepaticus

kasvatettiin mikroaerobisissa olosuhteissa valmis, ja vahvistettiin puhtaan kuten kuvattu muualla [11,20]. Kokeellinen hiiret saivat 0,2 ml tuoretta inokulaattia mahaletkulla joka toinen päivä yhteensä kolme annosta. Umpisuoli, suoliliepeen imusolmukkeesta (MLN), ja eturauhasen kerättiin 6 viikkoa infektion jälkeen ruumiinavauksessa ja analysoitiin PCR vahvista (suolen) tai sulkea pois (MLN, eturauhasen) kolonisaatio.

Kokeellinen suunnittelu

yhteensä 96

APC

Min /+

hiirillä ja 60 paino- hiiriä mukana erilaisissa hoito-ohjelmissa tai kokeellinen valvonta. Kokeet suoritettiin käyttäen kahta erillistä tutkimuksissa 5-6 hiirillä kukin, kuten taulukossa S1. Kuusikymmentä

APC

Min /+

hiirillä ja 40 paino hiirillä 6 viikon iästä ruiskutettiin intraperitoneaalisesti 5 x 10

6 MLN solut suspendoitiin HBSS. Solu luovuttajan hiiret olivat miespuolinen

H. hepaticus

infektoituihin kuusi viikkoa aikaisemmin, tai

Helicobacter

vapaa C57BL /6

paino-

tai

APC

Min /+

hiirillä.

TNF-α neutralointi

yhteensä 24

H. hepaticus

tartunnan

APC

Min /+

tai

paino

hiirillä iässä 9 viikon (alkaen 3 viikon kuluttua

H. hepaticus

infektio) saivat anti-TNF-α-vasta-ainetta (klooni XT-3, BioExpress, Lebanon, NH), on 200 ug hiirtä kohti kolme kertaa viikossa kolmen viikon ajan kuten aiemmin on kuvattu [13].

Detection systeemisen sytokiinien proteiinin ilmentyminen

Seerumin sytokiinien tasot 5-6 eläintä kussakin koeryhmässä analysoitiin käyttämällä Bioplex Pro Mouse Cytokine koejärjestelmässä (BioRad, Hercules, CA) valmistajan protokollan. Lyhyesti, seerumi laimennettiin käyttäen näytteen laimenninta kit, inkuboitiin vasta-aineella päällystettyjä helmiä seurasi sekundaarisen vasta-aineen inkubointi ja analysoitiin kaksoiskappaleita Bio-Plex 200-järjestelmä (BioRad, Hercules, CA).

histologisen arvioinnin ja immunohistokemia

formaliinikiinnitetyt kudoksia käsiteltiin ja parafiiniin 5 um kudos-leikkeet värjättiin H 0,01;