Krooninen sairaus

tiivistelmä

Background

5-fluorourasiili (5-FU) on yksi klassista kemoterapiaa huumeita. Nanohiukkasten lääkeannostelun ajoneuvot paremmiksi yli tavoitteen vaikutus parantaminen ja perusvähennystä sivuvaikutuksia. Tiedetään vähän kuitenkin niin että konkreettisena vaikutuksena nanohiukkasten peritoneaalidialyysia levittämiseen paksusuolensyöpä. Tavoitteena Tämän tutkimuksen on valmistaa yksi NP: itä (nanohiukkasia) varustettu 5-FU ja tutkia ominaisuus NP: itä ja rooli sen vatsakalvon etäpesäkkeiden kyhmyt muodostuminen ihmisen paksusuolen syövän.

Menetelmät /Principal Havainnot

Valmistettu NPS (nanohiukkasia) varustettu 5-FU (5-fluorourasiili) PEG-PLGA menetelmällä kaksinkertaisen emulsio. Sitten arvioida ominaisuudet NP pyyhkäisyelektronimikroskoopilla, analysoimalla hiukkashalkaisijajakautuman ja määrittämällä lastaus tehokkuutta. Tunnista vapauttamista piirteitä NP: itä in vitro ja in vivo. Nude-hiirten vatsakalvon etäpesäkkeitä hoidettiin 5-FU liuosta tai 5-FU-NP läpi vatsaonteloon. Laske nodules vatsakalvon ja suoliliepeen sekä kartoittaa koko niitä. Saimme NP keskimääräinen halkaisija on 310 nm. In vitro vapautuminen testi osoittaa NP voi vapauttaa equably 5 päivän ajan vapautumisnopeus 99,2%. In vivo, NP ryhmä voi pitää korkeampaa plasmassa 5-FU kauemmin kuin se liuoksessa ryhmässä. Määrä vatsakalvon levittämisen kyhmyn alle 1 mm 5-FU-sol ryhmä (17,3 ± 3,5) ja 5-FU-NP ryhmä (15,2 ± 3,2) on pienempi kuin verrokkiryhmässä (27,2 ± 4,7) (P 0,05). Kokonaismäärä kyhmyt 5-FU-NP ryhmä (28,7 ± 4,2) on huomattavasti pienempi kuin 5-FU-sol ryhmä (37,7 ± 6,3) (P 0,05).

Johtopäätökset /Merkitys

uudet kasvaimen vastaisen nanohiukkasten ladattu 5-FU PEG-PLGA voi vapauttaa yllä 5 päivää ja on estävä toiminta vatsakalvon levittämistä paksusuolensyöpä hiirillä.

Citation: Tang Q, Wang Y Huang R, You Q, Wang G, Chen Y, et ai. (2014) valmistaminen Anti-kasvain Nanoparticle ja sen esto on Peritoneaalisille levittäminen Colon Cancer. PLoS ONE 9 (6): e98455. doi: 10,1371 /journal.pone.0098455

Editor: Vipul Bansal, RMIT University, Australia

vastaanotettu: 19 tammikuu 2014; Hyväksytty: 4. toukokuuta 2014; Julkaistu 4. kesäkuuta 2014

Copyright: © 2014 Tang et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään.

Rahoitus: Tämä työ tukivat ”Wu Jie-ping” Medicine Foundation of China, (nro 04102303) ja Special Foundation Harbin tekniset innovaatiot Talented Person (nro 2006RFQXS075) ja Science Fund for Distinguished Young Scholars Heilongjiangin maakunnassa Kiinassa alle Grant No. JC04-02. Rahoittajat ollut mitään roolia tutkimuksen suunnittelu, tiedonkeruu ja analyysi, päätös julkaista tai valmistamista käsikirjoituksen.

Kilpailevat edut: Kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

peräsuolen syöpä on kolmanneksi yleisin syy syöpään liittyvien kuolemien maailmanlaajuisesti. Peritoneaalisille etäpesäke peräsuolen syöpä on yleinen esiintyvyys noin 13%, mikä ilmoitettiin tutkimuksen laaja otos aiemmin [1] .Peritoneal etäpesäke esiintyi 7%: lla potilaista, joilla kolorektaalisyövän hoidon alussa ja 4% ~19% potilaista jälkeen radikaaleja [2] kantavassa ennustetta paksusuolisyövän vatsakalvon etäpesäke on huono, joiden mediaani selviytyminen on ainoa 5~9 kuukautta [3] .Nykyinen systeemistä solunsalpaajahoitoa perustuu 5-FU ja peräsuolen syövän eivät ole tuottaneet tyydyttäviä tuloksia, erityisesti kohtelu vatsakalvon levittämistä [4]. Yksi ongelmista tämäntyyppisen hoidon on rajoitettu toimituksen systeemisesti lääkeaineiden vatsakalvon [5]. Suora vatsaonteloon voi aiheuttaa 5-FU imeytyä verenkiertoon nopeasti johtaa riittämätön annos saapuu paikallisen kyhmy vatsaonteloon. On tarpeen kehittää uusia strategioita hoitoon vatsakalvon levittämisen kolorektaalisyövässä saavuttaa parempia tuloksia. Nanohiukkasten, uutena kantaja anti-kasvain huumeet, on kiinnitetty tarkkaa huomiota, joita lääketieteen alalla alussa 1978 asti [6]. Viime vuosina tutkimukset polymeeriin nanohiukkasten ovat tehneet valtavasti etenemisen vuoksi, biologisen yhteensopivuuden ja biohajoavuuden polymeerin nanohiukkasia [7]. Polymeerinen aloilla voi suojata lääkkeen haitalliset ulkoiset olosuhteet ja valvoa sen vapautumista [8]. Verrattuna mikropallojen, NP on omat paremmuutta tavoite vaikutuksen tehostaminen ja perusvähennystä sivuvaikutuksia [9] – [10]. Neovessels kasvaimen ovat läpäiseviä nanohiukkasten alle 400-600 nm välittää, joka ei vain voi parantaa tavoitefunktio mutta voi myös vähentää sivuvaikutuksia anti-kasvain huumeet [11]. Hetken intraperitoneaalisesti nanohiukkasten antituumoriaineista hoitoon kolorektaalisyövän vatsakalvon levittäminen ei ole tutkittu laajasti. Ottaen huomioon tämän, valmistelimme 5-FU nanopartikkelien uutta tekniikkaa ensinnäkin ja osoittivat anti-kasvain nanohiukkaset voivat estää muodostumista vatsakalvon levittämisen paksusuolisyövän.

Materiaalit ja menetelmät

Ethics Statement

Kaikki eläinkokeet hyväksyttiin Institutional animal Care ja käyttää komitean ja eettisen komitean Harbinin Medical University ja noudattaen suuntaviivoja animal Experiment keskus Harbin Medical University.

valmistelu 5-FU /PEG-PLGA-nanohiukkasia

aluksi, PLGA-PEG lisätään 80 ml: ssa dikloorimetaania. 4 ml 10% (w /w) NaOH-liuosta, joka sisälsi 5-FU hitaasti ruiskutetaan seokseen suuri leikkaus emulgoituminen (Fa25 emulgointiaine, Fluko, USA), hieman läpinäkyvä emulsio Näin saatiin. Tippui ne 160 ml: aan 5-FU: n kylläistä liuosta, joka sisälsi 5% (paino /tilavuus) PVA alle voimakkaasti sekoittaen (Fa25 emulgointiaine, Fluko, USA) 5 minuuttia, jotta saataisiin kaksinkertainen emulsion (w /o /w) . Liuotin haihduttamalla suoritettiin tyhjiössä pyöröhaihduttimessa (RE-85A pyöröhaihduttimessa, Henan Yuxin Instrument Corporation). NP otetaan talteen sentrifugoimalla 12000 rpm, ja myöhemmin pestään 5-FU kyllästettyä vesiliuosta ja tislattu vesi jotka kaikki lyofilisoitiin lopulta.

Arvioi laatu NP

Arvioi morfologia ominaisuus NP.

1 mg NP dispergoidaan 1 ml vettä. NP suspensioita pudotettiin dian ja purkautui kultaa, kun se on kuiva. Morfologia NP tutkitaan pyyhkäisyelektronimikroskoopilla (JSM-6700F, JEOL, ja Japani).

analyysi hiukkasen koon.

Hiukkaskokojakauma määritetään laser koon analysaattoriin (LS -13320 laser koko analysaattori, BeckmanCoulter, USA). Jokainen tuote analysoidaan 30 kertaa sen jälkeen, suspendoitiin tislattuun veteen.

määritys kapselointi Tehokkuus.

5-FU loading tehokkuus määritetään lämpö- gravimetria (STA409 -lämpöanalysaattoria, Saksa). Tietty määrä kuivaa NP kuumennettiin lämmitys nopeudella 10 ° C /min typpiatmosfäärissä.

arvioiminen in vitro Release Character NP: itä

50 mg 5-FU NP oli dispergoitiin 10 ml: aan PBS: ää (pH = 7,4). Tämä liuos lisätään dialyysipussiin, joka oli otettu 90 ml: aan PBS: ää (pH = 7,4), suljettiin, ja sekoitettiin (~75 r /min) 37 ° C: ssa. Näyte 10 ml kerättiin tietyin aikavälein ulommasta PBS ja täydentää yhtä suuret määrät tuoretta PBS.

arvioiminen in vivo Release Character NP: itä HPLC

Kunming hiiriä ostettiin Shanghai Laboratory Animal Center (Shanghai, Kiina). Hiiret, jotka oli sijoitettu identtisissä oloissa saivat vapaa pääsy tavallisen ruokavalion ja vesijohtovettä ja altistetaan kanssa 12-tunnin valo: 12-h pimeä sykli. 90 Kunming hiiret jaetaan 2 ryhmään sattumanvaraisesti. 5-FU-NP (n = 45) on koeryhmä, kun kontrasti ryhmä on 5-FU ratkaisu ryhmä, jotka molemmat jakautuvat vastaavasti otetaan 9 joukkuetta 5 hiiriin satunnaistettu menetelmällä. Käsittele hiiriä tavalla vatsaontelonsisäisestä annoksella 40 mg /kg. Lievittää kärsimystä, hiiriä tehtiin hengitysteitse anestesian etyylieetteri ennen saada verta. Veri ja panna heparinisoituun sentrifugiputkeen 5 minuutin ajan 3000 rpm välillä silmäkuopin vastaavasti klo 0.083,0.167,0.333,0.5,1.0,1.5,2.0,3.0,4.0 h. Ota oleva neste 200 ui osaksi EP putki 25 ui sisäistä valvontaa (50 ug /ml 5-Bru liuos) ja 800 ui etikkahappoa eetteriä tarkasti lisättiin tarkasti, sekoitettu tasaisuus pyörteisissä sekoittaen 1 minuutin ajan, ja sentrifugoitiin 5 minuuttia ( 5000 rpm). Suodatetaan supernatantti neste mikrohuokoinen kalvo (0. 45 um), ja kuivaa se sitten typpikaasulla ja se liuotetaan liikkuva faasi 100 ui. Lopulta näyte injektoidaan HPLC, niin että voimme laskea plasman 5-FU.

Soluviljely

Ihmisen paksusuolen syövän soluja HCT116 ostoksen ”solu resursseja keskustassa Shanghai Institute of life science, Kiinan tiedeakatemia ”, joka pidettiin vuonna 1640 väliaineessa, joka oli täydennetty 10% naudan sikiön seerumia, 100 U /ml penisilliini G: tä ja 100 lg /ml streptomysiiniä, 37 ° C: ssa kostutetussa inkubaattorissa, joka sisälsi 5 % CO2.

solunelinkykyisyysmääritys

Solujen elinkyky määritettiin käyttämällä 3- (4,5-dimetyylitiatsoli-2-yyli) -2,5-diphe-145 nyltetrazolium bromidia (MTT), kuten aiemmin on kuvattu [12].

Pesäkkeenmuodostusta määrityksessä

HCT116-soluja siirrostettiin 3,5 cm: n annoksia (1000 solua /malja), ja viljeltiin 2 viikkoa, jotta pesäkkeiden muodostumista. 5-FU ja 5-FU-NP lisättiin annoksia erikseen. Pesäkkeet kiinnitettiin metanoli, värjättiin 0,1% kristalliviolettia ja laskettiin.

Evaluation of 5-FU-NP: Vaikutus vatsakalvon levittämistä hiirimallissa

BALB /c-nu nude-hiiriin ( ikäinen 4 viikkoa) hankittiin Shanghai Laboratory Animal Center (Shanghai, Kiina). Kaikki eläinkokeet hyväksyttiin Institutional Animal Care ja käyttö komitea Harbin Medical University. Nude Hiiriä pidettiin SPF identtisissä olosuhteissa ja niille annettiin vapaa pääsy tavallisen ruokavalion ja vesijohtovettä ja altistetaan kanssa 12-tunnin valo: 12-h pimeä sykli. HCT116-solut (5 x 10

5 /hiiri) /ml suolaliuosta injektoitiin vatsaonteloon 4 viikon ikäisten (BalbC nu /nu) hiirissä. Viisi hiiriä kullekin ryhmälle. 5-FU-sol ja 5-FU-NP annettiin vatsaonteloon MTD 40 mg /painokilo viikoittain alkaen päivästä 7. Hiiret tapettiin päivinä 28 jälkeen nukutettiin ethyletherfor lievittää kärsimystä. Määrä vatsakalvon kyhmyjä laskettiin vastaavasti mukaan halkaisijaltaan alle 1,0 mm tai yli 3,0 mm mikroskoopilla ja tulokset esitetään edustavien experiments.Tumor tilavuus laskettiin kaavalla V = π x L x S x S /6 (L, pituusakselilta, S, lyhyt akseli).

Solusykli ja apoptoosin analyysi virtaussytometrialla

Katso täydentävät menetelmät File S1.

tulokset

Analysoi morfologia, hiukkaskokojakauma, ja kapseloimalla tehokkuus 5-FU-NP

Koska SEM kuva esittää (kuvio 1A) morfologian NP paljastaa pallomainen tai elliptinen rakenne kiiltävä pinta ei kiinnittynyt kanssa toisiaan. SEM kuva NP: itä on 10000 ja 48000 monistaminen esitetty Figure.S1 File S1. Partikkelikoko osoitetaan raekoko määritys, jossa keskimääräinen halkaisija on 310 nm on hyvin jakautunut (kuvio 1 B). Alkuperäinen parametrit laser-koon analyysi NP lueteltiin Figure.S2 File S1. Kapselointi tehokkuuden NP on (15,38 ± 0,56)% havaittu 5 näytettä.

(a) SEM scan osoitti NP: pallomainen muoto ja sileä pinta. (B) nanopartikkelikoko analysoitiin laser- koon analysaattoriin. Tulokset osoittivat keskimääräinen halkaisija NP: itä on noin 310 nm. Jakelu nanohiukkasten oli välillä 255 nm 469 nm ja 70% oli alle 385 nm. P 0,05.

In vitro vapautuminen 5-FU päässä NP

tulos in vitro vapautuminen 5-FU päässä NP on esitetty (Kuvio 2). 5-FU voi vapauttaa säilyttää 5 päivän ajan varaamiseen julkaisu määrä jopa 99,2% .Linear kunnossa Q vapauttaa aikaa (t) saa julkaisun toiminto: Q = 20,9037 + 0,80953 * t.

5-FU-NP Farmakokinetiikka in vivo

tässä tutkimuksessa, retentioaika 5-FU on 4,6 min, joka on esitetty kromatogrammi (kuvio 3A, 3B, 3C). Standardikäyrä yhtälöt Y (piikin pinta-alojen suhde on 5-FU: n ja sisäinen standardi) ja C on Y = 0.06266C + 0,01752 (R = 0,99687) (n = 5), alin havaittava raja on 0,05 ug /ml, tarkkuus RSD on alhainen, mediaalinen ja korkea pitoisuus on 9,05%, 4,73%, 2,97%: lla, ja hyötykäyttöaste on 87,43%, 102,91%, 108,64% vastaavasti.

Kromatogrammi osoitettiin (a) tyhjä plasma, (b ) plasman 5-FU ja 5-Bru, ja (c) näytteen plasmassa 5-FU ja 5-Bru. (5-Bru kuin endo-parametri). C-T-käyrä osoitti, että keskimääräinen viipymäaika varten (d) 5-FU-NP on 0.490 pidempi (e) 5-FU-liuosta (0,271 h). Ja pitoisuus ei voida tunnistaa 2 tuntia myöhemmin 5-FU ratkaisu ryhmä.

Figure.3 havainnollistaa virtausta CT plasmassa sen jälkeen, kun hiiret ovat ylläpitäjä vatsan (kuvio 3D, 3E) . Alue CT käyrän (AUC0~t), kun hiiret ylläpitäjä ja keskimääräinen viipymäaika (MRT0~t) lasketaan käyttämällä farmakokinetiikkaa tilastollisia ohjelmistoja DAS2.0, ja sitten harjoittaa T-testi SPSS10.0 ohjelmistot (taulukko 1).

5-FU-NP tukahduttaa kasvua paksusuolen syövän solujen

tutkimiseksi, miten 5-FU-NP vaikuttavat leviämisen koolonkarsinoomasoluissa, me suoritettiin MTT ja klooni muodostumisen määritykset HCT116-soluissa. MTT tulokset osoittivat, että elävien solujen lukumäärä on 5-FU-NP: itä oli huomattavasti vähemmän kuin negatiivisen kontrollin soluissa 24 h, 48 h, 72 h, 96 h, joka on myös vähemmän kuin 5-FU-sol ryhmä 48 h, 72 h, 96 h (kuvio 4A). Kuten odotettua, 5-FU-NP esti kasvuvauhti solujen verrattuna kontrolliryhmään. Soluja viljeltiin sitten 14 päivän ajan suorittamaan kloonin muodostumista määrityksessä. Koska tulokset osoittivat, että 5-FU-sol ja 5-FU-NP: molemmat voivat vähentää pesäkemäärät verrattuna kontrolliryhmään. Kauempana enemmän, 5-FU-NP aiheutti yli 35%: n lasku pesäkkeen numerot verrattuna 5-FU-sol ryhmä (kuva 4B). Solusyklin esti molempien 5-FU-liuosta ja 5-FU-NP verrattuna kontrolliryhmään (kuva S3 File S1). Lisäksi apoptoosin analyysi määritys suoritettiin myös ilmoittaa, miten 5-FU-NP jotka suoritetaan kykyyn paksusuolisyöpäsolulinjassa. (Kuva S4 File S1) Virtaussytometria Tulokset osoittivat, että 5-FU-sol ja 5-FU-NP voitaisiin edistää apoptoosia koolonkarsinoomasoluissa verrata pilkata tai PEG-PLGA. Koska tulokset osoittivat, että 5-FU-NP saattaa voimistaa 5-FU solusyklin tai apoptoosin osittain verrattuna 5-FU-sol, mutta vaikutukset eivät olleet merkittävästi.

(a) HCT116 solu rivi lisättiin 5-FU-NP tai 5-FU-sol tai PEG-PLGA tai vedos ja altistetaan solu-elinkelpoisuuden määritys 24 h, 48 h, 72 h ja 96 h. (B) klooni muodostumisen määritys suoritettiin mock, PEG-PLGA, 5-FU-sol ja 5-FU-NP ryhmiä. * P 0,05, vs. kontrolli. ** P 0,05, verrattuna 5-FU-sol. (C) edustaja valokuvia lisäämisen jälkeen PEG-PLGA, 5-FU-sol ja 5-FU-NP: itä ja mock.

Estovaikutus 5-FU-NP peritoneaalidialyysia levittämistä muodostumiseen peräsuolen syöpä in vivo

The effect of 5-FU-NP peritoneaalidialyysia levittämiseen arvioitiin. Makroskooppinen dessemination on näkyviä kasvain kyhmyt olivat läsnä vatsaonteloon (Figure.5B). Kaikki hiiret lopetettiin päivänä 14, ja määrä kasvaimen kyhmyjä suoliliepeen laskettiin (Table.2). Keskimääräinen etäpesäkenystyröiden määrä alle 1 mm 5-FU-sol-ryhmässä (17,4 ± 3,6) ja 5-FU-NP ryhmä (15,2 ± 3,2) on pienempi verrattaessa kontrolliryhmään (27,2 ± 9,7) (P 0,05) . Kokonaismäärä kyhmyt 5-FU-NP ryhmä (28,7 ± 5,5) on huomattavasti pienempi kuin 5-FU-sol ryhmä (37,6 ± 5,4) (P 0,05) kantavassa ilmaantuvuus vatsakalvon levittäminen oli 100% kaikissa ryhmissä . Ilmaantuvuus maksan etäpesäkkeiden 5-FU-NP ryhmässä (33,3%) on alhaisempi kuin kontrolliryhmässä (100%) (p 0,05) (Figure.5A).

(a) Metastaattinen kyhmyt vatsaonteloon laskettiin mukaan halkaisija on pienempi kuin 1 mm, 1~3 mm tai enemmän kuin 3 mm. (B) näkyvä kasvain kyhmyt olivat läsnä vatsaonteloon edustavissa kuvia nude hiiret tapettiin 4 viikon kuluttua i.p. injektio HCT116-soluissa.

Keskustelu

Peritoneaalidialyysi levittäminen on vakava ongelma pitkälle paksusuolisyöpäpotilaalta koska sen huonon ennusteen ja puute tehokkaan hoidon [13]. 5-FU, joka on yksi kaikkein klassinen anti-kasvain lääkkeitä, jotka voivat estää DNA-synteesiä käsittely tuumorisolun, on laajalti käytetty ruoansulatuskanavan syöpä [14] – [15]. Kuitenkin annoksesta riippuvaa toksisuutta rajoitettu yhteisen hallinnon laskimoiden injektiona ja vähemmän annostus saapuu vatsakalvon kyhmyt läpi verenkierrosta heikentää hoidon vaikutus varten vatsakalvon etäpesäke paksusuolensyöpä [16] – [17]. Siksi on välttämätöntä löytää uusia strategian vatsakalvon etäpesäke paksusuolen syöpä. Tässä tutkimuksessa, valmistimme yksi anti-kasvain NP kuorma 5-FU voivat edistää parannuskeinoa vatsakalvon levittämisen paksusuolensyöpä.

5-FU-NP valmistettiin korkea leikkaus emulgoituminen sijasta ultraääni emulgoituminen, joka suurensi emulgoimalla energiaa, jotta saadaan NP: itä halkaisijaltaan 310 nm (Figure1A). Aiemmat tutkimukset osoittivat, että voimme saada NP eri kokoa säätämällä sisäinen vesifaasin tilavuus ja hajonta aikaa [18]. Verrattuna ultraääni emulgoituminen raportoitu ennen, se yksinkertaistaa kokeilun ja voittaa rajoittamisesta suhteellisen alhainen tuotanto johtuen rasituksessa ultraääni emulgoituminen [19]. Lisäksi hiukkaskoko mikropallon vähenee tehokkaasti ja jaeltu. Tarkastellaan partikkelikokojakauma, halkaisija 70% nanohiukkasten on vähemmän kuin 385 nm, jakelun alueella 255 nm 469 nm (Figure1B). Meidän yrittää korvata PLA PLGA (50:50) ja ketjun PEG 5000-2000, mikä luo osaltaan hyvin jakautunut 5-FU-NP, jonka kapselointi- tehokkuus oli 15,4%. Osalta, että PEG-PLGA suotuisin histocompatibility ja biohajoavuus, ne ovat yleensä työskentelee lääketieteen ja biologian harjoittajille [20] – [21]. Tämä tutkimus osoittaa, että tämä 5-FU-NP voi pitää pääsee ympäristöön ylläpitää noin 5 päivän ajan hitaasti ja tasaisesti in vitro, joka simuloitu ihmiskeho ympäristö sisälle vatsaontelon (kuva 2).

toteaminen in vivo vapauttaen luonteeltaan tämän uuden 5-FU-NP, farmakokinetiikkaa kokeet harjoiteltu in vivo. Lääkkeet kapseloitu NP, uudentyyppisen lääketieteen harjoittaja, yleensä otettu maksan ja pernan ensinnäkin, joka sisältää runsaasti endoteelin järjestelmä [22] – [23]. Mukaan hiirillä, huomasimme, että on olemassa eräänlainen disharmonious osaston mallin eri yksittäiset tiedot ja veren huumeiden tasolla. 5-FU-NP näkyy kahden osaston malliin in vivo vertaamalla kontrolliryhmään esittää yksiallasmalliin, joka johtaa sovelluksen tilastollisten hetki. Keskimääräinen viipymäaika (MRT (0-t)) 5-FU-NP-ryhmä on 0,490 h (P 0,01), mikä on tietenkin pidempi kuin kontrolliryhmässä (0,271 h) (kuvio 3D, 3E). On osoitettu, että 5-FU-pitoisuuksien ei voida tunnistaa 2 h kontrolliryhmä, joka osoittaa yhteisiä 5-FU hajotettiin in vivo pian. Alueella CT (AUC (0-t)) on 4,372 mg /L • h Cmax on 17.06 ug /ml 5-FU-NP ryhmässä verrattuna kontrolliryhmään on 67,77 ug /ml, jotka voivat johtua edelle saanti kohdekudoksessa huumeiden kuormitettu nanohiukkasten (taulukko 1).

Anti-kasvain NP voi estää kasvaimen metastaaseja vatsaonteloon on osoitettu monissa tutkimuksissa [24] – [25]. Ei kuitenkaan ole selvää, kuinka hoidon vaikutuksen kasvainten vastaisen nanopartikkeleiden paksusuolensyöpä vatsakalvon levittämiseen. MTT tutkimukset vahvistivat hypoteesia, että 5-FU nanohiukkasten terapeuttiset ovat tehokkaampia kuin normaali 5-FU ratkaisu erityisesti 48 tunnin kuluttua (Figure4A). Samat tulokset osoittivat klooni muodostumiseen määrityksessä (kuvio 4B) heidänkin osuutensa Toisaalta toiminta 5-FU vaikutus apoptoosiin tai solusyklin oli kumpikaan tehostaa 5-FU-NP verrattuna 5-FU-NP, jotka olivat osoitettu apoptoosin ja solusyklin analyysi virtaussytometrialla menetelmillä (kuva. S3, S4 File S1). Kuten kuviossa 4C, 5-FU-sol ja 5-FU-NP johti muuttuneita morfologisia ominaisuuksia verrata mock, joka tunnistetaan hajallaan jakautuminen viljelmän soluista ja spindle- tai tähtimäinen morfologia solujen ( Figure4C). Tämä muutos morfologiset ominaisuudet voidaan johtua 5-FU-NP vaikutus epiteelin-mesenkymaalitransitioon toiminto syöpäsoluissa [26], jonka pitäisi olla tutkimus tulevaisuudessa. Toisaalta, osoittaa in vivo tehokkuuden 5-FU-NP terapeuttisia vatsakalvon levittämiseen, kehitimme vatsakalvon etäpesäke malli matkimaan ihmisen kunnossa. Lukumäärät kyhmyt arvioitiin halkaisijan ja jaettu 3 ryhmään. Tulokset on esitetty, että 5-FU-NP on kyky estää kyhmy muodostumista ylivoimainen sekä positiivisia verrokkiryhmään ja negatiivinen kontrolliryhmä (kuvio 5A, 5B).

Yhteenvetona saavuttaa parempi ennuste potilaille, joilla on vatsaonteloon etäpesäkkeitä, tehokkaiden hoito strategia on ratkaiseva. Tässä tutkimuksessa olemme onnistuneesti valmistettu kasvaimen vastaisen nanohiukkasten ladattu 5-FU, joka osoitti esto vaikutuksia koolonisyöpäsolulinja ja vatsakalvon disseminations paljaisiin hiirimallissa. Siksi voi olla uusi anti-kasvain valmistautuminen vatsakalvon etäpesäkkeet syvästi näkymät kliinisissä sovelluksissa. Silti se on edelleen tutkittu, että yksityiskohtia mekanismin tulevaisuudessa.

tukeminen Information

Tiedosto S1.

1. Täydentävä tuloksia. Fig.S1 SEM skannaa 5-FU-NP. Fig.S2 5-FU NP: itä koko analyysi. Fig.S3 Cell cycle estää 5-FU-NP. Fig.S4 Apoptoosi edistää 5-FU-NP. 2. Täydentävä menetelmiä. Laser koko analyysi Particle. Virtaussytometria ja solusyklin analyysi. Virtaussytometria apoptoosin analyysi PI ja anneksiini V värjäys

doi: 10,1371 /journal.pone.0098455.s001

(DOC) B